О чем говорит моноцитоз? — ИА «Орелград»

Что такое моноциты? Это большие белые кровяные клетки, которые внутри тканей превращаются в макрофаги в тканях. Эти клетки помогают контролировать инфекции, они делают это за счет поглощения бактерий. В определенных случаях клинический анализ крови может показать повышение уровня моноцитов: оно как правило классифицируется на абсолютное и относительное, два этих термина разделяет восьмипроцентный барьер. Оба отклонения — тревожный симптом. Если это зафиксировано у взрослого человека, необходимо установить причину увеличения количества защитных клеток. Повышенный уровень моноцитов в крови носит название «моноцитоз». Что делать, если моноциты повышены у взрослого? Об этом подробнее можно прочитать на сайте medicalok.ru — настоящей медицинской энциклопедии, где с читателем общаются простым и доступным языком. 

Зачем нужны моноциты?

Формирование и созревание моноцитов в организме человека происходит в костном мозге, но наиболее активны они в период пребывания внутри кровяного русла.

В отличие от других кровяных клеток, относящихся к лейкоцитам, моноциты способны захватить и разрушить в большом количестве даже крупные инородные элементы кислой среды. Благодаря возможности избавляться от омертвевших клеток при заболеваниях, моноциты считаются настоящими дворниками организма. Как правило, эти клетки локализованы в селезенке, печени и лимфатических узлах.

Почти всегда величение моноцитов в крови у взрослого человека обусловлено достаточно широким спектром заболеваний. Они как правило имеют вирусное и бактериальное происхождение, реже – это инфекции протозойного типа.

Стресс, как нервный, так и физический, почти всегда вызывает повышение моноцитов: это, убеждены медики, обусловлено внезапными изменениями, которые испытывает организм. Когда тело находится в состоянии психоэмоционального равновесия, каждый орган функционирует полноценно, будучи сбалансированным. Организму требуется адекватный отдых, здоровый сон. Высокий показатель моноцитов объясняется возросшей потребностью человека в восстановлении.

При превышении показателя по моноцитам, врач как правило назначает анализ крови.

Принципы трактовки клинического анализа крови. Сообщение 1. Лейкоциты (лекция) Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

УДК 612.1:615.074

ПРИНЦИПЫ ТРАКТОВКИ КЛИНИЧЕСКОГО АНАЛИЗА КРОВИ СООБЩЕНИЕ 1. ЛЕЙКОЦИТЫ (лекция)

АА.Крылов

Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования Росздрава, Россия

THE PRINCIPLES OF CLINICAL BLOOD COUNT INTERPRETATION PART I. WHITE BLOOD CELLS

A.A.Krylov

Saint-Petersburg Medical Academy of Postgraduate Studies, Russia

Нейтрофильный лейкоцитоз.

Это самый распространенный гематологический феномен, отражающий физиологические и патологические процессы в организме, с ним постоянно встречаются врачи различных специальностей.

В широком смысле слова — это универсальный гематологический синдром острых ситуаций, атрибут стресса различного происхождения, от психического и физического напряжения до тяжелых воспалительных и гнойно-септических процессов, разного рода болевых синдромов, травм и тканевых деструкций, как обобщенное проявление приспособительных защитных процессов в организме.

Нейтрофильный лейкоцитоз разной степени выраженности ежедневно регистрируется у 70-75% больных и пострадавших, поступающих по неотложным показаниям в отделение экстренной помощи Елизаветинской больницы и у 85-90% лиц, находящихся в отделении общей реанимации. Оценка гематологических сдвигов всегда индивидуальна и проводится с учетом клинической картины в целом.

Напомним, что в физиологических условиях продолжительность нейтрофилопоэза в костном мозге составляет 6-10 суток. Родоначальницей всех клеточных элементов костного мозга является стволовая клетка, которую «ориентируют» в сторону нейтрофи-лов регулирующие факторы, в частности гранулоци-тарный и грануломакрофагальный стимуляторы (Г-КСФ и ГМ-КСФ). Первая морфологически узнаваемая клетка в этом направлении — миелобласт; последующие стадии делящихся и развивающихся клеток — промиелоцит и миелоцит. Метамиелоцит и палочкоядерный нейтрофил более не делятся, а только созревают до сегментоядерных нейтрофилов, наиболее функционально активных.

В норме около 90% всех зрелых сегментоядерных нейтрофилов содержится в костном мозге, 2-3% в периферической крови и 5-8% в тканях. В циркуляции находится около половины нейтрофилов периферической крови, вторую половину составляет пристеночный пул клеток за счет их легко обратимой адгезии на эндотелиальной поверхности микр ос осуди стого русла (сосудистый гранулоцитарный резерв).

В крови нейтрофилы находятся около 10 часов, после чего мигрируют в ткани.

© А.А.Крылов, 2009 г.

Важнейшая функция нейтрофилов — способность к фагоцитозу и деструкции микробов, инородных тел и клеточного детрита. Нейтрофильная зернистость, выявляемая при окраске этих клеток, отражает присутствие в их цитоплазме многочисленных ферментов и биологически активных веществ, осуществляющих эти функции.

Быстрота появления нейтрофильного лейкоцитоза возможна, прежде всего, за счет экстренной мобилизации клеточных резервов («депо» клеток) — сосудистого и костномозгового. Стимулом для формирования перераспределительного лейкоцитоза могут быть нервное и физическое напряжение, прием пищи (пищеварительный лейкоцитоз), болевые синдромы различной локализации. При воспалительных инфекционных заболеваниях резервы зрелых нейтрофилов истощаются, и постепенно формируется истинный костномозговой пролиферативный нейтрофильный лейкоцитоз, характеризующийся продолжительностью, ядерным сдвигом нейтрофилов влево, часто сопутствующим увеличением СОЭ.

Стимулируют стрессорный перераспределительный лейкоцитоз адреналин и кортикостероиды.

Сложившиеся представления о роли гормонов гипофиза и надпочечников в формировании нейтро-фильного лейкоцитоза подтверждены экспериментально и в клинике. У животных с резецированным надпочечником или передней доли гипофиза введение бактериальных полисахаридов не дает лейкоцитоза в отличие от контроля. В кардиологическом отделении Елизаветинской больницы отмечают нейтро-фильный лейкоцитоз почти при каждом гипертоническом кризе симпатоадреналового типа. Особенно высокий лейкоцитоз в сочетании с эфемерной гипергликемией наблюдается при адреналовых кризах у больных феохромоцитомой. Полагают, что адреналин мобилизует преимущественно пристеночный сосудистый пул депонированных зрелых нейтрофилов, а кортикостероиды — их костномозговые резервы.

Участие гипофиза и надпочечников в механизме лейкоцитоза следует учитывать при оценке картины крови в клинике.

Пульмонологи часто наблюдают лейкоцитоз у больных хроническими неспецифическими заболеваниями легких и бронхиальной астмой

при лечебном использовании глюкокортикоидов. Такой медикаментозный лейкоцитоз бывает значительным и иногда дает повод к безрезультатному поиску воспалительного очага. Вспоминается молодая больная, поступившая в эндокринологическое отделение больницы в состоянии надпочечниковой комы. На фоне внутривенного введения мегадоз кортизона у нее развился гиперлейкоцитоз — 60х109/л (І). Постоянный или периодически возникающий нейтро-фильный лейкоцитоз, по нашим наблюдениям, наблюдается при болезни и синдроме Иценко — Кушинга. С другой стороны, у больных с хронической надпочечниковой недостаточностью логически ожидаемый лейкоцитоз может отсутствовать даже при активном туберкулезе, тяжелой пневмонии, уросепсисе.

О роли ЦНС в формировании нейтрофильного лейкоцитоза также свидетельствуют эксперимент и повседневные клинические наблюдения. У наркотизированных животных после внутримышечного введения лейкогенного агента (например, молока) лейкоцитоз не возникает или он менее выражен по сравнению с контролем. Психическое напряжение вызывает нейтрофильный лейкоцитоз перераспределительного типа. Известны вечерние лейкоцитозы (10-12х109/л) у лиц с эмоционально напряженной деятельностью в течение дня. Кстати, этому способствует и интенсивное курение. «Стрессорный» механизм лейкоцитоза присутствует при острых болевых синдромах (стенокардия, почечная, печеночная, кишечная колики и др.), острых кровопотерях (в содружестве с реактивным тромбоцитозом), в период первичной лучевой реакции после радиационного облучения. Нейтрофильный лейкоцитоз — почти постоянный симптом тяжелых механических повреждений, переломов, особенно черепно-мозговых травм. Травматологи иногда наблюдают у таких пострадавших затягивающийся или рецидивирующий лейкоцитоз на фоне трудно объяснимой лихорадки. В ряде случаев это удается купировать небольшими дозами пред-низолона, что дает основание предполагать резорбци-онно-аллергический характер того и другого.

Хорошо известны гематологические сдвиги у больных ИБС. Лейкоцитоз почти постоянно сопровождает острый коронарный синдром. Присоединяющееся к лейкоцитозу увеличение СОЭ обычно наблюдается при уже сформировавшемся инфаркте миокарда. Нередко при этом ускорение оседания наступает на 2-3-и сутки, когда лейкоцитоз уже исчезает («симптом перекреста» Фогельсона). Между тем, длительный нейтро-фильный лейкоцитоз и увеличение СОЭ приходится иногда наблюдать при тяжелом коронарном атеросклерозе и без признаков свежего инфарцирования. Возможно, это подтверждает современные представления о роли иммунного воспаления в патогенезе атеросклероза. Следует отметить, что отсутствие лейкоцитоза и, тем более, лейкопения при остром трансмуральном инфаркте миокарда прогностически неблагоприятны.

В практике неврологов нейтрофильный лейкоцитоз почти постоянен в начальный период острых нарушений мозгового кровообращения. Лейкоцитоз бо-

лее выражен и продолжителен у больных с геморрагическим инсультом по сравнению с ишемическим. Продолжительный и значительный лейкоцитоз при этом прогностически неблагоприятен.

Высокий лейкоцитоз при тяжелых воспалительных и гнойно-септических заболеваниях вызывается действием на костный мозг провоспалительных интерлейкинов (ИЛ-1, ИЛ-2, ИЛ-6, ИЛ-8; фактор некроза опухоли и др.), продуктов распада лейкоцитов и тканевой деструкции, эндотоксинов микроорганизмов. Выраженность такого лейкоцитоза и степень ядерного сдвига нейтрофилов зависит как от тяжести заболевания, так и от реактивности организма. По нашим наблюдениям, если тяжелая пневмония не сопровождается выраженным реактивным лейкоцитозом с регенеративным ядерным сдвигом влево, а сочетается с лейкопенией и большим количеством только палочкоядерных нейтрофилов (дегенеративный ядерный сдвиг) — это прогностически неблагоприятно. Такую ситуацию мы наблюдали у больных с пневмонией, страдающих хроническим алкоголизмом.

Динамика картины крови традиционно учитывается при наблюдении за больными с хирургическими заболеваниями органов брюшной полости (острые аппендицит, холецистит, панкреатит; прободная язва желудка и двенадцатиперстной кишки, перитонит различного происхождения и др.). Лейкоцитоз, как правило, сопровождает острые тромбоэмболии. Он особенно значителен (до 25-30х109/л) при тромбозе мезентериальных сосудов (симптом Блинова). Гиперлейкоцитоз при этом заболевании, по-видимому, связан с масштабами развивающегося некроза и с особенностями вовлекающихся рефлексогенных зон. Высокий лейкоцитоз наблюдается у хирургических больных после спленэктомии, например у лиц с травматическим повреждением (разрывом) селезенки. Такой «аспленический» лейкоцитоз является своего рода противоположностью лейкопении за счет «гиперс-пленизма» при циррозе печени.

На практике встречаются случаи необычайно выраженного реактивного нейтрофильного лейкоцитоза (40-50х109/л) с резчайшим ядерным сдвигом до ней-трофильных миелоцитов и промиелоцитов при достаточном количестве палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов. Такая гематологическая «картина» вызывает подозрение на хронический миелолейкоз. Лейкемоидный нейтрофильный лейкоцитоз иногда наблюдается при сепсисе, крупных неопорожняющих-ся гнойниках, гиперергических синдромах, тяжелых гемолитических кризах и др. Правильному диагнозу в подобной ситуации способствует тщательный анализ клинической картины, но иногда ошибочно диагностируется хронический миелолейкоз. Для диагностики необходимо выполнить цитогенетическое и молекулярно-генетическое исследование. При лейкемо-идных реакциях выражена токсическая зернистость цитоплазмы нейтрофилов, отсутствует сопутствующее содружественное увеличение числа эозинофилов и базофилов («Э-Б ассоциация»), часто встречающееся при лейкозе. Вспоминается молодой больной

с абсцессом печени и лейкемоидной картиной крови, длительно трактовавшийся как страдающий хроническим миелолейкозом. После хирургического опорожнения гнойника, интенсивной антибиотической и де-зинтоксикационной терапии картина крови постепенно нормализовалась, «лейкоз» исчез.

Выраженный лейкоцитоз наблюдается в онкологической практике, особенно при запущенных метаста-зирующих злокачественных новообразованиях. Известен синдром Горяева при метастазах рака в кости (ос-салгии, гиперлейкоцитоз и нормоцитоз в периферической крови). В кости чаще метастазируют раки бронхов, молочной железы, почек, предстательной железы. Из онкогематологических заболеваний нейтрофиль-ный лейкоцитоз с моноцитозом и эозинофилией наблюдается при лимфогранулематозе.

Таким образом, нейтрофильный лейкоцитоз, повседневно встречающийся в практике врачей различных специальностей, весьма разнороден по происхождению и клиническому значению. Его правильная оценка, возможно, и дает ценную информацию при условии комплексного индивидуального подхода к больным и пострадавшим.

В организационном плане необходимо подчеркнуть, что полный клинический анализ крови с обязательным подсчетом лейкоцитарной формулы должен быть доступен в любое время суток в условиях ур-гентной терапии, в частности в отделениях экстренной помощи многопрофильных больниц.

Лейкопении (нейтропении). В отличие от нейтро-фильного лейкоцитоза — гематологического проявления физиологических и патологических приспособительных реакций организма — лейкопения чаще связана с патологией, указывает на ослабление по различным причинам продукции нейтрофилов в костном мозге с истощением их запасов в депо крови, повышенный некомпенсированный расход или перераспределение этих клеток на периферии.

О лейкопении говорят при снижении количества лейкоцитов в повторных анализах крови (не менее трех) ниже 4х109/л (по некоторым данным, ниже

3,5х109/л или 3,0х109/л). Как правило, лейкопения связана со снижением абсолютного количества ней-трофилов (менее 2,0х109/л, по другим источникам — менее 1,5х109/л), в связи с чем используется уточненный термин — нейтропения.

Клиническая оценка лейкопений неоднозначна. Чаще речь идет об осложнении того или иного заболевания, ослаблении реактивности организма, побочных эффектах медикаментозной терапии, токсических влияниях на кровь. В других случаях лейкопения является симптомом заболевания и связана с его этиологией и патогенезом, приобретая, таким образом, дифференциально-диагностическое значение. Как и лейкоцитоз, лейкопения встречается в практике врачей различных специальностей, составляя междисциплинарную проблему.

Общепринятой классификации лейкопений нет. В зависимости от длительности существования различают острые, хронические, рецидивирующие и ци-

клические лейкопении. Выделяют врожденные (генетически обусловленные) и приобретенные лейкопении. Среди последних — лейкопении токсического и медикаментозного происхождения, лейкопении вследствие действия физических факторов (ионизирующая радиация, СВЧ-поле), лейкопении вследствие гиперспленизма, лейкопении при некоторых инфекционных, ревматических, эндокринных и гематологических заболеваниях, при дефектах питания и др. Обсуждается вопрос о невротических и функциональных лейкопениях.

При делении лейкопений по степени тяжести учитывают не только количество лейкоцитов (нейтрофи-лов) в крови, но при необходимости и состояние костномозгового кроветворения. Большое значение имеют и клинические особенности течения заболеваний. Крайняя степень лейкопении (агранулоцитоз) ниже 1,0х109/л характеризуется критическим снижением количества нейтрофилов. Агранулоцитоз может стать причиной угрожающих жизни инфекций, входными воротами для которых чаще являются желудочно-кишечный тракт и места инвазивных воздействий. Выраженная лейкопения, особенно в случаях затянувшейся лихорадки, геморрагических явлений, увеличения размеров лимфоузлов и селезенки, является поводом к консультации гематолога.

Врожденные генетически обусловленные лейкопении встречаются редко, преимущественно, в практике педиатров и семейных врачей. Известен тяжело протекающий генетический агранулоцитоз (синдром Костмана), впервые описанный в 1956 г. Он характеризуется тяжелыми воспалительными процессами и инфекциями уже с первых дней жизни ребенка. Определяется выраженная нейтропения в крови и «обрыв созревания» нейтрофилов в костном мозге на уровне промиелоцитов. Многие пациенты умирают от сепсиса в детском возрасте. Использование в последние годы с лечебной целью препаратов ростовых факторов позволяет продлить жизнь таких больных.

В последние годы описаны наследственные ней-тропении, сочетающиеся с генетически обусловленной патологией поджелудочной железы (синдром Швахмана), кардиомиопатией (синдром Барта) и др. Известна также семейная лейкопения преимущественно среди арабов, африканских и американских негров (синдром Глассена), обычно протекающая доброкачественно.

Токсические лейкопении возникают вследствие контакта с бензолом, толуолом, мышьяком, ртутью, солями тяжелых металлов, компонентами специальных топлив, при вдыхании паров бензина, растворителей, лаков и красок. В патогенезе таких лейкопений нередко участвуют иммунные механизмы, в частности лизис клеток циркулирующими иммунными комплексами. Встречается аутоиммунная панлейкопения с нейтропе-нией, эозинопенией, лимфопенией, моноцитопенией.

Актуальна проблема токсических лейкопений при хроническом алкоголизме, особенно у лиц, употребляющих большие дозы алкоголя. Алкоголь тормозит костномозговой нейтрофилопоэз, замедляет подвижность

зрелых нейтрофилов, снижает эффективность фагоцитоза. По нашим наблюдениям, лейкопения вместо ожидаемого лейкоцитоза при тяжелой пневмонии у больного с алкоголизмом прогностически неблагоприятна. Летальность в таких случаях достигает 30-40%, несмотря на интенсивную противомикробную и дезинтокси-кационную терапию. Мы наблюдали мужчину 62 лет, у которого после употребления 2 л водки возник острейший агранулоцитоз с летальным исходом.

В лечебной практике все чаще наблюдаются медикаментозные лейкопении как вариант лекарственной болезни. Следует выделять лекарства, лишь иногда дающие лейкопению, и медикаменты почти постоянно ее вызывающие. Спектр первых очень широк: сульфаниламиды, бисептол, некоторые антибиотики (метициллин и др.), салицилаты, производные пира-золона, барбитураты, аминазин, пеницилламин, препараты золота, противосудорожные, противомалярийные и антитиреоидные средства и др. Лейкопению, к сожалению, вызывают и новые антиагреганты (тиклопидин).

Среди них, по нашим наблюдениям, в лучшую сторону выделяется клопидогрель (плавикс), не дающий лейкопении. При проведении медикаментозной терапии необходимо контролировать картину крови, особенно при использовании нового для больного препарата.

Опыт показывает, что клинические проявления гематологических вариантов лекарственной болезни разнообразны — от бессимптомных цитопений до острого агранулоцитоза с некротической ангиной и септической лихорадкой. Полагают, что это связано с ми-елотоксическим действием некоторых медикаментов у лиц с генетическими дефектами кроветворения. Возможен и аутоиммунный механизм лекарственного агранулоцитоза, когда медикаменты выступают в роли гаптенов, образующих при соединении с белками организма полные антитела.

Цитопении разной степени выраженности — почти постоянные осложнения использования большинства цитостатиков. При многих видах химиотерапии происходит дозозависимая супрессия образования лейкоцитов и тромбоцитов.

Выраженная лейкопения может быть предстадией или начальной стадией острого лейкоза. Лейкопения в таких случаях обычно сочетается с анемией и тром-боцитопенией, входя в программу так называемого миелодиспластического синдрома. Бластные клетки в подобных случаях появляются вначале в костном мозге и длительно отсутствуют в крови. Диагностика лейкоза при этом возможна лишь при специальных исследованиях костного мозга (трепанобиопсия).

Известны и так называемые вторичные лейкозы, развивающиеся на фоне глубокой панцитопении в результате длительной цитостатической или лучевой терапии.

Лейкопенией сопровождаются некоторые инфекционные заболевания (вирусный грипп, острые гепатиты, брюшной тиф, паратифы, малярия в межпри-ступный период, корь, краснуха и т.д.). Повторная во-

лна лихорадки при гриппе, сопровождаемая несвойственным гриппу лейкоцитозом, указывает на возникновение осложнений.

Развитием лейкопении, лимфопении, тромбоцито-пении сопровождается развернутая картина СПИДа.

Лейкопения нередко встречается в практике терапевтов. Хорошо известна лейкопения при синдроме гиперспленизма у больных с циррозом печени, когда она сочетается с тромбоцитопенией и анемией. Причина цитопений в подобных случаях, вероятно, связана с повышенным разрушением клеток в селезенке и с иммунными механизмами. По нашим наблюдениям, цитопении нередко сопровождают системную красную волчанку, а иногда и предшествуют ей. Выраженную лейкопению мы наблюдали при некоторых вариантах ревматоидного артрита, в частности, при синдроме Фелти. При этом заболевании кроме полиартрита выявляются спленомегалия, лимфаде-нопатия, полисерозит, васкулиты, поражения кожи. Нейтропения при синдроме Фелти чаще имеет иммунное происхождение.

