Значение повышения МВ-креатинкиназы при различной экстракардиальной патологии | #10/18

Креатинкиназа (креатинфосфокиназа, КК) — фермент, который содержится преимущественно в клетках миокарда, скелетной мускулатуры, головного мозга, а в минимальном количестве — в щитовидной железе, легких. Повреждение клеток сопровождается выходом различных внутриклеточных компонентов в кровоток, что лежит в основе лабораторной диагностики большого ряда патологических процессов. КК обратимо катализирует фосфорилирование креатинина при помощи аденозинтрифосфата (АТФ), в результате образуется высокоэнергетическое соединение — креатинфосфат. КК представляет собой гетерогенный энзим, молекула которого состоит из двух субъединиц — В и М. Комбинации этих субъединиц образуют три различных изофермента: ММ — содержащийся в скелетных мышцах, ВВ — в головном мозге и МВ — гибридный — в сердечной мышце. В норме содержание изоферментов КК в сыворотке крови составляет: КК-ММ — 94–96%, КК-МВ — 4–6%, КК-ВВ отсутствует или обнаруживается в следовом количестве [1–3].

Повышение активности КК-МВ традиционно является диагностическим маркером острого инфаркта миокарда, что широко используется для ранней дифференциальной диагностики. Повышение более 6% от общей КК отмечается уже через 2–4 часа после начала острого болевого приступа, максимум достигается через 12–24 часа, возврат показателя к норме происходит достаточно быстро — на 3-и сутки. При расширении зоны инфаркта нормализация происходит позднее, на 4–6 сутки, в редких случаях позднее, что позволяет диагностировать пролонгированное или рецидивирующее течение. Величина повышения активности КК и КК-МВ коррелирует с размером пораженной зоны миокарда. Повышение активности КК нередко наблюдается и при острых миокардитах, но рост показателя при этом не столь велик, а продолжительность сохранения повышенных цифр значительно дольше, чем при инфаркте [2].

Высокая активность общей КК нередко встречается при травматических повреждениях и заболеваниях скелетных мышц (например, при прогрессирующей мышечной дистрофии, миопатии, дерматомиозите, столбняке), а также при заболеваниях головного мозга (шизофрении, маниакально-депрессивном психозе, эпилепсии, травмах головы), после хирургических операций, при любых видах шока, гипотиреозе.

КК может повышаться в результате приема больших доз кортикостероидов, психотропных или наркотических препаратов, алкоголя, после судорог, инъекций, тяжелой физической нагрузки и при беременности. Увеличение показателя возможно за счет хилеза пробы или гемолиза. Для тиреотоксикоза, напротив, характерно снижение уровня КК [1].

Повышение этого фермента отмечается при различной патологии: острых инфекционных заболеваниях, онкологических процессах, травмах, как у взрослых, так и у детей разных возрастных групп [4]. Наибольшее число вопросов вызывают ситуации, когда по результатам лабораторного обследования у пациента обнаруживаются значения КК-МВ, превышающие показатели общей КК. Этот феномен исследователи связывают с возможностью изоферментов находиться в разных формах с образованием различных макрокомплексов. К макрокомплексам 1-го типа относят молекулы КК-МВ или КК-ВВ, связанные с иммуноглобулином IgG или (реже) IgA. Макрокомплексы 2-го типа — это олигомерные формы митохондриальной КК-МВ [3, 5, 6].

Эти необычные соединения становятся причиной повышения значений КК-МВ, определяемого с помощью метода иммуноингибирования, который используется в большинстве клинических лабораторий. Электрофоретически можно четко увидеть различные варианты КК в виде отдельных зон. Заподозрить образование макрокомплексов следует в случаях, когда показатель КК-МВ становится более 0,5 от КК общей или превышает ее.

Такие ситуации требуют анализа причин, поскольку обнаружение олигомеров КК регистрируется, как правило, у пациентов с тяжелой патологией. В отличие от инфаркта миокарда динамическое наблюдение за уровнями КК и МВ-фракцией показывает их незначительные изменения во времени, что абсолютно не свойственно инфаркту [7].

Увеличение показателя КК-МВ может быть вследствие присутствия в крови ВВ-фракции, вплоть до превышения уровня МВ-фракции над общей КК. Подтвердить предположение можно после исследования сыворотки крови методом электрофореза. Причиной этого является особенность методики определения методом иммуноингибирования.

Он основан на иммунном ингибировании с последующим ферментативным определением КК. Реагент содержит антитела, которые специфически связываются с М-субъединицей, ингибируя ее ферментативную активность. Определяется активность В-субъединицы. Предполагается, что количество КК-ВВ в циркулирующей крови пренебрежимо мало. Определяемая данным методом активность, умноженная на два, представляет собой показатель КК-МВ.

По литературным данным, наличие макрокомплексов 1-го типа в сыворотке крови у взрослых связывают в первую очередь с сердечно-сосудистой патологией и миозитами, ассоциированными с аутоиммунными и онкологическими процессами, а также с нежелательными явлениями при приеме ряда лекарственных средств [5, 6]. Макрокомплексы 1-го типа были обнаружены в сыворотке крови больных сахарным диабетом, сепсисом, у детей с язвенным колитом и тяжелой респираторной инфекцией [6, 8].

Макрокомплексы 2-го типа выявляют при циррозах печени (у 14% больных), мелкоклеточном раке легкого, гастроинтестинальных опухолях, гепатокарциноме (у 16% больных), раке молочной железы (в 5%), опухолях предстательной железы с метастазами в печень и кости [6, 9, 10].

Их присутствие ассоциировано с высокой смертностью больных [6].

В то же время у детей были отмечены благоприятные исходы заболеваний, сопровождавшихся появлением макрокомплексов 2-го типа. Они были выявлены у новорожденных с диагнозами «кардиомиопатия», «дефекты межжелудочковой и межпредсердной перегородок», «перинатальная асфиксия» [8, 11].

Повышение КК-ВВ, сопровождающееся высокими значениями КК-МВ, отмечается не только при патологических процессах в головном мозге, но и у пациентов с солидными опухолями, мелкоклеточным раком легкого, аденокарциномами легких и толстой кишки [12].

Таким образом, повышение КК общей и КК-МВ требует оценки в соответствии с клинической картиной и особенностями пациента.

Целью данной работы было оценить частоту, диагностическое и прогностическое значение повышения КК-МВ с вероятным образованием макрокомплексов у пациентов с экстракардиальной патологией.

Материалы и методы исследования

В исследование включили 6299 пациентов с различной некоронарогенной патологией. 4099 взрослых находились на лечении в отделении реанимации и интенсивной терапии ГКБ им. С. С. Юдина ДЗ г. Москвы с января 2016 по июль 2017 г. Средний возраст их составил 59,8 ± 13,1 года. 2200 детей в возрасте от 1 месяца до 18 лет (в среднем 2,9 ± 1,9) были госпитализированы в базовые инфекционные отделения ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора с апреля 2010 по июль 2017 г. Определение активности КК-МВ осуществляли методом иммуноингибирования КК-МВ овечьими поликлональными антителами. Значения КК общей получали иммуноферментным способом с помощью оптимизированного ультрафиолетового теста. Диагноз устанавливали на основании клинической картины, результатов дополнительных обследований, проведенных в соответствии с имеющимися стандартами ведения больных. Этиологическую диагностику осуществляли методом полимеразной цепной реакции. Во всех случаях была исключена острая коронарная патология.

(adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});

После получения результатов лабораторного обследования оценивали соотношение КК-МВ/КК общая.

Статистическая обработка всех полученных данных осуществлялась на персональном компьютере с использованием программы Statistica, версия 6.1 (StatSoft Inc., США). Рассчитывали среднюю арифметическую (M), стандартное отклонение (σ), стандартную ошибку средних величин (m). Различия между рассчитанными показателями в группах оценивали по Z-критерию и критерию χ-квадрат, статистически значимыми считали при вероятности > 95% (p < 0,05).

Результаты и обсуждение

Увеличение КК-МВ выше нормального значения (от 25 U/L) и соотношения КК-МВ/КК общая более 0,5 отмечали у 47 (1,1%) взрослых пациентов и 51 (2,3%) ребенка. Среди них мужчин было 23, женщин — 24, мальчиков — 29, девочек — 22.

Из взрослых пациентов имели онкологические заболевания — 36 (76,6%, которые составили группу 1), другую патологию — 11 (23,4%, которые вошли в группу 2). Среди детей больных острой кишечной инфекцией было 32 (62,7% — группа 3), острой респираторной инфекцией — 19 (37,2% — группа 4).

В группе 1 наиболее частыми диагнозами были: колоректальный рак — 12 (33,3%), рак желудка — 8 (22,2%) и рак молочной железы — 4 (11,1%). Метастатическое поражение отмечалось у 33 (91,7%) пациентов. Чаще всего метастазы в печень — у 25 (69,4%), в легкие — у 9 (25%), в кости — у 5 (13,9%). У 18 (50,1%) пациентов были признаки диссеминированного процесса. Летальный исход в течение месяца с момента госпитализации в стационар отмечен у 18 (50%) больных. Как представлено в табл. 1, наибольшие значения МВ-КК были отмечены у пациентов с колоректальным раком, однако достоверных различий по сравнению с показателями больных онкологическими заболеваниями другой локализации мы не получили, вероятно, за счет небольшого числа пациентов в группах. В то же время превышения значений КК общей были не настолько выражены, а у некоторых пациентов оставались в пределах нормы, что свидетельствовало об образовании макрокомплексов. Соотношение КК-МВ/КК общая при колоректальном раке было достоверно выше, чем при другой онкопатологии.

