27Сен

Микроскопия у г мазка женский расшифровка: Микроскопическое (бактериоскопическое) исследование мазка (Bacterioscopic examination of different smears (vaginal, cervical, urethral, sputum, etc.)

Содержание

Микроскопия мазка, расшифровка и нормы – Статьи на сайте Четыре глаза


Полезная информация

Главная » Статьи и полезные материалы » Микроскопы » Статьи о микроскопах, микропрепаратах и исследованиях микромира » Анализ «Микроскопия мазка»

Многим женщинам после посещения гинеколога приходится сдавать анализ на флору. Микроскопия гинекологического мазка (расшифровка его результатов) – это общая диагностическая процедура, позволяющая врачу выявить воспаления в мочеполовой системе женщины на ранней стадии болезни. Чаще всего причиной воспалительного процесса являются бактерии. С помощью анализа «Микроскопия мазка» можно обнаружить гонококки, трихомонады, грибы Candida и другие микроорганизмы.

Что нельзя определить по этому анализу? Во-первых, он не показателен при беременности и не назначается для выявления раковых заболеваний. Кроме того, микроскопия мазка не информативна при диагностике таких инфекций, как хламидиоз, ВИЧ, герпес и некоторых других заболеваний, передающихся половым путем.

Микроскопия окрашенного мазка

Порой с медицинскими терминами возникает путаница – не все женщины понимают, какой именно анализ им сдавать. На самом деле, гинекологический мазок всего один, но у него есть официальное и множество неофициальных названий. В медицинских документах анализ называется «Микроскопия окрашенного мазка» или «Макроскопическое (бактериоскопическое) исследование окрашенного мазка по Граму». Другие названия разговорные: «анализ на флору», «гинекологический мазок», «мазок из половых органов» и другие. Основное – не стоит путать этот анализ с микроскопией мазка крови. Последний не назначается в виде отдельного анализа, а является одной из стадий исследования общего анализа крови.

Что такое «бакпосев»?

Бактериологический посев, или бакпосев, – это дополнительное исследование, которое проводится для уточнения результатов мазка на флору. Например, для определения вида грибов, если была обнаружена грибковая инфекция (разные виды реагируют на разные лечебные препараты).

Бакпосев отличается от классического мазка методом исследования. Мазок окрашивают и сразу же наблюдают под микроскопом, а бакпосев помещают в питательную среду, где он в течение нескольких дней «обрастает» микроорганизмами. Под микроскопом бакпосев изучают лишь спустя несколько дней.

Мазок (гинекологическая микроскопия, нормы)

После получения на руки результатов анализов практически невозможно дождаться повторного приема у врача – хочется знать диагноз прямо сейчас. Некоторые лаборатории указывают показатели нормы, но, к сожалению, не все. Таблица, расположенная ниже, поможет вам расшифровать результаты.

Вещество в мазке Влагалище Цервикальный канал
Эпителий в соответствии с фазой менструального цикла в соответствии с фазой менструального цикла
Лейкоциты 0–10 0–30
Слизь отсутствует или мало отсутствует или мало
Гонококки отсутствует отсутствует
Трихомонады отсутствует отсутствует
Кандиды отсутствует отсутствует
Ключевые клетки отсутствует отсутствует
Микрофлора грамположительные палочки отсутствует

Для медицинских исследований используются специальные лабораторные микроскопы.

Только на них можно получить достаточную детализацию структур, кроме того, они позволяют оценивать линейные размеры образцов. В нашем интернет-магазине представлены лабораторные микроскопы производства Levenhuk, Bresser, Биомед и других известных брендов. Наши консультанты всегда готовы помочь вам подобрать оптимальный оптический прибор для ваших исследований. Звоните или пишите – контакты указаны в верхней части сайта. Большинство микроскопов, представленных на сайте, можно посмотреть вживую в розничных магазинах сети «Четыре глаза».

4glaza.ru
Март 2019

Использование материала полностью для общедоступной публикации на носителях информации и любых форматов запрещено. Разрешено упоминание статьи с активной ссылкой на сайт www.4glaza.ru.

Производитель оставляет за собой право вносить любые изменения в стоимость, модельный ряд и технические характеристики или прекращать производство изделия без предварительного уведомления.


Смотрите также

Другие обзоры и статьи о микроскопах, микропрепаратах и микромире:

  • Видео! Микроскоп Levenhuk 870T: видеосравнение фильтрованной и нефильтрованной воды (канал MAD SCIENCE, Youtube. com)
  • Видео! Микроскоп Levenhuk 870T: жизнь в капле воды с болота (канал MAD SCIENCE, Youtube.com)
  • Видео! Микроскоп Levenhuk 870T: видео радиоактивной воды (канал MAD SCIENCE, Youtube.com)
  • Видео! Микроскоп Levenhuk 870T: видеообзор (канал MAD SCIENCE, Youtube.com)
  • Видео! Микроскоп Levenhuk 870T: видео соленой воды (канал MAD SCIENCE, Youtube.com)
  • Медицинские микроскопы Levenhuk MED: обзорная статья на сайте levenhuk.ru
  • Видео! Портативный микроскоп Bresser National Geographic 20–40x и другие детские приборы линейки: видеообзор (канал «Татьяна Михеева», Youtube.com)
  • Книги знаний издательства Levenhuk Press: подробный обзор на сайте levenhuk.ru
  • Видео! Книга знаний в 2 томах. «Космос. Микромир»: видеопрезентация (канал LevenhukOnline, Youtube.ru)
  • Видео! Видео бактерий под микроскопом Levenhuk Rainbow 2L PLUS (канал «Микромир под микроскопом», Youtube.ru)
  • Обзор микроскопа Levenhuk Rainbow 50L PLUS на сайте levenhuk. ru
  • Видео! Подробный обзор серии детских микроскопов Levenhuk LabZZ M101 (канал Kent Channel TV, Youtube.ru)
  • Обзор набора оптической техники Levenhuk LabZZ MTВ3 (микроскоп, телескоп и бинокль) на сайте levenhuk.ru
  • Видео! Микроскоп Levenhuk DTX 90: распаковка и видеообзор цифрового микроскопа (канал Kent Channel TV, Youtube.ru)
  • Видео! Видеопрезентация увлекательной и красочной книги для детей «Невидимый мир» (канал LevenhukOnline, Youtube.ru)
  • Видео! Большой обзор биологического микроскопа Levenhuk 3S NG (канал Kent Channel TV, Youtube.ru)
  • Микроскопы Levenhuk Rainbow 2L PLUS
  • Видео! Микроскопы Levenhuk Rainbow и LabZZ (канал LevenhukOnline, Youtube.ru)
  • Микроскоп Levenhuk Rainbow 2L PLUS Lime\Лайм. Изучаем микромир
  • Выбираем лучший детский микроскоп
  • Видео! Микроскопы Levenhuk Rainbow 2L: видеообзор серии микроскопов (канал LevenhukOnline, Youtube.ru)
  • Видео! Микроскопы Levenhuk Rainbow 2L PLUS: видеообзор серии микроскопов (канал LevenhukOnline, Youtube.
    ru)
  • Видео! Микроскопы Levenhuk Rainbow 50L: видеообзор серии микроскопов (канал LevenhukOnline, Youtube.ru)
  • Видео! Микроскопы Levenhuk Rainbow 50L PLUS: видеообзор серии микроскопов (канал LevenhukOnline, Youtube.ru)
  • Видео! Микроскоп Levenhuk Rainbow D2L: видеообзор цифрового микроскопа (канал LevenhukOnline, Youtube.ru)
  • Видео! Микроскоп Levenhuk Rainbow D50L PLUS: видеообзор цифрового микроскопа (канал LevenhukOnline, Youtube.ru)
  • Обзор биологического микроскопа Levenhuk Rainbow 50L
  • Видео! Видеообзор школьных микроскопов Levenhuk Rainbow 2L и 2L PLUS: лучший подарок ребенку (канал KentChannelTV, Youtube.ru)
  • Видео! Как выбрать микроскоп: видеообзор для любителей микромира (канал LevenhukOnline, Youtube.ru)
  • Галерея фотографий! Наборы готовых микропрепаратов Levenhuk
  • Микроскопия: метод темного поля
  • Видео! «Один день инфузории-туфельки»: видео снято при помощи микроскопа Levenhuk 2L NG и цифровой камеры Levenhuk (канал LevenhukOnline, Youtube. ru)
  • Видео! Обзор микроскопа Levenhuk Rainbow 2L NG Azure на телеканале «Карусель» (канал LevenhukOnline, Youtube.ru)
  • Обзор микроскопа Levenhuk Фиксики Файер
  • Совместимость микроскопов Levenhuk с цифровыми камерами Levenhuk
  • Как работает микроскоп
  • Как настроить микроскоп
  • Как ухаживать за микроскопом
  • Типы микроскопов
  • Техника приготовления микропрепаратов
  • Галерея фотографий! Что можно увидеть в микроскопы Levenhuk Rainbow 50L, 50L PLUS, D50L PLUS
  • Сетка или шкала. Микроскоп и возможность проведения точных измерений
  • Обычные предметы под объективом микроскопа
  • Насекомые под микроскопом: фото с названиями
  • Инфузории под микроскопом
  • Изобретение микроскопа
  • Как выбрать микроскоп
  • Как выглядят лейкоциты под микроскопом
  • Что такое лазерный сканирующий микроскоп?
  • Микроскоп люминесцентный: цена высока, но оправданна
  • Микроскоп для пайки микросхем
  • Иммерсионная система микроскопа
  • Измерительный микроскоп
  • Микроскопы от самых больших профессиональных моделей до простых детских
  • Микроскоп профессиональный цифровой
  • Силовой микроскоп: для серьезных исследований и развлечений
  • Лечение зубов под микроскопом
  • Кровь человека под микроскопом
  • Галогенные лампы для микроскопов
  • Французские опыты – микроскопы и развивающие наборы от Bondibon
  • Наборы препаратов для микроскопа
  • Юстировка микроскопа
  • Микроскоп для ремонта электроники
  • Операционный микроскоп: цена, возможности, сферы применения
  • «Шкаловой микроскоп» – какой оптический прибор так называют?
  • Бородавка под микроскопом
  • Вирусы под микроскопом
  • Принцип работы темнопольного микроскопа
  • Покровные стекла для микроскопа – купить или нет?
  • Увеличение оптического микроскопа
  • Оптическая схема микроскопа
  • Схема просвечивающего электронного микроскопа
  • Устройство оптического микроскопа у теодолита
  • Грибок под микроскопом: фото и особенности исследования
  • Зачем нужна цифровая камера для микроскопа?
  • Предметный столик микроскопа – что это и зачем он нужен?
  • Микроскопы проходящего света
  • Органоиды, обнаруженные с помощью электронного микроскопа
  • Паук под микроскопом: фото и особенности изучения
  • Из чего состоит микроскоп?
  • Как выглядят волосы под микроскопом?
  • Глаз под микроскопом: фото насекомых
  • Микроскоп из веб-камеры своими руками
  • Микроскопы светлого поля
  • Механическая система микроскопа
  • Объектив и окуляр микроскопа
  • USB-микроскоп для компьютера
  • Универсальный микроскоп – существует ли такой?
  • Песок под микроскопом
  • Муравей через микроскоп: изучаем и фотографируем
  • Растительная клетка под световым микроскопом
  • Цифровой промышленный микроскоп
  • ДНК человека под микроскопом
  • Как сделать микроскоп в домашних условиях
  • Первые микроскопы
  • Микроскоп стерео: купить или нет?
  • Как выглядит раковая клетка под микроскопом?
  • Металлографический микроскоп: купить или не стоит?
  • Флуоресцентный микроскоп: цена и особенности
  • Что такое «ионный микроскоп»?
  • Грязь под микроскопом
  • Как выглядит клещ под микроскопом
  • Как выглядит червяк под микроскопом
  • Как выглядят дрожжи под микроскопом
  • Что можно увидеть в микроскоп?
  • Зачем нужны исследовательские микроскопы?
  • Бактерии под микроскопом: фото и особенности наблюдения
  • На что влияет апертура объектива микроскопа?
  • Аскариды под микроскопом: фото и особенности изучения
  • Как использовать микропрепараты для микроскопа
  • Изучаем ГОСТ: микроскопы, соответствующие стандартам
  • Микроскоп инструментальный – купить или нет?
  • Где купить отсчетный микроскоп и зачем он нужен?
  • Атом под электронным микроскопом
  • Как кусает комар под микроскопом
  • Как выглядит муха под микроскопом
  • Амеба: фото под микроскопом
  • Подкованная блоха под микроскопом
  • Вша под микроскопом
  • Плесень хлеба под микроскопом
  • Зубы под микроскопом: фото и особенности наблюдения
  • Снежинка под микроскопом
  • Бабочка под микроскопом: фото и особенности наблюдений
  • Самый мощный микроскоп – как выбрать правильно?
  • Рот пиявки под микроскопом
  • Мошка под микроскопом: челюсти и строение тела
  • Микробы на руках под микроскопом – как увидеть?
  • Вода под микроскопом
  • Как выглядит глист под микроскопом
  • Клетка под световым микроскопом
  • Клетка лука под микроскопом
  • Мозги под микроскопом
  • Кожа человека под микроскопом
  • Кристаллы под микроскопом
  • Основное преимущество световой микроскопии перед электронной
  • Конфокальная флуоресцентная микроскопия
  • Зондовый микроскоп
  • Принцип работы сканирующего зондового микроскопа
  • Почему трудно изготовить рентгеновский микроскоп?
  • Макровинт и микровинт микроскопа – что это такое?
  • Что такое тубус в микроскопе?
  • Главная плоскость поляризатора
  • На что влияет угол между главными плоскостями поляризатора и анализатора?
  • Назначение поляризатора и анализатора
  • Метод изучения – микроскопия на практике
  • Микроскопия осадка мочи: расшифровка
  • Анализ «Микроскопия мазка»
  • Сканирующая электронная микроскопия
  • Методы световой микроскопии
  • Оптическая микроскопия (световая)
  • Световая, люминесцентная, электронная микроскопия – разные методы исследований
  • Темнопольная микроскопия
  • Фазово-контрастная микроскопия
  • Поляризаторы естественного света
  • Шотландский физик, придумавший поляризатор
  • Механизм фокусировки в микроскопе
  • Что такое полевая диафрагма?
  • Микроскоп Микромед: инструкция по эксплуатации
  • Микроскоп Микмед: инструкция по эксплуатации
  • Где найти инструкцию микроскопа «ЛОМО»?
  • Микроскопы Micros: руководство пользователя
  • Какую функцию выполняют зажимы на микроскопе
  • Рабочее расстояние объектива микроскопа
  • Микропрепарат для микроскопа своими руками
  • Метод висячей капли
  • Метод раздавленной капли
  • Тихоходка под микроскопом
  • Аппарат Гольджи под микроскопом
  • Чем занять детей дома?
  • Чем заняться на карантине дома?
  • Чем заняться школьникам на карантине?
  • Выбираем микроскоп: отзывы имеют значение?
  • Микроскоп для школьника: какой выбрать?
  • Немного об оптовой закупке микроскопов и иной оптической техники
  • Во сколько увеличивает лупа?
  • Где купить лампу-лупу – косметологическую модель с подсветкой?
  • Какую купить лампу-лупу для маникюра?
  • Можно ли купить лампу-лупу для наращивания ресниц в интернет-магазине?
  • Лампа-лупа косметологическая на штативе: купить домой или нет?
  • Лупа бинокулярная с принадлежностями
  • Как выглядит лупа для нумизмата?
  • Лупа-лампа – лупа для рукоделия с подсветкой
  • «Лупа на стойке» – что это за оптический прибор?
  • Лупа – проектор для увеличенного изображения
  • Делаем лупу своими руками
  • Основные функции лупы
  • Где найти лупу?
  • Лупа бинокулярная – цена возможностей
  • Лупа канцелярская: выбираем оптическую технику для офиса
  • Как выглядит коронавирус под микроскопом?
  • Как называется главная часть микроскопа?
  • Где купить блоки питания для микроскопа?
  • Строение объектива микроскопа
  • Как выглядят продукты под микроскопом
  • Что покажет музей микроминиатюр
  • Особенности и применение методов окрашивания клеток