В последние годы формируется представление о хронических иммунных лейкопениях (нейтропени-ях), встречающихся при различных заболеваниях (системные заболевания соединительной ткани, хронические гепатиты и циррозы печени, аллергические синдромы, опухоли, лекарственная болезнь и др.). Частое обнаружение антилейкоцитарных антител при перечисленных патологиях подтверждает это.

Изменения крови, в частности лейкопения, нередко сопровождают болезни нарушенного питания. Лейкопения отмечалась у многих больных алиментарной дистрофией во время ленинградской блокады. И в наше время врачи Елизаветинской больницы нередко наблюдают лейкопению у лиц с недостаточностью питания, особенно при дефиците белка и витаминов в рационе. Психиатры отмечают лейкопению у страдающих нервной анорексией. К анемии и лейкопении нередко приводит длительное упорное вегетарианство.

Для правильного развития клеток крови требуется достаточное количество витаминов, в частности витамина В12 и фолиевой кислоты. Об этом свидетельствует появление лейкопении у больных с анемией Аддисона — Бирмера.

В процессе лечения таких пациентов витамином B12 одновременно с нормализацией красной крови исчезает и лейкопения.

Из эндокринных заболеваний известна лейкопения при хронической недостаточности коры надпочечников, гипертиреозе, акромегалии. Избыток тирео-идных гормонов приводит к торможению созревания нейтрофилов в костном мозге. Выраженная лейкопения в подобных случаях вызывает опасение при назначении мерказолила, также иногда дающего лейкопению. Вспоминается возникновение агранулоцитоза после назначения мерказолила больному с тиреотоксикозом. Между тем, опыт показывает, что энергичное купирование тиреотоксикоза современными ти-реостатиками, как правило, в короткие сроки нормализует картину крови.

Лейкопения наблюдается и в клинике неврозов, чаще у пациентов с признаками парасимпатикотонии (гипергидроз, разлитой красный дермографизм, наклонность к брадикардии, артериальная гипотония). Картина костного мозга в подобных случаях остается нормальной. В происхождении невротических лейкопений допускают участие перераспределительных механизмов, когда зрелые нейтрофилы избыточно накапливаются в пристеночном пуле клеток в сосудах внутренних органов. Возможно, нечто подобное происходит и при так называемых функциональных лейкопениях. Однако следует подчеркнуть, что каждый пациент с выявленной и, тем более, стойкой лейкопенией нуждается в наблюдении.

При лечении пациентов с лейкопенией пристальное внимание уделяется ее причинам и терапии основного заболевания. Используются витамины Вб, В12 и фолиевая кислота, стандартные комплексы витаминов и микроэлементов. При иммунных цитопениях назначают кортикостероиды. В последние годы в случаях тяжелых гематологических осложнений лечения цитостатиками и для их профилактики применяют препараты ростовых факторов (граноцит, филграстим). При развитии агранулоцитоза и нейтропенической лихорадки после проведения посева крови на культуру срочно назначают эмпирическую антибиотическую терапию с использованием препаратов широкого спектра действия. После получения результатов микробиологического исследования антибиотики подбирают целенаправленно. Остается актуальной проблема профилактики вероятных и ожидаемых лейкопений.

Лейкоцитарная формула. Подсчет лейкоцитарной формулы — определение количественного соотношения между отдельными видами лейкоцитов — составляет важнейшую часть клинического исследования крови. Автоматический метод определения лейкоци-тограммы в основном удовлетворяет запросы повседневной практики. Однако полностью сохраняет значение и классический визуальный метод подсчета лейкоцитарной формулы в окрашенных мазках крови, непревзойденный по точности и возможности оценки качественных изменений клеток.

Структуру лейкоцитарной формулы еще в 1911 г. предложил немецкий гематолог Виктор Шиллинг (1883-1960). Различные формы лейкоцитов у взрослых распределяются в известных соотношениях (Н.С.Петров): базофилов 0-1%, эозинофилов 0,5-5%, палочкоядерных нейтрофилов 1-6% (по некоторых данным до 10%), сегментоядерных 47-72%, лимфоцитов 19-37% (по некоторым данным до 45%), моноцитов 3-11% (до 15%). В абсолютных величинах в 1 мкл крови содержится базофилов 0-65, эозинофилов 20-300, палочкоядерных нейтрофилов 40-300, сегментоядерных 2000-5500, лимфоцитов 1200-3000, моноцитов 90-1000. У ребенка первого года жизни в лейкоцитарной формуле преобладают лимфоциты. Количество лимфоцитов и сегментоядерных нейтро-филов выравнивается к 5-7 годам. У детей школьного возраста лейкоцитарная формула постепенно приближается к таковой у взрослых.

При оценке лейкоцитограммы всегда следует учитывать соотношение молодых и зрелых форм нейтро-филов. Различают регенеративный и дегенеративный вариант ядерного сдвига нейтрофилов влево. Первый характеризуется лейкоцитозом, значительным увеличением числа палочкоядерных форм, а иногда появлением более молодых клеток — метамиелоцитов и миелоцитов. Это свидетельствует не только о выраженности патологического процесса (воспаление, абсцедирование, септическое состояние и др.), но и о сохраненной реактивности организма. Дегенеративный сдвиг влево протекает без значительного лейкоцитоза или даже с лейкопенией, с большим числом палочкоядерных нейтрофилов, дистрофическими изменениями цитоплазмы нейтро-филов (токсическая зернистость, вакуолизация и т.д.), что указывает на тяжесть патологии и понижение реактивности организма. Смена регенеративного сдвига на дегенеративный прогностически неблагоприятна. По наблюдениям врачей Елизаветинской больницы, это бывает при тяжелой абсцедирую-щей пневмонии, деструктивном панкреатите, разлитом перитоните, ареактивном сепсисе.

Цитоплазма эозинофилов с ее характерной зернистостью содержит большой основной и катионный белки, многочисленные ферменты — гистаминазу, арил-сульфатазу, фосфолипазу, пероксидазу и др. Это определяет регулирующее участие эозинофилов во многих патологических процессах — аллергии, воспалении, ограничении активности паразитов и др. Вместе с тем, длительная гиперэозинофилия приводит к повреждению стенок сосудов и собственных тканей организма.

В норме в периферической крови находится около 1% всего пула эозинофилов в организме. Длительность их циркуляции в крови — 12-15 часов, после чего они поступают в ткани, где функционируют продолжительное время и нередко вновь поступают в кровяное русло. Замечено, что больше эозинофилов в крови в утренние часы, к вечеру их количество уменьшается.

Различают «малую» и «большую» эозинофилию. При первой повышена лишь доля эозинофилов в лей-коцитограмме (8-10% и более). «Большая» эозино-филия (гиперэозинофильный синдром) характеризуется повышением абсолютного числа эозинофилов до 1,5х109/л более при увеличении общего количества лейкоцитов. Предлагается также классифицировать эозинофилию на мягкую (количество эозинофилов 0,35-1,5х109/л), умеренную (1,5-5,0х109/л) и тяжелую (более 5,0х109/л).

Эозинофилия формируется за счет гиперпродукции этих клеток в костном мозге и интенсивного их выхода из тканей. Среди стимуляторов этого процесса выделяют интерлейкины 3 и 5.

Клиническая оценка эозинофилии не всегда проста. Среди наиболее частых ее причин — аллергические заболевания: риниты, бронхиальная астма, дерматозы, крапивница, отек Квинке, лекарственная болезнь. Особенно часто встречается эозинофилия при лечении антибиотиками. Если прежде при появлении эо-зинофилов в крови больного пневмонией говорили

о «розовой заре выздоровления», то сейчас иногда более уместен афоризм «зарево аллергического пожара».

У больных бронхиальной астмой степень эозино-филии не всегда соответствует тяжести заболевания. В ряде случаев более демонстративно обнаружение большого количества эозинофилов в мокроте и смыве бронхов. Известны случаи тяжелой бронхиальной астмы с гиперэозинофилией, осложненной васкулита-ми, сходными с узелковым полиартериитом (синдром Чарджа — Стросс, астматический вариант узелкового полиартериита). В патогенезе этого заболевания отводят место токсическим эффектам гиперэозинофи-лии на сосуды. Эозинофилией сопровождаются легочные микозы — кокцидиомикоз, аспергиллез и др. Большое количество эозинофилов в плевральной жидкости не всегда сопровождается эозинофилией. Эозинофильные плевриты имеют разную этиологию, включая туберкулез, системные заболевания соединительной ткани, опухоли и т.д.

Длительная эозинофилия весьма подозрительна в отношении глистной инвазии (аскаридоз, токсока-роз, описторхоз, фасциолёз, филяриоз, стронгилоидоз, парагонимоз, эхинококкоз и др. ). В.Лёффлер в 1932 г. описал летучие инфильтраты легких у пациентов с высокой эозинофилией. Оказалось, что это бывает проявлением миграционной личиночной стадии аскаридоза и некоторых других гельминтов (синдром Лёффлера I). При кишечной стадии аскаридоза эозинофилия, как правило, невысока. Между тем, как показывает опыт хирургов Елизаветинской больницы, аскаридоз бывает причиной кишечной непроходимости, механической желтухи, абсцессов печени и др. Эозинофилия при анемии Аддисона — Бирмера, в чем мы неоднократно убеждались, служит поводом для исключения инвазии широким лентецом. В последние годы появились сообщения о групповых случаях трихинеллеза из-за употребления в пищу мяса диких животных. Гиперэозино-филия — постоянный признак трихинеллеза. Это может быть также реакцией на укусы некоторых паукообразных (тарантулы, скорпионы и др.). Так называемая тропическая эозинофилия (синдром Вейнгартена) часто имеет паразитарное происхождение.

Как уже указывалось, длительная гиперэозинофи-лия может приводить к формированию васкулитов и повреждению различных органов и тканей организма. В 1936 г. В.Лёффлер сообщил о развитии на фоне высокой эозинофилии пристеночного эндокардита с клинической картиной сердечной недостаточности по рестриктивному типу (синдром Лёффлера II). Известны также эозинофильные миокардиты, острые и хронические пневмонии, поражения желудочно-кишечного тракта, печени, почек, ЦНС, опорно-двигательного аппарата, кожных покровов и слизистых. В редких случаях системная патология при эозинофильной болезни захватывает и органы кроветворения, поражая костный мозг и селезенку. В подобной ситуации иногда говорят об эозинофильном лейкозе, хотя с этим согласны не все. Возможно, в таких случаях более оправдан термин «диссеминированный эозинофильный коллагеноз».

Увеличение количества эозинофилов в крови наблюдается при лимфогранулематозе, экзогенном и идиопатическом фиброзирующем альвеолите, системных заболеваниях соединительной ткани. «Большая» эозинофилия известна и в онкологической практике, в частности при раке легкого, печени, почек, щитовидной железы. Это может быть как ранним симптомом опухоли, так и сопровождать ее в стадии метастазирования и распада. Замечено, что опухолевая эозинофилия в отличие от аллергической не сопровождается повышением концентрации IgE крови.

Беспричинных эозинофилий не существует, но, к сожалению, установить и причину даже при длительном и тщательном обследовании пациента удается не всегда. Впрочем, описываются доброкачественная эозинофилия без каких-либо клинических проявлений, а также семейная эозинофилия с аутосом-но-доминантным типом наследования.

Внимание врача привлекают и случаи полного отсутствия эозинофилов в лейкоцитограмме. Если точность исследования не вызывает сомнений, анэозино-филия может указывать на выраженный стресс любого происхождения (шок, болевой синдром, большие дозы кортикостероидов и др.).

Увеличение количества базофилов в лейкоцитарной формуле — редкое явление. Незначительная ба-зофилия (2-3%) иногда наблюдается при аллергических синдромах, гипотиреозе, неспецифическом язвенном колите. Количество базофилов в содружестве с эозинофилами, увеличивается при хроническом ми-елолейкозе («эозинофильно-базофильная ассоциация»). Высокий уровень базофилии при этом заболевании — прогностически неблагоприятный признак, предвещающий бластный криз.

Лимфоциты периферической крови при их относительном морфологическом однообразии представляют собой разнообразную в функциональном отношении группу клеток (Т- и В-лимфоциты, лимфоциты-киллеры, клетки памяти и др.), участвующих в иммунной защите организма. Деление лимфоцитов по размеру на малые, средние и большие, вероятно, отражает их функциональную активность. Однако, при оценке картины крови основное внимание уделяется их количественным сдвигам.

Абсолютные лимфоцитозы у детей, как правило, имеют реактивный характер и часто встречаются при вирусных заболеваниях. Известны длительные «лим-фоцитозы выздоровления» при детских инфекциях. В детских коллективах встречаются случаи групповой, по-видимому, вирусной инфекции, сопровождающейся выраженным лейкоцитозом с преобладанием зрелых лимфоцитов (инфекционный лимфоцитоз). Увеличение числа лимфоцитов с появлением их атипичных форм отмечается при фелинозе («болезнь кошачьей царапины»).

Лейкоцитоз с нарастающим процентом зрелых лимфоцитов у взрослого или, тем более, пожилого человека, как правило, указывает на хронический лим-фолейкоз. В крови таких пациентов преобладают зрелые лимфоциты, иногда встречаются пролимфоциты

и, очень редко, единичные лимфобласты. Характерно появление в мазке крови разрушенных лимфоцитов (тельца Гумпрехта).

Нарастающее количество «бластов» в крови не дает сомнений в диагнозе острого лейкоза и необходимости срочной госпитализации в гематологическое отделение. Дифференциация «бластов» (миелобла-сты, лимфобласты и др.) производится визуально и с применением специальных методик. Напомним, что при выраженной картине острого лейкоза отмечается почти полное отсутствие переходных форм ней-трофилов от «бластов» до оставшихся сегментоядерных нейтрофилов («лейкемический провал», hiatus leucemicus).

Заслуживают внимание врача случаи абсолютной лимфопении (лимфоцитов менее 1,5х109/л), свидетельствующей об ослаблении иммунитета. Это наблюдается при септических состояниях, туберкулезе, системных заболеваниях соединительной ткани, лимфогранулематозе, цитостатической и лучевой болезни, длительном применении кортикостероидов и др.

И, наконец, о моноцитах. Они являются частью системы мононуклеарных фагоцитов, в которую входят также и тканевые макрофаги. Моноциты образуются в костном мозге из общего предшественника для моноцитов и гранулоцитов. После созревания в костном мозге моноциты 15-20 часов циркулируют в крови, а затем поступают в ткани, трансформируясь в макрофаги. Моноциты имеют ряд общих функций с нейтро-филами, фагоцитируют бактерии, грибки, различные макромолекулы, остатки разрушенных клеток.

О моноцитозе говорят, когда их количество в лей-коцитограмме превышает 10-15% (в абсолютных величинах — более 0,8х109/л). Реактивный моноцитоз иногда наблюдается при хронических инфекциях, туберкулезе, инфекционном эндокардите. По наблюде-

ниям врачей Елизаветинской больницы это отмечается при неспецифическом язвенном колите, болезни Крона, саркоидозе, лимфогранулематозе.

Стойкий абсолютный моноцитоз, не объяснимый какой-либо другой причиной, дает повод подозревать хронический миеломоноцитарный лейкоз. Появление в крови миелобластов и монобластов склоняет диагностику в сторону острого лейкоза. Исследование костного мозга, включая трепанобиопсию, подтверждает диагноз.

Характерная картина крови подтверждает, а нередко определяет диагноз инфекционного мононуклеоза (болезнь Филатова — Пфейффера), вызываемого вирусом Эпштейна — Барр. Заболевание чаще наблюдается в детском и подростковом возрасте, но встречается и у взрослых. В мазках крови у таких больных обнаруживают в большом количестве одноядерные клетки, похожие то больше на широкоплазменных лимфоцитов, то на моноцитов (так называемые лимфомоноци-ты, монолимфоциты, мононуклеары). Иногда увеличивается количество эозинофилов, встречаются плазматические клетки. Диагноз инфекционного мононук-леоза во многом зависит от правильной оценки гематологической картины. Опытный исследователь уверенно отличает мононуклеары от бластных клеток.

Таким образом, лейкоцитарная формула, как важнейшая часть полного клинического анализа крови, дает ценную диагностическую и прогностическую информацию врачам различного профиля. Удовлетворяясь во многих случаях скрининговыми данными, полученными при помощи гематологических автоматов, в части наблюдений невозможно обойтись без квалифицированного исследования окрашенных мазков крови.

Моноцитоз у взрослых и детей: причины, виды, симптомы

Одним из результатов общего анализа крови является исследование моноцитов, а вернее их абсолютное (MON#, MO#) и относительное количество (MON%, MO%). Состояние, при котором содержание этих клеток превышает норму, называется моноцитоз. Что это такое, чем может быть вызвано и как нормализовать состав крови, читайте ниже.

Моноциты – это самые крупные и долго живущие клетки лейкоцитов, белых кровяных телец, отвечающих за иммунитет и чистоту крови. Что вам нужно знать о моноцитах:

• Они производятся в костном мозгу и выпускаются в кровь не до конца созревшими.
• После «рождения» моноциты всего пару дней циркулируют по крови. В этот момент они наиболее активны.
• Затем они попадают в ткани, где видоизменяются в макрофаги.
• В тканях макрофаги следят за чистотой совместно с нейтрофилами (остальными лейкоцитами, гораздо меньшими по размеру).
• Основная функция моноцитов – уничтожение болезнетворных и посторонних клеток.

Количество моноцитов может увеличиваться по сравнению с нормой, такое состояние называется абсолютный моноцитоз. Если по каким-то причинам уровень моноцитов в крови понижен, речь идет о моноцитопении.

к оглавлению ↑

Причины моноцитоза

1. Воспалительные и инфекционные заболевания зачастую являются поводом для повышения уровня моноцитов. Организм нуждается в экстренной помощи для иммунитета, поэтому производится больше моноцитов. К заболеваниям инфекционного характера, которые вызывают моноцитоз, относятся:

• Сифилис;
• Туберкулез.

Иногда причиной моноцитоза у детей является прорезывание зубов, но такая бурная реакция организма на этот естественный процесс встречается не так часто.

Изменение количества моноцитов может сопровождаться другими отклонениями в составе крови. Так, например моноцитоз и гранулопения в анализе крови с высокой вероятностью говорят о том, что недавно организмом была перенесена вирусная инфекция. Для уточнения необходимо сдать повторный анализ через пару недель. Гранулоциты – это те же лейкоциты, но другой формы и размеров.

2. Аутоиммунные заболевания также относятся к причинам моноцитоза у взрослых. Их механизм заключается в том, что по какой-то причине иммунная система принимает клетки организма за чужеродные и стремится ее уничтожить. Так что разрушающее действие исходит от самого главного защитника здоровья – иммунитета. Среди аутоиммунных заболеваний наиболее распространены:

• Волчанка;
• Ревматоидный артрит.

3. Заболевания крови напрямую влияют на содержание моноцитов. К ним относятся:

• Лейкоз;
• Лимфогранулематоз;
• Мононуклеоз

4. Раковые опухоли

Лейкемия – онкологическое заболевание, влияющее на функции крови и костного мозга. Во время него под ударом находятся все защитные способности иммунной системы.

5. Прочие причины:

• Индивидуальная особенность организма может быть причиной незначительного относительного моноцитоза у ребенка;
• Наследственные патологии;

к оглавлению ↑

Абсолютный и относительный моноцитоз

Если увеличено максимально достижимое количество моноцитов, речь идет об абсолютном отклонении. Показатель уровня моноцитов, превышенный более, чем на 7 млрд клеток на литр, свидетельствует об абсолютном моноцитозе у детей. Вообще же этот показатель также зависит от возраста.

Если же превышено процентное содержание моноцитов, относительно остальных форм лейкоцитарных клеток, это относительный моноцитоз. Относительный моноцитоз у взрослого наблюдается при увеличении процентного содержания моноцитов в общем составе лейкоцитов свыше 8%. В детском возрасте до 12 лет считается предельным моноцитоз – моноциты 12%. Для взрослых предельная величина еще ниже – 11%.

Абсолютный моноцитоз у взрослых представляет большую диагностическую значимость для врача и пациента по сравнению с относительным, который может незначительно меняться при стрессах, травмах и т.д.

к оглавлению ↑

Симптомы

Чаще всего люди узнают о том, что у них моноцитоз, основываясь не на собственных ощущениях, а на показателях результата анализа крови. Тем не менее, можно выделить следующие симптомы моноцитоза:

• Слабость;
• Быстрая утомляемость;
• Хроническая усталость;
• Субфебрильная температура: когда температура тела держится на уровне 37-37,5°С в течение длительного периода.

Однако, эти симптомы наблюдаются при многих различных заболеваниях, и нельзя ориентироваться только на них при постановке диагноза.

к оглавлению ↑

При беременности

В период беременности анализы крови женщины необходимо постоянно контролировать, так как идет глобальная перестройка организма, на что реагирует и кровеносная система.

В определенный период времени считается нормой увеличение общего числа лейкоцитов – так тело реагирует на новый объект.

Повышение моноцитов может свидетельствовать о начальных этапах вирусного или инфекционного заболевания. Необходимо проверить, не увеличены ли лимфатические узлы, не воспалены ли миндалины.

Лечение болезни, вызывающей моноцитоз, необходимо детально проработать совместно с врачом для того, чтобы не навредить будущей маме и ребенку.

Уменьшение количества моноцитов – моноцитопения, говорит о недостатке витаминов, неправильном питании и истощении иммунной защиты женщины. Добавьте в свой рацион фрукты, мясо, молочные продукты, возможно, специальные витаминные комплексы для беременных. Это поможет вам предостеречь появление хронических заболеваний у женщины и проблем со здоровьем будущего ребенка.

