15Июл

Лимфоциты в мазке на флору: Мазок гинекологический

Содержание

Сдать Мазок на флору гинекологический анализ во Владимире

Описание

Другие исследования — Мазок на флору гинекологический

Сроки исполнения: 1 р.д. *.
Биоматериал: мазок из влагалища у женщин, из уретры – у мужчин.. 
Стоимость анализа без учета забора.

Описание:

Подготовка к исследованию: перед исследованием рекомендуется не мочиться 2-3 часа, за 1-2 суток воздержаться от половых контактов, желательно сдавать мазок на флору сразу после месячных, на 4-5 день цикла.
Справка: Мазок на флору — лабораторное микроскопическое исследование, характеризующее микрофлору в мочеиспускательном канале, шейке матки, влагалище. При этом оценивают следующие показатели: количество лейкоцитов и эритроцитов, состав флоры, наличие трихомонад, гонококков, ключевых клеток и лактобактерий.
Показания к назначению: боли внизу живота, неприятные ощущения в области половых органов, зуд, необычные выделения из влагалища, профилактические осмотры, беременность и планирование беременности, длительное лечение антибиотиками, гормонами, цитостатиками, смена полового партнера.


Нормальные показатели: в норме в мазке определяются палочковая флора и единичные лейкоциты.
Интерпретация результатов:
Кокковая флора, большое количество лейкоцитов, эритроциты присутствуют в мазке при воспалительном процессе, появление эритроцитов также может быть признаком травмы. Количество лейкоцитов и эритроцитов в мазке может увеличиваться у женщин после месячных. Обнаружение трихомонад свидетельствует о трихомониазе, гонококков — о гонорее. В мазке могут быть обнаружены грибы рода кандида, гарднерелла, лептотрикс и некоторые другие бактерии, относящиеся к ключевым клеткам влагалища. Все это может быть симптомом нарушения микрофлоры влагалища у женщин и уретрита у мужчин. При остром или только что перенесенном воспалительном процессе ткани или органа увеличивается количество эпителиальных клеток. Большого значения этот показатель не имеет и должен трактоваться только совместно с другими показателями.

отрывок из книги акушера-гинеколога Ольги Белоконь «Я беременна, что делать?»

instagram.com/p/BqCjB0rHg6v/?utm_source=ig_embed&utm_medium=loading» data-instgrm-version=»12″>


Посмотреть эту публикацию в Instagram
Публикация от Доктор Ольга Белоконь (@doctor_belokon)

Влагалище — это целый микромир, в котором обитает огромное количество бактерий, вирусов и грибов.

Я бы назвала эту главу книги «бедное влагалище», потому что, честно сказать, иногда я действительно не знаю, как оно выдерживает всю ту артиллерию лекарственных средств, которую ему выписывают.

На втором году своей интернатуры я часто ходила на ночные дежурства в роддом. Признаться, именно тогда я грезила акушерством и мечтала работать в роддоме, мне казалось, что я нашла себя, и это абсолютно мое.

На очередном дежурстве к нам в родзал привезли Наташу. На каждую роженицу заводится своя история родов с кучей бумажек, которые надо заполнить. Это та работа, которую любой врач с огромным удовольствием перепоручит интерну, чтением и писаниной мы занимались вдоволь каждый день. Я вычитывала все, что можно было найти в обменной карте, и всегда подолгу беседовала с женщинами.

Я всегда хотела разобраться в логике врачебных назначений, обследований, при этом у меня никогда не было моды бежать к какому-то доктору за ответом или советом, я рыла информацию сама. Я прекрасно понимала, что любой врач может ошибаться (и я не исключение), может не знать, может пользоваться очень старыми данными, которые давно изменились. Поэтому кумиров у меня не было, и слова любых авторитетов всегда подвергались сомнению.

Я перечитывала монографии, книги, протоколы, научные журналы, я искала информацию везде, где можно было искать. Так я нашла достоверные источники информации и научилась в ней разбираться. Так родился мой блог в Инстаграме. Именно так я познакомилась со многими очень крутыми врачами, абсолютными профессионалами своего дела, и у меня пропало ощущение белой вороны, которое было раньше. Мне стало все равно, что меня откровенно недолюбливали некоторые интерны и даже врачи.

Все ответы на мои вопросы были найдены.

Но вернемся к Наташе. В процессе беседы выяснилось, что за девять месяцев беременности она 17 РАЗ!!! лечила какую-то инфекцию во влагалище. При полном отсутствии жалоб, отсутствии инфекций, передающихся половым путем, 17 раз было проведено лечение. Это неправильно и так быть не должно!

Словом «инфекция» в гинекологии часто злоупотребляют и иногда проводят вмешательства там, где они совсем не оправданы.

Слизистая оболочка влагалища выстлана многослойным плоским неороговевающим эпителием, клетки которого богаты гликогеном. Именно этот гликоген является основным питательным веществом для лактобацилл (палочек Дедерлейна), которые расщепляют его до глюкозы и молочной кислоты, создавая при этом во влагалище кислую среду (рН от 4,0 до 4,5). Кислая среда помогает поддерживать нормальный биоценоз во влагалище, создает в нем свой микромир, где все живут в дружбе и согласии. Кислая среда подавляет рост условно-патогенных, болезнетворных микроорганизмов, и в процентном соотношении их во влагалище очень немного.

Влагалищные выделения в норме есть абсолютно у каждой женщины. Не бывает так, чтобы их не было, это заблуждение. Выделения из влагалища — это, по сути дела, смесь из слущенных эпителиальных клеток влагалища, вагинального транссудата, вагинальной микрофлоры и слизистых выделений из канала шейки матки.

Нормальное количество влагалищных выделений за сутки — от 1 до 4 мл. Они белые или слегка желтоватые, могут быть прозрачными, в основном без запаха или имеют слегка кисловатый запах.

На характер вагинальных выделений влияет:

• питание;

• сексуальная активность;

• прием лекарственных препаратов, в том числе антибиотиков;

• стресс;

• использование оральных контрацептивов;

• фаза менструального цикла;

• беременность;

• гигиенические средства (гели, мыло, прокладки и пр.).

Для того чтобы поддерживать здоровье и чистоту влагалища, есть простые правила, которые вы должны соблюдать и которым должны научить вашу дочь:

1. Отдавайте предпочтение ночным рубашкам, а не пижаме. Рубашка позволяет воздуху свободно циркулировать. Если любите пижаму, то штаны должны быть абсолютно свободные и спать нужно без нижнего белья.

2. Белье должно быть хлопковым. При стирке нижнего белья пользуйтесь функцией дополнительного полоскания, это вымоет стиральный порошок, компоненты которого могут обладать раздражающим действием. Не нужно использовать ополаскиватели или кондиционеры для белья, нет ничего лучше чистой воды.

3. Избегайте ношения тесного белья, колгот, лосин, джинсов, легинсов. Юбки и свободные брюки позволяют воздуху свободно циркулировать и снижают риски возникновения вагинитов.

4. Не забывайте о ежедневном купании в обычной чистой теплой воде в течение 10–15 минут.

5. Ограничьте использование моющих средств. Подмываться можно обычной водой и не более 1–2 раз в день с мылом, у которого нейтральный рН. Для гигиены никакие специальные интимные гели не нужны, это маркетинг и ничего более.

6. Используйте мягкую, белую туалетную бумагу без ароматизаторов.

7. Вытираться туалетной бумагой после акта дефекации нужно спереди назад и ни в коем случае не наоборот — направление от влагалища к прямой кишке, а не от прямой кишки к влагалищу.

8. Не используйте пену для ванн, кремы, мыло, интимные гели с отдушками и ароматизаторами.

9. Подмывайтесь после акта дефекации и мочеиспускания, если есть такая возможность.

10. Ежедневные прокладки также не являются необходимостью, их вообще не нужно использовать. Достаточно гигиены два раза в день и ежедневной смены нижнего белья.

Важно понимать, что у каждой женщины своя норма влагалищных выделений (цвет, консистенция, количество), и она очень вариабельна.

Отличить норму от патологии можете только вы, потому что только вы знаете, как было раньше и что изменилось сейчас.

Проблема появилась, если вдруг у вас выделений стало заметно больше, если появился необычный запах, поменялся их цвет. Ко всему этому у вас появился зуд, жжение, раздражение, покраснение, расстройство мочеиспускания, боли во время полового акта. Понимаете? То есть что-то должно беспокоить. Неправильно выискивать стафилококки и стрептококки во влагалище в отсутствие жалоб, они в норме могут там находиться у любой здоровой женщины и лечения не требуют.

Цитологическое заключение «воспалительный тип мазка», лейкоциты в мазках

Неправильно, если вам назначают лечение, когда исключены инфекции, передающиеся половым путем (хламидиоз, гонорея, трихомоноз, микоплазма гениталиум), и вы ни на что не жалуетесь.

Объясню почему.

По моей личной статистике, девять из десяти мазков приходят «плохие»: то много лейкоцитов, то мало лактобактерий, то нашли лептотрикс, то больше эпителиальных клеток. В 90% случаев врач-лаборант перестрахуется и напишет «воспаление». При этом тот самый врач-лаборант не является вашим лечащим врачом и на вопрос, требует ли этот анализ лечения, ответит: «Результаты анализов не являются диагнозом. Обратитесь к вашему лечащему врачу».

Я тот самый лечащий врач, который должен объяснить, почему есть воспалительный процесс, а лечить его не нужно. Да потому что на самом деле это никакое не воспаление. Да, действительно, повышенное количество лейкоцитов может свидетельствовать о воспалительном процессе, но в крови, и в ситуации с влагалищем это далеко не всегда так.

Врач-лаборант пользуется данными из атласов, есть приблизительные нормы количества лейкоцитов (в основном заключение «воспаление» выдается по результатам подсчета именно этих клеток), койлоцитов, гистиоцитов и других клеток, но нормы очень условны, они сильно колеблются в зависимости от дня менструального цикла, особых состояний в жизни женщины (беременность, менопауза), фоновых заболеваний и многих других факторов. То есть заключения о «воспалении» шаблонные, они не учитывают индивидуальных особенностей (жалоб, моего осмотра) и не являются диагнозом. Воспаление по результатам цитологии совсем не обозначает настоящее воспаление во влагалище или в шейке матки.

Присутствие лейкоцитов в цитологических мазках является нормальным и не должно трактоваться как воспаление.

Современная медицина говорит нам о том, что лечение только лишь лейкоцитов в мазке не показано, и такие «плохие анализы» лечить не нужно.

Правильно лечить болезни, а не количество лейкоцитов мазках, стафило- или стрептококк. Не существует диагнозов «гарднереллез» или «дисбиоз», гарднерелла или уреаплазма в отдельности не требует лечения.

Гинекологический мазок на флору — Клиника Здоровье 365 г. Екатеринбург

Гинекологический мазок – простой и быстрый  лабораторный метод исследования нормальной и патогенной флоры под микроскопом. Для информативности мазков, перед посещением врача женщина не должна проводить санации влагалища, пользоваться вагинальными препаратами и иметь половые контакты (в течение 48 часов), т.к. все перечисленное может изменить микроскопическую картину. Забор осуществляется врачом-гинекологом одноразовым шпателем из трех точек – из наружного отверстия уретры («U»), влагалища («V») и шейки матки («C»). Взятый материал распределяется на предметное стекло, высушивается и направляется в лабораторию на микроскопию. Разные части клеток и бактерии окрашиваются в разные цвета, что позволяет оценить состав выделений из уретры, влагалища и шейки матки.

 

 

В данном мазке могут быть обнаружены:  

 

 

Плоский эпителий

– слой клеток, выстилающий влагалище и шейку матки. В норме эпителий должен присутствовать. Отсутствие его в мазке свидетельствует об атрофии эпителиальных клеток.

 

Лейкоциты

– норма до 15 единиц в поле зрения (в мочеиспускательном канале до 5, во влагалище до 10 и в шейке матки до 15 единиц в поле зрения). Количество лейкоцитов в мазке резко возрастает при воспалении влагалища (кольпит, вагинит). Чем больше лейкоцитов, тем острее протекает заболевание.   При остром воспалении значение этого показателя будет «до 100 в поле зрения» или «покрывают все поле зрения».

 

Палочки

в мазке составляют нормальную микрофлору влагалища. Кроме палочек в мазке не должно быть других микроорганизмов.

 

«Ключевые» клетки

в мазке — это гарднереллы – возбудители гарднереллеза. Дрожжевые грибы – признак кандидоза (молочницы). В скрытых (бессимптомных) стадиях молочницы грибок в мазке может обнаруживаться в виде спор.

 

Лептотрикс (Leptothrix) — анаэробная грамотрицательная бактерия. Чаще всего лептотрикс встречается при смешанных половых инфекциях  —  трихомониазе и хламидиозе, при кандидозе и бактериальном вагинозе. Определение его в мазке должно настораживать врача и предусматривать дальнейшее более углубленное обследование.

 

 

Мобилункус анаэробный микроорганизм, один из представителей транзиторной микрофлоры мочеполовых органов. Часто встречается у женщин с бактериальным вагинозом и кандидозом.

 

 

Трихомонада – простейший микроорганизм, представляет собой подвижный одноклеточный организм со жгутиком, вызывающий воспалительные заболевания мочеполовой сферы.

 

 

Гонококки (диплококки) – возбудители гонореи — в мазке норме не определяются.

 

Бактериоскопические исследования – SYNLAB Eesti

Интерпретация результатов бактериоскопии

Прямая микроскопия нативного материала является частью клинического исследования пациента, цель которого – определить морфологию микроорганизмов и наличие воспалительной реакции со стороны организма.