Микроскопия урогенитального мазка (ж) 3 точки

Диагностическое направление

Воспалительные заболевания органов малого таза

Общая характеристика

Исследование отделяемого из влагалища, цервикального канала и уретры проводят для выявления воспалительного процесса и его выраженнсти, обнаружения простейших (трихомонад), элементов дрожжеподобного гриба типа Candida, оценки характера флоры. Нарушение соотношения количественного уровня различных видов микроорганизмов или видового состава ассоциаций микробиотипов влагалища приводит к возникновению воспалительных процессов (бактериальный вагиноз).

Показания для назначения

1. Признаки ВЗОМТ (при подозрении на кольпит, вульвовагинит, цервицит, уретрит). 2. Во время беременности и перед родами. 3. Перед различными манипуляциями на наружных и внутренних половых органах (аборт, биопсия, введение и удаление ВМС, хирургическое лечение эрозий шейки матки и др.).

Маркер

Маркер наличия, локализации и выраженности воспалительного процесса

Клиническая значимость

Оценка клеточного состава урогенитального мазка.


Состав показателей:

Trichomonas vaginalis

Метод: Микроскопический

Ключевые клетки

Метод: Микроскопический

Лейкоциты
Метод: Микроскопический
Единица измерения: В поле зрения

Референтные значения:

Возраст

Комментарии

Метод: Микроскопический
Единица измерения: В поле зрения

Референтные значения:

Возраст

Комментарии

Метод: Микроскопический
Единица измерения: В поле зрения

Референтные значения:

Возраст

Комментарии

Цитолиз

Метод: Микроскопический

Элементы дрожжеподобного гриба типа Candida

Метод: Микроскопический

Выполнение возможно на биоматериалах:

Биологический материал

Условия доставки

Контейнер

Объем

Соскоб из уретры, цервикса, вагины

Условия доставки:

48 Час. при температуре от 2 до 25 градусов Цельсия

Контейнер:

Предметное стекло с полем

Правила подготовки пациента

У/г забор Стандартные условия: В течение рабочего дня ДЦ. Важно:

— За 24 часа (оптимально — 48 часов) исключить половые контакты и использование любых интравагинальных средств, тампонов или спермицидов, спринцевание, проведение гинекологического обследования (кольпоскопия и / или мануальное).

— В течение 2 часов воздерживаться от мочеиспускания. Важно: исследование не требует дополнительного потребления жидкости и наполнение мочевого пузыря.

— Желательно биоматериал сдавать до лечения или не ранее чем через 21 день после окончания курса антибактериальной, антимикотической терапии (если иное не определено вашим врачом).

Возможно: Возможны отклонения от стандартных условий по согласованию с врачом. Внимание: Условия подготовки к сдаче урогенитального материала определяются врачом. При особых указаниях врача берется в соответствии с указанной точкой забора. Другой тип БМ Стандартные условия: В течение рабочего дня ДЦ. Внимание: В работу может быть принят для данного метода различный тип биоматериала (это определяет только заказчик, указывая в направлении).

Вы можете добавить данное исследование в корзину на этой странице

Интерференция:

  • Местное применение антисептиков и/или других антибактериальных, противогрибковых, противозачаточных препаратов искажает результаты исследования.

Интерпретация:

  • В зависимости от микрофлоры и характера клеточного содержимого различают 4 степени чистоты влагалища:І степень В мазках эпителиальные клетки и чистая культура факультативных лактобацилл.ІІ степень Небольшое количество лейкоцитов, палочек факультативных лактобацилл меньше, присутствуют другие сапрофиты, преимущественно граммположительные кокки.ІІІ степень Большое количество клеток эпителия, лейкоциты. Факультативные лейкобациллы в незначительном количестве, разнообразная грам-вариабельная кокковая флора.ІV степень Клетки эпителия, много лейкоцитов, разнообразная гноеродная Грам-вариабельная флора при полном отсутствии влагалищной палочки, лактобацилл.

Микроскопическое исследование отделяемого цервикального канала

Микроскопия отделяемого мочеполовых органов женщины (мазок на флору) — анализ, с помощью которого можно оценить состав микрофлоры уретры, влагалища и цервикального канала, количество лейкоцитов, эпителия, морфотип бактерий, а также выявить ряд специфических возбудителей. К ним относятся грибы рода Candida, трихомонады и гонококки.

Нормальная микрофлора урогенитального тракта женщины включает около 40 видов бактерий. У женщин репродуктивного возраста преобладают лактобактерии, которые составляют более 90% всей микрофлоры влагалища. Лактобактерии вырабатывают перекись водорода и молочную кислоту, благодаря чему создается кислая среда и подавляет размножение вредоносных микроорганизмов. Также нормальная микрофлора включает стафилококки, коринебактерии, другие анаэробные и анаэробные микроорганизмы. В небольшом количестве могут встречаться дрожжеподобные грибы рода Candida. Снижение количества лактобактерий приводит к нарушению баланса микрофлоры и росту условно-патогенных микроорганизмов (стрептококков, стафилококков, кишечной палочки и т. д.), что может приводить к дисбиозу. Дисбиоз влагалища способствует воспалению матки и ее придатков, бесплодию, внематочной беременности, выкидышам, недоношенности плода.

В каких случаях обычно назначают исследование?

  • При признаках дисбиоза или воспалительных заболеваний органов мочеполовой системы.
  • При профилактических осмотрах.
  • Для скрининга некоторых урогенитальных инфекций (кандидоз, трихомониаз, гонорея).

Что именно определяется в процессе анализа?

При микроскопическом исследовании отделяемого мочеполовых органов женщины исследуется состав микрофлоры, количество лейкоцитов, наличие элементов грибов рода кандида, наличие или отсутствие специфических инфекций. 

Что означают результаты теста?

Результат выдается в виде описания, которое интерпретируется лечащим врачом пациентки. Следует помнить о том, что микроскопическое исследование урогенитального отделяемого является ориентировочным тестом, в случае выявления патологии могут понадобиться другие исследования. Следует помнить, что в мазке на микрофлору не выявляются такие возбудители как вирусы, хламидии, микоплазмы и уреаплазмы, поэтому для диагностики этих заболеваний чаще всего используют анализы методом  ПЦР.

Сроки выполнения теста.

Результат исследования можно получить через 2-3 дня после сдачи анализа.

Как подготовиться к анализу?

Следует придерживаться общих правил подготовки к взятию мазка из мочеполовых путей. Накануне необходимо исключить местное лечение и половой акт. Рекомендуется сдавать анализ до менструации или спустя два дня после ее окончания. 

Анализ урогенитального мазка на микрофлору (на стекле)

Анализ урогенитального мазка на микрофлору (на стекле)

Анализ урогенитального мазка на микрофлору (на стекле)  — это исследование, которое  позволяет определить состав микрофлоры мочеполовых органов женщины (уретры, влагалища и цервикального канала) и мужчины, количество лейкоцитов, эпителия и их соотношение, количество слизи и морфологический тип бактерий, а также выявить ряд специфических возбудителей, таких как грибы рода Candida, трихомонады и гонококки. В состав нормальной микрофлоры мочеполовых органов женщины входит около 40 видов бактерий. Доминирующими микроорганизмами у женщин репродуктивного возраста являются молочнокислые бактерии (лактобактерии), которые составляют 95-98 % всей микрофлоры влагалища. Микроскопическое исследование мазка у женщин позволяет полуколичественно оценить общую микробную обсемененность, состояние эпителия влагалища, наличие и выраженность воспаления (по лейкоцитарной реакции), состав микрофлоры, а также выявить молочницу, трихомониаз и гонорею. Этот метод является «золотым стандартом» для диагностики бактериального вагиноза (чувствительность – 100 %). Норма мазка на флору определяется следующими показателями:
должен присутствовать плоский эпителий, его отсутствие может быть связано с атрофией эпителиальных клеток, с недостатком эстрогенов или избытком мужских половых гормонов,
количество лейкоцитов не должно превышать 15 в поле зрения, его увеличение указывает на воспалительный процесс, слизь, палочки (бациллы) в мазке составляют нормальную микрофлору влагалища, кокки и диплококки – выявление грамотрицательных диплококков в мазке свидетельствует о гонорее, «ключевые», или атипичные, клетки характерны для дисбактериоза влагалища, споры или мицелий грибов свидетельствует о кандидозе (молочнице), наличие подвижных бактерий в нативном мазке (трихомонад) характерно для трихомониаза,
эритроциты выявляются при кровотечениях из матки, эрозиях или новообразованиях. Урогенитальный мазок у мужчин исследуют в основном для диагностики воспалительного процесса при уретритах различной этиологии (бактериальных уретритах, гонорее, трихомониазе, хламидиозе и др.). При исследовании отделяемого из уретры число и состав клеточных элементов зависят от остроты и продолжительности воспалительного процесса. Воспалительное состояние слизистой оболочки мочеиспускательного канала (уретры) выражается наличием в урогенитальном мазке более 4 сегментноядерных нейтрофилов (больше 4 лейкоцитов) в поле зрения. О глубине патологического процесса в уретре в мазке свидетельствует преобладание в препаратах цилиндрического и парабазального эпителия.

Подготовка к исследованию

В течение трех дней до планируемого исследования урогенитального мазка рекомендовано исключить местное применение антисептиков и/или других антибактериальных и противогрибковых препаратов. В течение трех часов до исследования удерживаться от мочеиспусканий, не проводить туалет наружных половых органов.
Не рекомендованы половые контакты за 3 дня до планируемого исследования.
Рекомендовано проводить анализ урогенитального мазка мужчины не ранее чем через две недели после приема антибактериальных препаратов.
Женщинам рекомендуется сдавать анализ до менструации или через 2 дня после ее окончания.
 

Показания к исследованию

При симптомах дисбиоза или воспалительных заболеваний органов мочеполовой системы.
При профилактических осмотрах.
Для диагностики бактериального вагиноза.
Для выявления некоторых специфических инфекций, передающихся половым путем (кандидоза, трихомониаза, гонореи).

     
     
Интерпретация

     

Лейкоциты (v)

0-10

Эпителиальные клетки(V)

5-10

Микрофлора (V)

Большое кол грамполож палочек Дедерлейна

Гонококки (V)

отсутствуют

Трихомонады (V)

отсутствуют

Дрожжи (V)

отсутствуют

Ключевые клетки (V)

отсутствуют

Слизь (V)

Умеренное количество

 

На результаты могут влиять

Местное применение антисептиков, антибактериальных, противогрибковых и противозачаточных препаратов.

Назначается в комплексе с

TORCH инфекции

Микроскопическое исследование отделяемого мочеполовых органов женщин (микрофлора): исследования в лаборатории KDLmed

Это исследование, позволяющее определить состав микрофлоры мочеполовых органов женщины (уретры, влагалища и цервикального канала), количество лейкоцитов, эпителия и их соотношение, количество слизи и морфологический тип бактерий, а также выявить ряд специфических возбудителей, таких как грибы рода Candida, трихомонады и гонококки.

Синонимы русские

Исследование на микробиоценоз влагалища с микроскопией.

Синонимы английские

Gram’s Stain. Bacterioscopic examination of smears (vaginal, cervical, urethral).

Метод исследования

Микроскопия.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Мазок на предметном стекле.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Женщинам рекомендуется сдавать анализ до менструации или через 2 дня после её окончания.

Общая информация об исследовании

В состав нормальной микрофлоры мочеполовых органов женщины входит около 40 видов бактерий. Доминирующими микроорганизмами у женщин репродуктивного возраста являются молочнокислые бактерии (лактобактерии), которые составляют 95-98 % всей микрофлоры влагалища. За счет продукции перекиси водорода и молочной кислоты лактобактерии подавляют размножение патогенных микроорганизмов и создают кислую реакцию среды (pH = 3,8-4,5). Остальная часть нормальной микрофлоры представлена стафилококками, коринебактериями, клебсиеллами, кишечной палочкой, гарднереллами и анаэробами (бактероидами, превотеллами, микрококками, вибрионами рода Mobilincus, энтерококками, пептококками, пептострептококками, вейлонеллами, клостридиями, эубактериями, кампилобактером, фузобактериями и др.). В небольшом количестве могут встречаться дрожжеподобные грибы рода Candida. Если лактобацилл становится меньше, нарушается баланс микрофлоры и увеличивается количество условно-патогенных микроорганизмов (стрептококков, стафилококков, кишечной палочки и т.  д.), что может приводить к дисбиозу. Дисбиоз влагалища грозит воспалением матки и её придатков, бесплодием, внематочной беременностью, выкидышем, рождением недоношенного ребенка. К его развитию приводит несоблюдение правил личной гигиены, гормональные нарушения (недостаток эстрогенов), нарушение обмена веществ, приём антибиотиков широкого спектра действия.