В группе 2 распределение по нозологиям получилось следующее: больных циррозом печени было 5 (45,4%), с черепно-мозговыми травмами и последствиями черепно-мозговых травм — 3 (27,3%), с тяжелыми поражениями желудочно-кишечного тракта (дивертикулез сигмовидной кишки — 2, язва желудка — 1) — 3 (27,3%). Значения исследуемых показателей были ниже у пациентов с циррозом печени и заболеваниями желудочно-кишечного тракта. В то же время у этих больных соотношение КК-МВ/КК общая нередко превышало 1. Высокие цифры КК-МВ при черепно-мозговых травмах понятны, обусловлены высокими значениями КК-ВВ, учитывая методику определения, что следует помнить при обследовании таких пациентов. Летальный исход в течение месяца с момента госпитализации в стационар отмечен у 8 (72,7%) больных.

Среди детей, у которых отмечали значения КК-МВ выше верхнего предела нормальных значений (от 25 ЕД/л) и соотношение КК-МВ/КК общая более 0,5, сочетанная рота- и норовирусная этиология острой кишечной инфекции была зарегистрирована у 7 (21,9%) пациентов, энтеро- и норовирусная — у 6 (18,8%), астро- и норовирусная — у 4 (12,5%), сальмонеллез — у 5 (15,6%), ротавирусная — у 3 (9,4%), неуточненная — у 7 (21,9%).

Этиологическими факторами у пациентов с острой респираторной инфекцией были парагрипп в сочетании с респираторно-синцитиальным вирусом — у 2 (10,5%) детей, респираторно-синцитиальный вирус с аденовирусом — у 1 (5,3%), парагрипп — у 4 (21,1%), респираторно-синцитиальный вирус — у 3 (15,8%), грипп — у 3 (15,8%, h2N1 — у 2, В — у 1), неуточненная этиология — у 6 (31,6%). Пневмония была подтверждена у 8 детей (42,1%), необструктивный ларингит — у 3 (15,8%).

У большинства из этих пациентов (у 45–88%) отмечали среднетяжелое течение, у 6 (12%) — тяжелое. Как видно из табл. 3, у этих детей повышенные значения КК-МВ и КК общей были в целом ниже, чем у пациентов группы 1. Высокие значения соотношения КК-МВ/КК общая, в некоторых случаях превышающие 1, также указывали на вероятное образование макрокомплексов. На электрокардиограммах у этих детей были выявлены нарушения реполяризации в 2–3 или более отведениях со сглаженностью (у 39 пациентов — 76,5%) или инверсией зубцов Т (у 12–23,5%), снижение зубца R в стандартных отведениях — у 16 (31%), вентрикулярная экстрасистолия — у 4 (8%). В большинстве случаев были отмечены изменения по результатам ЭХО-КГ: диастолическая дисфункция одного (у 31–61%) или обоих (у 19–37%) желудочков, снижение фракции выброса левого желудочка — у 6 (12%). Изменения купировались на фоне терапии у 46 детей (90%) в течение 1–6 месяцев, а у 5 (10%) изменения на электрокардиограммах и ЭХО-КГ сохранялись длительно, в течение 1–5 лет наблюдения. У 4 детей, со слов родителей, отмечали повышенную утомляемость, плохую переносимость повседневных нагрузок. Летальных случаев среди них не было.

Сопоставляя полученные результаты в разных группах пациентов, можно сделать заключение о необходимости различной трактовки повышения КК-МВ и соотношения КК-МВ/КК общая при разной патологии. В рассмотренных случаях очевиден факт, что рост КК-МВ указывал на поражение миокарда некоронарогенного генеза при нарастании интоксикации у пациентов с онкологическими заболеваниями как за счет основного процесса, так, возможно, и вследствие нежелательных явлений от проводимой терапии. Инфекционная патология у детей была причиной изменений показателей работы сердечной мышцы как из-за непосредственного влияния возбудителей на сердечную мышцу, так и в результате интоксикации и/или водно-электролитных нарушений, что описано в литературе [4]. При дивертикулезе сигмовидной кишки и язве желудка рост КК-МВ отмечался, возможно, из-за метаболических нарушений и/или воздействия патогенной микрофлоры.

Выводы

Повышение активности изофермента КК-МВ регистрируется как у взрослых, так и у детей при различной, в том числе и некоронарогенной патологии, возможны значения, превышающие уровень активности КК общей. Соотношение КК-МВ/КК общая более 0,5 было зарегистрировано у 1,1% пациентов отделения реанимации и интенсивной терапии, указывало на образование макрокомплексов, при отсутствии возможностей эффективной терапии являлось маркером неблагоприятного исхода. В то же время при заболеваниях с благоприятным прогнозом повышение КК-МВ и образование макрокомплексов у 2,3% детей свидетельствовало о вовлечении в патологический процесс миокарда, не было ассоциировано с тяжелым течением и ростом летальности.

Литература

1. Камышников В. С. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике. М.: МЕДпресс-информ, 2009. 896 с.
2. Тиц Н. У. Клиническое руководство по лабораторным тестам. М.: Юнимед-пресс, 2003. 960 с.
3. Stein W., Bohner J., Krais J., Steinhart R., Eggstein M. Macro creatine kinase: Determination and differentiation of two types by their activation energies // Clin. Chem. 1982. Vol. 28. P. 19–24.
4. Руженцова Т. А. Диагностика и терапия поражений миокарда у детей, больных острыми кишечными инфекциями (клинико-экспериментальное исследование): автореферат дисс. … докт. мед. наук. М., 2016. 47 с.
5. Axinte C. I., Alexa T., Cracana I., Alexa I. D. Macro-creatine kinase syndrome as an underdiagnosed cause of ck-mb increase in the absence of myocardial infarction: two case reports // Rev. Med. Chir. Soc. Med. Nat. lasi. 2012. Vol. 116 (4). P. 1033–1038.
6. Ruiz Ginés M. A., Calafell Mas M. F., Ruiz Ginés J. A. et al. Macro creatine kinase: illness marker. Practical guide for the management // An Med Intern. 2006. Vol. 23 (6). P. 272–275.
7. Ткачук В. А. Клиническая биохимия. М.: Медицина, 2004. 515 с.
8. Wu A. H., Herson V. C., Bowers G. N. Jr. Macro Creatine Kinase type1 and type 2: Clinical Significance in Neonates and Children as Compared with Adults // Clin. Chem. 1983. Vol. 29 (1). P. 201–204.
9. Enooku K., Nakagawa H., Soroida Y. et al. Increased serum mitochondrial creatine kinase activity as a risk for hepatocarcinogenesis in chronic hepatitis C patients // Int J Cancer. 2014. Vol. 135. P. 871–879.
10. Chang C. C., Liou C. B., Su M. J. et al. Creatine Kinase (CK)-MB-to-Total-CK Ratio: a Laboratory Indicator for Primary Cancer Screening // Asian Pac J Cancer Prev. 2015. Vol. 16 (15). P. 6599–6603.
11. Kuint J., Pipano S., Linder N. et al. Serum macro-creatine kinase type 2 in asphyxiated newborn infants // Clin Biochem. 1993. Vol. 26 (2). P. 117–120.
12. Zeng G. Q., Zhang P. F., Deng X. et al. Identification of candidate biomarkers for early detection of human lung squamous cell cancer by quantitative proteomics // Mol Cell Proteomics. 2012. Vol. 11 [Электронный ресурс] // URL: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3433890/pdf/M111.013946.pdf (дата обращения: 10.07.2018).

---

Т. А. Руженцова*, доктор медицинских наук
Е. И. Милейкова**
А. В. Моженкова***
Ю. В. Новоженова***
О. М. Кобызева***
В. А. Дубравицкий^#
Л. Л. Гребец^##
Н. А. Мешкова^###

* ФБУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора, Москва
** Московский филиал «Медицинского университета «РЕАВИЗ», Москва
*** ГБУЗ ГКБ им. С. С. Юдина ДЗМ, Москва
^# ГБУЗ МГНПЦ борьбы с туберкулезом ДЗМ, Москва
^## ГБУЗ ГП № 52 ДЗМ, Москва
^### ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И. М. Сеченова МЗ РФ, Москва

¹ Контактная информация: [email protected]

 

Значение повышения MB-креатинкиназы при различной экстракардиальной патологии/ Т. А. Руженцова, Е. И. Милейкова, А. В. Моженкова, Ю. В. Новоженова, О. М. Кобызева, В. А. Дубравицкий, Л. Л. Гребец, Н. А. Мешкова
Для цитирования:  Лечащий врач № 10/2018; Номера страниц в выпуске: 80-83
Теги: сердце, коронарные артерии, диагностика, маркеры

Креатиназа, Креатинкиназа (Creatinase, Creatine Kinase)