Показания: Прямая микроскопия нативного материала дает информацию о общем состоянии генитального тракта, позволяет оценить наличие и интенсивность воспалительной реакции, зрительно оценить клетки слизистой оболочки и имеющиеся микробы. При известных инфекциях прямая микроскопия имеет диагностическую ценность (гонорея у мужчин, трихомоноз).

Исследуемый материал: Соскоб из цервикального канала, влагалища, уретры (на предметное стекло)

Метод анализа: Микроскопия

Соответственно международным стандартам у каждого пациента необходимо смотреть два препарата, окрашивая их по методу Грама и Лейшману-Гимза.

Методика окраски по Лейшману-Гимза является основной методикой для определения инфекции Trichomonas и внутриклеточных микроорганизмов, также эта методика очень информативна для исследования клеточных элементов; позволяет оценить отличия эпителия генитального тракта (вагинальный, эндоцервикальный, слизистая оболочка уретры).

На основе методики окраски по Граму микробы подразделяются на Грам-положительные и Грам-отрицательные. В диагностике бактериального вагиноза это основной метод окраски, поскольку он позволяет определить критерии Nugent.

Интерпретация результата:

ЭПИТЕЛИАЛЬНЫЕ КЛЕТКИ

  • Суперфициальные. Максимального своего числа (96%) достигают во время овуляции. К 27-28 дню цикла их число падает до 4%.  
  • Интермедиарные. Составляют большую часть клеток в первые (74-76%) и последние (96%) дни цикла. Минимальное их количество во время овуляции (3,5%).
  • Парабазальные. У женщин репродуктивного возраста имеются в препарате только во время менструации. Также их часто можно обнаружить при низком уровне эстрогенов.
  • Базальные. В препарате здоровых женщин не определяются. Обнаружение базальных клеток указывает на наличие воспалительного процесса слизистой или травматического повреждения. При воспалении также имеется множество лейкоцитов. NB! Парабазальные и базальные клетки также являются отличительным признаком атрофического вагинита.
  • Спонтанно отслоившиеся клетки эндометрия. У женщин репродуктивного возраста их можно обнаружить первые 12 дней после менструации. Обнаружение клеток эндометрия во второй фазе цикла свидетельствует о наличии эндометрита, полипа эндометрия или связано с использованием внутриматочного контрацептивного средства.

 

ЛЕЙКОЦИТЫ

  • Нейтрофилы. Клетки острой фазы. В препарате можно обнаружить следующие патологические формы:
    • гиперсегментированные: число ядерных сегментов 6 и более, величина клеток может превышать 15 μm. Возникают при мегалобластной и пернициозной анемии, хронической инфекции и применении химиотерапии. 
    • гипосегментированные: число ядерных сегментов 3 и меньше. Возникают при некоторых инфекциях и на фоне применения химиотерапии (особенно препаратов группы сульфонамидов).
  • Моноциты или мононуклеарные фагоциты. Отвечают за хроническую фазу воспаления.
  • Эритроциты. У некоторых женщин определяются в период овуляции и перед мен- струацией.

 

СООТНОШЕНИЕ ПОЛИМОРФОНУКЛЕАРНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ ПМН И ЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ КЛЕТОК

  • У здоровых женщин это соотношение менее, чем 1:1.
  • Пропорции клеток 2:1 и 3:1 и более, являются маркером острого воспаления.  

 

МИКРООРГАНИЗМЫ

Нормальная микробиота у мужчин

УретраСеменная жидкость

Доминирует грамм-положительная микрофлора. Самое богатое микроорганизмами место это дистальная часть уретры и самая бедная – спонгиозная часть.

Наиболее частые изоляты:

  • Альфа-гемолитические стрептококки группы: Streptococcus salivarius, S. sanguis, S. intermedius и др.
  • Коагулазонегативные: Staphylococcus haemolyticus, S. auricularis, S. hominis, S. epidermidis 
  • Enterococcus spp., Corynebacteria

Реже и в небольшом количестве встречаются S.aureus, S. pyogenes, стрептококки B группы, Enerobacter spp. и микрококки

Нестерильная число микробов варьирует инди- видуально от 10²
до 107 PMÜ/mL.

 

Нормальная микробиота у женщин

Наружные гениталииУретраВлагалище
• S. epidermidis
• Viridans стрептококки
• Peptostreptococcus spp.
• Corynebacteria
• Mycobacteria
• Enterobacteriaceae
• S. aureus и CONS
• Enterococcus
• Neisseria (авирулент-
ные)
• Corynebacteria
• Mycobacteria
• Enterobacteriaceae
• Gardnerella vaginalis
• Mycoplasma
• Грибки

Аэробы:
• Difteroidid
• Streptococcus spp.
• S. aureus
• S. epidermidis
• Enterobacteriaceae

Микроаэрофилы и анаэробы:
• Лактобациллы
• Peptostreptococcus
• Peptococcus
• Clostridium
• Eubacterium
• Bifidobacterium
• Gardnerella vaginalis
• Candida
• Actinomyces
• Ureaplasma urealyticum
• Mycoplasma hominis

 

ГРАМ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ ПАЛОЧКИ

  • Genus Lactobacillus. Их количество в препарате колеблется циклично, больше всего их можно обнаружить на фоне овуляции (10-14 день). Иногда множество лактобацилл имеется на 19-23 день цикла, что может вызвать цитолиз промежуточных клеток.
  • Genus Corynebacterium. Большинство представителей этого вида факультативные или же непатогенные.

 

ГРАМ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ КОККИ 

  • Genus Staphylococcus
    • S. aureus в сообществе с E. coli, и стрептококками группы В и Trichomonas vaginalis может вызывать аэробный вагинит. На наличие аэробного вагинита указывает большое количество парабазальных клеток и лейкоцитов (также их гранулярный аспект).
    • S. epidermidis является важнейшим фактором уретрита и простатита у молодых (42%).
    • Увеличилась частота возникновения бактериурии с S. saprophyticus у молодых женщин. Также при инфекции амниона у беременных женщин может быть изо- лирован из материала цервикального канала.
  • Genus Streptococcus
    • S. agalactiae (стрептококк В группы) колонизируется на слизистой оболочке половых путей 5-40% женщин. Вульвовагинит же может возникнуть только тогда, когда их число достигнет не менее 108 PMÜ/g, а также будет определяться одновре- менно E. coli и S. aureus. Часто может быть одновременно с Candida albicans (55%).

 

ACTINOMYCES

Имеется в полости рта здоровых людей и на слизистой оболочке половых путей женщин. В качестве колонизирующего микроорганизма может быть у женщин, использующих внутриматочные противозачаточные средства (7%). Достаточно часто Actinomyces сопровождается Entamoeba gingivalis. Может быть причиной симптоматической инфекции.

 

ГРАМ НЕГАТИВНЫЕ ПАЛОЧКИ

  • Представители Enterobacteriaceae
    • Наиболее частые возбудители инфекций уротракта это Escherichia coli, Proteus spp., Klebsiella spp., Pseudomonas spp.
    • Диагностическую ценность имеет обнаружение E. coli в больших количествах, особенно вместе с другими энтеробактериями и на фоне PMN либо же с BV- микробами.

 

ГРАМ НЕГАТИВНЫЕ КОККИ 

  • N. gonorrhoeae (гонококки)
  • N. meningitidis (менингококки)
  • Другие представители Neisseria с относительно низкой патогенностью изолируются из дыхательных путей. N. lactamica часто изолируется из урогенитального тракта.
  • Genus Acinetobacter. В большинстве своем кокобациллы или диплококки. Изоли- руются из слюны, мокроты, мочи и влагалищного секрета.  
  • Genus Moraxella. Морфологически неотличимы от нейсерий. В некоторых случаях можно обнаружить M. catarrhalis среди полиморфных лейкоцитов.

 

GARDNERELLA VAGINALIS

Имеется в микрофлоре у 45-58% здоровых женщин репродуктивного возраста и у 27% женщин в период менопаузы.

 

LEPTOTRICHIA

Относительно низкой патогенности. Возникает обычно на фоне трихомоноза, бактериального вагиноза или длительного курса противовоспалительного лечения.

 

ДИАГНОЗ БАКТЕРИАЛЬНОГО ВАГИНОЗА ПО КРИТЕРИЯМ NUGENT

  • Различное число морфотипов в препарате, окрашенном по Граму
  • Норма 0-3
  • Пограничное значение 4-6
  • Бактериальный вагиноз >7

 

ДИАГНОЗ БАКТЕРИАЛЬНОГО ВАГИНОЗА ПО КРИТЕРИЯМ AMSEL

  • Гомогенные молокообразные выделения из влагалища
  • Положительный аминовый тест
  • Ph >4,5
  • Микроскопическая находка: клетки „clue“ (~20%) Gardnerella, Mobiluncus и др.

 

ГРИБЫ

  • Бластоспоры, лейкоцитов мало или отсутствуют – колонизация
  • Бластоспоры, лейкоцитов много – Candida non-albicans, необразующая псевдомицелий
  • Бластоспоры, лейкоцитов много – инфекция Candida albicans  

 

🤰 Памятка по подготовке к гистероскопии

Решила поделиться своим опытом прохождения ЭКО в клинике GMS ЭКО. В протокол пошла в конце ноября прошлого (2016-ого) года.

Клиника новая, но до этого я достаточно долгое время наблюдалась по гинекологии у Анны Владиславовны Морозовой в «большом» GMS на Смоленке, она мне и посоветовала эту клинику — она там медицинский директор. Для полноты картины — мне 34 года, 2 внематочных беременности, удалены обе трубы, так что ЭКО для меня единственный вариант. До GMS ЭКО было 2 неудачных протокола, короткие протоколы, стимуляция менопуром.

По порядку. Клиника расположена по адресу 2-ая Ямская ул. дом 9. Ближайшее метро Марьина роща, от метро не спеша минут 15, сначала вдоль Сущевского вала, потом направо во дворы. Клиника расположена в странном кургузом полосатом здании. Отличный ремонт, все как то очень уютно. Не скажу, что по домашнему, но обстановка комфортная. Персонал реагирует на каждый твой чих, но я к этому привыкла еще по моему опыту лечения на Смоленке. Но это так, к слову.

Как вы понимаете, лечащий врач Анна Владиславовна Морозова. Спокойная, деловая, и пациентов настраивает на такой же спокойный лад. Предэкошное обследование проходили здесь же, в клинике. Стимуляцию делали по длинному протоколу, поскольку до этого короткие были пролетные с низким качеством клеток и небольшое их количество, стимулировали пурегоном. Ощущения не самые приятные, но все обошлось. Спунктировали 9 клеток, 7 нормального качества, оплодотворилось 6. Эмбриолог Ильин Кирилл Александрович. На 5-эй день получили 5 эмбрионов очень хорошего качества, как сказал Кирилл Александрович, и один, как но выразился, нормальный.

Анна Владиславовна объяснила, что поскольку доза гормонов была высокая, лучше дать организму время успокоиться, поэтому сделали крио всех эмбрионов. 26-ого января у меня был перенос, перенесли 2 эмбриона. 9-ого февраля сделали бета ХГЧ — 132 единицы.

Я беременна!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!

Огромное спасибо всему персоналу клиники за их профессионализм, прекрасное человеческое отношение, отзывчивость, внимательность, чуткость и заботу. Отдельная благодарность медицинскому директору Анне Владиславовне Морозовой за то, что она уверенно вела мой протокол и довела его до победы и заразила этой уверенностью и меня и зав. эмбриологией Кириллу Александровичу Ильину за то, что тот так хорошо позаботился о моих детках в их первые дни жизни.

Теперь будем ждать УЗИ на сердцебиение. Сказали, что в принципе при моем уровне ХГЧ бывает и многоплодная беременность. Если это случится то я буду просто на седьмом небе!

Последнее по тексту, но не по значению. Естественно, я очень довольна результатами и готова рекомендовать клинику и своих врачей всем, кому это нужно. Если кто то решит последовать моему примеру, немного о финансах. Сама процедура мне обошлась чуть больше 150 тыс. за все включая ИКСИ, крио, подтверждение беременности и т.д. плюс стандартный пакет предварительных анализов и врачей (42 тыс. по акции) плюс лекарства для стимуляции — я покупала прямо в клинике, цены нормальные. Итого получилось по моим расчетам чуть больше 260 тыс.. Наверняка, можно было найти и дешевле. А вот много это или мало за человеческие условия лечения, за внимательный персонал, за врачей, которым можно доверять, наконец, за ТАКОЙ результат — это дело каждого. Я лично ни копейки не пожалела.

Микроскопическое исследование мазка из влагалища и шейки матки (гинекологический мазок)

Артикул: 00134

Стоимость анализа

в лаборатории:

Экспресс

1 300руб

стоимость указана без учета стоимости забора биологического материала

Добавить в корзину

Мазок из влагалища и цервикального канала

Готовность результатов анализа

Обычные*: 1 к. д.

Дата сдачи анализа:
Дата готовности:

*не считая дня сдачи.

Экспресс

Подготовка к анализу

Общие рекомендации по сдаче анализов

Анализ сдается в любой клинике будни с 7.45 до 21.00, в выходные с 8.45 до 15.00. График сдачи в праздничные дни может отличаться, пожалуйста, уточняйте заранее.

Забор биоматериала

Методы выполнения и тесты

Микроскопия. Эпителий, микрофлора, слизь (наличие, полуколичественная оценка), лейкоциты (количественная оценка). Наличие дрожжеподобных грибов рода Candida, трихомонад, диплококков (внеклеточно и внутриклеточно).

