17Дек

Антитела при: Антитела к коронавирусу. Что важно знать.

Содержание

Антитела к коронавирусу. Что важно знать.

Коронавирусная инфекция изменила жизнь почти всей планеты в целом и каждого из нас в частности. Инфекция часто протекает без симптомов или в лёгкой форме. Как узнать, переболел я или нет (ведь кашлял же зимой)? Являюсь ли безопасным для окружающих? Могу без страха навещать бабушку, маму, друзей? Эти и другие вопросы волнуют многих людей. Прошло достаточно времени чтобы появилась возможность ответить на них. Для оценки возможного иммунитета есть скрининговое исследование на антитела к коронавирусу (IgM и IgG).

Коронавирусная инфекция

«Имя» коронавируса, вызвавшего пандемию – CoV-2 (сокращённо от Corona Virus 2), или SARS-CoV-2 . Заболевание, вызванное CoV-2, называется COVID (от англ. COrona VIrus Disease). Опасен развитием двустороннего воспаления лёгких и острой дыхательной недостаточности. Проявления напоминают ОРВИ, но настораживает сухой кашель без отделения мокроты, боли в мышцах, одышка, чувство сдавления в груди.

При острых признаках заболевания исследуют мазки из зева методом ПЦР, который выявляет генетический материал возбудителя (РНК) и подтверждает диагноз.

Что такое антитела к коронавирусу?

Антитела, или иммуноглобулины – специальные белки, которые вырабатывает иммунная система в ответ на попадание любого инфекционного агента, в том числе CoV-2 в организм человека, даже если не было ярких признаков болезни. Антитела распознают коронавирус, обезвреживают и сохраняют информацию об инфекции на случай новой встречи с инфекцией.

Как образуются антитела?

На первой неделе заболевания начинают синтезироваться иммуноглобулины М (IgM). Они первыми встречаются с инфекцией, поэтому считаются маркерами острой первичной инфекции. Однако, тест на определение антител класса М может давать неспецифическую реакцию, что в ряде случаев приводит к ложноположительному результату. Поскольку на антитела класса М возложена ответственность первыми начать отражать инфекцию и сделать максимально быстро, то эти белки не очень специфичны и могут не очень точно улавливать вирус.

К неспецифической реакции с тест- системой могут привести процессы, связанные с воспалением в организме: острые и хронические воспалительные процессы, аутоиммунные заболевания, проблемы с щитовидной железой, беременность и так далее. Это называется «ложноположительный» результат.

При стандартном инфекционном заболевании (в том числе и при коронавирусной инфекции) обычно антитела IgM через месяц исчезают, заменяясь на более специфичные антитела IgG. Однако учёные выяснили, что при коронавирусе IgM могут сохраняться длительное время (до 1,5-3 месяцев от появления симптомов, когда уже сам вирус давно не обнаруживается).

Иммуноглобулины А (IgA) также вырабатываются в острый период инфекции. Их основная цель – защитить слизистые оболочки от коронавируса. IgA более избирательны (специфичны), вырабатываются строго на коронавирус. Их уровень снижается после выздоровления, примерно к 1,5- 2 месяцам после инфицирования.

Иммуноглобулины G (IgG) синтезируются последними, через 5-6 недель с момента попадания вируса в организм, и сохраняют информацию о коронавирусе. Обычно IgG являются архивом памяти перенесеных инфекций, в большинстве случаев пожизненно, либо на несколько лет. Механизмы развития иммунной реакции на коронавирус пока изучаются. Неясно, стойкий иммунитет формируется или нет. Это предстоит узнать. Но в любом случае, выявление IgG свидетельствует о факте попадания коронавируса в организм и иммунном ответе организма.

Лаборатория KDL представляет линейку тестов на определение антител к новой коронавирусной инфекции.

Кому они показаны?

  • Тем, кто хочет узнать, перенес он инфекцию или нет независимо от того, были признаки простуды или не было. Только следует понять, что если были подозрительные признаки, целесообразнее обследоваться на IgG спустя 5 недель от предполагаемого периода. Если признаков не было, сроки неважны, обследуйтесь в любое время.
  • Тем, кто подозревает течение коронавирусной инфекции сейчас или перенес в недавнее время, даже если проводили исследование мазка из зева методом ПЦР и он показал отрицательный результат.
    Иногда такое бывает.

Также возможно анонимное выполнение исследование на антитела к коронавирусу с указанием возраста и пола.

Давайте о каждом исследовании по порядку.

Антитела IgM/IgG к вирусу SARS-CoV-2.

Это комплексный тест, скрининговый. Одновременно определяет иммуноглобулины классов М и G, результат по каждому антителу. Выполняется иммунохроматографическим методом (ИХГА). Ответ выдаётся в формате «обнаружено/не обнаружено».

Как понимать результат исследования?

Если Ig M (+) обнаружены, IgG (-)не обнаружены:

  • Может быть признаком острой инфекции, особенно при наличии признаков заболевания.
  • Возможен ложноположительный результат (при хронических заболеваниях)

Поэтому целесообразно провести исследование мазка из зева методом ПЦР. Если результат ПЦР отрицательный или нет признаков болезни, повторить тест на антитела через 2-3 недели.

Если IgM (+) обнаружены, IgG (+) обнаружены:

  • Возможна текущая инфекция, начало выздоровления или недавно перенесенное заболевание

Если IgM (-) не обнаружены, IgG (+) обнаружены:

  • Свидетельствует о перенесенном ранее COVID-19

Если IgM (-) не обнаружены, IgG (-) не обнаружены:

  • Пациент еще не встречался с вирусом

Антитела IgA к коронавирусу SARS-CoV-2.

Тест выполняется методом ИФА на анализаторе, производитель Евроиммун, Германия. Результат выдается в виде цифрового значения (коэффициент позитивности = КП).

IgA – показатели ранней инфекции, являются более точными в отличие от IgM, поскольку более специфичны.

Как правильно прочитать результат?

Положительный результат – более 1,1. Говорит об обнаружении IgA и может означать:

  • Текущую инфекцию сейчас ( в частности, бессимптомное течение)
  • Если одновременно определяются IgG, то это период выздоровления или недавно перенесенная инфекция

Пограничный результат – в интервале 0,8 – 1,1. Требует повторного исследования через 2 недели, поскольку может означать:

  • Начальный период инфекции, когда не успели сформироваться антитела в достаточном количестве. Как правило, в таком случае есть признаки болезни и требуется подтверждение методом ПЦР (мазок из зева).  Тогда через 2 недели будет отмечаться нарастание IgA.

Отрицательный результат –менее 0,8. Означает отсутствие антител IgA, что возможно, если:

  • Пациент не встречался с коронавирусом SARS-CoV-2
  • Самое начало болезни, когда ещё нет иммунного ответа. При наличии проявлений правильно исследовать мазок из зева на ПЦР.

Антитела IgG к коронавирусу SARS-CoV-2.

Исследование выполняется на анализаторе методом ИФА, производитель Евроиммун, Германия. Результат в виде цифрового значения (коэффициент позитивности = КП).

Расшифровка результатов:

Положительный результат –более 1,1. IgG выявлены, а это может быть в следующих случаях:

  • Сформирован иммунитет после давно перенесенной инфекции. Тогда антитела IgM и IgA отсутствуют
  • Текущая инфекция в стадии выздоровления или недавно перенесенная –  если определяются одновременно IgA и/или IgM

Пограничный результат

–в интервале  0,8 – 1,1.

Возможно, IgG ещё немного, что требует повторить исследование через 2 недели и возможно, когда:

  • Инфекция протекает менее 5-6 недель. Тогда есть признаки болезни, может быть положительный ПЦР и антитела IgM, IgA. Антитела IgG при повторном исследовании в таком случае возрастут.
  • Неспецифическая реакция иммунной системы (очень редко). Тогда повторно тест будет отрицательный.

Отрицательный результат –менее 0,8.

IgG не обнаружены, что может быть, если:

  • Не было встречи с SARS-CoV-2 (тогда нет IgA, IgM)
  • Острая инфекция. При наличии проявлений следует проверить IgA, IgM и мазок на ПЦР.

Обнаружение антител IgG к коронавирусу SARS-CoV-2.

Выполняется методом ИФА, методика автоматизированная, тест-системы российского производства. Заключение в виде цифры (коэффициент позитивности)

Референсные значения:

  • менее 0,9 – отрицательный результат
  • 0,9 – 1,0 – пограничный результат
  • более 1,0 – положительный результат

Выявление антител класса IgG говорит о наличии иммунного ответа на встречу с инфекцией в прошлом и является признаком перенесенного заболевания

Нужна ли специальная подготовка для определения антител к коронавирусу?

Подготовка не нужна. Для исследования сдаётся венозная кровь утром натощак или днём в часы работы медицинских офисов через 3 часа после еды. Чистую воду без газа пить можно.

Обращаю Ваше внимание, что все результаты исследований должен интерпретировать врач! Ведь полноценная картина складывается из данных истории болезни, осмотра, лабораторных и инструментальных данных. Будьте здоровы с лабораторией KDL, берегите себя и близких!

Антитела IgG к S1 белку коронавируса SARS-CоV-2 (COVID-19), Германия — Комплексы медицинских анализов и их цен в KDL

Тест направлен на оценку иммунитета (определение антител класса G) после перенесенной инфекции, вызванной новым коронавирусом SARS-CoV-2.

Антитела к коронавирусу IgG являются показателями перенесенной инфекции, могут сохраняться в организме длительное время (годами). При стандартной реакции иммунной системы они начинают синтезироваться к концу 3-ей недели инфекционного заболевания, а при коронавирусной инфекции (COVID) мы можем наблюдать более позднее формирование пула антител класса G – через 5-6 недель. Насколько стойкий иммунитет формируется после COVID, ещё точно неизвестно. Источник инфекции — человек. Течение заболевания от бессимптомного до тяжелого с развитием пневмонии, дыхательной недостаточности и других осложнений. Среди подозрительных признаков выделяют сухой кашель без мокроты и насморка, одышка, боли в мышцах, нарушения восприятия запахов, высокая температура.

В каких случаях назначается исследование?

  • Тем, у кого были признаки заболевания, подозрительные на COVID. Желательно обследоваться не ранее 5 недель после предполагаемого заболевания
  • Бессимптомным носителям (когда признаков не было). Можно сдавать в любое время
  • Для оценки иммунитета после перенесенной коронавирусной инфекции, подтвержденной ПЦР

Что именно представляет исследование?

IgG – показатели перенесенной коронавирусной инфекции и сформировавшегося иммунитета. Исследование автоматизированное, выполняется методом ИФА на тест-системах Евроиммун, Германия. Ответ выдаётся в виде цифры (коэффициент позитивности)

Что означают результаты исследования?

отрицательный результат — менее 0,8

пограничный результат — в интервале от 0,8 до 1,1

положительный результат —  более 1,1

Расшифровка результата анализа на антитела класса IgG?

Отрицательный результат – менее 0,8

  • Организм не встречался с коронавирусной инфекцией
  • Начальная стадия инфекции, когда ещё не выработались IgG. При подозрении на COVID целесообразно сдать мазок из зева методом ПЦР и проверить IgA и/или IgM

Пограничный результат  – от 0,8 до 1,1

Рекомендовано повторное исследование через 2 недели, поскольку возможны следующие ситуации:

  • Недостаточная концентрация IgG при текущей инфекции. В таком случае могут определяться IgM и IgA и выявлен сам вирус методом ПЦР. Тогда при повторном исследовании ожидается нарастание уровня антител

Положительный результат – КП более 1,1

  • При отсутствии IgM и IgA – свидетельствует о перенесенной достаточно давно коронавирусной инфекции
  • Если одновременно определяются IgA и IgM, может быть проявлением текущей или недавно перенесенной инфекции

Интерпретацию исследований проводит врач, имея полноценную картину заболевания с учётом всех данных о пациенте.

Как подготовиться к анализу?

Кровь сдается утром натощак или через 3 часа после еды, можно пить чистую воду без газа.

Анализ на антитела IgM/IgG к коронавирусу SARS-CoV-2 (COVID-19)

Скрининговый тест, включающий комплексное определение двух основных показателей иммунного ответа (антител IgM и IgG) к «новому» коронавирусу – SARS-COV-2.

Коронавирусная инфекция (COVID), вызвавшая пандемию 2020 года, отличается быстрым распространением. Передача вируса осуществляется воздушно-капельным, воздушно-пылевым и контактно-бытовым путем. Может протекать бессимптомно, по типу ОРВИ или в тяжелой форме: с развитием двусторонней пневмонии. Настораживающими признаками являются сухой кашель (без мокроты), одышка, боли в мышцах, нарушения обоняния, отсутствие насморка, высокая температура.

В ответ на инфекцию SARS-COV-2 иммунная система вырабатывает специфические белки – иммуноглобулины (Ig). Стандартный иммунный ответ на любую инфекцию проявляется выработкой IgM на первой неделе заболевания и выявлением их до 1-1,5 месяцев, IgA – чуть позже (1-2 неделя заболевания), и IgG – на 3-4 неделе от момента попадания вируса в организм с последующим сохранением на долгие годы. IgM – самые ранние, являются показателем острой (текущей) инфекции, но они недостаточно специфичны, могут появляться при аутоиммунных заболеваниях, проблемах с щитовидной железой, других острых и хронических болезнях.

Коронавирусная инфекция может вызывать нестандартную реакцию иммунитета, и этот вопрос до конца не изучен. Пока известно, что IgM могут циркулировать несколько месяцев после выздоровления, а IgG появляются на 5-6 неделе от момента инфицирования COVID.

В каких случаях обычно назначают исследование?

  • При подозрении на перенесенную коронавирусную инфекцию
  • Для выявления иммунитета у перенесших инфекцию бессимптомно
  • После перенесенного ОРВИ в рамках дифференциальной диагностики

Когда целесообразнее обследоваться?

С целью определения иммунитета, если не было признаков заболевания — в любое время.

Если были признаки инфекции, правильнее сдавать кровь примерно через 5 недель после предполагаемого заболевания.

Что именно определяется в процессе анализа?

  • IgM к вирусу SARS-CoV-2 – маркеры острой первичной инфекции
  • IgG к вирусу SARS-CoV-2 – маркеры перенесенной ранее или текущей инфекции в стадии выздоровления

Тест комплексный, но ответ по IgM и IgG выдается по каждому антителу в отдельности в качественном формате: обнаружено/не обнаружено

Тест показывает ответ иммунитета на коронавирус, а не наличие вирусных частиц в организме!

Что означают результаты?

IgM (+) обнаружены, IgG (-) не обнаружены

  • Возможна острая коронавирусная инфекция, особенно при наличии признаков болезни
  • В ряде случаев ложноположительный результат, связанный с неспецифической реакцией организма

Целесообразно обследоваться методом ПЦР при наличии признаков инфекции. При отрицательном результате ПЦР повторить тест на антитела к коронавирусу IgM/IgG через 2-4 недели или сделать тесты на IgA и IgG к коронавирусу.

IgM (+) обнаружены, IgG (+) обнаружены

  • Текущая коронавирусная инфекция, начало выздоровления
  • Недавно перенесенное заболевание

Если есть признаки текущей инфекции, целесообразно выполнить исследование на выявление вируса методом ПЦР

IgM (-) не обнаружены, IgG (+) обнаружены

  • Перенесенное ранее коронавирусное заболевание

IgM (-) не обнаружены, IgG (-) не обнаружены

  • Пациент не встречался с SARS-CoV-2

Обычный срок выполнения

Результат будет готов через 2-3 дня.

Как подготовиться к исследованию

Сдается венозная кровь утром натощак или в течение дня через 3 часа после умеренного приёма пищи.

Антитела IgG к коронавирусу SARS-CoV-2 (COVID- 19) в крови

 Коронавирусная инфекция COVID-19 (CoronaVirusDisease 2019) – острое респираторное заболевание, вызываемое новым коронавирусом SARS-CoV-2, который был выявлен в декабре 2019 года в городе Ухане провинции Хубэй центрального Китая.  

В настоящее время доказана передача вируса SARS-CoV-2 от человека к человеку, преимущественно воздушно-капельным и контактным путями. Ведущим путем передачи SARS-CoV-2 является воздушно-капельный, который реализуется при кашле, чихании и близком общении инфицированного с окружающими. Контактный путь передачи осуществляется через рукопожатия и при других видах непосредственного контакта с инфицированным человеком, а также через пищевые продукты, поверхности и предметы, контаминированные вирусом. По имеющимся данным, вирус может находиться на различных предметах от нескольких часов до нескольких суток.  

