7Июн

Повышен белок: Общий белок (в крови) (Protein total)

Содержание

Белок S100 (S100 protein) — цена анализа в Ереване в ИНВИТРО

Исследуемый материал Сыворотка крови

Метод определения Электрохемилюминесцентный иммуноанализ, Cobas e601(Roche). 

Аналитическая чувствительность

Маркёр потенциального повреждения мозга, маркёр злокачественной меланомы.

Белки семейства S100 (к настоящему времени известно, по крайней мере, 25 представителей: S100A1 — S100A18, trichohylin, fillagrin, repetin, S100B, S100G, S100P, S100Z) – небольшие димерные кальцийсвязывающие белки с м.в. около 10,5 кДа, присутствующие только у позвоночных. S100 белки составляют самую большую подгруппу так называемых «EF-hand» кальцийсвязывающих белков (по структуре кальцийсвязывающего участка: спираль E – петля – спираль F), к которым, для примера, относятся также кальмодулин и тропонин С. Название S100 было дано при его первом описании по растворимости (solubility) в 100% насыщенном сульфате аммония. S100 белки могут формировать как гомо-, так и гетеродимеры, помимо Ca2+ связывать также Zn2+ и Сu2+.. Захват ионов меняет пространственную организацию S100 белка и обеспечивает возможность связи с различными белками — мишенями их биологического действия (документировано более 90 потенциальных белков-мишеней).

Представители S100 белков демонстрируют выраженную тканеспецифичную и клеточноспецифичную экспрессию. Они вовлечены в различные процессы – сокращение, подвижность, клеточный рост и дифференциация, прогрессия клеточного цикла, транскрипция, клеточная организация мембран и динамика цитоскелета, защита от оксидативного повреждения клетки, фосфорилирование, секреция. Предполагается, что S100 белки выполняют как внутриклеточные, так и внеклеточные функции, некоторые S100 белки секретируются и действуют аналогично цитокинам. S100Β, который продуцируется преимущественно астроцитами мозга, является маркёром активации астроглии, опосредующим свои эффекты через взаимодействие с RAGE (receptor for advanced glycation end products — рецепторы конечных продуктов гликозилирования). Показано, что S100Β проявляет нейротрофическую активность при физиологической концентрации и нейротоксическую при высокой концентрации. Различные формы рака проявляют выраженное изменение продукции S100. Повышенная секреция S100Β характерна для злокачественной меланомы. S100 — RAGE взаимодействие играет важную роль в связи воспаления и рака, выживании опухолевых клеток и злокачественной прогрессии. Клинический интерес к S100 связан с применением его как маркёра повреждения мозга при травматических поражениях мозга, болезни Альцгеймера (S100Β, высвобождающийся из некротических тканей может усиливать нейродегенерацию путём S100Β-индуцированного апоптоза), субарахноидальных кровотечениях, инсультах и иных неврологических расстройствах; в мониторинге злокачественной меланомы, других неопластических заболеваний, а также воспалительных болезнях.

Представляемый Независимой лабораторий ИНВИТРО тест количественного определения S100 (COBAS, Roche Elecsys 1010) направлен на выявление димеров S100A1B и S100BB. S100A1 и S100B (функциональные белки могут быть представлены как гомо- так и гетеродимерами) преимущественно экспрессируются клетками центральной нервной системы, главным образом, астроглией, но также продуцируются и в клетках меланомы и, в некоторой степени, в других тканях. Тест можно использовать для мониторинга и контроля лечения, раннего выявления метастазов и рецидивов (но не для постановки диагноза!) у пациентов со злокачественной меланомой и в целях комплексной оценки состояния пациентов с предполагаемым повреждением мозга.

Меланома. Секреция S100 повышена у пациентов, страдающих от злокачественной меланомы (особенно, в стадиях II, III и IV), уровень S100 коррелирует с прогрессией опухоли, стадией заболевания и может использоваться в целях прогноза, выявления рецидивов и метастазов (не для первичного диагноза). Превышение пороговой величины теста при мониторировании лечения пациентов с меланомой можно ожидать, в среднем, в % — у пациентов без проявлений заболевания – в 5,5%; с региональными метастазами – в 12,5%; метастазами в коже/дистантных лимфоузлах – в 47,6%; дистантными/висцеральными метастазами – в 42,9% (по результатам последующего наблюдения). В контрольной группе здоровых людей превышение порога наблюдается у 4,9% (доверительный интервал 95%).

В случае выявления повышенного уровня S100 рекомендован повтор исследования в целях исключения ложноположительного результата и проведение соответствующих томографических исследований для повышения точности диагностики.

Взрослые пациенты с потенциальным повреждением мозга. Уровень S100 растёт в спинномозговой жидкости и высвобождается в кровь при различных клинических ситуациях. Измерение S100 при неврологических нарушениях сравнивают c измерением СРБ при системном воспалении. S100 может быть обнаружен у пациентов с повреждениями мозга разного происхождения, включая травматические повреждения или инсульт.

После инсульта рост S100 начинается в период первых 8 часов, повышение сохраняется в течение 72 часов, концентрация S100 коррелирует с объемом повреждения и неврологическими последствиями инсульта. Повышение S100 после спонтанных субарахноидальных кровотечений коррелирует с тяжестью патологии (уровень выше 0,3 мкг/л ассоциирован с неблагоприятным течением). Травматические повреждения мозга сопровождаются ростом уровня S100 в спинномозговой жидкости и сыворотке.

При сопоставлении концентрации S100 с результатами томографии продемонстрирована высокая отрицательная предсказательная ценность теста (отсутствие повреждения по результатам томографии при отрицительном результате S100) — 99 — 100%, но низкая позитивная предсказательная ценность (наличие повреждений мозга по томограмме при результатах S100 выше порога) — 9 — 13%. Чувствительность теста 96,5 — 100%, специфичность 30 — 35% при доверительном интервале 95%. При умеренных травматических повреждениях мозга рост S100A1B и S100BB может наблюдаться у 31% и 48% пациентов без заметных признаков когнитивных расстройств. Показатель нельзя рассматривать как достоверное предсказание длительных неврологических исходов в таких случаях, особенно у детей.

Следует осторожно интерпретировать результаты, учитывая возможность влияния изменения целостности гематоэнцефалического барьера. Раннее высвобождение S100 может быть следствием механического выделения при повреждении гематологического барьера или активации экспрессии S100B при вовлечении мозга в системную воспалительную реакцию. Потенциально возможны внемозговые источники S100B (хондроциты, адипоциты). Рост S100 (>1,5 мкг/л) после остановки сердца и последующей реанимации отражает высокий риск тяжёлых неврологических последствий. 

S-100 — мозгоспецифический белок | Медицинская клиника «МЕДЭКСПЕРТ»

S-100 — мозгоспецифический белок | Медицинская клиника «МЕДЭКСПЕРТ»

S-100 – специфический белок, в большом количестве содержащийся в нервной ткани (глиальные и шванновские клетки). Мозгоспецифический белок очень быстро выводится почками и поэтому его содержание в крови крайне мало. Однако содержание данного протеина в крови и спинномозговой жидкости значительно повышается при повреждении нервной ткани. Таким образом, мозгоспецифический белок является маркером повреждения мозговой ткани и повышен при:

  • геморрагический инсульт;
  • ишемический инсульт;
  • поражение тканей головного мозга при оперативных вмешательствах, проводимых в условиях искусственного кровообращения.

Степень повышения маркера зависит от объема пораженной нервной ткани.

Норма белка S-100:

  • в крови – не более 0,2 мкг/л;
  • в спинномозговой жидкости – не более 5 мкг/л.

Услуги «Медэксперт»

Записаться на прием

ИМЕЮТСЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ. НЕОБХОДИМА КОНСУЛЬТАЦИЯ СПЕЦИАЛИСТА

Оформление заявки

×

Вызвать врача на дом

×

Результаты анализов

×

Оставить отзыв

×

Адрес: г. Казань, ул. Муштари, д.12а

Режим работы: 08:00 — 20:00, суббота: 08:00 — 15:00, воскресенье — выходной

Адрес: г. Казань, ул. Сиб. Хакима, д. 52

Режим работы: 08:00 — 20:00, суббота: 8.00 — 15.00, воскресенье — выходной

Адрес: г. Казань, ул. Сиб. Хакима, д. 50

Режим работы:

08:00 — 20:00, суббота: 8.00 — 15.00, воскресенье — выходной

Коронавирус и биомаркеры. Зачем нужны анализы на D-димер, С-реактивный белок и ферритин

Кроме лабораторных исследований, касающихся непосредственно коронавирусной инфекции SARS-CoV-2 (COVID-19), существуют другие исследования, которые следует обязательно проводить как во время заболевания, так и после него. В первую очередь, это анализы на некоторые биомаркеры, повышение уровня которых связано с разными осложнениями COVID-19.

В большинстве случаев врачи, ведущие пациентов с COVID-19, назначают им анализы на три биомаркера — С-реактивный белок (СРБ), ферритин и D-димер. Показатели этих биомаркеров следует отслеживать во время терапии COVID-19, а также (в некоторых случаях) и после выздоровления. Рассмотрим эти анализы поподробнее.

Анализ на С-реактивный белок

С-реактивный белок (СРБ, CRP) — один из белков крови, который одновременно крайне чувствительным, хотя и неспецифическим маркером некоторых воспалительных процессов.

Информация об уровне СРБ очень ценна именно в случае коронавирусной инфекции, поскольку уровень С-реактивного белка напрямую связан с тяжестью и прогрессированием болезни COVID-19. Если при лёгкой форме заболевания количество СРБ в крови существенно не возрастает, то при тяжелых формах она обычно увеличивается очень заметно. Именно поэтому исследование крови на содержание С-реактивного белка очень важно при ранних обследованиях пациентов с коронавирусом.

С точки зрения терапии COVID-19, С-реактивный белок играет роль основного лабораторного маркера активности процесса в легочной ткани. По степени повышения СРБ врач может определить объем поражения легких и назначить необходимую противовоспалительную терапию.

Анализ на С-реактивный белок можно сдать во всеукраинской сети лабораторий «МедЛаб». На данный момент доступны два вида исследований:

Анализ на ферритин

Ферритин – белок, основная функция которого заключается в транспортировке железа организмом. На это указывает и название белка, происходящее от латинского слова ferrum – «железо». Само по себе железо очень важно для красных клеток крови, которые переносят кислород. Таким образом, изменения уровня ферритина в крови могут указывать на:

  • анемию;
  • инфекцию, что препятствует транспортировке кислорода и нарушает функции красных кровяных телец.

В нашем случае инфекцией, нарушающей перенос кислорода, выступает коронавирусная инфекция и вызванное ею заболевание COVID-19. Повышение уровня ферритина коррелирует с тяжестью течения заболевания, т.е. чем выше ферритин, тем тяжелее течение болезни. Очень высокий уровень ферритина связан с риском развития дыхательной недостаточности – острого респираторного дистресс-синдрома (ГРДС), при котором пациенту могут назначить подключение к аппарату искусственной вентиляции легких (ИВЛ).

Анализ крови на ферритин можно сдать в лаборатории «МедЛаб». Сдавать его необходимо натощак.

ABC-медицина

Одним из методов, применяющихся при диагностике аллергических заболеваний, являются специфические анализы крови на аллергены, которые позволяют не только определить степень сенсибилизации и тип чужеродного для организма вещества, но и установить его роль в развитии данного аллергического заболевания.

Что собой представляет анализ крови на аллергены?

Определение аллергена по крови – это высокоинформативная, абсолютно безопасная диагностическая методика, которая проводится in vitro, то есть не требует непосредственного участия человека. При однократном применении данное лабораторное исследование позволяет выявить в сыворотке, плазме или цельной крови больного наличие специфических антител к неограниченному количеству аллергенов. В том случае, когда при проведении кожных аллергопроб существует вероятность развития сильной аллергической реакции, подобный анализ является единственно возможным способом диагностики.

Все лабораторные тесты, предусматривающие использование крови, условно подразделяются на специфические и неспецифические. В качестве исследований второго вида, направленных на выявление общих изменений в иммунной системе пациента, применяется клинический анализ крови, определение уровня С-реактивного белка, характеристика иммунокомпетентных клеток и пр.

Специфическая диагностика аллергенов включает в себя определение и измерение уровня аллергенспецифических иммуноглобулинов IgG/IgG4, являющихся биомаркерами гиперчувствительности к чужеродным белкам.

Методы специфической аллергодиагностики

  1. Иммуноферментный анализ на определение аллергена. Данное исследование назначается для измерения количества специфических иммуноглобулинов IgE в крови больного. В норме показатель общего иммуноглобулина находится в пределах 20–120 ед./мл. При наличии аллергии этот порог значительно повышен.
  2. Комплексный анализ пищевых аллергенов – определение специфических иммуноглобулинов IgG4, сгруппированных в так называемые аллергопанели (пищевые группы), оптимально подобранные по перекрестным реакциям.
  3. RAST-тест (радиоаллергосорбент). Данный анализ используется для определения концентрации в крови иммуноглобулинов IgE и IgG. С его помощью обнаруживается аллергия, однако не определяется степень чувствительности к вызывающему ее чужеродному белку.
  4. Иммунофлюоресцентный анализ на аллергены на сегодняшний день считается «золотым стандартом» в диагностике аллергических патологий. При помощи метода ImmunoCap, являющегося истинным количественным тестом, производится оценка концентрации IgE в сыворотке крови и определяется функциональное состояние организма. При проведении исследования используются индивидуальные аллергены (около 280 шт.), панели пищевых и ингаляционных аллергенов, панели для определения аллергенов животных, пылевых клещей, трав, грибков и пр.
  5. MAST-тест позволяет выявить изменения функциональной активности фагоцитов при их взаимодействии со специфическими агентами.
  6. Иммуноблот является высокоспецифичной и высокочувствительной референтной методикой, подтверждающей диагноз при положительном или неопределенном результате ИФА.
  7. Иммунохроматографический анализ – это пробы на аллергены, предусматривающие использование специальных экспресс-тестов. Данный метод применяется при исследовании сыворотки, плазмы или цельной крови.

Показания к проведению лабораторного исследования

  • Атопический дерматит, экзема, нейродермит и другие патологические состояния, сопровождающиеся значительным поражением кожных покровов.
  • Повышенная кожная чувствительность, способная спровоцировать ложноположительные или ложноотрицательные результаты.
  • Дискомфорт при проведении кожных тестов.
  • Выраженный дермографизм (кожная реакция на механическое раздражение).
  • Необходимость постоянного приема противоаллергических препаратов, снижающих чувствительность к аллергенам при проведении кожных тестов.
  • Грудной возраст.
  • Наличие в анамнезе анафилаксии или вероятность ее развития.

