16Мар

Роя в крови: норма у женщин по возрасту (таблица)

Содержание

%d1%81%d0%be%d1%8d — со всех языков на все языки

Все языкиРусскийАнглийскийИспанский────────Айнский языкАканАлбанскийАлтайскийАрабскийАрагонскийАрмянскийАрумынскийАстурийскийАфрикаансБагобоБаскскийБашкирскийБелорусскийБолгарскийБурятскийВаллийскийВарайскийВенгерскийВепсскийВерхнелужицкийВьетнамскийГаитянскийГреческийГрузинскийГуараниГэльскийДатскийДолганскийДревнерусский языкИвритИдишИнгушскийИндонезийскийИнупиакИрландскийИсландскийИтальянскийЙорубаКазахскийКарачаевскийКаталанскийКвеньяКечуаКиргизскийКитайскийКлингонскийКомиКомиКорейскийКриКрымскотатарскийКумыкскийКурдскийКхмерскийЛатинскийЛатышскийЛингалаЛитовскийЛюксембургскийМайяМакедонскийМалайскийМаньчжурскийМаориМарийскийМикенскийМокшанскийМонгольскийНауатльНемецкийНидерландскийНогайскийНорвежскийОрокскийОсетинскийОсманскийПалиПапьяментоПенджабскийПерсидскийПольскийПортугальскийРумынский, МолдавскийСанскритСеверносаамскийСербскийСефардскийСилезскийСловацкийСловенскийСуахилиТагальскийТаджикскийТайскийТатарскийТвиТибетскийТофаларскийТувинскийТурецкийТуркменскийУдмуртскийУзбекскийУйгурскийУкраинскийУрдуУрумскийФарерскийФинскийФранцузскийХиндиХорватскийЦерковнославянский (Старославянский)ЧеркесскийЧерокиЧеченскийЧешскийЧувашскийШайенскогоШведскийШорскийШумерскийЭвенкийскийЭльзасскийЭрзянскийЭсперантоЭстонскийЮпийскийЯкутскийЯпонский

 

Все языкиРусскийАнглийскийИспанский────────АймараАйнский языкАлбанскийАлтайскийАрабскийАрмянскийАфрикаансБаскскийБашкирскийБелорусскийБолгарскийВенгерскийВепсскийВодскийВьетнамскийГаитянскийГалисийскийГреческийГрузинскийДатскийДревнерусский языкИвритИдишИжорскийИнгушскийИндонезийскийИрландскийИсландскийИтальянскийЙорубаКазахскийКарачаевскийКаталанскийКвеньяКечуаКитайскийКлингонскийКорейскийКрымскотатарскийКумыкскийКурдскийКхмерскийЛатинскийЛатышскийЛингалаЛитовскийЛожбанМайяМакедонскийМалайскийМальтийскийМаориМарийскийМокшанскийМонгольскийНемецкийНидерландскийНорвежскийОсетинскийПалиПапьяментоПенджабскийПерсидскийПольскийПортугальскийПуштуРумынский, МолдавскийСербскийСловацкийСловенскийСуахилиТагальскийТаджикскийТайскийТамильскийТатарскийТурецкийТуркменскийУдмуртскийУзбекскийУйгурскийУкраинскийУрдуУрумскийФарерскийФинскийФранцузскийХиндиХорватскийЦерковнославянский (Старославянский)ЧаморроЧерокиЧеченскийЧешскийЧувашскийШведскийШорскийЭвенкийскийЭльзасскийЭрзянскийЭсперантоЭстонскийЯкутскийЯпонский

Анализ крови на ревмопробы в Мытищах | «Андреевские больницы

Анализ крови на ревмопробы – это группа исследований, позволяющих диагностировать и контролировать эффективность лечения болезней соединительной ткани. Анализ дает возможность подтвердить или исключить наличие патологии, а также выявить возбудителя болезни (если таковой есть) и участки, пораженные воспалительным процессом.

Разновидности анализов

Стандартное исследование включает в себя:

1.      Анализ на ревматоидный фактор (РФ). РФ – это вид антитела, вырабатываемого при аутоиммунных заболеваниях. Повышение его уровня в первую очередь свидетельствует о ревматоидном артрите. Тяжесть течения болезни и сложность достижения ремиссии увеличивается вместе с ростом данного показателя.

2.      Антистрептолизин (АСЛО). Анализ показан при подозрении на ревматическую лихорадку. Исследование проводится дважды.

3.      С-реактивный белок. Повышение его уровня может свидетельствовать о наличии инфаркта миокарда, ревматоидного артрита, ревматизма, системной красной волчанки, болезни Шегрена или мышечных травм.

Так как ревматоидные болезни обусловлены аутоиммунным и иммунным генезом и серьезно влияют на функциональное состояние печени, перечень анализов крови на ревмопробы может быть расширен общим анализом крови с лейкоцитарной формулой, СОЭ, анализом на общий белок и его фракции и некоторыми другими исследованиями.

Область применения

Анализ крови на ревмопробы дает возможность выявить аутоиммунные заболевания, а также инфекционные и дегенеративные васкулиты.

Анализ крови на ревмопробы расшифровка в норме выглядит следующим образом:

  • РФ – менее 30 Мед/мл

  • С-РБ – менее 7 мг/л

  • АСЛО – менее 200 kIU/I

Подготовка к анализу

Время между последним приемом пищи и анализом крови на ревмопробы должно составлять минимум 8 часов, лучше 12. Пить можно исключительно воду.

Анализ крови при язве желудка – какие сдать анализы

Анализ крови при язве желудка играет важную роль в диагностике осложнений патологического процесса. Результаты будут различаться в зависимости от стадии, тяжести и особенностей течения болезни, а также возраста пациента. Необходимый объем исследований определяет врач.

Язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки представляет собой хроническое заболевание, при котором в слизистой оболочке формируется дефект. Основные причины поражения:

  • инфицирование Helicobacter pylori,
  • длительный прием неспецифических противовоспалительных препаратов, кортикостероидов и цитостатиков в высокой дозировке,
  • иммунодефицитные состояния, в том числе ВИЧ,
  • болезнь Крона.

Риск заболеть увеличивается под воздействием факторов риска. К ним относят:

  • несбалансированное питание и вредные привычки — злоупотребление крепкими алкогольными напитками, курение;
  • депрессии и неврозы — способствуют угнетению моторики желудка и развитию нарушений желудочной секреции;
  • генетическая предрасположенность — обычное явление для тех пациентов, чьи близкие родственники страдают заболеваниями ЖКТ;
  • пол и возраст — мужчины болеют язвенной болезнью в 4 раза чаще молодых женщин, однако после наступления менопаузы это соотношение выравнивается.

Подозрение на язву желудка возникает, когда больной жалуется на:

  • распирающие боли в верхней половине живота — возникают обычно натощак или через 1-2 часа после еды,
  • изжогу,
  • тошноту и рвоту,
  • запоры,
  • бессонницу,
  • слабость и общее недомогание.

Для диагностики язвенной болезни применяют не только инструментальные методы, но и анализы крови. Подходящий комплекс исследований назначает гастроэнтеролог.

Лабораторная диагностика в «Литех»

Сеть лабораторий «Литех» приглашает пройти комплексную диагностику при подозрении на язвенную болезнь. Обследование включает:

  • общий и биохимический анализ крови — стандартные тесты при язве желудка, позволяют выявить анемию и распознать воспалительные процессы,
  • коагулограмму — для контроля функций свертывающей системы,
  • анализ кала на скрытую кровь — помогает определить острую либо хроническую кровопотерю.

Чтобы выявить наследственный фактор и проверить, если ли генетическая предрасположенность к язве желудка и двенадцатиперстной кишки, закажите оформление мужского или женского паспорта здоровья. Вместе с документом Вы получите заключение опытного генетика — кандидата медицинских наук.

Записывайтесь на анализы крови при язве желудка через интернет-регистратуру или по телефонам офисов«Литех». Часы забора биоматериала и особенности подготовки к конкретным исследованиям уточняйте у администраторов.

Все статьи

ПЭТ-КТ проследила за движением роя нанороботов в живом организме

Распределение радиоизотопных меток после внутривенного введения нанороботов

Hortelao et al. / Science Robotics, 2021

Испанские ученые впервые количественно проследили за распространением нанороботов с ферментным приводом в живом организме. Выяснилось, что в отличие от неактивных аналогов, они склонны самоорганизовываться в форму роя с равномерным распределением частиц. Исследование опубликовано в журнале

Science Robotics.

Нанороботы представляют собой перспективную область медицинских разработок, одно из основных направлений их экспериментального применения — прицельная доставка лекарств в злокачественные опухоли. В отличие от пассивных нанопрепаратов, лишь 0,7 процента дозы которых проникает в новообразование, активно движущиеся наночастицы способны хорошо преодолевать биологические преграды, такие как слизь, клеточные мембраны и оболочки искусственных органоидов. Для придания нанороботам движения применяют различные подходы, например, воздействие внешнего магнитного поля или жгутики, схожие с бактериальными. Наиболее перспективно на данный момент использование каталитической энергии ферментов, «топливом» для которых служат естественные вещества организма.

Отдельную проблему в разработке терапевтических нанороботов представляет отслеживание их движения и распространения в живом организме. Для этих целей пытались применять магнито-резонансную и фотоакустическую компьютерную томографии, однако из-за недостаточной чувствительности эти методы дают лишь качественную, но не количественную оценку.

Чтобы преодолеть эти ограничения, сотрудники Каталонского института биоинженерии, исследовательской организации CIC biomaGUNE и Барселонского автономного университета под руководством Самуэля Санчеса (Samuel Sánchez) и Джорди Льопа (Jordi Llop) решили воспользоваться методом позитронно-эмиссионной томографии, совмещенной с компьютерной томографией (ПЭТ-КТ). Поскольку эта методика основана на регистрации гамма-излучения от радиоизотопных меток, она обладает чрезвычайно высокой чувствительностью, которая не зависит от типа исследуемых органов и тканей, давая полную количественную картину распределения меченого вещества в реальном времени.

Для эксперимента исследователи создали нанороботов из мезопористого кремния с меченым фтором-18 ферментом уреазой, разлагающим мочевину, в качестве «двигателя» и мечеными йодом-124 золотыми наночастицами в качестве «полезной нагрузки». Движение таких нанороботов происходит за счет асимметричного испускания ионов карбоната и аммония, образующихся при распаде мочевины.

Производство нанороботов

Hortelao et al. / Science Robotics, 2021

В ходе первого эксперимента исследователи помещали двухмикролитровую каплю суспензии нанороботов в чашку Петри, содержащую либо дистиллированную воду, либо раствор мочевины, и наблюдали за их поведением с помощью оптической микроскопии и ПЭТ-КТ. В воде нанороботы сохраняли форму капли, медленно неравномерно расплывающейся под действием броуновского движения. В присутствии «топлива» они организовывались аналогично стае птиц или косяку рыб и быстро равномерно распределялись по раствору.