Необходимо добавить, что моноцитоз – это не болезнь, а только симптом, который можно устранить, только победив основное заболевание.

Поэтому узнав об отклонении в своей крови, не затягивайте с точной диагностикой и лечением. Помогут устранить моноцитоз у взрослых ответы врачей, без квалифицированной помощи могут начаться осложнения различной степени тяжести.

Задавайте свои вопросы в комментарии, оставляйте пожелания и делитесь полезными советами по поводу моноцитоза у детей и взрослых.

Будьте здоровы!

Моноцитоз — причины и лечение у взрослых и детей

Моноцитоз – повышение числа моноцитов в крови.

Общая информация

Моноциты – зрелые крупные одноядерные лейкоциты. Они вырабатываются в костном мозге, после чего попадают в кровь, лимфоузлы и ткани.

Их основные функции:

• фагоцитоз – поглощение и расщепление инфекционных агентов (бактерий, токсоплазм, возбудителей малярии), инородных тел, погибших и опухолевых клеток;
• презентация антигенов;
• синтез цитокинов.

Для определения количества моноцитов осуществляется клинический анализ крови. Подсчитывается их процент в общем количестве лейкоцитов (MON%). Кроме того, при использовании развернутой методики проведения анализа оценивается абсолютное количество моноцитов (MON#) – число клеток в 1 л крови.

Нормы моноцитов:

• дети (до 12 лет) – MON% – 2-12%, MON# – 0,05-1,1х109/л;
• взрослые (старше 12 лет) – MON% – 3-11%, MON# – 0,04-0,7х109/л.

У детей абсолютное число моноцитов изменяется в зависимости от показателя количества лейкоцитов, значение которого определяются возрастом.

Абсолютный или относительный моноцитоз диагностируется при превышении нормативных границ абсолютного или относительного числа моноцитов соответственно.

Причины

Относительный моноцитоз у ребенка или взрослого при условии нормального показателя MON# может иметь физиологический характер. Обычно при этом наблюдается уменьшение содержания других типов лейкоцитов. Например, моноцитоз может сочетаться с гранулопенией – снижением доли гранулоцитов (подгруппы лейкоцитов) в крови.

Абсолютный моноцитоз у взрослых и детей, как правило, возникает при заболеваниях, требующих значительной активации фагоцитоза для адекватного иммунного ответа. В некоторых случаях имеет место комбинация моноцитоза и лейкопении (уменьшения общего числа лейкоцитов).

Основные причины моноцитоза у взрослых и детей:

• инфекционные заболевания вирусной, грибковой, бактериальной природы, а также те, которые вызваны простейшими микроорганизмами;
• гранулематозные патологии – туберкулез, язвенный колит, бруцеллез, саркоидоз, сифилис;
• гематологические недуги – лейкемия, миелолейкоз, лимфогранулематоз;
• заболевания, поражающие соединительные волокна – волчанка, ревматоидный артрит;
• онкологические патологии – лимфома Ходжкина;
• отравление токсическими веществами.

Моноцитоз у взрослых и детей наблюдается не только в острый период заболеваний, но и на этапе восстановления после них. Незначительное отклонение MON% у ребенка может возникнуть из-за прорезывания зубов.

Симптомы

Основные симптомы моноцитоза:

• слабость;
• быстрая утомляемость;
• субфебрильная температура.

Поскольку повышение числа моноцитов в крови является одним из проявлений основного заболевания, клиническая картина будет дополняться другими признаками.

Диагностика

Нарушение нормы количества моноцитов устанавливается на основании общего анализа капиллярной крови. Для выявления ведущей патологии применяется ряд физикальных, лабораторных и инструментальных методов.

Лечение

Отклонение показателей MON# или MON% от нормы не является заболеванием. При отсутствии других патологических признаков лечение моноцитоза у взрослых и детей не производится.

Если диагностировано инфекционное, гематологическое, гранулематозное или другое заболевание, направления терапии определяются его сутью.

Прогноз

Прогноз при повышении числа моноцитов в крови зависит от специфики основной патологии.

Профилактика

Предупредить моноцитоз можно, не допуская развития заболеваний, которые требуют активации фагоцитоза.

Гемограмма с лейкограммой (B-CBC 5-diff, B-CBC 3-diff ) – SYNLAB Eesti

Гемограмма – это комплексное исследование, при котором измеряется содержание гемоглобина в крови, подсчитываются клетки крови: лейкоциты, эритроциты, тромбоциты и высчитываются эритроцитарные и тромбоцитарные индексы.

Лейкограмма с 5-компонентнoй лейкограммой представлена в абсолютных значениях:

Лейкограмма с 3-компонентнoй лейкограммой представлена в абсолютных значениях: 

Интерпретация результатова:

ГЕМОГЛОБИН, ГЕМАТОКРИТ, ЭРИТРОЦИТЫ

Обычно значения гемоглобина, гематокрита и эритроцитов связаны между собой и изменяются в одном направлении.

• Низкие значения: анемии 
• Высокие  значения:  гиповолемия,  полицитемия,  хроническая  недостаточность кислорода, курение.

ЭРИТРОЦИТАРНЫЕ ИНДЕКСЫ: MCV, MCH, MCHC, RDW-CV

Индексы эритроцитов характеризуют морфологический тип анемии. 

Нормоцитарная нормохромная (MCV в норме, МСН в норме): 

• Дефицит железа в ранней стадии
• Хроническое заболевание (например, злокачественная опухоль)
• Острая кровопотеря 
• Апластическая анемия
• Приобретенная гемолитическая анемия (например, клапанные протезы сердца)

Микроцитарная гипохромная (MCV ↓, MCH ↓): 

• Далеко зашедший дефицит железа
• Талассемия 
• Отравление свинцом

Микроцитарная нормохромная (MCV ↓, MCH в норме): 

• Заболевание почек (дефицит эритропоэтина) 

Макроцитарная нормохромная (MCV ↑, MCH в норме):

• Дефицит фолиевой кислоты или витамина В12
• Химиотерапия

Другие возможные причины MCV ↑: беременность, некоторые лекарственные препараты, алкоголь.

При значительных изменениях MCV нужно обязательно оценить морфологию эритроцитов в препарате мазка крови. 

RDW

Показывает Отражает вариабельность величины объема эритроцитов (анизоцитоз).

ЛЕЙКОЦИТЫ, ЛЕЙКОГРАММА 

• Возможных причин лейкоцитоза много. Более точную информацию дает автоматическая 5-компонентная лейкограмма 5 видов лейкоцитов.
• Попадающее в границы референтного интервала общее число количество лейкоцитов не исключает отклонений в разных популяциях лейкоцитов.
• Нейтрофилия – острое воспаление, токсическое поражение, иммунное заболевание, миелопролиферативное заболевание.
• Эозинофилия – аллергия, паразиты, иммунные синдромы, злокачественные забо- левания (лимфома, карцинома).
• Базофилия – аллергия, миелопролиферативные заболевания.
• Моноцитоз – хронические воспаления, болезни, протекающие с тканевым поражением, хронические миелопролиферативные заболевания.
• Лимфоцитоз – вирусные инфекции, реактивные состояния, злокачественные лимфопролиферативные заболевания. 
• Лейкопения – происходит обычно из нейтропении. Возникает при вирусных инфек- циях, токсическом (например, лекарственные препараты) или иммунном поражении кроветворной функции и при острых лейкемиях.

ТРОМБОЦИТЫ

• Тромбоцитопения чаще всего возникает в связи с вирусными инфекциями, использованием лекарственных препаратов, при некоторых аутоиммунных заболеваниях, болезнях печени, мегалобластической анемии, алкоголизме, заболеваниях кроветворной системы, гиперспленизме.
• Так называемая псевдотромбоцитопения возникает, если несколько агрегированных тромбоцитов анализатор считаеют какза один большой тромбоцит.
  • Причиной может быть недостаточное пересмешиваение крови с антикоагулянтом после взятия анализа пробы или чувствительность тромбоцитов к ЭДEDTA. В этом случае для пересчета тромбоцитов следует повторить анализ, взяв кровь в пробирку с цитратом, используемую для анализов свертываемости (с голубойая пробкойа). Агрегаты тромбоцитов хорошо видны при микроскопировании мазка крови.
  • Тромбоцитоз обычно возникает в связи с миелопролиферативными заболеваниями, такими как полицитемия и эссенциальная тромбоцитемия, а также после спленэктомии.
• Повышениные значения тромбоцитов возникают часто возникает вместе с реактивными изменениями лейкоцитов при бактериальных инфекциях.

ИНДЕКСЫ ТРОМБОЦИТОВ: MPV, PDW

MPV и PDW важны при выяснении сущностиприроды тромбоцитопений и тромбоцитозов.

• Повышенный МРV и тромбоцитопения – указываюет на нормальную регенераторнуюивную способность тромбоцитэритропоэза.
• Артефактное увеличение MPV:
  • Большой промежуток времени между взятием пробы и самим анализомпроведением анализа – тромбоциты разсбпухают в пробе крови сот ЭДTA
  • Агрегацияты тромбоцитов
• Высокие значения PDW и MPV – частая находка при хронических миелопролиферативных заболеваниях.
• Повышен PDW и уменьшено количество тромбоцитов – частая находка при мегалобластных анемиях.
• Нормальный PDW и количество тромбоцитов >500 × 109/L – часто возникает присопутствуют реактивнымх изменениямх

Показания к проведению микроскопии мазка крови

Если результат абсолютного количества клеток крови одинПри наличии в гемограмме любого из нижеприведенных показателей, и в случае, если анализатор выдает сообщение об атипичной морфологии, то в качестве уточняющего исследования проводится микроскопия мазка крови.

1.2. Гематологические показатели у детей

Особенности гемограммы развивающегося организма Кровь эмбриона Первые клетки – мегалобласты I и II генерации, первичные эритроциты (мегалоциты). К 3 мес эмбрионального развития количество эритробластов составляет до 8% всех элементов красной крови. Количество лейкоцитов – около 1х109/л (75% относится к бластам, остальные – к гранулоцитам). Лимфоциты появляются с 4–5 мес, моноциты – с 5-го. С 3–4 мес количество ретикулоцитов составляет 705‰, с 4–5 мес – 501‰, с 5–7 мес – 271‰. Кровь недоношенных детей Количество Нb – 155–217 г/л, эритроцитов – (7,2– 4,45)х1012/л. При исследовании мазков крови отмечается эритробластоз, ретикулоцитоз, повышенное количество полихроматофилов. Отмечается анизоцитоз и умеренный пойкилоцитоз. Количество лейкоцитов – (3,6–36)х109/л. Характерен лимфоцитоз, сдвиг нейтрофилов влево до миелоцитов. Кровь новорожденных Содержание Нb –167–240 г/л, количество эритроцитов – (4,5–7,5)х1012/л. Выражен анизоцитоз, диаметр эритроцитов 3,25–10,25 мкм. Выражены явления полихромазии, количество ретикулоцитов 8–42‰. Количество лейкоцитов (10–30)х109/л, со стороны нейтрофилов сдвиг влево до миелоцитов. Число лимфоцитов при рождении составляет 16–34%, к концу новорожденности 50–60%. Отмечается анизоцитоз кровяных пластинок, наличие гигантских форм. Кровь детей первого года Содержание Нb в первые месяцы снижается, к 5–6 мес – 116–133 г/л, количество эритроцитов (6–3)х1012/л. Анизоцитоз и полихромазия выражены слабее. Содержание ретикулоцитов 2–21‰. Количество лейкоцитов (6,2–22)х109/л. Со стороны нейтрофилов имеется умеренный сдвиг влево, помимо малых и средних лимфоцитов обнаруживаются и большие. Характерен лимфоцитоз и умеренный моноцитоз, обнаруживаются плазматические клетки лимфоидного и лимфобластического типа. Количество тромбоцитов (230–250)х109/л, анизоцитоз кровяных пластинок выражен слабее. Кровь детей старше года Содержание Нb постепенно нарастает, достигая к 5–8 годам 126 – 150 г/л, к 8–15 годам – 133–153 г/л. Количе­ст­во эритроцитов увеличивается до уровня взрослого человека. Количе­ство ретикулоцитов 2–6‰, общее количество лейкоцитов снижается до (8–7)х109/л, лимфоцитоз сохраняется до 6–7 лет жизни. Сдвиг влево лейкоцитарной формулы постепенно сокращается. Количество тромбоцитов (200–300)х109/л.     Таблица 1.2.1. Показатели гемограммы у новорожденных (И. Н. Усов)  Эритроциты, х1012/л Гемоглобин, г/л Цветовой показатель Ретикулоциты, ‰ Тромбоциты, х109/л Лейкоцитарная формула, % Лейкоциты, х109/л Метамиелоциты Палочкоядерные Сегментоядерные     Таблица 1. 2.2. Возрастные особенности осмотической резистентности эритроцитов у детей, %  Возрастные группы Минимальная резистентность Максимальная резистентность Амплитуда резистентности Новорожденные Дети грудного возраста Дети дошкольного возраста Дети старшего возраста и взрослые     Таблица 1. 2.3. Гематокритная величина и эритроцитометрические показатели у здоровых детей различного возраста (А. Ф. Тур, Н. П. Шабалов, И. Тодоров)  Гематокрит, мл/л Средний диаметр эритроцита, мкм Средний объем эритроцита, фл Средняя толщина эритроцита, мкм Среднее содержание гемоглобина в 1 эритроците, пг Новорожденные     Таблица 1. 2.4. Нормальный состав периферической крови детей разного возраста (Е. Н. Мосягина и соавт.)  Число эритроцитов, х1012/л Число ретикулоцитов, % Среднее число лейкоцитов, х109/л Колебания числа лейкоцитов, х109/л Тромбоциты, х1011/л абс. число, х109/л абс. число, х109/л абс. число, х109/л абс. число, х109/л абс. число, х109/л     Таблица 1. 2.5. Показатели красной крови, СОЭ и содержание тромбоцитов в крови здоровых детей (Е. Д. Гольдберг, Р. М. Тарлова)  Гемоглобин, г/л Эритроциты, х1012/л Цветовой показатель Ретикулоциты, °/00 Тромбоциты, х109/л Мальчики: 7-12 13-16                                         Девочки: 7-12 13-16                     Примечание. * В строке «а» — величины М±m, в строке «б» — пределы колебаний М±m     Таблица 1.2.6. Показатели белой крови здоровых детей (Е. Д. Гольдберг, Р. М. Тарлова)  Общее количество лейкоцитов Сегментоядерные нейтрофилы Палочкоядерные нейтрофилы                             Примечание. * В строке «а» — относительные величины содержания форменных элементов, % (М±m), в строке «б» — абсо­лютные величины (сегментоядерные нейтрофилы и лимфоциты, тыс.) в системе СИ -107л (М±m).     Таблица 1.2.7. Показатели системы гемостаза у здоровых детей 3-14 лет (М. С. Игнатова, Ю. В. Вельтищев)  Количество тромбоцитов, х109/л Время кровотечения по Дьюке, мин Гемолизатагрегационный тест:   время агрегации:   разведение 10-2, с разведение 10-6, с Агрегационная активность тромбоцитов:   разведение 10-2, % разведение 10-6, % Индекс активации тромбоцитов Ристомицинагрегация, с Фибриноген, г/л Протромбиновое время, с Протромбиновый индекс, % Тромбиновое время, с Аутокоагуляционный тест:   начальная свертывающая активность (А), % максимальная свертывающая активность (МА), % время достижения МА, мин индекс инактивации тромбина антитромбин III, % Этаноловый тест Отрицательный Протаминсульфатный тест Отрицательный Продукты деградации фибрина (фибриногена), г/л Эуглобулиновый лизис сгустка, мин Хагеманзависимый фибринолиз, мин Стрептазоиндуцированный фибринолиз, с     Таблица 1. 2.8. Факторы свертывания крови у новорожденных и сроки их возрастания до уровня взрослых (В. А. Мазурин, И. М. Воронцов)  У детей старше года (или у взрослых) Сроки нормализации I (фибриноген), г/л II (протромбин), % V (проакцелерин), % VII (проконвертин),% VIII (антигемофильный глобулин А), % IX (антигемофильный глобулин В), % X (фактор Стюарта-Прауэр), % XI (фактор Розенталя), % XII (фактор Хагемана), % XII (фибринстабилизирующий), % Антикоагулянты и фибринолитическая система Антитромбин II, % Антитромбин III, % Плазминоген, % Фибринолизин, %       Таблица 1. 2.9. Основные показатели нормальной коагулограммы у детей (Е. П. Иванов)  Фаза свертывания I — протромбинообразование Время свертывания крови по Ли-Уайту, мин: в несиликонированной пробирке в силиконированной пробирке Каолин-кефалиновое время, с Аутокоагулограмма, с: II — тромбинообразование Протромбиновый индекс III — фибринообразование Фибриноген А, г/л Тромбиновое время, с Антикоагулянтная система Антитромбин III, с Толерантность плазмы к гепарину, мин Спонтанный фибринолиз, % Эуглобиновый фибринолиз, мин IV — посткоагуляционная Гематокрит, мл/л Протаминовая проба Этаноловая проба     Таблица 1. 2.10. Коагулограмма здоровых детей  Время свертывания цельной крови, мин Время рекальцификации плазмы, с Толерантность плазмы к гепарину, мин Потребление протромбина, % Тромбиновое время, с  Протромбиновый комплекс, % Проакцелерин (фактор V), % Проконвертин (фактор VII), % Фибриноген через 2 ч, мг % Фибринолитическая активность, % Ретракция кровяного сгустка, % Количество гепарина, ЕД/мл Антиплазминовая активность, % Фибриназа (фактор XIII), % Время лизиса эуглобулинов, мин     Таблица 1. 2.11. Минутный объем крови (МОК) у детей, мл  Новорожденный     Таблица 1. 2.12. Объем циркулирующей крови у здоровых детей, мл/кг (Г. А. Баиров)  Объем циркулирующей крови Объем циркулирующей плазмы Глобулярный объем     Таблица 1. 2.13. Буферная система крови здоровых детей  Сумма буферных оснований, ммоль/л, (ВВ) Излишек или дефицит оснований, ммоль/л (ВЕ) Стандартные бикарбонаты, ммоль/л (8В) Рсо2. парциальное давление (кПа)

Моноцитоз — обзор | Темы ScienceDirect

Лейкоцитоз, вызванный расширением других клеточных линий

Моноцитоз и лимфоцитоз также могут приводить к повышению уровня лейкоцитов. Моноцитоз определяется абсолютным числом моноцитов более 500 / мкл и обычно возникает в условиях хронического воспаления, вызванного такими инфекциями, как туберкулез, сифилис или подострый бактериальный эндокардит, аутоиммунное или гранулематозное заболевание и саркоидоз. Его также можно увидеть при злокачественных новообразованиях, таких как прелейкемические состояния, нелимфоцитарный лейкоз, включая острый миеломоноцитарный и моноцитарный лейкоз, гистиоцитоз, болезнь Ходжкина, неходжкинскую лимфому и различные карциномы.Наконец, это можно увидеть на фоне хронической нейтропении, после спленэктомии и при восстановлении после подавления костного мозга (таблица 170-2).

Лимфоцитоз определяется по абсолютному количеству лимфоцитов более 5000 / мкл. Наиболее частыми причинами повышенного количества лимфоцитов являются вирусные инфекции, такие как вирус Эпштейна-Барра и вирусы гепатита. Хотя большинство бактериальных инфекций вызывают нейтрофилию, коклюш и болезнь кошачьих царапин из-за Bartonella henselae , они могут вызывать впечатляющий лимфоцитоз. Другие инфекции, которые могут вызвать вторичный лимфоцитоз, включают токсоплазмоз и бабезиоз. Реакции гиперчувствительности из-за лекарств или сывороточной болезни также могут быть связаны с лимфоцитозом. Первичные нарушения, вызывающие лимфоцитоз, включают хронический лимфолейкоз (ХЛЛ) и моноклональный В-клеточный лимфоцитоз (таблица 170-3; см. Также таблицу 190-2 и главу 190).

Эозинофилия определяется по абсолютному количеству эозинофилов более 400 / мкл. Эозинофилы пролиферируют под влиянием IL-5 и играют роль в фагоцитозе и модуляции токсичности из-за дегрануляции тучных клеток в реакциях гиперчувствительности.Таким образом, эозинофилия чаще всего проявляется в связи с реакциями на лекарства, аллергией, атопией и астмой. Различные инфекции, особенно паразитарные и, в меньшей степени, грибковые инфекции, могут быть связаны с повышенным количеством циркулирующих эозинофилов. Эозинофилия также может быть результатом аутоиммунных и воспалительных состояний, таких как васкулит Черджа-Стросса. Атероэмболическая болезнь и надпочечниковая недостаточность также могут вызывать эозинофилию. Существует ряд видов рака, которые были связаны с политипическим увеличением эозинофилов, включая лимфомы и солидные опухоли.Существует также ряд клональных нарушений эозинофилов, возникающих при некоторых лейкозах. Наконец, существует гетерогенная группа расстройств, получившая название гиперэозинофильных синдромов . Слитый ген FIP1L1-PDGFRA подтвердил, что некоторые из них являются первичными клональными нарушениями эозинофилов; клональность других гиперэозинофильных синдромов может быть трудно установить (см. Таблицу 173-1 в Главе 173).

Каковы причины моноцитоза при лейкоцитозе?

Котран Р.С., Кумар В., Коллинз Т. Патологическая основа болезни Роббинса . 6-е изд. Филадельфия, Пенсильвания: У. Б. Сондерс; 1999. 644-96.