Абрамов Игорь Владимирович	С 08:00:00 до 14:00:00	Массажист	Записаться
Петрушенко Людмила Николаевна	С 09:00:00 до 12:00:00	Рентгенлаборант	Записаться
Якупов Халит Асиятович	С 09:00:00 до 14:00:00	Стоматолог	Записаться
Жигарёва Ксения Юрьевна	С 10:00:00 до 21:00:00	Стоматолог-ортопед	Записаться
Калёнова Евгения Эдуардовна	С 10:00:00 до 13:00:00	Фтизиатр	Записаться
Посту Юлия Владиславовна	С 10:00:00 до 14:00:00	Гинеколог+узи	Записаться
Меркотун Галина Анатольевна	С 10:00:00 до 12:00:00	Терапевт	Записаться
Посту Юлия Владиславовна	С 10:00:00 до 14:00:00	Акушер-гинеколог	Записаться
Меркотун Галина Анатольевна	С 10:00:00 до 12:00:00	Гастроэнтеролог	Записаться
Жигарёва Ксения Юрьевна	С 10:00:00 до 21:00:00	Стоматолог-хирург	Записаться
Калёнова Евгения Эдуардовна	С 10:00:00 до 13:00:00	Пульмонолог	Записаться
Котовский Сергей Дмитриевич	С 13:00:00 до 17:00:00	Остеопат	Записаться
Ишанова Ирина Николаевна	С 13:45:00 до 19:30:00	Рентгенолог	Записаться
Быков Александр Николаевич	С 14:20:00 до 18:00:00	Врач УЗИ-диагностики	Записаться
Сыров Артур Михайлович	С 15:00:00 до 19:00:00	Стоматолог	Записаться
Пак Дмитрий Дингирович	С 15:00:00 до 17:00:00	Врач УЗИ-диагностики	Записаться
Боровских Ростислав Равильевич	С 15:00:00 до 19:00:00	Невролог	Записаться
Боровских Ростислав Равильевич	С 15:00:00 до 19:00:00	Врач УЗИ-диагностики	Записаться
Боровских Анна Вячеславовна	С 15:00:00 до 19:00:00	Косметолог	Записаться
Пак Дмитрий Дингирович	С 15:00:00 до 17:00:00	Кардиолог	Записаться
Кихаял Александр Петрович	С 16:00:00 до 19:00:00	Отоларинголог	Записаться
Пак Дмитрий Дингирович	С 17:00:00 до 20:00:00	Кардиолог	Записаться
Пак Дмитрий Дингирович	С 17:00:00 до 20:00:00	Врач УЗИ-диагностики	Записаться

Креатинкиназа-МВ (Креатинфосфокиназа-МВ, КК-МВ, КФК-МВ, Creatine Kinase-MB, CK-MB, КК-2)

Метод определения Хемилюминисцентный иммуноанализ на микрочастицах.

Исследуемый материал Сыворотка крови

Доступен выезд на дом

Онлайн-регистрация

Синонимы: МВ-изофермент креатинкиназы; КК-МВ; КФК-МВ; КК-2 Creatine Kinase-MB; CK-MB; СК-2; 

Creatine phosphokinase, CPK-MB.  

Краткое описание определяемого аналита Креатинкиназа-МВ 

Изофермент креатинкиназы, характерный для ткани сердечной мышцы. 

Катализирует обратимый перенос фосфорильного остатка с АТФ на креатин и с креатинфосфата на АДФ. Молекула креатинкиназы-МВ состоит из двух различных субъединиц — В и М. Содержится исключительно в миокарде. 

С какой целью определяют активность Креатинкиназы-МВ 

Определение активности МВ-изофермента креатинкиназы имеет большое значение при диагностике инфаркта миокарда и мониторинге постинфарктного состояния, позволяя оценить объём поражения и характер восстановительных процессов.  

Для адекватной оценки соотношения концентрации КФК-MB и общей активности креатинкиназы введён расчётный относительный индекс RI = КФК-MB (нг/мл) / КФК общ. (Ед/л) х 100 (%). Для повреждения сердечной мышцы характерен RI > 2,5 — 3%. 

Диагноз острого инфаркта миокарда подтверждается также наблюдением характерной динамики показателя, серийное определение КФК-MB с интервалом 3 часа в течение 6 — 9 часового периода при неспецифических изменениях ЭКГ более информативно, чем единичное измерение. 

Что может повлиять на результаты определения активности Креатинкиназы-МВ 

Значение активности КК-МВ зависит от метода исследования и реагентов. 

Поэтому при исследовании изменения активности креатинкиназы-МВ в динамике для сохранения преемственности результатов необходимо проводить исследования одним и тем же методом в одной и той же лаборатории. Сравнение таких результатов будет более корректным.

Биохимический анализ крови на креатинкиназу (общую)

Диагностическое направление

Системные заболевания соединительной ткани

Общая характеристика

Катализирует обратимый перенос фосфорильного остатка с АТФ на креатин и с креатинфосфата на АДФ. Содержится преимущественно в скелетной мускулатуре, миокарде, а также в гладких мышцах и головном мозге. Креатинкиназа обеспечивает потребность в большом количестве энергии в короткие интервалы времени, например, обеспечивая энергией мышечные сокращения. Активность КФК ингибируется тироксином. В детском возрасте активность креатинкиназы выше, чем у взрослых, что связано с интенсивным ростом и участием в этом процессе тканей, богатых этим ферментом — мышечной и нервной. У женщин активность КК несколько ниже, чем у мужчин. Определение КK проводится с целью диагностирования и контроля качества лечения инфаркта миокарда и миопатий (прогрессивная мышечная дистрофия Дюшена).

Показания для назначения

1. Диагностика и мониторинг инфаркта миокарда. 2. Диагностика заболеваний мышечной системы (миопатии, миодистрофии). 3. Травмы, гипотиреоз.

Маркер

Маркер нарушений и заболеваний мышечной ткани.

Клиническая значимость

Используется в диагностике и мониторинге инфаркта миокарда и миопатий, таких как прогрессивная мышечная дистрофия Дюшена.

Состав показателей:

Креатинкиназа (общая)

Метод: Спектрофотометрический
Диапазон измерений: 0-1300
Единица измерения: Единиц на литр

Референтные значения:

Возраст

Комментарии

0 Д — 2 Д

2 Д — 6 Д

6 Д — 7 М

7 М — 12 М

Выполнение возможно на биоматериалах:

Биологический материал

Условия доставки

Контейнер

Объем

Сыворотка

Условия доставки:

24 Час. при температуре от 2 до 25 градусов Цельсия

Контейнер:

Вакутейнер с разделительным гелем

Объем:

8.5 Миллилитров

Капиллярная кровь

Условия доставки:

24 Час. при температуре от 2 до 25 градусов Цельсия

Контейнер:

Микровет с активатором свертывания крови

Объем:

500 Микролитр

Правила подготовки пациента

Стандартные условия: Утром до 11. 00, строго натощак, через 8-12 часов периода голодания.Возможно: В течение рабочего дня МЛ «ДІЛА», если имеются особые указания врача.Перерыв не менее 6 часов после приема пищи (должна быть исключена жирная пища).

Вы можете добавить данное исследование в корзину на этой странице

Интерференция:

• Аминокапроновая кислота, амфотерицин В, буциндолол, каптоприл, карбеноксолон, карбромал, картеолол, хлорпромазин, клофибрат, клонидин, колхицин, циклопропан, диэтиловый эфир, гемфиброзил, галофенат, галоперидол, галотан, ловастатин, изотретиноин, лабетало

Интерпретация:

• Травма, хирургическое вмешательство, инфаркт миокарда, болезни мышц, синдром Рейе, гипотиреоз, беременность, опухоли предстательной железы, мочевого пузыря.

Для вывода актуальных данных для вашего региона

Скачайте наши приложения
для iOS и Android

Слово КРЕАТИНКИНАЗА — Что такое КРЕАТИНКИНАЗА?

Слово состоит из 13 букв: первая к, вторая р, третья е, четвёртая а, пятая т, шестая и, седьмая н, восьмая к, девятая и, десятая н, одиннадцатая а, двенадцатая з, последняя а,

Слово креатинкиназа английскими буквами(транслитом) — kreatinkinaza

Значения слова креатинкиназа.

Что такое креатинкиназа?

Креатинкиназа

Креатинкиназа I Креатинкина́за (АТФ: креатин N-фосфотрансфераза; синоним: АТФ → креатин — трансфосфатаза, фермент Ломанна) фермент класса трансфераз, подкласса фосфотрансфераз, катализирует перенос фосфорсодержащей группировки атомов…

Медицинская эциклопедия

Креатинкиназа — фермент из группы фосфотрансфераз (КФ 2.7.3.2), катализирующий реакцию обратного переноса остатка фосфорной кислоты с АТФ на креатин с образованием креатинфосфата; определение активности К. используется, напр.

Большой медицинский словарь. — 2000

Креатинкиназа — это фермент, катализирующий из АТФ и креатина высокоэнергетическое соединение креатинфосфат, который расходуется организмом при увеличенных физических нагрузках. Cодержится в клетках сердечной мышцы, скелетной мускулатуры. ..

ru.wikipedia.org

КРЕАТИНКИНАЗА — фермент, присутствующий в организме человека, позвоночных и нек-рых беспозвоночных животных; относится к классу фосфотрансфераз (киназ), катализирует реакцию обратимого переноса фосфорильного (фосфатного) остатка (НРО-4)…

Краткая медицинская энциклопедия. — М., 1989

Креатиназа, Креатинкиназа (Creatinase, Creatine Kinase)

Креатиназа, Креатинкиназа (Creatinase, Creatine Kinase) Креатиназа (Creatinase), Креатинкиназа (Creatine Kinase) — фермент, участвующий в метаболическом разложении креатина до креатинина.

Медицинские термины от А до Я

Креатиназа (Creatinase), Креатинкиназа (Creatine Kinase) фермент, участвующий в метаболическом разложении креатина до креатинина. Источник: «Медицинский словарь»

Медицинские термины. — 2000

Русский язык

Креатинкина́за, -ы.

Орфографический словарь. — 2004

---

1. краю
2. края
3. креативность
4. креатинкиназа
5. креатин
6. креатура
7. креационизм

Креатинкиназа в крови повышена причины.| CMDAUTO |

Виды креатинкиназы

Данный фермент состоит из двух структурных элементов, соотношение которых и позволяет определить локализацию этого биологически активного соединения. Именно поэтому, если креатинкиназа в крови повышена, то различают общую и органоспецифическую. В зависимости от того, насколько уровень повышен (креатинкиназа выше нормы), проводится дифференциальная диагностика различных патологических состояний.

Креатинкиназа общая коррелирует с такими патологическими процессами как:

• травма;
• ишемия;
• воспаление;
• метаболические нарушения;
• интоксикация;
• дистрофические изменения.