Оптическая микроскопия нанороботов в чашке Петри

Hortelao et al. / Science Robotics, 2021

ПЭТ-КТ нанороботов в чашке Петри

Hortelao et al. / Science Robotics, 2021

В следующем эксперименте ученые пронаблюдали, как при наличии мочевины нанороботы успешно преодолевали полидиметилсилоксановые лабиринты возрастающей сложности.

Движение нанороботов в микролабиринтах

Hortelao et al. / Science Robotics, 2021

Чтобы оценить применимость методики к живым системам, суспензию нанороботов ввели мышам внутривенно и выполнили им ПЭТ-КТ в реальном времени. Так удалось количественно пронаблюдать изначальное накопление радиоизотопов в печени и легких (а меченых йодом-124 — и в щитовидной железе) с последующим постепенным выведением с мочой, что подтвердило пригодность ПЭТ-КТ и радиохимическую стабильность нанороботов in vivo. В течение последующих двух недель никаких побочных эффектов от процедуры не наблюдалось.


В последнем эксперименте нанороботов ввели мышам интравезикально — в мочевой пузырь, где присутствует достаточная концентрация мочевины. При поступлении из почек свежей мочи изначальное разделение содержимого на фазы (содержащую и не содержащую нанороботов) быстро сменялось равномерным распределением терапевтических частиц за счет их активного движения на появившемся «топливе». При введении в мочевой пузырь дистиллированной воды разделение фаз сохранялось.

ПЭТ-КТ нанороботов в мочевом пузыре мыши

Hortelao et al. / Science Robotics, 2021

По мнению исследователей, интравезикальное введение несущих противоопухолевые препараты нанороботов с меченым фтором-18 уреазным приводом под контролем ПЭТ-КТ может стать перспективным методом прицельной контролируемой химиотерапии рака мочевого пузыря. Изменяя фермент-двигатель и доставляемое лекарственное средство, технологию можно адаптировать к опухолям различных локализаций.


Количество разработок в области медицинской наноробототехники в наше время возрастает экспоненциально. В качестве примеров можно привести наномеханизмы, доставляющие культивированные нейроны в нервную ткань, способные двигаться в стекловидном теле глаза и использующие технологию ДНК-оригами для перекрытия сосудов, питающих опухоль.

Олег Лищук

Полевое руководство по подвижности скопления бактерий

Abstract

То, как бактерии регулируют, собирают и поворачивают жгутики, чтобы плавать в жидких средах, достаточно хорошо изучено. Однако гораздо меньше известно о том, как некоторые бактерии также используют жгутики для перемещения по твердым поверхностям в форме движения, называемого роением. По мере того как фокус бактериологии смещается с планктонной среды на поверхностную, интерес к подвижности роя растет. Здесь я рассматриваю требования, определяющие роевую подвижность в различных бактериальных модельных системах, включая увеличение числа жгутиков на клетку, секрецию поверхностно-активного вещества для снижения поверхностного натяжения для распространения и движение в многоклеточных группах, а не поодиночке.

Бактерии традиционно рассматривались как одноклеточные организмы, которые растут как рассредоточенные особи в планктонной среде. В последнее время эта точка зрения начала меняться с ростом осведомленности о роли биопленок, в которых сидячие бактерии секретируют внеклеточный матрикс и объединяются в многоклеточные группы. У бактерий, ассоциированных с поверхностью, есть еще один вариант, помимо сидячей агрегации; иногда бактерии становятся очень подвижными и мигрируют по субстрату, процесс, известный как роение.Исследования биопленки возродили интерес к подвижности скопления бактерий, которая часто регулируется противоположным образом и препятствует образованию биопленки 1 .

Роячая подвижность определяется как быстрое поверхностное движение многоклеточных бактерий, приводимое в движение вращающимися жгутиками 2 (). Хотя простое, точное и механистически значимое определение не отражает широкий спектр фенотипов, связанных с роевой подвижностью, и не подчеркивает все, что остается неизвестным об этом поведении.Кроме того, несмотря на простоту определения, важно признать распространенные неправильные термины, характерные для конкретной области (вставка 1), и отличать роение от таких видов поведения, как плавание, подергивание, скольжение и скольжение, которые могут происходить внутри или на поверхности твердого тела. поверхности 3 ().

Вставка 1: Неправильные термины

Термин «роевая подвижность» относится к глаголу «роиться», означающему «передвигаться в большом количестве», поскольку особи быстро перемещаются в больших группах. Образ роя, однако, подходит для ряда бактериальных явлений, и использование термина «рой» в широком смысле вызвало значительную путаницу в отношении формального определения роевой подвижности.

Анализ бактериального хемотаксиса роем

Особенно неудачное неправильное название встречается в общеупотребительном жаргоне хемотаксиса плавающих бактерий. Бактерии, инокулированные в центре богатой питательными веществами чашки, обогащенной менее чем 0,3% агара, будут потреблять питательные вещества локально, создавать градиент питательных веществ и повышать градиент хемотаксиса через поры в агаре 100 . Хотя технически бактерии плавают через поры, заполненные жидкостью, этот анализ называется «анализ роя».При чтении литературы по роению важно подтвердить, что используемая концентрация агара превышает 0,3%, необходимые для исключения плавания и определения роевой подвижности.

Роевые клетки Caulobacter crescentus

C. crescentus – это бактерия, которая растет с замечательным диморфным жизненным циклом 135 . Каждый раунд клеточного деления асимметричен и дает начало неподвижной «клетки на ножке», которая синтезирует протез с клейкой фиксацией на кончике, и «роевой клетке», которая синтезирует один жгутик и плавает в жидких средах. Роевые клетки C. cresentus не проявляют роевой подвижности на твердых поверхностях.

Стаи Myxococcus xanthus

M. xanthus — это хищные поверхностно-ассоциированные бактерии, которые перемещаются большими многоклеточными группами и выделяют пищеварительные ферменты для уничтожения и поглощения других бактерий в окружающей среде 136 . Группы M. xanthus называются «роями», несмотря на тот факт, что ни один из независимых механизмов, с помощью которых они перемещаются по поверхности (подергивание и скольжение), не требует жгутиков и не представляет собой роевую подвижность.

Бактерии передвигаются с помощью ряда механизмов

Роение — это многоклеточное поверхностное движение, приводимое в действие вращающимися спиральными жгутиками. Плавание — это индивидуальное движение в жидкости с помощью вращающихся жгутиков. Подергивание — это поверхностное движение, вызванное растяжением и втягиванием пилей. Скольжение — это активное поверхностное движение, которое не требует жгутиков или пили и включает комплексы фокальной адгезии. Скольжение — это пассивное поверхностное перемещение, вызванное ростом и облегченное поверхностно-активным веществом.Направление движения клеток указано серой стрелкой, а моторы, обеспечивающие движение, обозначены цветными кружками.

Плавающая подвижность представляет собой способ передвижения бактерий, приводимый в движение вращающимися жгутиками, но, в отличие от роящейся подвижности, происходит при перемещении отдельных клеток в жидкой среде. Twitching motility — это поверхностная подвижность, приводящаяся в действие растяжением и втягиванием пилей типа IV, что обеспечивает медленное движение клеток, часто с отрывистым или «подергивающимся» внешним видом 4 .Скользящая подвижность — это всеобъемлющее определение активного поверхностного движения, которое происходит вдоль длинной оси клетки без помощи жгутиков или пили. Скольжение, по-видимому, развилось независимо во множестве клонов, но обычно вовлекает тело клетки, перемещающееся через комплексы фокальной адгезии, которые связываются с субстратом 5 . Скользящая подвижность представляет собой пассивную форму поверхностного распространения, которая не требует активного двигателя 2 , а вместо этого опирается на поверхностно-активные вещества для снижения поверхностного натяжения, что позволяет колонии распространяться вдали от источника, движимого внешним давлением клеточного роста.Кроме того, скольжение легко принять за роевую подвижность, и оно может происходить, когда жгутики разрушаются у бактерий, которые обычно роятся 6,7,8,9,10 .

В этом обзоре будет представлен феномен роевой подвижности с практической точки зрения, обобщены клеточные потребности и фенотипы, связанные с роевой подвижностью различных модельных организмов, а также обсуждены некоторые загадки и противоречия, связанные с этим типом подвижности бактериальных клеток.

Изучение подвижности роя в лаборатории

Подвижность роя, по-видимому, узко консервативна в домене Bacterial и в настоящее время ограничена тремя семействами ().Сообщаемое количество роящихся видов почти наверняка занижено, потому что подвижность роя часто подавляется стандартными лабораторными средами и генетически устраняется во время одомашнивания широко используемых лабораторных штаммов 11,12,13,14 . Отбор против роения может быть обусловлен эволюционными силами, когда поверхностная подвижность не дает преимуществ в неструктурированных лабораторных средах 15 . С другой стороны, бактерии, которые беспорядочно распространяются по чашкам, редко приветствуются генетиками, и отбор против роения может быть искусственным в пользу небольших компактных колоний.

Филогенетическое распределение роевой подвижности

A Бактериальная филогения на основе гена 16S рРНК. Названия видов, выделенные цветным текстом, указывают на наличие роевой подвижности. Названия видов, выделенные черным текстом, обозначают бактерии, для которых роевая подвижность еще не продемонстрирована. Деревья, сгенерированные доктором Дэйвом Киселой из 1547 выровненных позиций с использованием алгоритма соединения соседей на расстояниях, определенных в модели замещения HKY85+I+G в PAUP* v4.0b10. Масштабная линейка соответствует расстоянию 0.1 замена на сайт.

Для подвижности роения обычно требуется богатая энергией твердая среда, но конкретные условия, поддерживающие роение, зависят от рассматриваемого организма. Некоторые бактерии, такие как Bacillus subtilis , роятся в широком спектре богатых энергией сред, в то время как другие бактерии, такие как Salmonella enterica и Yersinia entercolitica , требуют присутствия определенных добавок, таких как глюкоза 16,17,18 . Роению способствуют высокие темпы роста, которые могут объяснять потребность в богатых энергией условиях 12,19,20 .Хотя некоторые бактерии могут роиться почти на любой поверхности агара, большинству роящихся бактерий требуется мягкий агар в узком диапазоне концентраций агара. Среды, отвержденные с концентрацией агара выше 0,3%, исключают плавательную подвижность и заставляют бактерии двигаться, если это возможно, по поверхности, тогда как концентрации агара выше 1% запрещают роение многих видов бактерий. Вполне возможно, что стандартный 1,5% агар, который используется для затвердевания сред в лаборатории, мог быть специально выбран для ингибирования роения.