Tien FM, Hou HA, Tsai CH, et al. Гиперлейкоцитоз связан с отчетливыми генетическими изменениями и является независимым фактором низкого риска у пациентов с острым миелоидным лейкозом de novo. Eur J Haematol . 6 апреля 2018 г. [Medline].

Клавер-Белвер Н., Кано-Коррес Р., Миро-Канис С., Берланга-Эскалера Е. Псевдогиперкалиемия, вызванная тяжелым лейкоцитозом: описание случая. Clin Chem Lab Med . 2016 г. 1. 54 (12): e365-7. [Медлайн].

Махмуд Э., Книо З.О., Махмуд Ф. и др. Предоперационный бессимптомный лейкоцитоз и послеоперационные исходы у кардиохирургических больных. PLoS One . 2017. 12 (9): e0182118. [Медлайн]. [Полный текст].

Ижакян С., Вассер В.Г., Вайншелбойм Б. и др. Этиология и прогноз позднего послеоперационного лейкоцитоза у реципиентов трансплантата легких. Prog Transplant .2020 июн.30 (2): 111-6. [Медлайн].

Ли GM, Харпер МБ. Риск бактериемии у детей раннего возраста с лихорадкой в ​​пост-Haemophilus influenzae типа b. Arch Pediatr Adolesc Med . 1998 июл.152 (7): 624-8. [Медлайн].

Браун Л., Шоу Т., Уиттлейк, Вашингтон. Выявляет ли лейкоцитоз бактериальные инфекции у новорожденных с лихорадкой, поступающих в отделение неотложной помощи? Emerg Med J . 2005 22 апреля (4): 256-9. [Медлайн].

Сяо А.Л., Чен Л., Бейкер Д.Заболеваемость и предикторы серьезных бактериальных инфекций у младенцев в возрасте от 57 до 180 дней. Педиатрия . May 2006. 117: 1695-1701.

Сяо Р., Омар С.А. Исход новорожденных с крайне низкой массой тела при лейкемоидной реакции. Педиатрия . 2005 июл.116 (1): e43-51. [Медлайн].

webmd.com»> Zanardo V, Vedovato S, Trevisanuto DD, Suppiej A, Cosmi E, Fais GF. Гистологический хориоамнионит и лейкемоидная реакция новорожденных у детей с низкой массой тела при рождении. Хум Патол . 2006 Январь 37 (1): 87-91. [Медлайн].

Арав-Богер Р., Баггетт ХК, Спевак П.Дж., Уиллоуби РЭ. Лейкоцитоз, вызванный простагландином E1 у новорожденных. J Педиатр . 2001 февраль 138 (2): 263-5. [Медлайн].

Talosi G, Katona M, Turi S. Побочные эффекты длительного лечения простагландином E (1) у новорожденных. Педиатр Инт . 2007 июн. 49 (3): 335-40. [Медлайн].

Ballin A, Lehman D, Sirota P, Litvinjuk U, Meytes D.Повышенное количество CD34 + клеток периферической крови у пациентов, получавших литий. Br J Haematol . 1998, январь, 100 (1): 219-21. [Медлайн].

webmd.com»> Чжан С., Кондак Э, Цю Х и др. Гепарин-индуцированный лейкоцитоз требует 6-O-сульфатирования и вызывается блокадой опосредованного селектином и белком CXCL12 трафика лейкоцитов у мышей. Дж. Биол. Хим. . 2012 17 февраля. 287 (8): 5542-53. [Медлайн]. [Полный текст].

Аллам Дж. П., Паус Т., Райхель К., Бибер Т., Новак Н.DRESS-синдром, связанный с карбамазепином и фенитоином. Eur J Dermatol . 2004 сентябрь-октябрь. 14 (5): 339-42. [Медлайн].

Gungor E, Alli N, Comoglu S, Comcuoglu C. Синдром гиперчувствительности к фенитоину. Neurol Sci . 2001 июн. 22 (3): 261-5. [Медлайн].

Луптон Дж. Р., Фигероа П., Тамджиди П., Бербериан Б. Дж., Сулика VI. Синдром, подобный инфекционному мононуклеозу, вызванный миноциклином: третий тип побочных реакций на лекарства. Cutis . 1999 августа 64 (2): 91-6. [Медлайн].

Маркус Н., Смуэль К., Альмог М. и др. Успешное внутривенное лечение иммуноглобулином при тяжелом педиатрическом синдроме DRESS. J Allergy Clin Immunol Pract . 30 ноября 2017 г. [Medline].

Лю Ф, Махгуб Н., Феррандо С. Лейкоцитоз, связанный с лечением клозапином: отчет о болезни. Психосоматика . 2011 сентябрь-октябрь. 52 (5): 488-91. [Медлайн].

Шпалл Р.Л., Джеффес Е.В., Хоффман Х.М.Случай семейного холодового аутовоспалительного синдрома, подтвержденный наличием мутации CIAS1. Br J Dermatol . 2004 г., май. 150 (5): 1029-31. [Медлайн].

Granger JM, Kontoyiannis DP. Этиология и исход крайнего лейкоцитоза у 758 пациентов с негематологическим раком: ретроспективное исследование в одном учреждении. Рак . 2009, 1. 115 (17): 3919-23. [Медлайн].

Ализаде П., Рахбариманеш А.А., Бахрам М.Г., Салмасян Х.Нарушение адгезии лейкоцитов типа 1, проявляющееся лейкемоидной реакцией. Индийский J Pediatr . 2007 декабрь 74 (12): 1121-3. [Медлайн].

Rosa JS, Schwindt CD, Оливер SR, Leu SY, Flores RL, Galassetti PR. Изучите профили лейкоцитов у здоровых детей, детей с диабетом 1 типа, детей с избыточным весом и астматиков. Педиатр. Физические науки . 2009 21 февраля (1): 19-33. [Медлайн].

Айдоган М., Айдоган А., Кара Б., Басим Б., Эрдоган С. Преходящий периферический лейкоцитоз у детей с афебрильными припадками. J Детский нейрол . 2007 22 января (1): 77-9. [Медлайн].

Алиоглу Б., Озюрек Э., Авджи З., Аталай Б., Джанер Х. , Озбек Н. Картина периферической крови после легкой травмы головы у детей. Педиатр Инт . 2008 июн. 50 (3): 281-3. [Медлайн].

Furlan JC, Красюков А.В., Фелингс МГ. Гематологические аномалии в течение первой недели после острого изолированного травматического повреждения шейного отдела спинного мозга: когортное исследование случай-контроль. Позвоночник .Ноябрь / 2006. 31: 2674-83. [Медлайн].

Osawa I, Nagamachi S, Suzuki H et al. Лейкоцитоз и высокий уровень гематокрита при приступах брюшной полости наследственного ангионевротического отека. BMC Gastroenterology 2013, 13: 123 . Август 2013. 13: 123.

Plo I, Zhang Y, Le Couédic JP, Nakatake M, Boulet JM, Itaya M. Активирующая мутация в гене CSF3R вызывает наследственную хроническую нейтрофилию. J Exp Med . 2009 3 августа. 206 (8): 1701-7.[Медлайн]. [Полный текст].

Снайдер Р.Л., Стрингем ди-джей. Пегфилграстим-индуцированный гиперлейкоцитоз. Энн Фармакотер . 2007 Сентябрь 41 (9): 1524-30. [Медлайн].

Duchin JS, Koster FT, Peters CJ, et al. Хантавирусный легочный синдром: клиническое описание 17 пациентов с недавно выявленным заболеванием. Группа изучения хантавируса. N Engl J Med . 1994, 7 апреля. 330 (14): 949-55. [Медлайн].

Drago F, Cogorno L, Agnoletti AF, Parodi A.Роль периферической эозинофилии в нежелательных кожных реакциях на лекарства. Eur Rev Med Pharmacol Sci . 2015 июн.19 (11): 2008-9. [Медлайн].

Cherfane CE, Gessel L, Cirillo D, Zimmerman MB, Polyak S. Моноцитоз и низкое соотношение лимфоцитов к моноцитам являются эффективными биомаркерами активности язвенного колита. Воспаление кишечника . 2015 19 мая. [Medline].

Хуанг Дж., Ковалич А.Дж., Грабер С.Дж. Прогностическое значение лейкоцитоза и лимфопении для тяжести коронавирусного заболевания. Emerg Infect Dis . 2020 8 мая. 26 (8): [Medline]. [Полный текст].

Nguyen R, Jeha S, Zhou Y и др. Роль лейкафереза ​​в современном лечении гиперлейкоцитоза при впервые диагностированном остром лимфобластном лейкозе у детей. Рак крови у детей . 2016 17 мая. [Medline].

Choi MH, Choe YH, Park Y, et al. Влияние терапевтического лейкафереза ​​на ранние осложнения и исходы у пациентов с острым лейкозом и гиперлейкоцитозом: исследование с подобранной оценкой склонности. Переливание крови . 2018 янв.58 (1): 208-16. [Медлайн].

Mamez AC, Raffoux E, Chevret S, et al. Предварительное лечение пероральной гидроксимочевиной перед интенсивной химиотерапией улучшает раннюю выживаемость пациентов с высоким гиперлейкоцитозом при остром миелоидном лейкозе. Лимфома лейк . 2016 5. 1-8 февраля. [Медлайн].

Моноцитоз — Консультант по терапии рака

I. Проблема / Состояние.

Моноцит представляет собой тип лейкоцитов, продуцируемых в костном мозге из предшественников монобластов и обычно циркулирующих в кровотоке в течение 1-3 дней, прежде чем скопиться в селезенке в качестве резерва или проникнуть в ткани и созреть в макрофаги или дендритные клетки.Обычно они составляют от 3 до 8% циркулирующих лейкоцитов. Моноцитоз — это увеличение количества моноцитов, циркулирующих в крови, при этом уровень выше 950 / мкл обычно считается повышенным. У пациентов с нормальным количеством лейкоцитов дифференциация с количеством моноцитов, равным или превышающим 10%, также может считаться моноцитозом.

II. Диагностический подход.

A. Каков дифференциальный диагноз этой проблемы?

Дифференциальный диагноз является широким, поскольку моноцитоз не является репрезентативным для конкретного состояния.Это часто является маркером хронического воспаления, вызванного инфекцией, аутоиммунным заболеванием, злокачественными опухолями крови или, возможно, даже болезнью накопления липидов.

Общие инфекции, вызывающие моноцитоз, включают туберкулез, подострый бактериальный эндокардит, сифилис, протозойную болезнь или риккетсиоз. Общие аутоиммунные заболевания включают СКВ, ревматоидный артрит, саркоидоз и воспалительное заболевание кишечника. Злокачественные новообразования, особенно моноцитарный лейкоз, всегда следует исследовать у пациента с моноцитозом и соответствующими симптомами.Моноцитоз также может развиваться во время фазы выздоровления от острой инфекции, выздоровления от гранулоцитоза или быть репрезентативным для крайне редких педиатрических состояний, таких как врожденный агранулоцитоз.

Наконец, моноцитоз существует при хроническом, плохо определяемом идиопатическом состоянии, которое является диагнозом исключения. Однако все вышеперечисленные условия являются лишь примерами, так как окончательный список был бы слишком широким, чтобы его можно было охватить в этом тексте.

B. Опишите диагностический подход / метод пациенту с этой проблемой.

1. Историческая справка, важная для диагностики данной проблемы.

Сбор анамнеза пациентов с моноцитозом имеет решающее значение для расшифровки значения этого признака. Следует тщательно изучить инфекционный анамнез, включая лихорадку, непреднамеренную потерю веса, симптомы со стороны верхних и нижних дыхательных путей, расстройство кишечника и абдоминальные симптомы, дизурию, сыпь, историю путешествий, контакты с больными, головные боли, сексуальный анамнез и т. Д.

Симптомы часто совпадают с симптомами злокачественных или ревматологических заболеваний, но также должны включать артралгии, отек или жесткость суставов, язвы в полости рта или гениталий, визуальные симптомы, легкие синяки или кровотечения, миалгии, аномальные кожные проявления, ночную потливость, пищеводный рефлюкс и др. дисфагия, сухость глаз или рта, светочувствительность, феномен Рейно и др.

Наконец, и это, возможно, самое важное, необходимо провести семейный анамнез ревматологических, злокачественных или генетических заболеваний в дополнение к тщательному анамнезу.

2. Маневры физического осмотра, которые могут быть полезны при диагностике причины этой проблемы.

Не существует единого маневра, используемого для оценки моноцитоза, скорее следует применять общий подход к инфекционным или хроническим заболеваниям. Может быть использовано общее обследование на наличие инфекционных причин, особенно хронических инфекций, в частности на предмет лимфаденопатии, сыпи, поражений половых органов, включая шанкр, признаков потери веса и кахексии, включая временное истощение, себорейный дерматит, дубинку, поражения узкой дороги, узлы ягодиц и т. и Т. Д.

Петехии и спленомегалия могут быть отличительными признаками злокачественных новообразований, связанных с кровью, в то время как надлежащее ревматологическое обследование должно включать все вышеперечисленное в дополнение к осмотру суставов и кожи на предмет изливов, воспалений, пальпируемой пурпуры и синовита, а также осмотр ротовой полости. на язвы и осмотр глаз на сухость или воспаление.

3. Лабораторные, рентгенографические и другие тесты, которые могут быть полезны при диагностике причины этой проблемы.

Поскольку дифференциал для моноцитоза чрезвычайно широк, для его оценки нет единого теста. Общее рентгенологическое и инфекционное обследование должно проводиться в соответствии с симптомами и признаками. Если рассматривается злокачественная опухоль, мазки периферических тканей, проточная цитометрия, биопсия костного мозга и, наконец, биопсия лимфатических узлов могут быть полезными и диагностическими, а также могут быть связаны с общим лейкоцитозом с базофилией, эозинофилией и тромбоцитопенией. Злокачественные новообразования, передающиеся через кровь, скорее всего, потребуют многопрофильного подхода с привлечением гематологов для диагностики.

C. Критерии диагностики каждого диагноза, указанного в методе выше.

Поскольку моноцитоз является признаком заболевания с таким широким дифференциалом, клинические критерии были бы слишком исчерпывающими, чтобы рассматривать их в этой ситуации. Может быть важно различать инфекционные, ревматологические и злокачественные причины, для чего, вероятно, потребуются элементы анамнеза, визуализации и лабораторных исследований. В то время как каждая хроническая инфекционная причина может потребовать определенных культур или лабораторного анализа, ревматологические причины часто можно быстро сузить с помощью нескольких лабораторных тестов, включая ANA и RF.Злокачественные новообразования почти всегда требуют биопсии костного мозга с цитогенным анализом.

D. Чрезмерно используемые или «потраченные впустую» диагностические тесты, связанные с оценкой этой проблемы.

Трудно описать потраченные впустую тесты при анализе признака с таким широким дифференциальным диагнозом. Исключение инфекционной и ревматологической этиологии остается отличительной чертой диагноза, прежде чем переходить к злокачественным причинам, и в первую очередь к преждевременной биопсии костного мозга.

III. Управление во время диагностического процесса.

A. Управление клинической проблемой моноцитоза.

Моноцитоз сам по себе является признаком и не требует лечения. Лечение основной этиологии приведет к разрешению этого состояния.

B. Общие подводные камни и побочные эффекты управления этой клинической проблемой.

НЕТ

IV. Какие доказательства?

НЕТ

Copyright © 2017, 2013 ООО «Поддержка принятия решений в медицине». Все права защищены.

Ни один спонсор или рекламодатель не участвовал, не одобрял и не платил за контент, предоставляемый Decision Support in Medicine LLC.Лицензионный контент является собственностью DSM и защищен авторским правом.

Типичный диапазон

, что указывают высокие или низкие результаты

Когда вы получаете комплексный анализ крови, который включает полный анализ крови, вы можете заметить измерение моноцитов, типа лейкоцитов. Его часто называют «моноциты (абсолютные)», потому что они представлены как абсолютное число.

Вы также можете видеть моноциты в процентах от количества лейкоцитов, а не в абсолютном количестве.

Моноциты и другие виды белых кровяных телец необходимы, чтобы помочь организму бороться с болезнями и инфекциями. Низкий уровень может быть результатом определенных медицинских процедур или проблем с костным мозгом, в то время как высокий уровень может указывать на наличие хронических инфекций или аутоиммунного заболевания.

Моноциты — самые крупные из белых кровяных телец, они в три-четыре раза больше красных кровяных телец. Этих мощных защитников не так много в кровотоке, но они жизненно важны для защиты организма от инфекций.

Моноциты перемещаются по кровотоку в ткани тела, где они превращаются в макрофаги, другой вид белых кровяных телец.

Макрофаги убивают микроорганизмы и борются с раковыми клетками. Они также работают с другими лейкоцитами, удаляя мертвые клетки и поддерживая иммунную систему организма против инородных веществ и инфекций.

Макрофаги делают это одним из способов — сигнализировать другим типам клеток о наличии инфекции. Вместе несколько типов белых кровяных телец работают, чтобы бороться с инфекцией.

Моноциты образуются в костном мозге из миеломоноцитарных стволовых клеток перед попаданием в кровоток. Они путешествуют по телу в течение нескольких часов, прежде чем попадут в ткани органов, таких как селезенка, печень и легкие, а также в ткань костного мозга.

Моноциты отдыхают, пока не активируются, чтобы стать макрофагами. Воздействие патогенов (болезнетворных веществ) может запустить процесс превращения моноцита в макрофаг. После полной активации макрофаг может выделять токсичные химические вещества, убивающие вредные бактерии или инфицированные клетки.

Обычно моноциты составляют от 2 до 8 процентов от общего количества лейкоцитов.

Абсолютные результаты теста на моноциты могут незначительно отличаться в зависимости от метода, использованного для теста, и других факторов. Согласно данным некоммерческой системы здравоохранения Allina Health, нормальные результаты для абсолютных моноцитов попадают в следующие диапазоны:

У мужчин, как правило, больше моноцитов, чем у женщин.

Хотя уровни выше или ниже этого диапазона не обязательно опасны, они могут указывать на основное состояние, которое необходимо оценить.

Уровни моноцитов падают или повышаются в зависимости от того, что происходит с иммунной системой организма. Проверка этих уровней — важный способ контролировать иммунитет вашего организма.

Организм может производить больше моноцитов при обнаружении инфекции или при наличии аутоиммунного заболевания. Если у вас аутоиммунное заболевание, такие клетки, как моноциты, по ошибке охотятся за здоровыми клетками вашего тела. Люди с хроническими инфекциями также имеют повышенный уровень моноцитов.

Общие состояния, которые могут привести к скачку моноцитов абс, включают:

Интересно, что низкий уровень моноцитов может быть результатом аутоиммунных заболеваний.

Низкий уровень моноцитов имеет тенденцию развиваться в результате заболеваний, которые снижают общее количество лейкоцитов, или лечения рака и других серьезных заболеваний, подавляющих иммунную систему.

Причины низкого абсолютного количества моноцитов включают:

Стандартный общий анализ крови (ОАК) будет включать количество моноцитов. Если у вас есть ежегодный медосмотр, который включает регулярный анализ крови, общий анализ крови является довольно стандартным. Помимо проверки количества лейкоцитов (включая моноциты), общий анализ крови проверяет:

• красных кровяных телец, которые переносят кислород к вашим органам и другим тканям
• тромбоцитов, которые помогают свертывать кровь и предотвращают кровотечения
• гемоглобин, белок, который переносит кислород в ваши красные кровяные тельца
• гематокрит, отношение красных кровяных телец к плазме в вашей крови

Врач также может назначить анализ крови, если они считают, что у вас могут быть аномальные уровни клеток крови.Если ваш общий анализ крови показывает, что определенные маркеры ниже или выше нормального диапазона, дифференциальный тест крови может помочь подтвердить результаты или показать, что уровни, указанные в исходном клиническом анализе крови, были вне нормального диапазона по временным причинам.

Дифференциальный анализ крови также может быть назначен, если у вас есть инфекция, аутоиммунное заболевание, заболевание костного мозга или признаки воспаления.

И стандартный общий анализ крови, и дифференциальный анализ крови проводятся путем взятия небольшого количества крови из вены на руке.Образцы крови отправляются в лабораторию, и различные компоненты вашей крови измеряются и сообщаются вам и вашему врачу.

Помимо моноцитов, ваша кровь содержит другие типы лейкоцитов, которые помогают бороться с инфекциями и защищают вас от болезней. Типы лейкоцитов делятся на две основные группы: гранулоциты и мононуклеарные клетки.

Нейтрофилы

Эти гранулоциты составляют большинство белых кровяных телец в организме — до 70 процентов.Нейтрофилы борются со всеми видами инфекций и являются первыми лейкоцитами, которые реагируют на воспаление в любом месте тела.

Эозинофилы

Они также являются гранулоцитами и составляют менее 3 процентов ваших лейкоцитов. Но они могут увеличить этот процент, если вы боретесь с аллергией. Они также увеличивают свою численность при обнаружении паразита.

Базофилы

Это наименьшее количество гранулоцитов, но они особенно полезны при борьбе с аллергией и астмой.

Лимфоциты

Наряду с моноцитами, лимфоциты входят в группу мононуклеарных клеток, то есть их ядра представляют собой единое целое. Лимфоциты — это основные клетки лимфатических узлов.

Абсолютные моноциты — это показатель определенного типа лейкоцитов. Моноциты помогают бороться с инфекциями и заболеваниями, такими как рак.

Проверка абсолютного уровня моноцитов в рамках обычного анализа крови — это один из способов контроля здоровья вашей иммунной системы и крови.Если в последнее время вам не делали полный анализ крови, спросите врача, пора ли его сделать.