Микроскопическое исследование отделяемого мочеполовых органов позволяет полуколичественно оценить общую микробную обсеменённость, состояние эпителия влагалища, наличие и выраженность воспаления (по лейкоцитарной реакции), состав микрофлоры, а также выявить молочницу, трихомониаз и гонорею. Этот метод является «золотым стандартом» для диагностики бактериального вагиноза (чувствительность – 100 %). При микроскопическом исследовании определяются следующие показатели:

  • должен присутствовать плоский эпителий, его отсутствие может быть связано с атрофией эпителиальных клеток, с недостатком эстрогенов или избытком мужских половых гормонов,
  • количество лейкоцитов не должно превышать 15 в поле зрения, его увеличение указывает на воспалительный процесс,
  • слизь,
  • палочки (бациллы) в мазке составляют нормальную микрофлору влагалища,
  • кокки и диплококки – выявление грамотрицательных диплококков в мазке свидетельствует о гонорее,
  • «ключевые», или атипичные, клетки характерны для дисбактериоза влагалища,
  • споры или мицелий грибов свидетельствует о кандидозе (молочнице),
  • наличие подвижных бактерий в нативном мазке (трихомонад) характерно для трихомониаза,
  • ­эритроциты выявляются при кровотечениях из матки, эрозиях или новообразованиях.

Для чего используется исследование?

  • Чтобы оценить состав микрофлоры мочеполовой системы.
  • Для диагностики бактериального вагиноза.
  • Для выявления некоторых специфических инфекций, передающихся половым путём (кандидоза, трихомониаза, гонореи).

Когда назначается исследование?

  • При симптомах дисбиоза или воспалительных заболеваний органов мочеполовой системы.
  • При профилактических осмотрах.

Что означают результаты?

Референсные значения

Референсные значения для различных видов микроорганизмов зависят от их локализации (точки взятия биологического материала).

На основании микроскопической картины выделяют 4 типа микробиоценоза влагалища.

Тип микробиоценоза

Описание

Нормоценоз

Доминирование лактобацилл, отсутствие грамотрицательной микрофлоры, спор, мицелия и псевдогифов, наличие единичных лейкоцитов и «чистых» эпителиальных клеток. Такой тип мазка является вариантом нормы.

Промежуточный

Умеренное или сниженное количество лактобацилл, наличие грамположительных кокков и грамотрицательных палочек, лейкоцитов, моноцитов, макрофагов, эпителиальных клеток. Этот тип мазка часто наблюдается у здоровых женщин и редко сопровождается явными симптомами.

Дисбиоз

Незначительное количество или полное отсутствие лактобацилл, обильная полиморфная грамотрицательная и грамположительная палочковая и кокковая микрофлора, наличие «ключевых» клеток, вариабельное количество лейкоцитов, отсутствие или незавершённость фагоцитоза. Вместе с этим часто обнаруживаются гарднереллы, микоплазмы, уреаплазмы, вибрионы рода Mobiluncus, анаэробные кокки.

Вагинит

Полимикробная картина мазка с большим количеством лейкоцитов, макрофагов, эпителиальных клеток, с выраженным фагоцитозом и практически полным отсутствием лактобацилл. При обнаружении возбудителей специфических инфекций (гонококков, трихомонад, псевдогифов споры) можно предполагать наличие гонореи, трихомониаза или кандидозного вагинита.

Что может влиять на результат?

Местное применение антисептиков, антибактериальных, противогрибковых и противозачаточных препаратов.

Важные замечания

  • Микроскопия отделяемого мочеполовых органов является «ориентировочным» исследованием. Для точной идентификации возбудителя и определения его чувствительности к антимикробным препаратам выполняют бактериологическое исследование – посев материала с определением чувствительности к антибиотикам.
  • В урогенитальном мазке не определяются вирусы, хламидии, микоплазмы и уреаплазмы, поэтому для диагностики инфекций, вызываемых этими микроорганизмами, используют другие методы – полимеразную цепную реакцию или иммуноферментный анализ.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Акушер-гинеколог, венеролог.

Литература

  • Chernecky C.C. Laboratory Tests and Diagnostic Procedures / C.C. Chernecky, B.J. Berger ; 5th ed. – Saunders Elsevier, 2008. – 1232 p.
  • Oxford handbook of genitourinary medicine, HIV, and Aids / R. Pattman [et al.] (Eds) ; 1st edition. – USA : Oxford University Press, 2005 – 580 p.
  • Байрамова Г.Р. Бактериальный вагиноз / Г.Р. Байрамова // Гинекология. – 2001. – Т. 3, № 2. – С. 52-54.
  • Тихомиров А.Л. Оптимизация лечения бактериального вагиноза / А.Л. Тихомиров, Ч.Г. Олейник // Consilium-medicum. – 2005. – Т. 7, № 7. – C. 545-550.
  • Гинекология. Национальное руководство / под ред. В.И. Кулакова, Г.М. Савельевой, И.Б. Манухина. – М : ГЭОТАР-Медиа, 2009. – 1150 с.
  • Анкирская А.С. Бактериальный вагиноз: особенности клинического течения, диагностика и лечение / Анкирская А.С., Прилепская В.Н., Байрамова Г.В., Муравьева В.В. // Рус. мед. журнал. – 1998. – № 5. – С. 25-29.
  • Савичева А.М. Микробиологическая диагностика инфекций, передаваемых половым путем / А. М. Савичева // Consilium-medicum. – 2007. – Т. 9, № 6. – C. 38-43.
  • Савичева А.М. Лабораторная диагностика и терапия репродуктивно значимых инфекций / А.М. Савичева // Леч. врач. – 2008. – № 3. – C. 50-54.

Сдать мазок на флору у женщин в СПб — цены от 330 рублей

Анализ мазка – один из самых распространённых диагностических методов в гинекологии, который направлен на оценку состояния микрофлоры мочеполовой системы. Наш гинекологический центр «Даная», расположенный в Санкт-Петербурге, предлагает сделать мазок на флору по доступной цене. Отсутствие очередей, качественное оборудование и большой опыт специалистов – это лишь небольшая часть преимуществ нашей клиники.

Стоимость исследования мазка

Микроскопия окрашенного препарата отделяемого влагалища (Мазок на флору) 400
Микроскопия окрашенного препарата отделяемого влагалища (Мазок на флору экспресс) 500

Смотреть все цены

Запись к врачу

Когда нужно сдавать мазок на флору?

Мазок рекомендуется сдавать при любом посещении гинеколога, так как исследование является важной мерой профилактики многих заболеваний. Есть ряд прямых показаний для такого анализа:

  • Планирование беременности.
  • Зуд или жжение, неприятный запах или неестественные выделения из влагалища.
  • Воспаление органов малого таза.
  • Болевые ощущения внизу живота.
  • Смена полового партнёра.
  • Приём гормональных препаратов и антибиотиков.

Что показывает мазок на флору у женщин

Микроскопическое исследование отделяемого мочеполовых органов у женщин позволяет определять природу инфекционно-воспалительных заболеваний и выявлять специфических возбудителей. Метод считается «золотым стандартом» диагностики бактериального вагиноза в гинекологии и показывает «степень чистоты» влагалища. Показатели, которые оценивают при расшифровке результатов мазка на флору — лейкоциты, слизь, эпителий, палочки, кокки, ключевые клетки, эритроциты, грибы и трихомонады.

При расшифровке результатов учитывается содержание следующих элементов:

  • Кокковая флора. В норме в микрофлоре содержится несколько десятков видов бактерий, до 98% которых составляют лактобактерии. Как только их количество уменьшается, изменяется баланс и увеличивается число патогенных микроорганизмов — стафилококков, стрептококков, диплококков, энтерококков. Кокковая флора в мазке у женщин говорит о дисбиозе, который грозит воспалительными процессами.
  • Палочковая флора. Палочки или молочнокислые бактерии входят в состав нормальной микрофлоры. Однако большое количество грамположительных и грамотрицательных палочек вместе с ключевыми клетками может свидетельствовать о гарднереллезе, который часто сопровождает «рыбный» запах.
  • Лейкоциты. Это белые кровяные тельца препятствуют различным инфекциям, однако в норме в мазке их должно быть немного. Увеличенное количество лейкоцитов может свидетельствовать о наличии воспаления или инфекционных заболеваний.
  • Эритроциты. Такие клетки придают крови красный цвет, концентрация данных элементов в мазке зависит от дня менструального цикла. Но серьёзное превышение их числа говорит об эрозии или воспалении слизистой шейки матки.
  • Гарднереллы. Данные микроорганизмы относятся к условно-патогенной флоре, их увеличение свидетельствует о развитии у пациентки дисбактериоза влагалища и бактериального вагиноза.
  • Кандида. Этот грибок часто присутствует даже у здоровых женщин. Если таких бактерий в организме больше, чем лактобактерий, то возникает кандидоз — «молочница».
  • Лактобациллы (палочки Дондрейна). Поддерживают здоровье женской половой системы, поэтому их наличие в мазке строго обязательно.
  • Трихомонада. Возбудитель трихомониаза. Часто не определяется при обычном мазке на флору, поэтому наш врач может назначить дополнительное обследование – бактериальный посев.
  • Слизь. Вязкое вещество выделяется влагалищными железами, поэтому в норме должно входит в состав мазка. Однако если слизь была обнаружена в мочеиспускательном канале, то это свидетельствует об инфекциях мочевыводящих путей.
  • Эпителий. Такие отмершие клетки покрывают влагалище и шейку матки. В норме их должно быть немного, а повышение их количества вызывает воспаление.

Слизь и плоский эпителий должен присутствовать в умеренном количестве. Их отсутствие может быть вызвано гормональными сбоями, обилие — воспалительным процессом.

По результатам исследования определяют «степень чистоты»:

  1. 1. Бациллярная, скудная или единичная флора в мазке — варианты нормы и хорошего состояния здоровья.
  2. 2. Кокковая, полиморфная палочковая флора в мазке наблюдаются у женщин с дисбиозом.
  3. 3. Повышенная флора в мазке, наличие трихомонад, гонококков говорят о вагините и инфекциях.

Микроскопия может не дать точно идентифицировать возбудителя. Тогда используется посев мазка на флору, который позволяет определить чувствительность к антибиотикам и помогает врачу подобрать правильное лечение.

В зависимости от результатов исследования врач можете подобрать правильную терапию и назначить ряд дополнительных диагностических процедур.

Подготовка к мазку на флору

Для чистоты картины мазок на флору можно делать перед менструацией или через 3-5 дней после завершения. На результат могут влиять местные антисептические, антибактериальные, противогрибковые препараты, а также противозачаточные средства в свечах и кремах, презервативы со спермицидной смазкой, лубриканты.

Накануне лучше воздержаться от половых контактов, а непосредственно перед мазком на флору — от посещения туалета. В целях гигиены достаточно принять душ без спринцеваний.

Мазок на флору является довольно распространённым способом диагностики заболеваний у женщин, а всё благодаря его доступной цене и простоте.

Более подробные рекомендации вы можете получить у специалистов нашей клиники по указанным номерам.​

Мазок на флору при беременности

Лабораторное микроскопическое исследование назначается при симптомах дисбиоза, воспаления и в профилактических целях. Взятие гинекологического мазка на флору у беременных входит в план обязательных обследований.

Анализ берется при поставке на учет, на втором и третьем триместрах. Он позволяет своевременно выявить инфекции и дисбаланс микрофлоры, которые могут передаваться ребенку, приводить к выкидышу и преждевременным родам.

Сколько делается мазок на флору

Процедура выполняется после осмотра на кресле и занимает одну-две минуты. В отличие от цитологии мазок на флору не доставляет дискомфорта, не вызывает кровянистых выделений.

Результаты будут готовы в течение 1-3 дней. Расшифровкой должен заниматься гинеколог. Он расскажет, что значит мазок на флору, подберет лечение при обнаружении проблем или назначит дополнительные исследования.

Где можно сдать мазок на флору?

В нашей клинике «Даная» вы сможете пройти экспресс-обследование своего здоровья по низкой стоимости. Наш гинекологический центр имеет удобное расположение и работает даже по выходным.

Вы можете записаться на приём к специалисту заранее или пройти обследование в день обращения. Мы делаем всё для того, чтобы сделать ваше пребывание в клинике максимально комфортным.

Задайте ваш вопрос

Микроскопические исследования (CMD) ✅ цены в клинике «Чудо Доктор» в Москве

Важно! В стоимость анализов не входит взятие биоматериала. Размещённый прейскурант не является офертой. Стоимость анализов на сайте и в клинике могут различаться. Сдать анализы в клинике можно в нескольких лабораториях, обязательно уточняйте цены у администраторов клиники!

Микроскопические исследования (CMD)

  • Микроскопическое исследование мазка из влагалища и уретры

    160 ₽

    {{ items[0].value[43996].inCard ? ‘Удалить’ : ‘Заказать’ }}

  • Микроскопическое исследование мазка из влагалища с окраской по Граму (с оценкой по шкале Ньюджента)

    440 ₽

    {{ items[0].value[44001].inCard ? ‘Удалить’ : ‘Заказать’ }}

  • Микроскопическое исследование мазка из уретры у женщин

    140 ₽

    {{ items[0].value[44000].inCard ? ‘Удалить’ : ‘Заказать’ }}

  • Микроскопическое исследование мазка из цервикального канала

    140 ₽

    {{ items[0].value[43997].inCard ? ‘Удалить’ : ‘Заказать’ }}

  • Микроскопическое исследование мазков из цервикального канала и из влагалища) с окраской по Граму (с оценкой по шкале Ньюджента)

    510 ₽

    {{ items[0].value[44002].inCard ? ‘Удалить’ : ‘Заказать’ }}

  • Влажные мазки по сравнению с мазками Папаниколау

    При осмотре женского здоровья влажный образец представляет собой слайд, сделанный из влагалищного тампона. Он также известен как вагинальный мазок. Назначение влажного крепления — определить причину вагинита. Влажное крепление также может быть стандартной частью ежегодного гинекологического осмотра.

    Библиотека научных фотографий / Getty Images

    Чтобы приготовить влажный образец, врач возьмет мазок из влагалища — обычно во время гинекологического осмотра — и раскатает тампон на предметное стекло. Некоторые врачи также могут разрешить делать мазок самостоятельно.Затем ваш врач может взглянуть на влажную оправу под микроскопом в своем кабинете, чтобы диагностировать видимые состояния, такие как бактериальный вагиноз, дрожжевые инфекции и трихомониаз.