В клинике АВС-МЕДИЦИНА в Москве, предоставляющей широкий спектр амбулаторно-поликлинических услуг, реализован комплексный подход к проблеме диагностики и лечения аллергопатологий. У нас Вы сможете сдать анализ крови на аллергены, цена которого зависит от метода диагностики, а также при необходимости пройти полноценный курс лечения, разработанный в соответствии с мировыми стандартами терапии гистаминзависимых аллергических заболеваний.

Креатинин/Белок в моче — Биохимия мочи — показания к выполнению, оборудование, заболевания

Биохимический анализ включает много показателей, в том числе и на креатинин и белок. Повышение этих показателей указывает на неправильную работу почек, появление патологий. Исследования проводят в биохимическом анализаторе, он показывает наиболее точные показания, в отличие от тест-полосок.

Не всегда повышение этих показателей говорит о патологиях. Интенсивные физические нагрузки, пубертатный период, переохлаждение, сильные стрессы, инфекции половых органов, белковая диета — все это может стать причиной повышения белка и креатинина в моче. 

  1. беременность, поскольку необходимо следить за почками, ведь на них возрастает нагрузка;
  2. для профилактического осмотра;
  3. для оценки эффективности терапии, при лечении заболевания почек;
  4. сахарный диабет;
  5. воспалительные заболевания почек;
  6. гломерулонефрит;
  7. при заболеваниях щитовидной железы.

Соотношение белка к креатенину

Проводят для определения тяжести протекания протеинурии. Рассчитывают по формуле: показатели белка, делить на показатели креатинина. Норма — коэффициент не превышает 0,2.

Для исследования берется средняя порция мочи, собранная утром. Вечером необходимо провести туалет половых органов. С одобрения врача необходимо отказаться от принятия мочегонных препаратов, витамина С и физической нагрузки. Собирается до 5 мл жидкости в чистый, сухой пластмассовый контейнер. Можно хранить до 2-х часов (в холодильнике). 

О чем говорит повышенный белок и креатинин в моче?

  • новообразования;
  • обезвоживание;
  • аутоиммунные заболевания;
  • сахарный диабет;
  • недостаточность щитовидной железы;
  • на фоне лекарственных средств;
  • поликистоз в почках;
  • атеросклероз почечных артерий;
  • воспалительные заболевания (цистит, пиелонефрит, простатит и др.)

О чем говорит пониженный белок и креатинин в моче?

  • вегетарианство;
  • токсикоз при беременности;
  • неправильное питание — диеты.

В целом пониженные показатели не несут клинического интереса и для здоровья опасно только превышение нормы. 

Анализы не проводят во время менструации и при лечении инфекций половых путей, особенно при использовании свечей. Если врач настаивает на экстренном обследовании, то необходимо воспользоваться тампоном.

Высокочувствительный С-реактивный белок (кардио), (СРБ высокочувствительный, high sensitivity CRP, hs-CRP)

Синонимы: С-реактивный белок ультрачувствительный; СРБ кардио; СРБ. 

High-sensitivity C-reactive protein (hs-CRP), quantitative; Cardio CRP; High-sensitivity CRP; Ultra-sensitive CRP. 

Краткая информация об исследовании Высокочувствительный С-реактивный белок  

Уровень СРБ значительно повышается при инфекциях, воспалительных процессах и любом повреждении тканей. Традиционное использование теста СРБ нацелено на выявление инфекций и выраженного воспаления в организме (см. тест №43 С-реактивный белок). В таком стандартном варианте исследования используют диагностический порог СРБ <5 мг/л или <10 мг/л, превышение которого указывает на наличие значимого воспаления или инфекции, или повреждения тканей разного происхождения.  

Установлено, однако, что концентрация СРБ в небольшой степени повышается также при эндогенном сосудистом вялотекущем воспалении низкого уровня активности, сопровождающем процесс развития атеросклероза сосудов. Для выявления такого персистирующего воспаления низкой степени, связываемого с повышением кардиорисков, необходимы высокочувствительные методы определения СРБ, позволяющие достаточно точно различать концентрации СРБ даже в обычно считающемся нормальным диапазоне 0,5-5 (10) мг/л. 

Исследование СРБ в этих целях следует проводить в отсутствие каких-либо недавних заболеваний, инфекций, воспаления или повреждения тканей. При интерпретации результата СРБ, полученного в таких условиях, используют следующие критерии: уровень СРБ менее 1,0 мг/л – интерпретируется как оптимальный, 1-3 мг/л – промежуточный, а более 3 мг/л – указывающий на повышенный риск развития сердечно-сосудистых осложнений в будущем. По данным проведенных исследований, у лиц с уровнем СРБ, приближающемся к верхнему пределу стандартного диапазона нормы, потенциальный риск развития в будущем сердечно-сосудистых заболеваний ориентировочно от 1,5 до 4 раз выше, чем у лиц с значениями СРБ < 1,0 мг/л. 

Для индивидуального определения потенциального риска развития сердечно-сосудистых заболеваний (и их грозных осложнений — инфаркта, инсульта) применяют различные варианты подсчета факторов риска, из которых в настоящее время рекомендована и широко используется шкала SCORE. Она основана на учете возраста, пола, величины систолического артериального давления, уровня общего холестерина, факта курения (с уточнением по уровню холестерина антиатерогенных липопротеидов высокой плотности – ЛПВП). 

Определение потенциальных сердечно-сосудистых рисков с использованием подобных систем оценки рекомендуется применять взрослым лицам старше 40 лет, за исключением тех, кого автоматически относят к группе высокого и очень высокого сердечно-сосудистого риска (пациенты с сердечно-сосудистыми заболеваниями, сахарным диабетом, хронической болезнью почек или очень высокими уровнями отдельных факторов риска). Такая оценка позволяет вовремя применить нужные профилактические меры. Однако и инфаркт, и инсульт иногда неожиданно развиваются и у людей с умеренным или низким по указанным базовым факторам расчетным риском. Поэтому лицам, отнесенным в группу умеренного сердечно-сосудистого риска, для более точных оценок целесообразно определять дополнительные биомаркеры – в том числе факторы воспаления (высокочувствительный СРБ и фибриноген). Из них более широко экспертами обсуждается роль С-реактивного белка. 

Прогностическая значимость высокочувствительного исследования СРБ в оценке сердечно-сосудистых рисков ограничена тем, что его уровень в крови подвержен влиянию большого числа факторов. При выявлении признаков повышенного кардиориска в тесте высокочувствительного СРБ, его исследование целесообразно через некоторое время повторить, чтобы убедиться в том, что полученный результат не случаен. 

С какой целью определяют уровень высокочувствительного С-реактивного белка в крови  

Данное исследование является вариантом оценки уровня С-реактивного белка, предназначенным для дополнительного уточнения сердечно-сосудистых рисков у пациентов, отнесенных в группу умеренного риска по базовым факторам.  

Когда нецелесообразно определять уровень высокочувствительного С-реактивного белка в крови 

Следует понимать, что СРБ высокочувствительным (№ 1643) и СРБ стандартным (№ 43) тестами определяется один и тот же белок. При значениях СРБ выше 10 мг/л следует исключить наличие инфекционного процесса. Лицам с хроническими воспалительными заболеваниями (например, ревматоидным артритом) нецелесообразно применять высокочувствительный СРБ, поскольку уровень С-реактивного белка при этом заболевании всегда высокий, и использование высокочувствительного формата теста не имеет значения.  

Чувствительность теста (нижний предел определения): 0,1 мг/л.


Правила подготовки к исследованию на определение уровня высокочувствительного С-реактивного белка в крови

Взятие крови предпочтительно проводить утром натощак, после 8-14 часов ночного периода голодания (воду пить можно), допустимо днем через 4 часа после легкого приема пищи. 

Взятие крови для высокочувствительного исследования СРБ в целях дополнительной оценки сердечно-сосудистых рисков следует проводить в отсутствие каких-либо недавних заболеваний, инфекций, воспаления или повреждения тканей. Для остальных ситуаций см.тест № 43 С-реактивный белок.


В каких случаях проводят анализ крови на высокочувствительный С-реактивный белок

В дополнение к тестам липидного профиля для уточнения потенциальных сердечно-сосудистых рисков у лиц с умеренным риском при оценке по шкале SCORE.


Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Трактовка результатов исследования крови на высокочувствительный С-реактивный белок

Единицы измерения: мг/л.

Референсные значения: 0,1 мг/л-16160 мг/л. 

Интерпретация результатов (для целевой группы взрослых – см. Описание, Показания к назначению) 

При соблюдении указаний по подготовке к исследованию СРБ высокочувствительным методом в целях дополнительной оценки кардиорисков (см. разделы «Описание» и «Подготовка к исследованию») интерпретация результата СРБ (высокочувствительный) следующая: менее 1,0 мг/л – низкий риск, 1-3 мг/л – средний риск, концентрация более 3 мг/л – указывает на повышенный риск развития сердечно-сосудистых осложнений в будущем. 

В случае выявления признаков повышенного риска исследование СРБ высокочувствительным методом целесообразно повторить через некоторое время для исключения случайных причин. При уровне СРБ выше 10 мг/л следует исключить инфекционный процесс. См. также информацию по интерпретации к тесту № 43 С-реактивный белок (стандартный).  

Влияние лекарственных препаратов: нестероидные противовоспалительные лекарственные препараты (аспирин, ибупрофен и пр.), статины снижают уровень СРБ (поскольку снижают активность воспаления).


С-реактивный белок при коронавирусе: показатели, что показывает? Белок повышен в крови при ковиде?

Анализ крови на С-реактивный белок – СРБ – остается актуальным и в наши дни, поскольку по его результатам можно судить о наличии и активности воспалительных процессов. Диагностировать коронавирусную инфекцию или любую другую болезнь таким образом нельзя, однако значение СРБ дает возможность своевременно принять меры по предотвращению осложнений.

СРБ при Covid-19

Уровень С-реактивного белка при коронавирусе – это один из ключевых лабораторных показателей, которые требуют медицинского контроля при среднетяжелой и тяжелой форме инфекции. Его обязательно определяют также у пациентов, находящихся в критическом состоянии.

Именно С-реактивный белок (С — наша буква Ц) является основным маркером поражения легких, растущим по мере увеличения тяжести инфекционного процесса и масштабности воспалительных изменений.

Уровень СРБ обязательно определяют при затрудненном дыхании, когда число вдохов ≥ 22/мин, и сатурации

Сатурация измеряется специальным прибором – пульсоксиметром.

Норма

Нормальное значение С-реактивного белка не превышает 5 мг/л. Это универсальная величина, не зависящая от возраста, пола. У новорожденных детей она не должна подниматься больше 0.15 мг/л.

Если СРБ повышен, значит, в организме развивается воспаление, об интенсивности которого свидетельствует степень данного повышения.

Благодаря многолетним клиническим исследованиям и внедрению высокотехнологичных методик ученые вывели еще один параметр – так называемого «базового значения СРБ». Его уровень позволяет оценить, насколько высок риск поражения сердечно-сосудистой системы у человека.

Заметим, что указанный риск можно определить даже при отсутствии воспалительной реакции. Норма базового значения СРБ ≤ 1 мг/л.

Для максимально точных результатов рекомендуется сдавать анализ на С-реактивный белок в одной и той же лаборатории, так как в разных клиниках могут использоваться различные методики:

  • ИФА – иммуноферментный анализ;
  • РИД – метод радиальной иммунодиффузии;

Нефелометрия, основанная на интенсивности светового потока, рассеиваемого взвешенными частицами вещества.

Если повторные анализы сделать другими методами, то интерпретация результатов может быть неточной.

Кому показан анализ

Тест на С-реактивный белок в обязательном порядке делается при поступлении больного в стационар и диагностировании Covid-19 как минимум средней тяжести. Далее анализ повторяют по мере необходимости.

Результаты интерпретируются в соответствии со следующими значениями:

Если на фоне приема антибиотиков существенного снижения уровня СРБ не наблюдается, то крайне высок риск летального исхода.

Выработка С-реактивного белка начинает расти в первые 5 часов после заражения и достигает своего пика ко 2-3 дню болезни.

Более детальная расшифровка результатов анализа выглядит так (мг/л):

  • отрицательно –
  • слабоположительно – 3-6;
  • положительно – 6-12;
  • резко положительно – >12.

СРБ и СОЭ

Помимо С-реактивного белка, воспалительный процесс показывает также СОЭ – скорость оседания эритроцитов. Оба этих параметра увеличиваются на ранних стадиях заболеваний, но между ними есть существенная разница.

Во-первых, СРБ появляется и исчезает быстрее, чем меняется СОЭ. Поэтому на начальных этапах диагностики он более информативен.

Во-вторых, при адекватном лечении СРБ уменьшается уже примерно через неделю, тогда как СОЭ падает не раньше чем через 2-3 недели.

В-третьих, на показатель СОЭ оказывает влияние время суток, состав плазмы крови, уровень эритроцитов, пол (у женщин СОЭ почти всегда выше). Параметр СРБ не зависит от указанных факторов.

Следовательно, анализ на С-реактивный белок является более точным методом оценки интенсивности воспалительного процесса, нежели СОЭ. Поэтому его проводят для установления диагноза, выявления острых и хронических воспалений, а также их активности. Кроме того, результаты данного анализа позволяют оценить эффективность проводимой терапии.

При СРБ >60 мг/л или его увеличении втрое на 7-14 день заболевания обязательно назначаются ингибиторы интерлейкинов – Тоцилизумаб, Сарилумаб, Канакинумаб. В тяжелых случаях, если компьютерная томограмма показала 2-3 степень поражения легких, используются следующие препараты:

  • Тофацитиниб;
  • Барицитиниб;
  • Олокизумаб;
  • Левилимаб.

Для назначения перечисленных в списке средств нужно соблюдение 2-3 пунктов из перечня ниже:

  • СРБ >30 мг/л;
  • падение сатурации;
  • температура >38° в течение 3-х дней;
  • лейкоциты (WBS)
  • лимфоциты

Содержание в крови С-реактивного белка уменьшается у каждого пациента с разной скоростью. Пограничными показателями, свидетельствующими о начале выздоровления, считаются следующие:

  • СРБ
  • сатурация ≥ 95%;
  • нормальная температура 36.6°.

При таких параметрах больного можно выписывать из больницы и переводить на амбулаторное лечение.

Особенности С-реактивного белка в пожилом возрасте

Уровень СРБ у пожилых людей может повышаться из-за возрастных изменений и на фоне сопутствующих болезней. Одна из причин – деменция, при которой С-реактивного белка становится очень много.

Старческое слабоумие наиболее часто развивается при генерализованном – общем – воспалении, связанном с атеросклерозом сосудов, высокой концентрацией триглицеридов (жиров) и липопротеинов низкой плотности.