Файлы

Скачать образец результата анализа
 

Этот анализ входит в блоки:

  • Базовый блок анализов для подготовки к ЭКО
  • БЛОК. Микроскопическое исследование мазка из уретры, влагалища и ц/к
  • Обследование – стандарт Отделение ГИНЕКОЛОГИИ: ОАК, ОАМ, Биохимия крови, Блок маркеров инфекций (антитела к ВИЧ, HBs-Ag, анти-HCV, антитела к Treponema Pallidum, суммарные), Гинекологический мазок, Мазок на онкоцитологию по Папаниколау (шейка матки)
  • Обследование – экспресс Отделение ГИНЕКОЛОГИИ: ОАК, ОАМ, Биохимия крови, Блок маркеров инфекций (антитела к ВИЧ, HBs-Ag, анти-HCV, антитела к Treponema Pallidum, суммарные), Гинекологический мазок
  • Расширенный блок анализов для подготовки к ЭКО
Срок готовности анализов в экспресс-режиме (Cito)
Время сдачи Готовность
Будни Выходные
08:00-17:00 09:00-17:00 1-2 часа
17:00-20:30 На следующий день, как сданный в 8:00
08:00-12:00 09:00-12:00 3-5 часов
12:00-20:30 12:00-17:00 На следующий день, как сданный в 8:00
08:00-12:00 09:00-12:00 до 16:00
07:00-09:00 08:00-09:00 до 14:00
09:00-12:00 09:00-12:00 до 16:00

Значение анализов

Гинекологический мазок (мазок на флору) берется из 1 или 2 точек: влагалище, шейка матки. Материал забирается специальными стерильными инструментами, наносится на предметное стекло, а затем мазок анализируется под микроскопом. Гинекологический мазок забирается не в дни менструации, до использования свечей, лубрикантов, спринцевания.

Сдать мазок следует при наличии подозрения на инфекционно-воспалительные заболевания половых путей (выделения, зуд, дискомфорт в области половых органов, неприятный запах) в рамках комплексного обследования, включающего другие виды анализов, осмотр акушером-гинекологом.

Гинекологический мазок входит в список анализов, обязательно сдаваемых во время беременности, при диспансеризации. Этот анализ также сдается перед процедурами, связанными с проникновением в цервикальный канал и полость матки (соногистерография, инсеминация, биопсия и др.).

В мазке определяются:

  • Эпителиальные клетки. Слизистую оболочку влагалища выстилает плоский эпителий. В норме обнаруживается небольшое количество клеток плоского эпителия.
  • Количество слизи
  • Лейкоциты в норме в мазке обнаруживаются в небольшом количестве. При воспалении влагалища (вагинит/кольпит) в гинекологическом мазке количество лейкоцитов возрастает, вплоть до того, что лейкоциты могут покрывать все поля зрения.
  • Флора в норме представлена палочками. Кокковой, грибковой флоры и простейших в норме в мазке быть не должно. Появление такой флоры свидетельствует о необлагополучии – воспалительных, инфекционных заболеваниях или других нарушениях микрофлоры влагалища, например, о кандидозе (появление грибов), дисбактериозе (появление так называемых «ключевых» клеток, наличие коккобациллярной флоры), трихомониаза (при выявлении трихомонад). Дать название микрофлоры при анализе мазка невозможно, для определения вида конкретного микроорганизма следует использовать другие анализы – методом ПЦР, бактериологическим методом (посев).

Другие мазки на анализы:

  1. В некоторых случаях дополнительно берется мазок из уретры
  2. ПЦР-диагностика скрытых инфекций
  3. ПАП-мазок или мазок на онкоцитологию
  4. Анализ на папилломавирус
  5. Посев отделяемого женских половых органов

Гинекологический мазок на флору
Диплококки, клетки эпителия, слизь

Гинекологический мазок на флору
Споры гриба рода Candidа (кандида)

Гинекологический мазок на флору Лептотрикс

Гинекологический мазок на флору Лептотрикс на фоне воспаления

Гинекологический мазок на флору
Палочковая (бациллярная) флора
 

Гинекологический мазок на флору
Палочковая (бациллярная) флора, клетки промежуточного эпителия

Условия сдачи анализа

Этот анализ обязательно сдается перед процедурами (соногистерография, инсеминация и др. ).

Также спрашивают:

С этим анализом сдают:

Как сдать анализы в Лабораториях ЦИР?

Для экономии времени оформите заказ на анализ в Интернет-магазине! Оплачивая заказ онлайн, Вы получаете скидку 10% на весь оформленный заказ!

У Вас есть вопросы? Напишите нам или позвоните +7 (495) 514-00-11. По анализам Вы можете задать вопрос на нашем форуме и обратиться на консультацию к специалисту.

Влагалищные выделения и мазок в норме

Все, о чем приходится читать в письмах женщин, это об увлечении врачей лечением лейкоцитов во влагалище, потому что бытует мнение, что лейкоциты – это признак воспаления. Так ли это? Далеко не так! Лейкоцитоз играет огромнейшую роль в репродуктивной функции женщины, в том числе во время беременности. Об этом поговорим чуть позже.

Количество влагалищных выделений
Большинство женщин не знает, какими и в каком количестве должны быть влагалищные выделения в норме. Это приводит к тому, что часто они стараются добиться чуть ли не стерильности влагалища, поглощая большое количество лекарств, спринцуясь, пользуясь разными химическими растворами, гелями, «ионными» прокладками. Дискомфорт из-за выделений нередко создан искусственно как последствие применения слишком большого количества препаратов в борьбе с лейкоцитами, кандидой, уреаплазмой, кокками и палочками (о вреде спринцеваний читайте статью на эту тему).
В норме в течение суток выделяется от 1 до 4 мл влагалищной жидкости, которая в большинстве случаев белесоватая, вязкая и без неприятного запаха. Обычно, к концу дня прокладка на нижнем белье становится влажной. Цвет выделений может быть разных оттенков белого, кремового, желтого, розового.

Качество влагалищных выделений
Влагалищные выделения состоят из слизистого секрета (1), вырабатываемого железами канала шейки матки, слущенных клеток покровного эпителия стенок влагалища и шейки матки (2), микроорганизмов (3), живущих во влагалище, и влагалищного транссудата или выпота (4) из прилегающих кровеносных сосудов. Важно понимать, что влагалище не имеет собственных желез, вырабатывающих секрет.
В течение менструального цикла количество и качество выделений меняется (наблюдение за выделениями используется как составная часть контрацепции или, наоборот, при планировании беременности). В первой половине цикла, особенно ближе к овуляции, преобладает слизистый компонент – производное шейки матки. Перед менструацией количество выделений может быть минимальным, хотя некоторые женщины жалуются на мажущие кровянистые выделения, что может быть проявлением нормы или патологии.
Слизь шейки матки содержит также большое количество лейкоцитов, особенно в период овуляции, во второй половине лютеиновой фазы менструального цикла, но больше всего – при беременности.
Молодые женщины часто жалуются на обильные слизистые выделения – это может быть из-за наличия у них физиологической псевдоэрозии (эктопии). Такое состояние лечения не требует, но в редких случаях при выраженном дискомфорте проводится хирургическое лечение шейки матки, хотя оно и не желательно у нерожавших женщин.

От чего зависит количество выделений
От чего зависит количество выделений? Не только от дня менструального цикла, но и многих других факторов. В первую очередь, от комплекции женщины. У худых женщин, у которых не хватает жировой ткани, выделений больше, особенно при половом акте, и они более водянистые. Чтобы понять, почему у худых женщин наблюдается такое явление, важно вспомнить о значении жировой ткани в организме человека.
Жировая ткань участвует в обмене веществ, в том числе половых гормонов (поэтому у худых женщин часто наблюдаются продолжительные менструальные циклы до 40 дней и более, а также ановуляция). Она важна как депо многих питательных веществ, которые организм накапливает в стрессовой ситуации. Жировая ткань является отличной защитной прослойкой между органами и другими структурными частями организма. Она выполняет многие другие функции.

Репродуктивные органы женщины богато снабжены кровеносными сосудами, потому что природе важно обеспечить процесс размножения и вынашивания потомства. Если вспомнить анатомического размещение влагалища и матки, то спереди они соприкасаются с задней стенкой мочевого пузыря, а сзади – с передней стенкой прямой кишки. Все эти органы очень тесно взаимосвязаны, как кровоснабжением, так и нервными волокнами (иннервацией), как, например, связаны глаза, нос и горло. Резкий запах может вызвать слезотечение и дискомфорт в горле. Плач нередко сопровождается заложенностью носа и появлением обильных выделений (краснеют не только глаза, но и нос).
Точно такая же тесная взаимосвязь есть между влагалищем, мочевым пузырем и прямой кишкой. Настолько тесная, что проблема в одном органе, может повлечь за собой проблему в другом. Многие женщины знают, что при воспалении мочевого пузыря (цистите) усиливаются выделения из влагалища; дисбактериоз кишечной флоры (что чаще всего бывает из-за чрезмерного увлечения антибиотиками) практически всегда сопровождается дисбактериозом влагалища; половые инфекции часто поражают не только влагалище и шейку матки, но и уретру и анус, в первую очередь из-за особенностей строения слизистой оболочки этих органов. Интенсивный половой акт может привести к появлению цистита. Половая жизнь при запорах часто сопровождается болью в малом тазу.
Но, чтобы эти органы не прикасались слишком тесно друг к другу, природа позаботилась о защите, предохраняющей от трения, от быстрого обмена внеклеточной жидкости и распространения инфекции, а также о защите кровеносных сосудов и нервов, которыми обильно снабжена эта область тела — она «придумала» жировую прослойку.

У худых женщин, особенно высоких и тонких (модельного типа) жировая прокладка чрезвычайно тонкая. Это приводит к тому, что большее количество плазмы крови просачивается через стенку кровеносных сосудов и попадает во влагалище, формируя жидкие (почти водянистые) влагалищные выделения. Во время полового акта, когда происходит возбуждение, а также трение полового члена о стенки влагалища, усиливается кровоток в сосудах наружных и внутренних половых органов, а поэтому больше жидкой части крови выпотевает во влагалище. Такие женщины нередко жалуются, что во время полового акта у них вырабатывается столько «смазки», что она просто «хлюпает», вводя женщину в состояние стыда и дискомфорта. Помочь женщинам назначением лекарственных препаратов не просто.
У полных женщин тоже может быть повышенное количество выделений, в основном из-за застоя крови в органах малого таза. Запоры также сопровождаются нарушением микрофлоры влагалища – выделения становятся желтовато-зелеными, часто с неприятным запахом.
Усиленная физическая активность и, наоборот, малоподвижность сопровождаются повышенными выделениями. На количество выделений влияют также гигиена наружных половых органов, использование химических растворов для интимной гигиены (далеко не все интимные гели являются натуральными), синтетических гигиенических прокладок (почти все прокладки увеличивают выделения), синтетических стиральных порошков и жидкостей, ношение синтетического белья и колготок, тугих джинсов и штанов.

Методы обследования влагалищных выделений
Влагалищное содержимое можно обследовать различными методами. Наиболее распространенными являются:
• Микроскопическое исследование мазка (свежего нативного некрашеного, окрашенного) – чаще всего такое исследование проводится некачественно из-за наложения на стекло слишком большого количества выделений.
• Цитологический мазок (изучение клеток покровного эпителия) — используют как скрининг на предраковые и раковые состояния шейки матки.
• Определение кислотно-щелочного равновесия (рН) – этот вид исследования простой и информативный, но почти забыт многими врачами.
• Выделение культуры (бактериальные посевы с использование различных сред) – проводится чаще всего неправильно с загрязнением посевного материала микроорганизмами промежности и преддверия влагалища.
• Иммунологическое исследование (ПЦР и др.) – такие методы проводятся на коммерческой основе, поэтому ими начали злоупотреблять, игнорируя более дешевые методы обследования.

Микрофлора влагалища
Микрофлора влагалища представляет собой определенные виды микроорганизмов (бактерии, вирусы, грибки и др.), которые обитают во влагалище или были занесены туда разными способами (травма, инородное тело, оперативное вмешательство, половой акт, и т. д.)
Важно понимать, что область промежности – это самая грязная часть кожи человеческого тела.  При акте дефекации вместе с каловыми массами наружу выходят миллиарды микроорганизмов. Кожа вокруг анального отверстия всегда загрязнена большим количеством бактерий, так называемой, кишечной группы. Это норма жизни, даже если она сопровождается неприятным запахом и скопившимися к концу дня выделениями между ног.

Факторы, влияющие на микрофлору влагалища
Бактериальная флора влагалища женщин зависит от следующих факторов:
• Беременность (кандидоз – это физиологическая норма беременности)
• Возраст
• Гормональный уровень
• Кислотно-щелочное равновесие влагалищной среды (рН)
• Количество сексуальных партнеров
• Курение
• Менструальный цикл
• Метод контрацепции
• Наличие инфекционных заболеваний
• Наличие некоторых общих заболеваний (например, диабет)
• Прием медикаментов
• Спринцевания
• Частота половых отношений

Бактерии, живущие во влагалище
Традиционно, много лет тому назад, считалось, что основными обитателями влагалища должны быть только палочки Дедерлейна из группы лактобактерий. Но с развитием микробиологии ученые пришли к выводу, что во влагалище женщины может обитать до 100 видов микроорганизмов (в основном до 5 у одной женщины), чаще всего из условно-патогенной группы.
Условно-патогенные микроорганизмы – это бактерии, вирусы, грибки и простейшие, которые обитают в организме человека, не принося вреда, но при определенных условиях (понижение защитных сил, хронические заболевания, противораковая терапия и др.) могут привести к возникновению воспалительного процесса. Роль большинства микроорганизмов, живущих на поверхности и внутри организма человека, до сих пор не изучена до конца и не совсем понятна.
Таким образом, у более 50 % здоровых женщин такая влагалищная флора рассматривается как нормальная.