    Влажные крепления не используются для диагностики наиболее распространенных ЗППП, таких как хламидиоз и гонорея. Однако эти вагинальные мазки могут дать вашему врачу важную информацию о вашем репродуктивном здоровье.

    Уточнение разницы между влажными мазками и мазками Папаниколау

    Мокрые мазки и мазки Папаниколау могут начинаться с мазка, но это очень разные типы тестов.Влажные мазки читает врач в офисе. Они используются для обнаружения 3-4 конкретных типов инфекций, таких как упомянутые выше. Чтение мокрых креплений требует тренировки, но выполнять его все равно относительно легко.

    С другой стороны, мазки Папаниколау не используются для выявления ЗППП. Вместо этого они используются для выявления предраковых изменений шейки матки, связанных с ВПЧ. Это тест на рак и предраковые состояния. Кроме того, мазки из шейки матки берутся в кабинете врача, но их читают специально обученные патологи (или компьютеры.) Клеточные изменения гораздо более тонкие, чем изменения, которые врачи ищут на мокром покрытии.

    Другое важное различие между мазками Папаниколау и влажными мазками состоит в том, что мазки Папаниколау — это мазки из шейки матки, а влажные мазки — это мазки из влагалища. Они не только используются для диагностики различных типов состояний, но также содержат образцы клеток из разных мест.

    Однако есть одна общая черта, которую объединяет мокрый мазок и мазок Папаниколау — это то, что они обычно проводятся вместе с другими тестами на ЗППП.Ни один из тестов не является самостоятельным для контроля сексуального и репродуктивного здоровья женщины.

    Расшифровка кода мазка Папаниколау .. Кортни Снавели, соучредитель Ovee | автор: Ovee

    Кортни Снавли, соучредитель Ovee

    Итак, вам сделали мазок. Врач звонит вам и сообщает результаты, но вы не можете разобраться в них. «Аномальный? АСКУС? КОЛЬПОСКОПИЯ ?! » Что все это на самом деле означает от того, кто был там.

    Мазок Папаниколау — это микроскопическое исследование клеток шейки матки.Лаборанты ищут любые изменения в ваших клетках, клетки неправильной формы или, в некоторых случаях, наличие ВПЧ.

    Нормальный — В точности как звучит! У вас вполне здоровая шейка матки.

    Неудовлетворительно — Это не вы, это ваш образец. По какой-то причине в лаборатории возникли проблемы с анализом ваших клеток с помощью этой гигантской ватной палочки. Возможно, вам понадобится сделать еще один мазок Папаниколау 😢, но вы уже стали профессионалом!

    Незначительные изменения — Вы в основном нормальные.Вероятно, это всего лишь крохотная инфекция, которая вызывает воспаление клеток шейки матки. Пройдите контрольный осмотр органов малого таза, чтобы выяснить, нужны ли вам антибиотики для подавления инфекции.

    ASCUS — Означает «Атипичные плоскоклеточные клетки неопределенного значения». Рад, что все прояснилось. На самом деле это означает, что ваши клетки не имеют такой формы, как обычно. Они проведут дополнительные тесты, чтобы определить, является ли ВПЧ причиной странности.

    ASC-H — Ладно, тут никуда не деться, ваши клетки нетипичны.Вероятный виновник — ВПЧ. Не сходи с ума! ВПЧ встречается часто. СУПЕР ОБЩЕЕ. Настолько распространено, что, по оценкам, 80% женщин и 90% мужчин в какой-то момент своей жизни будут инфицированы ВПЧ. Если это ваш результат, вам потребуется кольпоскопия (подробнее об этом позже).

    LSIL — A.k.a. «Плоское интраэпителиальное поражение низкой степени». Поистине яркая аббревиатура. В человеческом разговоре это означает, что у вас, скорее всего, есть ВПЧ. Но я не могу повторить этого достаточно, ВПЧ СУПЕР ОБЫЧНЫЙ.Что это означает — вам придется каждый год делать мазок Папаниколау, пока ваши результаты не перестанут быть ненормальными. По мнению врача, вам также может потребоваться кольпоскопия.

    HSIL- «Плоскоклеточное интраэпителиальное поражение высокой степени». Может кто-нибудь переименовать их? Мы назовем это «более серьезным, чем низкий уровень, но все же не раком». Ваши клетки меняются, но наблюдение и лечение могут значительно снизить риск рака. Если это ваш результат Папаниколау, настоятельно рекомендуется сделать кольпоскопию.

    AGC — «Атипичные железистые клетки». Это имя действительно имеет смысл. Это означает, что произошли изменения в железистых клетках шейки матки. Заказывали кольпоскопию? Если у вас есть такие результаты, вам обязательно нужно.

    Рак — Я приберег этот до конца, потому что он крайне редко встречается у молодых женщин. Если результаты мазка Папаниколау показывают, что у вас рак, вам нужно сразу же записаться на прием к специалисту (онкологу).Чем раньше начнется лечение, тем лучше, поэтому так важно быть в курсе своих мазков Папаниколау!

    Ваш врач порекомендует либо тест на ВПЧ (в большинстве случаев он будет делать это автоматически), повторный мазок Папаниколау через год или, в некоторых случаях, кольпоскопию.

    Кольпоскопия. Звучит пугающе, но на самом деле они делают только гинекологический осмотр, в котором ваша шейка матки является звездой. Врач будет использовать зеркало и большое увеличительное стекло (не волнуйтесь, оно остается вне вашего тела!), Чтобы лично познакомиться с вашей шейкой матки.Тампон с уксусом используется для вынюхивания нездоровых клеток. Если что-то выглядит не так, врач может взять биопсию (крошечный образец ваших клеток шейки матки), чтобы убедиться, что все в порядке.

    Как человек, у которого он был, я могу засвидетельствовать, что он не очень удобен, НО занимает примерно столько же времени, сколько ваш годовой экзамен, и в большинстве случаев дает вам это сладкое душевное спокойствие.

    Советы: НЕ смотрите на образец клеток, если берут биопсию, ожидаются спазмы и странные коричневые выделения, а , самое главное, НЕ вступайте в половые отношения в течение 48 часов после кольпоскопии.Ваша шейка матки открыта и чрезвычайно уязвима для раздражения.

    Думайте о своих ежегодных экзаменах как о своей большой семье. В большинстве случаев вам не о чем беспокоиться, но раз в год (может быть, в праздничные дни?) Обязательно регистрируйтесь. Относитесь к шейке матки, как к мягкому золотому пончику, который она собой представляет, обязательно запланируйте все последующие встречи и будьте активны в отношении своего профилактического ухода!

    Остались вопросы? Напишите нам по телефону [email protected] !

    Дополнительную информацию можно найти по телефону Центр здоровья молодых женщин или Национальный институт рака.

    Мобильная микроскопия как инструмент скрининга рака полости рта в Индии: пилотное исследование

    Abstract

    Рак полости рта — наиболее распространенный тип рака среди мужчин в Индии и других странах Южной Азии. Поздняя диагностика в значительной степени способствует этой смертности, подчеркивая необходимость эффективных и конкретных диагностических инструментов в месте оказания медицинской помощи. В тех же регионах с высокой распространенностью рака полости рта наблюдается значительный рост инфраструктуры мобильной связи, что обеспечивает широкий доступ к услугам телемедицины.В этой работе мы описываем оценку автоматизированного мобильного микроскопа на базе планшета в качестве дополнения к телемедицинскому скринингу рака полости рта в Индии. Кистевая биопсия, минимально инвазивный метод отбора проб, была объединена с упрощенным протоколом окрашивания и мобильным микроскопом на базе планшета, чтобы облегчить локальный сбор цифровых изображений и удаленную оценку изображений клиницистами. Мобильный микроскоп на базе планшета (устройство CellScope) сочетает в себе iPad Mini с оптикой для сбора данных, светодиодной подсветкой и управляемыми Bluetooth двигателями для сканирования предметного стекла и получения изображений с высоким разрешением образцов биопсии с окрашенной кистью.Исследователи из Медицинского фонда Мазумдара Шоу (MSMF) в Бангалоре, Индия, использовали этот инструмент для сбора и отправки случайно выбранных изображений каждого слайда для телепатологического обзора. Оценка соответствия между золотым стандартом гистологии, стандартной цитологической микроскопией и обзором изображений удаленным патологом была проведена в рамках пилотного исследования мобильной микроскопии как инструмента скрининга рака полости рта. Результаты показали, что прибор успешно собрал изображения достаточного качества, чтобы сделать возможной удаленную диагностику, которая показывает соответствие существующим методам.Дальнейшие исследования будут оценивать эффективность скрининга рака полости рта с помощью мобильной микроскопии, проводимого техническими специалистами с минимальной квалификацией в условиях ограниченных ресурсов.

    Образец цитирования: Skandarajah A, Sunny SP, Gurpur P, Reber CD, D’Ambrosio MV, Raghavan N, et al. (2017) Мобильная микроскопия как инструмент скрининга рака полости рта в Индии: пилотное исследование. PLoS ONE 12 (11): e0188440. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0188440

    Редактор: Уилбур Лам, Университет Эмори / Технологический институт Джорджии, СОЕДИНЕННЫЕ ШТАТЫ

    Поступила: 9 марта 2017 г . ; Принята к печати: 7 ноября 2017 г .; Опубликован: 27 ноября 2017 г.

    Авторские права: © 2017 Skandarajah et al.Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

    Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в документе.

    Финансирование: Это исследование было частично профинансировано Siemens Healthcare и USAID за счет гранта Лаборатории влияния развития Калифорнийского университета в Беркли, входящей в сеть USAID по решениям для высшего образования.Сименс внес свой вклад в дизайн исследования, анализ данных, подготовку рукописи и публикацию рукописей.

    Конкурирующие интересы: Компания «Сименс» предоставила частичное финансирование и активно участвовала в этом исследовании. Некоторые сотрудники Siemens также являются владельцами акций Siemens. Доктор Флетчер является соучредителем CellScope Inc., компании, занимающейся продажей микроскопов для мобильных телефонов. CellScope Inc. не принимала участия в исследовании, описанном в рукописи. Такое раскрытие информации не влияет на соблюдение авторами всех политик PLOS One в отношении обмена данными и материалами.

    Введение

    Рак полости рта, обусловленный сочетанием поведенческих и инфраструктурных факторов, является наиболее распространенным типом рака среди мужчин в Индии и других странах Южной Азии [1, 2]. Привычки, связанные с курением и алкоголем, предрасполагают людей к развитию как предраковых поражений, так и рака полости рта [3], и считается, что более высокая доля мужчин с такими привычками вносит свой вклад в гендерные различия в заболеваемости раком полости рта [2]. Кроме того, данные исследований методом случай-контроль и метааналитических исследований показали, что ВПЧ также является независимым фактором риска развития карциномы ротоглотки и полости рта [4, 5]. Стадия заболевания при обращении является решающим прогностическим фактором плоскоклеточного рака полости рта [6, 7]. В то время как 5-летняя выживаемость рака полости рта, диагностированного на стадии I и II, составляет более 80%, на стадии III или IV она составляет менее 40% [6], что подчеркивает необходимость более ранней диагностики поражений.

    Окончательный диагноз рака полости рта достигается путем выполнения биопсии с последующим гистологическим исследованием подозрительных поражений [8–10]. Этот метод включает исследование полости рта и использование скальпеля или пункционной биопсии, а также гистопатологическую обработку с последующей интерпретацией специалиста.Сбор образцов является инвазивным и болезненным, однако неправильное обращение с образцом и его передача в гистологическое учреждение может помешать его использованию для постановки диагноза [11]. В результате биопсия обычно выполняется в условиях больницы или под руководством опытного клинициста. Первое контактное лицо для большинства пациентов, обращающихся за помощью, особенно в сельской местности, — это не централизованное учреждение, которое может предоставить такие виды услуг. Визуальный осмотр на предмет подозрительных поражений — стандартный подход к скринингу для направления пациентов из учреждения первичной медико-санитарной помощи в централизованное место для биопсии и лечения [7, 12, 13], но его специфичность для предраковых поражений невысока.Это, в свою очередь, снижает вероятность того, что поставщик медицинских услуг направит пациента для дальнейшего ухода, и снижает приверженность пациента к болезненной вторичной процедуре. Во многих странах Южной Азии это дополнительно усугубляется употреблением табака и бетеля, что приводит к большому количеству неспецифических поражений у пациентов, прошедших скрининг. Этот сценарий значительно выиграет от более чувствительного и конкретного инструмента скрининга, который подходит для инфраструктуры и персонала периферийных клиник [7].

    Многие технологии были разработаны за последние несколько десятилетий в попытке улучшить обследование полости рта при скрининге или потенциальной диагностике предрака или рака полости рта [7, 14, 15]. Некоторые из них помогают визуально осмотреть ротовую полость, эффективно увеличивая контраст между диспластической или злокачественной тканью и нормальной тканью. К ним относятся окрашивание толуидиновым синим [16] для обнаружения повышенного содержания ядер в злокачественных поражениях и использование уксусной кислоты с синим светом для получения хемилюминесценции, которая потенциально может улучшить визуализацию поражений полости рта [17].Хотя это потенциально простые способы улучшить стандартный визуальный скрининг, исследования сообщают о низкой специфичности этих методов и, кроме того, они не подтверждены данными биопсии золотого стандарта [7]. Другие потенциальные методы включают автофлуоресцентную визуализацию метаболических промежуточных продуктов, которые указывают на фенотипы рака, отражение и рассеяние в широком спектре, которые могут исследовать архитектуру [18], и оптическую когерентную томографию (ОКТ) [19]. Эти многообещающие методы получили ограниченное признание и требуют специальных инструментов, которые часто недоступны на месте оказания медицинской помощи.

    Инструмент скрининга, который был успешно оценен в различных медицинских учреждениях, — это кистевая биопсия [20, 21], которая включает минимально инвазивный забор образцов подозрительной области кистью с последующей подготовкой слайдов и интерпретацией патологоанатома с помощью просвечивающего светового микроскопа. Цитологическая информация, собранная из этих образцов, может указывать на клеточные изменения, включая соотношение ядра и цитоплазмы и структуру ядра. Этот метод может быть полезным подспорьем для дифференциации доброкачественных новообразований от потенциально злокачественных новообразований, позволяя медицинскому работнику первого уровня более эффективно направлять его в центральное учреждение для окончательной диагностики.Однако этот метод не был доступен в периферийных клиниках из-за проблем, связанных с необходимостью микроскопов и обученного персонала для интерпретации изображений.