Креатинкиназа МВ свидетельствует о патологическом процессе в миокарде. Креатинкиназа у детей может сигнализировать о мощном повреждении мышечной ткани, кроме того, креатинкиназа МВ у ребенка может свидетельствовать об инфекционном поражении мышечной оболочки сердца.

 

Когда креатинкиназа повышена что это значит?

 

Если креатинкиназа (норма до 167-190 единиц/л) повышена, необходимо провести дополнительные исследования, чтобы выяснить причины повышения креатинкиназы.         

В соответствии с представлениями современной медицины, повышенная креатинкиназа в крови свидетельствует о:

• повреждении;
• дистрофии тканей.

Если креатинкиназа повышена, причины следует искать, прежде всего, в состоянии следующих жизненно важных органов:

• сердце;
• мышечная ткань.

Высокая креатинкиназа определяется после даже небольшого хирургического вмешательства.

Повышение креатинкиназы           регистрируется при злокачественных неопластических процессах.

Кроме того, повышение креатинкиназы в крови провоцирует прием некоторых фармакологических препаратов.

Повышение креатинкиназы в крови причины такие могут вызвать:

• гипотиреоз;
• тяжелая физическая работа.          

Нельзя не отметить, что креатинкиназа в крови повышена и у пациентов с поражениями структурных элементов центрального звена нервной системы.

В ситуациях, когда креатинкиназа повышена, причины у взрослых могут быть связаны с состоянием щитовидной железы.

 

Повышенная креатинкиназа в крови у ребенка

Если креатинкиназа повышена у ребенка, то наиболее частыми причинами являются:

• миодистрофия;
• генерализированные судороги;
• столбняк.

Кроме того, креатинкиназа в крови повышена у ребенка при интенсивных физических нагрузках.

 

Когда креатинкиназа мв повышена?

 

Миокардиальная креатинкиназа повышена, прежде всего, при любых патологических процессах, которые становятся причиной повреждения миокарда. Инфекционный миокардит может стать причиной того, что креатинкиназа мв повышена у ребенка. Кроме того, креатинкиназа мб может повышаться при застойной сердечной недостаточности.

Заказать услугу можно >>> Здесь <<<

Набор реагентов для определения креатинина (энзиматический)

Набор реагентов для определения креатинина (энзиматический)

 

КОД     981845 4 х 60 мл

КОД     981896 4 х 30 мл

Назначение

Предназначено для количественного определения in vitro содержания креатинина в сыворотке, плазме или моче человека с помощью анализаторов Konelab. Все результаты анализов следует интерпретировать с учетом клинических условий.

Общие сведения

Синтез эндогенного креатинина происходит в почках, печени и поджелудочной железе. Около 1-2% креатина, содержащегося в мышцах, ежедневно превращается в креатинин. Так как количество образующегося эндогенного креатинина пропорционально мышечной массе, уровень креатинина различается в зависимости от возраста и пола. При одинаковой скорости клубочковой фильтрации у мужчин концентрация креатинина выше, чем у женщин, у лиц с большой мышечной массой концентрация креатинина выше, чем у лиц с меньшей мышечной массой, а у молодых людей она выше, чем у пожилых. В зависимости от количества мясной пищи, поступающей в организм, уровень креатинина может колебаться в пределах 10% от его количества. Высокое содержание креатинина обнаруживается при острой и хронической почечной недостаточности, при обезвоживании.

Методика определения

Креатинин определяется энзиматическим колориметрическим методом:

Креатинин + Н2О — Креатининаза→ Креатин

Креатин + Н2О -Креатиназа→ Сакрозин + Мочевина

Сакрозин + Н2О+О2 – Сакрозин оксидаза→ Глицин + НСНО + Н2О2

Н2О2 + 4-аминофеназон + HTIB*- Пероксидаза→ Хинон имин хромоген + h3O + HI

*HTIB = 2, 4, 6-трийод-3-гидроксибензойная кислота

Форма выпуска

Реагент А:   4х 40 мл

Реагент В:  4 х 20 мл

Состав

Реагент А:

TAPS буфер, рН 8. 1                           30 ммоль/л

Креатиназа                                         ≥ 333 мккат/л

Сакрозин оксидаза                             ≥ 133 мккат/л

Аскорбат оксидаза                             > 33 мккат/л

HTIB                                                    5.9 ммоль/л

Детергенты

Консервант

Реагент В:

TAPS буфер, рН 8.0                           50 ммоль/л

Креатининаза                                      ≥ 500 мккат/л

Пероксидаза                                       ≥ 16.7 мккат

4-аминофеназон                                 2.0 ммоль/л

Калий гексацианоферрат(II)                163 мкмоль/л

Детергент

Консервант

Меры предосторожности

Только для диагностики in vitro. При работе со всеми лабораторными реагентами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности.

Приготовление

Реагенты готовы к использованию.

Примечание: перед установкой реагента на борт анализатора Konelab необходимо удостоверится в отсутствии пузырьков во флаконе и на поверхности реагента.

Хранение и стабильность

Невскрытые реагенты стабильны при температуре  2…8°C до срока годности, указанного на этикетке флакона (коробки). Информация о стабильности реагентов на борту анализатора Konelab указана в руководстве по эксплуатации прибора.

ОТБОР ПРОБ

Тип образца

Сыворотка, Li-гепаринизированная плазма, Na-ЭДТА плазма, моча.

Меры предосторожности

Работать с образцами сыворотки, мочи и плазмы человека и утилизировать их следует так, как если бы они были потенциально инфекционно-опасными.

Хранение

Образцы сыворотки и плазмы можно хранить в течение 7 дней при температуре 20…25 °C или при  температуре 4…8 °C или в течение 3 месяцев при -20 °C.

Образцы мочи можно хранить в течение 2 дней при температуре 20. ..25 °C, 6 дней при  температуре 4…8 °C или в течение 6 месяцев при -20 °C.

ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

См. справочное руководство и примечания к применению для автоматизированной процедуры вашего анализатора Konelab. На любое применение, которое не было утверждено Thermo Fisher Scientific, гарантия работы прибора не распространяется, поэтому оно должно быть проверено пользователем.

Материалы, входящие в комплект

Реагенты в соответствии с приведенным выше описанием.

Требуемые материалы, которые не входят в комплект

Моющий раствор, код 981842.

Калибратор и контрольные материалы в соответствии с приведенным ниже описанием.

Калибровка

Используйте специальный калибратор SCal код 981831 в соответствии с инструкциями, прилагаемыми к вашему анализатору Konelab.

Контроль качества

Используйте образцы для контроля качества не реже одного раза в день и после каждой калибровки, а также каждый раз, когда используется новый флакон с реагентом.

Имеющиеся средства контроля:

Сыворотка/плазма:

Nortrol, код 981043

Abtrol, код 981044

Моча:

uTrol, код 981821

uTrol High, код 981822

Интервалы и диапазон для контроля должны устанавливаться согласно индивидуальным требованиям лабораторий. Результаты анализа образцов для контроля качества должны укладываться в пределы, установленные лабораторией.

ВЫЧИСЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Результаты вычисляются автоматически анализатором Konelab с использованием калибровочной кривой.

Калибровочная кривая (пример)

ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА

Интерференция

Критерий: попадание в пределы +/- 10% от первоначального значения.

Сыворотка/плазма:

Несвязанный билирубин: интерференция не наблюдается до концентрации 400 мкмоль/л (23.4 мг/дл).

Связанный билирубин: интерференция не наблюдается до концентрации 300 мкмоль/л (17.5 мг/дл).

Гемолизат: интерференция не обнаружена вплоть до содержания 10 г/л гемоглобина.

Липемия: интерференция не обнаружена до концентрации 10 г/л Intralipid® (торговая марка Fresenius Kabi AB) или 12 ммоль/л (1062 мг/дл)  триглицеридов. Имеется слабая корреляция между мутностью и содержанием триглицеридов.

Моноклональные иммуноглобулины (или их части) могут вызывать интерференцию при анализе. Результаты, полученные для пациентов, имеющих такие антитела, должны тщательно проверяться.
Моча:

Связанный билирубин: интерференция не обнаружена вплоть до концентрации 1000 мкмоль/л (58 мг/дл)

Гемолизат: интерференция не обнаружена вплоть до концентрации 10 г/л гемоглобина в гемолизате.

Глюкоза: Интерференция не обнаружена вплоть до концентрации 139 ммоль/л (2500 мг/дл).

Аскорбиновая кислота: интерференция не обнаружена вплоть до концентрации 5.7 ммоль/ль (100 мг/дл)

Кальций добезилат и α-Метилдопа вызывают ложное занижение результатов креатинина.

 ГРАНИЦЫ НОРМ

Сыворотка/плазма:

Мужчины: 59 — 104 мкмоль/л (0,67 — 1,17мг/дл)

Женщины: 45 — 84 мкмоль/л (0,51 – 0,95 мг/дл)

Моча: (утренняя моча)

Мужчины: 3.54 – 24.6 ммоль/л (40-26 мг/дл)

Женщины:2.55 – 20.0 ммоль/л (29-226 мг/дл)

Указанные значения служат только в качестве справочных величин. Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория проверила этот диапазон или измерила соответствующий диапазон для группы населения, которую она обслуживает.

 ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ

Сыворотка/плазма:

10 — 2500 мкмоль/л (0,11 – 28 мг/дл).

Расширенный диапазон измерений после вторичного разбавления:

10 — 10000 мкмоль/л (0,11 — 113 мг/дл).

Моча:

0,5 — 40 ммоль/л (2,3 — 452 мг/дл).

Расширенный диапазон измерений после вторичного разбавления:

0,01 — 200 ммоль/л (0,11 – 2260 мг/дл).

 РАБОЧАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА

 

Предел обнаружения

Сыворотка/плазма:

2 мкмоль/л (0,02 мг/дл)

Моча:

0,002 ммоль/л (0,02 мг/дл)

 Предел обнаружения представляет собой минимальную концентрацию/активность определяемого вещества, которую можно отличить от нулевого сигнала. Она вычисляется в виде: концентрация образца с нулевым содержанием исследуемого вещества + 3 ст. откл. (внутри серии, n = 24).

Моча:

0,002 ммоль/л (0,02 мг/дл)

 Предел обнаружения представляет собой минимальную концентрацию/активность определяемого вещества, которую можно отличить от нулевого сигнала. Она вычисляется в виде: концентрация образца с нулевым содержанием исследуемого вещества + 3 ст. откл. (внутри серии, n = 24).

 Воспроизводимость

Сыворотка/плазма (мкмоль/л):

	Среднее   38		Среднее   155		Среднее   484
	SD	CV%	SD	CV%	SD	CV%
Внутрисер.	0,56	1,4	0,69	0,4	1,85	0,4
Межсер.	0,16	0,4	0,71	0,5	1,30	0,3
Общая	0,84	2,1	2,32	1,5	6,76	1,4

Воспроизводимость определялась согласно протоколу EP5-А Комитета по клиническим лабораторным стандартам США (NCCLS) при использовании анализатора Конелаб 60  20 дней с количеством измерений = 80.

 Моча (ммоль/л)

	Среднее   38		Среднее   155
	SD	CV%	SD	CV%
Внутрисер.	0,06	1,0	0,13	0,9
Межсер.	0,05	0,8	0,17	1,2
Общая	0,24	3,5	0,51	3,4

Воспроизводимость определялась согласно протоколу EP5-А Комитета по клиническим лабораторным стандартам США (NCCLS) при использовании анализатора Конелаб 60  20 дней с количеством измерений = 80.

 Сравнение метода  

В соответствии с требованиями протокола ЕР9-А Института стандартов для клинических лабораторий (CLSI) проводилось сравнение метода с коммерчески доступным энзиматическим методом.

Линейная регрессия (ммоль/л):

у = 1,10х + 0,02

r = 0,999

n = 119

Исследование проводилось на пробах с концентрацией от 1,4 до 33,2 ммоль/л.

 Моча:

В соответствии с требованиями протокола ЕР9-А Института стандартов для клинических лабораторий (CLSI) проводилось сравнение метода с коммерчески доступным энзиматическим методом.

Линейная регрессия (мкмоль/л):

у = 0,97х — 0,3

r = 0,999

n = 110

Исследование проводилось на пробах с концентрацией от 38 до 1951 мкмоль/л.

Креатиназа

— креативные ферменты

Креатиназа может катализировать гидролиз креатина с образованием мочевины и креатина. В настоящее время креатиназа обнаруживается у множества бактерий. Креатинин — конечный продукт метаболизма фосфокреатина в организме человека. Он может фильтроваться почками, а затем выводиться из крови с мочой. Нормальный диапазон содержания креатинина в сыворотке составляет от 35 до 150 мкМ, но при наличии проблем с функцией почек или мышц содержание креатинина повышается до 1000 мкМ.Следовательно, содержание креатинина в крови и моче может отражать выделительную функцию почек. По сравнению с химическим обнаружением, ферментативное обнаружение имеет больше преимуществ. Как ключевой фермент для ферментативного определения содержания креатинина, креатиназа играет очень важную роль в клиническом обнаружении функции почек.

Рисунок 1. Белковая структура креатиназы.

Источники

Основной источник креатиназы — это микроорганизмы.При решении проблемы метода измерения креатинина было обнаружено, что некоторые микроорганизмы могут использовать креатинин в качестве основного источника азота и углерода для роста. В 1937 году было впервые обнаружено, что креатинин может быть arthrobacter. Впоследствии было обнаружено, что штаммы других родов могут индуцировать креатиназу и накапливаться в клетках. Эти бактерии включают Pseudomonas, Clostridium, Flavobacterium, Bacillus, Alcaligenes и Paracoccus.

Структурные исследования

Сообщаемая микробная креатиназа состоит из одной субъединицы или двух идентичных субъединиц с молекулярной массой в диапазоне от 45 до 51 кДа. Например, молекулярная масса креатиназы P. putida var. Naraensis имеет массу 94 кДа, которая состоит из двух идентичных субъединиц по 47 кДа, каждая из которых имеет тиоловую группу, которая тесно связана с активностью креатиназы, родственной; Креатиназа в P. putida состоит из двух идентичных субъединиц, каждая с двумя доменами, называемыми Met (157), Ile (158) -Lys (159) -Ser (160), His (232), Glu (262) и Glu (358). могут быть важные остатки, катализирующие гидролиз креатина; креатиназа Alcaligenes представляет собой фермент с одной субъединицей с молекулярной массой 51 кДа.Для клонирования и экспрессии гена креатиназы использовали методы молекулярной биологии, и все рекомбинантные ферменты представляли собой ферменты с одной субъединицей с молекулярной массой в диапазоне от 42 до 50 кДа.

Влияние ионов металлов и химических реагентов на активность креатиназы

Сообщалось о влиянии ионов металлов и химических реагентов на активность креатиназы, что креатиназа из различных источников может полностью подавляться 1 мМ Hg ²⁺ , Cu ²⁺ и Zn ²⁺ . Каждая субъединица фермента имеет тиоловую группу. Эта группа тесно связана с активностью креатиназы. Хотя реакции на ионы металлов различаются, все изученные CRE не имеют активатора ионов металлов. Кроме того, хелатирующий агент с металлами не влияет на активность фермента, что указывает на то, что фермент не является металлоферментом.

Приложения

Креатиназа широко используется для клинического определения содержания креатинина. Производство и экскреция креатинина в сыворотке относительно стабильны, поэтому определение концентрации креатинина в сыворотке может более точно отражать функцию клубочков, чем концентрацию мочевины в сыворотке.Поэтому точное определение креатинина сыворотки очень важно для клинической диагностики, наблюдения терапевтического эффекта и прогноза. В настоящее время большинство методов измерения креатинина — это аварийное биохимическое оборудование (электродный метод) и автоматическое биохимическое оборудование (ферментативный метод или метод скорости Яффе). Эти три метода имеют разные принципы измерения и также зависят от неспецифических веществ. Вначале в клинике широко использовались методы определения креатинина, в основном, химические методы.Этот метод в основном основан на реакции Яффе, то есть метилен креатинина реагирует с пикриновой кислотой в щелочных условиях с образованием красного комплекса. Его концентрацию можно определить колориметрическим методом. Однако метод химического обнаружения неспецифичен и имеет низкую чувствительность, что ограничивает его применение в клиническом определении.

Ссылка

1. Kha и Wolfgang W. Высокочувствительный амперометрический датчик креатинина. Analytica Chimica Acta , 1997, 351: 151-158.

Определение креатиназы в Медицинском словаре

Мы использовали ферментативный метод измерения креатинина, основанный на превращении креатинина с помощью креатининазы, креатиназы и саркозиноксидазы в глицин, формальдегид и перекись водорода.

Креатиназа [креатинамидиногидролаза (EC 3. 5.3.3)] превращает креатин в саркозин и мочевину (1-3).

Одним из этих ферментов является креатиназа, индуцибельный фермент, экспрессируемый в бактериях, когда креатинин является основным источником углерода или азота (17-22).

Креатинин: Этот ферментативный метод основан на превращении креатинина с помощью креатининазы, креатиназы и саркозиноксидазы в глицин, формальдегид и перекись водорода. Креатинин в моче был измерен модифицированным кинетическим методом Яффе в 1988-2006 гг. Ферментативный (креатиназный) метод в 2007-2008 гг. (NCHS 2010a). Концентрацию креатинина в моче измеряли с помощью анализа Creatinine Plus Assay, который представляет собой сопряженную ферментативную реакцию с использованием креатининазы, креатиназы и саркозиноксидазы (Roche Diagnostic, Индианаполис, Индиана).Затем креатин превращается в саркозин и мочевину с помощью креатиназы. Саркозиноксидаза превращает саркозин в глицин и перекись водорода, а перекись водорода реагирует с хромофором HTIB (2,4,6-трийод-3-гидроксибензойная кислота) за счет использования пероксидазы для получения продукта хромогена хинонимина, измеренного при 546 нм ( Этот метод основан на той же последовательности реакций, что и метод креатинин-PAP (феноламинофеназон) (29), состоящий из 4 последовательных ферментативных стадий через креатининазу, креатиназу, саркозиноксидазу и пероксидазу, но с использованием другого хромофор (2,4,6-трийод-3-гидроксибензойная кислота) и модифицированный моющий состав. Ферментативный метод основан на определении саркозина после преобразования креатинина с креатининазой, креатиназой и саркозиноксидазой. Знать лабораторные аналитические методы (например, Яффе против креатиназы) для оценки функции почек (креатинин, азот мочевины, скорость клубочковой фильтрации Один из методов основан на сочетании ферментативных биоанализов с использованием креатининазы, креатиназы и саркозиноксидазы и электрофоретического разделения и амперометрического определения продуктов реакции (46).