COVID-19 может протекать как в бессимптомной и легкой клинических формах, так и в тяжелой с развитием внебольничной пневмонии, острого респираторного дистресс-синдрома (ОРДС) и дыхательной недостаточности. Осложнённое течение заболевания, как правило, происходит среди людей, которые находятся в группе повышенного риска. Это пожилые люди, беременные женщины, лица с сопутствующими патологическими состояниями, такими как сердечно-сосудистые заболевания, хронические респираторные заболевания, диабет и рак. Встречается и бессимптомное носительство вируса, носителями чаще всего становятся дети и молодые взрослые. Они могут передавать вирус другим людям при близком контакте, однако у них самих не развиваются симптомы заболевания.

Инкубационный период COVID-19 составляет от 2 до 14 дней, наиболее часто – 5-7 дней. Самыми распространенными клиническими симптомами инфекции являются высокая температура тела (выше 38°С), кашель (сухой или с небольшим количеством мокроты), одышка, боль в мышцах, утомляемость. Среди других симптомов отмечают насморк, потерю обоняния, головную боль, заложенность грудной клетки, диарею, тошноту и рвоту.

Инфекционный процесс сопровождается выработкой антител двух типов: IgM и IgG.

Антитела класса IgМ к SARS-CoV-2  появляются в крови приблизительно через 5-7 дней от начала клинических симптомов и достигают максимуму ко 2-3 неделе заболевания. В дальнейшем их концентрация в крови постепенно снижается. 

Антитела класса IgG начинают вырабатываться через 10-14 дней от начала заболевания, достигая максимальной концентрации через месяц. Антитела класса IgG сохраняются в организме длительное время, обеспечивая специфический иммунный ответ к новой коронавирусной инфекции COVID-19. Однако,  данные о том, насколько долго будет сохраняться иммунитет в отношении SARS-CoV-2, в настоящее время отсутствуют.

Динамика молекулярных и серологических маркеров SARS-CoV-2

 

Анализ крови на антитела IgG к вирусу SARS-CoV-2 – исследование, которое помогает проверить в крови наличие антител IgG к возбудителю новой коронавирусной инфекции COVID-19 и определить их количество.

Анализ проводится по тест-системе «SARS-CoV-2-IgG-ИФА-БЕСТ». Тест предназначен для выявления антител класса IgG к коронавирусу SARS-CoV-2 в сыворотке или плазме крови человека методом твердофазного иммуноферментного анализа с возможностью определения титра антител (коэффициента позитивности)  IgG в выявленных положительных образцах.

Принцип метода:

Метод определения основан на двухстадийном «непрямом» варианте твердофазного иммуноферментного анализа. На первой стадии анализа, содержащиеся в исследуемых образцах специфические антитела (в том числе IgG) связываются с иммобилизованным на поверхности лунок планшета рекомбинантным антигеном SARS-CoV-2. На второй стадии конъюгат моноклональных антител к IgG человека с пероксидазой хрена взаимодействует с комплексами «антиген-IgG». При инкубации с раствором тетраметилбензидина происходит окрашивание раствора в лунках, содержащих образовавшиеся комплексы «антиген-IgG-конъюгат». Интенсивность окрашивания пропорциональна концентрации IgG к SARS-CoV-2 в анализируемом образце. После остановки реакции добавлением стоп-реагента результаты анализа регистрируются измерением оптической плотности в лунках планшета.

Интерпретация результатов

Референтный интервал  Интерпретация результата

Результат исследования на IgG и IgM к SARS-CoV-2  выражается полуколичественно с указанием коэффициента позитивности — КП:
Отрицательный: КП≤ 0,8
Сомнительный: 0,8 <КП< 1,1
Положительный: КП≥ 1,1

Коэффициент позитивности (КП) — это отношение оптической плотности пробы пациента к пороговому значению.

КП является универсальным показателем, применяемым в иммуноферментных тестах с полуколичественной оценкой результатов.

КП характеризует степень позитивности исследуемой пробы и может быть полезен врачу для правильной интерпретации полученного результата, для динамического наблюдения за пациентами, в том числе контроля эффективности лечения.

Точный диагноз устанавливается врачом на основании клинического обследования,  эпидемиологического анамнеза, результатов инструментальных и лабораторных исследований. 

Антитела класса IgG к SARS-CoV-2
Положительный результат:
1. перенесенное заболевание, в том числе с бессимптомным течением;
2. наличие текущего заболевания COVID-19 в поздней стадии инфекционного процесса.
Cомнительный результат:
1. возможен начальный период заболевания, рекомендовано повторить исследование через 10-14 дней, в случае получения аналогичных данных они расцениваются как отрицательные.
Отрицательный результат:
1. отсутствие контакта с коронавирусом SARS-CoV-2;
2. ранняя стадия заболевания (инкубационный период), когда антитела класса IgG ещё не успели выработаться;
3. нарушения в работе иммунной системы;
4. слабо выраженный иммунный ответ, ввиду индивидуальных особенностей организма и тяжести течения заболевания.

Показания к назначению данного исследования:
1. Диагностика текущей инфекции COVID-19, в том числе бессимптомного течения заболевания;
2. Диагностика COVID-19 в поздней стадии инфекционного процесса, в том числе бессимптомного течения заболевания;
3. Дифференциальная диагностика заболеваний, клинически схожих с течением коронавирусной инфекции COVID-19;
4. Дополнительная диагностика COVID-19 в совокупности с методом ПЦР;
5. Оценка иммунного статуса в отношении SARS-CoV-2.

Подготовка
Рекомендуется сдавать натощак или не ранее, чем через 2-4 часа после приема пищи.

 

сдать анализ в Москве, цены и адреса клиник АО Семейный доктор

Когда нужен анализ на антитела к SARS-CoV-2 (коронавирусу COVID-19)

Анализ на на антитела позволяет узнать, был ли у вас контакт с возбудителем заболевания, а если был, то как давно. С помощью данного анализа можно уточнить стадию заболевания, а также определить, сформировался ли иммунитет (как при естественном контакте с возбудителем, так и в случае вакцинации). 

Анализ на антитела обычно проводится как дополнительное исследование. Если есть подозрение на COVID-19 или вам нужен официальный документ об отсутствии заболевания (для выезда за рубеж, либо по возвращению из-за границы, либо для плановой госпитализации или в иных целях), то в этом случае необходимо сделать анализ методом ПЦР.

Что такое антитела и какими они бывают 

Антитела — это белки, вырабатываемые иммунной системой в ответ на проникновение возбудителя. Именно по ним определяют стадию развития инфекции. Также по ним  контролируют течение заболевания. Антитела разделяются на классы:

Антитела IgA. Образуются на ранней стадии заболевания в слизистых оболочках в ответ на местное воздействие инфекции. Они не формируют клеточную память, поэтому в формировании устойчивого иммунитета не участвуют. 

Антитела IgM. Иммуноглобулины этого класса первыми появляются в крови в ответ на внедрение чужеродного антигена в организм. Они тоже не формируют длительного иммунитета. Зато по наличию антител IgA и IgM можно определить. что заболевание находится в активной фазе (даже если внешние симптомы отсутствуют). 

Антитела IgG. Отвечают за длительную защиту организма после перенесенных инфекционных заболеваний и обеспечивают основной иммунный ответ. Уровень антител IgG повышается медленнее и достигает стабильного уровня в среднем через 15-20 дней после начала заболевания. 

Чтобы понять, на какой стадии находится инфекционное заболевание, учитывая специфику коронавирусной инфекции, нужно сдавать анализы двух типов: на определение антител IgА (или IgM) и IgG одновременно.

В случае положительного результата по антителам IgG необходимо провести повторный анализ. Сделать его рекомендуется через 14 дней после первого, чтобы определить увеличение или снижение концентрации IgG. В случае, если при повторном анализе уровень антител повысится или снизится, говорить о формировании иммунитета нельзя.

Если у пациента  при первой сдаче анализов не было выявлено антител IgM, а значение IgG равно 10 и больше, а при повторной диагностике значение IgG не увеличилось,  можно говорить о том, что человек переболел как минимум месяц назад и с большой вероятностью  имеет иммунитет к коронавирусу.

Впрочем, положительный результат на антитела к COVID-19 пока не может считаться стопроцентной гарантией неподверженности вирусу. Ученые еще не собрали достаточно данных, чтобы дать окончательный ответ, насколько долго сохраняется иммунитет.

Важный момент: особенностью иммунного ответа к новой коронавирусной инфекции является практически одновременное появление антител как класса IgM, так класса IgA. Однако антитела класса А сохраняются дольше и поэтому в совокупности с IgG имеют большее диагностическое значение.

Тестирование на антитела к вирусу SARS-CoV-2 (COVID-19)  в Семейном докторе

Мы предлагаем воспользоваться высокоточной тест-системой от проверенного производителя (страна происхождения — Германия). Метод диагностики — ИФА. Система зарегистрирована в Роспотребнадзоре и одобрена FDA США. Состоит из тестов на выявление IgA и IgG. Рекомендуем сделать сразу оба теста. Специфичность тестов — 100%, чувствительность для IgG — 99%. Готовность результатов — 2  суток. Результаты будут доступны в вашем Личном кабинете на сайте или мобильном приложении. 

Вы также можете воспользоваться комплексным анализом (профилем), позволяющим получить количественную оценку антител IgM и IgG. 

Если вам необходимо получить результат максимально быстро, вы можете выбрать экспресс-тест с готовностью результатов в течение 15-20 минут. Одновременно выявляются иммуноглобулины IgM и IgG. Методика качественная (т.е. выявляется только факт наличия антител, без количественной оценки). Чувствительность составляет 87%.

Также возможен выбор других тест-систем.

Подготовка к анализу

  • Перед анализом методом ИФА  в течение 3-4 часов нельзя есть. Из питья допускается только негазированная вода.

  • Перед прохождением экспресс-теста рекомендуется не есть жирную, сладкую пищу, не курить за 12 часов до теста, избегать чрезмерных физических и эмоциональных нагрузок. 

При сдаче анализа потребуется заполнить документы установленного образца. Чтобы минимизировать время на сдачу анализа, пожалуйста, скачайте бланки документов заранее (они доступны по этой ссылке>>>) и заполните их дома.

Как проходит диагностика?

  • Для анализа берётся кровь из вены или из пальца.  

  • Пациентам необходимо иметь при себе паспорт.

  • Рекомендуем приходить в масках и одноразовых перчатках.

  • Проводим с соблюдением всех правил санитарно-эпидемиологического режима.

  • Забор осуществляется во всех поликлиниках сети согласно графику их работы. 

Если у вас повышена температура, кашель, одышка, боль в мышцах, слабость и ощущение заложенности в грудной клетке, пожалуйста, оставайтесь дома и вызовите врача. 

Что означают антитела IgA, IgM, IgG к коронавирусу?

Многие люди даже не понимают, что переболели коронавирусом, списывая симптомы на простуду. Только при помощи теста на антитела можно узнать, какая инфекция «сидела» в организме. Мы поможем разобраться в результатах теста и ответим на главный вопрос: возможно ли заболеть коронавирусом повторно?

Для чего нужны антитела?

Антитела — это специальные белки плазмы крови, по-научному их называют иммуноглобулины. Они нейтрализуют клетки бактерий, грибов, паразитов и вирусов. Таким образом вырабатывается иммунитет. Этот процесс происходит в организме еще перед появлением первых симптомов болезни.

Кроме борьбы с инфекцией эти белки выступают своеобразным «щитом» для человека. Этот «щит» имеет эффект памяти, поэтому при повторном заражении организм легче справляется с болезнью.

Эти спасительные белки находятся в организме тех, кто переболел коронавирусом. Во время острой фазы образуются антитела IgM. Они появляются в теле самыми первыми. Их можно найти в крови больного уже на пятый день от начала болезни. Они будут находиться в крови в течение четырёх недель. Но не стоит забывать, что IgM могут появиться не только у коронавирусных больных, но и людей с хроническими болезнями. А иногда даже у беременных. Но при коронавирусе иммуноглобулины «сидят» в организме дольше — на протяжении нескольких недель.

Есть в анализах и другой класс антител — IgA. Данный иммуноглобулин находится в секретах: в слюне, в пищеварительном соке, в слизистой носа и молочной железы. Доля IgA в крови меньше других, всего около 15% от общего числа иммуноглобулинов.

IgA, как и IgM, появляются в самый острый период болезни. Они защищают слизистые оболочки человека от воздействия инфекции. И самое разительное отличие от IgM — белки IgA определяются только у коронавирусных больных.

Есть в плазме больных «ковидом» и другие антитела — IgG. Они вырабатываются клетками иммунной системы. Напрямую с «ковидом» сражаются IgG. В их памяти сохраняется вся информация о болезни. IgG появляются в плазме не сразу, а только через полтора месяца после заражения.

Пройти данное исследование необходимо — так человек узнает наверняка, перенёс он болезнь или нет. Но лучше всего сдавать этот тест по прошествию определенного времени — примерно через полтора месяца после первых симптомов. Кстати, сдать анализы могут и пациенты, которые болеют в данное время или переболели совсем недавно. Но знайте, что в таком случае тест на ПЦР (полимеразная цепная реакция) может показать отрицательный результат.

Всего есть 2 вида тестов на антитела: количественное и качественное исследования. В первом случае анализ определит титры, то есть точную концентрацию специфических белков. Тест на количество также покажет, в какой стадии находится ваша болезнь. При помощи него можно понять, насколько вы устойчивы перед инфекцией. Качественный тест только определит наличие или отсутствие специфических белков.

Как проходит сдача анализов?

Чтобы узнать наличие антител, нужно сдать кровь. Этот метод наиболее достоверный, точность теста превышает 99%.

Забор крови осуществляют из вены. Перед сдачей анализа не требуется предпринимать особых мер. Но, как и перед другими анализами, не рекомендуется до сдачи крови употреблять пищу в течение трёх часов. Но доктора разрешают пить воду в любом количестве.

Также желательно перед сдачей не заниматься спортом, не нервничать, не злоупотреблять сигаретами.

Я болею. Могу ли сдать тест или ждать выздоровления?

Пройти исследование на IgM можно в любое время, даже если вы болеете. Коронавирус вырабатывает антитела уже через семь-десять дней после заражения — в самой острой стадии болезни.

А вот исследоваться на IgG лучше через пару-тройку недель. Данный тест не выявит количество белков, но даст понять, «живет» ли в организме коронавирус.

Бывает и так, что болезнь проходит без симптомов, даже мазок полимеразной цепной реакции не показывает достоверный результат. В данном случае только анализ на кровь даст понять, опасен ли человек для окружающих.

Надолго ли хватает антител?

Многие полагают, что иммунитет к инфекции будет «жить» в организме всегда. Но это мнение ошибочно. Исследователи считают, что специальный белок коронавируса находится в плазме человека около четырех-шести месяцев. По наблюдениям ученых, антител больше у переболевших «ковидом» в тяжелой форме. Также специфического белка больше у пожилых людей.

Также исследователи считают, что количество антител у мужского пола больше, чем у слабой половины человечества. Тем не менее исследователи до сих пор не объяснили, как проявят себя иммуноглобулины при новом заражении коронавирусом.

Почему антитела не нашли?

Скорее всего вы не болели коронавирусом. Может быть диагноз был неправильным. Также существует риск, что само тестирование было некачественным — специфический белок есть, но тест был проведен неправильно.

Есть и еще одно объяснение. Возможно, ваш иммунитет слишком слабый. Организм выработал спасительный белок во время болезни. Но как только вы выздоровели, он остановил производство иммуноглобулинов. Таким образом найти антитела очень сложно.

У меня есть антитела, я заболею еще раз коронавирусом?

Есть множество случаев, когда человек заново заболевал коронавирусом спустя несколько месяцев. Уже доказано: антитела со временем исчезают, вечного иммунитета не будет.

Шанс заболеть повторно меньше у людей, которые перенесли болезнь в тяжелой форме. Ученые считают, что эти пациенты имеют большую концентрацию защитных белков.

Тем не менее, уже спустя 3-4 месяца количество спасительных белков сокращается. Порой количество антител начинает уменьшаться почти сразу. Поэтому коронавирусом можно переболеть несколько раз.

«IgM/IgG к вирусу SARS-CoV-2». Что означает результат?

Данное тестирование определит наличие антител сразу двух классов. Но у него есть явный недостаток. Тест определит только наличие или отсутствие белка, но не определит его количество.

Что значит Ig M (+), IgG (-)?

Данный результат означает, что вы находитесь на пике болезни. Скорее всего вы имеете яркие симптомы болезни.

Кроме того, ваш тест может быть ложноположительным. Вам лучше передать кровь через две-три недели.

Также не стоит забывать: такой тест может получить не только ковид-пациент, но человек с хроническими болезнями. Лучше перепроверить результат. Можно сдать мазок-ПЦР.