Кроме того, при нарушении биологических процессов, обусловленных сменой дня и ночи (циркадных ритмов), и недостатке ночного сна в крови повышается содержание веществ, вызывающих воспаление. Растет при этом и уровень С-реактивного белка.

Повышение СРБ характерно для гипертонии на фоне сужения сосудов из-за холестериновых отложений, а также ожирения. Инсульт нередко является осложнением атеросклероза, который сопровождается воспалением сосудистой стенки, поэтому сразу после приступа происходит резкий выброс С-реактивного белка в кровь.

Одной из причин повышения СРБ может быть пародонтоз – воспаление десен. Причем чем выше его уровень, тем тяжелее степень пародонтоза.

Увеличенные концентрации СРБ сопровождают воспалительные патологии кишечника, связанные с нерациональным питанием и нездоровым образом жизни, а также болезнь Крона и язвенный колит.

Роль СРБ в организме и возможные причины повышения

С-реактивный белок – это связующее звено между антигенами и иммунными клетками. При попадании в организм чужеродных агентов – вирусов, бактерий, фрагментов поврежденных клеток – в печени стартует выработка СРБ. В его задачу входит распознавание вражеского «профиля» и активация иммунного ответа.

Такой механизм действует при ряде патологий, среди которых:

  • аутоиммунные – амилоидоз, ревматизм, системная красная волчанка;
  • инфекционные – заражение крови (сепсис), менингит, пневмония, хламидиоз, микоплазма;
  • онкологические – карцинома, меланома, лейкоз;
  • глистные инвазии – лямблиоз, лейшманиоз, токсоплазмоз;
  • некротические – панкреонекроз, отторжение донорского органа или ткани, астма с поражением легких, инфаркт;
  • разрыв плодного пузыря при беременности, угрожающий выкидышем.

Виновник воспаления найден: S-белок коронавируса

Ученые специалисты по молекулярной биологии исследовали механизм воспалительного процесса при попадании Sars-CoV-2 в организм и выявили особую роль белка S. Именно сильное повреждение тканей (в основном легочной) является одним из наиболее грозных осложнений коронавирусной инфекции, способной привести к смерти.

В ходе исследования было установлено, что основная часть коронавирусного S-белка, либо вся его молекула могут вызвать внутритканевые повреждения, напрямую провоцируя воспаление.

Такой вывод сделала группа ученых под руководством П. Уорка из университета Ньюкасла. В нее вошли эксперты из Китая и Австралии. Результаты проведенного эксперимента были напечатаны в электронной библиотеке bioRxiv.

Оказалось, что S-белок Sars-CoV-2 обладает свойством изменять работу клеток и заставлять их синтезировать в большом объеме сигнальные молекулы, создающие условия для воспалительных процессов.

Ранее в медицинском сообществе эти воспалительные реакции считали следствием сверхактивной работы иммунной системы, чрезмерно реагирующей на коронавирус. Но открытие Уорка и его группы показало, что виновником избыточного иммунного ответа является коронавирусный белок S.

Полученные сведения ученые планируют использовать в лечении Covid-19 и протестировать ряд препаратов от онкологии. Возможно, они сумеют нейтрализовать S-белковые вирусные молекулы.

Коронавирусный S-белок как основа для вакцин

Обнадеживающие результаты получила еще одна совместная группа ученых из университета Техаса и Национального института аллергических и инфекционных болезней США под руководством Д. Маклиллана. В статье научного журнала Science в деталях описано трехмерное строение S-белка, который является ключевым элементом «Короны» Covid-19.

S-белки располагаются на поверхности вирионов – вирусных частиц. Они отходят от нее подобно лучам или иглам, благодаря чему называются Spike («шип», англ.). Именно эти белки подвергаются атакам антител, синтезируемых организмом-донором.

А самому коронавирусу S-белки нужны для заражения клеток. Их внешняя поверхность почти не отличается от знакомых клеткам молекул, что позволяет вредному микробу беспрепятственно соединяться с соответствующими рецепторами на мембранах и проникать внутрь. Именно таков механизм взаимодействия коронавирусных белков с ангиотензинпревращающим белком АПФ 2.

Применив крио-ЭМ – криогенную электронную микроскопию – ученые увидели трехмерную форму поверхности S-белка с разрешением до 3.5 А и установили, что белок меняет пространственное расположение атомов внутри молекулы: приготовившись к инфицированию, она имеет одну форму, а после связывания с клеткой-мишенью – другую.

Маклиллан и его коллеги изучали свойства первой молекулы, до ее преобразования, и установили, что соединяющийся с ферментом АПФ 2 участок белка обладает повышенной аффинностью, то есть может легко и прочно связываться с клетками, следовательно, быстро распространяться в организме.

Знания о точной структуре и свойствах S-белка позволяют увидеть новые возможности для создания эффективных вакцин и антител. Не исключено, что вакцину удастся получить даже непосредственно на основе коронавирусного S-белка, просто модифицировав его. И тогда грозная инфекция наконец сама станет мишенью.

Советы по получению максимально точных результатов и вопросы

Совет №1

Перед сдачей анализа необходимо предупредить врача о принимаемых препаратах, так как повышать уровень СРБ могут оральные контрацептивы и эстрогенсодержащие средства. Стероиды и салицилаты, напротив, снижают его.

Совет №2

Выработка СРБ может увеличиваться при курении и ожирении, после травм и недавних оперативных вмешательств. Поэтому за 3-4 часа до взятия биоматериала нежелательно курить.

Как определяют эффективность лечения по уровню С-реактивного белка?

СРБ «живет» примерно 6 часов, и при улучшении состояния пациента его концентрация быстро падает. По анализам крови эту тенденцию легко отслеживать.

Как быстро появляется С-реактивный белок в крови после заражения?

Его содержание в крови увеличивается сразу после инфицирования – в первые 6-12 часов, максимум – на 2-й день. При воспалениях он может вырасти в десятки и даже сотни раз, благодаря чему тест на СРБ весьма информативен.

Кроме того, данный параметр позволяет определить вирусную и бактериальную природу воспалительного процесса по цифровому показателю степени концентрации. На фоне адекватной терапии он быстро уменьшается уже на 2-й день.

Читайте также: Температурный хвост после коронавируса: сколько держится температура 37, 37.2 после ковида?

Источник apkhleb.ru

Пишу о том, что мне интересно. Чтобы не пропустить что нибудь важное, рекомендую подписаться на 9111.ру

Долгосрочные повышенные уровни воспалительного белка у бессимптомных лиц, инфицированных SARS-CoV-2

doi: 10.3389/fimmu.2021.709759. Электронная коллекция 2021. Лиина Цэрел 1 , Пия Йыги 2 3 , Пол Наабер 4 5 , Юлия Масловская 1 , Анника Хелинг 1 , Ахто Салуметс 1 , Ева Зусинайте 6 , Хиие Соорг 5 , Фредди Ляттекиви 7 8 , Диана Ингерайнен 9 , Мари Соотс 10 , Каролин Тоомпере 11 , Катрин Каарна 8 12 , Кай Кисанд 1 , Ирья Лутсар 5 , Пярт Петерсон 1

Принадлежности Расширять

Принадлежности

  • 1 Молекулярная патология, Институт биомедицины и трансляционной медицины, Тартуский университет, Тарту, Эстония.
  • 2 Детская клиника Клиники Тартуского университета, Тарту, Эстония.
  • 3 Кафедра педиатрии, Институт клинической медицины, Тартуский университет, Тарту, Эстония.
  • 4 SYNLAB Эстония, Таллинн, Эстония.
  • 5 Кафедра микробиологии, Институт биомедицины и трансляционной медицины, Тартуский университет, Тарту, Эстония.
  • 6 Технологический институт Тартуского университета, Тарту, Эстония.
  • 7 Кафедра патофизиологии, Институт биомедицины и трансляционной медицины, Тартуский университет, Тарту, Эстония.
  • 8 Центр клинических исследований, Клиника Тартуского университета, Тарту, Эстония.
  • 9 Центр семейного врача Ярвеотса, Таллинн, Эстония.
  • 10 Центр семейного врача Курессааре, Курессааре, Эстония.
  • 11 Кафедра эпидемиологии и биостатистики, Институт семейной медицины и общественного здравоохранения, Тартуский университет, Тарту, Эстония.
  • 12 Центр клинических исследований, Институт клинической медицины, Тартуский университет, Тарту, Эстония.
Бесплатная статья ЧВК

Элемент в буфере обмена

Лиина Цэрел и соавт.Фронт Иммунол. .

Бесплатная статья ЧВК Показать детали Показать варианты

Показать варианты

Формат АннотацияPubMedPMID

дои: 10.3389/fimmu.2021.709759. Электронная коллекция 2021.

Авторы

Лиина Цэрел 1 , Пия Йыги 2 3 , Пол Наабер 4 5 , Юлия Масловская 1 , Анника Хелинг 1 , Ахто Салуметс 1 , Ева Зусинайте 6 , Хиие Соорг 5 , Фредди Ляттекиви 7 8 , Диана Ингерайнен 9 , Мари Соотс 10 , Каролин Тоомпере 11 , Катрин Каарна 8 12 , Кай Кисанд 1 , Ирья Лутсар 5 , Пярт Петерсон 1

Принадлежности

  • 1 Молекулярная патология, Институт биомедицины и трансляционной медицины, Тартуский университет, Тарту, Эстония.
  • 2 Детская клиника Клиники Тартуского университета, Тарту, Эстония.
  • 3 Кафедра педиатрии, Институт клинической медицины, Тартуский университет, Тарту, Эстония.
  • 4 SYNLAB Эстония, Таллинн, Эстония.
  • 5 Кафедра микробиологии, Институт биомедицины и трансляционной медицины, Тартуский университет, Тарту, Эстония.
  • 6 Технологический институт Тартуского университета, Тарту, Эстония.
  • 7 Кафедра патофизиологии, Институт биомедицины и трансляционной медицины, Тартуский университет, Тарту, Эстония.
  • 8 Центр клинических исследований, Клиника Тартуского университета, Тарту, Эстония.
  • 9 Центр семейного врача Ярвеотса, Таллинн, Эстония.
  • 10 Центр семейного врача Курессааре, Курессааре, Эстония.
  • 11 Кафедра эпидемиологии и биостатистики, Институт семейной медицины и общественного здравоохранения, Тартуский университет, Тарту, Эстония.
  • 12 Центр клинических исследований, Институт клинической медицины, Тартуский университет, Тарту, Эстония.

Элемент в буфере обмена

Полнотекстовые ссылки Параметры отображения цитирования

Показать варианты

Формат АннотацияPubMedPMID

Абстрактный

Клинические признаки инфекции SARS-CoV-2 варьируются от бессимптомного до тяжелого течения с опасными для жизни осложнениями.Понимание стойкости иммунных ответов у бессимптомных лиц заслуживает особого внимания из-за их важности для контроля распространения инфекций. Здесь мы изучили реакцию антител и Т-клеток, а также широкий спектр маркеров воспаления у 56 лиц с положительным результатом на антитела к SARS-CoV-2, выявленных в результате скрининга населения после первой волны инфекции SARS-CoV-2. Эти, в основном бессимптомные люди, были повторно проанализированы через 7-8 месяцев после заражения вместе со 115 серонегативными контрольными лицами того же возраста.Мы обнаружили, что через 7-8 месяцев после заражения их антитела к белку нуклеокапсида (N) SARS-CoV-2 снизились, тогда как мы не обнаружили снижения антител к рецептор-связывающему домену Spike (S-RBD) по сравнению с результатами при серопозитивности. удостоверение личности. В отличие от антител к белку N, антитела к S-RBD коррелировали со способностью нейтрализовать вирус и с ответами Т-клеток CD4 + , что измерялось антиген-специфической активацией маркеров CD137 и CD69. Неожиданно мы обнаружили, что у бессимптомных лиц с положительным результатом на антитела повышены уровни в сыворотке S100A12, TGF-альфа, IL18 и OSM, маркеров активированных макрофагов-моноцитов, что свидетельствует о длительном стойком воспалительном эффекте, связанном с вирусной инфекцией у бессимптомных лиц.Наши результаты подтверждают доказательства долгосрочного персистенции воспалительного процесса и необходимость постинфекционного клинического мониторинга бессимптомных лиц, инфицированных SARS-CoV-2.

Ключевые слова: ОСМ; С100А12; инфекция SARS-CoV-2; Т-клеточный ответ; антитела; маркеры воспаления.

Авторское право © 2021 Tserel, Jõgi, Naaber, Maslovskaja, Häling, Salumets, Zusinaite, Soeorg, Lättekivi, Ingerainen, Soots, Toompere, Kaarna, Kisand, Lutsar and Peterson.

Заявление о конфликте интересов

Автор PN работал в компании SYNLAB Эстония. Остальные авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Цифры

Рисунок 1

Уровни антител к SARS-CoV-2 у бессимптомных…

Рисунок 1

Уровни антител к SARS-CoV-2 у бессимптомных (AS), симптоматических (S) и лиц с отрицательным контролем (NC)…

Фигура 1

Уровни антител к SARS-CoV-2 у бессимптомных (AS), симптомных (S) и пациентов с отрицательным контролем (NC), измеренные с помощью (A) CLIA (n = 29 AS, 8 S и 115 NC) и ( B) LIPS к белку N (n = 44 AS, 12 S и 115 NC) и (C) LIPS к S-RBD (n = 44 AS, 12 S и 115 NC) через 7-8 месяцев после заражения.CLIA представлен как кратная разница между образцом и калибратором , а результаты LIPS представлены в виде % от положительного контроля. Статистические различия рассчитывали с помощью критерия Крускала-Уоллиса с тестом множественных сравнений Данна. Статистическая значимость на графиках скрипки отмечена как **** = прил. Р ≤ 0,0001; нс, несущественно.

Рисунок 2

Уровни антител к SARS-CoV-2 у бессимптомных…

Рисунок 2

Уровни антител к SARS-CoV-2 у бессимптомных лиц при серопозитивности и через 7-8 месяцев после…

Фигура 2

Уровни антител к SARS-CoV-2 у бессимптомных лиц при серопозитивности и через 7-8 месяцев после заражения. (A) CLIA (n = 29), (B) LIPS к N белку (n = 44) и (C) LIPS к S-RBD (n = 44). CLIA дается как кратная разница между образцом и калибратором , а результаты LIPS представляют собой процент положительного контроля. Статистические различия рассчитывали с помощью двустороннего критерия Уилкоксона. Статистическая значимость на точечных графиках отмечена как *** = прил. P ≤ 0,001 и **** = прил. Р ≤ 0,0001; нс, несущественно.