Наиболее распространенными микроорганизмами влагалищного содержимого являются следующие бактерии:
• Atopobium vaginae
• Bacteroides sp.
• Candida
• Corynebacteria
• Enterococcus faecalis
• Esherichia coli
• Lactobacillus
• Leptotrichia
• Megasphaera
• Mycoplasma
• Neisseria meningitis
• Neisseria sp.
• Proteus spp.
• Staphylococcus aureus
• Staphylococcus epidermidis
• Streptococcus mitis
• Streptococcus pneumoniae
• Streptococcus pyogenes
• Ureaplasma

Большинство из этих микроорганизмов являются представителями нормальной флоры кишечника и кожи промежности. Между врачами до сих пор идет определенный спор о том, считать ли все эти виды бактерий и других микроорганизмов нормальной или условно-патогенной флорой влагалища. Ведь они могут обитать во влагалище длительный период жизни, не вызывая заболевания.
Каждая женщина может иметь свой индивидуальный набор микроорганизмов, поэтому старые «нормы» влагалищного содержимого давно уже не используются врачами в большинстве стран мира. Определение «нормальности» флоры учитывает наличие жалоб и отсутствие признаков инфекционных заболеваний.

Динамика изменений влагалищной флоры
С рождением ребенка, его контакт с внешним миром (воздух, вода, предметы, люди) приводит к тому, что детский организм быстро заселяется разными видами бактерий, вирусов, грибков и простейших, в основном обитающих на коже промежности, ягодиц, лобка, которые в большинстве случаев совершенно безопасны для ребенка. Чаще всего это коринобактерии, стафилококки, негнойные стрептококки, кишечная палочка и частично палочками Дедерлейна (лактобактерии). Ошибочно искать у девочки в бактериальных посевах выделений и микроскопических мазках лактобактерии и ужасаться при обнаружении бактерий кишечной группы. Лактобактерии появляются во влагалище девочки с появлением менструаций.
С ростом и периодом созревания, а также под влиянием различных факторов, одни виды бактерий замещаются (вытесняются) другими видами бактерий. Даже при строгом соблюдении гигиены тела, при определенных условиях (дефекация, половой акт, прием антибиотиков) происходит постоянное попадание различных микроорганизмов во влагалище женщины. Влагалищная флора нормализуется быстро без дополнительного вмешательства, обычно в течение суток.

Лактобактерии влагалища
Долгий период считалось, что лактобактерии – это единственные «здоровые», то есть полезные, бактерии, обитающие во влагалище и нормализующие влагалищную среду. Однако позже ученые обнаружили, что 10-42% здоровых женщин не имеют лактобактерий или же их количество небольшое. Таким образом, было создано понятие «экосистемы влагалища», которая включает многие факторы, в том числе условно-патогенные микроорганизмы, для поддержания своего равновесия.
Существует около 135 видов лактобактерий, которые могут обитать во влагалище женщины. Название «лактобактерии» происходит от способности этих видов микроорганизмов превращать лактозу (сахар) в молочную кислоту. Обычно во влагалище обитает от одного до нескольких видов лактобактерий.
Все лактобактерии делят на три группы по доминирующей функции (некоторые виды могут выполнять несколько функций): (1) виды, которые вырабатывают перекись водорода — L. acidophilus, L. crispatus, L. gasseri, L.johnsonii, L. vaginalis; (2) виды, которые вырабатывают молочную кислоту— L. salivarius, L. johnsonii, L. acidophilus, L. jensenii; (3) виды, которые прикрепляются к клеткам бактерий, эпителия влагалища — L. agilis, L. jensenii, L. Johnsonii, L. ruminus.
Перекись водорода действует как разрушающий фактор непосредственно на патогенные бактерии и грибки влагалища, молочная кислота создает кислую среду, что тоже влияет губительно на бактерии, а прикрепление (адгезия) лактобактерий к патогенным микроорганизмам (кишечная палочка и другие бактерии кишечной группы) ограничивает распространение инфекции во влагалище и за его пределы.

Триада: кишечник, влагалище, мочевой пузырь Др. Елена Березовская

Лактобактерии не угнетают рост дрожжевых грибков. Они стимулируют иммунную систему организма и обеспечивают нормальное соотношение флоры влагалища, препятствуя чрезмерному росту других 20‑30 видов условно-патогенных бактерий, в норме обитающих во влагалище в небольших количествах.
В большинстве учебников и статей прошлого, посвященных вопросам женского здоровья утверждается, что доминирующими лактобактериями влагалища являются Lactobacillus acidophilus – ацидофильные лактобактерии. Однако это ошибочное утверждение, потому что многочисленные клинические исследования показали, что во влагалище чаще всего обитают следующие виды лактобатерий: L. fermentum, L. crispatus, L. jensenii и L. johnsonii. Это объясняет неэффективность применения коммерческих препаратов лактобактерий для лечения ряда инфекций влагалища и восстановления нормальной флоры – все эти препараты содержат ацидофильные лактобактерии.

Лейкоциты и репродуктивная система
Среди врачей существует немало ошибочных представлений о том, сколько белых кровяных телец (лейкоцитов) должно быть во влагалищном содержимом. Ошибки начинаются с неправильного забора исследуемого материала. Чаще всего врачи накладывают обильное количество выделений на стекло, размазывают эти выделения по поверхности стекла, но результаты таких исследований крайне неинформативны. Влагалищные мазки не должны быть обильными по консистенции, и размазывать содержимое по стеклу несколькими движениями строго не рекомендуется, так как при этом эпителиальные клетки разрушаются. Любые мазки с разных точек влагалища и шейки матки должны браться отдельными инструментами.

Лейкоциты и репродуктивная система женщины – неразделимы. Это далеко не признак воспалительного процесса, а динамический процесс, который наблюдается в организме женщин, и этот процесс полностью зависит от гормонального фона. Количество, как и вид лейкоцитов меняется в зависимости от дня менструального цикла. Физиологический лейкоцитоз наблюдается перед овуляций и во второй половине цикла, особенно перед менструацией. Во время беременности лейкоцитоз – это неотъемлемое и необходимое состояние, без которого беременность не будет протекать нормально.
Лейкоциты есть во влагалищных выделениях, так как они сформированы из просочившейся через стенку влагалище и прилегающих сосудов жидкой части крови и мигрирующих лейкоцитов. Все без исключения виды лейкоцитов могут проникать через стенку капилляров.
Также, шеечная слизь – это депо лейкоцитов, количество которых зависит от гормонального фона. Во время беременности из лейкоцитов и слизи канала шейки матки формируется плотная шеечная пробка (поэтому она белая на вид). В большинстве случаев микроскопию выделений шеечного канала проводить не рекомендуется.

Др. Елена Березовская — О лейкоцитозе

Эндометрий тоже содержит разные лейкоциты: лимфоциты Т и В, макрофаги, нейтрофилы и ряд других. В нем имеется уникальный вид лейкоцитов – маточные натуральные киллеры (uNK), которые появляются в конце лютеиновой фазы и в начале беременности. Без достаточного количества этих лейкоцитов имплантация, плацентация и развитие беременности невозможно. В отличие от других натуральных киллеров, маточные НК отличаются специфическим строением, чувствительны к гормональным колебаниям, поэтому их количество полностью зависит от уровня половых гормонов и прогестерона.
Так как в эндометрии к началу менструации наблюдается увеличение лейкоцитов, повышается количество человеческого лейкоцитарного антигена класса 1 (ЧЛА или HLA 1), что является нормой, особенно на поверхности эндометриальных стромальных клеток. Этот антиген выполняет очень важную роль. Лейкоциты мНК участвуют в процессе гибели и отторжения эндометрия и помогают в расщеплении (лизисе) отслоившихся леток — без этого менструация невозможна. Но они также могут привести к лизису базального слоя эндометрия и стромы. Однако в природе этого не происходит, потому что человеческий лейкоцитарный антиген связывается с этим видом лейкоцитов и предохраняет строму и базальный эндометрий от повреждения.
Маточный пролактин стимулирует выработку лимфоцитов.

Нейтрофилы присутствуют в тканях эндометрия в небольшом количестве почти весь менструальный цикл, но за несколько дней до начала менструации их количество значительно повышается и они доминируют весь период менструального кровотечения.
Считается, что именно быстрое понижения уровня прогестерона со второй половины лютеиновой фазы является пусковым сигналом появления большого количества лейкоцитов в репродуктивных органах.
Основные нейтрофилы матки – это полиморфноядерные лейкоциты (ПЯЛ). Во всех учебниках и публикациях можно найти, что этот вид лейкоцитов появляется в очаге воспаления. Действительно, по количеству именно этих видов лейкоцитов и их соотношению к клетках плоского эпителия во влагалищных выделениях можно заподозрить воспалительный процесс. Подсчет лейкоцитов должен проводиться в соотношении с количеством обнаруженных эпителиальных клеток. В норме соотношение составляет до 10 лейкоцитов на одну эпителиальную клетку. Но в реальности большинством постсоветских лабораторий этот показатель не определяется и не учитывается, а в результатах указано общее количество лейкоцитов в поле зрения, и подсчет грубый и неточный (например, 50-100 лейкоцитов в поле зрения).
Какова роль ПЯЛ во влагалище, полости матки и эндометрии, если воспаления на самом деле нет? Этот вид лейкоцитов участвует не только в борьбе с воспалительным процессом, поглощая (фагоцитируя) микроорганизмы, но и мертвые клетки и обрывки тканей. Во время менструации происходит гибель большого количества клеток эндометрия, также он смешивается с кровью, создавая отличную почву для размножения микроорганизмов, которые могут попадать в полость матки из влагалища. Нейтрофилы становятся санитарами, очищая поверхность участка, на котором произошло отторжение старого эндометрия от его остатков и предотвращает попадание бактерий, вирусов, грибков в ткани эндометрия и матки.

Другой вид лейкоцитов – макрофаги тоже выполняют важную роль в функции эндометрия. Они составляют до 20% всех лейкоцитов, появляющихся в матке к концу лютеиновой фазы, в том числе во влагалищных выделениях. Хотя макрофаги не имеют прогестероновых и эстрогеновых рецепторов, но их количество в эндометрии и других тканях генитального тракта зависит от уровня гормонов и дня менструального цикла. Макрофаги содержат ферменты, которые расщепляют мертвые клетки эндометрия, они также вырабатывают ряд органических веществ, важных в процессах регенерации (восстановления) тканей.

У 10 % женщин наблюдается большое количество лейкоцитов во влагалищных выделениях в течение длительного периода жизни. Лечение антибиотиками, противомикробными препаратами, спринцеваниями обычно не меняют картины мазка, поэтому большинство врачей рекомендуют наблюдать таких женщин без лечения.
Таким образом, лейкоцитоз в любой форме является очень важной стадией физиологической нормы менструального цикла женщины.

Эритроциты во влагалище
В норме в мазке выделений из влагалища могут быть единичные эритроциты. Перед менструацией и после нее количество эритроцитов может быть увеличено, поэтому исследование влагалищных выделений рекомендовано проводить после полного прекращения менструального кровотечения. При грубом взятии мазка инструментом с острыми краями повреждаются микрососуды шейки матки и влагалища, что отразится на качестве мазка, и может быть причиной большого количества эритроцитов в исследуемом материале.

Эпителиальные клетки влагалища
Стенки влагалища покрыты плоским эпителием, который постоянно обновляется. Поэтому во влагалищном содержимом должны присутствовать клетки плоского эпителия. У женщин с низким уровнем эстрогенов и высоким уровнем андрогенов количество эпителиальных клеток понижено. При большом количестве клеток плоского эпителия всегда нужно провести дополнительное обследование для исключения воспалительного процесса.

рН влагалищного содержимого
В норме у большинства женщин рН составляет 4.0-4.5. Кислотно-щелочное равновесие может меняться в зависимости от дня менструального цикла, а также под влиянием других факторов. Определение кислотно-щелочного равновесия влагалищных выделений является важным диагностическим методом в дифференциации дисбактериоза влагалища, кандидоза, трихомониаза и нормальных выделений.

Гигиена наружных половых органов
Гигиена тела – это залог здоровья, в том числе влагалища и влагалищных выделений. Когда-то в недалеком прошлом гигиена наружных половых органов почти отсутствовала. Только аристократия могла позволить себе в туалетах для женщин специальные приспособления – биде. Туалетной бумаги не было (как впрочем, длительный период не было нижнего белья), поэтому женщины подмывались после каждого мочеиспускания и акта дефекации, и вытирались полотенцами. Современные женщины предпочитают туалетную бумагу, но важно помнить, что движения руки после акта дефекации всегда должны быть от влагалища в сторону анального отверстия и межъягодичной складки кзади, а не наоборот. После мочеиспускания, наоборот, движения должны быть от влагалища к лобку.
Перед половым актом и после него необходимо подмыться теплой водой с мылом – это профилактика многих воспалительных процессов репродуктивной системы и органов малого таза.
Теме гигиены наружных половых органов будет посвящена отдельная статья.