    Распространение мобильных устройств и поддерживающих сетей передачи данных может обойти необходимость создания традиционной инфраструктуры на периферийных территориях, где оказывается медицинская помощь. Эти потребительские электронные устройства обеспечивают интуитивно понятный пользовательский интерфейс, значительную вычислительную мощность и высококачественную оптику для визуализации в недорогом корпусе, а возможность передачи данных может принести опыт в удаленные места с ограниченными накладными расходами.Был разработан ряд устройств, которые ускоряют традиционную диагностику или позволяют проводить новые анализы с использованием мобильных телефонов в их основе [22–25]. Доступность мобильных телефонов, техническая грамотность и удаленная передача данных позволили использовать новые методы воздействия на изменения в системе здравоохранения Индии [26, 27] и представляют собой мост к удаленной телемедицине. Недавно мы продемонстрировали возможность скрининга рака полости рта с помощью мобильного телефона стоматологами первичной медико-санитарной помощи [28].

    В этом исследовании мы оцениваем мобильный микроскоп с поддержкой 3G и Wi-Fi для скрининга рака полости рта.Мобильный микроскоп в этом исследовании использует планшет для получения увеличенных изображений и автоматического сканирования образцов пациентов (D’Ambrosio et al, рукопись в стадии подготовки). Это устройство, которое мы называем автоматизированным CellScope, избавляет техников от необходимости фокусировать и сканировать образец, а также субъективно выбирать подозрительные поля зрения, автоматически собирая серию изображений для загрузки и просмотра. Автоматизированный CellScope основан на наших предыдущих микроскопах для мобильных телефонов CellScope [25] и, в сочетании с биопсией кистью и упрощенным окрашиванием, был оценен в Медицинском фонде Мазумдара Шоу в Бангалоре, Индия, как часть системы телемедицинского скрининга (рис. 1).Здесь мы представляем результаты, которые подтверждают возможности визуализации устройства на месте в Индии и демонстрируют соответствие телепатологического обзора изображений кистевой биопсии с традиционной цитологией и гистологией.

    Рис. 1. Обзор автоматизированного устройства CellScope и системы мобильного досмотра.

    (A) Автоматическая система получения изображений, способная выполнять автофокусировку и сканирование предметного стекла. (B) Типичное изображение клеток, окрашенных H&E, полученное с помощью объектива 20X / 0,4NA на автоматическом сканирующем CellScope.Масштабная линейка представляет 100 мкм. (C) Схема, чтобы объяснить общий рабочий процесс процесса телемикроскопии.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0188440.g001

    Материалы и методы

    Планшетный микроскоп для удаленной диагностики

    Автоматизированное устройство CellScope использует iPad Mini для автоматического сбора серии изображений образцов пациентов (D’Ambrosio et al, рукопись находится в стадии подготовки). Вкратце, пользовательское приложение iOS, написанное для iPad Mini 2 (Apple, Купертино, Калифорния), обменивается данными с микроконтроллером Arduino (Arduino Mega, Sparkfun, Boulder, CO) через Bluetooth, что позволяет управлять областью визуализации в реальном времени с помощью жестов ( Рис. 1A и 1B).Приложение также запускает автоматическое сканирование растрового изображения области подготовленного слайда с автоматической перефокусировкой на образец во время сканирования. Общий рабочий процесс процесса телемикроскопии поясняется схемой, показанной на рис. 1C.

    Основными аппаратными компонентами устройства CellScope были следующие:

    • iPad mini 2 с памятью 16 ГБ, iOS 9.2 с Wi-Fi и подключением к сети 3G
    • Линза объектива (20x, Edmund Optics, США) расположена так, что проходящий через нее свет направляется на камеру iPad
    • Белый светодиод для освещения (Rebel White LED, потребляемый ток 700 мА, LuxeonStar, США)
    • Управляемый Bluetooth / Arduino, автоматизированный, а также ручной механизм перемещения предметного столика микроскопа на основе жестов
    • Аккумулятор для питания

    Сбор и подготовка проб

    Щеточная биопсия.

    Щеточная биопсия выполнялась с использованием Cytobrush Plus GT (Medesign I.C. GmbH, Германия). Подготовка образцов биопсии с помощью жидкой цитологии проводилась в соответствии со следующим протоколом. Образцы кистевой биопсии были погружены в 1,0 мл консерванта клеток SurePath (GYN-0001-V, BD SurePath, BD Biosciences, Калифорния, США), и клетки были освобождены от кисти растиранием кисти в жидкости. Суспензию клеток центрифугировали в миниатюрной центрифуге (MiniSpin, Eppendorf, Гамбург, Германия) и супернатант удаляли, оставляя примерно 50 мкл объема.Клетки повторно суспендировали, помещали на предметное стекло, а затем распределяли, используя плоский край другого предметного стекла. Образец был грубо ограничен центральной областью слайда, чтобы улучшить плотность клеток и максимизировать количество клеток, отображаемых во время автоматического сканирования части области слайда. После сушки клетки фиксировали и окрашивали, как подробно описано ниже. После покрытия образца покровным стеклом подготовленное предметное стекло загружали в автоматизированный мобильный микроскоп с помощью сенсорного интерфейса, предоставляемого мобильным приложением, работающим на iPad, для получения изображений.После того, как изображения были собраны, они были переданы с устройства CellScope на веб-сервер, где патологоанатомы провели слепой просмотр полученных изображений. Два патолога независимо друг от друга просмотрели цифровые изображения, слайды цитологии и гистологии, чтобы поставить свой диагноз.

    Нетоксичное окрашивание H&E.

    Мы разработали нетоксичный и экологически безопасный метод окрашивания, который вкратце заключается в следующем. Был приготовлен основной раствор гематоксилина (1 г гематоксилина в 1 л воды, 0.2 г йодата натрия, 50 г додекагидрата сульфата алюминия-калия). Рабочий раствор получали добавлением 0,1 г лимонной кислоты к 100 мл исходного раствора. Раствор эозина получали растворением следующих компонентов в 100 мл дистиллированной воды: 0,3% (г / об) эозина G, 13% (об / об) глицерина, 0,1% (г / об) Na 2 SO 4 . После фиксации клеток на предметном стекле с использованием 95% этанола проводили окрашивание, погружая предметное стекло в гематоксилин и эозин каждый на 1 минуту, с промывкой после каждого окрашивания в водопроводной воде.

    Мобильное приложение и сбор данных

    Для iPad было разработано приложение, которое позволило вводить данные пациента, включая идентификатор случая, возраст, пол и место поражения (рис. 2).Приложение также позволило управлять движением сцены с помощью Bluetooth, захватывать изображения со слайдов, просматривать захваченные изображения, сохранять данные в iPad и передавать данные / связь с веб-сервером. Приложение предоставило пользователю возможность либо автофокусировки, либо ручной настройки курса и точной фокусировки для получения изображения.

    Рис. 2. Скриншоты пользовательского интерфейса мобильного приложения iPad.

    (A) Страница входа в приложение для iPad, показывающая защищенную паролем безопасную систему для технического специалиста.(B) Еще один снимок экрана в приложении для iPad, на котором показаны варианты ввода даты рождения пациента, идентификатора образца, пола и дополнительных комментариев.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0188440.g002

    Мобильное приложение было запрограммировано так, чтобы устройство автоматически захватило 125 изображений из разных областей слайда по растровому шаблону сканирования. Изображения, которые воспринимались как размытые или которые содержали плотность клеток менее примерно 30% (где плотность клеток приблизительно рассчитывалась как доля от общего поля зрения, которое было покрыто клеточным материалом), считались неадекватными и отбрасывались (поскольку описанный в предыдущем исследовании [29]).Кроме того, изображения, которые содержали наложение / скопление клеток, были отброшены техником, чтобы избежать потенциальных проблем с диагностической интерпретацией. Предпочтительно использовали изображения с плотностью клеток> 50%. В некоторых случаях, когда клетки считались разреженными (плотность клеток <50%), технический специалист делал изображения вручную с помощью приложения, панорамируя слайд с помощью сенсорного интерфейса и выбирая поля обзора с более высокой плотностью ячеек. Консенсус 60–100 изображений с высокой плотностью клеток был достигнут для диагноза после первоначального обсуждения с двумя патологами после оценки изображений первых пяти субъектов (не включенных в эту рукопись). Точное количество изображений для каждого слайда было продиктовано техническим специалистом, но не выходило за рамки согласованного диапазона. После получения техник загрузил изображения на веб-сервер в большом количестве с помощью мобильного приложения. Хотя мобильное приложение не использовалось в данном исследовании, оно также может быть использовано для быстрой проверки состояния образцов, отправленных на веб-сервер, в режиме реального времени (т. Е. Результатов состояния с цветовой кодировкой, описанных в разделе «Веб-сервер» ниже). Эта функция может быть очень полезна в будущих сценариях развертывания системы CellScope (например,грамм. в помощь удаленным полевым техникам, работающим над приложениями в области здравоохранения в сельской местности).

    Веб-сервер

    Веб-сервер был разработан для хранения изображений, загруженных устройством CellScope, и обеспечения удаленного просмотра этих изображений и связанных с ними данных патологоанатомами (рис. 3). Сервер позволил нескольким пользователям получить к нему безопасный доступ, каждый из которых использовал свой логин и пароль. На сервере использовалась система очередей с цветовой кодировкой статуса дела (рис. 3A). Очередь (список образцов в строках) представляет порядок, в котором образцы пациентов были загружены на сервер.Статус проверки образца патологоанатомами автоматически передавался (т.е. передавались данные обновления статуса) с веб-сервера в мобильное приложение в режиме реального времени по мере внесения изменений на сервере. Во время наблюдения за изображениями патолог может выбрать и аннотировать любую клетку или группу клеток, просто перетащив курсор мыши по интересующей области, в результате чего на микроскопическом изображении в этой позиции наложится прямоугольник (рис. 3B). Всплывающее меню морфологических признаков позволило легко выбрать все соответствующие особенности в выбранной области интереса (рис. 3C).Возможен выбор нескольких клеток и аннотации для каждого образца пациента. Также были доступны дополнительные функции, такие как увеличение / уменьшение изображения. Патологоанатомы вписали свой диагноз для каждого случая в отведенное место. Аннотации или мнения патологов не были видны друг другу.

    Рис. 3. Скриншоты пользовательского интерфейса сервера CellScope.

    (A) Снимок экрана сервера CellScope (интерфейс веб-портала), показывающий список пациентов, диагностика которых была проведена.Цветовое кодирование записей использовалось для обозначения статуса образцов (т.е. предоставлен результат диагностики, ожидает рассмотрения, образец отклонен и т. Д.) (B) Снимок экрана интерфейса сервера, показывающий изображения CellScope, полученные из образца пациента. Обратите внимание на панель эскизов слева, на которой показаны эскизы всех изображений, снятых для этого образца пациента, и увеличенное изображение выбранного изображения в центре / справа. Выбранные области интереса (обозначенные голубыми прямоугольниками, которые могут быть нарисованы патологами с помощью инструментов, предусмотренных в интерфейсе) накладываются на изображение.(C) Снимок экрана интерфейса сервера, показывающий всплывающее окно, содержащее различные клеточные функции, которые могут использоваться патологом для аннотирования выбранной интересующей области. Свободное текстовое поле в этом окне позволяет патологоанатомам при необходимости вводить дополнительные комментарии.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0188440.g003

    Определение параметров изображения для цитологии

    Разрешение изображения и поле зрения можно изменять, используя ряд объективов с мобильными микроскопами, как было показано ранее [25].Соответствующее увеличение и поле зрения для скрининга рака полости рта были выбраны техническими специалистами и патологами, участвовавшими в этом исследовании, путем качественной оценки образцов, отображаемых с помощью прибора. Объектив 20X / 0,4NA (Edmund Optics, США) был выбран для максимального увеличения поля зрения, обеспечивая при этом достаточное увеличение / разрешение для захвата важных функций для диагностики.

    Исследуемая популяция

    Исследование проводилось среди пациентов, посещающих стоматологические амбулаторные отделения Медицинского центра Мазумдар-Шоу (MSMC), Бангалор, и его совместного партнера, Стоматологического колледжа Общества KLE (KLESDC), Бангалор. Утверждения IRB для представленных исследований были получены от соответствующих учреждений (Комитет по медицинской этике здравоохранения Нараяны [NHH / MEC-CL-2014/222] и Сообщение о решении институционального комитета по этике, 20.11.2014). Форма согласия пациента была подготовлена ​​на четырех языках (английский, каннада, хинди и тамильский). Протокол, достоинства и конфиденциальность исследования были объяснены всем испытуемым на их родном языке. Форма согласия была предоставлена ​​пациенту на соответствующем языке и была подписана им, их врачом и исследователем.Каждому пациенту была предоставлена ​​одна копия формы согласия, а одна копия хранилась в библиотеке MSMC в Бангалоре. По этическим соображениям в отношении удаления ткани с помощью пункционной биопсии у бессимптомных лиц в исследование были включены только пациенты с подозрительными поражениями слизистой оболочки полости рта. Пациенты с поражениями, которые клинически напоминали очевидные буллезные поражения или красный плоский лишай, были исключены из выборки. Данные пациентов, у которых позже было обнаружено поражение с неплоскоклеточной патологией (саркома, липома, опухоль слюнной железы, опухоль кости или лимфома), также были исключены из исследования.

    Дизайн исследования

    Исследование было разработано для определения специфичности и чувствительности жидкого цитологического препарата образцов, полученных при кистевой биопсии, в сочетании с автоматическим получением изображений. Рабочий процесс образца и пациента показан на рис. 4.

    Сначала пациентов обследовал хирург-стоматолог. Те субъекты, у которых были выявлены клинически подозрительные поражения, были опрошены с помощью жидкостной цитологии и передачи данных с использованием автоматизированного мобильного микроскопа.Пациентам также была сделана биопсия скальпелем. Гистологическая обработка и исследование проводились в МСМФ по стандартным методикам. Подготовка образцов кистевой биопсии и окрашивание с помощью жидкостной цитологии выполняли, как описано выше.