Что значит IgM (+), IgG (+)?

Если оба иммуноглобулина положительны, то ваш организм активно борется с болезнью. Также данные показатели означают, что явные симптомы у вас отсутствуют. Но не стоит забывать: в вашем теле «сидит» вирус, стоит самоизолироваться.

ПЦР в данном случае лучше сделать через некоторое время. Это позволит узнать, выздоровели вы или нет.

Что значит IgM (-), IgG (+)?

Если в вашей плазме ничего не нашли кроме lgG, то значит вы уже перенесли инфекцию ранее.

Что значит IgM (-), IgG (-)?

Оба отрицательных показателя говорят о том, что вы не болели «ковидом». Тем не менее, если ранее сданный ПЦР анализ был положительным, то лучше провести повторное исследование во избежании неточности.

«IgA к коронавирусу SARS-CoV-2». Что означает результат?

Этот тип теста проводят сразу после начала болезни. Данные антитела определяются в пик «ковида».

Анализ покажет наличие или отсутствие у человека вируса. Кроме того, инфекция может протекать без симптомов.

За несколько часов до сдачи анализов нельзя есть и не пить. Врачи также не рекомендуют жевать жвачку.

Фото:Медиахолдинг1Mi

Если тест положительный

Ваш тест положительный, если результат показал более 1,1 единиц. Скорее всего в вашем организме есть антитела IgA. В вашем теде протекает инфекционный процесс, хотя симптомы отсутствуют или слабо выражены.

Если IgM и IgA не обнаружены, то вы переболели «ковидом» давно.

Если тест сомнительный

Интервал в промежутке от 0,8 до 1,1 означает, что ваше специфического белка в пограничной зоне. Данные показатели могут сказать, что вы находитесь в начальной фазе вируса — антитела для борьбы с «ковидом» еще не образовались в большом количестве.

Если в образце крови находят IgM, то организм восстанавливается после болезни. Скорее всего, через несколько дней при повторной сдаче анализов количество антител вырастет.

Фото:Медиахолдинг1Mi

Если тест отрицательный

Если вы получили тест, в котором зафиксированы показатели со значением менее 0,8, то у вас нет антител IgA. Вероятнее всего не болели коронавирусом, иммунитет на вирус пока не выработался.

«IgG к коронавирусу SARS-CoV-2». Что означает результат?

«Спасительные» антитела IgG «живут» в организме на протяжении нескольких месяцев, но при «ковиде» они формируются позже, чем при других инфекционных заболеваниях, поэтому рекомендуется пройти тестирование после пяти-шести недель после начала болезни.

Если тест положительный

Если ваш текст показал результат свыше 1,1, то у вас есть антитела. Если IgM и IgA отсутствуют, то иммунитет после давно перенесенной инфекции сформирован. Если иммуноглобулины A и M оба положительные, то пациент перенес инфекцию недавно или находится в стадии выздоровления.

Если тест сомнительный

Если вы получили тест, результат которого находится в интервале 0,8 — 1,1, то у вас есть вирус. Скорее всего, он протекает у вас пять-шесть недель. При повторном исследовании количество ваших антител вырастет. Бывают случаи, когда такой результат говорит о нетипичной индивидуальной реакции иммунной системы. При таких сомнительных показателях лучше провести повторное исследование спустя несколько дней.

Если тест отрицательный

Если значение теста меньше 0,8, то в плазме нет IgG. Скорее всего вы еще не болели «ковидом». Также отрицательный результат может быть по причине острой инфекции. Лучше всего перепроверить кровь. Можно повторно сдать тест. В таком случае лучше проверить наличие иммуноглобулинов A и M. Кроме того, можно исследовать ПЦР-мазок.

Я не болел, но тест показал антитела

Если тест показал антитела, то скорее всего вы уже переболели коронавирусом. Многие люди, а особенно молодежь, переносят данный вирус «на ногах». Кто-то испытывает легкие симптомы простуды, а кто-то вообще не замечает никаких изменений. В данном случае анализ ПЦР может быть отрицательным.

Не переживайте, сейчас ваше состояние не угрожает окружающим, вы не заразны. В ближайшие 4 месяца у вас будут антитела — они укрепят иммунитет.

Но помните: если у вас есть антитела в организме, то это не спасет вас от последующих заболеваний «ковидом». Быть осторожным все равно необходимо. Оградить об болезни помогут перчатки, маски. И не забывайте про соблюдение дистанции (особенно в местах, где много народу).

Сдача плазмы для тяжелобольных пациентов

Люди, которые переболели коронавирусом, могут помочь тяжелобольным пациентам. Чтобы спасти жизни, нужно стать донором и сдать кровь. Из плазмы человека, переболевшего коронавирусом, выделяют сыворотку с антителами (по-научному их называют иммуноглобулинами). Эту спасительную сыворотку вводят больному. Таким образом организм начинает бороться с инфекцией. Уже доказано, что донорство плазмы — эффективный метод лечения. Для больных с тяжелой формой «ковида» переливание плазмы — это шанс на выздоровление.

Но не все могут стать донорами. Необходимо подходить под ряд критериев. Так, у вас должна быть справка, в которой указан результат исследования на антитела. Кроме, того существует возрастной ценз — к сдаче крови допускают тех, кому исполнилось 18 лет. Максимальный возраст донора — 55 лет. Также у донора не должно быть хронических заболеваний.

Кровь можно сдать через две недели после полного выздоровления.

Важно помнить, что перед забором крови нельзя есть жирную пищу и пить алкоголь. Перед процедурой лучше легко позавтракать.

Не забудьте взять собой документы (справку о состоянии здоровья, паспорт).

Материалы по теме:

Нашли опечатку в тексте? Выделите её и нажмите ctrl+enter

Как формируются АНТИТЕЛА К КОРОНАВИРУСУ Медсанчасть-168

Что такое антитела?

Как различаются между собой? В каких случаях необходимо сдать тест на определение антител к COVID-19?

Об этих и других вопросах сегодня поговорим.

АНТИТЕЛА — это специальные белки, вырабатывающиеся в организме в ответ на какую-то чрезмерную активность, чаще из вне. Эти белки, их еще называют иммуноглобулины, нейтрализуют клетки бактерий, грибов, паразитов и вирусов и, в идеале, вырабатывают иммунитет к той или иной патологии. И этот иммунитет, так называемая память, при повторном заражении помогает организму легче справляется с болезнью.

Мы поговорим о специфических к COVID-19 антителах класса M и G, т.е. вырабатывающихся в ответ на столкновение конкретно с новым коронавирусом.

КАК ОБРАЗУЮТСЯ АНТИТЕЛА?

При попадании агента (вируса) в организм, уже на первой неделе заболевания начинают синтезироваться иммуноглобулины М (IgM). Это первая специфическая реакция организма на вирус. Их называют маркерами острой первичной инфекции. Их цель — связать и обезвредить большее количество вируса, однако из-за своей «спешки» они могут не очень точно улавливать именно этот конкретный агент, включаясь на все чужеродное, чтобы инактивировать. Определение антител класса М может давать неспецифическую, ложноположительную реакцию у людей со сниженным иммунитетом, имеющих хронические очаги инфекции, аутоиммунные заболевания, у беременных.

При классическом иммунном ответе обычно антитела IgM через 3-4 недели исчезают, заменяясь на более специфичные, уже обученные организмом и более тесно связанные с агентом (вирусом) антитела класса G (IgG).

С коронавирусом ситуация несколько другая. За период пандемии стало известно, что при коронавирусе IgM могут сохраняться длительное время до 1,5-3 месяцев от появления симптомов, когда уже сам вирус давно не обнаруживается. Это может говорить о персистенции вируса в тканях, органах, может считаться перекрестной реакцией с другими группами коронавирусной инфекции и затяжным иммунным ответом, никак не отражающимся на клинической картине. Дискуссии на эту тему ведутся. Иммуноглобулины G (IgG) синтезируются через 5-6 недель с момента попадания вируса в организм, и сохраняют информацию (иммунитет) о перенесенной инфекции. После вакцинации в организме тоже образуются антитела класса G, говорящие о защите. Но об этом чуть позже. Антитела класса G по-разному ведут себя при различных инфекциях. Могут оставаться пожизненно, защищая организм от повторной инфекции (пример полиомиелит, краснуха), а могут исчезать через какой-то промежуток времени, как это происходит с вирусом гриппа. Относительно коронавирусной инфекцией, как мы это уже можем наблюдать спустя год, защитные антитела класса G остаются до 6 месяцев (в среднем 4). Повторное заболевание возможно.

В КАКИХ СЛУЧАЯХ НЕОБХОДИМО СДАТЬ ТЕСТ НА АНТИТЕЛА COVID-19?

Давайте разберем на примерах:

Вы болеете «какой-то» инфекцией, мазок из носоглотки сдать не удалось, или он показал отрицательный результат. В этом случае антитела IgM покажут вам острый процесс воспаления и то, что в данный момент ваш организм воюет и пытается уничтожить врага. Для более точного диагноза можно повторно, более тщательно сдать тест ПЦР COVID19 (мазок из носоглотки), но он может быть и отрицательным, если инфекция спустилась в нижние дыхательные пути или же это другая инфекция.

В любом случае, при положительных антителах IgM вам необходимо поберечь свой организм, обратиться к грамотным докторам и не заниматься самолечением.

Переболели «чем-то». А удостовериться в том, ковид это или нет, спустя 4 недели вам поможет анализ на антитела класса G. Они покажут, перенесли ли вы коронавирусную инфекцию или нет независимо от того, были признаки простуды или не было. Ведь эти антитела вырабатываются организмом и без явной клинической картины (т.е любое количество вируса может давать реакцию со стороны иммунной системы в виде наработки специфических защитных антител G)

Поэтому: Антитела класса М — это острый процесс, вирус еще активен, организм борется. Антитела G – поздний ответ на вирус, перенесенная инфекция, специфическая память (схематично в таблице).

И давайте поговорим о соотношении этих антител в разные периоды болезни (таблица)- т.е количественном определении антител. Чаще, относительно коронавируса, большинство лабораторий делают полуколичественный тест, это так называемый коэффициент позитивности (КП), говорящий о степени связывания антител с вирусом в исследуемой пробе. Это не количественный тест, стандарты для которого едины для всех лабораторий, поэтому тесты с КП для динамики нарастания или убывания антител необходимо сдавать только в одной лаборатории.

ВАКЦИНАЦИЯ (подробно о вакцинах в другой раз). Перед вакцинацией необходимо сдать всю панель исследований на ковид- IgM, IgG, ПЦР. Для чего? Разбираем:

Вы не болели коронавирусом (IgM, IgG, ПЦР)- все тесты отрицательные.

В ближайшие 2 недели ДО у вас не было симптомов простуды, повышения температуры тела и вы можете себе позволить сделать перерыв в активном общении с людьми (дистанцироваться, не посещать массовых мероприятий, обязательно носить маску и т.д.) после вакцинации 2 недели, чтобы наработался активный иммунитет.

Для чего — это защитит вас от инфекции. Вероятность, что иммунологическая память остается и при следующем столкновении с вирусом организм ответит легкой клинической реакцией или даже бессимптомным течением высока. Это теория иммунного ответа, сейчас обсуждается в научных кругах. Даже мутирующий новый вирус, не изменил ВСЮ структуру, поэтому вакцинироваться имеет смысл, чтобы предотвратить серьезные последствия, особенно если имеются иммунодефициты различной степени.

IgM- положительный\ и или ПЦР- положительный. Вакцинироваться нельзя. Идет активный процесс вирусной инфекции, и вы можете навредить организму. Даже если у вас нет никаких клинических проявлений.

IgG- положительный- вы перенесли коронавирусную инфекцию и у вас сформировался иммунитет к ней. По наблюдениям он активен в течении 3-6 мес. Через 3 месяца необходимо пересдать анализ на антитела класса G, чтобы удостовериться в действующем факторе защиты. Желательно это делать в одной лаборатории, где определяют количественное/полуколичественное отношение.

Интерпретация

IgM

IgG

ПЦР

  1. Самое начало заболевания
  2. Неправильная техника взятия мазка
  3. Другое заболевание
  4. Вы не болеете

  1. Самое начало заболевания, возможно без клинических проявлений
  2. Носительство вируса на слизистых (чаще лица до 30лет)

+

  1. Начальная стадия заболевания 1-7 дней

+\- (КП до 5)

+

  1. Острый активный процесс инфекции. Организм активно борется с вирусом
  2. Возможна ложноположительная реакция у людей со сниженным иммунитетом, имеющие хронические очаги инфекции, аутоиммунные заболевания, беременных, лиц.
  3. Неправильная техника взятия мазка

+

Острый активный процесс инфекции. Организм активно борется с вирусом (примерно первые 3 недели от момента контакта с вирусом)

++ (КП от 5 и выше

+

Острый активный процесс инфекции. Организм активно борется с вирусом. Примерно 3-4я недели заболевания

++

++

+

Острый активный процесс инфекции. Организм активно борется с вирусом. Примерно 3-5я недели заболевания

-/+

+

+/-


  1. Все еще активный процесс инфекции, организм формирует специфический иммунитет
  2. Клинических проявлений может и не быть уже, реконвалесцент (выздоравливающий) пациент
  3. Вакцинация от коронавируса
  4. Переболевший коронавирусной инфекцией
  5. Перенесший коронавирусную инфекцию бессимптомно


+

++

КП от 5 и выше

12. 01.2021

Обновление по коронавирусу (COVID-19): FDA разрешает моноклональные антитела для лечения COVID-19

Для немедленного выпуска:

Español

Сегодня Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США выдало разрешение на применение в экстренных случаях (EUA) для одновременного применения казиривимаба и имдевимаба для лечения COVID-19 от легкой до умеренной степени у взрослых и педиатрических пациентов (от 12 лет и старше с массой тела не менее 40 кг [около 88 фунтов]) с положительными результатами прямого тестирования на вирус SARS-CoV-2 и которые имеют высокий риск развития тяжелой формы COVID-19. Сюда входят лица в возрасте 65 лет и старше или лица, имеющие определенные хронические заболевания.

В клиническом исследовании пациентов с COVID-19 было показано, что казиривимаб и имдевимаб, вводимые вместе, уменьшают количество госпитализаций, связанных с COVID-19, или посещений отделений неотложной помощи у пациентов с высоким риском прогрессирования заболевания в течение 28 дней после лечения по сравнению с плацебо . Безопасность и эффективность этой экспериментальной терапии для лечения COVID-19 продолжают оцениваться.

Казиривимаб и имдевимаб необходимо вводить вместе внутривенной (IV) инфузией.

Казиривимаб и имдевимаб не разрешены для пациентов, которые госпитализированы из-за COVID-19 или нуждаются в кислородной терапии из-за COVID-19. Польза от лечения казиривимабом и имдевимабом у пациентов, госпитализированных из-за COVID-19, не показана. Моноклональные антитела, такие как казиривимаб и имдевимаб, могут быть связаны с худшими клиническими исходами при введении госпитализированным пациентам с COVID-19, которым требуется кислород с высокой скоростью потока или механическая вентиляция.

«FDA по-прежнему привержено делу улучшения здоровья населения страны во время этой беспрецедентной пандемии. Разрешение этих методов лечения с использованием моноклональных антител может помочь амбулаторным пациентам избежать госпитализации и облегчить нагрузку на нашу систему здравоохранения », — сказал комиссар FDA Стивен М. Хан, доктор медицинских наук.« В рамках нашей Программы ускоренного лечения коронавируса FDA использует все возможные пути для создания новых методов лечения. доступны для пациентов как можно быстрее, продолжая изучать безопасность и эффективность этих методов лечения.”

Моноклональные антитела — это белки, полученные в лаборатории, которые имитируют способность иммунной системы бороться с вредными патогенами, такими как вирусы. Казиривимаб и имдевимаб представляют собой моноклональные антитела, которые специфически направлены против шипового белка SARS-CoV-2 и предназначены для блокирования прикрепления вируса и его проникновения в клетки человека.

«Экстренная авторизация этих моноклональных антител, вводимых вместе, предлагает поставщикам медицинских услуг еще один инструмент в борьбе с пандемией», — сказала Патриция Каваццони, M.Д., исполняющий обязанности директора Центра оценки и исследования лекарственных средств FDA. «Мы продолжим содействовать разработке, оценке и доступности методов лечения COVID-19».