При проведении анализа роевой подвижности необходимо установить определенный набор условий и неукоснительно их соблюдать 21 . Содержание воды в среде является решающим фактором: слишком мало воды приведет к плохому роению, а слишком много воды может способствовать плавательной подвижности. Для контроля содержания воды чашки наливают до стандартной толщины, пока агар относительно холодный (~ 50°C), что минимизирует потерю воды из-за конденсации на крышке чашки. Наконец, роевые пластины ненадолго (~ 15 минут) сушат с открытым лицом в ламинарном боксе, чтобы удалить поверхностную воду и свести к минимуму вклад плавательной подвижности в поверхностное движение 12,21 .

Требования к подвижности роя

Жгутики являются наиболее важным требованием, но роение также требует увеличения биосинтеза жгутиков, межклеточных взаимодействий, а также присутствия поверхностно-активного вещества.

Жгутики

Жгутики можно наблюдать с помощью фазово-контрастной микроскопии с использованием простого красителя на основе кристаллического фиолетового 22 , с помощью флуоресцентной микроскопии с использованием флуоресцентных красителей 23,24 или с помощью электронной микроскопии 25,26 . Присутствие жгутиковых клеток в передней части расширяющейся колонии согласуется с механизмом роевой подвижности, но не является его убедительным доказательством.Чтобы подтвердить механизм роения, мутации, вызывающие дефекты в синтезе жгутиков или функции жгутиков, должны препятствовать распространению колонии 27 .

Большинство роящихся бактерий имеют перитрихиальное расположение жгутиков, при котором многочисленные жгутики беспорядочно распределены по поверхности клетки 11,18,25,28,29,30 . Peritrichous жгутики собираются вместе при вращении, чтобы эффективно увеличить жесткость жгутиков и сделать генерацию силы более эффективной в вязких жидкостях, свойство, которое также может объяснить их корреляцию с роением 31,32,33,34 .Недавно было показано, что E. coli , которая перитрихально жгутиковая, роится между двумя близко расположенными неподвижными поверхностями 24,35, 36,37 . Так как один жгутик требует минимальных вложений ресурсов и достаточен для плавательной подвижности, возникает соблазн предположить, что синтез множественных перитрихиальных жгутиков является специфической адаптацией для создания силы в вязких средах и для перемещения по поверхностям и между ними.

Однако корреляция между перитрихиальными жгутиками и роением не является абсолютной, и некоторые бактерии со жгутиками, происходящими из одного клеточного полюса, могут роиться. Vibrio parahaemolyticus , Rhodosprillum centenum и Aeromonas образуют один полярный жгутик, которого достаточно для плавания в жидкостях, но он должен индуцировать перитрихиальные жгутики (также называемые боковыми жгутиками) для роения над поверхностями 28,30,38,39, 40 . Полярные и боковые жгутики кодируются разными генами, приводятся в действие отдельными моторами и регулируются по-разному 30,39,40,41,42 . Pseudomonas aeruginosa представляет собой короткую палочковидную бактерию, которая также образует полярный жгутик.Во время роения P. aeruginosa сохраняет свои полярные жгутики, но синтезирует альтернативный двигатель, необходимый для движения по поверхности и через вязкие среды 43,44 . Таким образом, экспрессия альтернативных моторов является по крайней мере еще одним способом облегчения роевой подвижности помимо использования перитрихиальных жгутиков.

При переходе клеток от плавания к роению количество жгутиков на поверхности клеток увеличивается. Организмы с альтернативными системами жгутиков становятся гипержгутиковыми при переходе от одиночных полярных жгутиков к множественным перитрихиальным жгутикам.Виды с одной жгутиковой системой, по-видимому, также увеличивают число жгутиков на поверхности клеток во время роения 6,18,20,25,29,45,46,47 . Даже P. aeruginosa , плавающий с одним полярным жгутиком, может производить два полярных жгутика при движении по поверхности 48,49 . Мутации, снижающие экспрессию гена жгутика, уменьшают число жгутиков и уменьшают или отменяют роение 17,46,20,50,51,52,53,54,55,56 . Наоборот, мутации, которые усиливают экспрессию жгутиков, увеличивают количество жгутиков и усиливают роение 47,54,55,57,58,59,60 .Причина, по которой роение требует множества жгутиков на клеточной поверхности, неизвестна.

Рафтинг

В то время как бактерии плавают поодиночке, роящиеся бактерии перемещаются бок о бок группами клеток, называемыми плотами 11,17,20,24,26,29,36,49,61,62,63 (). Формирование рафта происходит динамично: клетки, привлеченные к рафту, движутся вместе с группой, тогда как клетки, потерянные из рафта, быстро становятся неподвижными. Динамизм рекрутирования и потери клеток указывает на то, что ни одно вещество или матрикс не поддерживает стабильность рафта, за исключением, возможно, самих жгутиков.Действительно, сканирующая электронная микроскопия роя Proteus mirabilis выявила обширное рафтинг и, возможно, межклеточное связывание жгутиков 26 (). Как и в случае с гипержгутикованием, причина, по которой роевая подвижность требует формирования рафта, в настоящее время неясна.

Рафтинг

A) Интервальная серия изображений плота из клеток B. subtilis , движущихся роящимся монослоем. Изображения вырезаны из фильма S3, опубликованного в reference11 . Б) Изображения удлиненного P.mirabilis клетки кишат большим плотом в катетере. Панели взяты с рисунка 3 из , артикул 137 . См. также , ссылка26 .

Синтез сурфактантов

Многие роящиеся бактерии синтезируют и выделяют сурфактанты (сокращение от «поверхностно-активное вещество»). Поверхностно-активные вещества представляют собой амфипатические молекулы, которые уменьшают напряжение между субстратом и бактериальной клеткой, позволяя распространяться по поверхности. Поверхностно-активные вещества часто проявляются в виде прозрачного водянистого слоя, который предшествует клеткам на фронте роя 11,29,45,49,64 .Некоторые бактерии не способны вырабатывать поверхностно-активные вещества и скапливаются только на специальном агаре с изначально низким поверхностным натяжением, возможно, из-за присутствия поверхностно-активного вещества в самом агаре 9,18,35,40,65 .

Обнаружение наличия или отсутствия секретируемого сурфактанта относительно просто с помощью анализа падения капель 66,67 . Когда вода капает на гидрофобный субстрат (такой как полистирол), поверхностное натяжение воды сохраняет каплю в виде круглой бусины. Однако, если присутствует поверхностно-активное вещество, гидрофобные части молекулы связываются с поверхностью, тогда как гидрофильные части молекулы связываются с водой, заставляя как поверхностно-активное вещество, так и воду распространяться дальше и вызывать «схлопывание» капли.Чтобы проверить наличие поверхностно-активных веществ, надо только нанести культуральные супернатанты на гидрофобную поверхность, а степень коллапса капли коррелирует с силой и концентрацией поверхностно-активного вещества.

B. subtilis и Serratia liquefaciens секретируют сильнодействующие липопептидные поверхностно-активные вещества сурфактин и серраветтин соответственно 6,11,68,69,70 (). Оба липопептида состоят из несобранного рибосомами полипептида, замкнутого в кольцо жирной кислотой, и синтезируются гомологичными наборами ферментов 6,69,70,71 .Мутации, которые устраняют выработку сурфактанта, также устраняют роение, и роение можно устранить экзогенным добавлением очищенного сурфактанта 11,16,68 . P. aeruginosa использует поверхностно-активное вещество, отличное от липопептидов. Первоначальная характеристика P. aeruginosa включала рамнолипиды в качестве роящегося поверхностно-активного вещества 48 . Ди-рамнолипид состоит из двух рамнозных сахаров, присоединенных к сложной жирной кислоте β-гидроксидеканоил-β-гидроксидеканоату (HAA) 72,73,74 ().Последующие исследования показали, что предшественники ди-рамнолипидов HAA и моно-рамнолипидов также действуют как поверхностно-активные вещества, способствуя росту роя 72,74,96 . Специфические свойства и потенциальные антагонистические эффекты молекул HAA и рамнолипидов во время роения продолжают изучаться.

Поверхностно-активные вещества

Роящиеся бактерии используют химически отличающиеся секретируемые поверхностно-активные вещества для распространения по твердым поверхностям. Полимиксин В — это антибиотик, который включен сюда для сравнения с роящимися поверхностно-активными веществами.

Производство поверхностно-активных веществ обычно регулируется определением кворума 68,75,76,77 . Поверхностно-активные вещества являются общими секретируемыми ресурсами и эффективны только при высокой концентрации. Следовательно, чувство кворума могло развиться для регулирования производства поверхностно-активных веществ, чтобы гарантировать, что поверхностно-активные вещества производятся только тогда, когда присутствует достаточно бактерий, чтобы сделать поверхностно-активные вещества полезными.

И E. coli , и S. enterica роятся без поверхностно-активных веществ. Липополисахарид (LPS), сложный гибрид липидов и полисахаридов во внешней мембране грамотрицательных бактерий, был задействован как важный смачивающий агент, потому что мутации, устраняющие LPS, также устраняли роение 65 .В соответствии с физической ролью LPS, распространение по поверхности может быть восстановлено у мутантов LPS при введении на хорошо смачиваемую поверхность или в присутствии экзогенно обеспечиваемого сурфактанта 65 . Недавно роение было восстановлено у мутантов E. coli LPS за счет вторичных мутаций в пути передачи сигнала реакции на стресс оболочки Rcs, который контролирует экспрессию жгутиковых генов 63,78 . Мутанты LPS также устраняют роение у P. mirabilis из-за сниженного синтеза жгутиков, и роение может быть аналогичным образом восстановлено мутациями в системе Rcs 56 .Генетический обход указывает на то, что ЛПС не нужен для роения, что ЛПС не действует как смачивающий агент, а вместо этого прямо или косвенно регулирует. Смачивающий агент, который способствует роению E. coli , остается неизвестным.

Фенотипы, связанные с роением

Фенотипы отставания в роении, удлинения клеток и формирования колоний связаны с роевой подвижностью, но могут быть отменены или обойдены без потери роевого поведения.

Задержка роения

Период задержки неподвижного поведения предшествует началу роевой подвижности, когда бактерии переносятся из жидкой среды на твердую поверхность 11,61,79,80 ().Задержка роения постоянна для определенного набора условий, но может быть сокращена за счет увеличения плотности инокулята или устранена с помощью определенных мутантов 11,54,58,81,82,83 . Отставание плохо изучено, но его наличие указывает на то, что плавательные клетки должны каким-то образом измениться, чтобы стать способными к роению.