Спросите гематологов: диагностический подход к моноцитозу | Гематолог

Каков ваш диагностический подход к моноцитозу?

У 73-летней женщины моноцитоз не менее семи лет. В анамнезе она болела ревматоидным артритом и хронической анемией.В 2010 году количество лейкоцитов у нее составляло 9,8 × 10 ⁹ / л с 59% нейтрофилов, 19% лимфоцитов и 21% моноцитов (абсолютное количество моноцитов 2,1 × 10 ⁹ / л). Количество эритроцитов составляло 3,2 × 10 ¹² / л, гемоглобин 10,0 г / дл, средний корпускулярный объем 91,5 мкл, тромбоциты 162 × 10 ⁹ / л. Периферический мазок не показал незрелых моноцитов. Биопсия костного мозга, выполненная в то время, была нормоклеточной для этого возраста (40%). Существенные результаты были ограничены увеличением зрелых моноцитов (12% при ручной дифференциации) и умеренным дизеритропоэзом (<10%).Проточная цитометрия не показала увеличения количества бластов (0,3% CD34-положительных событий), политипических B-клеток и фенотипически нормальных T-клеток. Сопутствующий нестимулированный кариотип был нормальным. Шесть месяцев спустя абсолютное количество моноцитов оставалось повышенным и составляло 1,3 × 10 ⁹ / л, и повторная биопсия костного мозга с проточной цитометрией и цитогенетикой дала аналогичные результаты.

Исследование мазка крови

Анализ периферического мазка необходим в случаях стойкого моноцитоза, поскольку морфология имеет решающее значение для правильной классификации и рекомендаций диагностического тестирования.Морфология необходима для оценки зрелости моноцитов и различения моноцитов и промоноцитов. Это различие имеет решающее значение, поскольку промоноциты являются эквивалентами бластов и должны быть включены в подсчет бластов. Кроме того, требуется обследование на дисплазию, так как это свидетельствует о гематологической злокачественности. Это особенно важно при оценке нейтрофилов на предмет диспластических свойств, таких как ядерная гипосегментация и гипогранулярная цитоплазма. В условиях стресса костного мозга, ревматоидного артрита и других аутоиммунных заболеваний может наблюдаться дизеритропоэз в крови, поэтому оценка эритроцитов не так полезна, как оценка нейтрофилов. ¹ Если клиническая корреляция не может объяснить случай стойкого моноцитоза периферической крови, показан образец костного мозга (аспират и биопсия) с цитогенетическим кариотипированием.

Дифференциальный диагноз реактивного моноцитоза широк. Инфекция — наиболее частая причина реактивного моноцитоза. Другие частые причины моноцитоза включают воспалительные состояния, такие как коллагеновые сосудистые заболевания, хроническая нейтропения, спленэктомия, гемолитическая анемия, иммунная тромбоцитопеническая пурпура, а также гематопоэтические и негематопоэтические новообразования.

Проточная цитометрия способна выявить малозаметные иммунофенотипические отклонения, но она не может надежно отличить промоноциты (эквиваленты бластов) или монобласты от зрелых моноцитов. Из-за этого проточная цитометрия — наименее надежный метод оценки опухолевых моноцитарных заболеваний. Реактивные моноциты могут иметь аберрантную экспрессию по данным проточной цитометрии, в частности, CD56 и / или сниженный уровень человеческого лейкоцитарного антигена — DR, CD33 и CD13.Обнаружение двух или более аномалий способствует развитию неопластического процесса, хотя это не является специфическим признаком. ² Недавно было сообщено, что высокая фракция CD14 ⁺ / CD16 ^— оноцитов отличает хронический миеломоноцитарный лейкоз (CMML) от реактивных причин. ³

Некоторые первичные гематологические новообразования содержат неопластические моноциты, включая CMML, острый миелоидный лейкоз с моноцитарной дифференцировкой и миелопролиферативные новообразования, такие как хронический миелогенный лейкоз (CML).В то время как периферический мазок ХМЛ обычно является характерным, результаты ХММЛ и острого лейкоза с моноцитарной дифференцировкой могут быть сходными в периферической крови. Костный мозг часто является местом увеличения незрелых моноцитов. По этой причине исследование костного мозга необходимо при подозрении на неопластический процесс с моноцитарной дифференцировкой.

Морфология имеет решающее значение для подсчета монобластов и бласт-эквивалентных промоноцитов, а также для отличия их от зрелых моноцитов, как реактивных, так и диспластических.Как уже упоминалось, это различие невозможно с помощью проточной цитометрии. Цитохимическое окрашивание может быть полезным, поскольку оно улучшает чувствительность по сравнению с одной только морфологией для обнаружения моноцитарных клеток. ⁴

Согласно критериям Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) 2008 г., для диагностики CMML требуется не менее трех месяцев моноцитоза (> 1,0 × 10 ⁹ / л) с дисплазией по крайней мере в одной миелоидной линии. При отсутствии дисплазии необходимо наличие приобретенного цитогенетического или молекулярного клона.Другие транслокации, определяющие заболевание, особенно слияние BCR-ABL1 , не должны присутствовать. В условиях CMML необходимо также следить за системным мастоцитозом, который может наблюдаться одновременно. CMML — это миелоидная злокачественная опухоль, наиболее часто описываемая в этом контексте. В предстоящей редакции 4 ^{-го издания ВОЗ} будут признаны другие подтипы CMML с прогностическим значением. На основании WBC выше или ниже 13 x 10 ⁹ / л можно определить пролиферативный и диспластический подтипы соответственно.Кроме того, CMML-0 будет введен в случаях, когда количество бластов составляет менее 2% в периферической крови и 5% в костном мозге. ⁵

Цитогенетические аномалии наблюдаются в меньшинстве случаев CMML (примерно 30%). Обнаружение клональной цитогенетической аномалии, за редким исключением, подтверждает неопластический процесс. Напротив, положительный молекулярный результат не подтверждает неопластический процесс, поскольку мутации обнаруживаются у здоровых людей.Мутации в подтвержденных случаях CMML обнаруживаются почти во всех случаях. ⁶ В CMML описано много соматических мутаций, но ни одна из них не является специфической для данного заболевания. Некоторые из наиболее распространенных мутаций: TET2 , ASXL1 , SRSF2 и SETBP1 . В некоторых исследованиях SRSF2 является наиболее частой мутацией и чаще всего встречается в условиях нормального кариотипа. ⁷ SETBP1 и ASXL1 связаны с пониженной общей выживаемостью. ^6,8 RUNX1 был связан с худшим прогнозом. ⁹ Мутации NPM1 связаны с высоким риском трансформации в ОМЛ. ¹⁰ Интересно, что недавняя литература показала, что примерно у 10 процентов людей старше 70 лет есть мутации в периферической крови, многие из которых наблюдаются в CMML, включая ASXL1 и TET2 . ¹¹ Это открытие показывает, что, в отличие от цитогенетических аномалий, обнаружение изолированной молекулярной аномалии в случае моноцитоза не обязательно подтверждает неопластический диагноз.

Частота трансформации CMML в AML варьируется и составляет от 15 до 52 процентов. ¹² Последовательное кариотипирование имеет прогностическое значение, так как примерно у 25 процентов пациентов с CMML будут обнаруживаться цитогенетические аномалии, отсутствующие при постановке диагноза. Неудивительно, что развитие сложного кариотипа связано с прогрессированием в ОМЛ. Те, у кого добавлен del (20q), как правило, имеют стабильное заболевание. ¹³

У этого пациента абсолютное количество моноцитов колебалось, но оставалось повышенным, по крайней мере, с 2010 года, в диапазоне от 0,9 × 10 ⁹ / л до 3,2 × 10 ⁹ / л. Количество тромбоцитов оставалось незначительно сниженным (102 × 10 ⁹ / л — 137 × 10 ⁹ / л), анемии никогда не было. В 2015 году абсолютное количество моноцитов составило 3,2 × 10 ⁹ / л, что положило начало исследованию проточной цитометрии периферической крови.Это показало 62 процента моноцитов с частичной экспрессией CD56, но без дополнительных иммунофенотипических аномалий. Последующий общий анализ крови через несколько месяцев показал стабильное количество моноцитов 3,1 × 10 ⁹ / л.

В целом результаты в этом случае согласуются с реактивным моноцитозом. При ревматоидном артрите, как и при других аутоиммунных заболеваниях, моноцитоз наблюдается у значительного меньшинства пациентов и обычно протекает в легкой форме. ¹⁴ Моноцитоз был стабильным, и значительной дисплазии в периферической крови или костном мозге нет. Повторная биопсия костного мозга с кариотипом не выявила признаков неопластического процесса. В этой ситуации проведение молекулярных исследований для обнаружения мутации не является четко указанным и может даже привести к ошибочному диагнозу. Учитывая относительно высокую распространенность мутаций в этой популяции (например, клональный гематопоэз с неопределенным потенциалом), обнаружение одной из этих мутаций не может быть диагностическим признаком миелоидного новообразования и, скорее, может отражать возрастной клональный гематопоэз. ¹¹ Однако обнаружение последующей цитогенетической аномалии будет иметь большое значение для постановки диагноза, и это потенциально может быть выполнено на периферической крови.

Моноцитоз — частая и сложная находка. Точная диагностика многих состояний, которые проявляются как моноцитоз, требует интеграции истории болезни, морфологии и разумного использования дополнительных исследований.

Начальное абсолютное количество моноцитов как иммунный биомаркер клинического ответа при остром миелоидном лейкозе с моноцитарной дифференцировкой | Журнал Египетского национального института рака

1.

Сигель Р.Л., Миллер К.Д., Джемаль А. Статистика рака. CA Cancer J Clin. 2019; 69: 7–34. https://doi.org/10.3322/caac.21551 Epub 2019 8 января.

Статья PubMed PubMed Central Google ученый

2.

Liersch R, Müller-Tidow C, Berdel WE, Krug U. Факторы прогноза острого миелоидного лейкоза у взрослых — биологическое значение и клиническое использование. Br J Haematol. 2014; 165: 17–38.

Артикул Google ученый

3.

Фэн Дж, Чжан В., Ву Дж, Гао С., Е Х, Сун Л., Чен И, Ю К, Син Ц-ГГ. Влияние исходного абсолютного количества моноцитов на выживаемость пациентов с острым миелоидным лейкозом de novo, отличным от M3. Лимфома лейка. 2016; 57: 2548–54. https://doi.org/10.3109/10428194.2016.1166491.

Артикул PubMed Google ученый

4.

Wilcox RA, Ristow K, Habermann TM, Inwards DJ, Micallef INM, Johnston PB, Colgan JP, Nowakowski GS, Ansell SM, Witzig TE, Markovic SN, Porrata L.Абсолютная прогностическая оценка моноцитов и лимфоцитов позволяет прогнозировать выживаемость и выявлять пациентов с высоким риском диффузной В-клеточной лимфомы. Лейкемия. 2011; 25: 1502–9. https://doi.org/10.1038/leu.2011.112.

Артикул PubMed CAS Google ученый

5.

Wilcox RA, Ristow K, Habermann TM, Inwards DJ, Micallef INM, Johnston PB, Colgan JP, Nowakowski GS, Ansell SM, Witzig TE, Markovic SN, Porrata L. Абсолютное количество моноцитов связано с общим числом моноцитов. выживаемость пациентов с впервые диагностированной фолликулярной лимфомой.Лимфома лейка. 2012; 53: 575–80. https://doi.org/10.3109/10428194.2011.637211.

Артикул PubMed Google ученый

6.

Поррата Л.Ф., Ристоу К., Колган Дж. П., Хаберманн Т.М., Витциг Т.Э., Инвардс Д.Д., Анселл С.М., Микаллеф И.Н., Джонстон П.Б., Новаковски Г.С., Томпсон С., Маркович С.Н. Соотношение лимфоцитов / моноцитов периферической крови при диагностике и выживаемости при классической лимфоме Ходжкина. Haematologica. 2012; 97: 262–9. https://doi.org/10.3324/haematol.2011.050138.

Артикул PubMed PubMed Central Google ученый

7.

Э. Малек, Т. Досани, Р. Пинто, Ф. Ковут, Х. Акабане, Дж. Дж. Дрисколл, М. Де Лима, Иммунологический статус, оцениваемый по абсолютному соотношению лимфоцитов / моноцитов, обеспечивает мощный прогностический инструмент для вновь диагностированной множественной миеломы, (2016) 1862-1862. doi. https://doi.org/10.1182/blood.V128.22.1862.1862.

8.

Херишану Ю., Кей С., Сарид Н., Кохан П., Браунштейн Р., Ротман Р., Дойч В., Бен-Эзра Дж., Напарстек Е., Перри С., Кац Б.З.Абсолютное количество моноцитов трихотомически превращает хронический лимфоцитарный лейкоз в пациентов с высоким риском иммунной дисрегуляции, прогрессированием заболевания и плохой выживаемостью. Leuk Res. 2013; 37: 1222–8. https://doi.org/10.1016/j.leukres.2013.07.017.

Артикул PubMed Google ученый

9.

млн лет назад, Гао Ф, Гу К, Чен, Дания. Роль моноцитов и макрофагов в аутоиммунных заболеваниях: всесторонний обзор. Фронт Иммунол. 2019; 10. https: // doi.org / 10.3389 / fimmu.2019.01140.

10.

Кеннет Каушанский М.Л., Йозеф Прчал М.Л., Оливер Пресс LB, Калиджури М. Гематология 9-е издание; 2015.

Google ученый

11.

Döhner H, Estey EH, Amadori S, Appelbaum FR, Büchner T, Burnett AK, Dombret H, Fenaux P, Grimwade D, Larson RA, Lo-Coco F. Диагностика и лечение острого миелоидного лейкоза у взрослых : рекомендации международной группы экспертов от имени European LeukemiaNet.Кровь. 2010; 115: 453–74. https://doi.org/10.1182/blood-2012-03-362608.

Артикул PubMed CAS Google ученый

12.

Окен М.М., Крич Р.Х., Торми, округ Колумбия, Хортон Дж., Дэвис Т.Э., Макфадден Е.Т. и др. Критерии токсичности и ответа восточной кооперативной онкологической группы. Am J Clin Oncol. 1982; 5: 649–55.

Артикул CAS Google ученый

13.

Беннетт Дж. М., Катовски Д., Дэниел М. Т., Фландрин Дж., Гальтон Д.А.Г., Гралник Х.Р., Султан К.Предложения по классификации острой лейкемии во франко-американо-британской кооперативной группе (FAB). Br J Haematol. 1976. https://doi.org/10.1111/j.1365-2141.1976.tb03563.x.

14.

Арбер Д.А., Орази А., Хассерджян Р., Тиле Дж., Боровиц М.Дж., Ле Бо М.М. и др. Пересмотр 2016 г. классификации миелоидных новообразований и острого лейкоза Всемирной организации здравоохранения. Кровь. 2016; 127: 2391–405. https://doi.org/10.1182/blood-2016-03-643544.

Артикул PubMed CAS Google ученый

15.

Harnden DG, Klinger HP. Международная система цитогенетической номенклатуры человека (1985): Karger Basel и др .; 1985.

16.

Теффери А., Летендре Л. Выход за рамки схем 7 + 3 в лечении острого миелоидного лейкоза у взрослых. J Clin Oncol. 2012; 30: 2425–8. https://doi.org/10.1200/jco.2011.38.9601.

Артикул PubMed CAS Google ученый

17.

Cheson BD, Bennett JM, Kopecky KJ, Büchner T, Willman CL, Estey EH, et al.Пересмотренные рекомендации международной рабочей группы по диагностике, стандартизации критериев ответа, результатов лечения и стандартов отчетности для терапевтических испытаний при остром миелоидном лейкозе. J Clin Oncol. 2003; 21: 4642–9.

Артикул Google ученый

18.

Döhner H, Estey E, Grimwade D, Amadori S, Appelbaum FR, Büchner T, Dombret H, Ebert BL, Fenaux P, Larson RA, Levine RL, Lo-Coco F, Naoe T, Niederwieser D, Ossenkoppele GJ, Sanz M, Sierra J, Tallman MS, Tien HF, Wei AH, Löwenberg B, Bloomfield CD.Диагностика и лечение ОМЛ у взрослых: рекомендации ELN 2017 от международной группы экспертов. Кровь. 2017; 129: 424–47. https://doi.org/10.1182/blood-2016-08-733196.

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google ученый

19.

Tallman MS, Wang ES, Altman JK, Appelbaum FR, Bhatt VR, Bixby D, Coutre SE, De Lima M, Fathi AT, Fiorella M, Foran JM, Hall AC, Jacoby M, Lancet J, LeBlanc Т.В., Маннис Дж., Маркучи Дж., Мартин М.Г., Мимс А., О’Доннелл М.Р., Олин Р., Пекер Д., Перл А, Поллиа Д.А., Пратц К., Пребет Т., Раванди Ф., Шами П.Дж., Стоун Р.М., Стрикленд С.А., Видувилт М., Грегори К.М., Хаммонд Л., Огба Н.Острый миелолейкоз, версия 3.2019. JNCCN J Natl Compr Cancer Netw. 2019; 17: 721–49. https://doi.org/10.6004/jnccn.2019.0028.

Артикул Google ученый

20.

Баггинс А.Г., Милойкович Д., Арно М.Дж., Леа Н.С., Муфтий Г.Дж., Томас Н.С.Б., Херст В.Дж. Микроокружение, продуцируемое клетками острого миелоидного лейкоза, предотвращает активацию и пролиферацию Т-клеток за счет ингибирования путей NF-κB, c-Myc и pRb. J Immunol. 2001; 167: 6021–30. https: // doi.org / 10.4049 / jimmunol.167.10.6021.

Артикул PubMed CAS Google ученый

21.

Shibutani M, Maeda K, Nagahara H, Fukuoka T, Nakao S, Matsutani S., Hirakawa K, Ohira M. Подсчет периферических моноцитов связан с плотностью опухолевых макрофагов в микроокружении опухоли колоректального отдела. рак: ретроспективное исследование. BMC Рак. 2017; 17: 404. https://doi.org/10.1186/s12885-017-3395-1.

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google ученый

22.

Исмаил М.М., Абдуллатеф НАБ. Абсолютное количество моноцитов превосходит абсолютное количество лимфоцитов на 28-й день как независимый прогностический фактор при остром миелоидном лейкозе. Индийский J Переливание гематоловой крови. 2019; 35: 100–8. https://doi.org/10.1007/s12288-018-0976-3.

Артикул PubMed Google ученый

23.

Bar M, Othus M, Park HM, Sandhu V, Chen X, Wood BL, Estey E. Повышенное количество лимфоцитов во время диагностики острого миелоидного лейкоза связано с более короткой ремиссией.Лимфома лейка. 2015; 56: 3109–15. https://doi.org/10.3109/10428194.2015.1020060.

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google ученый

24.

Sun YX, Kong HL, Liu CF, Yu S, Tian T, Ma DX, Ji CY. Несбалансированный профиль и клиническое значение Т-хелперных цитокинов в микросреде костного мозга пациентов с острым миелоидным лейкозом. Hum Immunol. 2014; 75: 113–8. https://doi.org/10.1016/j.humimm.2013.11.014.

Артикул PubMed CAS Google ученый

25.

Гривенников С.И., Гретен Ф.Р., Карин М. Иммунитет, воспаление и рак. Клетка. 2010; 140: 883–99. https://doi.org/10.1016/j.cell.2010.01.025.

Артикул PubMed PubMed Central CAS Google ученый

26.

Лю Y, Cao X. Происхождение и функция опухолевых макрофагов.Cell Mol Immunol. 2015; 12: 1–4. https://doi.org/10.1038/cmi.2014.83.

Артикул PubMed CAS Google ученый

Границы | Тяжесть хронической болезни почек связана с селективным увеличением определенной промежуточной субпопуляции моноцитов

Введение

Термин «хроническая болезнь почек» (ХБП) описывает неблагоприятное влияние гетерогенных заболеваний на структуру и функцию почек (1) и имеет возрастающую во всем мире распространенность от 11 до 13% (2).Расчетная глобальная смертность, связанная с ХБП, увеличилась на 32% с 2005 по 2015 год (3). Снижение скорости клубочкового фильтрата (СКФ), которое является признаком ХБП, связано со значительным повышением риска смертности из-за атеросклеротического сердечно-сосудистого заболевания (ССЗСЗ) (4–7). Для оказания эффективной медицинской помощи больным ХБП существует значительная неудовлетворенная потребность в стратегиях более точного прогнозирования риска снижения функции почек, принятия терапевтических решений и категоризации субъектов клинических исследований (8).

Хроническая болезнь почек приводит к нарушениям множества физиологических процессов, включая удаление продуктов метаболизма, электролитного баланса, гомеостаза артериального давления и эндокринных путей, которые могут способствовать развитию ASCVD (1, 9–12). Традиционные факторы риска ASCVD, преобладающие при CKD, управляются хорошо зарекомендовавшими себя методами, включая лекарства для контроля артериального давления, параметров липидов и гликемии. Другие нетрадиционные факторы риска ASCVD при ХБП, такие как хроническое воспаление, еще не имеют окончательного лечения.Высокое количество циркулирующих лейкоцитов, в первую очередь моноцитов, и стойкое воспаление слабой степени могут быть вызваны накоплением уремических токсинов, нарушением экскреции цитокинов и другими факторами (13, 14). Циркулирующие моноциты могут дифференцироваться в макрофаги с липидами и способствовать атеросклеротическим поражениям, образованию бляшек и фиброзу (15). Ответы кровеносных сосудов и окружающих тканей на циркулирующие моноциты и их медиаторы участвуют в эндотелиальной дисфункции, кальцификации и атерогенезе, связанных с заболеванием почек (16, 17).В соответствии с этим, повышенное количество моноцитов в крови коррелирует с функцией почек, ASCVD и риском прогрессирования до терминальной стадии почечной недостаточности (ESRD) (18, 19).