Повышенная термостабильность креатиназы из Alcaligenes Faecalis за счет беспристрастного филогенетического мутагенеза на основе консенсуса | Microbial Cell Factories

Клонирование, экспрессия и характеристика гена afCR дикого типа

Креатиназа используется в качестве ключевого фермента для ферментативного измерения креатинина, который катализирует гидролиз креатина до саркозина и мочевины. Он был обнаружен у различных видов бактерий, таких как Flavobacterium , Pseudomonas , Arthrobacter и Bacillus [6, 28, 30, 31, 32]. В этой работе мы проанализировали последовательности семейств креатиназ на основе филогенетического дерева (дополнительный файл 1: рис. S1) и нашли ген креатиназы из Alcaligenes faecalis в базе данных NCBI. Сравнение его аминокислотной последовательности между креатиназой из Pseudomonas, Flavobacterium, и креатиназой Arthrobacter показало примерно 60% гомологии. Мы амплифицировали ген af CR и клонировали его в вектор экспрессии pANY1. Рекомбинантная ДНК была экспрессирована в E.coli BL21 (DE3), затем очищали аффинной хроматографией и определяли его активность. Результаты ферментативной характеристики af CR показали максимальную активность 14 Ед / мг (активность определяли с использованием фермента 1 мг / мл при 37 ° C) и более низкое значение K _M (23,6 мМ), обеспечивая новый источник креатиназы для ферментативного определения креатинина.

Влияние температуры, pH и ионов металлов на активность afCR дикого типа

Чтобы дать начальную характеристику оптимальной температуры для дикого типа af CR (WT), мы сначала исследовали его активность в диапазоне температур 25–55 ° C. Мы обнаружили, что активность WT постепенно увеличивалась от 30 до 37 ° C, но быстро инактивировалась при более высоких температурах, что указывает на то, что 37 ° C является оптимальной температурой для реакций и CR (рис. 2а). Поэтому мы исследовали активность WT в диапазоне значений pH реакции (4,5–10,0), чтобы определить, при каких значениях она действует наиболее эффективно (рис. 2b). Результаты показали заметное изменение активности в этом диапазоне, неуклонно увеличивающееся до pH 8,0, после чего скорость относительной активности f CR снижалась, при этом более 50% максимальной активности наблюдались при широком плато pH между 7.5 и 9.0. Таким образом, эти результаты продемонстрировали, что pH 8,0 и 37 ° C были оптимальными условиями для реакций и CR.

Рис. 2

a Температурно-зависимый профиль активности дикого типа af CR (WT), определенный при pH 8,0 в течение 60 мин. b Влияние pH на активность WT, определенное при 37 ° C в течение 60 мин. c Влияние нескольких ионов металлов на активность WT. d Профиль термической инактивации af CR-M0 при 55 ° C

Для исследования влияния ионов металлов на стабильность фермента WT af CR, WT индивидуально инкубировали с эквимолярными концентрациями Co ^2+. , Fe ²⁺ , Fe ³⁺ , Mn ²⁺ , Zn ²⁺ , Ca ²⁺ , Mg ²⁺ , Cu ²⁺ и Na ⁺ .WT показал различную чувствительность к ионам металлов (рис. 2в). В частности, ионы Mn ²⁺ и Mg ²⁺ усиливали активность WT af CR. В присутствии EDTA, Fe ³⁺ , Fe ²⁺ , Ca ²⁺ WT сохраняли> 80% своей исходной активности, что мало влияло на активность afCR; Напротив, ионы Cu ²⁺ , Co ²⁺ , Zn ²⁺ и Na ⁺ ингибировали активность WT в различной степени.

В частности, мы наблюдали, что присутствие Cu ²⁺ оказывает значительное ингибирующее действие на активность afCR, что аналогично другим предыдущим сообщениям о креатиназе [2, 33]. В предыдущих исследованиях сообщалось, что инактивация ферментов, вызванная ионами металлов, может быть связана с агрегацией белков [34]. Однако в наших экспериментах агрегация afCR не наблюдалась. Мы предположили, что Cu ²⁺ может взаимодействовать с некоторыми ключевыми аминокислотными остатками и приводить к потере каталитической активности afCR. Однако подробный механизм этого эффекта требует дальнейшего изучения.

Метод непредвзятого филогенетического консенсуса выявляет 21 целевой консенсусный остаток для мутагенеза

Чтобы использовать метод беспристрастного филогенетического консенсуса для идентификации конкретных остатков, которые наиболее эффективно улучшают термостабильность посредством мутации, мы использовали из CR дикого типа. как запрос для поиска белков blastP в базе данных NCBI.Этот поиск дал 45 последовательностей CR со сходством последовательностей более 50% (дополнительный файл 1: таблица S1) по сравнению с и CR дикого типа. Затем мы выровняли эти последовательности и удалили дубликаты, а также последовательности, которые были слишком длинными или слишком короткими. Окончательный набор из 24 гомологичных последовательностей CR был выбран для построения филогенетического дерева. Чтобы уменьшить смещение ветвей, которое может быть внесено в базу данных из-за чрезмерного представительства семейства, мы разработали беспристрастный метод филогенетического консенсуса, основанный на филогенетических отношениях.С этой целью мы сначала построили филогенетическое дерево, соединяющее соседей, и определили длины ветвей для каждой последовательности, представляя эволюционное расстояние между гомологичными последовательностями CR как отношение количества неидентичных пар остатков к минимальной длине последовательности ( Рис. 3 и Дополнительный файл 1: Рис. S4).

Рис. 3

Филогенетическое дерево 24 гомологов креатиназы. Соседнее филогенетическое дерево из 24 гомологичных белковых последовательностей креатиназы (идентичность> 50%), построенное с использованием MEGA 7. 0. Ветвь последовательности запроса BAA88830.1 из Alcaligenes faecalis обозначена красным цветом

Таким образом, филогенетическое дерево служит моделью для дивергенции CR, вызванной эволюционным давлением, с длинами ветвей, используемыми для расчета веса каждой последовательности. Таким образом, использование весов ветвей обеспечивало статистическую независимость между различными последовательностями белка, что позволяло идентифицировать консервативные целевые остатки путем оптимизации частоты встречаемости аминокислотных остатков (таблица 1).Мы использовали собственный консенсусный скрипт wi.py, чтобы ввести веса ветвей при вычислении консенсусной последовательности (дополнительный файл 1: рис. S2, S4). По сравнению с запрашиваемой последовательностью дикого типа 59 из 404 аминокислотных положений были выбраны в качестве кандидатных консенсусных остатков, если они появлялись в данном положении с частотой> 40% среди выровненных последовательностей. Это согласованное пороговое значение может быть скорректировано в соответствии с методом скрининга согласованных мутантов и точностью других критериев.

Таблица 1 Консенсусная информация о дизайне и результаты экспериментальной характеризации односайтовых мутантов

Чтобы еще больше сузить пул остатков-кандидатов для мутагенеза, мы затем рассмотрели влияние на структуру белка, связанного с каждым положением 59 остатков, применяя следующие критерии: (1) замещение должно быть дальше, чем на 6 Å от активного центра, чтобы избежать нарушения катализа; и (2) мы исключили аминокислоты с боковыми цепями, которые непосредственно образуют водородные связи или солевые мостики с другими остатками, чтобы избежать снижения стабильности структуры белка.На основании этих критериев скрининга мы отобрали 21 мутацию для дальнейшей белковой инженерии с помощью мутагенеза, включая E349V, W59F, C331S, K351E, T251C, F108Y, Y109F, D73T, L162A, V340L, P20T, G58D, Q165I, L6P, V362I, T117P, D17V, T199S, V33L, C52N и K166A (положения остатков и расстояние от активного сайта см. В таблице 1).

Ранее во многих исследованиях сообщалось, что расстояния в диапазоне 5–10 Å от активных сайтов могут быть выбраны для разработки библиотеки мутагенеза [35,36,37]. Для разных ферментов оптимальные расстояния могут зависеть от их разной структуры и механизма, которые могут не совпадать. Здесь мы выбрали критерий> 6 Å на основе структурного анализа и режима стыковки с субстратом нашей креатиназы. Фактически, наша успешная разработка фермента также доказала, что это разумное соображение.

Конструирование и характеристика мутантов afCR

Основываясь на отчете о двойном мутантном варианте креатиназы I304L / F395V из Erwinia с более низким K _M , чем у фермента дикого типа [38], мы сначала исследовали эффекты введения двух несинонимичных мутаций (I304L / F395V) в WT af CR.Затем мы исследовали значение K _M для двойного мутанта (15,3 мМ) и обнаружили, что оно было ниже, чем у WT afCR (23,6 мМ), при сохранении аналогичного значения K _cat . Соответственно, вариант I304L / F395V af CR ( af CR-M0) впоследствии был использован в качестве родительского шаблона для создания дополнительных вариантов. С этой целью был сконструирован 21 консенсусный вариант на основе остатков-кандидатов, идентифицированных выше и экспрессированных в E.coli. Одиннадцать из 21 варианта показали улучшенную термостабильность по сравнению с af CR-M0 при 55 ° C с 80% или более высокой активностью по сравнению с af CR-M0 (Таблица 1). Лучший вариант D17V ( для CR-M1) показал самый высокий период полураспада при 55 ° C (150 мин), что в 12,9 раза выше, чем у для CR-M0 (рис. 2d). Термостабильность других положительных мутантов была увеличена от одного до двух раз по сравнению с таковой af CR-M0.

Фактически, в предыдущих исследованиях некоторые исследователи применяли консенсусный подход к разработке термостабильных ферментов, который показал относительно низкий уровень успеха разработки — 20–38% [39,40,41].По сравнению с другими исследованиями, в которых использовался традиционный метод консенсусного дизайна, в этой работе метод беспристрастного филогенетического консенсусного дизайна был выполнен с более высокой вероятностью успеха дизайна — 52%. Анализ этих результатов также дополнительно продемонстрировал, что дизайн непредвзятого филогенетического консенсуса является эффективным подходом и многообещающим для улучшения термостабильности большего количества ферментов.