Задержка роения

A) Задержка предшествует активному роению B. subtilis , когда бактерии переносятся из бульонной культуры на твердую поверхность (светлые кружки).Отставание устраняется, если активно роящиеся клетки повторно инокулируют на свежую поверхность (темные кружки). Данные воспроизведены из reference11 . B) Лаг-период B. subtilis уменьшается с увеличением плотности клеток независимо от того, используются ли в качестве инокулята выращенный бульон (незаштрихованные кружки) или активно роящиеся клетки (заштрихованные кружки), когда перед инокуляцией в чашки добавляют насыщающие количества очищенного поверхностно-активного вещества.

Кажется, есть как минимум три условия для выхода из роевого лага в B.субтилис . Первое требование заключается в высокой плотности клеток, чтобы индуцировать продукцию сурфактина. Однако сурфактин не определяет минимальную продолжительность задержки, поскольку задержка не уменьшается при инокуляции клеток на агар, предварительно кондиционированный поверхностно-активным веществом 11 . Вторым требованием для выхода из лагового роя, по-видимому, является гипержгутикование, т.к. лаг устраняется в клетках, искусственно повышающих экспрессию жгутикового синтеза 54 . Третье требование плохо изучено и выводится из того факта, что отставание устраняется, когда кто-то собирает активно роящиеся клетки с чашки и повторно инокулирует эти клетки с высокой плотностью на свежую роевую среду (1).Однако лаг-период, зависящий от плотности клеток, снова появляется, когда роящиеся клетки, собранные с поверхности, разбавляются и повторно заселяются в присутствии сурфактанта (10). Таким образом, третье требование может представлять собой критическую плотность клеток, необходимую для образования центров зародышеобразования для динамических многоклеточных рафтов, напоминающую критическую концентрацию белка для сборки и динамическую нестабильность тубулина 84,85 .

Удлинение клеток

Широко распространено мнение, что роящиеся клетки подавляют клеточное деление и что удлинение клеток является либо требованием, либо показателем роящейся подвижности.Связь между филаментацией и роевой подвижностью происходит от P. mirabilis , который образует короткие палочки при выращивании в бульоне и длинные нити с множественными нуклеоидами при выращивании на поверхностях 25,80,86 (). Позже было обнаружено, что другие бактерии имеют субпопуляции длинных клеток, обогащенные на переднем крае роя 18,29,45,87,88 . На сегодняшний день неясно, нужны ли удлиненные клетки для роения или они просто скапливаются на краю роя.Несмотря на важность удлинения в догме о роевой подвижности, не выяснено никакой механистической или регуляторной связи для контроля клеточного деления во время роения на молекулярном уровне. Более того, значительная клеточная элонгация не является ни требованием, ни ко-регулируемой с роевой подвижностью у многих бактерий 11,16,39,40,48,49,89,90 .

Несколько исследований, помимо первоначальных наблюдений на Proteus , фактически подтвердили, что удлиненные клетки, наблюдаемые во время роения, на самом деле являются нитевидными.«Нитевидный» описывает дефект клеточного деления, при котором клетки продолжают расти без разделения. Явно удлиненные клетки также могут возникать из-за невозможности разделения клеток после успешного деления, в результате чего клетки соединяются встык в длинные цепи. Цепочки и филаменты бывает трудно различить с помощью фазово-контрастной микроскопии, но их можно различить с помощью флуоресцентной микроскопии и окрашивания мембран (4). Прежде чем объявить клетку нитчатой, следует определить, имеются ли перегородки.

Клеточные нити и клеточные цепи

Мутантные клетки B. subtilis сравнивают с помощью фазово-контрастной и флуоресцентной микроскопии (мембранный краситель FM4-64, ложно окрашенный в красный цвет). Цепочки клеток (из мутанта 54 swrA ) имеют правильные перегородки, тогда как филаменты (из мутанта 98 minJ ) их не имеют.

Образование колоний

Роящиеся бактерии образуют макроскопические колонии на твердых средах. Паттерны могут выглядеть по-разному, но значение каждого конкретного паттерна неясно.Кроме того, кажется вероятным, что все роящиеся бактерии могут производить ряд узоров в зависимости от условий окружающей среды 91,92 . Следовательно, формирование паттерна может быть не столько комментарием к регуляции роения, сколько индикатором факторов окружающей среды.

Безликие рои образуются, когда клетки равномерно и непрерывно распространяются наружу от места инокуляции в виде монослоя. Монослой прозрачен, но его можно увидеть, когда падающий свет отражается от поверхности или когда косой свет проходит через агар.Плотность клеток в монослое высока и примерно однородна по всему рою, слегка увеличиваясь на переднем крае 36 . Когда монослой достигает границ чашки, колония вырастает в безликий мат 11,20 ().

Образец роения

Без особенностей: Bacillus subtilis 3610, Бычий глаз: Proteus mirabilis PM7002 (щедрый подарок Фила Разера, Университет Эмори). Дендритный: Pseudomonas aeruginosa PA14 (щедрый подарок Джорджа О’Тула, Дартмутский колледж).Вихрь: Paenibacillus vortex V (щедрый подарок Ривки Руднер, Охотничий колледж). Мутант без роения и последующий супрессор в Bacillus subtilis 3610. Неколонизированный агар выглядит черным, а бактериальная биомасса — белой.

Наиболее известным нерегулярным роением является характерный бычий глаз, образованный P. mirabilis , который является результатом циклических и синхронных волн подвижности, за которыми следуют регулярные периоды прекращения роения 80,81,93 ().Каждый цикл создает макроскопическую «зону консолидации» или «террасу». Считается, что у P. mirabilis террасы возникают вследствие дифференцировки в роящиеся нитевидные клетки с последующей периодической и синхронной дедифференцировкой в ​​нероящиеся короткие клетки 80 . Однако террасы Proteus vulgaris образовались, несмотря на то, что клетки оставались конститутивно удлиненными 94,95 . S. marcescens и отдельные мутанты B.subtilis также образуют террасы, но взаимосвязь террасирования с формой клеток в этих случаях не изучалась 52,62 .

Дендриты (также известные как усики) представляют собой длинные тонкие области колонизации, исходящие из центрального источника (). Формирование дендритов у P. aeruginosa зависит от секреции множества поверхностно-активных веществ 72,74,96 . Производные рамнолипидов по-разному вносят вклад в структуру колоний, поскольку предшественник HAA действует как репеллент, а полностью синтезированный ди-рамнолипид действует как аттрактант 96 .Считается, что дендриты P. aeruginosa будут расширяться и отталкивать друг друга в результате сложного взаимодействия между двумя секретируемыми молекулами 72,96 . B. subtilis роятся в виде дендритов в некоторых средах и, возможно, дендриты возникают, когда локальные скорости подвижности превышают скорость роста общей популяции 12,64 . Дендриты также обычно возникают в результате скользящей подвижности 6,7,8,9,10 .

Некоторые бактерии образуют спиральные вихри, перемещаясь по поверхности пластины 2,62,89,97 ().Эти вихри представляют собой большие локализованные группы клеток, движущихся по общему круговому пути, и их также называют «блуждающими колониями» 2 . В случае Paenibacillus vortex роящая подвижность в сочетании с изначально искривленной клеточной морфологией может давать паттерн вихря 89 . В соответствии с влиянием формы клеток, B. subtilis обычно не образует вихрей во время роения, но будет делать это, когда мутации приводят к образованию длинных асептированных нитевидных клеток 98 .Следовательно, вихри могут быть просто следствием ограничения роения, чтобы оно соответствовало аберрантной клеточной морфологии.

Нероящиеся клетки, не способные распространяться по поверхности, растут в виде ограниченной колонии в центре чашки (). При длительной инкубации диаметр колонии нероевого штамма может увеличиваться за счет вклада скользящей подвижности. Избирательное давление на супрессорные мутации, которые восстанавливают подвижность нероевых штаммов, сильно. Супрессоры отделяются от конкурентов колонии в асимметричных вспышках и используют неколонизированный агар для значительного преимущества роста 52,54,82 ().Предполагаемые супрессоры должны быть клонально изолированы от вспышек и повторно проверены на роение, чтобы определить, унаследовали ли они генетически способность к роению. Супрессоры могут возникать быстро, и поэтому выгодно охарактеризовать дефект роения мутанта в течение ограниченного периода времени с помощью количественного анализа роя, а не просто инокулировать центр чашки и инкубировать в течение ночи 11,52 .

Роящиеся загадки и споры

Роль хемотаксиса

Хемотаксис – это направленное движение организма по химическому градиенту.Бактерии опосредуют хемотаксис, изменяя продолжительность одного из двух вариантов поведения: бегут по относительно прямой линии или беспорядочно кувыркаются, чтобы приобрести новое направление. Бег и акробатика контролируются направлением вращения жгутиков. Ряд белков передачи сигнала хемотаксиса обнаруживает стимулы в окружающей среде, трансдуцирует стимул и контролирует направление вращения жгутиков 99 .

Роящиеся бактерии быстро мигрируют в сторону от места инокуляции, и можно предположить, что роевое поведение имеет хемотаксическую направленность, поскольку движение напоминает хемотаксическое поведение бактерий, плавающих в рыхлом агаровом субстрате 100,101,102 .Кроме того, было показано, что некоторые роящиеся бактерии способны к хемотаксису по отношению к определенным химическим веществам 103,104 и фототаксису по отношению к свету 38,105 . Наконец, некоторые мутанты с дефектом хемотаксиса также теряют способность к роению 11,18,102,104,105 . Несмотря на эти феноменологические и генетические данные, маловероятно, что хемотаксис будет управлять массовым расширением роя, т.к. клетки в рое не проявляют бегущего и кувыркающегося поведения, которое формирует основу хемотаксической ориентации, а вместо этого случайным образом переориентируются в результате внешних столкновений с др. бактериями 36 .Кроме того, роение не затрагивается, когда хемотаксис устраняется путем насыщения рецепторных белков неметаболизируемыми аналогами , 106, , а некоторые мутанты с серьезным дефектом хемотаксиса не нарушаются при роении , 11,82,107, .

Роль хемотаксиса дополнительно усложняется тем фактом, что белки передачи сигнала хемотаксиса часто необходимы для роения способами, которые явно не связаны с контролем направленного движения. Одна модель предполагает, что подмножество хемотаксисных мутантов, которые вызывают чрезмерное кувыркание, физически нарушают способность формировать стабильные многоклеточные рафты 11,107 .Другая модель предполагает, что система хемотаксиса поддерживает периодические переключения жгутикового вращения, необходимые для извлечения воды из субстрата 90 . Третья модель вызывает идею, что белки Che имеют вторую функцию, связанную с регуляцией экспрессии жгутиковых генов и/или сборки жгутиков 45,108 . Хотя иногда требуются белки хемотаксиса, экспансия роящихся бактерий наружу, по-видимому, является быстрым, ненаправленным средством распределения популяции бактерий по поверхности.