Рисунок 3

(A) Репрезентативные графики FACS, показывающие…

Рисунок 3

(A) Репрезентативные графики FACS, показывающие специфические для SARS-CoV-2 CD4 + Т-клеточные ответы в…

Рисунок 3

(A) Репрезентативные графики FACS, показывающие специфические для SARS-CoV-2 ответы CD4 + Т-клеток у лиц с положительным и отрицательным антителами.Доля CD137+ CD69+ активированных CD4 + Т-клеток без пептидов или с пулами пептидов S, N и M SARS-CoV-2 указана в правом верхнем квадранте. (B) Процентное содержание активированных CD4 + Т-клеток у бессимптомных (AS, n=34), симптоматических (S, n=11) и пациентов с отрицательным контролем (NC, n=41). (C) Корреляция специфических ответов Т-клеток с уровнями антител к S-RBD (n=45). Критерий Крускала-Уоллиса с проверкой множественных сравнений Данна использовался для расчета различий в (B) , а ранговый корреляционный анализ Спирмена использовался в (C) .Статистическая значимость на графике скрипки отмечена как **** = прил. Р ≤ 0,0001; нс, несущественно.

Рисунок 4

(A–D) Повышение маркеров воспаления в…

Рисунок 4

(A–D) Повышение маркеров воспаления при бессимптомном (АС, n=39), симптомном (S, n=11) и отрицательном…

Рисунок 4

(A–D) Повышение маркеров воспаления у бессимптомных (АС, n=39), симптоматических (S, n=11) и пациентов с отрицательным контролем (NC, n=54). (E) Кластерная корреляционная матрица восьми маркеров воспаления. Статистические различия в графиках скрипки были рассчитаны с помощью критерия Крускала-Уоллиса с тестом множественных сравнений Данна. Статистическая значимость на графиках скрипки отмечена * = прил. P ≤ 0,05, ** = прил. P ≤ 0,01, *** = прил. P ≤ 0,001 и **** = прил. Р ≤ 0,0001; нс, несущественно. Значения корреляции Спирмена r приведены в корреляционной матрице.

Похожие статьи

  • Продольное профилирование ответа антител у пациентов с COVID-19 в больнице третичного уровня в Пекине, Китай.

    Feng X, Yin J, Zhang J, Hu Y, Ouyang Y, Qiao S, Zhao H, Zhang T, Li X, Zhang L, Zhang J, Jin R, Feng Y, Su B. Фэн X и др. Фронт Иммунол. 2021 15 марта; 12:614436. doi: 10.3389/fimmu.2021.614436. Электронная коллекция 2021. Фронт Иммунол. 2021. PMID: 337

  • Бесплатная статья ЧВК.

  • Легкая форма заболевания SARS-CoV-2 не связана с повторными инфекциями и обеспечивает стойкий спайк, нуклеокапсид и вируснейтрализующие антитела.

    Schuler CF 4th, Gherasim C, O’Shea K, Manthei DM, Chen J, Zettel C, Troost JP, Kennedy AA, Tai AW, Giacherio DA, Valdez R, Baldwin JL, Baker JR Jr. Schuler CF 4th, et al. Микробиологический спектр. 2021 31 октября; 9 (2): e0008721. doi: 10.1128/Spectrum.00087-21. Epub 2021 1 сентября. Микробиологический спектр. 2021. PMID: 34468184 Бесплатная статья ЧВК.

  • Расшифровка роли гуморального и клеточного иммунного ответа в различных вакцинах против COVID-19 — сравнение генов-кандидатов на вакцину у карликовых хомячков Роборовского.

    Тримперт Дж., Хервиг С., Стейн Дж., Владимирова Д., Адлер Дж. М., Абдельгавад А., Фиршинг Т. С., Тома Т., Сехули Дж., Остерридер К., Грубер А. Д., Савицки Б., Сандер Л. Е., Цихон Г. Тримперт Дж. и др. Вирусы. 2021 16 ноября; 13 (11): 2290. дои: 10.3390/v13112290. Вирусы. 2021. PMID: 34835096 Бесплатная статья ЧВК.

  • Эволюция ответов антител в течение 13 месяцев после заражения SARS-CoV-2 и риск повторного заражения.

    Галле Ф., Гантнер П., Брюэль Т., Веле А., Планас Д., Вендлинг М.Дж., Байер С., Солис М., Лаугель Э., Рейкс Н., Шнайдер А., Глэди Л., Панагет Б., Коллонг Н., Партизан М., Лессингер Дж. М., Фонтане А. , Рей Д., Хансманн Ю., Клинг-Пиллиттери Л., Шварц О., Де Сез Дж., Мейер Н., Гонсалес М., Шмидт-Муттер С., Фафи-Кремер С. Галле Ф. и др. ЭБиоМедицина. 2021 Сентябрь;71:103561. doi: 10.1016/j.ebiom.2021.103561. Epub 2021 27 августа. ЭБиоМедицина. 2021. PMID: 34455390 Бесплатная статья ЧВК.

  • Количественная серология SARS-CoV-2 у детей с мультисистемным воспалительным синдромом (MIS-C).

    Ростад К.А., Чахруди А., Мантус Г., Лапп С.А., Техерани М., Макой Л., Тарквинио К.М., Басу Р.К., Као С., Линам В.М., Циммерман М.Г., Ши П.Ю., Менахери В.Д., Остер М.Е., Эдупуганти С., Андерсон Э.Дж., Сутар М.С. , Враммерт Дж., Джагги П. Ростад К.А. и соавт. Педиатрия. 2020 декабрь;146(6):e2020018242.doi: 10.1542/пед.2020-018242. Epub 2020 2 сентября. Педиатрия. 2020. PMID: 32879033

Цитируется

2 статьи
  • Роль онкостатина М и его рецепторных комплексов в защите, регенерации и отказе кардиомиоцитов.

    Кубин Т., Гаджавада П., Брамладж П., Хейн С., Берге Б., Четинкая А., Бургер Х., Шёнбург М., Шапер В., Чой Ю.Х., Рихтер М.Кубин Т. и соавт. Int J Mol Sci. 2022 5 февраля; 23 (3): 1811. дои: 10.3390/ijms23031811. Int J Mol Sci. 2022. PMID: 35163735 Бесплатная статья ЧВК. Рассмотрение.

  • Стойкая аутоиммунная активация и провоспалительное состояние при пост-COVID-синдроме.

    Акоста-Ампудиа Ю., Монсальве Д.М., Рохас М., Родригес Ю., Сапата Э., Рамирес-Сантана С., Анайя Х.М. Акоста-Ампудиа Ю. и др.J заразить дис. 2022, 25 января: jiac017. doi: 10.1093/infdis/jiac017. Онлайн перед печатью. J заразить дис. 2022. PMID: 35079804 Бесплатная статья ЧВК.

использованная литература

    1. Лавеццо Э., Франчин Э., Чаварелла С., Куомо-Данненбург Г., Барзон Л., Дель Веккио С. и др. . Подавление вспышки SARS-CoV-2 в итальянском муниципалитете Во.Нат (2020) 584 (7821): 425–9. дои: 10.1038/s41586-020-2488-1 — DOI — пабмед
    1. Ален М., Исмо Л., Ассеми М.А., Кетема Д.Б., Менгист Б., Кэсси Б. и др.. Количество бессимптомных случаев COVID-19 на протяжении всей инфекции: систематический обзор и метаанализ. PloS One (2021) 16(3):e0249090. doi: 10.1371/journal.pone.0249090 — DOI — ЧВК — пабмед
    1. Кронбихлер А., Кресс Д., Юн С., Ли К.Х., Эффенбергер М., Шин Дж.И.Бессимптомные пациенты как источник инфекций COVID-19: систематический обзор и метаанализ. Int J Infect Dis (2020) 98: 180–6. дои: 10.1016/j.ijid.2020.06.052 — DOI — ЧВК — пабмед
    1. Atyeo C, Fischinger S, Zohar T, Slein MD, Burke J, Loos C, et al.. Отчетливый ранний серологический след с выживанием SARS-CoV-2. Иммун (2020) 53 (3): 524–32.e4. doi: 10.1016/j.immuni.2020.07.020 — DOI — ЧВК — пабмед
    1. Long QX, Tang XJ, Shi QL, Li Q, Deng HJ, Yuan J и др.. Клиническая и иммунологическая оценка бессимптомных инфекций SARS-CoV-2. Nat Med (2020) 26 (8): 1200–4. дои: 10.1038/s41591-020-0965-6 — DOI — пабмед

Показать все 30 ссылок

Типы публикаций

  • Поддержка исследований, не-U.С. Правительство

термины MeSH

  • Антитела, Нейтрализующие/иммунология
  • Антитела, Вирус/кровь*
  • Антитела, Вирус/иммунология
  • CD4-положительные Т-лимфоциты / иммунология*
  • Нуклеокапсидные белки коронавируса / иммунология
  • Воспаление/иммунология
  • Медиаторы воспаления/кровь*
  • Фосфопротеины / иммунология
  • Белковые домены / иммунология
  • Пиковый гликопротеин, коронавирус / иммунология
  • Трансформирующий фактор роста альфа / кровь

вещества

  • Нуклеокапсидные белки коронавируса
  • Спайковый гликопротеин, коронавирус
  • Трансформирующий фактор роста альфа
  • нуклеокапсидный фосфопротеин, SARS-CoV-2
  • спайковый белок, SARS-CoV-2

LinkOut — больше ресурсов

  • Полнотекстовые источники

  • Медицина

  • Исследовательские материалы

  • Разное

Повышенные концентрации белка в крови новорожденных и риск расстройства аутистического спектра и социальных нарушений в возрасте 10 лет среди детей, рожденных до 28-й недели беременности

  • Joseph, R.М. и др. Чрезвычайно низкий гестационный возраст и очень низкая масса тела при рождении для гестационного возраста являются факторами риска расстройства аутистического спектра в большом когортном исследовании 10-летних детей, рожденных на 23-27 неделе беременности. утра. Дж. Обст. Гинекол. 216 , 304.e1–304.e16 (2017).

    Артикул Google ученый

  • Lyall, K. et al. Меняющаяся эпидемиология расстройств аутистического спектра. год. Rev. Public Health 38 , 81–102 (2017).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Гарднер, Ф. и др. Поведенческая и эмоциональная адаптация подростков в общеобразовательной школе, родившихся до 29 недель беременности. Педиатрия 114 , 676–682 (2004).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Ричи, К., Бора, С. и Вудворд, Л. Дж. Социальное развитие детей, рожденных глубоко недоношенными: систематический обзор. Дев. Мед. Детский Нейрол. 57 , 899–918 (2015).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Константино, Дж. Н. и Грубер, С. П. Шкала социальной реакции, второе издание (SRS-2) (Западные психологические службы, Лос-Анджелес, 2012 г.).

    Google ученый

  • Джонсон С. и Волк Д. Поведенческие последствия и психопатология в подростковом возрасте. Ранний гул. Дев. 89 , 199–207 (2013).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Korzeniewski, S.J. et al. Оценка по шкале социальной реактивности поведенческого фенотипа недоношенных детей десятилетнего возраста, родившихся экстремально недоношенными. Дж. Дев. Поведение Педиатр. 38 , 697–705 (2017).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Дамманн, О.и Левитон, А. Прерывистое или устойчивое системное воспаление и недоношенный мозг. Педиатр. Рез. 75 , 376–380 (2014).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Van Steenwinckel, J. et al. Повреждение головного мозга недоношенного ребенка: новый взгляд на роль воспаления. Биохим. соц. Транс. 42 , 557–563 (2014).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Мовсас Т.З. и др. Расстройство аутистического спектра связано с увеличением желудочков у детей с низким весом при рождении. Дж. Педиатр. 163 , 73–78 (2013).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Schumann, C.M. et al. Исследование развития коры головного мозга в раннем детстве при аутизме с помощью продольной магнитно-резонансной томографии. J. Neurosci. 30 , 4419–4427 (2010).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Ян Д.Ю., Бим Д., Пелфри К.А., Абдуллахи С. и Джоу Р.Дж. Морфологические маркеры коры головного мозга у детей с аутизмом: исследование толщины, площади, объема и гирификации с помощью структурной магнитно-резонансной томографии. Мол. Аутизм 7 , 11 (2016).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Хогевен, Дж., Сальви, К. и Графман, Дж. «Эмоциональный интеллект»: уроки поражений. Trends Neurosci. 39 , 694–705 (2016).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Грекуччи А., Рубикондо Д., Сюгждайте Р., Суриан Л. и Джоб Р. Выявление социальных недостатков в мозге аутистов. Морфометрическое исследование на основе источников. Фронт. Неврологи. 10 , 388 (2016).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Сато В. и др. Уменьшение объема серого вещества в социальной сети мозга у взрослых с расстройствами аутистического спектра. Фронт. Гум. Неврологи. 11 , 395 (2017).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Bethlehem, R. A. I. et al. Интраназальный окситоцин усиливает внутреннюю функциональную связность кортикостриарной системы у женщин. Перевод. Психиатрия 7 , e1099 (2017).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Zheng, Z. et al. Нейротрофический фактор периферического мозга при расстройствах аутистического спектра: систематический обзор и метаанализ. Науч. Респ. 6 , 31241 (2016).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Рийконен Р.Лечение расстройств аутистического спектра инсулиноподобными факторами роста. евро. Дж. Педиатр. Нейрол. 20 , 816–823 (2016).

    Артикул пабмед Google ученый

  • O’Shea, T. M. et al. Исследование ELGAN головного мозга и связанных с ним нарушений у новорожденных с крайне низким гестационным возрастом. Ранний гул. Дев. 85 , 719–725 (2009).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Джозеф Р.М. и др. Распространенность и связанные с ней особенности расстройства аутистического спектра у новорожденных с крайне низким гестационным возрастом в возрасте 10 лет. Аутизм Res. 10 , 224–232 (2017).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Юдкин, П. Л., Абуальфа, М., Эйр, Дж. А., Редман, К. В. и Уилкинсон, А. Р. Новые процентили массы тела при рождении и окружности головы для гестационного возраста от 24 до 42 недель. Ранний гул. Дев. 15 , 45–52 (1987).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Elliott, CD Шкалы дифференциальных способностей 2-е изд. (Pearson, San Antonio, 2007).

    Google ученый

  • Раттер, М., Бейли, А. и Лорд, К. Опросник социальной коммуникации — Руководство (Западные психологические службы, Лос-Анджелес, 2003 г.).

    Google ученый

  • Раттер, М., Ле Кутер, А. и Лорд, К. «Интервью по диагностике аутизма – пересмотренное». (Западные психологические службы, Лос-Анджелес, 2003 г.).

    Google ученый

  • Lord, C. et al. График наблюдения за диагностикой аутизма™, второе издание (Western Psychological Services, Торранс, 2012 г.).