    Определение положительного и отрицательного диагноза в цитологии

    В этом исследовании пациент был обозначен как «наиболее вероятно положительный», если клетки, полученные от пациента, демонстрировали классические черты атипичных клеток, включая полинуклеацию, митотические фигуры, анизохроматизм, анизокариоз, большие ядрышки, уменьшенное количество цитоплазмы, высокое соотношение ядра к цитоплазме. , ядерная гипертрофия, гиперхроматизм или неровности ядерной мембраны.Если в клетках не обнаруживались такие особенности, пациент определялся как «скорее всего отрицательный». Если слайды не могли быть интерпретированы из-за ошибок окрашивания, скопления клеток или плохого качества изображения, они были помечены как «не интерпретируемые». Если позже гистологическое исследование диагностировало поражение как неплоскоклеточное новообразование, пациент считался отрицательным, поскольку плоскоклеточная карцинома была в центре внимания скрининга.

    Оценка образцов патологоанатомами

    В этом испытании концепции с помощью платформы телемикроскопии CellScope мы использовали двух экспертов для сравнения диагнозов. Чтобы обеспечить надежный анализ, были предприняты следующие шаги. Два патолога независимо друг от друга просмотрели образцы (как с помощью обычного микроскопа, так и с помощью цифровых изображений, полученных с помощью CellScope), чтобы решить проблему «вариабельности между наблюдателями». Патологоанатомы вошли в веб-систему, в которой хранились изображения CellScope, и получили доступ к изображениям. После просмотра изображений патологоанатомы записали свои диагнозы. Затем окрашенные слайды оценивали с помощью обычной микроскопии аналогичным слепым способом.

    Конфиденциальность и безопасность данных пациента

    Было реализовано несколько процессов для обеспечения конфиденциальности пациентов и безопасности данных. Это включало сбор и обработку физических образцов пациентов, цифровую передачу, а также хранение и анализ изображений CellScope и связанной с ними информации о пациентах.

    Процесс, используемый для кодирования / декодирования всей связанной информации о пациенте, физических образцов и изображений CellScope для защиты конфиденциальности пациента (а также для слепых результатов диагностики между патологами), показан на рис. Клиницисты собрали образцы у пациентов и присвоили каждому образцу институциональный идентификатор и уникальный идентификатор исследования, которые были записаны в Форме отчета о болезни (CRF). Образцы и связанные CRF были предоставлены координатору исследования, который, в свою очередь, сгенерировал новый (закодированный) идентификатор для каждого образца. Эти идентификаторы и связанная с ними информация о пациентах хранились в защищенной паролем таблице Microsoft Excel. Образцы были помечены этими идентификаторами и предоставлены лаборанту вместе с конкретным буквенно-цифровым кодом для обозначения типа образца (цитология, гистология, изображение CellScope).Некоторая основная информация, связанная с каждым образцом, также была предоставлена ​​лаборанту (например, дата рождения пациента, пол, идентификатор образца / буквенно-цифровой код и местоположение в полости рта, где образец был взят). Лаборант подготовил слайды, ввел основные данные пациента в устройство CellScope и загрузил связанные изображения и данные на веб-сервер CellScope. Патологи имели ограниченный доступ к веб-серверу только для анализа образцов изображений и ввода результатов диагностики вслепую.После того, как патологи составили диагностический отчет, координатор исследования получил доступ к данным на веб-сервере и расшифровал / снял слепые данные, сопоставив слайды, клинические данные и результаты. Все эти данные (без идентификации информации о пациенте) затем были предоставлены статистику для статистического анализа.

    В отношении безопасности устройства CellScope и связанной с ним передачи данных были выполнены следующие шаги. IPad, используемый в устройстве CellScope для хранения и передачи данных, был защищен 5-значным паролем.Его использование в этом исследовании было ограничено, и он находился в физической безопасности в MSMF. Доступ к приложению CellScope, запущенному на iPad (используемому для управления оборудованием устройства CellScope и передачи изображений), также контролировался логином / паролем. Данные из приложения CellScope на iPad отправлялись по беспроводной сети (через Wi-Fi) на локальный маршрутизатор в MSMF, а оттуда на веб-сервер CellScope, который размещался в облаке Amazon (с использованием Amazon Web Services, AWS). Маршрутизатор находился за институциональным брандмауэром (недоступным из внешнего Интернета), защищенным логином и паролем и сохраненным физически.Беспроводная передача данных с iPad на маршрутизатор была защищена с использованием протокола аутентификации WPA2 и стандартов шифрования AES 256 бит [30]. Вся передача данных между iPad, маршрутизатором и облаком AWS была защищена с помощью HTTPS (протокол передачи гипертекста в соединении, зашифрованном с помощью Transport Layer Security), который обеспечивает аутентификацию веб-сайтов и двунаправленное шифрование [31]. Amazon обеспечивает несколько уровней безопасности (как физической, так и ориентированной на данные) для программного обеспечения и данных, которые размещаются на их платформе облачных сервисов AWS (см. Https: // aws.amazon.com/ для получения дополнительной информации). Доступ к веб-серверу CellScope, размещенному на AWS, контролировался системой входа и пароля, и были доступны журналы доступа пользователей к серверу. Общий процесс передачи данных, использованный в этом исследовании, показан на рис. 6.

    Результаты

    Демографические данные пациента

    Пациенты, набранные для исследования, были в основном из южных штатов Индии, включая Карнатаку, Тамил Наду, Андхра-Прадеш и Кералу. В пилотном исследовании в соответствии с рабочим процессом, показанным на рис. 4, были оценены в общей сложности 32 пациента.

    Описание основных клинических параметров исследования представлено в таблицах 1 и 2. Восемь из 32 пациентов (25%) были женщинами. Возраст пациентов колебался от 23 до 72 лет (средний возраст 50,6, стандартное отклонение 13). Двадцать пять пациентов (78%) сообщили по крайней мере об одном из следующих видов поведения: употребление алкоголя, жевание табака, курение. Образцы были собраны у каждого пациента и подготовлены, как описано выше. Все изображения были получены автоматически с помощью устройства CellScope или вручную техническими специалистами.

    Статистический анализ

    Для статистического анализа была рассчитана эффективность системы (чувствительность, специфичность и согласие отдельных патологов). Специфичность и чувствительность CellScope (автоматизированная мобильная микроскопия) и цитология были рассчитаны с учетом цитологии и гистологии как золотого стандарта. Все статистические анализы проводились с использованием онлайн-калькулятора (http: // graph pad.com). Согласие между CellScope и цитологическим диагнозом было проверено с использованием статистики Каппа (как описано в разделе «Результаты»).

    Демонстрация захвата изображения автоматическим передвижным микроскопом

    Автоматическая фокусировка происходит путем получения нескольких изображений в различных положениях по оси Z (фокальной плоскости) и определения, какое изображение имеет самый высокий контраст, измеренный с помощью преобразования Лапласа изображения. Успешный процесс автоматической фокусировки и сбора данных продемонстрирован для пациентов с нормальным эпителием и пациентов с инвазивным раком (рис. 7A, 7A ’, 7B и 7B’). У пациентов с лейкоплакией, характеризующейся уплотнением эпителиальной поверхности, кистевая биопсия не позволяет получить достаточное количество клеток, что приводит к их недостаточному количеству на предметном стекле. В таких случаях технический специалист вручную выбирает случайные поля, в которых есть хотя бы несколько ячеек, и захватывает изображения (рис. 7C и 7C ’).

    Рис. 7. Автоматический передвижной микроскоп может делать изображения, представляющие соответствующие особенности заболевания.

    (A) Морфологически нормальные клетки из препарата для кистевой биопсии. (A ’) Увеличение клеток в A, показывающее нормальную морфологию. (B) Аномальные клетки пациента с подтвержденным злокачественным новообразованием, включая клетки с высоким соотношением ядра к цитоплазме и гиперхроматическим ядром, указанным красными стрелками.(B ’) Увеличенное изображение подозрительных клеток в B, показывающих морфологические изменения. (C) Подозрительные клетки, полученные от пациента с подтвержденной лейкоплакией. Красная стрелка указывает на высокое соотношение ядра: цитоплазмы, что указывает на подозрительную клетку. Обратите внимание на нехватку ячеек, что затрудняет работу с алгоритмом автофокусировки для этой пробоподготовки. (C ’) Увеличение подозрительной клетки в C, показывающее высокое соотношение ядра и цитоплазмы. Все масштабные линейки представляют 100 мкм.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0188440.g007

    Беспроводная передача данных

    В то время как iPad mini имел возможность телекоммуникационного подключения через SIM-карту 3G (которая могла использоваться для удаленного развертывания устройства CellScope), передача по Wi-Fi использовалась в клинической лаборатории из-за простоты использования и использования преимуществ более высоких скоростей передачи. в процессе проверки принципа действия. Время, необходимое для загрузки каждого изображения с помощью Wi-Fi больницы, варьировалось в зависимости от времени дня, когда это было выполнено.Это было самым медленным, когда большое количество пользователей использовало Интернет, и самым быстрым до / после рабочего времени. Продолжительность времени варьировалась от 6 до 12 секунд на изображение. Размер каждого изображения составлял примерно 1,5 МБ.

    пациентов, включенных в исследование

    В таблице 2 показаны возраст, пол, клинический диагноз, место взятия пробы и диагнозы, полученные с помощью традиционной гистопатологии и цитологии. Он также показывает диагностическую интерпретацию связанных изображений CellScope, предоставленных двумя патологами.Что касается результатов гистопатологии, следует отметить, что образцы были зарегистрированы как «положительные», если наблюдалась карцинома или дисплазия.

    Соглашение между патологоанатомами

    В исследовании участвовали два патолога, каждый из которых независимо оценивал цитологические слайды с помощью обычной микроскопии, гистопатологические слайды с помощью обычной микроскопии и изображения CellScope с помощью входа на удаленный сервер. Принятие решения о положительном / отрицательном диагнозе обоими патологами было основано на ряде цитологических критериев.В случаях, когда диагностические мнения патологов расходились, консенсус достигался путем совместного рассмотрения каждого из этих критериев. Среди всех случаев несоответствие наблюдалось в 5 случаях, и по всем из них был достигнут консенсус после второго обзора. Этот консенсусный диагноз (таблица 2) для цитологии или гистопатологии затем использовался для сравнения с диагнозом, поставленным с использованием автоматических изображений CellScope.

    Прежде чем рассматривать их диагноз на основе оценки автоматических изображений CellScope, согласие между двумя патологами было рассчитано с использованием показателя надежности между экспертами, статистики κ (Каппа).Статистика κ рассчитывалась по формуле [32]: где Pr (a) представляет собой фактически наблюдаемое согласие, а Pr (e) представляет собой случайное согласие. Pr (a) и Pr (e) рассчитывались с помощью онлайн-калькулятора, доступного по адресу: http://graphpad.com/quickcalcs/kappa1/. Как показано в Таблице 3, значение κ составляло 0,695 для диагностики, основанной на автоматических изображениях CellScope, что указывает на «существенное» согласие между патологами.

    Соответствие удаленного диагноза по изображениям, полученным с помощью автоматической мобильной микроскопии, с традиционными цитологическими и гистологическими исследованиями

    Чувствительность и специфичность автоматизированного CellScope, использующего цитологию или гистологию в качестве золотого стандарта, показаны в таблицах 4 и 5. Эти значения также представлены для стандартной цитологии по сравнению с гистологией (Таблица 6).

    Обсуждение

    Рак полости рта представляет собой серьезную проблему для общественного здравоохранения в Индии и других странах с тяжелым бременем болезни. Поведенческие факторы, которые предрасполагают людей к развитию рака полости рта и ограниченный доступ к онкологической помощи, вызывают серьезную озабоченность. Оба эти фактора увеличивают количество случаев рака и вызывают задержки в диагностике, что, в свою очередь, приводит к плохому прогнозу. Инструменты, помогающие при традиционном визуальном осмотре, отчаянно необходимы в учреждениях первичной медико-санитарной помощи, где большинство пациентов обращаются с поражениями.В то время как методы, включая кистевую биопсию, были протестированы в хорошо оборудованных лабораториях, применение аналогичной стратегии в условиях ограниченных ресурсов требует новых инструментов и информационной инфраструктуры для диагностики.

    В этой работе мы адаптировали устройство на основе мобильной бытовой электроники с преимуществами масштаба и возможности подключения, чтобы облегчить визуализацию и передачу упрощенной, минимально инвазивной кистевой биопсии. Система загрузки и представления данных была разработана и развернута в клинических условиях для обеспечения возможности просмотра и аннотирования изображений.Мы оценили стратегию, которая предъявляла различные требования к пользователю инструмента и к самому инструменту, используя техника с автоматизированным сканирующим мобильным микроскопом с минимальной потребностью во вмешательстве пользователя.

    Необработанные цифровые цветные (красный-зеленый-синий, RGB) микроскопические изображения, использованные в этом исследовании, были достаточными для оценки морфологических характеристик собранных образцов клеток полости рта. Во многих других аналогичных исследованиях, проведенных при диагностике рака шейки матки и рака груди с использованием платформы телецитологии, для оценки морфологических характеристик использовались необработанные изображения RGB [33–36]. Чтение и интерпретация цифровых изображений, полученных с помощью CellScope, заменили оценку прямым просмотром слайдов с помощью обычного микроскопа. Следовательно, нормализация интенсивности окрашивания не требовалась, поскольку изображения CellScope дублировали фактические изображения. В обоих случаях диагноз определялся в основном по морфологическим характеристикам.

    Анализ результатов показывает, что согласие между патологами при постановке диагноза с использованием автоматизированных изображений CellScope было «существенным», как классифицируется статистическим значением κ, равным 0.695 [32]. Это указывает на то, что изображения CellScope предоставили патологам достаточную диагностическую информацию о качестве, чтобы сформировать свое мнение, так что согласие между ними не было просто случайным.

    Хотя в этом исследовании использовались наблюдения только двух патологов, мы полагаем, что на основании плана обзора выборки этого было достаточно для обеспечения надежного анализа образцов. В другом аналогичном исследовании рака груди, основанном на телецитологии, для интерпретации были использованы мнения только двух цитопатологов с совпадением 66.7% -90% [33]. В этом исследовании было обнаружено, что цифровые изображения являются отличной заменой стеклянным предметным стеклам, причем изображения интерпретируются дистанционно и демонстрируют отличные клеточные детали для цитологической диагностики. В нашем исследовании 84,4% (27/32) между патологами совпадают в результатах диагностики с помощью системы CellScope.

    Специфичность диагноза, достигнутого с использованием автоматизированных изображений CellScope, по сравнению с гистологией как золотым стандартом составила 100%. Это также имело место, когда диагноз был поставлен с использованием автоматизированных изображений CellScope по сравнению с традиционной цитологией в качестве золотого стандарта (100%).Это высокое значение специфичности было обнаружено независимо от того, какой патолог ставил диагноз. Поскольку высокая специфичность указывает на низкий уровень ложных срабатываний, это указывает на то, что в качестве инструмента скрининга в условиях ограниченных ресурсов автоматизированный CellScope будет полезен для сокращения затрат и потенциально быстрого направления подозрительных поражений и сокращения задержек в диагностике.