Механизм поверхностного восприятия

Роевая подвижность требует контакта с твердым субстратом. Взаимодействие с поверхностью может привести к тому, что клетки станут способными к роению во время задержки роения. Если поверхностный контакт действительно является индуцирующим стимулом, само собой разумеется, что клетки должны содержать систему передачи сигналов для передачи этой информации. Выяснение механизма поверхностного восприятия или определение молекулярной основы бактериального осязания — это «Святой Грааль» исследования роящейся подвижности.

Осязание плохо изучено для всех систем, но особенно проблематично для бактерий. Плазматическая мембрана содержит системы передачи сигналов, но отделена от места поверхностного контакта либо толстым пептидогликаном грамположительных бактерий, либо обесточенной наружной мембраной грамотрицательных бактерий. Следовательно, полимеры, которые проходят через эти слои, могут обеспечивать канал для передачи сигнала, а бактериальные жгутики являются потенциальными кандидатами на роль поверхностного сенсора.У V. parahaemolyticus единственный полярный жгутик был задействован в качестве сенсора, когда ингибирование полярного жгутика при контакте с поверхностью или рядом других средств активировало экспрессию гена латерального жгутика 28,79,109,110,111 . Когда вращению жгутиков препятствует контакт с поверхностью, клетки могут ощущать изменения в ионном потоке через мотор жгутиков 110,111 . Альтернативно, клетки могут ощущать напряжение скручивания при вращении жгутиков, возможно, посредством плохо изученного ассоциированного с жгутиками трансмембранного белка, называемого FliL 112,113,114 .

Механизм генерации силы

Во время плавательной подвижности перитрихиальные жгутики на одной клетке сливаются в пучок и вращаются, приводя в движение бактерию как бег. Плавающая клетка переворачивается, когда хотя бы один жгутик меняет направление вращения. Роящиеся бактерии бегают, но не кувыркаются, а иногда отступают назад, когда все жгутики в клетке меняют направление вращения и клетка движется назад через пучок жгутиков 37 . Кроме того, роение происходит в многоклеточных группах, и неизвестно, почему одних и тех же жгутиков, достаточных для движения одиночных клеток в жидкости, недостаточно для движения одиночных клеток по поверхности.Возможно, рафтинг способствует связыванию жгутиков между клетками. Если да, то как вращение жгутиков координируется между клетками, чтобы способствовать однонаправленному движению и стабильности плота? Как координируется вращение жгутиков в клетках, что приводит к изменению направления? Как увеличенное количество жгутиков вращается при высокой плотности клеток, не запутываясь и не ломаясь? Новые достижения в визуализации жгутиков отдельных клеток в рое, как мы надеемся, раскроют механизм группового движения 24,37 .

Роение как состояние развития

Роение подвижность — это поведение.Иногда описание роящейся подвижности смешивается с наблюдением за длинными и гипержгутиковыми клетками, что указывает на программу развития. Действительно, длинные и короткие формы P. mirabilis кажутся физиологически разными 86,115,116 . Другие бактерии испытывают транскрипционные и протеомные изменения при контакте с поверхностью, но эти изменения в основном связаны с метаболизмом и стационарной фазой, а экспрессия жгутиковых генов не затрагивается 117,118,119 .Кроме того, клетки, по-видимому, не «привержены» развитию к состоянию роения и имеют тенденцию быстро терять характер роения при переносе в бульон 79 . Отставание роя указывает на то, что плавающие клетки изменяются до того, как они становятся способными к роению, но неясно, составляют ли роевые клетки истинное состояние развития.

«Плавать в двух измерениях?»

Исследователей, изучающих роение, часто спрашивают: «Откуда вы знаете, что роение — это не просто плавательная подвижность, ограниченная в двух измерениях?» Возможность того, что роение является артефактом плавания, трудно отвергнуть, поскольку оба поведения часто требуют одних и тех же жгутиков, и есть исключения из требований к роению, представленных ранее.Например, кажущееся увеличение количества жгутиков на клетку (гипержгутикообразование) во время роения считается оптической иллюзией у некоторых бактерий 87,117 . Более того, рафтинг может быть следствием, а не требованием роения, потому что отдельные клетки E. coli иногда перемещаются независимо от рафтов, а рафты могут возникать пассивно, когда движение особи вынуждено подчиняться движениям своих соседей 36 . Большая часть недавней литературы о роении основана на исследованиях E.coli и S. enterica , мощные модельные системы плавательной подвижности, обладающие одними из самых условных фенотипов роения. Будет важно определить, как роение E. coli и S. enterica связано с роением других бактерий.

Future Directions

Для тех, кто убежден, что роевая подвижность является отдельным поведением, остается много вопросов: Какие физиологические изменения происходят во время задержки роения? Является ли поверхностный контакт прямым раздражителем, и если да, то как он передается? Связано ли деление клеток с роением, и если да, то какова механистическая связь? Как создается и координируется сила в многоклеточных плотах? Сколько видов бактерий способны к роению и сколько раз роение было выведено из лабораторных изолятов? Наконец, каково экологическое значение роевой подвижности? Хотя идеальная поверхность тщательно высушенной чашки с агаром никогда не встречается в окружающей среде, роение может происходить на богатых питательными веществами мягких субстратах, таких как гидратированные почвы, корни растений и ткани животных, и роевые клетки обладают целым рядом преимуществ.

Противомикробные поверхностно-активные вещества

Помимо стимулирования подвижности роя, поверхностно-активные вещества являются сильнодействующими противомикробными средствами 120,121,122 . Таким образом, роевая подвижность может быть стратегией захвата и удержания, при которой одни и те же поверхностно-активные вещества, используемые для распространения по поверхности объекта, также одновременно предотвращают колонизацию и рост конкурирующих микроорганизмов.

Биоремедиация

Поверхностно-активные вещества повышают биодоступность за счет повышения растворимости углеводородов или повышения гидрофобности поверхности потребителей углеводородов 123,124,125 .Гидрофобные соединения часто связаны с поверхностью, поэтому поверхностно-активные вещества и роение могут способствовать питанию бактерий 123 .

Патогенез

Движение по поверхности может позволить бактериям мигрировать, прикрепляться к местам инфекции и рассеиваться от них 26,39,126,127 . Роение может защитить патогены от макрофагов, поскольку было показано, что клетки роя обладают повышенной устойчивостью к поглощению 128 . Наконец, секреция токсинов часто корегулируется роевой подвижностью 126,129 .

Повышенная устойчивость к антибиотикам

Бактерии различных видов становятся устойчивыми к широкому спектру антибиотиков при роении 130,131 . Механизм генерализованной множественной лекарственной устойчивости, по-видимому, не связан с известными активными системами оттока антибиотиков и скорее является пассивным из-за быстрого распространения клеток при высокой плотности 118,130,132 . Тем не менее, некоторые бактерии имеют специализированные системы, чтобы сопротивляться своим собственным секретируемым поверхностно-активным веществам 52,132,133 .Структура катионных пептидов, таких как полимиксин B, подобна поверхностно-активному веществу, и бактерии могут экспрессировать некоторые системы устойчивости к антибиотикам, чтобы избежать аутотоксичности во время роения 134 ().

Изучение роевой подвижности обещает новое понимание бактериальной физиологии многоклеточного поведения. Новые роящиеся специфические гены ждут открытия и исследования. Необходимы новые биохимические механизмы, чтобы связать фенотипы роения со старой, лучше изученной клеточной физиологией. Роение предлагает цитологическое представление о том, как контролируется количество жгутиков, биофизические модели того, как жгутики функционируют на поверхности, и мощное давление эволюционного отбора.По мере того, как микробиологи все больше интересуются жизнью на поверхности, подвижность бактериального роя, несомненно, изменит эту область.

Секвенирование РНК и разработка расширенного алгоритма классификации с использованием роевого интеллекта для диагностики заболеваний на основе крови с использованием сплайсированной РНК тромбоцитов

  • Аликс-Панабьер, К. и Пантел, К. Клиническое применение циркулирующих опухолевых клеток и циркулирующей опухолевой ДНК в виде жидкой биопсии . Рак Дисков. 6 , 479–491 (2016).

    Артикул Google ученый

  • Чан, К.С.А. и др. Неинвазивное обнаружение связанного с раком гипометилирования всего генома и аберраций числа копий с помощью бисульфитного секвенирования ДНК плазмы. Проц. Натл акад. науч. США 110 , 18761–18768 (2013 г.).

    КАС Статья Google ученый

  • Newman, A.M. et al. Встроенное цифровое подавление ошибок для улучшенного обнаружения циркулирующей опухолевой ДНК. Нац. Биотехнолог. 34 , 547–555 (2016).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Wan, J.C.M. et al. Жидкие биопсии достигают совершеннолетия: на пути внедрения циркулирующей опухолевой ДНК. Нац. Преподобный Рак 17 , 223–238 (2017).

    КАС Статья Google ученый

  • Фарманн, Дж.Ф. и др. Исследование метаболических биомаркеров крови для выявления аденокарциномы легкого. Рак Эпидемиол. Биомаркеры Пред. 24 , 1716–1723 (2015).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Skog, J. et al. Микровезикулы глиобластомы транспортируют РНК и белки, которые способствуют росту опухоли и обеспечивают диагностические биомаркеры. Нац. Клеточная биол. 10 , 1470–1476 (2008).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Cohen, J.D. et al. Комбинированная жидкостная биопсия на основе циркулирующей опухолевой ДНК и белковых биомаркеров для более раннего выявления рака поджелудочной железы. Проц. Натл акад. науч. США 114 , 10202–10207 (2017).

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Коэн, Дж.Д. и др. Обнаружение и локализация хирургически резектабельного рака с помощью мультианализа крови. Наука 359 , 926–930 (2018).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Rowley, J.W. et al. Полногеномный анализ РНК-секвенций транскриптомов тромбоцитов человека и мыши. Кровь 118 , e101–e111 (2011 г.).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Шуберт, С., Вейрих, А.С. и Роули, Дж.В. Экскурсия по транскрипционному ландшафту тромбоцитов. Кровь 124 , 493–502 (2014).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Диттрих, М. и др. Анализ данных SAGE в тромбоцитах человека: особенности транскриптома безъядерной клетки. Тромб. Гемост. 95 , 643–651 (2006).