Др. Елена Березовская — О кольпитах, цервицитах и т.д.

Поделиться ссылкой:

Почитать еще

доказательств инфекции у бессимптомных женщин?

Справочная информация . Значение возможного наличия инфекции в мазке Папаниколау бессимптомных женщин по цитологическим критериям практически неизвестно. Материалы и методы . В общей сложности 1117 бессимптомных небеременных женщин прошли мазок Папаниколау и посевы из влагалища и шейки матки (622 с воспалением и 495 без воспаления по Пап-мазку). Результаты . Из 622 женщин с воспалением на мазке Папаниколау 251 (40.4%) имели отрицательные культуры (присутствует нормальная флора), а у 371 (59,6%) женщины были положительные культуры с различными патогенами. Напротив, группа женщин без воспаления на Пап-тесте показала значительно увеличенный процент отрицательных культур (67,1%,) и снижение процента положительных культур (32,9%,). Бактериальный вагиноз диагностировался чаще в обеих группах и значительно чаще в группе с воспалением на мазке Папаниколау по сравнению с группой без воспаления (). Выводы .Отчет о воспалительных изменениях в мазке Папаниколау шейки матки не может быть использован для надежного прогнозирования наличия инфекции половых путей, особенно у бессимптомных женщин. Тем не менее, изоляция различных патогенов примерно у 60% женщин с воспалением на мазке Папаниколау не может быть упущена из виду и должна рассматриваться с осторожностью.

1. Введение

Инфекции половых путей часто встречаются у женщин репродуктивного возраста, и связанные с этим расходы являются значительными. Было отмечено, что многие женщины остаются бессимптомными при вагините или цервиците [1, 2].Папаниколау (Пап-тест) — это простая, быстрая и безболезненная процедура, выполняемая на клетках шейки матки и используемая в качестве скринингового теста для профилактики рака шейки матки [3, 4]. При сообщении результатов мазка Папаниколау шейки матки обычно делается замечание о возможном наличии инфекции на основании цитологических критериев [5]. Клиническое значение воспаления в мазке Папаниколау у бессимптомных женщин практически неизвестно, так как не существует рекомендаций по соответствующему лечению.Таким образом, клиницисты часто сталкиваются с дилеммой, следует ли рекомендовать этим женщинам делать посевы из влагалища / шейки матки для выделения возможных патогенов [6, 7]. В этом исследовании оценивалась возможная связь между воспалением в мазках Папаниколау и наличием цервикальных / вагинальных патогенов, определяемая посевом.

2. Материалы и методы

Исследуемая популяция состояла из бессимптомных небеременных женщин репродуктивного возраста, обратившихся в амбулаторную клинику акушерства и гинекологии университетской больницы Аретайо для рутинного анализа мазка Папаниколау в период с января 2008 года по май 2012 года и которые дали согласие на обследование. включены в это исследование.Комитет по этике больницы Aretaieio одобрил исследование, и от всех субъектов были получены формы информированного согласия.

Женщин посоветовали явиться в больницу через 10–20 дней после первого дня менструального цикла без использования вагинального душа или лекарств в течение как минимум месяца. Мазки, показывающие воспалительные изменения или отсутствие воспаления, были включены в это исследование, в то время как неадекватные мазки и мазки, показывающие любую атипичную морфологию, были исключены. Воспалительные изменения, обнаруженные в мазке, окрашенном по Папаниколау, включали присутствие клеток с увеличенными ядрами, пикноз или кариорексис, перинуклеарные ореолы и вакуоли.Часто регистрировали повышенное количество полиморфноядерных лейкоцитов или нейтрофилов и парабазальных клеток с генерализованной эозинофилией клеток. Кроме того, наличие эпителиальных клеток, покрытых окрашенными в синий цвет кокковыми бактериями, на окрашенном мазке из шейки матки вместе с уменьшенным количеством или отсутствием лактобацилл свидетельствует о бактериальном вагинозе.

Бессимптомных женщин с воспалительными изменениями в мазке Папаниколау или без них вызывали для посева. Для анализа были доступны образцы половых путей (вагинальные и шейные).Влажный образец, а также мазок, окрашенный по Граму, исследовали под микроскопом для выявления Trichomonas vaginalis и получения ценной информации о присутствующих микроорганизмах (дрожжах и бактериях), а также для диагностики бактериального вагиноза с использованием методов Амселя и Ньюджента. критерии [8, 9]. Женщин проверяли на наличие различных аэробных бактерий, то есть видов Candida , стрептококков группы B, Gardnerella vaginalis и Neisseria gonorrhoeae , а также анаэробных бактерий.Таким образом, клинические образцы, собранные у пациентов, были засеяны на соответствующие чашки для стандартных аэробных и анаэробных культур и инкубированы при 37 ° C в течение 24 часов и 48 часов соответственно. Выделенные патогены идентифицировали с помощью автоматизированной системы VITEK 2 (BioMerieux, Marcy l’Etoile, Франция). Кроме того, присутствие Chlamydia trachomatis , а также Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma hominis в исследованных образцах было определено с помощью тестов COBAS AMPLICOR Chlamydia trachomatis 0004 (Rocheplasma , США) и Rocheplasma (США). BioMerieux, Marcy l’Etoile, Франция) соответственно.

Статистический анализ проводился с использованием критерия хи-квадрат, и значения ≤0,05 считались значимыми.

3. Результаты

Всего у 1117 женщин были проведены анализы мазков и посевы из влагалища и шейки матки (622 с воспалением и 495 без воспаления по Пап-мазку). Результаты посева в исследуемой популяции представлены в таблице 1. У женщин с воспалением на Пап-тесте процент отрицательных посевов значительно снизился (), а процент положительных посевов увеличился ().Среди женщин с выявленными возбудителями половых путей бактериальный вагиноз диагностировался чаще в обеих группах. Интересно, что в группе с воспалением на мазке Папаниколау женщин с диагнозом бактериальный вагиноз было значительно больше по сравнению с группой без воспаления (). Выделение других патогенов, таких как видов Candida , Chlamydia trachomatis и T. vaginalis , а также случаев, диагностированных как аэробный вагинит (характеризуемых выделением Streptococcus agalactiae , грамотрицательных стержней и метицилл-резистентных палочек). Staphylococcus aureus ) не различались между двумя группами.


Результаты посева Воспаление () Нет воспаления () Значение P

Отрицательные посевы 251 (40,4) 332 (67,1) <0,001
Положительные культуры 371 (59,6) 163 (32,9) <0,001
Бактериальный вагиноз 274 ​​ 136 <0.02
Candida spp. 43 12 NS
C. trachomatis 3 0 NS
T. vaginalis 2 0 NS
Аэробный вагинит 49 15 NS

4. Обсуждение

В нашем исследовании мы провели посев из влагалища и шейки матки на широкий спектр микроорганизмов у женщин с воспалением и без него. Пап-тест для определения прогностической ценности этого вывода на предмет наличия патогенов у бессимптомных женщин.Мы установили, что почти 60% женщин с воспалительными изменениями в мазках из шейки матки имели положительные культуры на различные патогены. Характеристика цервиковагинальной микробной флоры необходима, и, таким образом, было бы целесообразно для всех пациентов с воспалением на Пап-тесте пройти микробиологическое обследование шейно-влагалищного отдела для выявления потенциальных патогенов для правильной диагностики и лечения. Келли и Блэк обнаружили, что 47% женщин с воспалительными изменениями при исследовании мазка из шейки матки имели микробиологически подтвержденную инфекцию [10].Wilson et al. также сообщили, что воспаление при цитологическом исследовании часто связано с инфекцией половых путей [11]. Подобные результаты и сопоставимые с нашими результатами были опубликованы в литературе [2, 12, 13]. Однако примерно у трети женщин без воспалительных изменений при мазке мазка посевы были положительными. Предыдущие исследования показали, что женщины без воспалительных изменений в мазках из шейки матки могут содержать патогены половых путей. Бертолино и др. отметили, что воспаление на мазке Папаниколау имеет относительно низкую прогностическую ценность для наличия вагинальных патогенов у бессимптомных женщин [5], в то время как Parsons et al.обнаружили высокий уровень положительных культур как у женщин с воспалительными изменениями, так и у женщин без воспалительных изменений при мазке мазка, что позволяет предположить, что воспаление на мазке Папаниколау является плохим индикатором цервикальной инфекции [6]. С другой стороны, Берк и Хики продемонстрировали, что распространенность инфекции была выше в группе мазка воспалительного процесса, таким образом подтверждая, что женщины с мазком воспаления более склонны к заражению половых путей, чем женщины, мазок которых не показывает признаков воспаления [7]. .

Бактериальный вагиноз — это состояние, при котором имеет место впечатляющее микроэкологическое изменение флоры влагалища, характеризующееся уменьшением Lactobacillus spp. и чрезмерный рост Gardnerella vaginalis вместе с анаэробами и потенциально патогенными бактериями, включая Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma hominis . Воспаление по мазку Папаниколау было связано с 30–50% случаев бактериального вагиноза [14, 15], что согласуется с нашими данными.Кроме того, другие сообщают, что большинство мазков с воспалительными изменениями содержали ключевые клетки, что указывает на бактериальный вагиноз и делает вывод, что мазок Папаниколау хорошо подходит для диагностики цервикальных инфекций, связанных с бактериальным вагинозом [2, 7, 12].

Флора влагалища представляет собой сложную микросреду, которая состоит из различных видов бактерий в постоянно изменяющихся количествах и пропорциях. Хотя некоторые патологические состояния и клинические проявления четко определены, присутствие некоторых аэробных микроорганизмов можно рассматривать как колонизацию.В 2002 году Donders et al. предложили термин «аэробный вагинит», чтобы лучше определить патологическое состояние, которое коррелирует с присутствием аэробных бактерий, в основном стрептококков группы B, Escherichia coli и Staphylococcus aureus [16]. Интересно, что уже сообщалось, что Streptococcus agalactiae подавляет рост лактобацилл и Gardnerella vaginalis , но не S. aureus [17, 18]. В нашей исследуемой популяции распространенность S.agalactiae и грамотрицательных палочек (в основном E. coli ) было ниже, чем в недавнем сообщении [19], но было похоже на сообщение Donders et al. [16] и Лукич и др. [20].

Staphylococcus aureus Влагалищная колонизация широко изучается с момента возникновения синдрома токсического шока несколько десятилетий назад. Однако вагинальное носительство метициллин-устойчивого S. aureus (MRSA) не было хорошо документировано. Распространенность MRSA была низкой в ​​нашей популяции и аналогична предыдущим отчетам в амбулаторной, негоспитализированной и бессимптомной выборке [16, 21].

Сорок три женщины (11,6%) с воспалением на мазке Папаниколау были положительными на инфекцию Candida , большинство из которых были диабетиками. Эти результаты согласуются с предыдущими результатами, представленными в литературе [16], но не согласуются с недавним отчетом, в котором в другой популяции частота инфицирования Candida у пациентов с воспалительными изменениями была очень высокой, 73,8% [13] . С другой стороны, наши результаты высоки по сравнению с другими сообщениями в литературе [2, 6, 22].

В некоторых исследованиях сообщается о корреляции между признаками воспаления при тестировании мазка и положительными образцами на Chlamydia trachomatis [5, 7, 12]. В нашей выборке распространенность положительных результатов тестирования C. trachomatis составила 0,8%, что соответствует предыдущим отчетам [6, 13, 15]. Скрининг инфекции нижних отделов половых путей с использованием интрацервикального или вагинального мазка на инфекцию Chlamydia должен проводиться, даже если в некоторых группах населения заявленная распространенность является низкой, поскольку инфекция хламидиоза, в частности, имеет долгосрочные последствия для фертильности из-за ее потенциальной возможности. вызвать бессимптомное повреждение маточных труб.

Trichomonas vaginalis — паразит, вызывающий симптоматическую и бессимптомную инфекцию женской мочеполовой системы. Доказано, что выздоровление T. vaginalis чаще происходило у женщин с воспалением на мазке Папаниколау, чем у женщин без воспаления [5, 12]. В нашем исследовании только два образца были положительными на T. vaginalis у женщин с воспалением, что согласуется с другими данными о низкой распространенности [16, 22, 23] и отличается от исследований, в которых была обнаружена повышенная частота этого паразита [2, 13].

5. Выводы

Результаты нашего исследования позволяют предположить, что отчет о воспалительных изменениях в мазке Папаниколау шейки матки не может быть использован для надежного прогнозирования наличия инфекции половых путей, особенно у бессимптомных женщин. Необходимы дальнейшие исследования с продольным характером, чтобы изучить возможное наличие инфекции на основе цитологических критериев. Тем не менее, изоляция различных патогенов примерно у 60% женщин с воспалительными изменениями в мазке Папаниколау шейки матки в отсутствие видов Lactobacillus нельзя игнорировать и к ней следует относиться с беспокойством.

Лейкоциты — типы, наблюдения, подсчет и анализ мочи

Типы, наблюдения, подсчет и анализ мочи


Лейкоциты

Также называются лейкоцитами, лейкоцитами составляют 1% от общего объема крови и играют важную роль защита организма от инфекционных агентов (вирусов, бактерий и т. д.), посторонних захватчики и инфицированные или раковые клетки.

Лейкоциты делятся на две основные группы, которые включают гранулоциты (нейтрофилы, эозинофилы, базофилы и тучные клетки) и мононуклеарные лейкоциты (лимфоциты, моноциты, макрофаги и дендритные клетки).Различные типы специализированы реагировать на инфекционных агентов или иностранных захватчиков особым образом, таким образом предотвращение дальнейшего распространения и заражения.