Выдача EUA отличается от утверждения FDA. При принятии решения о выдаче EUA FDA оценивает все доступные научные данные и тщательно уравновешивает любые известные или потенциальные риски с любыми известными или потенциальными преимуществами продукта для использования во время чрезвычайной ситуации. Основываясь на обзоре совокупности имеющихся научных данных, проведенного FDA, агентство пришло к выводу, что есть основания полагать, что одновременное введение казиривимаба и имдевимаба может быть эффективным при лечении пациентов с COVID-19 легкой или средней степени тяжести.При использовании для лечения COVID-19 у уполномоченного населения известные и потенциальные преимущества этих антител перевешивают известные и потенциальные риски. Не существует адекватных, одобренных и доступных альтернативных методов лечения казиривимаба и имдевимаба, вводимых вместе для утвержденной группы населения.

Данные, подтверждающие эту EUA для казиривимаба и имдевимаба, основаны на рандомизированном двойном слепом плацебо-контролируемом клиническом исследовании с участием 799 не госпитализированных взрослых с легкими или умеренными симптомами COVID-19.Из этих пациентов 266 получили однократную внутривенную инфузию 2400 миллиграммов казиривимаба и имдевимаба (по 1200 мг каждого), 267 получили 8000 мг казиривимаба и имдевимаба (4000 мг каждого) и 266 получили плацебо в течение трех дней после получения положительного результата. Тест на вирус SARS-CoV-2.

Предварительно заданной первичной конечной точкой исследования было средневзвешенное по времени изменение вирусной нагрузки по сравнению с исходным уровнем. Снижение вирусной нагрузки у пациентов, получавших казиривимаб и имдевимаб, было больше, чем у пациентов, получавших плацебо, на седьмой день. Однако наиболее важные доказательства того, что одновременное введение казиривимаба и имдевимаба может быть эффективным, были получены из заранее определенной вторичной конечной точки посещений врача, связанных с COVID-19, особенно госпитализаций и обращений в отделения неотложной помощи в течение 28 дней после лечения. Что касается пациентов с высоким риском прогрессирования заболевания, то госпитализации и обращения в отделения неотложной помощи произошли в среднем у 3% пациентов, получавших казиривимаб и имдевимаб, по сравнению с 9% у пациентов, получавших плацебо. Влияние на вирусную нагрузку, уменьшение количества госпитализаций и посещений скорой помощи было одинаковым у пациентов, получавших одну из двух доз казиривимаба и имдевимаба.

Согласно EUA, информационные бюллетени, содержащие важную информацию об использовании казиривимаба и имдевимаба, вводимых вместе для лечения COVID-19 в соответствии с утверждением, должны быть доступны поставщикам медицинских услуг, пациентам и лицам, осуществляющим уход. Эти информационные бюллетени включают инструкции по дозировке, возможные побочные эффекты и лекарственные взаимодействия. Возможные побочные эффекты казиривимаба и имдевимаба включают: анафилаксию и реакции, связанные с инфузией, лихорадку, озноб, крапивницу, зуд и приливы.

EUA была выдана Regeneron Pharmaceuticals Inc.

FDA, агентство в составе Министерства здравоохранения и социальных служб США, защищает здоровье населения, обеспечивая безопасность, эффективность и безопасность лекарственных и ветеринарных препаратов, вакцин и других биологических продуктов для использования человеком, а также медицинских устройств. Агентство также отвечает за безопасность продуктов питания, косметики, пищевых добавок, продуктов, излучающих электронное излучение, а также за регулирование табачных изделий.

###



Связанная информация


Два исследования показывают, что антитела к COVID-19 действуют 8 месяцев.

Два исследования, опубликованные вчера, демонстрируют, что иммунный ответ COVID-19 сохраняется до 8 месяцев, хотя авторы сосредотачиваются на разных причинах.

Первое исследование, опубликованное в журнале Science Immunology , отслеживало небольшую когорту австралийцев с 4-го по 242-й день после заражения. Все пациенты продемонстрировали наличие В-клеток памяти — иммунных клеток, которые «запоминают» вирусные белки и могут запускать быстрое производство антител при повторном контакте с вирусом в течение 8 месяцев после первоначального заражения.

Во втором исследовании изучали ответы антител у 58 подтвержденных пациентов с COVID-19 в Южной Корее через 8 месяцев после бессимптомной или легкой инфекции SARS-CoV-2, обнаружив высокие уровни сывороточных антител.Эти результаты, опубликованные в журнале Emerging Infectious Diseases , противоречат как данным первого исследования по антителам, так и предыдущим исследованиям, которые показали, что количество антител уменьшается через 20 дней, но авторы предполагают, что различия в характеристиках иммуноанализа и производстве могут быть ответственны за разницу.

В-клетки памяти — ключ к обнаружению иммунного ответа

Для австралийского исследования исследователи взяли образцы крови 25 подтвержденных пациентов с COVID-19 с разной степенью тяжести заболевания и 36 здоровых контрольных пациентов с марта по сентябрь, оценив статус антител каждого пациента и уровни вирус-специфических иммунных клеток.

Авторы исследования обнаружили, что к 6-му дню после инфицирования у всех пациентов наблюдались антитела иммуноглобулина (Ig) G к вирусному рецептор-связывающему домену — белку на поверхности вируса, который связывается с клеточными рецепторами, обеспечивая проникновение и инфицирование, а также нуклеокапсидный белок, защитная белковая оболочка вируса. Уровни IgG у пациентов начали снижаться через 20 дней после появления симптомов.

Напротив, авторы исследования обнаружили, что уровни В-клеток памяти продолжали расти до 150 дней после заражения и оставались обнаруживаемыми через 240 дней после появления симптомов, что позволяет предположить, что иммунная система пациента была настроена для ответа на повторное заражение.Авторы говорят, что из-за своего длительного присутствия клетки могут быть лучшим индикатором долгосрочного иммунного ответа, чем сывороточные антитела.

Результаты исследования дают надежду на то, что вакцины будут генерировать аналогичную продолжительность защиты, и авторы говорят, что клеточный иммунитет может объяснить, почему имеется мало задокументированных случаев повторного заражения SARS-CoV-2.

«Эти результаты важны, потому что они однозначно показывают, что пациенты, инфицированные вирусом COVID-19, действительно сохраняют иммунитет против вируса и болезни», — сказал старший автор Менно ван Зельм, доктор философии, в пресс-релизе Университета Монаша. вчерашний день.

«Это было черное облако, нависшее над потенциальной защитой, которую может обеспечить любая вакцина против COVID-19, и вселяет реальную надежду на то, что, как только вакцина или вакцины будут разработаны, они обеспечат долгосрочную защиту».

Антитела через 8 месяцев после заражения в Корее

Во втором исследовании ученые измерили антитела, специфичные для SARS-CoV-2, с помощью четырех коммерческих иммуноанализа у изолированных пациентов в общественном лечебном центре больницы Сеульского национального университета с 5 марта по 9 апреля. .Три из четырех анализов показали высокий уровень серопозитивности (от 69% до 91,4%; P <0,01), в отличие от еще одного более раннего исследования, показавшего, что бессимптомные пациенты становятся серонегативными через 2–3 месяца после заражения.

«Показатели различались в зависимости от методов иммуноанализа или производителей, что объясняет различия в показателях между исследованиями», — пишут авторы. Например, по их словам, исследование BMJ , проведенное в июле года, показало, что тесты хемилюминесцентного иммуноанализа имели 97,8% чувствительность к IgG или IgM, тогда как тесты с ферментным иммуносорбентом имели только 84.3%.

Нейтрализующая активность вируса, необходимая для защиты от повторного заражения, была обнаружена только у 53,4% участников исследования через 8 месяцев после заражения, что значительно ниже, чем показатель положительных результатов иммуноанализа.

«Несмотря на опасения по поводу ослабления иммунитета, соответствующие иммуноанализы могут выявить антитела против SARS-CoV-2 через 8 месяцев после заражения у большинства бессимптомных или слабо симптоматических лиц», — заключили авторы.

Моноклональные антитела к COVID-19 | Инфекционные болезни | JAMA

Моноклональные антитела , разработанные для имитации естественного иммунного ответа организма, доступны для лечения COVID-19 у пациентов с высоким риском прогрессирования до тяжелого заболевания.

Существует несколько одобренных методов лечения коронавирусной болезни 2019 (COVID-19) для госпитализированных пациентов, но мало для пациентов, которые недостаточно больны для госпитализации. Моноклональные антитела — это новое средство для лечения амбулаторных пациентов с COVID-19, которые подвержены риску прогрессирования до тяжелого заболевания.

Что такое моноклональное антитело?

Антитело — это белок, который естественным образом вырабатывается иммунной системой в ответ на инфекцию.Моноклональное антитело — это молекула, разработанная в лаборатории, которая предназначена для имитации или усиления естественного ответа иммунной системы организма на захватчика, такого как рак или инфекция. Моноклональные антитела имеют преимущество перед другими видами лечения инфекции, потому что они созданы специально для нацеливания на важную часть инфекционного процесса. Моноклональное антитело создается путем воздействия на лейкоцит определенного вирусного белка, который затем клонируется для массового производства антител, направленных на этот вирус.До COVID-19 были разработаны моноклональные антитела для лечения нескольких вирусных инфекций, таких как лихорадка Эбола и бешенство.

Лечение моноклональными антителами для COVID-19

Коронавирус 2 тяжелого острого респираторного синдрома (SARS-CoV-2) имеет на своей поверхности шипованный белок, который помогает вирусу прикрепляться и проникать в клетки человека.Было разработано несколько моноклональных антител, которые связываются со спайковым белком SARS-CoV-2 и блокируют проникновение вируса в клетки человека. Пациенты с COVID-19 могут получить внутривенную (IV) инфузию моноклонального антитела, как правило, в отделении неотложной помощи, инфузионном центре или другом амбулаторном учреждении (например, на дому у пациента или в доме престарелых).

Моноклональные антитела к SARS-CoV-2, варианты

Недавно были обнаружены новые варианты вируса SARS-CoV-2.Эти варианты возникают из-за мутаций в геноме вируса. Моноклональные антитела остаются эффективными против нового варианта SARS-CoV-2 под названием B.1.1.7 (впервые зарегистрированного в Соединенном Королевстве). Однако некоторые мутации могут вызывать изменения в белке шипа, которые могут повлиять на эффективность доступных в настоящее время моноклональных антител.

Потенциальные риски моноклональных антител

Некоторые пациенты могут испытывать аллергическую или неаллергическую реакцию, связанную с инфузией.Обе реакции связаны с активацией иммунной системы в ответ на антитело, но протекают по-разному. Реакции, связанные с инфузией, кажутся редкими, но могут вызывать покраснение, зуд, одышку или низкое кровяное давление. Также существуют потенциальные побочные эффекты приема любого внутривенного лекарства, включая боль, болезненность или синяки вокруг места внутривенного вливания.

Кому нужно лечение моноклональными антителами?

В настоящее время 2 продукта с моноклональными антителами используются для лечения COVID-19 в соответствии с разрешением на экстренное использование Управления по контролю за продуктами и лекарствами США (FDA).Хотя исследователи все еще изучают, каким пациентам с COVID-19 с наибольшей вероятностью будет полезна терапия моноклональными антителами, ранние данные свидетельствуют о большей пользе у пациентов с высоким риском, в том числе старше 65 лет, с подавленной иммунной системой или с определенными заболеваниями. в том числе ожирение. Моноклональные антитела предназначены для пациентов, у которых недавно диагностирован COVID-19, которые недостаточно больны, чтобы лечь в больницу, но имеют некоторые факторы риска тяжелой инфекции. Важно дать настой как можно раньше в ходе инфекции, поэтому пациенты должны обратиться за медицинской помощью и пройти обследование, как только у них появятся симптомы.

Идентификационный номер прямоугольной секции

Опубликован онлайн: 5 февраля 2021 г. doi: 10.1001 / jama.2021.1225

Раскрытие информации о конфликте интересов: Д-р Ганди и д-р Петти сообщили о получении грантов от Blue Cross Blue Shield of Michigan. О других раскрытиях информации не сообщалось.

Источники: Kim PS, Read SW, Fauci AS. Лечение раннего COVID-19: острая необходимость. JAMA . 2020; 324 (21): 2149-2150.DOI: 10.1001 / jama.2020.22813

Готлиб Р.Л., Нирула А., Чен П. и др. Влияние бамланивимаба в качестве монотерапии или в комбинации с этесевимабом на вирусную нагрузку у пациентов с COVID-19 от легкой до умеренной степени тяжести. JAMA . Опубликовано онлайн 21 января 2021 г. doi: 10.1001 / jama.2021.0202

Коронавирусная болезнь (COVID-19): серология, антитела и иммунитет

«Коллективный иммунитет», также известный как «популяционный иммунитет», — это непрямая защита от инфекционного заболевания, которое возникает, когда популяция приобретает иммунитет в результате вакцинации или иммунитета, выработанного в результате предыдущей инфекции.ВОЗ поддерживает достижение «коллективного иммунитета» посредством вакцинации, не позволяя болезни распространяться среди любого сегмента населения, поскольку это может привести к ненужным случаям заболевания и смерти.

Коллективный иммунитет против COVID-19 должен достигаться путем защиты людей с помощью вакцинации, а не путем воздействия на них патогена, вызывающего болезнь. Подробнее читайте в брифинге для СМИ от 12 октября для СМИ .

Вакцины обучают нашу иммунную систему создавать белки, которые борются с болезнями, известные как «антитела», точно так же, как это происходит, когда мы подвергаемся воздействию болезни, но — что очень важно — вакцины работают, не вызывая у нас болезней.Вакцинированные люди защищены от заражения данной болезнью и передачи возбудителя, разрывая любые цепи передачи. Посетите нашу веб-страницу о COVID-19 и вакцинах для получения более подробной информации.

Для безопасного достижения коллективного иммунитета против COVID-19 значительная часть населения должна быть вакцинирована, что снизит общее количество вируса, способного распространяться среди всего населения. Одна из целей работы над коллективным иммунитетом — сохранить уязвимые группы, которые не могут пройти вакцинацию (например,грамм. по состоянию здоровья, например, аллергическим реакциям на вакцину) безопасен и защищен от болезней. Прочтите наш Q&A о вакцинах и иммунизации для получения дополнительной информации.

Процент людей, которым необходим иммунитет для достижения коллективного иммунитета, зависит от каждого заболевания. Например, коллективный иммунитет против кори требует вакцинации около 95% населения. Остальные 5% будут защищены тем, что корь не будет распространяться среди вакцинированных.Для полиомиелита порог составляет около 80%. Доля населения, которая должна быть вакцинирована против COVID-19, чтобы вызвать коллективный иммунитет, неизвестна. Это важная область исследований, которая, вероятно, будет варьироваться в зависимости от сообщества, вакцины, групп населения, которым в первую очередь проводится вакцинация, и других факторов.

Достижение коллективного иммунитета с помощью безопасных и эффективных вакцин делает болезни более редкими и спасает жизни.

Узнайте больше о науке, лежащей в основе коллективного иммунитета, посмотрев или прочитав это интервью с главным научным сотрудником ВОЗ д-ром Сумья Сваминатан.

Два исследования показывают, что антитела к COVID-19 сохраняются в течение нескольких месяцев — Блог директора NIH

Опубликовано доктор Фрэнсис Коллинз

Подпись под фото: Художественное изображение вируса SARS-CoV-2 (оранжевый), покрытого антителами (белый), генерируемых иммунными В-клетками (серый) в нижнем левом углу.Предоставлено: iStock / selvanegra

. Более 8 миллионов человек в США уже дали положительный результат на COVID-19. Для тех, кто выздоровел, многие задаются вопросом, может ли однократная защита от SARS-CoV-2 — коронавируса, вызывающего COVID-19, — их иммунная система защитит их от повторного заражения. И если да, то как долго продлится этот «приобретенный иммунитет»?

Первые данные дали надежду на то, что приобретение иммунитета возможно. Но некоторые последующие исследования показали, что иммунная защита может быть недолговечной.Хотя необходимы дополнительные исследования, результаты двух недавних исследований, опубликованных в журнале Science Immunology , подтверждают ранние данные и дают более полное представление о природе иммунного ответа человека на этот коронавирус [1,2].

Новые данные показывают, что люди, пережившие инфекцию COVID-19, продолжают вырабатывать защитные антитела против ключевых компонентов вируса в течение как минимум трех-четырех месяцев после появления первых симптомов. Напротив, некоторые другие типы антител разрушаются быстрее.Результаты дают надежду на то, что люди, инфицированные вирусом, будут иметь длительную защиту антител от повторного заражения, хотя, как долго еще предстоит определить.

В одном из двух исследований, частично финансируемых NIH, исследователи под руководством Ришель Чарльз из Массачусетской больницы общего профиля, Бостон, стремились получить более подробное представление об ответах антител после заражения SARS-CoV-2. Чтобы получить более подробное представление, они включили 343 пациента, большинство из которых имели тяжелую форму COVID-19, требующую госпитализации.Они изучали свои реакции антител в течение 122 дней после появления симптомов и сравнивали их с антителами в более чем 1500 образцах крови, собранных до начала пандемии.