    Google ученый

  • Виркуд Ю.В., Тодд Р.Д., Абакки А.М., Чжан Ю. и Константино Дж. Н. Семейная агрегация количественных признаков аутизма при мультиплексном и простом аутизме. утра. Дж. Мед. Жене. Б Нейропсихология. Жене. 150B , 328–334 (2009).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Фихорова Р.Н. и др. Системное воспаление у новорожденных с крайне низким гестационным возрастом после инфекций мочеполовой системы у матери. утра.Дж. Репрод. Иммунол. 73 , 162–174 (2015).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Левитон, А. и др. Белки, связанные с воспалением, в крови новорожденных с экстремально низким гестационным возрастом. Вклад воспаления в появление регуляции развития. Цитокин 53 , 66–73 (2011).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Се, Дж.и другие. Иммунологический цитокиновый профиль идентифицирует TNF-α как ключевую молекулу, нарушенную у детей с аутизмом. Онкотаргет . 8 , 82390–82398 (2017).

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Маси, А. и др. Цитокиновые аберрации при расстройствах аутистического спектра: систематический обзор и метаанализ. Мол. Психиатрия 20 , 440–446 (2015).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Сингх, С.и другие. Уровни тиреотропного гормона и интерлейкина-8 в сыворотке крови у мальчиков с расстройствами аутистического спектра. J. Нейровоспаление. 14 , 113 (2017).

    Артикул Google ученый

  • Маси, А. и др. Уровни цитокинов и ассоциации с тяжестью симптомов у детей мужского и женского пола с расстройствами аутистического спектра. Мол. Аутизм 8 , 63 (2017).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Брин, В.и другие. Цитокиновый профиль при расстройствах аутистического спектра у детей. Дж. Мол. Неврологи. 61 , 1–7 (2017).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Тонхайзерова И. и др. Воспалительная активность при расстройствах аутистического спектра. Доп. Эксп. Мед. биол. 861 , 93–98 (2015).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Судзуки, К.и другие. Профили цитокинов плазмы у субъектов с высокофункциональными расстройствами аутистического спектра. PLoS ONE 6 , e20470 (2011 г.).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Ashwood, P. et al. Повышенный уровень цитокинов в плазме при расстройствах аутистического спектра свидетельствует об иммунной дисфункции и связан с нарушением поведенческих исходов. Поведение мозга. Иммун. 25 , 40–45 (2011).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Нельсон П.Г. и др. Отдельные нейротрофины, нейропептиды и цитокины: траектория развития и концентрации в неонатальной крови детей с аутизмом или синдромом Дауна. Междунар. Дж. Дев. Неврологи. 24 , 73–80 (2006).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Левитон А.и другие. Системное воспаление, внутрижелудочковое кровоизлияние и повреждение белого вещества. Дж. Чайлд Нейрол. 28 , 1637–1645 (2013).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Allred, E. N. et al. Текст научной работы на тему «Системное воспаление в течение первого постнатального месяца и риск развития синдрома дефицита внимания с гиперактивностью у детей 10 лет, рожденных глубоко недоношенными» J. Нейроиммунный. Фармакол. 12 , 531–543 (2017).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Левитон, А. и др. Предшествующие факторы и ранние корреляты высоких и низких концентраций ангиогенных белков у крайне недоношенных новорожденных. клин. Чим. Acta 471 , 1–5 (2017).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • МакЭлрат, Т. Ф.и другие. Перинатальные системные воспалительные реакции у недоношенных новорожденных с задержкой роста. Acta Pediatr. 102 , e439–e442 (2013 г.).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Левитон, А., Блэр, Э., Дамманн, О. и Оллред, Э. Богатство информации, передаваемой гестационным возрастом. Дж. Педиатр. 146 , 123–127 (2005).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Ройсс, М.Л., Панет, Н. и Сассер, М. Способствует ли потеря плацентарных гормонов нарушениям развития нервной системы у недоношенных детей? Дев. Мед. Детский Нейрол. 36 , 743–747 (1994).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Логан, Дж. В. и др. Оценка тяжести заболевания в раннем послеродовом периоде позволяет прогнозировать нарушения развития нервной системы в возрасте 10 лет у детей, рожденных крайне недоношенными. Дж. Перинатол. 37 , 606–614 (2017).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Bright, H. R. et al. Нейрокогнитивные исходы в возрасте 10 лет у крайне недоношенных новорожденных с поздним началом бактериемии. Дж. Педиатр. 187 , 43–49.e1 (2017).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Левитон А., Gressens, P., Wolkenhauer, O. & Dammann, O. Системный подход к изучению повреждения головного мозга у очень недоношенных новорожденных. Фронт. Сист. Неврологи. 9 , 58 (2015).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Се, С. и др. Распространенность расстройств аутистического спектра с умственной отсталостью и без нее по гестационному возрасту при рождении в когорте молодежи Стокгольма: исследование связи регистров. Педиатр. Перинат. Эпидемиол. 31 , 586–594 (2017).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Никель, К. и др. Измененная целостность белого вещества у взрослых с расстройством аутистического спектра и IQ 100: исследование визуализации тензора диффузии. Acta Psychiatr. Сканд. 135 , 573–583 (2017).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Юре А.М. и др. Неонатальные аномалии головного мозга, связанные с расстройством аутистического спектра у детей, рожденных глубоко недоношенными. Аутизм Res. 9 , 543–552 (2016).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Дин, округ Колумбия и др. Изучение микроструктурной корреляции белого вещества при расстройствах аутистического спектра. Мозговой контакт. 6 , 415–433 (2016).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Амейс, С.Х. и Катани М. Измененная связность белого вещества как нейронный субстрат социальных нарушений при расстройствах аутистического спектра. Cortex 62 , 158–181 (2015).

    Артикул пабмед Google ученый

  • McGrath, J. et al. Аномальная функциональная связность во время зрительно-пространственной обработки связана с нарушением организации белого вещества при аутизме. Фронт. Гум. Неврологи. 7 , 434 (2013).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Фитцджеральд Дж., Галлахер Л. и МакГрат Дж. Дж. Аутизм Дев. Беспорядок. (2016). https://doi.org/10.1007/s10803-016-2803-8.

  • Воган В.М. и др. Распространенные различия в белом веществе у детей и подростков с расстройствами аутистического спектра. Дж. Аутизм Dev. Беспорядок. 46 , 2138–2147 (2016).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Ло Ю.C., Chen, YJ, Hsu, YC, Tseng, W.I. & Gau, S.S. Сниженная целостность путей модели социальной коммуникации является нейронным субстратом дефицита социальной коммуникации при расстройствах аутистического спектра. Дж. Детская психология. Психиатрия 58 , 576–585 (2017).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Cheng, Y. et al. Атипичное развитие микроструктуры белого вещества у подростков с расстройствами аутистического спектра. Нейроизображение 50 , 873–882 (2010).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Итахаши Т. и др. Связанные изменения морфологии серого и белого вещества у взрослых с высокофункциональным расстройством аутистического спектра: мультимодальное исследование визуализации мозга. НейроИмидж Клин. 7 , 155–169 (2015).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Ди, Х., Azeez, A., Li, X., Haque, E. & Biswal, BB. Нарушенная фокальная целостность белого вещества при расстройствах аутистического спектра: основанный на вокселах метаанализ исследований диффузионно-тензорной визуализации. Прог. Нейропсихофармакол. биол. Психиатрия 82 , 242–248 (2017).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Бланкен, Л. М. Е. и др. Микроструктура белого вещества у детей с аутистическими чертами. Психиатрия Res. 263 , 127–134 (2017).

    Артикул Google ученый

  • Samson, A.C. et al. Структура белого вещества крючковидного пучка: значение социально-аффективного дефицита при расстройствах аутистического спектра. Психиатрия Res. 255 , 66–74 (2016).

    Артикул Google ученый

  • Иримия А., Торгерсон К.М., Джейкокс З.Дж. и Ван Хорн, Дж. Д. Коннектомы мужчин и женщин с расстройствами аутистического спектра имеют значительно разную плотность соединений белого вещества. Науч. Респ. 7 , 46401 (2017).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Хагберг, Х. и др. Роль воспаления в перинатальной травме головного мозга. Нац. Преподобный Нейрол. 11 , 192–208 (2015).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Фляйсс, Б.& Gressens, P. Третичные механизмы повреждения головного мозга: новая надежда на лечение церебрального паралича? Ланцет Нейрол. 11 , 556–566 (2012).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Макьюэн, Б. С. Нейробиология стресса: от счастливой случайности к клинической значимости. Мозг Res. 886 , 172–189 (2000).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Пирьянов Г.и другие. Циклопентенон-15-дезокси-дельта-12,14-простагландин J(2) задерживает индуцированные липополисахаридами преждевременные роды и снижает смертность у новорожденных мышей. Эндокринология 150 , 699–706 (2009).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Кадар, Х., Фам, Х., Тубул, Д., Брюнель, А. и Бод, О. Влияние вдыхаемого оксида азота на сульфатидный профиль мозга новорожденных крыс, изученный с помощью визуализации TOF-SIMS. Междунар. Дж. Мол. науч. 15 , 5233–5245 (2014).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Човатия Р. и Меджитов Р. Стресс, воспаление и защита гомеостаза. Мол. Cell 54 , 281–288 (2014).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Котас М.Э. и Меджитов Р. Гомеостаз, воспаление и восприимчивость к болезням. Cell 160 , 816–827 (2015).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Соарес, М.П., ​​Тейшейра, Л. и Мойта, Л.Ф. Толерантность к болезням и иммунитет в защите хозяина от инфекции. Нац. Преподобный Иммунол. 17 , 83–96 (2017).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Чжан, Дж.C., Yao, W. & Hashimoto, K. Передача сигналов мозгового нейротрофического фактора (BDNF)-TrkB при депрессии, связанной с воспалением, и потенциальные терапевтические мишени. Курс. Нейрофармакол. 14 , 721–731 (2016).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Скапер, С. Д. Фактор роста нервов: нейроиммунный медиатор перекрестных помех на все времена года. Иммунология 151 , 1–15 (2017).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Нейроиммунная связь. Нац. Иммунол . 18 , 115 (2017). https://doi.org/10.1038/ni.3676.

  • Айзенбергер, Н. И., Моиени, М., Инагаки, Т. К., Мускателл, К. А. и Ирвин, М. Р. В болезни и в здоровом состоянии: совместная регуляция воспаления и социального поведения. Нейропсихофармакология 42 , 242–253 (2017).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Гальвез-Контрерас, А. Ю. и др. Факторы роста как клинические биомаркеры прогноза и диагностики психических расстройств. Cytokine Growth Factor Rev. 32 , 85–96 (2016).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Сегура, М. и др. Экспрессия генов нейротрофинов в крови и анализ социального познания у пациентов с расстройствами аутистического спектра. Нейрогенетика 16 , 123–131 (2015).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Abdallah, M.W. et al. Неонатальные уровни нейротрофических факторов и риск расстройств аутистического спектра. Acta Psychiatr. Сканд. 128 , 61–69 (2013).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Руссо, А. Дж.Корреляция между уровнем фактора роста гепатоцитов (HGF) и гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК) в плазме у детей, страдающих аутизмом. Биомарк. Insights 8 , 69–75 (2013).

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Russo, A. J. Снижение эпидермального фактора роста (EGF), связанное с HMGB1, и повышенная гиперактивность у детей с аутизмом. Биомарк. Insights 8 , 35–41 (2013).

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Suzuki, K. et al. Снижение уровня эпидермального фактора роста в сыворотке крови у взрослых пациентов с высокофункциональным аутизмом. биол. Психиатрия 62 , 267–269 (2007).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Shen, Y. et al. Измененные уровни хемокинов в плазме при аутизме и их связь с социальным поведением. Психиатрия Res. 244 , 300–305 (2016).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Qin, X.Y. et al. Связь уровней нейротрофического фактора головного мозга в периферической крови с расстройством аутистического спектра у детей: систематический обзор и метаанализ. JAMA Pediatr. 170 , 1079–1086 (2016).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Коннолли, А.М. и др. Нейротрофический фактор головного мозга и аутоантитела к нейральным антигенам в сыворотке крови детей с расстройствами аутистического спектра, синдромом Ландау-Клеффнера и эпилепсией. биол. Психиатрия 59 , 354–363 (2006).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Анжелиду, А. и др. Нейротензин повышен в сыворотке крови маленьких детей с аутистическим расстройством. J. Нейровоспаление. 7 , 48 (2010).

    Артикул КАС Google ученый

  • Inga Jacome, M.C. et al. Периферические воспалительные маркеры, способствующие сопутствующим заболеваниям при аутизме. Поведение. науч. 6 , E29 (2016).

    Артикул пабмед Google ученый

  • Krakowiak, P. et al. Неонатальные цитокиновые профили, связанные с расстройством аутистического спектра. биол. Психиатрия 81 , 442–451 (2015).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Макинодан, М. и др. Экспрессия фактора некроза опухоли-альфа в мононуклеарных клетках периферической крови коррелирует с социальным взаимодействием в раннем детстве при расстройствах аутистического спектра. Нейрохим. Междунар. 104 , 1–5 (2017).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Зербо, О.и другие. Неонатальные цитокины и хемокины и риск расстройства аутистического спектра: исследование ранних маркеров аутизма (EMA): исследование случай-контроль. J. Нейровоспаление. 11 , 113 (2014).

    Артикул КАС Google ученый

  • Войнеагу И. и Ю Х. Дж. Текущий прогресс и трудности в поиске биомаркеров аутизма. Дис. Маркеры 35 , 55–65 (2013).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Фихорова Р.Н. и др. Биологические и технические переменные, влияющие на выделение цитокинов с помощью иммуноанализа из сыворотки крови человека и имитированной вагинальной жидкости: многоцентровое исследование. Анал. хим. 80 , 4741–4751 (2008).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Hecht, J.L. et al. Взаимосвязь между концентрациями белка в крови новорожденных и гистологическими характеристиками плаценты у новорожденных с экстремально низким ГА. Педиатр. Рез. 69 , 68–73 (2011).

    Артикул пабмед ПабМед Центральный КАС Google ученый

  • Белзо, Р. и др. Как: измерение цитокинов крови в биологической психиатрии с использованием имеющихся в продаже мультиплексных иммуноанализов. Психонейроэндокринология 75 , 72–82 (2017).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Арнольд, К.К., Крамер, М.С., Хоббс, К.А., Маклин, Ф.Х. и Ашер, Р.Х. Очень низкий вес при рождении: проблемная когорта для эпидемиологических исследований очень маленьких или незрелых новорожденных. утра. Дж. Эпидемиол. 134 , 604–613 (1991).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Rothman, K. J. Для множественных сравнений корректировки не требуются. Эпидемиология 1 , 43–46 (1990).