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Брей, П.Ф. и др. Сложный транскрипционный ландшафт безъядерного тромбоцита человека. BMC Genomics 14 , 1 (2013).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Kissopoulou, A., Jonasson, J., Lindahl, T.L. & Osman, A. Секвенирование нового поколения мРНК PolyA+ тромбоцитов человека и тотальной РНК, обедненной рРНК. PLoS ONE 8 , e81809 (2013 г.).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Альхасан, А.А. и др. Обогащение кольцевой РНК в тромбоцитах является признаком деградации транскриптома. Кровь 127 , e1–e11 (2016).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Landry, P. et al. Существование пути микроРНК в безъядерных тромбоцитах. Нац. Структура Мол. биол. 16 , 961–966 (2009).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Бойлар, Э.и другие. Тромбоциты усиливают воспаление при артрите за счет образования микрочастиц, зависящих от коллагена. Наука 327 , 580–583 (2010).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Макаллистер, С. С. и Вайнберг, Р. А. Системная среда, индуцированная опухолью, как критический регулятор прогрессирования рака и метастазирования. Нац. Клеточная биол. 16 , 717–727 (2014).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Гнатенко Д.В. и др. Анализ транскриптов тромбоцитов человека с использованием микрочипов и серийного анализа экспрессии генов. клин. Рез. 101 , 2285–2293 (2003).

    КАС Google ученый

  • McRedmond, J.P. et al. Интеграция протеомики и геномики в тромбоциты: профиль белков тромбоцитов и специфичных для тромбоцитов генов. Мол. Клетка. Протеомика 3 , 133–144 (2004).

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Simon, L.M. et al. Сети микроРНК-мРНК тромбоцитов человека, связанные с возрастом и полом, выявленные с помощью интегрированной тромбоцитомии. Кровь 123 , e37–e45 (2014).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Рокс, Дж.М. и др. Анализ экспрессии генов в тромбоцитах от одного донора: оценка метода амплификации на основе ПЦР. клин. хим. 50 , 2271–2278 (2004).

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Рольф, Н. Оптимизированная процедура определения профиля РНК тромбоцитов в образцах крови с ограниченным числом тромбоцитов. клин. хим. 51 , 1078–1080 (2005).

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Эдельштейн, Л.С. и др. Расовые различия в реактивности PAR4 тромбоцитов человека отражают экспрессию PCTP и miR-376c. Нац. Мед. 19 , 1609–1616 (2013).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Nilsson, R.J.A. et al. Тромбоциты крови содержат биомаркеры РНК опухолевого происхождения. Кровь 118 , 3680–3683 (2011).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Калверли, Д.С. и др. Значительное подавление экспрессии генов тромбоцитов при метастатическом раке легкого. клин. Перевод науч. 3 , 227–232 (2010).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Best, M.G. et al. РНК-секвенирование тромбоцитов, образованных опухолью, позволяет проводить диагностику панрака, мультикласса и рака по молекулярному пути на основе крови. Раковая клетка 28 , 666–676 (2015).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Best, M.G. et al. Обнаружение немелкоклеточного рака легких с помощью роевого интеллекта с использованием тромбоцитов, образованных опухолью. Раковая клетка 32 , 238–252 (2017).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Ramsköld, D. et al. Полноразмерная мРНК-Seq из одноклеточных уровней РНК и отдельных циркулирующих опухолевых клеток. Нац. Биотехнолог. 30 , 777–782 (2012).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Takagi, S. et al. Тромбоциты усиливают прогрессирование множественной миеломы за счет повышения активности IL-1β. клин. Рак Рез. 24 , 2430–2439 (2018).

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Zhang, Q. et al.Секвенирование РНК позволяет систематически идентифицировать транскриптомные изменения тромбоцитов у пациентов с НМРЛ. Биомед. Фармацевт. 105 , 204–214 (2018).

    КАС Статья Google ученый

  • Клэнси Л., Болье Л.М., Танриверди К. и Фридман Дж.Э. Роль поглощения РНК в гетерогенности тромбоцитов. Тромб. Гемост. 117 , 948–961 (2017).

    Артикул Google ученый

  • Эйхер, Дж.Д. и др. Характеристика транскриптома тромбоцитов с помощью секвенирования РНК у больных с острым инфарктом миокарда. Тромбоциты 27 , 230–239 (2016).

    КАС Статья Google ученый

  • Wrzyszcz, A., Urbaniak, J., Sapa, A. & Woźniak, M. Эффективный метод выделения репрезентативной и чистой популяции тромбоцитов для протеомных исследований. Тромбоциты 28 , 43–53 (2017).

    КАС Статья Google ученый

  • Abdel-Ghany, S.E. et al. Обзор транскриптома сорго с использованием длинных чтений одиночных молекул. Нац. коммун. 7 , 11706 (2016).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Garalde, D. R. et al. Высокопараллельное прямое секвенирование РНК на массиве нанопор. Нац. Методы 15 , 201–206 (2018).

    КАС Статья Google ученый

  • Warren, S. Одновременное мультиплексное определение РНК и белка на платформе NanoString® nCounter®. в Анализ экспрессии генов: методы и протоколы (ред. Рагхавачари, Н. и Гарсия-Рейеро, Н.) 105–120 (Спрингер, Клифтон, Нью-Джерси, 2018).

  • Брейман Л. Случайные леса. Маха.Учиться. 45 , 5–32 (2001).

    Артикул Google ученый

  • Рамасвами, С. и др. Мультиклассовая диагностика рака с использованием сигнатур экспрессии опухолевых генов. Проц. Натл. акад. науч. США 98 , 15149–15154 (2001).

    КАС Статья Google ученый

  • Yeang, C.H. et al. Молекулярная классификация множественных типов опухолей. Биоинформатика 17 (Приложение 1), S316–S322 (2001).

    Артикул Google ученый

  • Альшамлан, Х. М., Бадр, Г. Х. и Алохали, Ю. А. Алгоритм генетической пчелиной колонии (GBC): новый метод отбора генов для классификации рака с помощью микрочипов. Вычисл. биол. хим. 56 , 49–60 (2015).

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Си М., Sun, J., Liu, L., Fan, F. & Wu, X. Выбор и классификация признаков рака с использованием оптимизации роя бинарных частиц с квантовым поведением и машины опорных векторов. Вычисл. Мат. Методы мед. 2016 , 1–9 (2016).

    Артикул Google ученый

  • Мукерджи, С. и др. Оценка требований к размеру набора данных для классификации данных ДНК-микрочипов. Дж. Вычисл. биол. 10 , 119–142 (2003).

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Banfi, G., Salvagno, G.L. & Lippi, G. Роль этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) в качестве антикоагулянта in vitro для диагностических целей. клин. хим. лаборатория Мед. 45 , 565–576 (2007).

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Давила, Дж. И. и др. Влияние деградации РНК на обнаружение слияния с помощью RNA-seq. BMC Genomics 17 , 814 (2016).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Picelli, S. et al. Полноразмерная РНК-секвенция из отдельных клеток с использованием Smart-seq2. Нац. протокол 9 , 171–181 (2014).

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Teruel-Montoya, R. et al. Различия в экспрессии микроРНК в линиях гемопоэтических клеток человека позволяют регулировать экспрессию трансгена. PLoS ONE 9 , e102259 (2014).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Trichler, S.A., Bulla, S.C., Thomason, J., Lunsford, K.V. & Bulla, C. Выделение сверхчистых тромбоцитов из цельной крови собак. BMC Вет. Рез. 9 , 144 (2013).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Ли, Х., Mauro, M. & Williams, Z. Сравнение наборов для выделения внеклеточной РНК из плазмы выявило предвзятость, зависящую от набора. Биотехнологии 59 , 13–17 (2015).

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Adiconis, X. et al. Сравнительный анализ методов секвенирования РНК для деградированных или малозатратных образцов. Нац. Методы 10 , 623–629 (2013).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Болджер А.M., Lohse, M. & Usadel, B. Trimmomatic: гибкий триммер для данных последовательностей Illumina. Биоинформатика 30 , 2114–2120 (2014).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Добин А. и др. STAR: сверхбыстрый универсальный выравниватель RNA-seq. Биоинформатика 29, 15–21 (2013).

    Google ученый

  • Андерс С., Pyl, P. T. & Huber, W. HTSeq — платформа Python для работы с высокопроизводительными данными секвенирования. Биоинформатика 31 , 166–169 (2014).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Лангмид, Б. и др. Сверхбыстрое и эффективное с точки зрения памяти выравнивание коротких последовательностей ДНК с геномом человека. Геном Биол. 10 , R25 (2009).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Ким, Д., Langmead, B. & Salzberg, S.L. HISAT: устройство для быстрого сращивания с низкими требованиями к памяти. Нац. Методы 12 , 357–360 (2015).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Голуб, Т. Р. и др. Молекулярная классификация рака: открытие класса и предсказание класса с помощью мониторинга экспрессии генов. Наука 286 , 531–537 (1999).

    КАС Статья Google ученый

  • Рычаг, Дж., Крживинский М. и Альтман Н. Важные моменты: классификационная оценка. Нац. Методы 13 , 603–604 (2016).

    КАС Статья Google ученый

  • Робинсон, М. Д. и Ошлак, А. Метод нормализации масштабирования для анализа дифференциальной экспрессии данных секвенирования РНК. Геном Биол. 11 , R25 (2010).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Ли, Х.и другие. Сравнение методов глобального масштабирования для каждого образца и нормализации для каждого гена для анализа дифференциальной экспрессии данных РНК-секвенирования. PLoS ONE 12 , e0176185 (2017).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Боньяди, М. Р. и Михалевич, З. Оптимизация роя частиц для задач непрерывного пространства с одной целью: обзор. Эволюция. вычисл. 25 , 1–54 (2017).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Кеннеди, Дж. Ф. и Эберхарт, Р. К. Оптимизация роя частиц. in Proceedings of the 1995 IEEE International Conference on Neural Networks Vol. 4, 1942–1948 (1995).

  • Риссо, Д., Нгаи, Дж., Спид, Т. П. и Дудойт, С. Нормализация данных секвенирования РНК с использованием факторного анализа контрольных генов или образцов. Нац. Биотехнолог. 32 , 896–902 (2014).

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Робинсон, М. Д., Маккарти, Д. Дж. и Смит, Г. К. edgeR: пакет Bioconductor для дифференциального анализа экспрессии цифровых данных экспрессии генов. Биоинформатика 26 , 139–140 (2010).

    КАС Статья Google ученый

  • Лучшая сборка Elden Ring Swarm of Flies и как получить заклинание

    Elden Ring полон мощного оружия и заклинаний, и некоторые из них могут оказаться не такими, как вы ожидаете.Например, кто бы мог подумать, что группа кровожадных мух станет одной из самых мощных вещей в игре? Но, как оказалось, после первого большого патча Elden Ring , Рой мух — это удивительное заклинание, которое поможет вам прорваться сквозь самых сложных боссов игры.