Исследователи охарактеризовали развитие трех типов антител в образцах крови. Первым типом был иммуноглобулин G (IgG), который может обеспечивать устойчивый иммунитет. Вторым типом был иммуноглобулин А (IgA), который защищает от инфекций на поверхности слизистой оболочки тела, например, инфекции дыхательных и желудочно-кишечных трактов, и в больших количествах содержится в слезах, слизи и других выделениях организма.Третий тип — иммуноглобулин М (IgM), который организм вырабатывает первым при борьбе с инфекцией.

Они обнаружили, что все три типа присутствовали примерно через 12 дней после заражения. Антитела IgA и IgM были недолговечными против белка-шипа, венчающего SARS-CoV-2, и исчезли в течение примерно двух месяцев.

Хорошая новость заключается в том, что антитела IgG с более длительным действием сохраняются у этих пациентов до четырех месяцев, то есть столько, сколько исследователи смогли найти.Уровни этих антител IgG также служили индикатором наличия защитных антител, способных нейтрализовать SARS-CoV-2 в лаборатории. Более того, эта способность не снизилась в течение 75 дней после появления симптомов. Хотя необходимы более длительные исследования, полученные результаты подтверждают, что защитные реакции антител против нового вируса действительно сохраняются.

Другое исследование пришло к очень похожим выводам. Команда под руководством Дженнифер Гоммерман и Анн-Клод Гинграс из Университета Торонто, Канада, профилировала те же три типа реакции антител против шипового белка SARS-CoV-2. Они создали профили с использованием крови и слюны, взятых у 439 человек. , не все из которых нуждались в госпитализации, у которых симптомы COVID-19 развились от 3 до 115 дней до этого.Затем команда сравнила профили антител пациентов с COVID-19 с профилями людей, отрицательных по COVID-19.

Исследователи обнаружили, что антитела против SARS-CoV-2 легко обнаруживаются в крови и слюне. Уровни IgG достигли пика примерно от двух недель до одного месяца после заражения, а затем оставались стабильными в течение более трех месяцев. Подобно бостонской команде, канадская группа заметила быстрое падение уровня антител IgA и IgM.

Результаты показывают, что тесты на антитела могут служить важным инструментом для отслеживания распространения SARS-CoV-2 в наших сообществах.В отличие от тестов на сам вирус, тесты на антитела предоставляют средства для обнаружения инфекций, которые произошли когда-то в прошлом, включая те, которые могли протекать бессимптомно. Результаты канадской команды также предполагают, что тесты на антитела IgG в слюне могут быть удобным способом отслеживания приобретенного иммунитета человека к COVID-19.

Поскольку антитела IgA и IgM снижаются быстрее, тестирование на эти различные типы антител также может помочь отличить инфекцию в течение последних двух месяцев от инфекции, которая, скорее всего, возникла еще раньше. Такие детали важны для заполнения пробелов в нашем понимании инфекций COVID-19 и отслеживания их распространения в наших сообществах.

Тем не менее, есть редкие сообщения о людях, которые пережили один бой с COVID-19 и были инфицированы другим штаммом SARS-CoV-2 несколько недель спустя [3]. Однако редкость таких сообщений свидетельствует о том, что приобретенный иммунитет после инфекции SARS-CoV-2 в целом является защитным.

Остается много открытых вопросов, и для ответа на них потребуется провести более масштабные исследования с большим разнообразием выживших с COVID-19.Итак, я рад отметить, что Национальный институт рака (NCI) Национального института здоровья недавно запустил сеть серологических наук NCI по COVID19 (SeroNet), которая теперь является крупнейшим в стране скоординированным усилием по характеристике иммунного ответа на COVID-19 [4].

Сеть была создана на средства из экстренного ассигнования Конгресса США в размере более 300 миллионов долларов на разработку, проверку, улучшение и внедрение тестирования на антитела к COVID-19 и связанных с ним технологий. С помощью этой сети и текущих исследований по всему миру появится более четкая картина приобретенного иммунитета, который поможет контролировать будущие вспышки COVID-19.

Ссылки :

[1] Устойчивость и ослабление ответов человеческих антител на рецептор-связывающий домен спайкового белка SARS-CoV-2 у пациентов с COVID-19. Айер А.С., Джонс Ф.К., Нодушани А., Райан Э.Т., Харрис Дж. Б., Чарльз Р. К. и др. Sci Immunol. 2020 Октябрь 8; 5 (52): eabe0367.

[2] Сохранение реакции антител в сыворотке и слюне на спайковые антигены SARS-CoV-2 у пациентов с COVID-19. Ишо Б., Абэ К.Т., Зуо М., Дюрохер И., МакГир А.Дж., Гоммерман Дж.Л., Гинграс А.С. и др.Sci Immunol. 2020 Октябрь 8; 5 (52): eabe5511.

[3] Что означает повторное инфицирование для COVID-19. Ивасаки А. Lancet Infect Dis, 12 октября 2020 г. [Epub до печати]

[4] NIH запускает Сеть серологических наук по COVID-19, объявляет получателей грантов и контрактов. Национальные институты здоровья. 2020 8 октября.

Ссылки :

Коронавирус (COVID-19) (NIH)

Charles Lab (Массачусетская больница общего профиля, Бостон)

Gingras Lab (Университет Торонто, Канада)

Дженнифер Гоммерман (Университет Торонто, Канада)

NCI Сеть серологических наук по COVID-19 (SeroNet) (Национальный институт рака / NIH)

Поддержка NIH: Национальный институт аллергии и инфекционных заболеваний ; Национальный институт общих медицинских наук ; Национальный институт рака

Связанные

Опубликовано в: Новости

Теги: приобретенный иммунитет, антитела, кровь, коронавирус, COVID-19, тест на антитела COVID-19, повторное заражение COVID-19, IgA, IgG, IgM, иммунитет, NCI Serological Sciences Network для COVID-19, новый коронавирус, пандемия, слюна, SARS-CoV-2, SeroNet, спайковый белок

Иммуностимулирующие моноклональные антитела для лечения рака

Иммунная система регулируется очень сложным балансом сигналов, передаваемых стимулирующими и ингибирующими рецепторами. Более чем любое другое открытие, моноклональные антитела (mAb) 1 позволили нам как идентифицировать, так и манипулировать этими молекулами, обеспечивая важный новый класс иммуностимулирующих терапевтических средств, которые могут дополнять низкомолекулярные терапевтические средства, находящиеся в стадии активной разработки 2 . Специфическое распознавание mAb позволило идентифицировать цитокины и молекулы клеточной поверхности, участвующие в гуморальных (опосредованных антителами) и клеточных иммунных ответах. Более того, mAb обладают специфичностью в отношении своих молекул-мишеней и способностью либо активировать (агонистические mAb), либо подавлять (антагонистические mAb) молекулярную функцию мишени.Иммуностимулирующие mAb можно определить как агенты, усиливающие текущие иммунные ответы. Как таковые, они обладают потенциалом для усиления иммунного ответа на опухоли, который подавляется у многих онкологических больных с помощью различных механизмов 3,4 .

Стимулирование иммунитета у онкологических больных

Отторжение опухолевых клеток требует согласованного набора событий, опосредованных несколькими типами лейкоцитов, включая CD4 + и CD8 + Т-лимфоциты, дендритные клетки (DC) и естественные киллерные (NK) клетки (рис.1). В лимфатических узлах, дренирующих опухоль, каждый Т-лимфоцит со своим эксклюзивным Т-клеточным рецептором (TCR) имеет возможность сканировать поверхности DC на предмет специфического антигенного пептида в комплексе с молекулами главного комплекса гистосовместимости (MHC) класса I или класса II. Передача сигналов от TCR является основным триггером управляемого антигеном деления лимфоцитов, выживания и дифференцировки в эффекторные Т-лимфоциты или Т-лимфоциты памяти (рис. 2), но, как ни парадоксально, это также может привести к толерантности. Толерантность опосредуется либо устранением антиген-специфических Т-клеток посредством индукции апоптоза (клональная делеция), либо функциональным параличом антиген-специфических Т-клеток (анергия) 5 . Опасное решение инициировать или прервать клеточный иммунный ответ в основном зависит от врожденного обнаружения антигенпрезентирующими ДК биомолекул, которые указывают на опасность 6 в форме присутствия микробов, стрессовой гибели клеток или воспаления 7 . Межклеточная коммуникация для инициирования, подавления или тонкой настройки клеточного иммунного ответа опосредуется растворимыми цитокинами и множеством пар рецептор-лиганд на поверхности соседних лейкоцитов (рис. 2).

Рисунок 1: Схематическое изображение точек вмешательства с иммуностимулирующими mAb.

Отторжение опухолевых клеток — это организованный набор событий, опосредованный несколькими типами лейкоцитов. Молекулярные и клеточные сети, определяющие интенсивность ответа, могут быть искусственно изменены с помощью mAb, которые действуют на указанные поверхностные гликопротеины. Считается, что оптимальный иммунный ответ инициируется активированной и / или зрелой дендритной клеткой (ДК), представляющей оптимальные уровни антигена в лимфоидной ткани. Эффекторные противоопухолевые лимфобласты CD4 + и CD8 + образуются строго регулируемым образом, который устанавливает порог активации, предотвращает чрезмерную активацию системы и ограничивает размер клональной экспансии.Клетки-естественные киллеры (NK) могут способствовать противоопухолевому ответу, способствуя воспалению, активируя ДК и лизис опухоли, которые могут обеспечивать остатки злокачественных клеток для перекрестной презентации ДК. Иммунный ответ на опухолевые антигены организован в лимфоидной ткани (обычно лимфатических узлах), которая дренирует ткань, в которой расположена опухоль, и затем активированные лимфоциты могут потенциально проникать в опухолевую ткань, опосредуя разрушение опухолевых клеток. Это ограничено несколькими супрессивными механизмами, которые опосредуются регуляторными Т-клетками (клетки T Reg ), миелоидными клетками, присутствующими в очаге опухоли, и растворимыми факторами, такими как трансформирующий фактор роста-β (TGFβ), интерлейкин 10 (IL10) и сосуды. фактор роста эндотелия (VEGF).Молекулярные мишени для иммуностимулирующих mAb обозначаются антителом, указывающим на название каждой молекулы. С фармакодинамической точки зрения иммуностимулирующие mAb можно классифицировать по следующим категориям, обозначенным цветами: (красный) mAb, которые способствуют функции рецептора лимфоцитов (агонистов), участвующего в иммунной активации; (синий) mAb, которые препятствуют функции рецептора лимфоцитов, участвующего в ингибировании или регулировании иммунного ответа; (зеленый) mAb, которые способствуют функции профессиональных антигенпрезентирующих клеток (APC), таких как DC, которые представляют антиген Т-лимфоцитам; (пурпурный) mAb, которые мешают ингибирующим молекулам, экспрессируемым опухолью или клетками в микроокружении опухоли, которые способствуют уклонению от иммунитета.

Фиг. 2: Костимулирующие и коингибирующие молекулы, нацеленные на иммуностимулирующие mAb.

Схематическое изображение поверхностных ко-сигнальных молекул на Т-клетках, релевантных для иммунотерапии рака, взаимодействующих со своими лигандами на антигенпрезентирующей клетке (APC). Эти поверхностные молекулы принадлежат к семействам рецепторов фактора некроза опухолей (TNF) и иммуноглобулинов, и их стимуляция или ингибирование может использоваться для усиления клеточного иммунного ответа против рака.Сверхактивация костимулирующих сигналов и инактивация коингибиторных функций может быть искусственно достигнута с помощью моноклональных антител (mAb) к агонистам и антагонистам. Некоторые из этих поверхностных молекул лимфоцитов являются конститутивными (например, CD28), некоторые конститутивно экспрессируются на одних клетках и индуцируются на других (таких как CD27 и CD40), тогда как другие индуцируются только после праймирования антигена (например, цитотоксические Т-лимфоциты). ассоциированный белок 4 (CTLA-4), 4-1BB, OX40, CD40L, BTLA и GITR) и поэтому избирательно экспрессируются на отвечающих лимфоцитах.Предполагается, что мишени индуцируемой экспрессии более избирательны и с меньшей вероятностью вызывают системные воспалительные синдромы.

После полной активации Т-лимфоциты достигают периферических тканей, отдавая предпочтение областям с воспалительным эндотелием сосудов. Активированные CD8 + Т-клетки, однажды загруженные цитолитическим аппаратом, убивают клетки-мишени, которые экспрессируют антиген-мишень в комплексе с небольшим количеством молекул MHC класса I. Активированные CD4 + Т-клетки также могут опосредовать разрушение опухолевых клеток, способствовать воспалению, взаимодействовать в индукции цитотоксических Т-лимфоцитов (CTL) CD8 + и помогать В-клеткам продуцировать разрушающие клетки противоопухолевые антитела.

Опухоли используют широкий спектр регуляторных механизмов иммунной системы, чтобы избежать или подавить иммунный ответ 3,4 . К ним относятся специализированные подмножества Т-клеток, которые подавляют клеточный иммунитет (регуляторные Т-клетки; клетки T Reg ) и множество растворимых факторов, таких как интерлейкин 10 (IL10), фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) и трансформирующий фактор роста-α ( TGFα) (рис.1). Фактически, успешный уход от иммунного надзора считается одним из необходимых признаков рака 8 .

Рассматривается ряд стратегий использования иммунной системы в борьбе с раком (иммунотерапия рака), включая иммуностимулирующие и ингибирующие mAb, противораковые вакцины 9 , иммуностимуляторы для повышения иммуногенности опухолевых клеток и адаптивный перенос культивированных активированных Т-лимфоциты (адоптивная Т-клеточная терапия) 10 .

Преимущества иммуностимулирующих mAb

mAb IgG — это большие сложные белки, устойчивые к разложению в сыворотке крови и обладающие молекулярными особенностями, которые обеспечивают их сохранение в кровотоке в течение длительного периода 11 .Однако преимущество длительного периода полувыведения сопровождается проблемой медленного обращения токсичности после лечения; Удаление моноклональных антител из кровотока затруднено и требует сложных процедур, таких как повторный плазмаферез.

Чтобы избежать внутренней иммуногенности mAb грызунов, эти биомолекулы в настоящее время генетически сконструированы для замены иммуногенных мышиных последовательностей на человеческие (что приводит к антителу, которое составляет ~ 95% человеческого) продуцируется у мышей, трансгенных по локусам иммуноглобулина человека 13,14 . Такие терапевтические антитела отличаются от эндогенного иммуноглобулина только по их антигенсвязывающему участку (идиотопу), поэтому количественные анализы для оценки их фармакокинетики должны основываться на иммуноанализах с использованием рекомбинантного антигена, адсорбированного на пластиковых чашках, или специфических антиидиотипических моноклональных антител, если они доступны. Появление технологии гуманизации или производства полностью человеческих антител произвело революцию в терапии mAb, сделав возможным повторное дозирование без индукции иммунных ответов против антител у пациента, что было невозможно с исходными антителами грызунов.

Дозы для людей обычно составляют около 2–20 мг на кг (массы тела), и большинство схем включают повторение с интервалом в 2–8 недель. Следовательно, для контроля качества, токсикологии и клинических испытаний требуются дорогостоящие партии по 100–200 г, соответствующие надлежащей производственной практике (GMP).

Бивалентность антигенсвязывающих сайтов mAb, вместе с возможностью гипер-перекрестного связывания рецепторами Fc на соседних лейкоцитах, обеспечивает способность сшивать белки, такие как рецепторы клеточной поверхности (часто связанные с агонистическими антителами), блокировать белок-белок узнавание или индуцирование конформационных изменений связанного целевого белка. MAb часто связываются со своими антигенами с аффинностью в несколько раз выше, чем природные лиганды. Эти молекулярные механизмы наделяют mAb различными функциональными возможностями в качестве агонистов или антагонистов передачи сигналов иммунной системы, опосредованной их белками-мишенями 15 .

Хотя новые mAb иногда могут обладать сильной иммуностимулирующей активностью и вызывать сильные противоопухолевые ответы, такая эффективность может иметь цену: токсичность. Описаны два типа токсичности, связанной с мишенью; генерализованная системная индукция провоспалительных медиаторов (индукция цитокинового шторма), которые могут вызывать опасный для жизни системный воспалительный синдром или синдром высвобождения цитокинов (вставка 1), и органоспецифический аутоиммунитет, который до сих пор был временным и обратимым при клиренсе антител .