    Артикул пабмед КАС Google ученый

  • Протеинурия | Медицина Джона Хопкинса

    Что такое протеинурия?

    Протеинурия, также называемая альбуминурией, представляет собой повышенный уровень белка в моче.Это не болезнь сама по себе, а симптом определенных состояний, поражающих почки. Как правило, слишком много белка в моче означает, что почечные фильтры — клубочки — не работают должным образом и позволяют слишком большому количеству белка выходить с мочой. Когда клубочки повреждены, состояние называется нефритом или гломерулонефритом. Другие состояния могут привести к нефриту, включая гипертонию, болезни сердца и диабет, а также другие виды заболеваний почек.

    Альбумин — это белок, который чаще всего появляется в моче, поэтому протеинурию иногда называют альбуминурией.Другие белки также могут попасть в мочу. Уровень и тип белка показывают степень повреждения, а также риск развития почечной недостаточности. Если уровень белка повышен лишь минимально, это состояние называется микроальбуминурией и свидетельствует о минимальном повреждении. Однако по мере прогрессирования заболевания повреждение усугубляется, и в мочу попадает больше белка, что приводит к выраженной альбуминурии.

    Симптомы

    • Пенистая моча
    • Отек рук, ног, лица и/или живота

    Помните: на ранних стадиях протеинурия может не вызывать видимых симптомов.

    Диагностика

    Быстрый анализ мочи с полоской позволяет определить белок в моче. Бумажная палочка, смоченная мочой, изменит цвет при высоком уровне белка.

    Однако необходимы дополнительные тесты для определения точного количества белка и соотношения некоторых белков к другим веществам в моче. Для определения точной причины протеинурии необходимы дополнительные тесты. К ним относятся анализы крови для измерения креатинина и азота мочевины, отходов, отфильтрованных почками, которые повышены у людей с нарушением функции почек.

    Некоторые организации и эксперты рекомендуют рутинный скрининг белков для людей с высоким риском повреждения почек. Группы высокого риска почечной недостаточности включают афроамериканцев, американских индейцев, латиноамериканцев/латиноамериканцев, американцев с тихоокеанских островов, людей с диабетом и/или гипертонией, а также людей с семейным анамнезом заболеваний почек.

    Лечение

    Лечение зависит от основной причины заболевания. Если причиной является нефрит, первым шагом является определение причины воспаления почек и соответствующее лечение.Если причиной является гипертония или диабет, первой целью является контроль высокого кровяного давления или уровня сахара в крови соответственно.

    Когда обращаться за помощью

    Если у вашего ребенка пенистая моча и/или отечность вокруг глаз, отек лица, рук или ног, поговорите со своим педиатром.

    Диагностика | Общество лейкемии и лимфомы

    Точный диагноз является одним из важнейших аспектов медицинской помощи человеку. Получить точный диагноз поможет врач

    • Оценить, как будет прогрессировать заболевание
    • Определите соответствующее лечение.

    Результаты анализов крови, которые сопровождают периодические медицинские осмотры, могут указывать на необходимость дальнейшего обследования на миелому. К ним относятся повышенный уровень белка, анемия и нарушения функции почек или уровня кальция.

    Критерии диагностики 

    Диагноз миеломы зависит от трех основных признаков

    • Увеличение количества (более 10 процентов) злокачественных плазматических клеток (клеток миеломы) в образце биопсии костного мозга или любых атипичных плазматических клеток, указывающих на плазмоцитому
    • Необычно большое количество моноклонального белка, называемого «М шипом».Моноклональные белки могут быть либо интактными моноклональными иммуноглобулинами, либо легкими цепями иммуноглобулинов (белками Бенс-Джонса), обнаруженными в крови и/или моче.
    • Доказательства повреждения органов-мишеней в соответствии с критериями CRAB (см. ниже).

    Международная рабочая группа по миеломе (IMWG) недавно обновила диагностические критерии миеломы, включив в них биомаркеры в дополнение к существующим характеристикам CRAB.

    Пересмотренные критерии Международной рабочей группы по миеломе (IMWG) для диагностики множественной миеломы

    Должны быть выполнены оба следующих критерия:

    • Злокачественные плазматические клетки в костном мозге ≥ 10% или наличие костной или экстрамедуллярной плазмоцитомы, подтвержденное биопсией
    • Любое одно или несколько из следующих событий, определяющих миелому:
      • Признаки поражения органов-мишеней, которые могут быть связаны с заболеванием (признаки CRAB)
        • C Повышение уровня кальция — уровень кальция в сыворотке > 0.25 ммоль/л (> 1 мг/дл) выше верхней границы нормы или > 2,75 ммоль/л (> 11 мг/дл)
        • R энтеральная недостаточность — клиренс креатинина < 40 мл в минуту или креатинин сыворотки > 177 мкмоль/л (> 2 мг/дл)
        • Немия A — концентрация гемоглобина > 2 г/дл ниже нижней границы нормы или концентрация гемоглобина < 10 г/дл
        • B одно поражение — одно или несколько остеолитических поражений, обнаруженных при рентгенографии, КТ или ПЭТ-КТ
      • Клональные плазматические клетки в костном мозге ≥ 60%
      • Соотношение вовлеченных/невовлеченных свободных легких цепей в сыворотке ≥ 100
      • Одно или несколько очаговых образований, обнаруженных при МРТ-исследовании (размером не менее 5 мм)

    Моноклональные иммуноглобулины (белок М) и легкие цепи (белок Бенс-Джонса)

    У здоровых людей плазматические клетки продуцируют белки, называемые «поликлональными иммуноглобулинами».Это набор антител, которые защищают организм от всевозможных вторгающихся вирусов, бактерий или других инфекционных агентов (антигенов).

    При миеломе большое количество одиночного антитела отмечается как «моноклональный пик иммуноглобулина» или «моноклональный пик» (М-шип), что указывает на то, что белок происходит из клеток, которые первоначально начинались как одиночные злокачественные клетки.

    Уровни моноклонального белка (белка М) можно измерить в образцах крови и/или мочи, и эти уровни обычно коррелируют со степенью миеломы.

    У небольшого числа пациентов с миеломой имеется либо «олигосекреторное заболевание», при котором обнаруживаемый уровень моноклонального белка низкий, либо «несекреторное заболевание», при котором моноклональный белок не может быть обнаружен. Некоторым из этих пациентов можно провести новый анализ крови, который измеряет легкие цепи, свободные от сыворотки, которые представляют собой небольшой фрагмент более крупного интактного белка М.​

    Интактная молекула иммуноглобулина (Ig) состоит из двух больших частей (тяжелых цепей) и двух меньших частей (легких цепей), которые соединены друг с другом.

    Этот цельный (цельный) иммуноглобулин, состоящий из четырех цепей, обычно слишком велик, чтобы пройти через почки. Таким образом, он чаще всего присутствует в крови, но не в моче. Когда весь иммуноглобулин присутствует в моче, он обычно находится на низком уровне.

    У некоторых пациентов с миеломой в злокачественных плазматических клетках нарушается скоординированный процесс образования и прикрепления легких и тяжелых цепей. Неприкрепленные, «свободные» легкие цепи попадают в кровь и быстро выводятся с мочой.Легкую цепь также называют «белком Бенс-Джонса» по имени доктора Генри Бенс-Джонса, изучавшего ее характеристики. При экскреции в больших количествах белки Бенс-Джонса (свободные легкие цепи) иногда могут вызывать пену мочи и вызывать повреждение почек.

    Каждая плазматическая клетка вырабатывает один из пяти типов антител

    • Иммуноглобулин G (IgG)
    • Иммуноглобулин А (IgA)
    • Иммуноглобулин М (IgM)
    • Иммуноглобулин D (IgE)
    • Иммуноглобулин Е (IgD).

    Клетки миеломы продуцируют множество копий своего иммуноглобулина. Наиболее распространенным типом миеломы является IgG, встречающийся примерно у 50 процентов пациентов. Следующим наиболее распространенным типом является миелома легких цепей, при которой интактный иммуноглобулин не вырабатывается.

    Диагностические тесты

    Анализы крови и мочи. В некоторых случаях миелома не подозревается до тех пор, пока анализы крови для других плановых обследований не укажут на повышенный уровень глобулина. Это может привести к большему количеству тестов, особенно если у вас нет симптомов.Если в результате возникнет подозрение на миелому, врач снова проведет анализ крови, чтобы подтвердить диагноз. Ваша кровь отправляется в лабораторию для полного анализа крови (CBC), который может выявить, влияют ли клетки миеломы на нормальное развитие клеток крови, и биохимического анализа крови, который может выявить аномальные уровни определенных химических веществ, которые могут указывать на то, что орган не работает должным образом.

    Ваш врач также проверяет вашу кровь на наличие:

    • Уровень кальция. Высокий уровень может означать, что кальций вышел из ваших костей и попал в кровоток, что ставит под угрозу здоровье ваших почек.

    • Уровень белка. Измеряя определенные белки, врач может оценить размер и скорость роста миеломных опухолей.

    • Уровни азота мочевины и креатинина. Эти белки измеряются для проверки функции почек.

    Ваш врач проверяет вашу мочу (анализ мочи) на белок Бенс-Джонса, который может указывать на наличие миеломы. Уровни белка Бенс-Джонса измеряются для проверки функции почек и степени заболевания.

    Электрофорез белков.  Электрофорез белков сыворотки (SPEP) и электрофорез белков мочи (UPEP) — ​​это тесты, используемые для выявления присутствия аномальных белков, выявления отсутствия нормальных белков, а также для определения повышения и понижения содержания различных групп белков в сыворотке или моче. Эти тесты, как правило, назначают для обнаружения и выявления избыточной продукции специфических белков (иммуноглобулинов). Эти тесты измеряют все пять типов иммуноглобулинов (IgG, IgA, IgM, IgE или IgD).При наличии избыточной продукции моноклонального иммуноглобулина результаты лабораторных исследований могут быть показаны в виде пика на графике (белок М или пик М). Большинство пациентов с нелеченой миеломой имеют пик моноклонального иммуноглобулина в сыворотке, моче или в обоих случаях.

    Эти тесты обычно следует повторять через регулярные промежутки времени, чтобы контролировать течение миеломы пациента и эффективность лечения.

    Анализ легких цепей, свободных от сыворотки (SFLC). Бессывороточное тестирование легких цепей предоставляет дополнительную информацию к двум тестам белкового электрофореза: SPEP и UPEP.Анализ SFLC может выявить аномальные уровни свободных легких цепей, что может указывать на заболевание плазматических клеток. Он также может обнаруживать изменения в соотношении производства легких цепей каппа и лямбда, что указывает на избыток аномальных плазматических клеток.

    Анализы костного мозга. Ваш врач проверит ваш костный мозг на наличие повышенного количества клеток миеломы. Тестирование костного мозга включает в себя два этапа, которые обычно выполняются одновременно в кабинете врача или в больнице:

    Цитогенетический анализ. Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) — это тип лабораторного теста, в котором используются специальные красители для маркировки определенных аномальных хромосом в клетках. Хромосомные аномалии играют решающую роль в выявлении злокачественных новообразований и определении риска рецидива.

    Визуальные тесты. Возможно, вам потребуется пройти рентгенологическое исследование, компьютерную томографию (КТ), магнитно-резонансную томографию (МРТ) или позитронно-эмиссионную томографию (ПЭТ). Ваш врач ищет любые признаки повреждения костей, такие как истончение, отверстия или переломы.

    Если у вас диагностирована миелома, вам может потребоваться пройти дополнительные тесты во время или после лечения, чтобы увидеть, как клетки миеломы реагируют на терапию.

    Кроме того, врачи определяют стадию миеломы, чтобы помочь им выбрать наилучший план лечения.

    Ссылки по теме

    Повышенное содержание мочевины в моче при высокобелковой диете может быть одной из причин заболеваний мочевого пузыря | Журнал трансляционной медицины

  • Какехи Ю., Хирао Ю., Ким В.Дж., Озоно С., Масумори Н., Миянага Н., Насу Ю., Йокомизо А.Отчет рабочей группы по раку мочевого пузыря. Jpn J Clin Oncol. 2010; 40 (Приложение 1): i57–64.

    Артикул пабмед Google ученый

  • Плоэг М., Абен К.К., Кименей Л.А. Настоящее и будущее бремя рака мочевого пузыря в мире. Мир Дж. Урол. 2009; 27: 289–93.

    Центральный пабмед Статья пабмед Google ученый

  • Джеймс Н.Д., Хуссейн С.А., Холл Э., Дженкинс П., Тремлетт Дж., Роулингс С., Крундвелл М., Сайзер Б., Шринивасан Т., Хендрон С., Льюис Р., Уотерс Р., Хаддарт Р.А.Лучевая терапия с химиотерапией или без нее при мышечно-инвазивном раке мочевого пузыря. N Engl J Med. 2012; 366:1477–88.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Донато Ф., Боффетта П., Фациоли Р., Ауленти В., Гелатти У., Порру С. Рак мочевого пузыря, курение табака, употребление кофе и алкоголя в Брешии, северная Италия. Евр J Эпидемиол. 1997; 13: 795–800.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Чу Х., Ван М., Чжан З.Эпидемиология рака мочевого пузыря и генетическая предрасположенность. Дж. Биомед Рез. 2013;27:170–8.

    Центральный пабмед Статья КАС пабмед Google ученый

  • Wu X, Ros MM, Gu J, Kimeney L. Эпидемиология и генетическая предрасположенность к раку мочевого пузыря. БЖУ Интерн. 2008; 102:1207–15.

    Артикул пабмед Google ученый

  • Рафнар Т., Вермеулен С.Х., Сулем П., Торлейфссон Г., Абен К.К., Витжес Дж.А., Гротенхейс А.Дж., Верхаг Г.В., Хюльсберген-ван Д.К.С., Безенбахер С., Гудбьяртссон Д., Стейси С.Н., Гудмундссон Дж., Йоханнсдоттир Х., Бьярнасон Х. , Zanon C, Helgadottir H, Jonasson JG, Tryggvadottir L, Jonsson E, Geirsson G, Nikulasson S, Petursdottir V, Bishop DT, Chung-Sak S, Choudhury A, Elliott F, Barrett JH, Knowles MA, de Verdier PJ, Ryk С., Линдблом А., Руднаи П., Гурзау Э., Коппова К., Винейс П., Полидоро С., Гуаррера С., Сакердоте С., Панадеро А., Санс-Велес Д.И., Санчес М., Вальдивия Г., Гарсия-Пратс М.Д., Хенгстлер Дж.Г., Селински С. , Геруллис Х., Овсянников Д., Хезри А., Аминшарифи А., Малекзаде М., ван ден Берг Л.Х., Опхофф Р.А., Велдинк Дж.Х., Зигерс М.П., ​​Келлен Э., Фостинелли Дж., Андреоли Д., Аричи С., Порру С., Бантинкс Ф., Гадери А. , Голка К., Майордомо Д.И., Матулло Г., Кумар Р., Стейнек Г., Килти А.Е., Конг А., Торстейнсдоттир У., Стефанссон К., Кимени Л.А.Европейское общегеномное ассоциативное исследование идентифицирует SLC14A1 как новый ген предрасположенности к раку мочевого пузыря. Хум Мол Жене. 2011;20:4268–81.