    Если вы хотите сосредоточить свой следующий магический эффект кровотечения на заклинании «Рой мух», вот как его получить, с каким оружием его сочетать и какие характеристики вам нужны, чтобы стать самым смертоносным повелителем насекомых в Междуземельях.

    Где найти рой мух Изображение: FromSoftware/Bandai Namco через Polygon

    Заклинание находится в регионе Дворец Могвин на трупе. Труп находится на восточной стене кровавого болота Дворца, к северу от места благодати Дворцового уступа-дороги .

    Лучшая печать для сборки «Рой мух»

    «Рой мух» технически является заклинанием крови, и в настоящее время в Elden Ring нет печатей, увеличивающих урон этой конкретной школы магии.Из-за этого вам лучше всего получить Печать Причастия Дракона , которую вы можете найти, пройдя Могилу Героя Крайнего народа рядом с Stranded Graveyard местом благодати в начале игры. Из благодати вам нужно будет использовать два ключа Stonesword , а затем перемещаться по колесницам с лезвиями. Когда вы доберетесь до верхней части области, вы найдете врага, которого вы можете убить, чтобы получить эту Печать.

    Лучшее оружие для использования с Роем мух Набор

    «Рой мух» чрезвычайно эффективен для увеличения потери крови, поэтому вам нужно оружие, которое также хорошо справляется с этой задачей.Вам также понадобится оружие, которое хорошо масштабируется либо от Arcane , либо от Faith , так как это характеристики, с которыми лучше всего масштабируется Swarm of Flies. Но поскольку оружие с кровотечением часто основано на тайной магии, именно на нем мы и сосредоточимся.

    Реки крови Катана — лучшее оружие-компаньон, но вам придется пройти довольно далеко в Elden Ring , прежде чем вы сможете его получить. Реки Крови появляются после победы над Окиной Кровавый Палец, которая нападет на вас в Церкви Упокоения на Вершинах Гигантов.Другим вариантом является Священное Копье Могвина , которое вы можете получить, обменяв Воспоминания о Лорде Крови на Энию в Крепости Круглого Стола , но вам придется убить Мога, Повелителя Крови, чтобы получить это , так что это тоже довольно поздно в игре.

    Лучшие талисманы для сборки «Рой мух»

    Единственный талисман, напрямую связанный с этим билдом, — Lord of Blood’s Exultation , который увеличивает вашу силу атаки, когда поблизости происходит потеря крови.Этот Талисман — награда за убийство Эсгара, Жреца Крови в Катакомбах Лейнделла.

    Статистика сборки «Рой мух»

    Этот билд будет сфокусирован на Arcane , но вам понадобится немало других характеристик, чтобы все заработало. Во-первых, вам понадобится дополнительная Сила или Ловкость, в зависимости от того, какое оружие вы используете, но вам также понадобятся характеристики, чтобы иметь возможность владеть оружием с самого начала. После того, как вы выполнили эти требования, ваше основное внимание должно быть сосредоточено на Arcane — по крайней мере, в том, что касается урона.

    Вот характеристики, которые вам понадобятся для использования каждого оружия, печатей и заклинаний этой сборки:

    • Рой мух — 11 Вера, 16 Тайна
    • Печать Причастия Дракона — 10 Веры, 10 Тайной магии
    • Реки Крови — 12 Сила, 18 Ловкость, 20 Тайная магия
    • Священное копье Могвина — Сила 24, Ловкость 14, Тайная магия 27

    Рой | Назад 4 Blood Wiki

    Рой.

    Рой — это режим PvP, в котором команды по очереди играют за Уборщиков и Ридденов, чтобы остановить друг друга.

    В начале команды случайным образом назначаются либо Чистильщиками, либо Ездовыми. После периода загрузки для выбора карт и первоначального выбора в Системе мутации зомби (ZMS) начинается короткий период «Уборки», в течение которого Уборщики могут открывать ящики, чтобы найти оружие и предметы. Как только период сбора мусора закончится, появятся обычные Риддены, и команда Ридденов сможет начать появляться.«Рой» — это круг, вдохновленный Battle-Royale, который сжимается, и если Чистильщики находятся за его пределами, они будут получать постоянный урон. Цель Чистильщиков — остаться в живых как можно дольше; пока хотя бы один Уборщик стоит с хотя бы 1 очком здоровья, часы будут отсчитывать. Как только их нет, часы останавливаются, и команды меняются сторонами. Раунд заканчивается после того, как обе команды по одному разу попытались выжить в роли Уборщиков. Та команда, которая продержалась дольше, побеждает в раунде. Матч выигрывает та команда, которая выигрывает в трех раундах.


    Уборщики используют колоду Роя из 15 карт. Пул карт для Swarm намного меньше, чем пул карт для совместной игры, но каждая карта доступна для всех игроков, и разблокировка карт на линиях снабжения не требуется. Когда начинается первый раунд, каждый член команды Уборщиков выбирает, каким Уборщиком они будут играть на протяжении всего матча, и выбирает либо одну из четырех готовых колод, либо собственную колоду. Затем им предоставляется первая карта в этой колоде, и они выбирают следующие четыре карты. В начале каждого последующего раунда они выбирают еще четыре.Ящики снабжения появляются в Swarm и могут быть разблокированы с помощью набора инструментов. Каждый член команды Ridden выбирает один из девяти игровых режимов Mutation Ridden (босс Ridden не появляется в Swarm), где только два игрока могут выбирать классы из одного и того же набора вариантов. Игроки Ridden могут изменить класс в любое время во время матча, за исключением случаев, когда они появляются с выбранным классом. В то время как команда Чистильщиков увеличивает свои возможности, выбирая карты и находя оружие и снаряжение на карте, игроки Риддена становятся сильнее, используя Систему мутации зомби.

    Обзор

    Толба группа Bruiser

    Толба группы ДРОБИЛКА Обзор

    Толба Обзор группы Толба

    Стингер группы Höcker Обзор

    Стингер окуня Обзор СТАЛКЕР

    Стингер Обзор группы STINGER

    Обзор Рикер группы тужиться

    Обзора Рикер группы взрыватель

    Reeker group REEKER обзор

    В Swarm есть 18 карт, которые выбираются случайным образом для каждого раунда:

    Автодорожный тоннель
    Название карты заставки Имя внутренней карты Ассоциированная кооперативная миссия Описание
    Друг в беде Школа закончилась Остатки парковка школьного автобуса
    Заброшенный Город-призрак Полый синий пес жилая улица
    Плохие семена Ферма каннибалов Полый синий пес сенокос
    Сверкающие тропы Выжженная земля Др.Окрестности Роджерса сгоревший кемпинг
    Хижины у озера Кровавый лагерь Район доктора Роджерса как указано
    Дальше Поле криков Район доктора Роджерса кукурузное поле
    Серьезная опасность Нет покоя, только кусочки Иов 10:22 кладбище
    Адские колокола Нагромождение Полый синий пес транспортная долина
    Вестники Червя Часть 1 Резня на главной улице Иов 10:22 АЗС
    Вестники Червя Часть 2 Гамбургер Ад Иов 10:22 закусочная с бургерами
    Внутренние районы Полностью автоматический План Б гаражей / свалок
    Повышение квалификации Грохот на крыше Остатки «SOS» на крыше
    Поезд боли Конец линии Возвращение дьявола гравийный двор
    Чистящие средства для труб Засорен План Б канализация
    Возрождение Двор грузовиков Возвращение дьявола стоянка полуприцепов
    Прицеп выброшен Парк трейлеров План Б трейлерный парк
    Дорога в ад Карантинная зона Остатки рельефно-палаточный район
    Тоннель крови Туннель ужаса Возвращение дьявола

    Назад 4 Blood представляет режим PvP Swarm и расширенный трейлер E3 2021

    Warner Bros.Interactive Entertainment решили представить на E3 2021 одну игру, и это была Back 4 Blood . Игрокам представился первый взгляд на игровой режим PvP, известный как Swarm. Детали включали играбельного Риддена и стратегии, которые Чистильщики должны будут использовать, если они собираются пережить другую команду.

    Рой — это режим 4 на 4, в котором две команды сражаются, чтобы выяснить, чьи Уборщики дольше всех продержатся против Риддена. В каждом раунде команды меняются сторонами, и побеждает команда Уборщиков, продержавшаяся дольше всех.Каждый матч является лучшим из трех раундов.

    Чистильщики будут иметь в своем распоряжении разнообразное оружие, включая пистолеты, дробовики, легкие и ручные пулеметы и снайперские винтовки. Чистильщикам нужно собирать припасы, например запасы, глушители, прицелы и прицелы для своего оружия, топливные баки, аптечки, боеприпасы и другие полезные предметы. Наконец, им нужно выбрать хорошее место на карте, чтобы укрепиться и продержаться, а затем продержаться как можно дольше против другой команды, которая будет контролировать Ридден.По ходу раунда Рой приближается все ближе. Это увеличивает размер атак Риддена и сужает игровое пространство для Чистильщиков. Это может даже вынудить их покинуть выбранное ими место.

    Ридденам нужно убивать уборщиков как можно быстрее. Это делается путем выбора правильного Риддена, чтобы противостоять стратегии другой команды, координируя атаки с другими игроками и ИИ. Риддены набирают очки, сражаясь с Чистильщиками. Их можно потратить на общекомандные улучшения, известные как мутации.Мутации можно использовать для добавления эффектов к способностям Риддена или для усиления количества, размера и силы волн ИИ. Эти мутации будут сохраняться между раундами. В начале каждого раунда есть выбор из девяти играбельных Ридденов из трех разных групп, хотя у каждой есть свои способности:

    Группа 1: Рикер, Ретч и Взрыватель

    • Рикер обладает быстрой атакой в ​​ближнем бою, как Left 4 Dead Танк
    • У Ретча рвота, как у Бумера
    • Взрыватель взорвется после смерти.

    Группа 2: Стингер, Хокер и Сталкер

    • Стингер имеет легкую дальнюю атаку, как Спиттер, и может цепляться за стены

    Группа 3: Tallboy, Crusher и Bruiser

    • Tallboy имеет удар сверху
    • Crusher может хватать и сжимать Cleaners
    • Bruzy Meiser атакует Burst Smash

    Back 4 Blood уже появлялся во время мероприятия Summer Game Fest Kickoff Live с коротким тизер-трейлером.Во время показа Xbox и Bethesda игра получила расширенную версию трейлера, позволяющую нам ближе познакомиться с опасностями, с которыми столкнутся Чистильщики.