МА, повышающие костимуляцию

Т-клетки активируются, когда они связывают антиген, представленный антигенпрезентирующими клетками (APC), через их комплекс TCR-CD3. Т-клетки также экспрессируют несколько ко-сигнальных молекул, обычно гликопротеинов клеточной поверхности, которые направляют, модулируют и точно настраивают сигналы TCR 16 (Рис. 1, 2). Как следствие, эти мембранные молекулы положительно и отрицательно контролируют праймирование, рост, дифференциацию и функциональное созревание ответа Т-клеток.Функциональные эффекты на активацию Т-клеток классифицируют сопутствующие сигнальные молекулы как костимуляторы или коингибиторы. Молекулы совместной передачи сигналов задействуют свои лиганды в организованных участках межклеточного взаимодействия между Т-клетками и APC, называемыми иммунологическими синапсами 17 . Большинство определенных ко-сигнальных молекул принадлежат либо к суперсемейству иммуноглобулина 16,18 , либо к суперсемейству рецепторов фактора некроза опухоли (TNFR) 19,20 (рис. 2).

CD28 .Двухсигнальная модель активации Т-клеток постулирует существование двух типов сигналов: антиген-зависимые TCR-опосредованные сигналы называются сигналом 1, а антиген-независимые костимулирующие сигналы называются сигналом 2. Классический сигнал 2 доставляется посредством молекула CD28 (экспрессируемая Т-клеткой) при связывании с лигандами CD80 (также известными как B7-1) или CD86 (также известными как B7-2) на APC. Комбинация сигналов 1 и 2 считается решающей для эффективной активации Т-клеток 21,22 .CD28 представляет собой член суперсемейства иммуноглобулинов, конститутивно экспрессирующийся на мембране большинства покоящихся Т-лимфоцитов CD4 + и примерно на половине Т-клеток CD8 + 21 . После взаимодействия со своим лигандом CD28 индуцирует сигнальные каскады, которые увеличивают пролиферацию, усиливают секрецию цитокинов, повышают экспрессию антиапоптотических генов и повышают энергетический метаболизм для поддержки активации лимфобластов 21,22 .

Опухолевые клетки, трансфицированные кассетами экспрессии CD80 или CD86, проявляют повышенную иммуногенность, что приводит к регрессии и вакцинации против исходных опухолевых клеток, которые не трансфицированы ни одним из лигандов 23,24 . Известно, что антитела против CD28 усиливают противоопухолевый иммунитет в сочетании с биспецифическими антителами, которые связывают как поверхностный опухолевый антиген, так и комплекс TCR-CD3 25 . В общем, лигирование CD28 без вовлечения TCR не влияет на Т-клетки, определяя его как костимулирующий рецептор. Однако некоторые антитела против CD28, называемые суперагонистическими антителами, связываются с конкретным эпитопом в CD28 и могут активировать Т-клетки без сопутствующего взаимодействия с TCR. Механизм активации Т-клеток этими суперагонистами неясен, но включает перекрестное связывание CD28 и может включать неспецифическое взаимодействие компонентов TCR вместе с взаимодействием CD28 через сайт связывания антигена.Использование суперагонистских анти-CD28-антител in vivo приводит к быстрому размножению клеток T Reg 26 , и экспериментальные данные на грызунах предполагают, что они обладают потенциалом для лечения аутоиммунных состояний 27 и болезни трансплантат против хозяина 28 . Клетки множественной миеломы также экспрессируют CD28, что указывает на то, что эти антитела могут оказаться полезными для лечения этого заболевания 29 . Однако первоначальное клиническое испытание суперагонистических антител против CD28 привело к резкой клинической токсичности (вставка 1).

Применение ex vivo агонистических моноклональных антител против CD28 человека клинического уровня представляет собой устойчивое распространение в культуре Т-клеток для адоптивной терапии 30 . Этот подход может быть использован для крупномасштабного размножения культур Т-клеток после того, как специфичность была установлена ​​с помощью первоначальных методов культивирования, основанных на антигенах 31 .

4-1BB . Суперсемейство рецепторов TNF включает несколько членов, которые доставляют костимулирующие сигналы Т-клеткам 19,20,32 (рис.2). 4-1BB, также известный как CD137, экспрессируется на активированных Т-клетках (CD8 + , CD4 + , включая T клетки Reg и NKT-клетки) 33 , цитокин-активированные NK-клетки 34 , активированные DC 35 , эозинофилы, тучные клетки и, что интересно, эндотелиальные клетки в некоторых метастатических опухолях 19 . Существует один охарактеризованный лиганд (4-1BBL, также известный как CD137L) 36 , экспрессируемый на активированных DC, B-клетках и макрофагах. После связывания со своим лигандом 4-1BB доставляет костимуляторный сигнал, который может функционировать независимо от CD28 (Ref.37). Передача сигналов 4-1BB индуцирует повышающую регуляцию антиапоптотических генов BCL2, BCL-XL и BFL1, которые обеспечивают защиту от индуцированной активацией гибели Т-клеток (AICD) 19,38 . В соответствии с его функцией костимулятора активации Т-клеток, нулевые мыши 4-1BB и нулевые мыши 4-1BBL имеют менее устойчивый CTL-ответ против вирусов, таких как лимфоцитарный хориоменингит и грипп 39,40 . Недавние данные показывают, что 4-1BB необходим для стабильной дифференцировки CTL и создания долгоживущих CTL с памятью 41 .

Сингенные саркомы, мастоцитомы и лимфомы, которые экспрессируют трансфицированный 4-1BBL, редко могут прижиться у сингенных мышей. Совместная экспрессия 4-1BBL и CD80 или CD86 в этих опухолях синергетична в предотвращении приживления 42,43 . Опухолевые клетки, экспрессирующие 4-1BBL, являются митогенными для предварительно активированных CD8 + и CD4 + Т-клеток. In vitro трансфекция 4-1BBL в клетки K562, которые используются в качестве искусственных APC, вместе с mAb против CD28 улучшила рост культур Т-клеток человека 44 .В отличие от опухолевых клеток, экспрессирующих CD80, клетки мастоцитомы P815 и B-клеточной лимфомы, экспрессирующие 4-1BBL, неэффективно ингибировали рост соответствующих нетрансфицированных опухолевых клеток. Однако одноцепочечное антитело против 4-1BB, закрепленное на клеточной поверхности клеток меланомы, функционировало как сильнодействующая вакцина против нетрансфицированных клеток меланомы мыши. Терапевтическая эффективность этой вакцины основывалась главным образом на способности NK-клеток и CD4 + Т-клеток, поскольку их молекулы 4-1BB предположительно взаимодействуют с искусственным лигандом с более высоким сродством на мембране клеток меланомы 45 .

Активирующие (агонистические) mAb, которые связывают 4-1BB (ссылка 46), вызывают полную регрессию многих типов сформировавшихся опухолей, происходящих из линий сингенных опухолевых клеток мыши 47 . Считается, что этот противоопухолевый эффект включает активацию наивных Т-клеток, которые специфичны для опухолевых антигенов, перекрестно презентируемых DC. Следовательно, циркулирующие антитела против 4-1BB будут совместно стимулировать праймированные Т-клетки 4-1BB + везде, где они мигрируют по телу (рис. 2). Регрессия опухоли требует активности CD8 + Т-лимфоцитов 47 и NK-клеток 34 , тогда как CD4 + Т-клетки необходимы в некоторых, но не во всех моделях трансплантированных опухолей (рис.1). Отторжение опухоли сопровождается сильными ответами CTL со специфической цитолитической активностью и секрецией интерферона-γ (IFNγ). Слабо иммуногенные опухоли, которые были устойчивы к mAb против 4-1BB, были ликвидированы при комбинировании с пептидными вакцинами для экспериментальных опухолевых антигенов, таких как E7 вируса папилломы человека-16 или протеин 2, родственный тирозиназе, в результате повышенного ответа CTL на эти ранее игнорированные антигены 48 . В этом отношении вакцинация DC, подвергнутая импульсной обработке лизатами опухолей, также привела к синергическому и успешному лечению двух опухолей, устойчивых к 4-1BB-mAb 49 .

В контексте адоптивной Т-клеточной терапии Т-клетки, которые экспрессируют 4-1BB и которые вводятся одновременно с моноклональными антителами против 4-1BB, обладают сильным синергическим эффектом у мышей, как сообщается, благодаря ингибированию AICD в адоптивно перенесенных лимфоцитах 50 . Лечение анти-4-1BB также имеет потенциал для профилактической вакцинации против вирусных антигенов гриппа и вируса гепатита С 51,52 . Как опухолевые антигены, так и вирусные антигены при хронических инфекциях вызывают гипореактивность в результате анергии или истощения Т-клеток, специфичных для высокой авидности.Было показано, что обработка mAb 4-1BB отменяет толерантность Т-клеток CD8 + в моделях опухолей 53 . Интересно, что лигирование 4-1BB приводит к появлению CD8 + Т-клеток, которые имеют тенденцию сохраняться в виде более многочисленной популяции Т-клеток памяти.

Разработаны гуманизированные моноклональные антитела против 4-1BB (BMS-663513), и начато клиническое испытание фазы I с увеличением дозы у 60 пациентов с метастатическими или местно-распространенными солидными опухолями (база данных клинических испытаний Национального института здравоохранения NCT00309023) .

Как ни парадоксально было показано, что mAb против 4-1BB, характеризующиеся их противоопухолевой активностью, предотвращают или улучшают различные аутоиммунные состояния у мышей 54 . Кроме того, экспериментальные данные показывают, что они могут подавлять гуморальный иммунитет, возможно, из-за вмешательства в CD4 + Т-хелперные клетки 1 55 . Эти противоположные эффекты могут объясняться несколькими механизмами, включая повышенную активность клеток T Reg , вмешательство в активацию Т-клеток CD4 + и IFNγ-зависимую индукцию иммуносупрессивного фермента 2,3-индоламиндиоксигеназы (IDO) 54 .В качестве возможного исключения из положительного воздействия mAb против 4-1BB на аутоиммунитет исследования на мышах показали, что mAb против 4-1BB могут вызывать легкие мультифокальные воспалительные инфильтраты в печени, хотя клиническое значение этого наблюдения неясно 56 .

OX40 . OX40, также известный как CD134 и TNR4, является членом семейства TNFR, который экспрессируется на активированных, но не покоящихся CD4 + и CD8 + Т-клетках 19,20 .Его основная роль — функционировать как поздний костимуляторный рецептор для CD4 + и CD8 + Т-лимфоцитов 32 (рис. 1, 2). Его лиганд, OX40L, экспрессируется на активированных APC (DC, B-клетки и макрофаги), а также может экспрессироваться на активированных T-клетках и эндотелиальных клетках 19 . Лигирование OX40 костимулирует пролиферацию и выживание Т-клеток 32 , и хотя OX40 и 4-1BB, по-видимому, перекрываются в своих внутриклеточных сигналах, существуют различия 57 , возможно, связанные с тем фактом, что эти молекулы могут гетеродимеризоваться в плазме. мембрана 58 .Искусственная совместная стимуляция CD4 + и CD8 + Т-клеток посредством активации OX40 увеличивает пролиферацию, выживаемость и секрецию цитокинов. Соответственно, дефицит OX40 или OX40L у мышей приводит к более слабому CD4 + Т-хелперный иммунный ответ 59,60 .

Агонистические моноклональные антитела против OX40, как сообщалось, обращают вспять толерантность к CD4 + Т-лимфоцитам, изменяя анергическое состояние, вызванное воздействием антигена (в форме растворимого белка) на CD4 + Т-клеток в условиях не- воспалительные состояния 61 .Лигирование OX40 с агонистическими антителами или с химерным белком OX40L – Ig повышает иммунитет опухоли против различных трансплантируемых сингенных опухолей 62,63 . Более того, экспрессия экзогенного OX40L опухолевыми клетками увеличивает их иммуногенность, и они отторгаются через CD4 + Т-хелперные клетки 1 (Th2) и ответы CTL 64 .

Аутоиммунитет как побочный эффект, вызванный стимуляцией OX40, еще не зарегистрирован, хотя его нельзя исключать, поскольку OX40 был обнаружен на лимфоцитах CD4 + , инфильтрирующих рассеянный склероз и воспалительные заболевания кишечника. Фаза I клинических испытаний с использованием мышиных моноклональных антител против OX40 человека была начата у пациентов с распространенным раком множественного тканевого происхождения (В. Урба, личное сообщение), хотя возможность введения повторных доз этого ксеногенного антитела пациентам будет ограничена из-за к иммунному ответу, который будет возникать против мышиных последовательностей антитела.

МА, которые препятствуют совместному ингибированию

Совместное ингибирование можно определить как активность, опосредованную рецепторами клеточной поверхности, которые подавляют активацию лимфоцитов и / или эффекторную функцию 18,23 .Интересно, что ко-ингибиторные пары рецептор-лиганд превосходят по численности пары костимулирующих в суперсемействе иммуноглобулинов (Рис. 2), указывая тем самым, что аутоиммунитет и системное воспаление были сильным селективным давлением во время эволюции. Альтернативная возможность, предложенная J. P. Allison, заключается в том, что коингибирующие молекулы динамически регулируют порог активации Т-клеток, чтобы сдерживать Т-клетки с наиболее активными TCR и разрешать активацию Т-клеток с более низким сродством 65 . Получающийся в результате поликлональный (мультиспецифический) иммунный ответ будет менее подвержен неудаче из-за потери или мутации эпитопа.

CTLA-4 . Цитотоксический белок 4, связанный с Т-лимфоцитами (CTLA-4, также известный как CD152), гомологичен костимулирующему рецептору CD28, и они способны связывать те же лиганды. Однако авидность CTLA-4 по отношению к CD80 и CD86 в 100–1000 раз выше, чем у CD28 (ссылки 18, 66). Экспрессия белка CTLA-4 индуцируется, когда комплекс TCR взаимодействует с антигеном и, хотя и сохраняется во внутренних компартментах везикулярных Т-клеток, выходит в иммунный синапс при последующих встречах с антигеном 66 .CTLA-4 снижает активацию Т-клеток как за счет конкуренции с CD28 за связывание лиганда, так и за счет привлечения тирозина и сериновых или треониновых фосфатаз 66 . Наиболее важной молекулярной функцией CTLA-4, по-видимому, является ингибирование костимуляции CD28, о чем свидетельствует CD28-зависимый 18 неконтролируемый лимфопролиферативный и аутоиммунный синдром, наблюдаемый у мышей с нулевым CTLA-4 67,68 .

Важно отметить, что CTLA-4 конститутивно экспрессируется на CD4 + CD25 high forkhead box P3 + (FOXP3 + ) T Reg клетки 4 и, по-видимому, действует как костимулятор их подавляющей функции in vitro .Возможно, что CTLA-4, экспрессируемый клетками T Reg , участвует в индукции толерантности в CD80-экспрессирующих DC за счет обратной передачи сигналов 69 . Действительно, адоптивный перенос CTLA-4-нулевых Т-клеток нормальным мышам не повторяет аутоиммунный синдром, наблюдаемый у донорских мышей 69 , что предполагает, что CTLA-4 функционирует не только для регулирования активации эффекторных Т-клеток, но также включает активность, проявляемую доминирующим образом супрессорными клетками 18,70 . Однако роль CTLA-4 в функции клеток T Reg еще предстоит окончательно доказать, поскольку пациенты, получавшие анти-CTLA-4 mAb, не показывают значительных изменений в количестве или функции циркулирующих клеток T Reg 71 , хотя эффекты на клетки T Reg в опухолях или тканях пролеченных пациентов не оценивались.

Моноклональные антитела, которые ингибируют функцию CTLA-4 (рис. 1), способны увеличивать терапевтический иммунный ответ CD8 + и CD4 + против многих трансплантируемых сингенных опухолей мыши с сильным терапевтическим эффектом, хотя и противоопухолевым. Эффекты одноэлементных моноклональных антител против CTLA-4 обычно ограничиваются иммуногенными опухолями, способными примировать Т-клетки 72,70 .Тот факт, что CTLA-4 экспрессируется только после предварительной активации на эффекторных лимфоцитах, объясняет, почему эффекты in vivo анти-CTLA-4 и анти-CD28 mAb различны, хотя основной функцией CTLA-4, по-видимому, является контроль CD28-опосредованной активации 18 . Кроме того, поскольку CTLA-4 индуцируется на примированных клетках, потенциальный синергизм с вакцинацией против опухоли казался правдоподобным, и хотя лечение против CTLA-4 само по себе оказывало незначительное влияние на слабоиммуногенную меланому B16, оно эффективно синергировало с опухолевыми клетками, которые экспрессировали гранулоцитарный макрофаг колониестимулирующий фактор (GMCSF) для устранения установленных поражений меланомы B16 с сопутствующим аутоиммунным витилиго 73 .Точно так же лечение моноклональными антителами против CTLA-4 в синергии с вакцинацией против простат-специфического антигена для индукции противоопухолевых эффектов в трансгенной модели спонтанного рака простаты (мыши TRAMP) с признаками деструктивного воспаления в доброкачественной ткани простаты 74 . Синергизм с синтетическим пептидом и вакцинами DC также был продемонстрирован 70,75,76,77,78,79 .