Моноциты являются основным клеточным компонентом врожденной иммунной системы и недавно были вовлечены в осложнения и прогрессирование ХБП (15, 19). Это по своей сути правдоподобно, учитывая их характерную способность быстро мигрировать из кровотока в места воспаления и их мощную реакцию на воспалительные стимулы (20).Последние достижения выявили существенную фенотипическую и функциональную гетерогенность циркулирующих моноцитов человека, что может иметь отношение к патогенезу ХБП (20–23). Моноциты экспрессируют специфические цитокины и молекулы адгезии, которые играют центральную роль в патогенезе воспаления, связанного с ХЗП. Цитокины способствуют активации и трансэндотелиальной миграции иммунных эффекторных клеток, что приводит к хронической профиброзной воспалительной инфильтрации почек и других тканей (24–26). В настоящее время распознаются три субпопуляции моноцитов на основе поверхностной экспрессии CD14 и CD16: классический (CD14 ⁺⁺ CD16 ^— ), промежуточный (CD14 ⁺⁺ CD16 ⁺ ) и неклассический (CD14 ^{). +} CD16 ⁺⁺ ).Документально подтверждено, что эти подмножества обладают рядом различных фенотипических и функциональных особенностей (27). Об изменениях репертуара циркулирующих моноцитов при ХБП сообщали несколько групп, при этом более высокое количество моноцитов CD16 ⁺ было специфически связано с худшими сердечно-сосудистыми исходами (28–33). Патофизиологическая связь между промежуточными моноцитами и ускоренным атеросклерозом подтверждается активностью этой субпопуляции моноцитов к поглощению модифицированных липопротеинов и оттоку холестерина (32, 34).

В то время как исследования, связанные со способностью моноцитов прогнозировать снижение функции почек, ограничены, промежуточные количества моноцитов обратно коррелировали с расчетной СКФ (рСКФ) (19, 31, 35). Кроме того, современное понимание происхождения и функции in vivo промежуточных моноцитов и их связи с классическими и неклассическими моноцитами является неполным. Анализ микроматрицы выявил 1554 гена, общих для всех субпопуляций моноцитов, но только 135 из них были высоко экспрессированы промежуточными моноцитами, многие из которых участвуют в активации, ангиогенезе, окислительном стрессе, процессинге антигена и презентации антигена (36, 37).Недавние экспериментальные данные, полученные от здоровых людей, показывают, что между тремя подгруппами существует линейная взаимосвязь в развитии, но детали того, как этот процесс может изменяться в условиях болезни, неизвестны (23). Недавно наша группа продемонстрировала дальнейшее подразделение промежуточных моноцитов на основе поверхностной экспрессии человеческого лейкоцитарного антигена класса II, HLA-DR. У здоровых взрослых и взрослых с ожирением мы наблюдали наличие субпопуляций в промежуточных воротах, которые демонстрировали, соответственно, средний и высокий уровень экспрессии HLA-DR, называемые моноцитами DR ^mid и DR ^hi , соответственно ( 22).Функциональные и фенотипические различия между двумя промежуточными субпопуляциями моноцитов включали дифференциальную экспрессию хемокинов и рецепторов адгезии (DR ^mid больше напоминал классические моноциты, а DR ^hi больше напоминал неклассические моноциты) и дифференциальные скорости поглощения окисленных и ацетилированных липопротеины низкой плотности (ЛПНП) (при этом DR ^mid имеет более высокое поглощение, чем DR ^hi ). У людей с ожирением по сравнению со взрослыми, не страдающими ожирением, мы наблюдали повышенное количество промежуточных моноцитов в крови, что было полностью связано с относительным увеличением субпопуляции DR ^mid (а не DR ^hi ) (22).

В этом исследовании мы стремились оценить основные популяции циркулирующих лейкоцитов, традиционно определенные субпопуляции моноцитов крови и недавно описанные промежуточные субпопуляции моноцитов в образцах крови взрослых с ХБП различной степени тяжести, не требующей заместительной почечной терапии (ЗПТ). . Мы также стремились определить, имеет ли циркулирующее количество исследуемых субпопуляций лейкоцитов потенциальную прогностическую ценность для последующей скорости снижения рСКФ при ХЗП.

Материалы и методы

Этические соображения

Исследование было проведено в соответствии с этическими принципами Хельсинкской декларации и Рекомендаций по надлежащей клинической практике Международной конференции по гармонизации (ICH GCP) с письменного информированного согласия всех субъектов.Все субъекты дали письменное информированное согласие в соответствии с Хельсинкской декларацией. Протокол был одобрен Комитетом по этике клинических исследований больниц Университета Голуэя (GUH) и Комитетом по этике исследований Национального университета Ирландии в Голуэе (NUI Galway).

Дизайн исследования

взрослых с ХБП 1-5 стадий были включены в исследование с информированного согласия нефрологических амбулаторных клиник при ГУХ в период с января 2014 г. по май 2016 г. Стадии ХБП определялись с использованием модифицированного (4-параметрического) уравнения модификации диеты при почечной недостаточности (MDRD): обычно сообщается лабораторией клинической биохимии GUH в течение периода времени, охватываемого исследованием (38).Критериями включения в когорту ХБП 1-5 были: (а) возраст ≥ 18 лет, (б) диагностика ХБП на основании рСКФ, анализа мочи и клинических проявлений, (в) отсутствие лечения в настоящее время от инфекции, рака, острого сердечно-сосудистого события или гематологическое состояние, отличное от анемии, (d) готовность и способность дать информированное согласие, (e) уровень гемоглобина ≥ 10 г / дл, (f) в настоящее время не получают хронический гемодиализ или перитонеальный диализ, (g) не получатель трансплантата почки , (h) Не известно, что он является положительным на вирус иммунодефицита человека, вирус гепатита B или вирус гепатита C, (i) в настоящее время не получает иммуносупрессивную терапию.

здоровых добровольца (впоследствии называемых без ХБП) были зарегистрированы в NUI Galway и GUH. Критерии включения в когорту без ХБП были следующими: (а) возраст ≥ 18 лет, (б) отсутствие активных заболеваний, (в) отказ от приема каких-либо лекарств (без рецепта или по рецепту) в течение 48 часов исследования (за исключением противозачаточных средств). , (d) Желание и возможность предоставить информированное согласие, (e) Отсутствие в настоящее время или в прошлом истории болезни почек.

Клинические, лабораторные и радиологические данные были записаны в защищенную паролем клиническую базу данных на базе Интернета (Distiller ^® , SlidePath, Дублин, Ирландия), разработанную в сотрудничестве с Центром клинических исследований Совета медицинских исследований (HRB), Голуэй. .Бумажные и электронные медицинские карты включенных в исследование субъектов были просмотрены квалифицированными с медицинской точки зрения членами исследовательской группы, а соответствующие области были включены в базу данных. Продольные изменения функции почек оценивались с использованием значений рСКФ с даты включения в исследование до самых последних значений функции почек, доступных 30 сентября 2017 г. Серийные лабораторные результаты были извлечены из системы клинических данных eMED Renal (Mediqal H.I., Aston, UK).

Сбор, обработка образцов крови и подсчет общего количества клеток

Свежеотобранные образцы периферической венозной крови собирали в пробирки Vacutainer ^® объемом 10 мл с этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА) (BD Medical Supplies, Кроули, Великобритания).Сбор образцов крови производился один раз для каждого участника при получении согласия. Образцы транспортировали при 4 ° C и обрабатывали в течение 2 часов после сбора. Для подсчета основных подтипов лейкоцитов периферической крови (PBL) 100 мкл антикоагулированной крови, собранной в вакутайнерах с ЭДТА, инкубировали с мышиным анти-человеческим CD45-APC (BD Biosciences, Сан-Хосе, Калифорния) и мышиным анти-человеческим CD14. -PerCP-Cy5.5 (Miltenyi Biotec, Кельн, Германия). Лизис эритроцитов (RBC) выполняли с использованием буфера для лизиса RBC (BD Biosciences) в соответствии с инструкциями производителя.Оставшиеся клетки промывали и ресуспендировали в 200 мкл фосфатно-солевого буфера Дульбекко без Ca ^{2 + /} Mg ^{2+ (PBS) (Gibco-Life Technologies, Карлсбад, Калифорния). Общее количество клеток регистрировали путем регистрации событий на единицу объема по времени с использованием проточного цитометра Accuri TM C6 (BD Biosciences, Сан-Хосе, Калифорния, США). Настройки компенсации и гейта были получены с использованием контрольных образцов с одним окрашиванием. Файлы данных анализировали с использованием программного обеспечения BD Accuri TM C6 CFlow Sampler (BD Biosciences).Абсолютные числа циркулирующих нейтрофилов, моноцитов и лимфоцитов были рассчитаны и выражены как количество клеток на мл цельной крови из доли общего количества клеток, зарегистрированной в пределах заранее определенных ворот, на основе профилей прямого и бокового рассеяния и профилей окрашивания поверхности.}

Выделение мононуклеарных клеток периферической крови и анализ многоцветной проточной цитометрии

Выделение мононуклеарных клеток периферической крови (PBMC) выполняли путем наслоения аликвот 3 мл антикоагулированной EDTA крови на 3 мл среды Ficoll-Plaque Plus ^® , не содержащей эндотоксинов (GE Healthcare, Little Chalfont, U.K.) в пробирках Falcon на 15 мл (Sarstedt, Nümberbrecht, Германия). Образцы центрифугировали при относительной центробежной силе 420 (RCF) в течение 22 мин при 4 ° C с перерывом. Видимый непрозрачный слой «лейкоцитов» из PBMC на границе раздела плазмы и слоев RBC осторожно удаляли с помощью пластиковой пипетки Пастера на 3 мл (Starstedt). PBMC переносили в новую пробирку Falcon на 15 мл (Sarstedt) и добавляли до 10 мл буфером для сортировки флуоресцентных активирующих клеток (FACS) [2% фетальной сыворотки теленка (Lonza, Базель, Швейцария), PBS и 0.05% NaN ₃ (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США)]. PBMC осаждали центрифугированием при RCF 300 в течение 10 мин при 4 ° C. Затем супернатант удаляли, осадок РВМС ресуспендировали в 5 мл буфера для FACS и этап промывки повторяли с использованием того же протокола, который описан выше. После этого осадок PBMC ресуспендировали в 1 мл буфера для FACS и подсчитывали с помощью гемоцитометра. Этот протокол выделения PBMC с целью анализа субпопуляции моноцитов был ранее оптимизирован (22) и показал, что он обеспечивает согласованные результаты, когда все этапы выполняются при 4 ° C (EP Connaughton, MC Dennedy и MD Griffin, неопубликованные результаты).Аликвоты, содержащие 5 × 10 ⁵ клеток, переносили в каждую 3 мл полистирольную пробирку FACS (Sarstedt) и доводили до конечного объема 100 мкл буфером для FACS на пробирку.

Аликвоты PBMC инкубировали с оптимизированными объемами моноклональных антител, конъюгированных с флуорохромом [мышиные анти-человеческие CD45-V500, мышиные анти-человеческие CD16-FITC, мышиные анти-человеческие HLA-DR-APC, мышиные анти-человеческие CD56-V450 ( BD Biosciences), мышиные антитела против человеческого CD14-PerCP-Cy5.5, мышиные антитела против человеческого CD33 APC-Vio770 (Miltenyi Biotec) и мышиные антитела против человеческого CX2CR1-Pe-Cy7 (Biolegend, Сан-Диего, Калифорния, США)] для 20 мин при 4 ° C, чтобы позволить идентифицировать три обычных субпопуляции моноцитов человека и недавно идентифицированные промежуточные субпопуляции моноцитов (22).Каждую аликвоту PBMC промывали 1 мл буфера FACS, центрифугировали при RCF 300 в течение 5 минут при 4 ° C и, наконец, ресуспендировали в 200 мкл буфера FAC. Проточный цитометрический анализ выполнялся с использованием проточного цитометра BD FACS Canto ™ II (BD Biosciences), который был откалиброван в соответствии с рекомендациями производителя. Компенсацию флуоресценции устанавливали с использованием однократно окрашенных контролей и применяли соответствующие алгоритмы медианной компенсации. Образцы были обработаны в течение 2 часов после сбора, и мертвые клетки были исключены с использованием FSC-A vs.Стробирование SSC-A методом проточной цитометрии. Оптимизационные исследования продемонстрировали неизменно высокую жизнеспособность закрытых популяций с использованием этого подхода (SD Naicker, EP Connaughton, MC Dennedy и MD Griffin, неопубликованные результаты). Контроли флуоресценции минус один (FMO) использовали для установки контрольных ворот анализа, и данные анализировали с использованием программного обеспечения для сбора данных Diva v8.0.1 (BD Biosciences) или программного обеспечения FlowJo ^® 7.6.5 (TreeStar Inc., Olten, Switzerland).

Расчет годовой скорости снижения почечной функции

Для определения годовой скорости снижения функции почек для каждого участника исследования был рассчитан наклон наилучшего соответствия путем линейной регрессии продольных измерений рСКФ, зарегистрированных в медицинских записях между датой включения в исследование и сентябрем 2017 г.Для субъектов, которые умерли или начали ЗПТ в течение периода наблюдения за исследованием, линейный регрессионный анализ был остановлен при последнем измерении перед началом ЗПТ или смерти. Участники с менее чем тремя значениями рСКФ в течение периода наблюдения, те, кто начал ЗПТ в течение 1 месяца после включения в исследование, и те, чьи серийные значения рСКФ четко сгруппированы вокруг эпизодов острого повреждения почек (ОПП), были исключены из анализа скорости снижения функции почек.

Статистический анализ

Статистический анализ выполнялся с использованием GraphPad ^® Prism Version 6 (GraphPad Software, Калифорния, США), Статистического пакета для социальных наук (SPSS) версии 23 (IBM, Армонк, Нью-Йорк, International Business Machines Corporation (IBM).S.A) и Minitab Version 18 ^® (Minitab Inc., State College, Penn., США). Непрерывные данные были представлены с использованием средних значений (стандартное отклонение) при нормальном распределении и медианы (межквартильный диапазон [IQR]) при ненормальном распределении. Сравнение непараметрических данных между участниками без ХБП и ХБП 1–5 было выполнено с использованием критерия Манна-Уитни U . Категориальные данные суммированы как частоты (проценты). Для сравнения различий в пропорциях между группами использовался точный критерий Фишера.Связь между скоростью снижения рСКФ и различными субпопуляциями моноцитов была исследована с использованием корреляции Спирмена. Модели множественной линейной регрессии с использованием стандартизованных коэффициентов (95% доверительный интервал) использовались для изучения взаимосвязей между переменной ответа (почечная функция [рСКФ]) и объясняющими переменными (клинические демографические данные и различные популяции лейкоцитов). Стандартизованный коэффициент — это изменение рСКФ на стандартное отклонение (для параметрических данных) и увеличение IQR (для непараметрических данных) независимой переменной.В первую модель (Модель а) для каждого анализа были включены все интересующие переменные. В последующей модели (Модель b) не значимые переменные были исключены. Возраст был значительно связан с рСКФ во всех анализах модели А. Таким образом, он был включен в качестве объясняющей переменной во все анализы Модели b, что позволило учесть его влияние на ассоциации между подсчетом иммунных клеток и рСКФ. Для всех выполненных анализов статистическая значимость была приписана значениям P <0.05.

Результаты

Всего в исследование было включено 187 субъектов: 33 здоровых добровольца без ХБП и 154 амбулаторных пациента с ХБП 1–5. По сравнению с отсутствием ХБП пациенты с ХБП 1–5 были старше и имели предсказуемые различия в сывороточных концентрациях креатинина и мочевины (Таблица 1). Средняя рСКФ в группе с ХБП 1–5 составила 39 ± 22 мл / мин / 1,73 м ² . Документированные причины ХБП и сопутствующие заболевания в когорте ХБП 1–5 обобщены в таблице 2. Был задокументирован ряд этиологий ХБП, из которых наиболее частыми были неизвестные причины, сахарный диабет и гломерулонефрит.Частые сопутствующие заболевания включали гипертонию, сахарный диабет, заболевания костей и суставов и ASCVD.

Таблица 1 . Соответствующие основные демографические и почечные функциональные показатели исследуемой когорты.

Таблица 2 . Документированная этиология ХБП и профили сопутствующих заболеваний в когорте исследования ХБП 1–5.

Количество моноцитов и нейтрофилов в крови увеличивается при ХБП 1–5 и независимо связано с рСКФ

Анализ методом проточной цитометрии

первоначально использовался для количественной оценки общего количества моноцитов, лимфоцитов и нейтрофилов в недавно взятых образцах цельной крови из общей когорты исследуемых из 187 субъектов, и результаты без ХБП сравнивались с результатами для ХБП 1–5 (рисунки 1A – D).Как показано, общее количество моноцитов и нейтрофилов в крови было выше при ХБП 1–5, в то время как количество лимфоцитов в крови было одинаковым для двух групп. Чтобы продемонстрировать взаимосвязь между числом PBL и функцией почек (рСКФ) в пределах всей исследуемой когорты, были применены отдельные множественные линейные регрессии для переменных возраста, пола и общего числа моноцитов, лимфоцитов и нейтрофилов в крови (Таблица 3, Модель 1a. ). Это указывает на значительную связь между текущей рСКФ и возрастом, общим количеством моноцитов и нейтрофилов, но не полом и общим количеством лимфоцитов.Поскольку возраст, как и ожидалось, был связан с рСКФ ( P <0,001), затем была выполнена множественная регрессия с поправкой на возраст (таблица 3, модель 1b). Это подтвердило независимые от возраста ассоциации количества моноцитов в крови ( P = 0,03) и числа нейтрофилов в крови ( P = 0,016) с рСКФ.

Рисунок 1 . Количество циркулирующих PBL у здоровых взрослых и взрослых с разными стадиями ХБП. Абсолютные количества трех основных подтипов PBL были количественно определены с помощью проточной цитометрии в образцах крови 187 взрослых без ХБП ( n, = 33) и CKD 1-5 ( n = 154). (A) Специфические субпопуляции CD45 ⁺ PBL были идентифицированы на основании характеристик бокового рассеяния и поверхностной экспрессии CD14. Репрезентативная стратегия стробирования, использованная для идентификации и количественного определения количества (B) моноцитов, (C) лимфоцитов и (D) нейтрофилов на 1 мл цельной крови. Графики иллюстрируют медианное значение, IQR, а также верхний и нижний предел для каждого подтипа лейкоцитов для групп без ХБП и для групп с ХБП (прямоугольные диаграммы и диаграммы с усами) с наложенными точками данных для отдельных субъектов (треугольники).Статистические сравнения выполнены с использованием U-критерия Манна-Уитни. нс p > 0,05, *** p <0,001, **** p <0,0001.

Таблица 3 . Модели множественной линейной регрессии для определения взаимосвязи между демографическими показателями, популяциями циркулирующих лейкоцитов и функцией почек у субъектов исследования без ХБП + ХБП 1-5.

Число промежуточных моноцитов в крови наиболее тесно связано с функцией почек

Взаимосвязь между функцией почек и циркулирующим числом трех подгрупп моноцитов, которые в настоящее время признаны общепринятыми, были затем определены в когорте исследования.Свежевыделенные PBMC от 169 субъектов (27 без ХБП и 142 с ХБП 1–5) были проанализированы проточной цитометрией с использованием стратегии 6-цветного анализа для определения абсолютного числа классических, промежуточных и неклассических моноцитов (рис. 2A) (22). ). На основе этих анализов были рассчитаны абсолютные количества каждой субпопуляции моноцитов на единицу объема крови. Как показано на рисунках 2B – D, количество циркулирующих классических и промежуточных моноцитов было выше при ХБП 1–5 по сравнению с отсутствием ХЗП, в то время как количество неклассических моноцитов не различалось.Модели множественной линейной регрессии для всех субъектов, включенных в анализ PBMC, показали значительную связь с рСКФ для возраста, классического числа моноцитов и промежуточного числа моноцитов, но не для пола и неклассического числа моноцитов (таблица 4, модель 2a). Эта связь с функцией почек была сильнее для промежуточных, чем для классических моноцитов ( P = 0,009 против P = 0,049). Связь между промежуточными, но не классическими моноцитами и рСКФ оставалась значимой в модели с поправкой на возраст ( P = 0.030) (таблица 4, модель 2b).

Рисунок 2 . Многоцветная проточная цитометрия для идентификации и количественного определения общего количества циркулирующих подгрупп моноцитов. Субпопуляции моноцитов были идентифицированы с использованием стратегии 6-цветного окрашивания в свежевыделенных PMBC от 169 взрослых без ХБП ( n, = 27) или CKD 1–5 ( n = 142). (A) Репрезентативные точечные диаграммы показаны для иллюстрации стратегии стробирования для идентификации и количественного определения общего количества моноцитов (верхние панели) и трех признанных в настоящее время субпопуляций моноцитов. (B – D) Показаны графики абсолютного количества классических, промежуточных и неклассических моноцитов, выраженных соответственно в количестве клеток на мл цельной крови для двух групп. Графики иллюстрируют медианное значение, IQR, а также верхний и нижний предел для каждого подтипа лейкоцитов для групп без ХБП и для групп с ХБП (прямоугольные диаграммы и диаграммы с усами) с наложенными точками данных для отдельных субъектов (треугольники). Статистические сравнения выполнены с использованием U-критерия Манна-Уитни. нс p > 0,05, ** p <0.01.