Микроскопия

Учитывая, что вся белая кровь клетки имеют диаметр более 5 микрометров, они достаточно большие, чтобы их можно было увидеть с помощью обычного оптического микроскопа (составной микроскоп).

Окрашивание морилкой Лейшмана позволяет не только легко определить разные типы лейкоцитов, но и посчитать их.Этот делает его одним из самых идеальных пятен для дифференциального подсчета лейкоцитов. клетки.

* Пятно Лейшмана — это пятно Романовского, которое состоит из эозина и метиленового синего, растворенных в метаноле.

Требования

Подготовка проб

  • Встряхните пробирку с ЭДТА (для перемешивания кровь) и с помощью пипетки соберите и поместите каплю крови возле одного конца чистое предметное стекло (этого также можно добиться, проткнув кончик кольца палец)
  • Используя другое чистое стекло сдвиньте под углом, распределите каплю крови по слайду (это создаст тонкая пленка с головой, корпусом и хвостом)
  • Дайте слайду высохнуть в течение около 5 минут (сушка на воздухе)
  • Залейте мазок пятно из капельницы и дать постоять около 2 минут
  • Залейте предметное стекло, используя забуференная дистиллированная вода, чтобы разбавить пятно и дать постоять примерно 10 минут
  • Промойте предметное стекло, используя дистиллированной или водопроводной воды примерно на 1 минуту (пока мазок не станет розоватым)
  • Поместите предметное стекло в вертикальное положение на сухой стойке и дайте ей высохнуть (используйте салфетку для очистки сзади и по бокам слайда)
  • Посмотрите слайд под микроскоп с малым увеличением

* Используйте масляную иммерсию для большого увеличения.


Наблюдение


Когда при просмотре под микроскопом мазок покажет разные типы лейкоцитов а также эритроциты. Студенты смогут дифференцировать лейкоциты в зависимости от их формы и ядра.

Нейтрофилы — При рассмотрении под микроскопом нейтрофилы будет иметь сферическую форму с темным ядром, которое сегментировано (2 до 5 долей). При более внимательном рассмотрении также можно обнаружить мелкие гранулы (нейтрофильные гранулы) и тонкие нити, соединяющие доли ядра (нити хроматина)

* Нейтрофилы часто первыми реагируют во время инфекционное заболевание.Гибель многих нейтрофилов с образованием гноя.

Эозинофилы — По сравнению с нейтрофилами, которые могут иметь от 2 до 5 лопастное ядро, эозинофилы имеют только двухлопастное (двухлепестковое) ядро, которое в форме подковы. Они также будут иметь сферическую форму с мелкими гранулы называются ацидофильными преломляющими гранулами.

Базофилы — По сравнению с другими гранулоцитами, базофилы имеют большие и неправильное ядро, которое находится внутри клетки сферической формы.В то время как ядра других гранулоцитов хорошо определены и могут быть четко описано, ядро ​​базофила (голубоватое под микроскопом) большое и нерегулярны внутри клетки и могут оказаться трудными для описания учащимися.

* Базофилы отвечают за расширение сосудов во время воспаления.

Тучные клетки — Если есть, тучные клетки имеют сферическую форму с крупное центральное ядро ​​и больше гранул по сравнению с базофилами.

нейтрофилы, эозинофилы, базофилы и тучные клетки — это гранулоциты. Наличие гранул в этих клетки отличает их от агранулоцитов, в которых отсутствуют гранулы.


Лимфоциты — Хотя они меньше по сравнению с другими лейкоциты, лимфоциты имеют большое круглое ядро, которое занимает большую часть объем ячейки. В результате у лимфоцитов очень мало цитоплазмы или она отсутствует.

* Есть два типа лимфоцитов: B-клетки (клетки, вырабатывающие антитела для уничтожения чужеродных захватчиков) и Т-клетки (отвечает за уничтожение инфицированных и раковых клеток)

Моноциты — По сравнению с лимфоцитами (агранулярными лейкоцитами) моноциты являются большего размера с ядром фасоли или почки. Эти клетки также имеют больше цитоплазмы по сравнению с лимфоцитами.


Подсчет лейкоцитов

Подсчет лейкоцитов имеет большое клиническое значение. значение, потому что способствует диагностике различных заболеваний. Этот может быть достигнуто вручную или автоматически.

Ручной подсчет лейкоцитов

Показан ручной подсчет лейкоцитов иметь несколько недостатков, в том числе склонность к ошибкам и время потребляющий.

Для этого метода студенты могут подсчитать клетки на мазке крови (слайде) или с помощью гемоцитометра, установленного на составном микроскопе. Для мазков белый клетки просто подсчитываются путем сканирования нескольких областей мазка. Здесь, студенты могут подсчитать количество различных типов лейкоцитов на различных регионов и вычислите общий процент каждого типа лейкоциты.

Пример:

Если студент подсчитывает всего 4 моноцита из двух областей и всего 8 лейкоцитов (подсчитаны все лейкоциты), затем становится можно получить процент доступных моноцитов; (4/8) * 100 = 50 процентов

Помимо мазка крови, гемоцитометр также можно использовать. Гемоцитометр — это специальная счетная камера с квадратным линейчатые области, облегчающие подсчет клеток.

Пока камера разделена на 9 квадратных участков, только 4 (в четырех углах камеры) из них используется для подсчета лейкоцитов. Для этого метода сетка отсканированы на предмет выявления и подсчета лейкоцитов для расчета их соответствующие проценты.

* Хотя подсчитать белые клетки можно непосредственно под микроскопом, студенты также могут делать снимки с помощью цифровую камеру и просканируйте изображения, чтобы подсчитать количество белых клеток.


Автоматический подсчет

При ручном подсчете неточности возникают из-за ошибки подсчета (человеческая ошибка) и из-за того, что белые клетки могут быть неравномерно распределены по мазку. Эти проблемы решаются с помощью потока цитометрия.

Для этого метода эритроциты должны быть удалены из крови, потому что они загрязнители. Это достигается с помощью растворы хлорида аммония для лизирования эритроцитов. Для очистки агранулоцитов только (мононуклеарные клетки периферической крови — PBMC) студенты могут использовать плотность градиентная процедура, которая может включать использование Ficoll-Paque PLUS или Гистопак-1077.Однако это не обязательно.

* Выделение и очистка PBMC включает смешивание любого раствора с образцом крови, разделение клеток с помощью центрифуга и промывка клеток с помощью PBS.

Для подсчета количества лейкоцитов, клетка суспензия проходит через электронные детекторы для количественной оценки различных свойств детектируется, что позволяет подсчитывать различные типы лейкоцитов.

Здесь подвеска сделана для создания ламинарного потока, что делает возможным для прохождения отдельных камер через пункт допроса.

Ячейки пересекается пучком монохроматического света в точке опроса, который позволяет свету излучаться в разных направлениях. Затем свет излучает сигналы, которые собираются и анализируются для получения показаний.

* Хотя это более надежный метод для при подсчете лейкоцитов он имеет недостаток в том, что невозможно определить форму или морфологию клеток. По этой причине невозможно определить, повреждены клетки или нет.


Аномально высокое или низкое количество лейкоцитов (WBC)

У здорового взрослого человека нормальное количество / количество лейкоцитов колеблется от примерно 4500 до 11000 клеток на микролитр крови. Однако количество разных типов белых кровяных телец различается.

  • Нейтрофилы — составляют 50-75 процентов от общего числа лейкоцитов и колеблются от 1500 до 8000 на микролитр крови
  • Лимфоциты — составляют от 18 до 45 процентов от общего количества лейкоцитов и колеблется от 800 до 5000 клеток на микролитр крови
  • Эозинофилы — составляют от 1 до 6 процентов от общего количества лейкоцитов и колеблются от 50 до 400 клеток на микролитр крови
  • Базофилы — составляют менее 3 процентов от общего количества лейкоцитов и могут составлять около 300 клеток на микролитр крови
  • Моноциты — составляют менее 10 процентов от общего количества лейкоцитов и диапазона от 200 до 600 клеток на микролитр крови


Высокий / низкий лейкоциты

Количество / количество эти лейкоциты могут измениться на все более (ненормально) высокие или низкие числа. В клинических условиях это указывает на то, что что-то не так, и может помочь с диагностикой.

  • Нейтрофилы — Высокий уровень нейтрофилов (нейтрофильных лейкоцитоз) указывают на наличие инфекции, воспаления или данного тип лейкемии. Аномально низкое количество нейтрофилов (нейтропения) на с другой стороны связаны с нарушениями работы костного мозга, лечение рака как а также аутоиммунные нарушения.
  • Моноциты — Аномально высокие числа моноцитов (моноцитоз) связан с некоторыми видами рака, аутоиммунными расстройства, а также хронические инфекции среди других. Аномально низкий (моноцитопения), с другой стороны, связаны с вирусными инфекциями, определенные врожденные заболевания и аутоиммунные заболевания, а также некоторые антибиотики.
  • Лимфоциты — Аномально высокий уровень лимфоцитов известен как лимфоцитарный лейкоцитоз и связан с учитывая вирусные и бактериальные инфекции, а также лимфомы и рак. Ненормально низкие показатели или лимфоцитопения связаны с такими вирусными инфекциями как ВИЧ, плохое питание, а также аутоиммунные расстройства среди прочего.
  • Базофилы — Очень высокие уровни базофилы в крови были обнаружены среди лиц с такими состояниями, как гипотиреоз, среди других инфекций и раковые заболевания при очень малом количестве был связан со случаями лейкемии, инфекций, тиреотоксикоза и другие реакции гиперчувствительности в организме.
  • Эозинофилы — Аномально высокий уровень эозинофилов (гиперэозинофила) был связан с рядом реакций такие как паразитарные, аллергические и астматические реакции. Учитывая, что количество эозинофилы обычно могут быть очень низкими (до нуля), это не считается проблема.


Микроскопический анализ мочи (лейкоциты)

Можно использовать анализ мочи с помощью микроскопа определить наличие лейкоцитов, что помогает в диагностике различные заболевания.

Требования

Процедура

  • Встряхните пробирку с мочой и центрифугировать на низких оборотах (2-3000 об / мин) в течение примерно 5 минут
  • Слить супернатант, но оставить небольшое количество в пробирке (0. 4 мл)
  • Встряхните пробирку до суспендировать осадок в оставшемся супернатанте
  • Поместите каплю подвешивание на предметном стекле и крышка покровным стеклом
  • Осмотрите предметное стекло под микроскоп, начиная с малого увеличения, наконец, используя большое увеличение

Подробнее об анализе мочи здесь


Наблюдение

При меньшем увеличении учащиеся могут увидеть ряд объектов, включая кристаллы и слепки. Однако при большой мощности студенты могут увидеть ряд лейкоцитов.

В моче наличие высоких цифр лейкоцитов называют пиурией, что свидетельствует об инфекции в мочевыводящие пути или почки. В большинстве случаев лейкоциты в моче: гранулоциты, которые можно идентифицировать по их дольчатому ядру и гранулы.

* Лейкоциты в моче из-за отсутствия окрашивания могут казаться полупрозрачными, что затрудняет их идентификацию некоторыми учащимися.


Движение и функции

Нейтрофилы — Нейтрофилы — это не только первая линия защиты, но также являются наиболее распространенными лейкоцитами. После выпуска они распространяются в течение около 10 часов в крови и может оставаться активным до 6 дней.

Они могут выявлять вторгшиеся организмы, такие как бактерии, с помощью хемотаксиса относительно быстро приближается к ним, используя тип движения, называемый амебоидным движение. Под электронным микроскопом нейтрофилы выглядят так, будто они гонятся вторгающийся организм, когда они ползают среди красных клеток. Как только они доберутся до вторгаясь в организм, они поглощают и уничтожают чужеродный организм (бактерии) через процесс, называемый фагоцитозом.

* Также было показано, что нейтрофилы включают выступы актина и интегрин, связывающие адгезию в своем движении.

Эозинофилы — В ткани миграция эозинофилов контролируется эотаксином-1 (хемоаттрактант белка). Здесь его миграция включает в себя такие действия, как перекатывание, приклеивание, а также трансмиграция через эндотелий. Эти процессы делают возможным клетки мигрируют в определенные места, где они вызывают аллергию. реакции.

Базофилы — Базофилы мигрируют в барьерные ткани, где они высвобождаются воспалительные химические вещества (гистамин и т. д.), которые, в свою очередь, обладают такими эффектами, как расширение кровеносных сосудов и сокращение гладкой мускулатуры. приводит к таким результатам, как снижение артериального давления.

Базофилы также играют важную роль играет важную роль в аллергическом воспалении, выпуская провоспалительные химические вещества, такие как цистеинил лейкотриены.

Для достижения воспаленных тканей, базофилов использовать три основных процесса, связанных с прикреплением к эндотелию сосудов, трансэндотелиальная миграция, а также перемещение через дополнительные сосуды ткани.Цитокины-активаторы тоже играют важную роль в случайном движении клеток, где они перемещаются в сайт через хемокинез.

Моноциты — В нормальных условиях моноциты используют адгезию для движения. Моноциты используют такие молекулы адгезии, как интегрин α4β1 (VLA-4) и β2 интегрины прикрепляются к эндотелию сосудов и достигают целевых участков.

В эндотелиальные соединения, моноциты протискиваются между дополнительными клетками через диапедез пройти, несмотря на их большой размер по сравнению с другими лейкоцитами.Моноциты уничтожают вторгшиеся организмы, такие как бактерии и другие микробы, путем проглатывая их как макрофаги.