Противоопухолевые эффекты этих антител, вероятно, не опосредованы их действием на клетки T Reg , поскольку лечение mAb против CTLA-4 синергетически с истощением клеток T Reg 80 и in vivo. Функция клеток T Reg , по-видимому, не подавляется обработкой анти-CTLA-4 71 .Следовательно, основным механизмом действия, по-видимому, является предотвращение связывания CTLA-4 с CD80 или CD86. Трансплантируемые опухолевые клетки мышей, по-видимому, экспрессируют низкие уровни CD80, что указывает на то, что блокирование этого взаимодействия может предотвратить CD80-опосредованную активацию CTLA-4 на цитотоксических Т-клетках, которые инфильтрировали опухоль 81 .

Клиническая разработка mAb против CTLA-4 . Клинически два различных гуманизированных моноклональных антитела, направленных к человеческому CTLA-4, в настоящее время независимо тестируются в клинических испытаниях фазы III для пациентов с метастатической меланомой 70 .Оба агента показали клинические терапевтические реакции в соответствии с критериями оценки ответа при солидных опухолях (RECIST), некоторые из которых имеют длительный срок действия, что нечасто у пациентов с запущенным заболеванием, включенных в исследования фазы III. Неблагоприятные аутоиммунные эффекты были временными и обратимыми.

Неблагоприятные явления в форме аутоиммунитета чаще всего включают кожную зудящую экзему с генерализованными высыпаниями и воспалительные синдромы кишечника с умеренной и тяжелой диареей 82 .Патологическое исследование кожных и желудочно-кишечных поражений показывает инфильтраты CD4 + и CD8 + Т-клеток. Реже наблюдались случаи воспаления гипофиза (гипофизита), вызывающего гипопитуитаризм, воспаление увеального слоя глаза (увеит) и гепатит 82,83,84,85,86 . Следует отметить, что, хотя эти побочные эффекты связаны с индукцией аутоиммунитета, ответа на определенные аутоантигены еще не установлено.Поэтому возможно, что некоторые из них, особенно синдромы воспалительного кишечника, могут представлять собой несоответствующие реакции на комменсальную флору. Лечение этих нежелательных явлений потребовало стероидной терапии, которая предположительно противодействует противоопухолевым эффектам анти-CTLA-4, хотя есть случаи продолжающихся объективных ответов опухоли во время стероидной терапии 87 . Смягчение аутоиммунной и / или гипериммунной токсичности, вызванной mAb против CTLA-4, также наблюдалось у пациентов, получавших лечение ингибирующими антителами против TNFα (S.Розенберг, личное сообщение).

Первое опубликованное клиническое испытание mAb против CTLA-4 включало однократную дозу 3 мг на кг (массы тела) пациентам с меланомой или раком яичников. Хотя это не были объективные ответы, было несколько признаков усиленных воспалительных реакций, один из них — метастаз злокачественной меланомы в мозжечок. Однако это поражение настолько воспалилось, что пациент умер от внутричерепной гипертензии 88 . Было отмечено, что пациенты в этом исследовании, которые ранее лечились вакциной DC или аутологичными опухолевыми клетками, которые экспрессируют экзогенный GMCSF (GVAX), имели более сильные патологические признаки воспаления и некроза в опухолях 78,88 .Клиническое испытание с участием 36 пациентов со злокачественной меланомой сочетало болюсную инъекцию IL2 с возрастающими дозами mAb против CTLA-4. 22% пролеченных пациентов показали общий ответ с 3 полными ответами, и не было никаких доказательств аддитивной токсичности 89 . В настоящее время проводится обширная серия исследовательских клинических испытаний фазы II, в которых моноклональные антитела против CTLA-4 комбинируются с принятыми протоколами химиотерапии.

Данные, собираемые в настоящее время в клинике, касаются пациентов, в основном, со злокачественной меланомой или почечно-клеточным раком, хотя есть пациенты с различными солидными опухолями, которые были включены в различные клинические испытания.Результаты более всесторонних исследований у пациентов со злокачественной меланомой показали несколько вещей. Во-первых, эта дозировка и режим максимальной эффективности не установлены, хотя клинический ответ редко наблюдается при дозах менее 3 мг на кг (масса тела). Улучшение ответов и повышение иммунной токсичности чаще наблюдаются при применении нескольких доз. Во-вторых, для появления клинических ответов требуются недели, если не месяцы, что требует необычно длительного временного окна для оценки эффективности 85 .В-третьих, аутоиммунные реакции четко коррелируют с клинической эффективностью 86,87 . В-четвертых, стойкие иммунные инфильтраты в очагах поражения могут длиться месяцами, и поэтому критерии ответа, основанные только на методах визуализации, могут не полностью определять эффективность. В-пятых, в испытании, объединяющем ранее описанную пептидную вакцину gp100 90 , mAb против CTLA-4 не увеличивали частоту Т-клеток, отвечающих на этот антиген, даже в случаях с объективными ответами, вопреки ожиданиям исследований на мышах 83 , 87 .В-шестых, количество и функция клеток T Reg в периферической крови существенно не затрагиваются у пролеченных пациентов 71 . В-седьмых, еще нет какого-либо полезного иммунного параметра, который коррелировал бы с эффективностью, кроме инфильтрации опухоли клетками иммунной системы 91 . И, наконец, до сих пор неясно, усиливают ли антитела против CTLA-4 скрытый, слабый ранее существовавший ответ Т-лимфоцитов или способствуют активации наивных Т-клеток. Действительно, нет сообщений об антигенной специфичности Т-клеток, инфильтрирующих опухоли пациентов, которые реагируют на это лечение.

ПД-1 и B7-h2 . PD-1 (ссылка 92) является другим коингибиторным рецептором, который проявляет гомологию с CD28 и экспрессия которого индуцируется после активации на CD4 + и CD8 + Т-клетках, В-клетках и моноцитах 16,18 . Этот поверхностный рецептор имеет два известных лиганда, B7-h2 (также известный как PD-L1) и B7-DC (также известный как PD-L2) 16,18 . Лигирование PD-1 вызывает ингибирование активации и пролиферации Т-клеток, вызывая остановку клеточного цикла без апоптоза.Фенотип PD-1-нулевых мышей характеризуется клеточно-опосредованным органоспецифическим аутоиммунитетом 93 , что согласуется с ингибирующей функцией PD-1 в регулировании TCR – CD28-зависимой активации Т-клеток. В отличие от CTLA-4-нулевых мышей, у которых в течение 3 недель развивается летальный полиорганный аутоиммунитет или гипериммунитет, у PD-1-нулевых мышей обычно развиваются более ограниченные аутоиммунные синдромы, которые зависят от штамма и возникают только в возрасте старше 6 месяцев. Следовательно, PD-1, по-видимому, является более тонкой иммунной контрольной точкой, чем CTLA-4.

Экспрессия B7-h2 была описана на различных опухолевых клетках человека 94 , и экспрессия этой молекулы снижает иммуногенность опухолей мыши in vivo 94 . Кроме того, экспрессия B7-h2 при злокачественных новообразованиях человека коррелирует с плохим прогнозом 95 .

B7-DC может доставлять костимулирующие или коингибиторные сигналы к примированным лимфоцитам, в зависимости от условий культивирования 96,97 . Его экспрессия ограничена активированными DC, и считается, что он индуцирует костимуляцию Т-лимфоцитов через еще не идентифицированный контррецептор, экспрессируемый на активированных Т-клетках.

Введение mAb против PD-1 и B7-h2 вызывало CTL-опосредованные противоопухолевые эффекты у мышей 98 . B7-h2 вмешивается в эффекторную фазу CTL-опосредованных клеток, убивая 98 (рис. 1). Интерес к этой мишени подпитывается открытием, что у мышей, хронически инфицированных лимфоцитарным хориоменингитом, наблюдается клональное истощение CD8 + CTL, которые распознают вирусные антигены. Истощенные клоны экспрессировали высокие уровни PD-1, и блокада как PD-1, так и B7-h2 с помощью mAb изменила этот фенотип in vivo , и у мышей восстановилась опосредованная Т-клетками противовирусная активность 99 .До сих пор не поступало данных об обращении клонального истощения Т-клеток у мышей с опухолями. Клинические испытания фазы I были начаты на онкологических больных с полностью человеческими mAb против PD-1, хотя пока нет доказательств того, что истощение клонов объясняет слабые Т-клеточные ответы на злокачественные новообразования человека.

В разных направлениях исследований было обнаружено, что мультивалентные mAb человеческого IgM, направленные против B7-DC из сыворотки пациента с макроглобулинемией Вальденстрема, доставляют сильный сигнал созревания DC после перекрестного связывания B7-DC (рис.1), индуцируя секрецию IL12 из DC 100 . Введение этого mAb мышам вызывает зависимое от Т-клеток отторжение трансплантируемых опухолей и, таким образом, указывает на клинический потенциал 101 .

MAb, улучшающие производительность APC

Зрелые или активированные DC способны индуцировать мощную клональную экспансию Т-клеток и эффекторную дифференцировку 7 . Созревание DC 102 вызывает активацию костимулирующих молекул, таких как CD80 и CD86, и цитокинов (таких как IL2, IL12, IL15, IL23, IFNα, IFNβ и IFNγ), которые управляют полной эффекторной дифференцировкой Т- и NK-клеток.Однако в стационарных условиях презентация антигена не полностью активированными DC вызывает анергию или истощение Т-клеток после прерванной временной активации. Неполностью активированные ДК обнаруживаются у больных раком 7 .

CD40 . Конститутивная экспрессия CD40 имеет решающее значение для функции В-клеток и DC 103 . Эта молекула принадлежит к суперсемейству TNFR. Экспрессия CD40 не ограничивается В-клетками и DC, но также экспрессируется на макрофагах, Т-клетках и в негемопоэтических тканях, таких как эндотелий сосудов и множественный эпителий.Фактически, CD40 часто экспрессируется на поверхности клеток карциномы и лимфомы. Существует единственный лиганд, CD40L, который в основном экспрессируется на активированных Т-хелперных клетках 103,104 , хотя он также может экспрессироваться на активированных NK-клетках, тромбоцитах и ​​плазмацитоидных DC. В иммунной системе лигирование CD40 имеет решающее значение для компетентного клеточного иммунного ответа, а также для созревания аффинности и переключения классов тяжелых цепей в гуморальном иммунном ответе. Эти функции системы CD40L – CD40 поддерживаются гуморальным и клеточным иммунодефицитом, наблюдаемым у людей с мутациями в CD40L или CD40, и у мышей, у которых гены, кодирующие эти белки, нокаутированы.CD40 кажется решающим для лицензирования DCs и позволяет им управлять ответами эффекторных CTL, частично за счет индукции секреции IL12 с помощью DCs 105,106 .

MAb, специфичные для CD40, могут оказывать два типа противоопухолевых эффектов. Некоторые из них, вероятно, действуют на CD40-экспрессирующие опухолевые клетки посредством опосредования антителозависимой клеточной цитотоксичности (ADCC) или комплемент-зависимой цитотоксичности 104 . Кроме того, передача сигнала CD40 в некоторых карциномах и лимфомах может способствовать апоптозу опухолевых клеток 104 .

Однако во многих доклинических моделях наблюдалось, что противоопухолевые эффекты лигирования CD40 с помощью mAb требуют функциональной иммунной системы 107 . Предлагаемые механизмы включают активацию DC и, возможно, в случае лимфомы превращение злокачественных В-клеток в эффективные APC для индукции CTL. Очевидно, что запуск CD40 может, по крайней мере, частично преодолеть потребность в помощи Т-клеток и обеспечить эффективный, длительный противоопухолевый иммунитет, как экспериментально наблюдалось после истощения Т-клеток CD4 + 108,109 .Как mAb к CD40, так и CD40L также использовали для созревания культивируемых DC in vitro перед использованием в вакцинах DC 108 , и некоторые DC были трансфицированы CD40L перед использованием 110 . Фактически, в ранней клинической работе была принята модифицированная версия этой стратегии с прямой экспрессией CD40L в клетках хронического лимфоцитарного лейкоза с использованием рекомбинантного аденовирусного вектора. Увеличение количества противоопухолевых Т-клеток и уменьшение количества циркулирующих злокачественных лимфоцитов и размера пораженных лимфатических узлов наблюдались у пациентов, которым вводили клетки хронического лимфоцитарного лейкоза, экспрессирующие CD40L 111 .

В первом клиническом испытании по изучению использования растворимого триггера CD40 использовался рекомбинантный тример CD40L человека, rhuCD40L, который обладает сильной агонистической активностью 112 . Тридцать два пациента с солидными опухолями или неходжкинской лимфомой получали 5-дневный курс от 0,05 до 0,15 мг на кг (веса тела) в исследовании с увеличением дозы. Максимально переносимая доза (МПД) составляла 0,1 мг на кг (массы тела) в день, исходя из временного увеличения трансаминаз печени в сыворотке. Несмотря на эту относительно небольшую дозу, было зарегистрировано два ответа, один полный и один частичный, и 12 пациентов достигли улучшения в виде некоторой степени стабильного заболевания.Полный ответ был особенно интересен, потому что он произошел через долгое время после лечения. Совсем недавно компания Seattle Genetics исследовала использование гуманизированного mAb против CD40 (SGN-40) в исследовании фазы I повышения дозы 113 . Тридцать пять пациентов, 23 с множественной миеломой и 12 с неходжкинской лимфомой, получали еженедельные дозы от 2 до 4 мг на кг (массы тела). SGN-40 на удивление хорошо переносился по сравнению с другими исследованиями, в которых использовали CD40L или анти-CD40 mAb, при этом не сообщалось о серьезных побочных эффектах.Два пациента, оба с неходжкинской лимфомой, достигли частичного ответа, один из которых сохранялся в течение нескольких месяцев. Кроме того, хотя критерии объективного ответа не были соблюдены, у четырех пациентов было зарегистрировано снижение уровня моноклонального (М) -белка, продуцируемого клетками злокачественной миеломы, что указывает на уменьшение опухолевой нагрузки.

Наконец, Vonderheide и его коллеги недавно сообщили о клиническом испытании фазы I, в котором использовались различные mAb против CD40 при различных типах опухолей.Это моноклональные антитела с полностью агонистическими IgG2 человека, CP-870,893 (ссылка 114). Интересно, что у пациентов со злокачественной меланомой наблюдались четыре частичных ответа, но ограничивающая дозу токсичность наблюдалась при низких дозах, таких как 0,3 мг на кг (массы тела), из-за системных воспалительных синдромов 115 . В настоящее время продолжается фаза I испытаний двух неродственных человеческих mAb против CD40 у пациентов с неходжкинской лимфомой, хроническим лимфолейкозом или множественной миеломой.

Терапевтические комбинации для повышения эффективности

Поэтапная клиническая разработка требует ранних клинических испытаний для проверки новых препаратов в качестве монотерапии.Тем не менее, считается, что комбинированная терапия обладает потенциалом создания синергетической противоопухолевой активности (рис. 3). MAb против CTLA-4 продемонстрировали доклинические синергические эффекты с несколькими формами противораковых вакцин, а также с лучевой терапией 116 и химиотерапией 117 . Наблюдается явный недостаток экспериментальной информации о том, могут ли mAb против CTLA-4 также безопасно увеличивать эффективность адоптивного переноса Т-клеток на моделях мышей.

Фигура 3. Эффективные комбинированные стратегии с использованием иммуностимулирующих mAb.

Схема комбинаторных терапевтических стратегий с иммуностимулирующими моноклональными антителами (mAb) против рака, в клинической и доклинической разработке. Состояние каждого лечения или каждой комбинации (двуглавые стрелки) обозначается цветовым кодом. α, анти.