Таблица 4 . Модели множественной линейной регрессии для определения взаимосвязи между демографическими показателями, признанными в настоящее время субпопуляциями моноцитов и функцией почек у субъектов исследования без ХБП + ХБП 1-5.

A Distinct, HLA-DR

^hi В периферической крови пациентов с ХБП 1–5 стадий численно увеличивается промежуточная субпопуляция моноцитов

Недавно мы сообщили о наличии двух различных субпопуляций промежуточных моноцитов в крови здоровых взрослых и взрослых с ожирением без диабета на основе среднего и высокого уровней поверхностной экспрессии HLA-DR (22).Две субпопуляции, которые мы назвали DR ^mid и DR ^hi промежуточными моноцитами, были, соответственно, более фенотипически сходны с классическими и неклассическими моноцитами. Чтобы определить, связана ли ХБП с селективным изменением в репертуаре промежуточных моноцитов, к образцам РВМС от тех же 169 субъектов исследования применили стратегию анализа проточной цитометрии, что и для обычного анализа моноцитов (рис. 3А). Репрезентативные примеры стратегии стробирования показаны на фиг. 3В, чтобы показать различия в промежуточных популяциях моноцитов между популяциями без ХБП и популяциями с ХБП.Как показано на рисунках 3C, D , абсолютное количество промежуточных моноцитов DR ^hi было выше у субъектов с ХБП 1–5 по сравнению с отсутствующими ХБП ( P = 0,003), в то время как количество DR ^{промежуточных} моноцитов не было ( P = 0,09).

Рисунок 3 . Многоцветная проточная цитометрия для идентификации и количественной оценки отдельных субпопуляций промежуточных моноцитов DR ^mid и DR ^hi . (A) Типичный пример стратегии стробирования, используемой для идентификации и количественной оценки двух различных промежуточных субпопуляций моноцитов на основе поверхностной экспрессии HLA-DR. (B) Репрезентативные примеры точечных графиков проточной цитометрии от субъектов без (без ХБП) и с (ХБП) хронической болезни почек, показывающие распределение четырех субпопуляций моноцитов, (C, D) Графики представлены абсолютными числами DR ^mid (C) и DR ^hi (D) промежуточных моноцитов, выраженных в виде клеток на мл цельной крови для субъектов исследования без ХБП ( n = 27) или ХБП 1–5 ( n = 142). На графиках показаны медиана, IQR, а также верхний и нижний предел для каждого подтипа лейкоцитов для групп без ХБП и ХБП (прямоугольные диаграммы и диаграммы с усами) с наложенными точками данных для отдельных субъектов (треугольники). Статистические сравнения, выполненные с использованием U-критерия Манна-Уитни.нс p > 0,05, ** p <0,01.

Результаты этого альтернативного анализа субпопуляций моноцитов среди когорты без ХБП и ХБП 1-5 были проанализированы с помощью множественной линейной регрессии для изучения взаимосвязи с функцией почек. Эти анализы показали, что возраст, промежуточное количество моноцитов DR ^hi и неклассическое количество моноцитов, но не пол, классическое количество моноцитов и промежуточное количество моноцитов DR ^mid , были достоверно связаны с рСКФ (таблица 5, модель 3a).Эта связь с функцией почек была сильнее для промежуточных моноцитов DR ^hi ( P = 0,005) и оставалась значительной ( P <0,001) в модели с поправкой на возраст (таблица 5, модель 3b). Когда модели регрессии были повторены с использованием только данных для субъектов с ХБП 1–5, только DR ^hi промежуточное число моноцитов продемонстрировало начальную и скорректированную по возрасту связь с рСКФ ( P = 0,025, P = 0,03 соответственно) (Таблица 6, модели 4а и 4б).Таким образом, из изученных субпопуляций и субпопуляций моноцитов промежуточная субпопуляция DR ^hi обнаружила наиболее значительную взаимосвязь с одновременно оцениваемой функцией почек в анализах, объединяющих здоровых добровольцев и взрослых с известной ХБП, а также в отдельных анализах, ограниченных субъектами с ХБП. Только.

Таблица 5 . Множественные модели линейной регрессии для определения взаимосвязей между демографическими показателями, альтернативно анализируемыми субпопуляциями моноцитов и функцией почек у субъектов исследования без ХБП + ХБП 1-5.

Таблица 6 . Множественные модели линейной регрессии для определения взаимосвязи между демографическими показателями, альтернативно анализируемыми субпопуляциями моноцитов и функцией почек у субъектов исследования с ХБП 1–5.

Кровь DR

^hi Промежуточное количество моноцитов связано с последующим снижением функции почек

После включения в исследование и забора крови была рассчитана годовая скорость снижения функции почек в течение среднего периода наблюдения 25 человек.4 ± 9,2 месяца для 135 из 154 исследуемых субъектов с ХБП 1–5. Остальные 19 были исключены из последующего анализа из-за недостаточного количества значений рСКФ ( n = 13), кластеризации измерений почечной функции вокруг эпизодов ОПН ( n = 3) и начала гемодиализа в течение 1 месяца после включения в исследование. ( n = 3). Из 135, для которых можно было рассчитать последующую скорость снижения рСКФ, у всех была проведена исходная количественная оценка проточной цитометрии цельной крови основного подтипа PBL, а у 124 была проведена количественная оценка проточной цитометрии PBMC традиционного и альтернативного анализа подгрупп моноцитов.Чтобы изучить взаимосвязь между снижением рСКФ и различными популяциями клеток крови, было применено моделирование множественной линейной регрессии с поправкой на возраст (таблица 7). В случае трех основных типов PBL ни один из них не был существенно связан со скоростью снижения рСКФ (таблица 7, модель 5). Модель, включающая три традиционно определенных подгруппы моноцитов, также не показала значимых взаимосвязей между исходным количеством клеток и последующей скоростью снижения рСКФ (таблица 7, модель 6). Наконец, однако, скорректированная по возрасту модель, которая включала четыре субпопуляции моноцитов — классическую, DR ^{промежуточную} , промежуточную DR ^hi и неклассическую, выявила статистически значимую связь между исходным DR ^hi промежуточным числом моноцитов и последующим скорость снижения рСКФ (таблица 7, модель 6).Таким образом, по сравнению со всеми другими субпопуляциями более высокое число промежуточных моноцитов DR ^hi в крови наиболее тесно коррелировало с последующей скоростью снижения рСКФ.

Таблица 7 . Модели множественной линейной регрессии для определения взаимосвязи между возрастом, подтипами лейкоцитов и моноцитов в крови, а также скоростью снижения функции почек у испытуемых с ХБП 1–5.

Обсуждение

В 2013 году 2,2 миллиона смертей и 52 миллиона лет жизни с поправкой на инвалидность (DALY) были связаны с ХБП, что составляет 3.9% от общего числа смертей в мире и 2,1% от общего числа DALY в мире за этот год (39). Это подчеркивает важность нацеливания на снижение функции почек и критический характер ранней диагностики. В соответствии с опубликованными исследованиями, представленная здесь работа продемонстрировала, что абсолютное количество нейтрофилов и моноцитов в венозной крови выше у взрослых с клинически диагностированной ХБП, чем у здоровых взрослых без ХБП (15, 19, 30, 32, 40, 41 ). Кроме того, показатели периферической крови для этих двух типов миелоидных клеток коррелировали с функцией почек (что отражено в рСКФ на основе креатинина) независимо от возраста и пола.Однако при более подробном анализе репертуара моноцитов мы наблюдали, что субпопуляция промежуточных моноцитов с более высокой поверхностной экспрессией HLA-DR наиболее сильно коррелировала с рСКФ, и что только эта субпопуляция продемонстрировала значительную связь с предполагаемой количественно оцененной скоростью снижения рСКФ. С точки зрения клинической значимости, наша амбулаторная когорта охватывала широкий спектр основных причин ХБП, не включала лиц с острым заболеванием или гематологическими состояниями и находилась под активным контролем нефрологов-консультантов в специализированном центре.

Аномалии моноцитов крови связаны с ХБП и ее неблагоприятными последствиями

Микровоспаление, включая нарушение регуляции циркулирующих миелоидных клеток, вносит свой вклад в бремя сердечно-сосудистых заболеваний, связанных с ХБП (15, 19, 30, 32, 40, 41). Нарушения репертуара циркулирующих моноцитов могут, в частности, способствовать эскалации сердечно-сосудистого риска, который возникает по мере прогрессирования ХБП, вызывая эндотелиальную дисфункцию и атеросклероз (42). Действительно, в течение некоторого времени было известно, что количество моноцитов в крови имеет общую прогностическую ценность для ASCVD (43).Например, Prentice et al. (44) наблюдали, что повышенное количество нейтрофилов и моноцитов в крови было связано с заболеванием коронарной артерии. Кроме того, в отчете исследования риска атеросклероза в сообществах (ARIC) самый высокий квартиль по количеству моноцитов в крови привел к увеличению смертности от сердечно-сосудистых заболеваний на 40% по сравнению с самым низким квартилем (45). Кроме того, общее количество моноцитов, соотношение моноцитов к лимфоцитам и соотношение моноцитов к липопротеинам высокой плотности, по разным данным, имеют прогностическое значение для исходов ASCVD (43, 45–47).Наиболее поразительно то, что в крупном эпидемиологическом исследовании в США Bowe et al. недавно продемонстрировали линейную взаимосвязь между количеством моноцитов в крови и неблагоприятными последствиями для почек, включая удвоение сывороточного креатинина, снижение рСКФ на ≥30% или сочетание ТПН, диализа или трансплантации почки (19).

Было также показано, что нарушения функции моноцитов играют важную патофизиологическую роль при ХБП / ХПН. Нарушение регуляции секреции моноцитами провоспалительных (TNFα и IL-6) и противовоспалительных (IL-10) цитокинов уже давно зарегистрировано в уремических условиях, особенно при диализ-зависимой ESRD (48, 49).Также сообщалось, что нарушение распознавания патоген-ассоциированных молекулярных паттернов (PAMP) для активных врожденных иммунных ответов, снижение экспрессии костимулирующих молекул (CD80, CD86) и снижение способности представлять антиген также способствуют уремической иммунной дисфункции (48, 50) . Кроме того, гиперфосфатемия при ХБП / ТПН может приводить к дифференцировке моноцитов в остеокластоподобные клетки как механизм кальцификации сосудов (51). Наши наблюдения относительно общего числа моноцитов и субпопуляций моноцитов в широком диапазоне значений рСКФ предоставляют дополнительные доказательства того, что отклонения от нормы репертуара моноцитов крови представляют собой легко поддающиеся количественной оценке биомаркеры тяжести ХБП, хотя клиническое значение для отдельных пациентов пока неясно. .Такие ассоциации также представляют собой важный ключ к разгадке конкретных механизмов, которые связывают хроническое микровоспаление с прогрессированием ХБП и неблагоприятными сердечно-сосудистыми исходами.

Промежуточное количество моноцитов наиболее тесно связано с нарушением функции почек

Ряд исследований предоставили доказательства гетерогенности внутри промежуточной субпопуляции моноцитов (36, 37, 52–54). Мы сообщаем здесь, что абсолютное количество циркулирующих субпопуляций промежуточных моноцитов, которые, как мы ранее сообщали, более напоминают неклассические, чем классические моноциты (22), было специально увеличено у взрослых с медикаментозно управляемой ХБП, было обратно пропорционально рСКФ во всем диапазоне. недиализно-зависимой ХБП и было связано с последующей скоростью снижения рСКФ.Гетерогенность моноцитов в настоящее время широко признана, и появляется все больше доказательств того, что моноциты CD16 ⁺ специфически способствуют развитию атеросклероза как в общей популяции, так и у взрослых с ХБП / ХПН (15). В 1998 году Нокхер и др. сообщили об увеличении количества моноцитов CD16 ⁺ в образцах крови взрослых, находящихся на гемодиализе (55). Хотя соглашение о трех субпопуляциях еще не было полностью установлено в то время, это исследование действительно подчеркнуло тот факт, что в наших знаниях о динамике субпопуляций моноцитов при ХБП имелись интересные пробелы.После этого ряд исследований подтвердил и расширил наблюдение более высоких долей или абсолютных количеств субпопуляций моноцитов CD16 ⁺ в образцах крови взрослых с диализно-зависимой ТПН, а также пациентов с преддиализной ХБП (28–33, 56 ).

С признанием различия между промежуточными и неклассическими моноцитами в 2010 году несколько исследовательских групп сосредоточили свое внимание на выявлении конкретных субпопуляций моноцитов, которые увеличиваются при ХБП / ХПН, и на определении их связи с известными факторами риска и неблагоприятными исходами ССЗС.Несмотря на то, что среди этих исследований есть важные общие результаты, есть также нерешенные вопросы, особенно в отношении того, является ли нарушение регуляции промежуточных или неклассических моноцитов наиболее заметным в условиях не-ЗПТ-зависимой ХБП. Например, отчеты Merino et al. и Ли и др. документально подтвердить пропорциональное увеличение неклассических моноцитов (определяемых в этих исследованиях как CD14 ⁺ CD16 ⁺ ) в группах пациентов с ХБП перед диализом (28, 31). Кроме того, Ли и др.продемонстрировали, что моноциты CD14 ⁺ CD16 ⁺ достоверно коррелировали с рСКФ и индексом артериальной жесткости (31). Напротив, в нескольких поперечных и проспективных исследованиях Heine и его коллеги последовательно наблюдали, что пропорции и абсолютное количество промежуточных моноцитов (определяемых как CD14 ⁺⁺ CD16 ⁺ ) увеличиваются при ХБП перед диализом, в то время как не- классическое количество моноцитов увеличивается только у пациентов с ТПН, нуждающихся в диализе (29, 30, 32, 33, 56).Кроме того, эта группа убедительно продемонстрировала, что при ХБП количество циркулирующих промежуточных моноцитов связано с событиями ASCVD, общей выживаемостью и неблагоприятным липидным профилем (30). С механистической точки зрения они предоставили доказательства того, что промежуточные моноциты обладают высокой авидностью к модифицированным ЛПНП с низкой способностью к оттоку холестерина, что соответствует проатерогенному фенотипу (32).

Очевидные расхождения в выводах разных исследователей, относящиеся к промежуточным и неклассическим моноцитам, могут быть результатом технических деталей, поскольку сообщалось о нескольких стратегиях стробирования для различения трех подмножеств моноцитов — граница между промежуточным и неклассическим является особенно уязвимой. к изменчивости (33).Также возможно, что нарушение репертуара моноцитов «эволюционирует», чтобы последовательно вовлекать промежуточные и неклассические моноциты, поскольку ХБП ухудшается и прогрессирует до ТПН. Результаты, о которых мы сообщаем здесь, добавляют дополнительное объяснение, что «неклассические» промежуточные моноциты DR ^hi специфически увеличиваются в количестве на разных стадиях ХБП и могут представлять собой характерный иммунный / воспалительный ответ на снижение функции почек. Интересно, что Patel et al. недавно предоставили убедительные доказательства у здоровых людей, что промежуточные моноциты крови представляют собой стадию последовательного созревания небольшой доли классических моноцитов костного мозга до неклассических моноцитов (23).Учитывая ограниченный объем знаний о медиаторах и сигналах, которые управляют переходом циркулирующих моноцитов от классических фенотипов к промежуточным и неклассическим, становится ясно, что ХБП представляет собой важное заболевание, при котором необходимо изучить гетерогенность моноцитов.

Связь между HLA-DR

^hi Промежуточным числом моноцитов и прогрессированием ХБП

Как уже отмечалось, Bowe et al. На эпидемиологическом уровне наблюдается линейная зависимость количества моноцитов крови от клинически значимой потери почечной функции (19).В то время как многочисленные исследования продемонстрировали, что промежуточное и / или неклассическое количество моноцитов в крови связано с ASCVD или атерогенным потенциалом у пациентов с CKD / ESRD (28–32), связь между аномалиями репертуара моноцитов и прогрессированием CKD менее изучена. В подмножестве нашей хорошо охарактеризованной когорты с ХБП 1–5 с достаточной информацией о последующем наблюдении мы определили численное расширение промежуточных моноцитов DR ^hi как наиболее тесно коррелированное со скоростью снижения рСКФ независимо от возраста и пола.Хотя открытие потребует дальнейшей проверки, оно повышает вероятность того, что эта субпопуляция моноцитов или факторы, которые приводят к увеличению ее числа при ХБП, играют особую роль в прогрессировании хронического повреждения почек независимо от основной причины заболевания почек. Патофизиологическая роль промежуточных моноцитов остается плохо изученной, хотя мы и другие исследователи наблюдали распространение этой подгруппы при различных провоспалительных состояниях, помимо ХБП, включая ревматоидный артрит, воспалительное заболевание кишечника и ожирение (22, 57, 58).Развитию знаний в этой области препятствовал ряд факторов. К ним относятся отсутствие промежуточной субпопуляции моноцитов у экспериментальных видов грызунов, сложные и (до недавнего времени) спорные пути дифференцировки / созревания трех признанных субпопуляций, дифференциальные паттерны трансэндотелиальной миграции и обратной миграции субпопуляций моноцитов и накопление доказательств. дальнейшей гетерогенности внутри промежуточной подгруппы (36, 37, 52–54). Тем не менее, вполне вероятно, что промежуточные моноциты DR ^hi опосредуют вредное воздействие на структуру почек через дезадаптивные взаимодействия с эндотелием внутрипочечной сосудистой сети, напрямую управляя профибротическим тубулоинтерстициальным воспалением или управляя привлечением / трансмиграцией дополнительных иммунных эффекторов из кровь в почки (59).

Клиническая значимость и заключение

Наше исследование дополняет доказательства клинической ценности профилирования промежуточных моноцитов крови у взрослых с ХБП. В частности, будет интересно определить, можно ли использовать подсчет промежуточных моноцитов DR ^hi в крови в условиях специализированной клиники ХБП для стратификации риска, мониторинга реакции на терапию или идентификации целевых популяций для клинических испытаний новых агентов. Чтобы лучше рассмотреть потенциальные клинические применения, сначала необходимо будет подтвердить ассоциации в более крупных и разнообразных когортах пациентов и выполнить продольный анализ с участием пациентов, прогрессирующих через стадии ХБП.Также будет важно определить, модифицируются ли связи между циркулирующими моноцитами и функцией почек конкретными клиническими переменными. В связи с этим поисковый статистический анализ данных этого исследования не выявил значимых взаимодействий между диабетом, сердечно-сосудистыми заболеваниями, протеинурией, терапией ингибиторами ренин-ангиотензиновой системы или терапией статинами, а также корреляции между количеством моноцитов и рСКФ (данные не показаны). Однако для окончательного ответа на эти вопросы потребуются адекватные целевые исследования.

Чтобы разработать таргетную терапию, необходимо лучше понять патофизиологические механизмы, с помощью которых промежуточные субпопуляции моноцитов способствуют потере функции почек. Инфильтрация почечной ткани и трансформация в макрофаги является потенциальным механизмом, поскольку макрофаги участвуют в прогрессировании почечного фиброза в ряде моделей (60–62). Также было показано, что количество почечных макрофагов коррелирует со степенью почечного фиброза при биопсии почек человека (63).Дальнейшая работа по определению количества и фенотипа моноцитов и макрофагов в образцах тканей от людей с ХБП будет иметь большое значение. С точки зрения патофизиологической значимости, мы предполагаем, что очистка, функциональный анализ и молекулярное профилирование промежуточных субпопуляций моноцитов, которые мы описываем здесь, могут дать новое понимание микровоспаления, связанного с ХЗП и его основными осложнениями. Что касается аномалий нейтрофилов и лимфоцитов при ХБП, следует признать, что определения, основанные на проточной цитометрии, которые мы использовали для этих типов клеток, были относительно грубыми.Эти анализы были разработаны для получения высокоуровневого профиля относительного количества каждого из основных кластеров лейкоцитов в крови в отсутствие и в присутствии ХЗП, что привело к более детальному изучению субпопуляций моноцитов. Более точное определение и дальнейшее уточнение субпопуляций нейтрофилов и лимфоцитов потребуют дополнительных панелей окрашивания, охватывающих несколько специфических маркеров, и будут предметом будущих исследований. Наконец, анализ образцов биопсии почек с использованием новейших методов цитометрии и визуализации (64) даст возможность понять, в какой степени определенные субпопуляции моноцитов крови инфильтрируют пораженную почку и способствуют прогрессированию травмы.

В заключение, наши результаты дополнительно подчеркивают важность биологии моноцитов и гетерогенности при ХЗП человека, особенно в контексте функционального снижения почек. Хотя точные механизмы, лежащие в основе численного расширения промежуточных моноцитов DR ^hi , еще предстоит выяснить, мы предоставляем новые доказательства того, что эта субпопуляция циркулирующих моноцитов отчетливо изменена у пациентов с управляемой медикаментами ХБП и заслуживает дальнейшего изучения в связи с ее клинической диагностической / прогностической ценностью. а также из-за его механистических и терапевтических последствий.

Авторские взносы

SN, SC и TG отвечали за концепцию работы, экспериментальный план, сбор, анализ и интерпретацию данных, написание и окончательное утверждение рукописи. SM, WM, JF, DC и EC внесли свой вклад в экспериментальный дизайн, анализ и интерпретацию данных, написание и окончательное утверждение рукописи. MD участвовал в разработке концепции работы, интерпретации данных, написании и окончательном утверждении рукописи.MG отвечал за концепцию, финансирование и контроль работы, участвовал в экспериментальном дизайне, интерпретации данных, написании и окончательном утверждении рукописи.