    Чувствительность диагноза, достигаемого с использованием изображений CellScope, по сравнению с традиционной цитологией в качестве золотого стандарта варьировалась от 67% до 90% (между двумя патологами).Когда диагноз проводился с использованием изображений CellScope по сравнению с гистологией в качестве золотого стандарта, чувствительность варьировалась от 47% до 63%. Интересно, что из Таблицы 2 очевидно, что снижение чувствительности происходит из-за случаев лейкоплакии, когда трудно получить какие-либо клетки с помощью щеточной биопсии, поскольку это состояние вызывает уплотнение поверхностных слоев слизистой оболочки щеки. Недостаток клеток затрудняет постановку правильного диагноза в цитологии. Другой интересный факт заключается в том, что чувствительность диагноза, поставленного с использованием традиционной цитологии, по сравнению с гистологией как золотым стандартом, составляет 70%, что аналогично чувствительности при использовании автоматического CellScope по сравнению с гистологией как золотым стандартом. Это указывает на то, что качество изображений, подготовка образцов и случайный выбор изображений из автоматического CellScope находятся на одном уровне с традиционной цитологией.

    Для скрининга на рак рекомендуется протокол теста с высокой чувствительностью. В сценарии скрининга, если патолог диагностирует случай как атипию, субъекта обычно направляют в региональный онкологический центр для дальнейшего диагностического подтверждения. В этом экспериментальном исследовании скрининг был основан на цитологии, и, соответственно, общее соответствие между автоматической мобильной микроскопией и цитологией было высоким (90%), когда все пациенты оценивались вместе.Когда когорты пациентов с раком полости рта и дисплазией были проанализированы независимо, чувствительность увеличилась до 94% (17/18) при сравнении CellScope с цитологией. По сравнению с диагностикой рака полости рта, дисплазия была обнаружена с чувствительностью только 67%, когда цитология была золотым стандартом. Эти анализы дали результат, что чувствительность была высокой для выявления рака полости рта, но низкой для дисплазии. Низкая чувствительность при обнаружении дисплазии снизила общую чувствительность / специфичность исследования.Эта огромная разница между диагностикой рака и дисплазии может быть объяснена неэффективностью цитологии для диагностики атипии. Цитология может выявить 95% случаев рака полости рта, но только 27% случаев дисплазии, что позволяет сделать вывод о том, что цитология как метод имеет более низкую чувствительность при диагностике дисплазии. Кроме того, в диагностике, основанной на телемикроскопии, наблюдалась высокая согласованность между патологами (84,4%), что свидетельствует об эффективности системы CellScope как диагностического инструмента на основе телемикроскопии.

    Рабочие характеристики устройства CellScope могут быть улучшены за счет дальнейших технических разработок. Например, поскольку автоматизированному сбору изображений предшествуют жидкостная цитология и ресуспендирование, оставшийся объем и размер мазка можно регулировать в зависимости от размера осадка центрифугированных клеток для поддержания постоянной плотности клеток на слайде. В качестве альтернативы, простой порог, рассчитанный для содержимого в поле зрения (т. Е. Исключая поля, содержащие слишком мало ячеек), может исключить поля, слишком далекие от оптимальной плотности ячеек.

    Другие проблемы с производительностью автоматизированного CellScope связаны с техникой подготовки образцов для биопсии. В то время как некоторые работы показали, что диагноз кистевой биопсии имеет чувствительность выше 90% [21, 29], результаты, полученные в этом исследовании с традиционной кистевой биопсией, больше похожи на другие работы [37], которые сообщают о чувствительности около 70%. . Причина этого падения чувствительности становится очевидной при более внимательном рассмотрении результатов: в случаях гиперкератотических поражений, таких как лейкоплакия, когда наблюдается затвердение поверхностных слоев слизистой оболочки, щетка не может собирать злокачественные клетки, расположенные в более глубоких слоях. слои.Из-за этой неспособности собрать злокачественные клетки, диагностика с помощью цитологии страдает, и, следовательно, чувствительность в случаях таких поражений падает. Кроме того, отсутствие конкретных диагностических критериев, позволяющих отличить атипичные клетки от предраковых поражений, также способствует снижению чувствительности. Однако в случаях более запущенных поражений, когда злокачественные клетки расположены в верхних слоях слизистой оболочки, щетка легко собирает злокачественные клетки, что приводит к превосходной чувствительности. Эти факты указывают на ограничения щеточной биопсии и цитологического метода при скрининге рака полости рта.

    Поскольку зарегистрированная чувствительность и специфичность традиционно считываемой кистевой биопсии сравнимы с измерениями с помощью мобильных микроскопов на базе планшетов, мы пришли к выводу, что наш рабочий процесс визуализации не приводит к потере информации об изображении. Сообщалось, что изображения, полученные с помощью мобильных телефонов iPhone, не имеют потери разрешения [25, 38]. С продемонстрированными здесь характеристиками визуализации было бы полезно дополнительно протестировать систему с помощью методов подготовки образцов, которые обеспечивают более воспроизводимую информацию об образце или других связанных анализах.

    Выводы

    В заключение, это исследование демонстрирует потенциал мобильной микроскопической системы CellScope для раннего выявления и профилактики рака полости рта у сельского населения в рамках системы телемедицины с дистанционной оценкой изображений.

    Благодарности

    Мы хотели бы поблагодарить Тиягараджана Субрамани, Siemens Healthcare Pvt Ltd, Бангалор, Йоахима Бангерта, Siemens Healthcare GmbH, Германия и Раду Мирона Тоева, Siemens S.Р.Л., Румыния за техническую помощь.

    Ссылки

    1. 1. Дикшит Р., Гупта П.К., Рамасундарахеттиге С., Гаялакшми В., Александрович Л., Бадве Р. и др. Смертность от рака в Индии: национально репрезентативное обследование. Ланцет. 2012. 379 (9828): 1807–16. Epub 2012/03/31. pmid: 22460346.
    2. 2. Варнакуласурия С. Жизнь с раком полости рта: эпидемиология с особым упором на распространенность и изменения образа жизни, влияющие на выживаемость. Oral Oncol. 2010. 46 (6): 407–10. Epub 2010/04/21. pmid: 20403722.
    3. 3. Петти С. Факторы риска развития рака полости рта. Oral Oncol. 2009. 45 (4–5): 340–50. Epub 2008/08/05. pmid: 18674956.
    4. 4. D’Souza G, Kreimer AR, Viscidi R, Pawlita M, Fakhry C, Koch WM, et al. Исследование случай-контроль вируса папилломы человека и рака ротоглотки. N Engl J Med. 2007. 356 (19): 1944–56. Epub 2007/05/15. pmid: 17494927.
    5. 5. Миллер Д.Л., Пуричелли М.Д., Стек МС. Вирусология и молекулярный патогенез плоскоклеточного рака ротоглотки, ассоциированного с ВПЧ (вирусом папилломы человека).Биохим Дж. 2012; 443 (2): 339–53. Epub 2012/03/29. pmid: 22452816; Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC3571652.
    6. 6. Гомес И., Варнакуласурия С., Варела-Центеллес П.И., Лопес-Джорнет П., Суарес-Кункейро М., Диз-Диос П. и др. Возможна ли ранняя диагностика рака полости рта? Кто виноват в опоздании диагностики? Oral Dis. 2010. 16 (4): 333–42. Epub 2010/03/18. pmid: 20233328.
    7. 7. Линген М.В., Кальмар-младший, Каррисон Т., Спейт П.М. Критическая оценка диагностических средств для обнаружения рака полости рта.Oral Oncol. 2008. 44 (1): 10–22. Epub 2007/09/11. pmid: 17825602; PubMed Central PMCID: PMCPMC2424250.
    8. 8. Фариди М., Прасант М., Ашок П., Винит А., Сафия Т., Кишор П. и др. Биопсия полости рта в общей стоматологической практике: обзор. Int J Med Public Health. 2012; 2 (1): 3–6.
    9. 9. Кумарасвами К.Л., Видхья М., Рао П.К., Мукунда А. Биопсия полости рта: взгляд патолога полости рта. J Cancer Res Ther. 2012. 8 (2): 192–8. Epub 2012/07/31. pmid: 22842360.
    10. 10. Оливер Р.Дж., Слоан П., Пембертон Миннесота.Биопсия полости рта: методы и применение. Бр Дент Дж. 2004; 196 (6): 329–33; викторина 62. Epub 2004/03/27. pmid: 15044984.
    11. 11. Кумар К., Шетти Д., Дуа М. Артефакты биопсии и обработки тканей в тканях слизистой оболочки полости рта. Int J Head Neck Surg. 2012. 3 (2): 92–8.
    12. 12. Феделе С. Диагностические средства при скрининге рака полости рта. Голова Шея Онкол. 2009; 1: 5. Epub 2009/03/17. pmid: 19284694; Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC2654034.
    13. 13. Куджан О., Гленни А.М., Оливер Р.Дж., Таккер Н., Слоан П.Программы скрининга для раннего выявления и профилактики рака полости рта. Кокрановская база данных Syst Rev.2006; (3): CD004150. Epub 2006/07/21. pmid: 16856035.
    14. 14. Буко Дж., Суарес П. Выявление предрака полости рта и раннего рака в стоматологическом кабинете — обзор новых технологий. J Implant Adv Clin Dent. 2010. 2 (3): 47–63.
    15. 15. Гупта М., Гупта М., Аггарвал А., Ахуджа Р. Последние достижения в диагностике предраковых и злокачественных поражений полости рта: всесторонний обзор.Клиническое исследование рака, J. ​​2013; 2 (3): 181–4.
    16. 16. Машберг А. Переоценка применения толуидина синего в качестве диагностического дополнения при обнаружении бессимптомной плоскоклеточной карциномы полости рта: продолжающееся перспективное исследование рака полости рта III. Рак. 1980. 46 (4): 758–63. Epub 1980/08/15. pmid: 7397638.
    17. 17. Рам С, Сиар СН. Хемилюминесценция как средство диагностики рака полости рта и потенциально злокачественных эпителиальных поражений. Int J Oral Maxillofac Surg.2005. 34 (5): 521–7. Epub 2005/08/02. pmid: 16053872.
    18. 18. Пирс М.С., Шварц Р.А., Бхаттар В.С., Мондрик С., Уильямс М.Д., Ли Дж.Дж. и др. Точность мультимодальной оптической визуализации in vivo для обнаружения новообразований полости рта. Рак Prev Res (Phila). 2012; 5 (6): 801–9. Epub 2012/05/04. pmid: 22551901; Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC3560936.
    19. 19. Ли СК, Чи Т.Т., Ву К.Т., Цай М.Т., Чианг С.П., Ян СС. Диагностика предрака полости рта с помощью оптической когерентной томографии. Биомед Опт Экспресс.2012. 3 (7): 1632–46. Epub 2012/07/19. pmid: 22808434; Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC3395487.
    20. 20. Koch FP, Kunkel M, Biesterfeld S, Wagner W. Диагностическая эффективность дифференциации небольших раковых и предраковых поражений с использованием мазков кистей слизистой оболочки полости рта — проспективное и слепое исследование. Clin Oral Investig. 2011; 15 (5): 763–9. Epub 2010/07/02. pmid: 20593209.
    21. 21. Sciubba JJ. Улучшение выявления предраковых и раковых поражений полости рта.Компьютерный анализ щеточной биопсии полости рта. Совместная исследовательская группа OralCDx в США. J Am Dent Assoc. 1999. 130 (10): 1445–57. Epub 1999/11/26. pmid: 10570588.
    22. 22. Бреслауэр Д.Н., Маамари Р.Н., Свитц Н.А., Лам В.А., Флетчер Д.А. Клиническая микроскопия с помощью мобильного телефона для приложений глобального здравоохранения. PLoS One. 2009; 4 (7): e6320. Epub 2009/07/23. pmid: 19623251; Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC2709430.
    23. 23. Мартинес А.В., Филипс СТ, Каррильо Э., Томас СВ, 3-е место, Синди Х., Уайтсайдс ГМ.Простая телемедицина для развивающихся регионов: телефоны с камерой и микрожидкостные устройства на бумажной основе для диагностики в реальном времени вне офиса. Anal Chem. 2008. 80 (10): 3699–707. Epub 2008/04/15. pmid: 18407617; Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC3761971.
    24. 24. Сео С., Су Т.В., Ценг Д.К., Эрлингер А., Озкан А. Голографическая визуализация без линз для цитометрии и диагностики на кристалле. Лабораторный чип. 2009. 9 (6): 777–87. Epub 2009/03/04. pmid: 19255659; PubMed Central PMCID: PMCPMC3931575.
    25. 25. Скандараджа А., Ребер С.Д., Свитц Н.А., Флетчер Д.А.Количественная визуализация с помощью микроскопа мобильного телефона. PLoS One. 2014; 9 (5): e96906. Epub 2014/05/16. pmid: 24824072; PubMed Central PMCID: PMCPMC4019540.
    26. 26. Фальк М.М., Лауф У. Флуоресцентная деконволюционная микроскопия с высоким разрешением и мечение автофлуоресцентными индикаторами CFP, GFP и YFP для изучения структурного состава щелевых контактов в живых клетках. Microsc Res Tech. 2001. 52 (3): 251–62. Epub 2001/02/17. pmid: 11180618.
    27. 27. Гоэль С., Бхатнагар Н., Шарма Д., Сингх А.Устранение разрыва в человеческих ресурсах в системах оказания первичной медико-санитарной помощи в развивающихся странах с помощью мобильного здравоохранения: обзор литературы. JMIR Mhealth Uhealth. 2013; 1 (2): e25. Epub 2013/01/01. pmid: 25099436; PubMed Central PMCID: PMCPMC4114440.
    28. 28. Бирур П.Н., Санни С.П., Джена С., Кандасарма У., Рагхаван С., Рамасвами Б. и др. Мобильное медицинское приложение для удаленного наблюдения за раком полости рта. J Am Dent Assoc. 2015. 146 (12): 886–94. Epub 2015/11/28. pmid: 26610833.
    29. 29.Афрохех А., Райт К.А., Селларс С.Л., Веттер Дж., Пелсер А., Шуберт П.Т. и др. Оценка орального теста на жидкой основе Shandon Papspin с использованием новой цитологической балльной системы. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol. 2012. 113 (6): 799–807. Epub 2012/06/07. pmid: 22668708.
    30. 30. Лашкари А., Данеш М., Самади Б. Обзор протоколов безопасности беспроводных сетей (WEP, WPA и WPA2 / 802.11i). Международная конференция по информатике и информационным технологиям. 2009: 48–52.10.1109 / ICCSIT.2009.5234856.
    31. 31. Рескорла Э. HTTP через TLS. Инженерная группа Интернета, RFC 2818. 2000.
    32. 32. МакХью МЛ. Надежность между экспертами: статистика каппа. Биохим Мед (Загреб). 2012. 22 (3): 276–82. Epub 2012/10/25. pmid: 23092060; PubMed Central PMCID: PMCPMC3