Интересно, что недавно было сообщено о синергетическом эффекте совместного введения анти-4-1BB и анти-CTLA-4 mAb 56 . Эксперименты на человеческих мышах CTLA-4 с нокаутом позволили провести эти наблюдения с человеческим mAb 56 против CTLA-4, но только на модели карциномы толстой кишки MC38, а не с другими менее иммуногенными опухолями, такими как B16 меланома.Важно отметить, что совместное введение с mAb против 4-1BB, по-видимому, улучшало аутоиммунные инфильтраты, которые вызываются обработкой mAb против CTLA-4 56 .

mAb против CTLA-4 могут синергизировать с mAb против CD40 и истощением клеток T Reg в доклинической модели 80 . Размышляя о сочетании лечения с mAb против CTLA-4, следует помнить, что одновременное или последовательное воздействие на различные контрольные точки иммунной регуляции может вызвать неизлечимый аутоиммунитет в результате одновременного ослабления слишком многих иммунологических «тормозов».

mAb 4-1BB также показали повышенную эффективность в доклинических моделях в сочетании с химиотерапией 118 . Недавно было одобрено клиническое испытание для тестирования химиотерапии и моноклональных антител против 4-1BB при раке яичников (NCT00351325). Вакцины против опухолевых антигенов обладают синергическим действием с mAb против 4-1BB и в качестве адоптивной Т-клеточной терапии 50 . Синергизм с DC-вакцинацией кажется высокоэффективным и наблюдался с DC, нагруженными опухолевым лизатом 49 , и внутриопухолевой инъекцией DCs, генетически модифицированных для продуцирования IL12 (Ref.119).

Очень обнадеживающее недавнее исследование подтвердило беспрецедентную эффективность у мышей, получавших комбинацию анти-CD40 и анти-4-1BB mAb 120 . Интересно, что активность увеличивалась с помощью mAb, индуцированных против рецептора смерти 5 (DR5), члена суперсемейства TNFR, которое индуцирует апоптоз опухолевых клеток 120 . Эффективность была замечательной даже против автохтонных сарком, вызванных химическим канцерогеном. Индукция гибели опухолевых клеток антителами против DR5 в сочетании с иммуностимулирующими mAb предполагает, что апоптоз опухоли опосредует высвобождение опухолевых антигенов для перекрестной презентации DC и может способствовать инфильтрации Т-клеток в опухолевые поражения.Следует изучить другие подходы, которые используют аналогичные комбинации для локального разрушения опухолевых клеток. Лечение mAb-агонистом 4-1BB (и в меньшей степени клетками, экспрессирующими 4-IBBL) синергетически с переносом гена IL12 в опухолевые клетки, опосредуя очищение опухоли у мышей 121,122 .

Еще одна интересная область, которая до сих пор в значительной степени не исследована, — это комбинация иммуностимулирующих mAb с аллогенной или аутологичной трансплантацией костного мозга. Сообщалось, что mAb против 4-1BB усиливают как острую болезнь трансплантат против хозяина, так и связанный с ней эффект трансплантата против лейкемии у мышей 123 , тогда как mAb против 4-1BB улучшают хроническую болезнь трансплантат против хозяина 124 .

mAb против OX40 эффективно синергетически с mAb против 4-1BB в моделях мышиной опухоли и вирусной инфекции, без явных побочных эффектов 63 . Дальнейшее улучшение было очевидным, когда опухолевые клетки экспрессировали экзогенный IL12 (ссылка 63). Если вводить вместе с вакцинацией, эта комбинация может успешно лечить карциному молочной железы, развивающуюся у трансгенных мышей с опухолью молочной железы (MMTV) -neu 125 .

mAb против PD-1 и против B7-h2 проявляют синергетические терапевтические эффекты с агонистическими mAb против 4-1BB против опухолевых клеток, которые экспрессируют B7-h2 в качестве механизма ускользания от иммунитета 98 .Идентификация первичных механизмов иммунного ускользания для определенных классов опухолей может иметь важное значение в будущем для создания наиболее подходящих комбинаций на индивидуальной основе.

Разработка новых иммуностимулирующих моноклональных антител, нацеленных на недавно идентифицированные костимулирующие и ко-ингибиторные молекулы (дополнительная информация S1 (вставка)), является захватывающей, но сложной областью исследований трансляции и обратного трансляции (вставка 2). Важно, чтобы любое новое иммуностимулирующее соединение тестировалось тщательно и систематически поэтапно (рис.4 и Дополнительная информация S2 (рамка)). Возможно, наиболее многообещающими являются наблюдения, указывающие на то, что методы лечения, включающие иммуностимулирующие mAb, по-видимому, обладают синергетическим эффектом (рис. 3).

Рисунок 4: Путь от доклинической к клинической разработке иммуностимулирующих моноклональных антител.

Блок-схема путей открытия и разработки, изображающая прогрессирование иммуностимулирующего моноклонального антитела (mAb) в направлении клиники: от идентификации мишени до клинических испытаний (дополнительная информация S2 (рамка)).Следует иметь в виду, что иммуностимулирующие моноклональные антитела, по крайней мере в некоторых случаях, бросают вызов общепринятым парадигмам развития малых молекул при раке, потому что они часто не имеют четких эффектов доза-ответ, позднее начало положительных эффектов в некоторых случаях, непоследовательность в оценка ответа с помощью стандартных методов визуализации, иммунологических тестов, измеряющих противоопухолевый иммунитет в качестве суррогатной конечной точки, и, прежде всего, новых типов побочных эффектов.

Ящик 1 | Клиническое испытание фазы I TGN1412

13 марта 2006 г. область иммунотерапии потрясла сообщение о серьезной токсичности в когорте нормальных добровольцев в ходе испытания фазы I с увеличением дозы моноклонального антитела к CD28 (mAb; TGN1412). с сильным «суперагонистическим» действием на Т-лимфоциты 126 .Каждому из первых шести добровольцев, получивших первую дозу (около 7 мг), потребовалась госпитализация из-за синдрома высвобождения цитокинов, включая четыре тяжелых случая полиорганной недостаточности в контексте массивного ангионевротического отека и диссеминированного внутрисосудистого свертывания 127 . Никаких смертельных случаев не произошло благодаря подстрекательству, хотя и с задержкой на несколько часов, интенсивной терапии, стероидов, плазмы и курса mAb-антагонистов рецепторов интерлейкина-2 (анти-IL2). Было обнаружено существенное повышение концентрации нескольких воспалительных цитокинов (фактора некроза опухоли-α, IL1β, IL12 и IL6) 127 .Доклинические данные у приматов, отличных от человека, которым вводили 500-кратно более высокие дозы, не предсказывали это нежелательное явление, несмотря на очевидную реактивность CD28 приматов с TGN1412. Тщательное расследование, похоже, исключает неправомерные действия, а также ловушки производства и / или контроля качества, которые могли объяснить почти фатальный результат (согласно отчету Министерства здравоохранения Великобритании). Результат испытания TGN1412 явно повлияет на правила клинической разработки других иммуностимулирующих моноклональных антител, что потребует более осторожного первого введения людям для минимизации рисков 128 .В частности, это устранит практику болюсного введения новых mAb нескольким нормальным добровольцам без возможности прекратить инфузию при первом появлении симптомов 129 . Хотя иммуностимулирующие моноклональные антитела потенциально могут быть очень полезными агентами, они требуют очень тщательного доклинического и клинического тестирования, чтобы избежать дальнейших неудач. Особенно важно, чтобы мы не игнорировали то, что может быть полезным иммуностимулятором, просто из-за недостаточного внимания или понимания при их первоначальном тестировании.Важная рекомендация британского исследования исследования Тегенеро состоит в том, что сначала нужно пробовать стимулирующие моноклональные антитела в очень низких дозах. «Низкая» доза в испытании основана на разбавлении максимальной переносимой дозы для обезьян.

Ящик 2 | Ограничения в разработке иммуностимулирующих мАт

Препятствия для распознавания новой цели

  • Почти все эксперименты проводятся на мышах, поэтому те элементы иммунной системы, которые различаются у мышей и людей, нелегко оценить в экспериментальных опухолевых системах.

  • Трансплантируемые опухоли грызунов являются несовершенными предикторами истинной потенциальной эффективности против болезней человека (даже у мышей со спонтанными или химически индуцированными опухолями).

  • Мыши являются несовершенными предикторами токсичности антител против конкретной иммунной мишени.

  • Моноклональные антитела (mAb) против молекул мыши производятся у крыс и хомяков, и поэтому высокогомологичные белки среди видов грызунов вряд ли будут иммуногенными для продукции mAb.Следовательно, нельзя получить высокоаффинные антитела против некоторых мышей-мишеней. Беспристрастный скрининг антител с использованием фаговых библиотек и иммунизация соответствующих мышей с нокаутом могут обойти эту проблему.

Препятствия для клинического развития

  • Затраты: зарождающаяся область технологии гуманизированных антител стоит дорого, так как требует биообработки и контроля качества партий сложного тетрамерного белка.

  • Риски: новые типы побочных эффектов, включая аутоиммунные реакции и синдромы цитокинового шторма, могут быть связаны с использованием этих mAb.

  • Комбинированные схемы, вероятно, потребуются для достижения клинически значимой эффективности.

  • Трудности в разработке надежных иммуноанализов в качестве суррогатных конечных точек биологической активности.

  • Сложные вопросы интеллектуальной собственности с участием различных владельцев, которые в конечном итоге требуют сложных деловых соглашений и, возможно, инициатив со стороны национальных или наднациональных финансовых агентств 130 .

Вопросы и ответы: В-клетки и антитела при COVID-19: как выглядит «хорошо»?

В четверг, 13 августа, наш веб-семинар «Связь с коронавирусом» был представлен доверенным лицом BSI профессором Деборой Данн-Уолтерс на тему «В-клетки и антитела — как выглядит« хорошо »? ‘Если вы пропустили онлайн-семинар, вы можете наверстать упущенное и посмотреть снова здесь .

Профессор Дебора Данн-Уолтерс — профессор иммунологии, руководитель отдела иммунологии и руководитель темы исследований здоровья на протяжении всей жизни в Университете Суррея. Мы много слышим о выработке антител против SARS-CoV-2, но не все В-клетки продолжают вырабатывать антитела, а из тех, которые это делают, некоторые вырабатывают антитела другого типа, чем другие. Создание хороших антител без создания потенциально вредных — это цель вакцин, но знаем ли мы, как легко отличить их? На этом веб-семинаре профессор Данн-Уолтерс представил нам резюме исследований, проведенных на сегодняшний день, и поставил некоторые ключевые вопросы для будущих исследований.

К сожалению, мы потеряли подключение к Интернету во время вопросов и ответов в конце вебинара. Однако аудитория прислала значительное количество вопросов, и профессор Данн-Уолтерс любезно нашел время, чтобы ответить на некоторые из них для этого блога.


Учитывая то, что мы в настоящее время знаем о производстве антител и COVID-19, какое значение это имеет для понимания результатов тестов на антитела против болезни? Если у меня есть антитела, значит ли это, что я невосприимчив к будущей инфекции? Графика из ресурсов BSI о тестировании на COVID-19

Дебора Данн-Уолтерс: Существует много различий в ответе антител между людьми и в результатах в зависимости от того, какой метод используется для измерения антител.Антитела могут не обнаруживаться на ранней стадии заболевания у пациентов с SARS-CoV-2, но могут быть обнаружены через 20 дней после первоначального заражения. Антитела IgM и IgA не будут обнаружены через пару месяцев после выздоровления, но IgG будут оставаться там дольше. У вас больше шансов выработать антитела, которые можно выявить с помощью стандартного теста на антитела, если у вас было более тяжелое заболевание, чем у кого-то, у кого не было симптомов или было заболевание только в легкой форме.

Положительный результат теста со 100% специфичностью означает, что вы перенесли болезнь.Если бы тест был, например, специфичен на 99,7%, то положительный результат означал бы, что у вас высока вероятность того, что вы болели этим заболеванием, но 3 из тысячи результатов могут быть ложноположительными.

Отрицательный тест может означать, что либо у вас вообще не было вируса, либо у вас был вирус, но это была такая легкая / бессимптомная инфекция, вы не вырабатываете антител или что любые полученные антитела находятся в таком низком количестве что тест на антитела недостаточно чувствителен для их обнаружения. Недавнее исследование 341 добровольца с предыдущим положительным тестом ПЦР показало, что даже после корректировки отсутствия чувствительности теста было 4% отрицательных результатов. 1

В любом случае, поскольку у нас еще нет ответа на вопрос, указывает ли присутствие антител на иммунную защиту от инфекции, мы можем использовать тесты на антитела только для оценки распространенности заболевания, а не для оценки нашего уровня иммунитета.

Считаете ли вы, что какие-либо антитела, вырабатываемые в ответ на COVID-19, могут перекрестно реагировать с антителами, продуцируемыми для других коронавирусов, которые инфицируют людей (и которые вызывают простуду)?

DDW: Да.Системная серологическая статья Батлера et al. , представленный на вебинаре, показывает, что у пациентов с COVID-19 есть антитела, вырабатываемые как в сыворотке, так и в смывах для носа, которые вступают в реакцию с другими распространенными коронавирусами. 2

Есть ли у вас дальнейшие мысли об использовании сыворотки для выздоравливающих, содержащей высокие уровни антител, для пациентов с тяжелой формой COVID-19. Есть ли доказательства того, что это помогает выздоровлению?

DDW: Если моя гипотеза верна, что более поздние антитела являются более зрелыми, чем антитела, выработанные на ранних стадиях заболевания, то отсюда следует, что антитела выздоравливающих пациентов будут полезны.Например, они могут иметь более высокое сродство и иметь разные уровни сахара. Доказательств вреда сыворотки выздоравливающих не было, рандомизированные контролируемые испытания продолжаются. Показано, что переливание на ранней стадии плазмы выздоравливающей, содержащей высокий уровень IgG, может быть полезным. 3

Что определяет низкий или высокий титр антител при COVID-19? Например, количество вируса, или сколько В-клеток распознают антиген, или и то, и другое?

DDW: Во-первых, я очень хочу подчеркнуть различие между корреляцией двух факторов и «определением» или «причинно-следственной связью» между одним и другим.Наблюдения, которые мы делаем в отношении COVID-19 сейчас, являются корреляциями. Кроме того, я пока не знаю каких-либо количественных исследований антиген-специфических В-клеток во время болезни, поэтому на этот вопрос трудно ответить. В случаях с высокими титрами вируса и тяжелым заболеванием вы увидите высокие уровни антител.

Некоторые отчеты предполагают, что при COVID-19 наблюдается истощение Т-лимфоцитов. Повлияет ли это на Т-зависимый ответ В-клеток при COVID-19 и последующее образование антител?

DDW: Я определенно думаю, что это проблема.Т-хелперы необходимы как для Т-киллеров, так и для В-клеток. В-клетке в зародышевом центре необходима помощь Т-клетки, чтобы выжить, когда у нее созревает аффинность своего антитела. Я также должен упомянуть, что В-клетки являются отличными антигенпрезентирующими клетками, которые помогают активировать Т-клетки. Для получения наилучших ответов вам нужны оба.

Считаете ли вы, что создание соответствующих В-клеток памяти важнее, чем наличие долгоживущих антител, для создания иммунитета к COVID-19?

DDW: Я бы хотел и то, и другое.Наличие долгоживущих нейтрализующих антител, циркулирующих в крови (или присутствующих в носу), хорошо, потому что антитело может в первую очередь блокировать инфекцию. Наличие В-клеток памяти также хорошо, потому что клетки могут быстро реактивироваться в ответ на воздействие и пополнять долгоживущие клетки, продуцирующие антитела. Можно еще больше улучшить антитело, если B-клетка памяти во второй раз вступит в реакцию нового зародышевого центра. Это может быть возможность немного скорректировать антитела, если вирус за это время немного изменился.

Какое значение имеет период полураспада антител COVID-19 для разработки вакцины и для типа подхода, который может быть успешным?

DDW: Я лично надеюсь, что реакция на вакцины будет отличаться от реакции на болезнь. Если при заболевании В- и Т-клетки уменьшаются, и это препятствует типу ответа, который дает высокоаффинные антитела, возможно, в вакцине ответ более контролируемый — более Т-зависимый ответ и меньше экстрафолликулярный ответ.Таким образом, с самого начала будут производиться более качественные долгоживущие антитела и В-клетки памяти. Это моя догадка и надеюсь не факт.


Мы хотели бы поблагодарить профессора Дебору Данн-Уолтерс за ее время и опыт как в постановке, так и в ответах на эти вопросы. Вы можете посмотреть полный вебинар здесь, .


Ссылки
  1. Ward et al. 2020. Распространенность антител к SARS-CoV-2 в Англии после первого пика пандемии: исследование REACT2 с участием 100 000 взрослых.https://doi.org/10.1101/2020.08.12.20173690
  2. Батлер et al. 2020. Особенности и функции системного гуморального иммунитета и гуморального иммунитета слизистых оболочек у выздоравливающих лиц с SARS-CoV-2. https://doi.org/10.1101/2020.08.05.20168971
  3. Joyner et al. 2020. Влияние плазмы реконвалесценции на смертность среди госпитализированных пациентов с COVID-19: начальный трехмесячный опыт.