    Центральный пабмед Статья КАС пабмед Google ученый

  • Гарсия-Клозас М., Йе И., Ротман Н., Фигероа Д.Д., Малатс Н., Динни С.П., Чаттерджи Н., Прокунина-Олссон Л., Ван З., Лин Дж., Real FX, Джейкобс К.Б., Барис Д., Тун М., Де Виво И., Албанес Д., Пердью М.П., ​​Кожевинас М., Камат А.М., Лернер С.П., Гроссман Х.Б., Гу Дж., Пу Х., Хатчинсон А., Фу Ю.П., Бердетт Л., Йегер М., Тан В., Тардон А., Серра С., Каррато А., Гарсия-Клосас Р., Льорета Дж., Джонсон А., Швенн М., Карагас М.Р., Шнед А., Андриоле Г.Дж., Грабб Р.Р., Блэк А., Джейкобс Э.Дж., Дайвер В.Р., Гапстур С.М., Вайнштейн С.Дж., Виртамо Дж., Хантер Д.Дж., Капорасо Н., Ланди М.Т., Фраумени Дж.Дж., Сильверман Д.Т., Чанок С.Дж., Ву С.Полногеномное исследование ассоциации рака мочевого пузыря идентифицирует новый локус восприимчивости в SLC14A1, гене переносчика мочевины на хромосоме 18q12.3. Хум Мол Жене. 2011;20:4282–9.

    Центральный пабмед Статья КАС пабмед Google ученый

  • Дирскьот Л., Тикьяер Т., Крухоффер М., Дженсен Дж.Л., Маркуссен Н., Гамильтон-Дютуа С., Вольф Х., Орнтофт Т.Ф. Выявление различных классов карциномы мочевого пузыря с использованием микрочипов. Нат Жене.2003;33:90–6.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Дирскьот Л., Крухоффер М., Тикьяер Т., Маркуссен Н., Дженсен Дж.Л., Моллер К., Орнтофт Т.Ф. Экспрессия генов в мочевом пузыре: распространенная сигнатура экспрессии генов карциномы in situ существует независимо от гистопатологической классификации. Рак рез. 2004;64:4040–8.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Дун З., Ран Дж., Чжоу Х., Чен Дж., Лэй Т., Ван В., Сунь Ю., Линь Г., Банкир Л., Ян Б.Делеция транспортера мочевины UT-B вызывает повреждение ДНК и апоптоз в уротелии мочевого пузыря мышей. ПЛОС ОДИН. 2013;8:e76952.

    Центральный пабмед Статья КАС пабмед Google ученый

  • Реал-Чичарро А., Руис-Мостасо И., Навас-Дельгадо И., Керзази А., Чнибер О., Санчес-Хименес Ф., Медина М.А., Алдана-Монтес Х.Ф. Protopia: инструмент белок-белкового взаимодействия. Биоинформатика BMC. 2009;10(Приложение 12):S17.

    Центральный пабмед Статья пабмед Google ученый

  • Мартин А., Очагавиа М.Э., Рабаса Л.С., Миранда Дж., Фернандес-де-Коссио Дж., Брингас Р.BisoGenet: новый инструмент для построения, визуализации и анализа генных сетей. Биоинформатика BMC. 2010;11:91.

    Центральный пабмед Статья пабмед Google ученый

  • Клайн М.С., Смут М., Керами Э., Кучински А., Лэндис Н., Уоркман С., Кристмас Р., Авила-Кампило И., Крич М., Гросс Б., Хансперс К., Иссерлин Р., Келли Р., Киллкойн С., Лотия С. , Маэре С., Моррис Дж., Оно К., Павлович В., Пико А.Р., Вайлайя А., Ван П.Л., Адлер А., Конклин Б.Р., Худ Л., Койпер М., Сандер С., Шмулевич И., Швиковски Б., Уорнер Г.Дж., Идекер Т., Бадер ГД.Интеграция биологических сетей и данных об экспрессии генов с помощью Cytoscape. Нат Проток. 2007; 2: 2366–82.

    Центральный пабмед Статья КАС пабмед Google ученый

  • Zhang ZG, Niu XY, Lu AP, Xiao GG. Влияние куркумина на стареющую Drosophila Melanogaster: анализ прогнозирования пути. Chin J Integr Med. 2013.

  • Wang L, Zang W, Xie D, Ji W, Pan Y, Li Z, Shen J, Shi Y. Сравнение гепатоцеллюлярной карциномы (HCC), холангиокарциномы (CC) и комбинированной HCC-CC (CHC). ) друг с другом на основе набора данных микрочипов.Опухоль биол. 2013; 34:1679–84.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Непуш Т., Ю. Х., Пакканаро А. Обнаружение перекрывающихся белковых комплексов в сетях белок-белковых взаимодействий. Нат Методы. 2012;9:471–2.

    Центральный пабмед Статья КАС пабмед Google ученый

  • Хуанг Д.В., Шерман Б.Т., Лемпицки Р.А. Инструменты обогащения биоинформатики: пути к всестороннему функциональному анализу больших списков генов.Нуклеиновые Кислоты Res. 2009; 37:1–13.

    Центральный пабмед Статья Google ученый

  • Maere S, Heymans K, Kuiper M. BiNGO: плагин Cytoscape для оценки чрезмерного представления категорий онтологии генов в биологических сетях. Биоинформатика. 2005; 21:3448–9.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Насери М. Изменения количества периферических лейкоцитов, скорости оседания эритроцитов и С-реактивного белка при фебрильной инфекции мочевыводящих путей.Иран Дж. Почки Дис. 2008;2:137–42.

    ПабМед Google ученый

  • Хун С.Ф., Чунг С.Д., Куо Х.К. Повышенный уровень С-реактивного белка в сыворотке крови связан с усилением симптомов депонирования нижних мочевыводящих путей у мужчин с доброкачественной гиперплазией предстательной железы. ПЛОС ОДИН. 2014;9:e85588.

    Центральный пабмед Статья пабмед Google ученый

  • Рой А., Ганеш Г., Сиппола Х., Болин С., Савеси О., Дагалв А., Шленнер С.М., Фейерабенд Т., Родевальд Х.Р., Челлен Л., Хеллман Л., Абринк М.Химаза тучных клеток расщепляет аларминовый белок теплового шока 70, бигликан, HMGB1 и интерлейкин-33 (IL-33) и ограничивает воспаление, вызванное опасностью. Дж. Биол. Хим. 2014; 289: 237–50.

    Центральный пабмед Статья КАС пабмед Google ученый

  • Галли С.Дж., Гримбалдестон М., Цай М. Иммуномодулирующие тучные клетки: как отрицательные, так и положительные регуляторы иммунитета. Нат Рев Иммунол. 2008; 8: 478–86.

    Центральный пабмед Статья КАС пабмед Google ученый

  • Гривенников С.И., Гретен Ф.Р., Карин М.Иммунитет, воспаление и рак. Клетка. 2010; 140:883–99.

    Центральный пабмед Статья КАС пабмед Google ученый

  • Falck JR, Reddy LM, Reddy YK, Bondlela M, Krishna UM, Ji Y, Sun J, Liao JK. 11,12-эпоксиэйкозатриеновая кислота (11,12-EET): структурные детерминанты ингибирования TNF-альфа-индуцированной экспрессии VCAM-1. Bioorg Med Chem Lett. 2003; 13:4011–4.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Манхиани М., Куигли Д.Э., Найт С.Ф., Тасообщирази С., Мур Т., Брэндс М.В., Гамак Б.Д., Имиг Д.Д.Делеция гена растворимой эпоксидгидролазы ослабляет повреждение почек и воспаление при гипертензии, вызванной ДОКА-солями. Am J Physiol Renal Physiol. 2009; 297:F740–8.

    Центральный пабмед Статья КАС пабмед Google ученый

  • Корпетину А., Скандалис С.С., Лабропулу В.Т., Смирлаки Г., Нулас А., Караманос Н.К., Теохарис А.Д. Серглицин: на перекрестке воспаления и злокачественности. Фронт Онкол. 2014;3:327.

    Центральный пабмед Статья пабмед Google ученый

  • Хантер Т., Пайнс Дж.Циклины и рак. II: ингибиторы циклина D и CDK достигают совершеннолетия. Клетка. 1994; 79: 573–82.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Эван Г.И., Вусден К.Х. Пролиферация, клеточный цикл и апоптоз при раке. Природа. 2001; 411:342–8.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Камб А., Груис Н.А., Уивер-Фельдхаус Дж., Лю К., Харшман К., Тавтигян С.В., Стокерт Э., Дэй Р.Р., Джонсон Б.Е., Сколник М.Х.Регулятор клеточного цикла, потенциально участвующий в генезе многих типов опухолей. Наука. 1994; 264:436–40.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Унек Г., Озмен А., Мендильчиоглу И., Симсек М., Коргун Э.Т. Экспрессия белков, связанных с клеточным циклом, PCNA, Ki67, p27 и p57 в нормальной и преэклампсии плаценты человека. Тканевая клетка. 2014;46:198–205.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Микеа Л., Фергюсон Д.Р., Петерс Э.М., Эндрюс П.М., Кирби М.Р., Бург М.Б.Задержка клеточного цикла и апоптоз индуцируются высоким содержанием солей и мочевины в клетках мозгового вещества почек. Am J Physiol Renal Physiol. 2000; 278:F209–18.

    КАС пабмед Google ученый

  • Лийнен ХР. Плейотропные функции ингибитора активатора плазминогена-1. Джей Тромб Хемост. 2005; 3:35–45.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Вилладсен С.Б., Брамсен Дж.Б., Остенфельд М.С., Виклунд Э.Д., Фриструп Н., Гао С., Хансен Т.Б., Дженсен Т.И., Борре М., Орнтофт Т.Ф., Дырскьот Л., Кемс Дж.Кластер миР-143/-145 регулирует ингибитор активатора плазминогена-1 при раке мочевого пузыря. Бр Дж Рак. 2012; 106: 366–74.

    Центральный пабмед Статья КАС пабмед Google ученый

  • Гарг М., Каноджиа Д., Сет А., Кумар Р., Гупта А., Суролия А., Сури А. Экспрессия белка теплового шока 70-2 (HSP70-2) при уротелиальной карциноме мочевого пузыря связана с прогрессированием опухоли и способствует миграции и вторжение. Евр Джей Рак. 2010;46:207–15.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Шаулян Э., Карин М. АР-1 как регулятор жизни и смерти клеток. Nat Cell Biol. 2002;4:E131–6.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Hour TC, Pu YS, Lin CC, Huang SW, Chen J, Chiu AW, Chen CJ, Huang CY. Дифференциальная экспрессия молекулярных маркеров при уротелиальном раке, связанном с мышьяком и без него.Противораковый Рез. 2006; 26: 375–8.

    КАС пабмед Google ученый

  • Симеонова П.П., Ван С., Ториума В., Комминени В., Мэтисон Дж., Унимье Н., Каяма Ф., Харки Д., Дин М., Вальятан В., Ластер М.И. Мышьяк опосредует пролиферацию клеток и экспрессию генов в эпителии мочевого пузыря: связь с активацией трансактивации белка-1. Рак рез. 2000;60:3445–53.

    КАС пабмед Google ученый

  • Ли С., Сюй С., Сюй С., Ху З., У Дж., Чжу Й., Чен Х., Мао Й., Линь Й., Луо Дж., Чжэн Х., Се Л.МикроРНК-490-5p ингибирует пролиферацию рака мочевого пузыря путем нацеливания на c-Fos. Biochem Biophys Res Commun. 2013; 441:976–81.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Цзоу К., Хаберманн-Роттингхаус С.М., Мерфи К.П. Влияние мочевины на стабильность белков: водородные связи и гидрофобный эффект. Белки. 1998; 31: 107–15.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Краус Л.М., Краус А.Дж.Карбамоилирование аминокислот и белков при уремии. Почки Int Suppl. 2001; 78:S102–7.

    Артикул КАС пабмед Google ученый

  • Parkin DM, Bray F, Ferlay J, Pisani P. Глобальная статистика рака, 2002. CA Cancer J Clin. 2005; 55: 74–108.

    Артикул пабмед Google ученый

  • Диета, питание и профилактика хронических заболеваний. Представитель World Health Organ Tech Rep.2003; 916:1–149.

  • Границы | Мономерный С-реактивный белок в сыворотке с заметно повышенным уровнем СРБ обладает общими свойствами связывания кальций-зависимого лиганда с диссоциированной формой С-реактивного белка in vitro

    Введение

    С-реактивный белок (CRP) принадлежит к семейству белков, известных как пентраксины, которые были высококонсервативными на протяжении всей эволюции и могут быть идентифицированы у различных видов, от млекопитающих и рыб до примитивного атлантического мечехвоста, Limulus polyphemus (1 ).Человеческая форма CRP демонстрирует кольцевую структуру из пяти нековалентно связанных субъединиц вокруг центральной поры, причем каждая субъединица содержит 206 аминокислот, свернутых в два антипараллельных β-листа с уплощенной топологией желейного рулета (2). Внутри каждого промотора содержится два иона кальция, образующих сайт для связывания лигандов, таких как фосфохолин (PCho), экспрессируемых на поверхностных структурах патогенов и мертвых или поврежденных клеточных мембранах (2, 3). Считается, что основная роль СРБ в организме человека заключается в инициации врожденного иммунного ответа посредством классического пути комплемента, воспаления, индуцированного цитокинами, и взаимодействия с антителами.Однако были описаны более сложные роли СРБ, включая обострение, регуляцию и подавление иммунитета (4–7).

    У нормальных здоровых людей исходные уровни СРБ колеблются от 1 до 5 мг/л (8). Во время инфекции, воспаления или повреждения тканей уровни СРБ резко повышаются, вызывая достаточный иммунный ответ в течение 24–72 часов. Из-за такого быстрого повышения уровня СРБ в сыворотке его обычно измеряют в качестве клинического биомаркера инфекции или воспаления в медицинских учреждениях.В последние годы появились доказательства связи СРБ с развитием и прогрессированием хронических аутовоспалительных заболеваний, таких как сердечно-сосудистые заболевания (9, 10). Было высказано предположение, что СРБ играет альтернативную провоспалительную роль в развитии заболевания: исследований in vitro продемонстрировали повышающую регуляцию молекул клеточной адгезии, активацию эндотелиальных клеток, отложение в атеросклеротических поражениях и повышенную продукцию воспалительных цитокинов; все общие черты, обнаруженные в патофизиологии сердечно-сосудистых заболеваний (8, 11–15).Эти данные привели к разработке высокочувствительного анализа СРБ, который может точно измерять уровни СРБ <3 мг/л и оценивать индивидуальный риск развития сердечно-сосудистых заболеваний (9, 10).