Комбинация полезных мутаций и термостабильность комбинаторных вариантов

Для дальнейшего улучшения термостабильности af CR-M1 мы затем постепенно вводили дополнительные положительные мутации (т.е., L6P, G58D, Q165I, F108Y, Y109F, T117P, T199S, T251C, E349V и K351E) (см. таблицу 2). Мы обнаружили, что термостабильность улучшалась с последующими мутациями и что эти варианты сохраняли 80% или более высокую активность по сравнению с af CR-M1. Очевидно, что в ходе эксперимента период полураспада мутанта при 55 ° C непрерывно увеличивался с улучшением термостабильности, период полураспада некоторых мутантов становился очень длинным. Например, мутант M2-4 (D17V / T199S) имеет период полураспада ~ 700 мин при 55 ° C, что затрудняет точное измерение. Поэтому в следующем эксперименте мы установили температуру 57 ° C, чтобы уменьшить сложность нашего эксперимента.

Таблица 2 Результаты экспериментальной характеристики мультисайтовых мутантов af CR

Следовательно, среди двойных мутантов D17V / T199S ( af CR-M2-4) показал самую высокую термостабильность с периодом полураспада 210 мин при 57 ° C (~ 105 раз выше, чем у для CR-M0) (таблица 2). Затем мы использовали его в качестве шаблона для индивидуального введения других мутаций (L6P, T251C, F108Y, Y109F, K351E).Все варианты тройных мутантов показали значительное улучшение термостабильности, причем наибольшее увеличение было обнаружено у мутанта M3-4 (D17V / T199S / L6P), у которого время полужизни составляло 1258 мин при 57 ° C (~ 629 раз выше, чем у af CR-M0) (Таблица 2). Затем мы создали варианты M3-4 путем введения T251C, F108Y, Y109F и K351E соответственно. В ходе этого третьего раунда мутагенеза был получен вариант M4-2 (D17V / T199S / L6P / T251C), который показал самую высокую стабильность из всех вариантов до этого момента, i. е., , период полураспада 3371 мин при 57 ° C (в ~ 1685 раз больше, чем у для CR-M0). Все вышеупомянутые тройные и четверные мутанты сохраняли каталитическую активность, аналогичную активности af CR-M0, в дополнение к проявлению улучшенной термостабильности. Во время процесса комбинирования мы также исключили некоторые сайты мутаций, которые привели к снижению активности или не смогли значительно улучшить термостабильность, такие как D17V / G58D, D17V / Q165I, D17V / T117P и D17V / E349V.

Примечательно, что мы обнаружили, что некоторые односайтовые мутанты вместе производили синергетический эффект на термостабильность.Например, по сравнению с односайтовым мутантом D17V добавление T199S (D17V / T199S) привело к еще одному пятикратному увеличению термостабильности, тогда как только T199S привело к увеличению в 1,2 раза по сравнению с af CR-M0 (Таблица 1 ). Дальнейшая комбинация D17V / T199S с L6P дала еще одно шестикратное повышение термостабильности, тогда как одно только оно обеспечило только 1,64-кратное увеличение по сравнению с для CR-M0 (Таблица 1). Таким образом, эти результаты продемонстрировали, что эти аминокислотные остатки действуют вместе, что приводит к синергетическому улучшению термостабильности.Однако мы также наблюдали, что некоторые комбинации односайтовых мутантов приводили к антагонистическим эффектам на термостабильность. Например, по сравнению с вариантами с одной мутацией L6P (период полураспада 19 минут при 55 ° C) и G58D (период полураспада 17 минут при 55 ° C) двойной мутант L6P / G58D обладал пониженной термостабильностью (период полураспада 6 мин при 55 ° C), что даже ниже, чем у шаблона af CR-M0. Дальнейшее изучение вклада каждого из этих остатков в общую термостабильность поможет прояснить молекулярные механизмы, лежащие в основе синергетических эффектов этих мутаций, что обеспечит полезный справочник для инженерии CR посредством комбинаторного мутагенеза.

Кинетическая и термодинамическая стабильность улучшенных комбинаторных вариантов afCR

Для оценки кинетической стабильности вариантов была измерена активность в диапазоне температур (35–70 ° C), чтобы определить температуры, при которых активность фермента снижалась на 50 % через 15 мин инкубации (Т ₅₀ ¹⁵ ) (рис. 4а). Мы обнаружили, что остаточная активность M0 составила всего 7% после инкубации при 60 ° C в течение 15 минут (рис. 4a), тогда как M1 сохранил активность 40%, M2-4 и M3-4 сохранили активность 80%, M4-1 сохраняет активность 68%, а M4-2 сохраняет активность 50%.Таким образом, эти результаты показали, что T ₅₀ ¹⁵ этих вариантов был на 3,6–6,7 ° C выше, чем у af CR-M0 (Таблица 3). Примечательно, что хотя M4-1 показал самый высокий период полураспада (T _1/2 ), он имел более низкое значение T ₅₀ ¹⁵ , чем у M3-4. Поскольку T _1/2 и T ₅₀ ¹⁵ оба являются первичными индикаторами кинетической стабильности белка, этот результат также продемонстрировал, что улучшение стабильности среди комбинаторных вариантов не было связано с простыми аддитивными эффектами единичных мутаций.Однако для определения вклада каждой мутации в общий эффект на термостабильность требуется детальное исследование взаимосвязи между структурой белка и внешними условиями реакции при определении кинетической стабильности белка [42].

Рис. 4

Термоиндуцированные профили инактивации и развертывания мутантных вариантов af CR. a Профили термической инактивации для вариантов и CR. b Результаты температуры плавления для вариантов af CR.Анализ данных проводился с помощью Prometheus PR. Программа ThermControl

Таблица 3 Кинетические и термодинамические свойства мутантов af CR

Для дальнейшего изучения того, как комбинированные мутации влияют на термодинамическую стабильность, с помощью nanoDSF были определены температуры плавления (T _m ). Основополагающий принцип этого анализа заключается в том, что коэффициент излучения 350/330 нм для триптофановой флуоресценции данного белка может указывать на температуру, при которой белок разворачивается.Значения T _m для M1, M2-4, M3-4, M4-1 и M4-2 находились в диапазоне от 2 до 5,3 ° C выше, чем у af CR-M0 (рис. 4b). Интересно отметить, что в отличие от изменений кинетической стабильности, температура плавления комбинированных вариантов мутации лишь незначительно превышала температуру плавления матричного белка. В предыдущих исследованиях некоторые исследователи предположили, что разворачивающийся барьер свободной энергии и скорость разворачивания в белке являются ключевыми факторами термодинамической стабильности [43, 44]. Следовательно, хотя процесс денатурации и разворачивания фермента может быть связан, результаты четко отражают другой процесс для фермента в каталитической реакции [45], и при измерении стабильности фермента, кинетической стабильности, его следует отличать от термодинамической стабильности.

Молекулярные механизмы, лежащие в основе более высокой термостабильности, обеспечиваемой отдельными мутациями

Учитывая наши результаты для более высокотермостабильных мутантов, мы затем исследовали механистические взаимодействия, связанные с отдельными мутациями, которые улучшили термостабильность среди положительных мутантов, используя моделирование структурной гомологии af CR. С этой целью мы сначала проверили, вводят ли мутации новые взаимодействия (рис.5 и дополнительный файл 1: таблица S3), и обнаружили, что замена F108Y привела к образованию новой водородной связи с гидроксильной группой боковой цепи Y68 (рис.5а). Сходным образом, мутация Y109F, как наблюдали, формирует новые π-π взаимодействия с остатками F133 и F108, что впоследствии увеличивает стабильность двух спиральных структур, в которых расположены остатки (рис. 5b). Напротив, мутация K351E привела к потере водородной связи между этим остатком и E349. Однако эта мутация привела к новым взаимодействиям солевых мостиков и образованию Н-связи между P352 и L350 (Fig. 5c). Кроме того, замена T251C привела к появлению новой сульфгидрильной группы и может создать новую дисульфидную связь с соседним C175 (дополнительный файл 1: рис.S5A).

Рис. 5

Структурные сравнения между диким типом и вариантами конверсии остатков, связанных с термостабильностью, af CR. a F108Y, b Y109F, c K351E Структуры дикого типа (слева) в сравнении с мутированными остатками (справа), смоделированными в модели гомологии

Затем мы исследовали изменения в гидрофобных и гидрофильных заменах среди мутантов и обнаружили, что D17V в основном улучшал гидрофобную упаковку во внутренней части белка и облегчал сеть взаимодействия между соседними остатками His12, Asn13, Lys16, Trp90 и Arg91 (дополнительный файл 1: рис.S5B). Кроме того, мы обнаружили, что преобразования Q165I и E349V, мутации, аналогичные D17V, также стабилизировали фермент за счет повышенной гидрофобности с использованием механизмов, аналогичных D17V. Преимущества, обеспечиваемые этими мутациями, явно противоречат общепринятой теории мутаций, поскольку преобразование гидрофобной аминокислоты в гидрофильную с большей вероятностью улучшит термостабильность белка. Например, мутации G58D и T199S в основном способствовали повышению стабильности за счет увеличения гидрофильности поверхности белка, а также межспирального гидрофобного взаимодействия. Кроме того, ранее было показано, что введение замен пролина является тенденцией к стабилизации белков [46]. Замена лейцина на пролин в мутации L6P (дополнительный файл 1: рис.S5C) снижает конформационную энтропию локального развернутого белка, что приводит к более жесткой структуре пространства белка.