Итак, они способны преобразовывать в дендритные клетки, где они перерабатывают антигенный материал. Это делает это возможно, чтобы антитела идентифицировали вредные организмы как уничтожающие их.

Лимфоциты — Есть два типа лимфоцитов; Т лимфоциты и В-лимфоциты. Т-лимфоциты (Т-клетки) составляют большинство лимфоциты (80 процентов) производятся в тимусе.Их главная роль предполагает уничтожение поврежденных или инфицированных клеток. Кроме того, В-клетки играют важную роль в производстве антитела, которые нацелены на специфический антиген и разрушают его.

Пока механизма еще нет для полного понимания, исследования показали, что хемокины играют важную роль роль в адгезии и трансэндотелиальной миграции некоторых лимфоцитов.


Интересно: Что такое вирусы?

Подробнее о лейкоцитах здесь

Прочтите о красных кровяных тельцах

Вернуться на главную страницу мазка крови

Проверьте страницу микроскопии крови

Возвращение из лейкоцитов в MicroscopeMaster Home


Ссылки

Peter Дж.Барнс, Джеффри М. Дрейзен, Стивен И. Реннард, Нил С. Томсон. 2002. Астма и ХОБЛ: основные механизмы и клиническое лечение.

В. Т. Маркези, Дж. Л. Гованс. 1964 г. миграция лимфоцитов через эндотелий венул в лимфатические узлы: электронно-микроскопическое исследование.

Ссылки

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4506059/

https://www.sciencedirect.com/topics/immunology-and-microbiology/ лейкоциты

Накопление эозинофилов и Т-лимфоцитов в легких после воздействия сосновой пыли

Реферат

Было доказано, что воздействие древесной пыли в деревообрабатывающей промышленности вызывает ряд респираторных заболеваний.Целью этого исследования было изучить клеточные эффекты в жидкости бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ) и периферической крови здоровых людей, подвергшихся воздействию сосновой пыли.

Одиннадцать здоровых добровольцев подвергались воздействию сосновой пыли в течение 1 часа в камере для экспонирования всего тела. Жидкость БАЛ и клетки крови подсчитывались по-разному, а экспрессия маркеров активации, адгезии и субпопуляции на альвеолярных макрофагах и Т-лимфоцитах определялась за 2-6 недель до и через 20 часов после воздействия.

После воздействия пыли сосновой древесины общая концентрация клеток в БАЛ увеличилась с 81,4 (64,1–97,5) × 10 6 клеток · L −1 (медиана (межквартильный размах)) до 195,3 (154,6–341,2) × 10 6 ячеек · L -1 . Концентрация Т-лимфоцитов в БАЛ увеличилась с 3,8% (3,5-6,5%) до 7,6% (4,9-11,2%), а концентрация эозинофилов в жидкости БАЛ с 0,0% (0,0-0,2%) до 1,8% (0,6-3,5%). .

Вдыхание сосновой пыли приводит к привлечению воспалительных клеток в дыхательные пути здоровых людей.Увеличение количества эозинофилов, Т-лимфоцитов и тучных клеток, , т.е. клеток, имеющих решающее значение для воспаления дыхательных путей, в легких может быть связано с повышенным риском развития респираторных заболеваний у плотников.

Промышленное использование древесины — важная часть шведской экономики, в которой занято 1,5% трудоспособного населения (в 2001 г.), включая рабочих на лесопилках, столярных мастерских, а также в бумажной и мебельной промышленности (Статистическое управление Швеции, Стокгольм, Швеция). ).Поэтому проблемы со здоровьем, связанные с окружающей средой работников деревообработки, являются важной проблемой. Было показано, что постоянное воздействие древесной пыли связано с различными клиническими симптомами. Он не только вызывает респираторные заболевания в верхних и нижних дыхательных путях 1-3, но также, как было показано, способствует развитию контактного дерматита из-за контактной аллергии на колофонию 4, 5 и рака носа 6, 7.

Древесная пыль образуется при различных операциях в деревообрабатывающей промышленности.Уровни подверженности различаются между отдельными рабочими местами, а также между различными задачами на одном рабочем месте. Обследование уровней воздействия в деревообрабатывающей промышленности Швеции показало, что самые высокие уровни наблюдаются во время таких операций, как пиление, осмотр и полировка, с общим уровнем пыли 0,2–4,1, 0,4–5,6 и 0,3–7,3 мг · м −3 , соответственно 8. Рабочие, подвергавшиеся воздействию древесной пыли в этих пределах, страдают различными респираторными симптомами. Могут ли другие агенты в окружающей среде обработки древесины, такие как терпены, быть ответственными за наблюдаемые симптомы, также было предметом обсуждения 1, 9, 10.

Целью этого исследования было выяснить, есть ли воспалительная реакция в дыхательных путях и изменения в клетках крови здоровых людей после воздействия пыли сосны. Воспалительная реакция будет поддерживать связь между воздействием и респираторными симптомами и последующим заболеванием. 11 испытуемых подвергались воздействию пыли сосновой древесины с общей концентрацией 5,5 мг · м −3 (медиана) в течение 1 часа с использованием камеры для воздействия на все тело 11.Бронхоскопия с бронхоальвеолярным лаважем (БАЛ) проводилась за 2–6 недель до и через 1 день после воздействия. Клетки БАЛ анализировали с помощью дифференциального подсчета, а фенотипический анализ альвеолярных макрофагов (АМ) и Т-лимфоцитов из БАЛ жидкости и периферической крови выполняли с помощью проточной цитометрии.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Субъектов

В исследовании приняли участие одиннадцать здоровых добровольцев (восемь женщин) со средним возрастом 25 (диапазон 22–51) лет.Девять никогда не курили, а двое бросили курить более 10 лет назад (субъекты №№ 3 и 9). Все субъекты прошли медицинское обследование, включая рентгенографию грудной клетки и обычный анализ крови, за 2 недели до исследования. Ни у кого не было инфекций дыхательных путей в течение месяца, предшествующего исследованию, и ни у кого в анамнезе не было заболеваний дыхательных путей. Ни у одного из испытуемых не было атопии в анамнезе, и у всех испытуемых были отрицательные результаты тестов на радиоаллергосорбент, специфичных для сосны и ели.Уровни сывороточного иммуноглобулина Е были <120 ЕД -1 для всех, кроме одного человека (субъект № 7: 300 ЕД -1 ). Участники дали свое информированное согласие, и местный комитет по этике Каролинской больницы (Стокгольм, Швеция) одобрил исследование.

Воздействие сосновой пыли

Сосновая пыль, использованная во время экспозиций, была взята из вытяжной коробки, подключенной к шлифовальной машине производителя деревянных половиц (Раппго, Браос, Швеция).Пыль просеивали (100 мкм) и хранили в аргоне перед экспонированием. Испытуемые подвергались воздействию сосновой пыли в течение 1 часа в камере для облучения всего тела, построенной и сконструированной специально для равномерного и непрерывного образования переносимой по воздуху пыли 11. На основе шведского порогового значения для древесной пыли (2 мг · м ). −3 (общая пыль) за 8-часовой рабочий день), концентрация пыли в воздухе ∼5 мг · м −3 (общая пыль) была выбрана в качестве подходящего уровня воздействия. Перед воздействием древесную пыль анализировали на наличие живых микробов.Присутствие терпенов в переносимой по воздуху пыли анализировалось во время экспонирования. Все экспозиции проводились с воздухообменом, в результате которого воздух в камере заменялся 12 раз в час.

Во время экспонирования образцы пыли были собраны в двух местах, близких к зоне дыхания, по обе стороны от объекта. Общая пыль отбиралась в 37-миллиметровые открытые кассеты (держатель Millipore; Millipore, Бедфорд, Массачусетс, США), а вдыхаемая пыль (определенная Европейским комитетом по стандартизации (CEN) (1993)) отбиралась с помощью пробоотборников Института медицины труда. (SKC, Blandford Forum, Великобритания).Для обоих пробоотборников расход составлял 2 л · мин -1 . Вдыхаемая пыль, определяемая как взвешенные в воздухе частицы диаметром <5 мкм, , т.е. размер частиц пыли, которые собирает пробоотборник с эффективностью 50% 12, отбиралась с помощью циклонов (Casella SIMPEDS; Casella London, Лондон, Великобритания) при потоке расход 1,9 л · мин −1 . Все пробы пыли собирали на мембранных фильтрах из смешанных эфиров целлюлозы с размером пор 0,8 мкм для общей и вдыхаемой пыли и 8,0 мкм для вдыхаемой пыли (Millipore, Billerica, MA, USA) и взвешивали на микровесах в помещение для взвешивания с контролируемой средой (относительная влажность 55% при 21 ° C) до и после отбора проб.Объем форсированного выдоха за одну секунду (ОФВ1) регистрировали до воздействия, сразу после и непосредственно перед второй бронхоскопической процедурой на следующий день после воздействия. ОФВ1 выражали в процентах от прогнозируемого значения в соответствии с рекомендациями Европейского респираторного общества 13.

Процедура бронхоальвеолярного лаважа и обращение с клетками

Бронхоскопия с БАЛ выполнялась за 2–6 недель до и на следующий день после воздействия.Процедура бронхоскопии была выполнена, как подробно описано в другом месте 14. Вкратце, после предварительного лечения морфином и гиосцином бронхоскопия была проведена под местной анестезией с использованием гибкого фиброоптического бронхоскопа (Olympus BF Type P20 / 30/40; Olympus Optical Co., Токио, Япония). Бронхоскоп вклинивали в субсегментарный бронх в средней доле и в пять аликвот по 50 мл каждая закапывали общий объем 250 мл стерильного фосфатно-солевого буфера (PBS; pH 7,4) при 37 ° C. После закапывания жидкость осторожно аспирировали и собирали в силиконизированную пластиковую бутылку, хранящуюся на льду.Жидкость BAL фильтровали через единственный слой дакроновых сеток (тип AP32; Millipore, Cork, Ирландия) и центрифугировали в течение 10 мин при 400 × g при 4 ° C. Клетки ресуспендировали в PBS и подсчитывали в камере Bürker, и жизнеспособность клеток определяли по исключению трипанового синего. Мазки для дифференциального подсчета готовили цитоцентрифугированием (Cytospin 2; Shandon, Runcorn, UK) в течение 3 минут при 22x g . После окрашивания May-Grünwald Giemsa было подсчитано 500 клеток и после окрашивания толуидином / гематоксилином было определено количество тучных клеток в 10 полях зрения (увеличение 16x).

Во время бронхоскопии было взято

образцов венозной крови, и дифференциальный подсчет клеток был определен путем автоматического подсчета с использованием гематологической системы Advia 120 (Bayer Diagnostics, Tarrytown, NY, USA). Моноцитарные клетки периферической крови отделяли от гепаринизированной цельной крови градиентным центрифугированием Ficoll Hypaque (Amersham Pharmacia Biotech, Уппсала, Швеция), дважды промывали и разбавляли PBS.

Иммунофлуоресценция и проточная цитометрия

Иммуномечение AM проводили с использованием первичных неконъюгированных моноклональных антител мыши, специфичных к CD11a (маркер адгезии; Dako, Glostrup, Дания), CD14 (липополисахаридный рецептор; Dako), CD16 (FcγRIII; Dako), CD86 (костимуляторный маркер; Serotec , Оксфорд, Великобритания) и человеческий лейкоцитарный антиген (HLA) класса II (маркер активации; Dako).Соответствующие изотипу контрольные мышиные иммуноглобулины (Dako) использовали для определения неспецифической фоновой флуоресценции. Для каждого анализа 5 × 10 5 клеток жидкости BAL инкубировали с насыщающим количеством первичного антитела в течение 30 мин при 4 ° C в темноте. После двух промывок PBS клетки окрашивали вторичным R-фикоэритрином (RPE) -конъюгированным F (ab ‘) 2 кроличий иммуноглобулин G антимыши (Dako) в течение 30 минут. Клетки дважды промывали, ресуспендировали в Cellfix (Becton Dickinson, Mountain View, CA, USA) и держали на льду до анализа проточной цитометрии на следующий день.

Для анализа субпопуляций Т-клеток и экспрессии маркеров активации Т-клеток 2 × 10 5 лимфоцитов из жидкости БАЛ или периферической крови окрашивали насыщающим количеством непосредственно меченных моноклональных антител мыши. Конъюгированные с RPE анти-CD8 и конъюгированные с RPE / цианином Cy5 антитела к CD4 (Dako) были одновременно добавлены вместе с конъюгированными с флуоресцеин-изотиоцианатом анти-CD3 (Dako), анти-CD69 (очень ранняя активация; Becton Dickinson, San Хосе, Калифорния, США) или антитела против HLA-DR (поздняя активация; Дако).После инкубации в течение 30 минут при 4 ° C в темноте клетки дважды промывали PBS, ресуспендировали в Cellfix и оставляли на льду в течение ночи перед анализом проточной цитометрии.

Образцы анализировали в проточном цитометре FACSCalibur (Becton Dickinson, Mountain View, CA, USA), и популяции клеток идентифицировали и регистрировали с помощью их светорассеивающих свойств. Внутри ворот макрофага было собрано 10000 клеток, и экспрессия каждого поверхностного маркера была определена как средняя интенсивность флуоресценции после вычитания интенсивности фоновой флуоресценции.Для лимфоцитов рассчитывали процент положительно меченых клеток в подгруппах CD4 + и CD8 +, соответственно. Окрашивание подобранными по изотипу антителами отрицательного контроля составляло <1% проанализированных клеток во всех экспериментах.