Финансирование

SN был поддержан стипендией Ирландии в области клинических и трансляционных исследований молекулярной медицины, финансируемой Программой исследований правительства Ирландии в учреждениях третьего уровня, Cycle5, и Колледжем медицины, медсестер и медицинских наук Национального университета Ирландии в Голуэе.SC поддерживается стипендией Совета по исследованиям в области здравоохранения / Wellcome Trust Irish Clinical Academic Training (ICAT). TG поддерживается стипендией Хардимана от Колледжа медицины, медсестер и медицинских наук Национального университета Ирландии в Голуэе и стипендией Ирландского эндокринного общества / Королевского колледжа врачей Ирландии. EC был поддержан стипендией Ирландии для клинических и трансляционных исследований в области молекулярной медицины, финансируемой Программой исследований правительства Ирландии в учреждениях третьего уровня, Cycle5.JF поддерживается грантом Emerging Investigator, присуждаемым Советом по исследованиям в области здравоохранения. MD был поддержан Управлением здравоохранения (HSE) Ирландии, Отделом медицинского образования, обучения и исследований (METR) и Советом по исследованиям в области здравоохранения (HRB) Ирландии в рамках Программы стипендий национального специалиста-регистратора / старшего регистратора (NSAFP). Работа также была поддержана грантами Европейской комиссии [Совместного проекта здравоохранения Horizon 2020 NEPHSTROM (номер гранта 634086; TG, WM и MG) и Совместного проекта здравоохранения FP7 VISICORT (номер гранта 602470; MG)] и Ирландского научного фонда [ Кластер стратегических исследований REMEDI (грант № 09 / SRC-B1794; DC и MG) и Исследовательский центр CÚRAM (грант № 13 / RC / 2073; MG)] и Европейским фондом регионального развития.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Авторы хотят искренне поблагодарить всех пациентов и добровольцев, которые согласились участвовать в исследовании, и поблагодарить врачей, медсестер и флеботомистов в Университетской больнице Мерлин Парк, Голуэй, которые внесли свой вклад в набор объектов исследования и сбор данных. образцы крови.Мы хотели бы поблагодарить Отделение клинической биохимии университетских больниц Голуэя, в частности г-жу Шивон Хамон и доктора Паулу О’Ши. Мы также благодарим Основной центр проточной цитометрии в NUI Galway, который финансируется NUI Galway, Научным фондом Ирландии и Программой правительства Ирландии по исследованиям в учреждениях третьего уровня, цикл 5, Национальный план развития на 2007-2013 годы, а также техническую помощь доктора Ширли Хэнли.

Список литературы

2. Hill NR, Fatoba ST, Oke JL, Hirst JA, O’Callaghan CA, Lasserson DS, et al.Глобальная распространенность хронической болезни почек — систематический обзор и метаанализ. PLoS ONE (2016) 11: e0158765. DOI: 10.1371 / journal.pone.0158765

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

3. Участники исследования факторов риска ГББ, 2013 г., Forouzanfar MH, Alexander L, Anderson HR, Bachman VF, et al. Глобальная, региональная и национальная сравнительная оценка рисков 79 поведенческих, экологических, профессиональных и метаболических рисков или кластеров рисков в 188 странах, 1990-2013 гг .: систематический анализ для исследования глобального бремени болезней 2013 г. Ланцет (2015) 386: 2287–323. DOI: 10.1016 / S0140-6736 (15) 00128-2

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

4. Ван дер Вельде М., Мацусита К., Кореш Дж., Астор Б.К., Вудворд М., Леви А. и др. Более низкая оценочная скорость клубочковой фильтрации и более высокая альбуминурия связаны с общей смертностью и смертностью от сердечно-сосудистых заболеваний. Совместный мета-анализ когорт населения высокого риска. Kidney Int. (2011) 79: 1341–52. DOI: 10.1038 / ki.2010.536

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

5.Мацусита К., ван дер Велде М., Астор BC, Вудворд М., Леви А.С. и др. Связь предполагаемой скорости клубочковой фильтрации и альбуминурии с общей смертностью и смертностью от сердечно-сосудистых заболеваний в популяционных когортах в целом: совместный метаанализ. Ланцет (2010) 375: 2073–81. DOI: 10.1016 / S0140-6736 (10) 60674-5

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

6. Хуэй Х, Мацусита К., Санг И, Баллю С.Х., Фюлоп Т., Кориш Дж. ХЗП и сердечно-сосудистые заболевания в исследовании риска атеросклероза в сообществах (ARIC): взаимодействие с возрастом, полом и расой. Am J Kidney Dis. (2013) 62: 691–702. DOI: 10.1053 / j.ajkd.2013.04.010

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

7. Агарвал С., Шлипак М.Г., Крамер Х., Джайн А., Херрингтон Д.М. Связь хронической болезни почек и метаболического синдрома с сердечно-сосудистыми событиями: мультиэтническое исследование атеросклероза. Cardiol Res Pract. (2012) 2012: 806102. DOI: 10.1155 / 2012/806102

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

8.Гриффин Т.П., Мартин В.П., Ислам Н., О’Брайен Т., Гриффин М.Д. Перспективы терапии мезенхимальными стволовыми клетками при диабетической болезни почек. Curr Diab Rep. (2016) 16:42. DOI: 10.1007 / s11892-016-0734-6

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

9. Лопес-Новоа Ю.М., Мартинес-Сальгадо С., Родригес-Пенья А.Б., Лопес-Эрнандес Ф.Дж. Общие патофизиологические механизмы хронической болезни почек: терапевтические перспективы. Pharmacol Ther. (2010) 128: 61–81.DOI: 10.1016 / j.pharmthera.2010.05.006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

10. Jha V, Garcia-Garcia G, Iseki K, Li Z, Naicker S, Plattner B, et al. Хроническая болезнь почек: глобальное измерение и перспективы. Ланцет (2013) 382: 260–72. DOI: 10.1016 / S0140-6736 (13) 60687-X

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

11. Хелал И., Фик-Броснахан Г.М., Рид-Гитомер Б., Шриер Р.В. Гломерулярная гиперфильтрация: определения, механизмы и клиническое значение. Nat Rev Nephrol. (2012) 8: 293–300. DOI: 10.1038 / nrneph.2012.19

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

13. Mutsaers HA, Stribos EG, Glorieux G, Vanholder R, Olinga P. Хроническая болезнь почек и фиброз: роль уремических удерживающих растворенных веществ. Front Med. (2015) 2:60. DOI: 10.3389 / fmed.2015.00060

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

15. Хайне Г. Х., Ортис А., Масси З. А., Линдхольм Б., Викек А., Мартинес-Кастелао А. и др.Субпопуляции моноцитов и сердечно-сосудистый риск при хронической болезни почек. Nat Rev Nephrol. (2012) 8: 362–9. DOI: 10.1038 / nrneph.2012.41

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

18. Ганда А., Магнуссон М., Иван-Чарвет Л., Хедблад Б., Энгстрём Г., Ай Д. и др. Легкая почечная дисфункция и метаболиты, связанные с низким уровнем холестерина ЛПВП, связаны с моноцитозом и атеросклерозом. Тираж (2013) 127: 988–96. DOI: 10.1161 / CIRCULATIONAHA.112,000682

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

19. Bowe B, Xie Y, Xian H, Li T, Al-Aly Z. Связь между количеством моноцитов и риском развития ХБП и прогрессирования до ТПН. Clin J Am Soc Nephrol. (2017) 12: 603–613. DOI: 10.2215 / CJN.09710916

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

21. Бойетт Л. Б., Маседо К., Хади К., Элинофф Б. Д., Уолтерс Д. Т., Рамасвами Б. и др. Фенотип, функция и потенциал дифференциации субпопуляций моноцитов человека. PLoS ONE (2017) 12: e0176460. DOI: 10.1371 / journal.pone.0176460

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

22. Коннотон Е.П., Найкер С., Хэнли С.А., Слевин С.М., Эйкеленбум Дж.К., Лаундес Н.Ф. и др. Фенотипическая и функциональная гетерогенность промежуточных моноцитов человека на основе экспрессии HLA-DR. Immunol Cell Biol. (2018). DOI: 10.1111 / imcb.12032. [Epub перед печатью].

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

23.Патель А.А., Чжан Ю., Фуллертон Дж. Н., Белен Л., Ронгво А., Майни А. А. и др. Судьба и продолжительность жизни субпопуляций моноцитов человека в устойчивом состоянии и при системном воспалении. J Exp Med. (2017) 214: 1913–23. DOI: 10.1084 / jem.20170355

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

24. Ochodnicky P, Vettoretti S, Henning RH, Buikema H, Van Dokkum RP, de Zeeuw D. Эндотелиальная дисфункция при хроническом заболевании почек: детерминанта восприимчивости к повреждению органов-мишеней и терапевтический ответ. J Nephrol. (2006) 19: 246–58.

PubMed Аннотация | Google Scholar

25. Рамирес Р., Карраседо Дж., Мерино А., Сориано С., Охеда Р., Альварес-Лара М.А. и др. CD14 + CD16 + моноциты пациентов с хронической болезнью почек проявляют повышенную адгезионную способность к эндотелиальным клеткам. Contrib Nephrol. (2011) 171: 57–61. DOI: 10.1159 / 000327134

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

27. Циглер-Хайтброк Л., Анкута П., Кроу С., Далод М., Грау В., Харт Д. Н. и др.Номенклатура моноцитов и дендритных клеток крови. Кровь (2010) 116: e74–80. DOI: 10.1182 / кровь-2010-02-258558

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

28. Мерино А., Портолес Дж., Селгас Р., Охеда Р., Буэндиа П., Оканья Дж. И др. Влияние различных методов диализа на микровоспалительный статус и повреждение эндотелия. Clin J Am Soc Nephrol. (2010) 5: 227–34. DOI: 10.2215 / CJN.03260509

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

29.Ulrich C, Heine GH, Seibert E, Fliser D, Girndt M. Циркулирующие субпопуляции моноцитов с высокой экспрессией ангиотензинпревращающего фермента прогнозируют смертность у пациентов с терминальной стадией почечной недостаточности. Циферблатная трансплантация нефрола. (2010) 25: 2265–72. DOI: 10.1093 / ndt / gfq012

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

30. Рогачев К.С., Зайлер С., Завада А.М., Райхарт Б., Герат Е., Рот Д. и др. CD14 ++ CD16 + моноциты и сердечно-сосудистые исходы у пациентов с хроническим заболеванием почек. Eur Heart J. (2011) 32: 84–92. DOI: 10.1093 / eurheartj / ehq371

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

31. Ли Дж. У., Чо И, Ким М. Г., Чо СК, Чо В.Й., Ким Х. К.. Провоспалительные моноциты CD14 (+) CD16 (+) связаны с жесткостью сосудов у пациентов с хроническим заболеванием почек до диализа. Kidney Res Clin Pract. (2013) 32: 147–52. DOI: 10.1016 / j.krcp.2013.08.001

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

32.Рогачев К.С., Завада А.М., Эмрих I, Зайлер С., Бём М., Флисер Д. и др. Более низкие уровни Apo A-I и более низкие уровни HDL-C связаны с более высоким промежуточным количеством моноцитов CD14 ++ CD16 +, которые прогнозируют сердечно-сосудистые события при хроническом заболевании почек. Arterioscler Thromb Vasc Biol. (2014) 34: 2120–7. DOI: 10.1161 / ATVBAHA.114.304172

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст

33. Завада А.М., Фелл Л.Х., Унтерстеллер К., Зайлер С., Рогачев К.С., Флисер Д. и др. Сравнение двух различных стратегий для стробирования субпопуляций моноцитов человека в рамках крупномасштабного проспективного исследования CARE FOR HOMe. Cytometry A (2015) 87: 750–8. DOI: 10.1002 / cyto.a.22703

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

35. Фан Ф, Цзя Дж., Ли Дж., Хо Й., Чжан Ю. Подсчет лейкоцитов предсказывает вероятность снижения функции почек у населения Китая. BMC Nephrol. (2017) 18: 190. DOI: 10.1186 / s12882-017-0608-4

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

36. Wong KL, Tai JJ, Wong WC, Han H, Sem X, Yeap WH, et al.Профилирование экспрессии генов выявляет определяющие особенности классических, промежуточных и неклассических субпопуляций человеческих моноцитов. Кровь (2011) 118: e16–31. DOI: 10.1182 / кровь-2010-12-326355

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

37. Завада AM, Рогачев К.С., Роттер Б., Винтер П., Марелл Р.Р., Флисер Д. и др. Доказательства SuperSAGE для CD14 ++ CD16 + моноцитов как третьей подгруппы моноцитов. Кровь (2011) 118: e50–61. DOI: 10.1182 / кровь-2011-01-326827

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

38.Леви А.С., Бош Дж. П., Льюис Дж. Б., Грин Т., Роджерс Н., Рот Д. Более точный метод оценки скорости клубочковой фильтрации по креатинину сыворотки: новое уравнение прогнозирования. Модификация диеты в группе изучения заболеваний почек. Ann Intern Med. (1999) 130: 461–70. DOI: 10.7326 / 0003-4819-130-6-199

0-00002

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

39. Томас Б., Мацусита К., Абате К. Х., Аль-Али З., Эрнлов Дж., Асаяма К. и др. Глобальные сердечно-сосудистые и почечные исходы снижения СКФ. J Am Soc Nephrol. (2017) 28: 2167–79. DOI: 10.1681 / ASN.2016050562

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

40. Рогачев К.С., Кремерс Б., Завада А.М., Зайлер С., Биндер Н., Эге П. и др. CD14 ++ Моноциты CD16 + независимо предсказывают сердечно-сосудистые события: когортное исследование 951 пациента, направленного на плановую коронарную ангиографию. J Am Coll Cardiol. (2012) 60: 1512–20. DOI: 10.1016 / j.jacc.2012.07.019

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

42.Ямамото Э., Сугияма С., Хирата Ю., Токицу Т., Табата Н., Фудзисуэ К. и др. Прогностическое значение количества циркулирующих подтипов лейкоцитов у пациентов с ишемической болезнью сердца. Атеросклероз (2016) 255: 210–6. DOI: 10.1016 / j.atherosclerosis.2016.08.033

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

43. Мацумура Т., Ямамото Э., Цудзита К., Араки Э. Возможности подсчета моноцитов для оценки сердечно-сосудистых заболеваний. Cardiovasc Pharm Открытый доступ (2017) 6: 217.DOI: 10.4172 / 2329-6607.1000217

CrossRef Полный текст

44. Прентис Р.Л., Сатровски Т.П., Фуджикура Т., Като Х., Мейсон М.В., Гамильтон Х.Х. Подсчет лейкоцитов и ишемическая болезнь сердца в когорте японцев. Am J Epidemiol. (1982) 116: 496–509. DOI: 10.1093 / oxfordjournals.aje.a113434

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

45. Ли С.Д., Фолсом А.Р., Ньето Ф.Дж., Чемблесс Л.Э., Шахар Э., Вулф Д.А. Количество лейкоцитов, частота ишемической болезни сердца и ишемического инсульта, а также смертность от сердечно-сосудистых заболеваний у афроамериканцев и белых мужчин и женщин: исследование риска атеросклероза в сообществах. Am J Epidemiol. (2001) 154: 758–64. DOI: 10.1093 / aje / 154.8.758

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

46. Сян Ф., Чен Р., Цао Х, Шэнь Б., Лю З., Тан Х и др. Отношение моноцитов / лимфоцитов как лучший предиктор сердечно-сосудистой и общей смертности у пациентов, находящихся на гемодиализе: проспективное когортное исследование. Hemodial Int. (2018) 22: 82–92. DOI: 10.1111 / HDI.12549

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

47.Канбай М., Солак Ю., Унал Х.Ю., Курт Ю.Г., Гок М., Четинкая Х. и др. Отношение количества моноцитов / холестерина ЛПВП и сердечно-сосудистые события у пациентов с хроническим заболеванием почек. Int Urol Nephrol. (2014) 46: 1619–25. DOI: 10.1007 / s11255-014-0730-1

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

48. Като С., Хмелевски М., Хонда Х, Пекойц-Филхо Р., Мацуо С., Юдзава И. и др. Аспекты иммунной дисфункции при терминальной стадии почечной недостаточности. Clin J Am Soc Nephrol. (2008) 3: 1526–33. DOI: 10.2215 / CJN.00950208

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

49. Girndt M, Köhler H, Schiedhelm-Weick E, Schlaak JF, Meyer zum Büschenfelde KH, Fleischer B. Производство интерлейкина-6, фактора некроза опухоли альфа и интерлейкина-10 in vitro коррелирует с клиническим иммунным дефектом Больные хроническим гемодиализом. Kidney Int. (1995) 47: 559–65. DOI: 10.1038 / ki.1995.70

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

50.Meuer SC, Hauer M, Kurz P, Meyer zum Büschenfelde KH, Köhler H. Селективная блокада антиген-рецепторного пути активации Т-клеток у пациентов с нарушенными первичными иммунными ответами. J Clin Invest. (1987) 80: 743–9. DOI: 10.1172 / JCI113129

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

51. Моцар А., Харен Н., Шассеро М., Луве Л., Мазьер С., Ваттель А. и др. Высокая концентрация внеклеточного неорганического фосфата подавляет передачу сигналов RANK-RANKL в остеокластоподобных клетках. J Cell Physiol. (2008) 215: 47–54. DOI: 10.1002 / jcp.21283

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

52. Cros J, Cagnard N, Woollard K, Patey N, Zhang SY, Senechal B, et al. Моноциты CD14dim человека патрулируют и воспринимают нуклеиновые кислоты и вирусы через рецепторы TLR7 и TLR8. Иммунитет (2010) 33: 375–86. DOI: 10.1016 / j.immuni.2010.08.012

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

53. Меткалф Т.У., Уилкинсон П.А., Камерон М.Дж., Гнейм К., Чанг К., Вертхаймер А.М. и др.Субпопуляции человеческих моноцитов транскрипционно и функционально изменяются при старении в ответ на агонисты рецепторов распознавания образов. J Immunol. (2017) 199: 1405–17. DOI: 10.4049 / jimmunol.1700148

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

54. Виллани А.С., Сатия Р., Рейнольдс Г., Саркизова С., Шекхар К., Флетчер Дж. И др. Последовательность одноклеточной РНК позволяет выявить новые типы дендритных клеток, моноцитов и предшественников крови человека. Наука (2017) 356: eaah5573.DOI: 10.1126 / science.aah5573

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

55. Нокхер WA, Scherberich JE. Расширение субпопуляции моноцитов CD14 + CD16 + у пациентов с острыми и хроническими инфекциями, находящихся на гемодиализе. Infect Immun. (1998) 66: 2782–90.

PubMed Аннотация | Google Scholar

56. Heine GH, Ulrich C, Seibert E, Seiler S, Marell J, Reichart B, et al. CD14 (++) CD16 + моноциты, но не общее количество моноцитов, предсказывают сердечно-сосудистые события у диализных пациентов. Kidney Int. (2008) 73: 622–9. DOI: 10.1038 / sj.ki.5002744

CrossRef Полный текст | Google Scholar

57. Слевин С.М., Деннеди М.К., Коннотон Е.П., Рибейро А., Середиг Р., Гриффин М.Д. и др. Инфликсимаб избирательно модулирует репертуар моноцитов циркулирующей крови при болезни Крона. Воспаление кишечника. (2016) 22: 2863–78. DOI: 10.1097 / MIB.0000000000000964

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

58. Цукамото М., Сета Н., Ёсимото К., Сузуки К., Ямаока К., Такеучи Т.CD14 (яркие) CD16 + промежуточные моноциты индуцируются интерлейкином-10 и положительно коррелируют с активностью заболевания при ревматоидном артрите. Arthritis Res Ther. (2017) 19:28. DOI: 10.1186 / s13075-016-1216-6

CrossRef Полный текст | Google Scholar

59. Карлин Л.М., Стаматиадес Е.Г., Оффрей С., Ханна Р.Н., Гловер Л., Вискей-Баррена Г. и др. Nr4a1-зависимые моноциты Ly6C (low) контролируют эндотелиальные клетки и регулируют их удаление. Cell (2013) 153: 362–75.DOI: 10.1016 / j.cell.2013.03.010

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

60. Ле Мёр Й, Теш Г. Х., Хилл П. А., Мю В., Фоти Р., Николич-Патерсон Д. Д. и др. Накопление макрофагов в очаге почечного воспаления зависит от пути M-CSF / c-fms. J Leukoc Biol. (2002) 72: 530–7.

PubMed Аннотация | Google Scholar

61. Лим А.К., Ма Ф.Й., Николич-Патерсон Д.Д., Томас М.К., Херст Л.А., Теш Г.Х. Блокада c-fms антителами подавляет прогрессирование воспаления и повреждения при ранней диабетической нефропатии у мышей db / db с ожирением. Diabetologia (2009) 52: 1669–79. DOI: 10.1007 / s00125-009-1399-3

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

63. Эрдли К.С., Кубал С., Зендер Д., Квинклер М., Лепенис Дж., Сэвидж СО и др. Роль плотности капилляров, инфильтрации макрофагов и интерстициального рубцевания в патогенезе хронической болезни почек человека. Kidney Int. (2008) 74: 495–504. DOI: 10.1038 / ki.2008.183

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

64.Winfree S, Khan S, Micanovic R, Eadon MT, Kelly KJ, Sutton TA и др. Количественная трехмерная тканевая цитометрия для изучения почечной ткани и резидентных иммунных клеток. J Am Soc Nephrol. (2017) 28: 2108–18. DOI: 10.1681 / ASN.20160

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

.