    Игроки смогут опробовать игру, когда она выйдет на PS5 и PS4 12 октября. До этого будет открытое бета-тестирование, которое начнется 12 августа и продлится до 16 августа. Те, кто оформит предзаказ на игру, получат ранний доступ к бета-версии с 5 по 9 августа.

    Советы по игре в режиме роя

    Есть несколько разных режимов, в которые вы можете играть в Back 4 Blood , и режим роя — один из них.В Swarm вы можете играть за команду из 4 человек, которые являются либо Чистильщиками, либо Ридденами, и вы идете против другой команды из 4 человек. Поначалу к этому режиму может быть немного сложно привыкнуть, поэтому мы написали несколько полезных советов по игре в режиме Swarm.

    Подробнее: Назад 4 Blood: как получить абонемент Ultimate Game Pass Ultimate Perks

    Советы по игре в режиме Swarm

    Советы по игре в режиме Swarm будут различаться в зависимости от того, на чьей вы стороне, но есть несколько ключевые, которые распространяются на весь режим, независимо от того, за кого вы играете.Режим «Рой» проверит все ваши навыки, и вы сможете использовать немало приемов, которым научились в режиме «Кампания», чтобы бой оставался интересным.

    Если вам нравится Back 4 Blood , но вы застряли на некоторых частях, зайдите на в наш центр прохождения , где вы можете найти все наши руководства по игре!

    Не уходите, если вы проиграли

    Проигрыш может быть очень неприятным, особенно когда вы приложили много усилий к матчу, но если вы уходите после поражения, вы можете поставить остальную часть своей команды в невыгодное положение. или вы можете закончить игру вообще.Ваши очки и карты складываются по раундам, поэтому даже если вы проиграете один матч, очки/улучшения, которые вы можете получить, могут означать, что следующий матч будет вашим!

    Работа в команде, работа в команде, работа в команде!

    Работайте в команде, и успех будет в пределах вашей досягаемости, независимо от того, за какую сторону вы играете. Вы будете сильны как единое целое, потому что, если вы разделитесь (особенно как Чистильщики), вы сделаете себя уязвимыми для любых атак. Если вы видите товарища по команде, который вот-вот будет ошеломлен, подбегите и помогите ему.

    Если вы видите, что у другого участника низкий уровень здоровья, защитите его от входящих атак, играя за Риддена, или исцелите его с помощью своих припасов, если вы Чистильщик. Команда, которая работает вместе, имеет больше шансов победить команду, которая этого не делает.

    Советы для уборщиков в Swarm

    Эти советы пригодятся вам, когда вы будете играть за героев игры The Cleaners. Когда вы играете за одного из Уборщиков, игра идет как обычно до начала матча: вы выбираете Уборщика, Колоду, берете карты и вступаете в матч.Тем не менее, в начале каждого матча у вас есть время, чтобы побегать и собрать как можно больше из разных ящиков с апельсинами. Вы даже можете найти лучшее оружие, чем то, с которым вы начинаете.

    Стратегически используйте свои карты


    Даже если вы застряли с колодой после того, как заблокировали ее, у вас все равно будет возможность взять из нее несколько карт и выбрать, какими из них вы хотите сыграть. Когда вы делаете это, постарайтесь сосредоточиться на выборе карт, которые принесут пользу всей команде, если это возможно.Если нет, вы всегда можете сбалансировать это с помощью карт, которые дают хорошие привилегии, такие как высокая защита или высокие рейтинги атаки.

    Настройка колод, которые не работают

    После окончания игры в Swarm вы можете обнаружить, что составленная вами колода не подходит для этого конкретного режима. К счастью, вы также можете создавать собственные колоды для режима Swarm, поэтому стоит пересмотреть и перестроить свои колоды для этого конкретного режима, если вы чувствуете, что игра вам не подходит. У нас есть руководство по использованию карт , в котором рассказывается, как создавать успешные колоды.

    Откройте все ящики с апельсинами во время уборки

    Даже если вы больше не можете нести предметы, попробуйте открыть как можно больше ящиков с апельсинами. Это сэкономит вам драгоценные секунды в середине боя, так как вы можете просто пробежать мимо открытого ящика и взять все необходимые припасы.

    Укрепление области


    Не всегда можно использовать укрепления для защиты в Рое, но на некоторых картах вы будете одарены большим количеством колючей проволоки, бензобаков и топливных канистр.Если вы находитесь на одной из таких карт, попробуйте использовать их для защиты окружающей вас области, поскольку Колючая проволока может замедлить обычного Риддена. Вы можете расставить бензобаки и канистры с горючим, чтобы они действовали как защитные ловушки, и вы можете выстрелить в них, чтобы они взорвались, когда враги подойдут слишком близко.

    Советы для Ridden in Swarm

    Эти советы будут очень полезны, когда придет ваша очередь играть за зараженных зомби, уничтожающих то, что осталось от мира. Чем больше вы играете за каждый тип Special Ridden в режиме Swarm, тем больше вы узнаете о том, что нужно для победы.

    Смотрите, где вы появляетесь

    В любом случае, чтобы появиться, вы должны быть вне поля зрения, иначе игра не позволит вам, но вы все равно должны быть осторожны с тем, где вы появляетесь. В режиме роя Ридден может взбираться только на определенные части зданий, поэтому, если вы где-то застряли, когда появляетесь, и не можете выбраться, вы станете легкой мишенью, если Чистильщики найдут вас.

    Используйте окружающую среду, чтобы устроить засаду своим врагам

    Используйте окружающую среду, чтобы устроить засаду своим врагам, когда вы играете за Особого Риддена, вас будут поддерживать обычные Риддены, и именно так вы сможете устроить засаду своим врагам.Среда в режиме роя детализирована и часто имеет довольно много мест, откуда вы можете появиться, чтобы застать врагов врасплох. Как только Чистильщики отвлекаются на других Ридденов, вы можете подкрасться к ним.

    Иметь 1 Большого Риддена

    Вы можете играть за 1 из 9 различных типов Ридденов в режиме Swarm Mode, а набор Tallboy — это сильные игроки в игре. Если у вас есть хотя бы 1 человек в вашей команде, который появляется как Крушитель, Высокий или Громила, вы можете нанести существенный урон другой команде. Тем не менее, эти Риддены двигаются медленно, так что не рекомендуется, чтобы вся ваша команда принадлежала к этому типу.

    Что такое режим Swarm в Back 4 Blood?

    Режим роя — это режим PvP в Back 4 Blood, в котором команда из 4 игроков сражается с другой командой из 4 человек. Одна команда начинает как Чистильщики, а другая — как Ридден.

    Ваша задача как Чистильщиков — как можно дольше выживать против Ридденов, а ваша задача как Ридденов — уничтожить всех Чистильщиков.После того, как вся команда Уборщиков побеждена, матч заканчивается, и их время будет записано:

    Затем начинается следующий раунд, и команды меняются сторонами, что означает, что Уборщики теперь становятся Одержимыми. Команда, которая когда-то была Ридденом, теперь стала Уборщиками, и теперь их задачей будет выжить дольше, чем предыдущая команда.

    Выигрывает тот, кто продержится дольше всех.

    В Назад 4 Крови Риддены — ваши враги, но приятно высвободиться и поиграть за них какое-то время в режиме «Рой», а затем сменить сторону, чтобы снова уничтожить их в роли Чистильщиков.Если вам трудно победить некоторых Ридденов, у нас есть руководства по , как победить врагов Tallboy, Crusher и Bruiser , а также одно по , как победить врагов Reeker, Retch и Exploder.

    Назад 4 Blood Shows Off Режим PvP Swarm

    Back 4 Blood раскрывает подробности своего PvP-режима под названием Swarm, в котором две команды противостоят друг другу в битве между Чистильщиками и Ридденом.

    Turtle Rock Studios, разработчик, стоящий за Left 4 Dead и Evolve , возвращается в этом году с новой игрой на выживание.Поклонники с нетерпением ждали дополнительной информации о Back 4 Blood с тех пор, как он был официально представлен на прошлогодней церемонии вручения наград Game Awards. Во время специального обзора Warner Bros. Games во время E3 2021 игроки увидели игровой режим «Рой» для Back 4 Blood.

    Назад 4 Кровь События происходят после крупной катастрофы, которая уничтожила большую часть человечества, оставив после себя множество мутировавших и инфицированных монстров.Выживших в этом постапокалиптическом мире зовут Чистильщиками, и они объединились, чтобы противостоять уничтожению зомби-подобных Ридденов. Поскольку Back 4 Blood является духовным преемником Left 4 Dead , созданным той же командой, игроки могут ожидать одинаковых напряженных действий как в кооперативной кампании, так и в режимах PvP.

    СВЯЗАННО: Back 4 Blood подтверждает дату открытого бета-тестирования и показывает нового гигантского монстра

    Глубокое погружение в PvP-геймплей Back 4 Blood s выявило многопользовательский режим, в котором две команды по четыре человека противостоят друг другу.Все игры Swarm проводятся в формате до трех побед, и каждый игрок может играть в команде Чистильщиков или Риддена. В конечном итоге игроки будут переключаться между Уборщиками и Ридденами в течение нескольких раундов. Команда, которая дольше всех продержится в роли Уборщиков, становится победителем в режиме игры «Рой».

    Когда игроки являются Чистильщиками, перед ними стоит задача как можно дольше выживать под натиском вражеских атак. Уборщикам нужно найти лучшее место на карте, чтобы укрепить оборону, избегая при этом опасных, захваченных Ридденом участков.Риддены могут использовать различные способности, чтобы как можно быстрее уничтожить вражеских Чистильщиков. Вы можете выбирать из разных типов зомби Риддена и разных улучшений, которые могут помочь противостоять команде Чистильщиков в различных ситуациях.

    Трейлеры и предварительные просмотры Back 4 Blood до сих пор были многообещающими, а новые функции, такие как карточная система rogue-lite, добавляют динамичности игровому процессу. К счастью, разработчики также пообещали избегать любых сценариев с оплатой за победу с помощью механики построения колоды, некоторые из которых будут доступны после запуска контента. Back 4 Blood также появится в Xbox Game Pass и станет доступен подписчикам сервиса с первого дня. В связи с выпуском Back 4 Blood в конце этого года игрокам следует следить за дополнительной информацией в течение следующих нескольких месяцев.

    Back 4 Blood выйдет 12 октября 2021 года для ПК, PS4, PS5, Xbox One и Xbox Series X/S.

    БОЛЬШЕ: E3 2021: расписание, где смотреть, все анонсы и многое другое

    Стример Twitch и ютубер Кика умерла в возрасте 21 года

    Читать Далее

    Об авторе

    Охотничья Масса (опубликовано 203 статьи)

    Хантер — писатель и рассказчик, а также страстный фанат игр с тех пор, как в 90-х играл в покемонов.