      2.
    33. 33. Гальвес Дж, Хауэлл Л., Коста М.Дж., Дэвис Р. Диагностическое соответствие телецитологии и традиционной цитологии для оценки аспиратов груди.Acta Cytol. 1998. 42 (3): 663–7. Epub 1998/06/12. pmid: 9622684.
    34. 34. Клдиашвили Э., Шредер Т. Воспроизводимость телецитологической диагностики мазков из шейки матки в программе обеспечения качества: опыт Грузии. Телемед Дж. Здоровье. 2011. 17 (7): 565–8. Epub 2011/08/20. pmid: 21851161.
    35. 35. Ли Е.С., Ким И.С., Чхве Дж. С., Йом Б.В., Ким Х. К., Хан Дж. Х. и др. Точность и воспроизводимость телецитологической диагностики мазков из шейки матки. Инструмент для программ обеспечения качества.Am J Clin Pathol. 2003. 119 (3): 356–60. Epub 2003/03/21. pmid: 12645336.
    36. 36. Цилалис Т. , Архондакис С., Меристудис К., Маргари Н., Пулиакис А., Скагиас Л. и др. Оценка воспроизводимости статических телецитологических диагнозов в мазках из шейки матки, полученных с помощью жидкостной цитологии. Телемед Дж. Здоровье. 2012. 18 (7): 516–20. Epub 2012/08/04. pmid: 22856666.
    37. 37. Poate TW, Buchanan JA, Hodgson TA, Speight PM, Barrett AW, Moles DR, et al. Аудит эффективности техники щеточной биопсии полости рта в специализированном отделении стоматологии.Oral Oncol. 2004. 40 (8): 829–34. Epub 2004/08/04. pmid: 15288839.
    38. 38. Tuijn CJ, Hoefman BJ, van Beijma H, Oskam L., Chevrollier N. Передача данных и изображений с использованием мобильных телефонов для усиления диагностических услуг на основе микроскопии в лабораториях стран с низким и средним уровнем доходов. PLoS One. 2011; 6 (12): e28348. Epub 2011/12/24. pmid: 22194829; Идентификатор PubMed Central PMCID: PMCPMC3237433.

    Пап-мазок на рак шейки матки под микроскопом

    Пап-мазок — это скрининговая процедура для выявления рака шейки матки.Этот тест проверяет наличие предраковых или раковых клеток на шейке матки, отверстии матки. Женщинам обычно рекомендуют начинать сдавать мазки Папаниколау в возрасте 21 года. Во время мазка Папаниколау клетки шейки матки исследуются на предмет аномального роста.

    Есть несколько различных методов тестирования мазка Папаниколау.

    При традиционном мазке Папаниколау образцы клеток берут из влагалища, шейки матки и цервикального канала и наносят на предметное стекло микроскопа. Затем предметное стекло микроскопа отправляется в лабораторию для исследования под лабораторным микроскопом.

    Пап-тест ThinPrep был разработан для уменьшения некоторых технических проблем, присущих традиционному методу мазка Папаниколау. В тесте ThinPrep Pap образцы клеток собираются с помощью специальной щетки, которую сразу же промывают специальной жидкостью. Затем аппарат ThinPrep отфильтровывает клетки из раствора и наносит их в виде тонкого однородного единственного слоя клеток на предметное стекло для исследования под микроскопом. Пап-тест ThinPrep используется для выявления заболеваний шейки матки, ВПЧ и некоторых распространенных инфекций, передаваемых половым путем.


    Это изображение мазка Папаниколау ThinPrep, полученное под лабораторным микроскопом при 100-кратном увеличении.

    Некоторые преимущества метода ThinPrep Pap включают удаление загрязняющих веществ, таких как кровь и слизь, которые могут скрывать клетки в традиционном мазке Папаниколау. Единый слой клеток легче рассмотреть под микроскопом. Это приводит к увеличению скорости обнаружения аномальных клеток. Недостатком метода мазка по Папаниколау ThinPrep является повышенная стоимость собирающей жидкости и стоимость непрерывной работы аппарата ThinPrep.


    Это изображение мазка Папаниколау ThinPrep, полученное под лабораторным микроскопом с увеличением 400x.

    Чтобы узнать больше о том, чего можно ожидать во время сдачи мазка Папаниколау, посетите веб-сайт клиники Мэйо. Если у вас есть вопросы относительно лабораторных микроскопов или цифровой микроскопии, обращайтесь в Microscope World.


    Оценка эффективности недорогого переносного микроскопа для мобильного телефона в цитологии шейки матки | BMC Women’s Health

    Большинство людей, подверженных риску рака шейки матки, проживают в развивающихся странах [4], которые в большинстве случаев не имеют ресурсов, инфраструктуры и / или доступа к обученным патологам для эффективного скрининга рака шейки матки.Доступное и простое в использовании диагностическое устройство могло бы оказать значительное влияние на скрининг рака шейки матки в этих условиях, особенно в отдаленных районах развивающихся стран [5, 6].

    Foldscope показал свою способность визуализировать паразитов, таких как Schistosoma haematobium [14], а также клетки плоского эпителия шейки матки [10]. Это последнее исследование показало 100% корреляцию между цитологическими характеристиками, обнаруженными с помощью Foldscope и традиционной оптической микроскопии, с глобальным каппа-индексом Коэна, равным 0.7 и значения 0,8 для хроматической характеристики, 0,8 для непрерывности ядерной мембраны и 0,7 для морфологии цитоплазмы. Однако в упомянутом исследовании использовалась станция изображения, проецирующая изображение с Foldscope с дополнительной системой конденсации в темную комнату [10], что требовало дополнительных технологий и ресурсов, которые ограничивают его потенциальное применение в удаленных и / или сельских условиях.

    В целом изображения Foldscope были сопоставимы с изображениями, полученными с помощью обычного микроскопа и цифровой камеры.Для большинства цитологических препаратов (75%) наблюдалось точное совпадение. В этих точных совпадениях цитологические изменения были более четкими и классическими по сравнению с несогласованными случаями. Несоответствия, наблюдаемые между нормальным и LSIL, можно отнести к проблемам с фокусировкой (из-за плотных кластеров ячеек), ограниченному ROI, а также к субъективности. Четкость изображения была вероятной причиной наблюдаемого несоответствия одиночного HSIL / злокачественного и нормального. Нормальные клетки, сгруппированные вместе с пониженной четкостью, и проверка одной области интереса, возможно, также привели к неправильной классификации.

    Ограничения ROI и субъективность цитологических характеристик могут объяснить несоответствия, которые мы наблюдали в нашем исследовании. Большинство несоответствий произошло с HSIL / Mal (6 из 10) и LSIL (5 из 8). Эта группа несоответствий вызывает наибольшее беспокойство из-за значительной разницы в схемах лечения для этих двух категорий. Тем не менее, чувствительность и специфичность для LSIL и HSIL были более 80%. Как правило, патологи просматривают весь слайд вместе с исследованием нескольких областей интереса перед постановкой диагноза, что помогает в точности классификации.При использовании Foldscope различие между LSIL и HSIL могло быть затруднено из-за ограничения одной или нескольких областей интереса и отсутствия скрининга всего слайда.

    Кроме того, переход от LSIL к HSIL может быть субъективным в определенных группах ячеек. Визуальная оценка отношения N: C по своей сути субъективна, а не является количественной величиной. Субъективность и плохая воспроизводимость не редкость в схемах патологической классификации [15]. В определенных схемах классификации некоторые категории могут не иметь значительных изменений при первоначальном диагностическом обследовании.Это тот случай, когда проводится различие между HSIL и злокачественным новообразованием / раком, когда для обеих категорий первоначальный план диагностики требует немедленной кольпоскопии и биопсии. По этим причинам и из-за ограниченной рентабельности инвестиций в наш проект мы решили объединить категории HSIL и злокачественной цитологии в одну категорию HSIL / злокачественные.

    Маленькое поле зрения, ограничения в фокусировке, а также невозможность совершать точные движения слайда под Foldscope, были основными недостатками Foldscope.Текущий бумажный столик не обеспечивает достаточных возможностей фокусировки или сканирования слайдов, что делает очень трудоемкой задачей полное сканирование / скрининг цитологического слайда. Проблемы с фокусировкой были очевидны в Foldscope, о чем свидетельствуют большие области с различной резкостью и четкостью даже в пределах одного кластера ячеек. Отсутствие резкости вокруг фокуса и сужение фокуса ранее сообщалось как ограничение устройства [10].

    Микроскоп с шаровой линзой — мощное новшество, которое потенциально может обеспечить доступную диагностику не только цитологии шейки матки, но и других цитопатологических состояний, особенно с использованием специальных конструкций Foldscope [16].Линза Foldscope мощная, и ее способность к классификации может быть дополнительно использована с помощью компьютерного анализа. Телефонные приложения с морфометрией могут позволить быстро классифицировать цитологию и уменьшить субъективную классификацию. Разработка ступенчатой ​​системы, а также усовершенствование существующей системы фокусировки могут уменьшить препятствия для сканирования.

    (PDF) Автоматическое определение малярийных паразитов неконтролируемыми методами

    10

    Ссылки

    1.ВОЗ. : Руководство по обеспечению качества микроскопии малярии, версия 2, Всемирная организация здравоохранения —

    zation, 2016.

    2. ВОЗ. : Всемирный доклад о малярии, 2016 г. Всемирная организация здравоохранения, 2016 г.

    3. Тек Ф.Б., Демпстер А.Г., Кале И.: Компьютерное зрение для микроскопической диагностики малярии.

    Журнал малярии. 8 (1), стр 153 (2009).

    4. Das D, Mukherjee R, Chakraborty C .: Компьютерная микроскопия для выявления малярии

    Обнаружение паразитов: систематический обзор.Журнал микроскопии. 260 (1), стр. 1–19,

    (2015).

    5. Ян З., Хан А., Саджад М., Мухаммад К., Ро С., Мехмуд И.: Обзор автоматизированной

    диагностики малярийных паразитов в микроскопических изображениях мазков крови. Мультимедийные инструменты

    и приложения. С. 1–26, (2017).

    6. Деви С.С., Шейх С.А., Ласкар Р.Х .: Особенности эритроцитов для обнаружения малярийных паразитов

    в микроскопических изображениях мазка тонкой крови: обзор. Международный журнал Интер-

    активных мультимедиа и искусственного интеллекта.4 (2), стр. 34–39, (2016).

    7. Поостчи М., Силамут К., Мод Р., Джегер С., Тома Г.: Анализ изображений и машинное обучение

    Обучение обнаружению малярии. Трансляционные исследования. (2018).

    8. Шен, Х., Пан, У.Д., Донг, Ю. и Алим, М .: Декабрь. Сжатие без потерь изображений эритроцитов с рейтингом cu-

    с использованием глубоких автоэнкодеров для диагностики малярийной инфекции.

    In Picture Coding Symposium (PCS), стр. 1-5, (2016).

    9. Раззак, М.И., Наз, С. и Заиб, А .: Глубокое обучение для обработки медицинских изображений:

    Обзор, проблемы и будущее. В классификации в BioApps, стр. 323-350,

    (2018).

    10. Cham. Бустамам, А., Д. Алдила, Фатима и М. Д. Аримби: Метод кластеризации

    систематизирующих карт (SOM) ДНК вируса папилломы человека (ВПЧ) как основной

    причины рака шейки матки. В материалах конференции AIP, vol. 1862, нет. 1, стр.

    030-155, (2017).

    11. Корраль, Хуан А., Мигель Герреро и Педро Дж. Зуфириа. Сжатие изображений с помощью оптимального векторного квантования

    : сравнение алгоритмов SOM, LBG и k-средних. 1994

    Международная конференция IEEE по нейронной сети. IEEE World Congress on Compu-

    tational Intelligence., Vol. 6, стр. 4113-4118, (1994).

    12. Маргеску Д., Раджанен М.Дж .: Оценка использования метода SOM в интеллектуальном анализе данных.

    Базы данных и приложения InDatabase.С. 181-186, (2005).

    Обнаружение и сегментирование лейкоцитов на микроскопических изображениях тонких мазков крови — Nuffield Department of Medicine

    © 2017 IEEE. Малярийная инфекция диагностируется и контролируется с помощью скрининговых микроскопов мазков крови на наличие инфицированных паразитами эритроцитов. Ежегодно миллионы препаратов крови проверяются вручную на наличие паразитов, что является утомительным и подверженным ошибкам процессом, который во многом зависит от опыта микроскопистов.Мы разработали программное обеспечение для выполнения этой задачи на смартфоне, используя методы машинного обучения и анализа изображений для автоматического подсчета инфицированных эритроцитов. Метод, который мы реализовали первым, должен обнаруживать и сегментировать эритроциты. Однако присутствие лейкоцитов (лейкоцитов) затрудняет процесс обнаружения и сегментации эритроцитов, поскольку лейкоциты могут быть ошибочно приняты за эритроциты с помощью методов автоматического определения клеток. В результате необходим этап предварительной обработки для удаления лейкоцитов.В нашей статье предлагается новый метод сегментации лейкоцитов на микроскопических изображениях мазков крови. Во-первых, алгоритм фильтрации диапазона используется для определения местоположения белых кровяных телец на изображении в соответствии с алгоритмом установки уровней Чанвеса для оценки границ каждой лейкоцита, присутствующего на изображении. Предлагаемый алгоритм сегментации систематически тестируется на базе данных из более чем 1300 изображений тонких мазков крови, демонстрирующих приблизительно 1350 лейкоцитов. Мы оцениваем эффективность предлагаемого метода для двух этапов обнаружения лейкоцитов и сегментации лейкоцитов, сравнивая аннотации, предоставленные экспертом-человеком, с результатами, полученными с помощью предлагаемого алгоритма.