Анализ жидкости бронхоальвеолярного лаважа

Катионный белок эозинофилов в БАЛ (ECP) измеряли с помощью коммерчески доступного флюоро-иммуноанализа, Pharmacia ECP CAP System FEIA (Pharmacia Diagnostics, Упсала, Швеция).Уровни ECP <1 мкг · л -1 считались отрицательным результатом.

Статистический анализ

Данные представлены как медианы с межквартильным размахом, если не указано иное. Для сравнения значений, полученных до и после воздействия у одного и того же человека, использовался критерий согласованной пары Вилкоксона.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Данные о древесной пыли и уровни воздействия

Микроскопический анализ древесной пыли перед экспонированием показал, что около 95% было получено из соснового леса, и только следовые количества были получены из домашних цветочных деревьев.Определение аэродинамического размера частиц в воздухе показало два вида частиц, ∼8 и ∼25 мкм (рис. 1⇓). Концентрация терпена в пыли сосновой древесины была ниже предела обнаружения используемого метода (<0,02 мг · м −3 ) и намного ниже порогового значения (150 мг · м −3 ). Роста бактерий не обнаружено.

Рис. 1–

Распределение аэрозольной пыли сосновой древесины по размерам, измеренное в камере экспонирования с использованием каскадных ударных элементов при 2 л · мин -1 15. Пунктирные вертикальные линии показывают пики двух видов частиц, при ∼8 и ∼25 мкм.

Концентрации пыли в камере во время экспозиций, измеренные как общая пыль, вдыхаемая пыль и вдыхаемая пыль, составляли 5,5 (5,4–6,0), 6,8 (6,7–7,4) и 1,0 (0,9–1,1) мг · м –3 , соответственно.

Данные о функции легких и количестве клеток в жидкости бронхоальвеолярного лаважа

Показатели спирометрии до и сразу после воздействия не различались. Однако ОФВ1 имеет тенденцию к снижению с 97 (93–111)% до 95 (92–107)% до следующего дня после воздействия сосновой пыли (p = 0.055).

Извлечение жидкости из БАЛ и жизнеспособность клеток составляли> 70 и> 90% соответственно и не различались до и после воздействия. Воздействие сосновой пыли значительно увеличивало общее количество клеток в жидкости БАЛ (таблица 1). Процент лимфоцитов и эозинофилов в жидкости БАЛ значительно увеличился (рис. 2⇓), тогда как процент AMs соответственно снизился. Более того, воздействие сосновой пыли приводило к увеличению количества тучных клеток в жидкости БАЛ (таблица 1).В периферической крови наблюдалось значительное снижение количества лимфоцитов и эозинофилов (рис. 2⇓) и увеличение числа нейтрофилов, тогда как количество моноцитов и базофилов оставалось неизменным (таблица 1⇓). Общий процент лейкоцитов в периферической крови остался прежним после воздействия сосновой пыли.

Рис. 2—

Процентное содержание: а, б) лимфоцитов и в, г) эозинофилов, в а, в) жидкости бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ) и б, г) периферической крови. Образцы БАЛ и крови были взяты у 11 здоровых добровольцев за 2–6 недель до и через 1 день после 1-часового воздействия древесной пыли.Различные линии представляют отдельных пациентов. # : р = 0,188; : p = 0,186; ***: p <0,001.

Таблица 1–

Количество клеток в жидкости бронхоальвеолярного лаважа (БАЛ) и периферической крови 11 здоровых людей до и после 1-часового воздействия древесной пыли

Уровни

ТЭК в БАЛ были проанализированы у шести испытуемых и не были обнаружены до воздействия пыли (<2 мкг · л -1 ). После воздействия у двух человек (субъекты № 3 и 11) наблюдались повышенные уровни (2.3 и 3,6 мкг · л -1 соответственно).

Фенотип альвеолярных макрофагов

Воздействие пыли сосновой древесины привело к изменению фенотипа AM в жидкости БАЛ. После воздействия было обнаружено, что популяция AM стала меньше и менее гранулированной, о чем свидетельствует значительное уменьшение средней интенсивности флуоресценции как для бокового (p <0,001), так и для прямого (p <0,001) разброса (рис. 3). Экспрессия липополисахаридного рецептора CD14 значительно увеличилась после воздействия (p <0.001) (рис. 4⇓). Более того, костимулирующие маркеры CD11a и CD86 и маркер активации HLA-DR показали снижение уровня экспрессии (p <0,001, p = 0,019 и p <0,001, соответственно) после воздействия пыли сосновой древесины, тогда как экспрессия CD16 в AM не наблюдалась. существенно изменится (рис. 4⇓).

Рис. 3—

Проточно-цитометрический гистографический анализ клеток жидкости бронхоальвеолярного лаважа от одного репрезентативного человека (№ 9), показывающий: a) прямое рассеяние (FSC) и b) боковое рассеяние (SSC) за 2–3 недели до (––– -) и через 1 день после (········) 1-часового воздействия древесной пыли.

Рис. 4–

Экспрессия альвеолярных макрофагов (средняя интенсивность флуоресценции (MFI)): a) CD14, b) CD16, c) CD11a, d) CD86 и e) лейкоцитарного антигена человека (HLA) -DR 2–6 недель до и через 1 день после 1-часового воздействия древесной пыли. Различные линии представляют отдельных пациентов. нс: незначительно; # : р = 0,019; ***: p <0,001.

Фенотип лимфоцитов

Процент CD4 + Т-клеток жидкости БАЛ, экспрессирующих маркер ранней активации CD69, значительно снизился с 73.От 4% (57,8–79,6%) до 60,8% (44,6–68,9%) после (p = 0,0078) воздействия, тогда как остальные фенотипические данные Т-клеток ЖБАЛ (CD4, CD8 и HLA-DR) не показали какие-либо существенные изменения. Анализ лимфоцитов периферической крови не выявил каких-либо значительных изменений в экспрессии CD69 или HLA-DR на CD4 + или CD8 + Т-клетках после воздействия пыли сосновой древесины. Кроме того, соотношение CD4 / CD8 осталось неизменным как в БАЛ, так и в периферической крови.

Обсуждение

В настоящем исследовании здоровые люди подвергались воздействию сосновой пыли в течение 1 часа в экспозиционной камере.До и после воздействия проводился дифференциальный подсчет клеток, а также фенотипический анализ как для жидкости БАЛ, так и для клеток крови. Полученные данные свидетельствуют о том, что воздействие сосновой пыли приводит к привлечению эозинофилов и лимфоцитов из крови в легкие. После воздействия также было отмечено значительное увеличение количества тучных клеток в ЖБАЛ, а также увеличение общего количества клеток ЖБАЛ. Фенотипический анализ AM показал измененный фенотип AM, соответствующий увеличению доли менее активированных и менее дифференцированных моноцитов.

Воздействие древесной пыли может быть недооцененной проблемой профессионального здоровья, поскольку в одной только Швеции в отраслях, где используется древесина, занято более 60 000 человек. Известно, что постоянное воздействие древесной пыли увеличивает риск заболевания дыхательных путей 1–3, контактного дерматита 4, 5 и рака носа 6, 7. В недавнем исследовании Douwes et al. 16, у рабочих лесопилки сосны чаще наблюдались респираторные симптомы, включая симптомы астмы и кашля, а также раздражение глаз и носа.Воздействие пыли, в том числе древесной пыли, также может повышать риск развития хронической обструктивной болезни легких. 17. К другим категориям специалистов, подвергающимся воздействию древесины, относятся учителя деревообработки, которые, как было доказано, демонстрируют более высокую частоту появления симптомов кожи, носа, горла. и нижних дыхательных путях, чем здоровые люди из контрольной группы 2. В настоящем исследовании здоровые люди подвергались воздействию древесной пыли с уровнями, аналогичными тем, о которых ранее сообщалось в реальной жизни во время работы с древесной пылью 8.

Одной из распространенных проблем со здоровьем у плотников является астма 16.Интересно, что в настоящем исследовании было обнаружено, что эозинофилы, тучные клетки и лимфоциты (, т. Е. клеток, жизненно важных для развития астматической воспалительной реакции), в частности, накапливаются в легких после воздействия сосновой пыли 18. Для эозинофилов. и лимфоцитов, в периферической крови наблюдалось сопутствующее снижение количества клеток, что дополнительно указывает на заметный сдвиг этих клеток из крови в жидкость БАЛ. Считается, что эозинофилы мигрируют в легкие в ответ на хемотаксические медиаторы, такие как, в частности, эотаксин, а также хемотаксические пептиды-3 и -4 моноцитов и RANTES (регулируются при активации, экспрессируются и секретируются нормальные Т-клетки) 19.Хотя эотаксин в основном продуцируется эпителиальными клетками в ответ на цитокины типа 2 Т-хелперных клеток (Th), такие как интерлейкин (IL) -5 и -13, хематрактанты моноцитарного хемотаксического пептида -3 и -4 и RANTES продуцируются в основном моноцитами. / макрофаги при активации. AM также были обнаружены в более высоком общем количестве после воздействия пыли сосновой древесины, хотя они выражали более низкую интенсивность маркеров активации, что свидетельствует о пониженном статусе активации. Однако измененный фенотип AM и клеточный состав указывают на приток большего количества моноцитоподобных клеток в жидкость BAL, и моноциты могут обладать высокой способностью продуцировать хемоаттрактантные медиаторы.Увеличение количества эозинофилов в БАЛ в двух из шести случаев сопровождалось повышенными уровнями ТЭК, что свидетельствует об усилении активации локально накопленных эозинофилов после воздействия пыли. Таким образом, можно предположить, вызывает ли долгосрочный эффект воздействия сосновой пыли у некоторых людей накопление активированных эозинофилов, что может способствовать более высокой распространенности астмы у рабочих деревообрабатывающей промышленности. Роль Т-лимфоцитов при астме влечет за собой активацию Т-лимфоцитов с повышенной выработкой цитокинов Th3, в частности, IL-4, -5 и -13.В настоящем исследовании после воздействия пыли сосновой древесины было обнаружено значительно увеличенное количество Т-лимфоцитов БАЛ, сопровождающееся значительным снижением количества Т-лимфоцитов периферической крови. Кроме того, было значительно уменьшено количество CD69-положительных CD4 + Т-лимфоцитов в БАЛ после воздействия, что, скорее всего, вызвано притоком в легкие большого количества CD69-отрицательных CD4 + Т-лимфоцитов периферической крови. Таким образом, были явные признаки притока CD4 + Т-лимфоцитов в легкие после воздействия пыли сосновой древесины, что указывает на потенциально специфическую местную иммунную реакцию.Однако какая-либо особая роль этих клеток остается неясной, тем более, что здесь не анализировались цитокины.

Предыдущие исследования воздействия твердых частиц с использованием камеры для всего тела выявили признаки воспаления дыхательных путей со значительным увеличением количества AM, в частности, после воздействия пшеничной муки 20. Более того, у здоровых людей, подвергшихся воздействию крахмала, наблюдались сильные признаки накопления эозинофилов в легких после воздействия, эозинофилы иногда составляют до 30% всех клеток ЖБАЛ 21.Увеличение количества эозинофилов коррелировало с повышенными уровнями ECP, указывая на активацию эозинофилов на месте после воздействия 21. Предполагаемое накопление эозинофилов в легких, вызванное крахмалом, не зависело от эотаксина, поскольку уровни эотаксина не изменились после воздействия. Важность полисахаридного компонента древесной пыли в резком накоплении эозинофилов в легких после воздействия древесной пыли остается открытой для предположений. Интересно, что целлюлозный компонент сосновой пыли, но не экстракт волокон древесной пыли, ранее был вовлечен в индукцию патологических изменений в легких, включая гранулематозное воспаление и фиброз 22.Также было показано, что (1 → 3) -β-d-глюкан, компонент клеточной стенки полиглюкозы грибов, некоторых бактерий и растений, вызывает реакцию дыхательных путей, характеризующуюся увеличением количества эозинофилов и лимфоцитов в жидкости лаважа легких и интерстиции. морских свинок 23. Сообщалось также, что древесная пыль содержит эндотоксины. Однако воздействие эндотоксинов приводит к привлечению нейтрофилов 24, что не было зарегистрировано в настоящем исследовании. Древесная пыль может также содержать терпены, которые, как было показано, увеличивают гиперчувствительность плотников 9, 10.В настоящем исследовании не удалось идентифицировать терпены в пыли, а также не было резких изменений функции легких после воздействия.

Воздействие свиной пыли приводит к острому воспалению дыхательных путей, включая накопление большого количества нейтрофильных гранулоцитов у здоровых людей 25, 26. Интересно, что хроническое воздействие среди свиноводов приводит к уменьшению воспалительной реакции, что указывает на развитие толерантности. Подобная ситуация может быть обнаружена среди людей, хронически подвергающихся воздействию древесной пыли, поскольку воспалительная реакция клеточных дыхательных путей, описанная в настоящем исследовании, не обнаруживается у плотников, которые вместо этого демонстрируют нормальный клеточный состав БАЛ, но с другими признаками альвеолярного воспаления низкой интенсивности 27.

В заключение, в настоящем исследовании описано значительное накопление эозинофильных гранулоцитов и Т-лимфоцитов, в частности, но также и тучных клеток, в легких после воздействия пыли сосны. Настоящие результаты могут быть важны для понимания воспаления дыхательных путей, распространенного среди рабочих в деревообрабатывающей промышленности.