Таким образом, этот анализ показал, что отдельные мутации вызвали широкий спектр изменений в структуре af CR-M0 и внутренних и внешних взаимодействиях, включая изменения водородных связей, взаимодействий солевых мостиков, π-π-взаимодействий и дисульфидных связей (F108Y , Y109F, K351E, T251C), усиление гидрофильных взаимодействий на поверхности белка (T199S, G58D), снижение конформационной энтропии локально развернутых белков (L6P) и улучшение гидрофобной упаковки во внутренней части белка или увеличение сети взаимодействия (D17V, Q165I, E349V).Более того, введение вышеуказанных взаимодействий может улучшить термостабильность белков, что было подтверждено в других исследованиях [47,48,49]. Путем анализа этих мутаций мы изменили наше текущее понимание механизмов взаимодействия, с помощью которых различные типы превращений аминокислот могут улучшать термостабильность и тем самым обеспечивать руководство для разработки более высокой термостабильности в других белках.

Креатиназа Фермент креатиназа

Креатиназа Фермент креатиназа

Эти веб-сайты используют файлы cookie.Продолжая просматривать сайт, вы соглашаетесь на использование файлов cookie.

США ($) Соединенное Королевство (£) Европа (€)

• • Вы просматриваете магазин в США. Хотите пойти в магазин Europe?

Похоже, в вашем браузере отключен JavaScript.
Вы должны включить JavaScript в вашем браузере, чтобы использовать функциональные возможности этого веб-сайта.

Синонимы	CAH, креатинамидногидролаза, фермент креатиназы

Технические характеристики

Система экспрессии	E. coli
Форма и буфер	Поставляется в лиофилизированной форме

Информация об использовании и анализе

Биоактивность	9 U / мг материала, 1000 U = приблизительно 125 мг

Хранение и безопасность

Хранилище	Хранить при -15 ° C или ниже

Общая информация

Биологическое значение	Этот фермент принадлежит к семейству гидролаз, действующих на связи углерод-азот, отличные от пептидных связей, особенно в линейных амидинах.Систематическое название этого класса ферментов — креатин амидиногидролаза. Этот фермент участвует в метаболизме аргинина и пролина.

Список литературы

Добавить бумагу Вы упомянули этот продукт?

Извините, но на данный момент нет ссылок на этот продукт.

Отзывы

Вы должны войти в систему, чтобы написать отзыв. Пожалуйста авторизуйтесь здесь

Извините, в настоящее время нет отзывов об этом продукте

КРЕАТИН-АМИДИНОГИДРОЛАЗА | 37340-58-2

CREATINE AMIDINOHYDROLASE Свойства

темп хранения.

2-8 ° С

форма

лиофилизированный порошок

цвет

белый

Система регистрации веществ EPA

Креатиназа (37340-58-2)

БЕЗОПАСНОСТЬ

• Заявление о рисках и безопасности

КРЕАТИН АМИДИНОГИДРОЛАЗА цена Подробнее (2)

Производитель	Номер товара	Описание товара	Номер CAS	Упаковка	Цена	Обновлено	Купить
Сигма-Олдрич	C3921	Креатиназа из Pseudomonas sp. рекомбинантный, экспрессированный в E. coli, лиофилизированный порошок, 10-15 единиц / мг белка	37340-58-2	500un	$ 250	2020-08-18	Купить
Сигма-Олдрич	C2409	Креатиназа из Actinobacillus sp.лиофилизированный порошок, 20-40 единиц / мг белка	37340-58-2	1ку	$ 335	2020-08-18	Купить

---

CREATINE AMIDINOHYDROLASE Поставщики

Глобальные (61) Поставщики КИТАЙ 55 Германия 1 Япония 2 Швейцария 1 США 2 Глобальный 61

---

Посмотреть последнюю цену от производителей CREATINE AMIDINOHYDROLASE

37340-58-2 (CREATINE AMIDINOHYDROLASE) Поиск по теме:

МЕТИЛИЗОЦИАНАЦЕТАТ Трис (2,4-пентандионато) хромом (III) ФЕНИЛСЕЛЕНОЛ ацетилацетонат меди 1,3,3-ТЕТРАМЕТИЛБУТИЛИЗОЦИАНИД ТРИС (2,2,6,6-ТЕТРАМЕТИЛ-3,5-ГЕПТАНДИОНАТО) ЕВРОПИЙ (III) Ацетилацетонат алюминия N-БУТИЛИСОЦИАНИД ТРИС (2,2,6,6-ТЕТРАМЕТИЛ-3,5 -ГЕПТАНДИОНАТО) ДИСПРОЗИЙ (III) Тозилметилизоцианид САЛЬКОМИН Этилизоцианоацетат

---

• креатиназа из видов актинобацилл
• креатиназа из flavobacterium sp.
• креатиназа из видов pseudomonas: * рекомбинантная
• КРЕАТИНАЗА ИЗ ВИДОВ ФЛАВОБАКТЕРИЙ
• КРЕАТИНАЗА ИЗ FLAVOBACTERIUM SP., LYOP HIL., ~ 10 Ед / мг
• креатиназа из actinobacillus sp.
• креатиназа из pseudomonas sp.
• EC 3.5.3.3
• КРЕАТИН АМИДИНОГИДРОЛАЗА
• CREATINASE
• Креатинамидогидролаза
• Креатиназа рекомбинантная, лиофильная.
• Креатининаза рекомбинантная, лиофильная.
• Креатиназа / креатин амидиногидролаза, ≥8U / мг белка
• Креатиназа / креатин-амидиногидролаза
• Креатиназа из E. coli, рекомбинантный
• Нативный Flavobacterium sp. Креатиназа
• Креатиназа из Pseudomonas sp., Рекомбинантная
• Креатин амидиногидролаза нативных микроорганизмов
• Нативный Actinobacillus sp. Креатиназа
• 37340-58-2
• 3.5.x.x Действие на C-N, кроме пептидов
• 3.x.x.x Гидролазы
• Диагностические и аналитические ферменты
• Ферменты, ингибиторы и субстраты
• Индекс класса ферментов
• Биохимические продукты и реагенты
• Биохимия
• Указатель приложений

Сравнение последовательности и структуры

позволяет предположить, что метионин-аминопептидаза, пролидаза, аминопептидаза P и креатиназа имеют общую складку на JSTOR

.

Сравнение аминокислотной последовательности предполагает, что структура метионинаминопептидазы Escherichia coli (EC 3.4.11.18) и C-концевой домен креатиназы Pseudomonas putida (EC 3.5.3.3) связаны. Детальное сравнение трехмерных складок двух ферментов подтверждает эту гомологию: в сегменте цепи, состоящем из ≈260 остатков, 218 атомов Cα структур накладываются друг на друга в пределах 2,5 Å; только 41 из этих перекрывающихся положений (т.е. 19%) содержат идентичные аминокислоты в двух белковых цепях. Несмотря на это поразительное соответствие в структуре, метионинаминопептидаза связывается и стимулируется Co2 +, в то время как креатиназа не является металл-зависимым ферментом.Поиск в банках данных по белкам с использованием профилей на основе последовательностей и структур выявляет другие ферменты, в том числе аминопептидазу P (EC 3.4.11.9), пролидазу (EC 3.4.13.9) и агропинсинтазу, которые, вероятно, имеют те же общие черты «лаваша». креатиназе и метионинаминопептидазе.

PNAS — это самый цитируемый в мире междисциплинарный научный сериал. Он публикует отчеты об исследованиях, комментарии, мнения, обзоры, доклады коллоквиума и акции Академии.В соответствии с руководящими принципы, установленные Джорджем Эллери Хейлом в 1914 году, PNAS издает краткие первые объявления членов Академии и иностранных партнеров подробнее важный вклад в исследования и работу, которая, как представляется, иметь особое значение.

Национальная академия наук (НАН) — это частная некоммерческая организация ведущих исследователей страны. НАН признает и продвигает выдающуюся науку путем избрания в члены; публикация в своем журнале PNAS; и его награды, программы и специальные мероприятия.Через Национальные академии наук, инженерии и медицины НАН предоставляет объективные, научно обоснованные советы по важнейшим вопросам, затрагивающим нацию.

Анализ креатинина (ферментативный) | Diazyme Laboratories, Inc.

Характеристики продукта Анализ жидких реагентов креатинина от компании Diazyme предлагает значительные преимущества по сравнению с традиционным методом Яффе для креатинина, который является едким веществом (пикриновая кислота) и может окрашивать трубки и кюветы анализатора.Ферментативный метод Diazyme не является едким, не оставляет пятен и не требует дорогостоящих и опасных транспортировок. В отличие от метода Яффе, ферментативный анализ Diazyme показывает, что следующие вещества, обычно присутствующие в сыворотке крови, вызывают отклонение менее 10% при перечисленных концентрациях: триглицерид при 1000 мг / дл, аскорбиновая кислота при 10 мМ, билирубин при 40 мг / дл, конъюгат билирубина 30 мг / дл, гемоглобин 500 мг / дл. Следующие вещества, обычно присутствующие в моче, вызывают отклонение менее 10% при перечисленных концентрациях: триглицериды при 1000 мг / дл, аскорбиновая кислота при 10 мМ, билирубин при 40 мг / дл, конъюгат билирубина при 40 мг / дл, гемоглобин при 1000 мг / дл. Упакованный для оптимального удобства оператора, перенос реагента может быть исключен для большинства химических систем с помощью вариантов упаковки для конкретного прибора, включая Roche ™ Hitachi 917 series, Beckman AU (400/600/640/680), Beckman Synchron CX.

Принцип анализа Анализ жидких реагентов креатинина от компании Diazyme — это быстрая и простая в использовании ферментативная процедура, применимая к рутинным лабораторным приборам. Ферментативная методология — лучший клинический выбор для точного измерения креатинина, особенно для новорожденных, педиатров и гематологических отделений.Ферментативный анализ креатинина включает серию сопряженных ферментативных реакций, включая ферментативное преобразование креатинина креатинином в продукт креатин, который сам превращается в саркозин креатинамидиногидролазой (креатиназой) с последующим окислением саркозина саркозиноксидазой (SOD) с образованием пероксида водорода. No related posts.