    Хотя пентамерный СРБ человека (пСРБ) чрезвычайно стабилен в физиологических условиях, появляется все больше данных, свидетельствующих о биологической роли мономерной формы СРБ, обычно обозначаемой как мСРБ (16–19). Сообщалось о широком спектре конформеров in vitro и ex vivo мономерных CRP (мCRP), начиная от денатурированного mCRP in vitro , продуцируемого высокими концентрациями мочевины (до 8 М) (20) через восстановленную мембрану связал mCRP (21) с гибридным mCRP с близкой к нативной структурой (22).Были созданы моноклональные антитела к различным конформерам, в том числе те, которые нацелены на неоэпитопы, выявляемые диссоциацией субъединиц pCRP, и используются для идентификации мономерных форм, отличных от pCRP (23–25). Мочевинодиссоциированный мСРБ Potempa et al. (20) остается в значительной степени прототипом мСРБ, который используется в самых разных исследованиях на протяжении более 30 лет. Этот mCRP демонстрирует снижение растворимости (будучи нерастворимым при концентрациях кальция всего 0,05 мМ) и изоэлектрической точки, а также потерю кальций-зависимого связывания с прототипом лиганда CRP C-полисахаридом (20).Этот мономер не может быть реассоциирован обратно в свою пентамерную форму, диссоциация сопровождается значительными изменениями как в структуре, так и в функции (26). На основе восстановления внутрицепочечного дисульфида в этом mCRP, но не в pCRP, восстановителями, такими как дитиотреитол, в нескольких отчетах показано различие между пентамерным и мономерным CRP (21, 27, 28).

    В литературе было предложено несколько моделей, предполагающих физиологический механизм образования мСРБ.Наиболее широко распространена диссоциация через кальций-зависимое связывание pCRP с клеточными мембранами (17, 18, 25, 27-32), хотя еще предстоит прояснить природу и судьбу образующегося конформера mCRP. Предполагается, что связывание с микровезикулами приводит к структурным изменениям pCRP, которые делают возможным связывание C1q и, следовательно, активацию комплемента (27). Кроме того, все больше экспериментальных данных в литературе свидетельствуют о провоспалительной роли мСРБ (33) и о связи между мСРБ и прогрессированием некоторых аутовоспалительных заболеваний в организме.Подобно описанному ранее для pCRP, mCRP проявляет способность стимулировать продукцию цитокинов и усиливать продукцию молекул адгезии, а также индуцировать образование тромбов и изменять свойства фибрина и экспрессию тканевого фактора (18, 34). Было высказано предположение, что циркулирующие микрочастицы, образующиеся из липидных мембран, могут не только индуцировать диссоциацию pCRP, но также выступать в качестве способа транспорта по всему телу к местам усиленного воспаления (30). Также было подчеркнуто, что стандартные клинические тесты СРБ, используемые в значительной части медицинских лабораторий, не позволяют обнаружить мСРБ, связанный с циркулирующими микрочастицами (35).

    Совсем недавно появились сообщения о разработке методов ELISA, позволяющих количественно определять мСРБ в клинических образцах сыворотки и тканей до 1 нг/мл (24, 36). Чжан и др. (36) продемонстрировали сэндвич-ИФА, который выявлял мСРБ у пациентов с аутоиммунными заболеваниями, связанными с кожей, со статистической разницей в уровнях мСРБ по сравнению с контрольной группой, даже когда нативные пентамерные образцы не показали такой разницы (35). Уровни мСРБ в сыворотке, о которых сообщают Zhang et al. (36) находились в диапазоне нг/мл, как и данные Wang et al.(24), которые использовали моноклональное антитело на основе С-концевого октапептида CRP, предложенное для воздействия на диссоциацию pCRP путем обработки 8 М мочевиной, в исследовании уровней mCRP при остром инфаркте миокарда (ОИМ). Было показано, что антитело распознает mCRP из денатурированного pCRP, но не самого pCRP. В этом исследовании пациентов ( n = 101), недавно перенесших ОИМ, средний зарегистрированный уровень мСРБ в сыворотке крови составил 0,021 мг/л (24), при этом шесть пациентов из 42 имели повышенный уровень рСРБ (3–285 мг/л). /L), отображая обнаруживаемые уровни мСРБ, равные 0.0,057 мг/л-0,1227 мг/л.

    Наша цель состояла в том, чтобы создать и найти в сыворотке с заметно повышенными уровнями СРБ почти нативный мСРБ, который, насколько это возможно, сохраняет структуру и связывание мономера в пентамерной молекуле. Мы описываем получение, очистку и характеристику mCRP in vitro, полученного в более мягких условиях диссоциации, чем те, которые обычно используются, наряду с анализом образцов сыворотки крови пациентов с повышенным уровнем CRP (> 100 мг/л) с помощью клинического анализа.Этот анализ выявляет форму mCRP ex vivo во всех проанализированных образцах пациентов. Обе формы mCRP распознавались одними и теми же моноклональными антителами против CRP, обе были растворимы в трис-буферном солевом растворе с 5–10 мМ CaCl 2 и обе обратимо связывались с PCho кальций-зависимым образом.

    Материалы и методы

    Использовались следующие стандартные буферы

    : буфер A: (буфер для хранения) 20 мМ трис(гидроксиметил)аминометан (трис), 280 мМ NaCl, 5 мМ CaCl 2 , 0.01% азид натрия, рН 7,4; буфер B: (элюирующий буфер) 50 мМ трис, 150 мМ NaCl, pH 7,2; буфер C: (уравновешивающий буфер) 10 мМ CaCl 2 , 50 мМ трис, pH 7,4, 150 мМ NaCl, 0,01% азид натрия; буфер D: (хелатирующий буфер) 10 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА), 50 мМ трис, рН 7,4, 150 мМ NaCl, 0,01% азид натрия.

    Протокол ИФА

    Общие процедуры ELISA были следующими: Все анализы ELISA проводили на стерильном 96-луночном планшете (Costar). В каждую лунку добавляли по 50 мкл каждого образца.Планшеты блокировали 3% бычьим сывороточным альбумином (BSA) и промывали фосфатно-солевым буфером (PBS)-Tween (Sigma). Используемое первичное антитело представляло собой моноклональное антитело против С-реактивного белка (CRP-8, Sigma), полученное у мыши; вторичное антитело представляло собой антитело против мышиного IgG (полная молекула) и пероксидазы, полученное у кролика (Sigma). Оба были использованы в разведении 1:40000. Положительный и отрицательный контроли были включены в анализ, и все образцы были протестированы в трех повторностях. В качестве проявляющего субстрата использовали 3, 3′, 5, 5′, жидкий субстрат тетраметилбензидина (ТМВ) (Sigma).Планшеты для ELISA оставляли для проявления на 10 мин перед добавлением 2 М серной кислоты. Планшеты считывали при 450 нм на планшет-ридере BioTek EL800 с использованием программного обеспечения Gen5.

    Производство

    мономерного С-реактивного белка in vitro

    Нативный пентамерный CRP человека (pCRP) был приобретен у Scripps в буфере для хранения (буфер A). Диссоциация была достигнута путем добавления pCRP к ряду буферов для диссоциации (20 мМ трис, 280 мМ NaCl, 1 мМ ЭДТА и 2, 2,5, 3 и 4 М мочевина) с последующим хранением при 4°C в течение периодов до 12 недель.

    Фосфохолин (PCho) Аффинная хроматография

    Иммобилизованный p- аминофенилфосфорилхолин (APC) был приобретен у Fisher Scientific в форме геля, поперечно сшитого с 6% гранулированной агарозы. Связывающая способность АПК составляла >3 мг СРБ на 1 мл геля. Все эксперименты по аффинной хроматографии как для in vitro , так и для ex vivo CRP проводились с использованием системы хроматографии Biologic LP (BioRad) со скоростью потока 0,5 мл/мин.Поглощение измеряли при 280 нм. Перед пропусканием образцов через колонку колонку уравновешивали 20 объемами колонки уравновешивающего буфера (буфер C), а затем перед нанесением образца показание базовой линии УФ-поглощения сводили к нулевому значению поглощения (Au). После нанесения всего образца колонку повторно уравновешивали 5 объемами колонки буфера C с последующей элюцией хелатирующим буфером (буфер D) до тех пор, пока показания УФ-поглощения не вернулись к исходному значению 0 Au.

    Очистка

    мономерного С-реактивного белка (мСРБ) in vitro

    mCRP и pCRP в образцах, диссоциированных с мочевиной, разделяли и очищали с использованием системы быстрой белковой жидкостной хроматографии (FPLC) AKTA explorer 100 (GE Healthcare) с колонкой HiLoad 16/60 Superdex 200 пг. Калибровку проводили с использованием набора для калибровки гель-фильтрации (GE Healthcare) с включенными маркерами молекулярной массы ферритином, альдолазой, кональбумином, овальбумином и рибонуклеазой (буфер для элюирования: буфер B).Объем пустот определяли с использованием Blue Dextran (Sigma). Образцы вводили в колонку через петлю для ввода образца объемом 2 мл, и элюирование контролировали по поглощению в УФ-излучении при 280 нм при скорости потока 0,5 мл/мин. Образцы элюировали и собирали фракциями по 5 мл в буфере для хранения А.

    SDS-PAGE и Вестерн-блоты очищенного pCRP и

    in vitro Образцы mCRP

    Как очищенные образцы диссоциированного CRP, так и CRP, очищенный из сыворотки крови человека, были подтверждены как содержащие CRP с помощью электрофореза в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS PAGE) и вестерн-блоттинга.Образцы анализировали в невосстанавливающих условиях на 12,5% разрешающем и 4% накопительном геле. Все реагенты были приобретены у Sigma. SDS PAGE проводили в ячейке BioRad mini-Protein II при 200 В в течение примерно 45–50 мин. Все образцы анализировали с положительным и отрицательным контролем и маркерами молекулярной массы.

    Вестерн-блоттинг

    проводили с использованием ячейки для электрофоретического переноса Mini Trans-Blot (BioRad) с использованием нитроцеллюлозной промокательной бумаги или поливинилидендифторидной (PVDF) мембраны.Перенос проводили при 350 мА в течение 1 ч при 4°С. Мембраны блокировали с помощью сухого молока Marvel и промывали с помощью BLOTTO (сухое молоко Marvel, Triton-X 100 или Tween-20 и трис-буферный солевой раствор). Первичное антитело, моноклональное антитело против С-реактивного белка (CRP-8, Sigma), полученное у мыши, использовали в разведении 1:1000, за исключением mCRP, очищенного из сыворотки человека (1:400), и не -диссоциированный pCRP после обработки мочевиной (1:200). Вторичное антитело, антитело против мышиного IgG (полная молекула) и пероксидазы, полученное у кролика (Sigma), использовали в разведении 1:40000, за исключением недиссоциированного pCRP после обработки мочевиной (1:2000).Хемилюминесцентный субстрат Clarity Western Enzyme Chemiluminescence Substrate (BioRad) или хемилюминесцентный субстрат Thermo Scientific™ SuperSignal™ West Pico, разбавленный в 4 раза, использовали для обнаружения полос белка, которые визуализировали с использованием цифрового детектора изображений CCD. Время экспозиции составляло примерно 30–60 мин.

    Связывание

    mCRP in vitro с фосфохолином

    Зависимое от кальция связывание с PCho эксклюзионно очищенного mCRP из диссоциации 3 М мочевины оценивали с использованием аффинной хроматографии с PCho, как описано выше.Образцы белка готовили путем разбавления 500 мкл (250 мкг) mCRP в 5 мл буфера C. Для предотвращения попадания пузырьков воздуха в колонку во время нанесения образца использовали образцы большего объема.

    Исследования осаждения с

    Streptococcus pneumoniae Полисахариды клеточной стенки
    Калибровка ELISA

    50 мкл кальциевого буфера (буфер А) добавляли в столбцы 1–12, ряды A–F планшета для ELISA. 50 мкл (3,0 мкг в 50 мкл, 60 мг/л) pCRP (Scripps) добавляли в колонку 1, ряды A–C, и mCRP ( in vitro , очищенный после 3 М диссоциации) в ряды D–F. .Проводили серийное разведение до столбца 11, ряды A–F, оставляя буфер А в столбце 12, ряды A–F (отрицательный контроль).

    CRP/CWPS Осадки

    Нативный pCRP (Scripps) вместе с mCRP (диссоциированный с 3 М мочевиной и очищенный методом исключения размера) инкубировали с различными количествами С-полисахарида клеточной стенки Streptococcus pneumoniae (CWPS; Oxford Biosystems). Используемые количества CWPS составляли 0,1, 0,5, 1, 10, 20, 50, 100, 200, 300 мкг. Оба образца CRP содержали 20 мкг в 400 мкл буфера А.Все образцы инкубировали при 37°С в течение 1 ч при осторожном встряхивании. Затем образцы центрифугировали при 6500×g в течение 15 минут для осаждения осадка, а надосадочную жидкость от каждого образца переносили в отдельные пробирки. Уровни осаждения рассчитывали на основе оставшейся концентрации белка в супернатанте с помощью ELISA, следуя общим процедурам, описанным выше. Концентрации CRP определяли с использованием уравнений калибровочной линии, а общий уровень осаждения рассчитывали путем вычитания общего количества CRP, оставшегося в растворе после инкубации CWPS, из исходного количества (20 мкг).

    Концентрация белка и количественная оценка

    Образцы элюированного белка хранили для использования при 4°C в различных элюирующих буферах после концентрирования с использованием центрифужного концентратора Vivaspin (Fisher Scientific), отсечение по молекулярной массе 10 кДа. Сначала концентратор заливали деионизированной водой и центрифугировали при 1000 x g, 4°C в течение 10 мин. Затем образец белка центрифугировали при 1000×g, 4°C в течение 15 минут или до тех пор, пока не была достигнута желаемая концентрация. Содержание белка в образцах CRP определяли по поглощению при УФ-излучении 280 нм.Коэффициент экстинкции был рассчитан по последовательности CRP как 1,7 (Expasy, http://web.expasy.org/protparam/).

    План этического применения и исследовательского исследования

    Этическое одобрение экспериментального исследования образцов сыворотки крови человека было предоставлено Комитетом по этике научных исследований Национальной службы здравоохранения Великобритании (NRES) South Central — Oxford B (ссылка REC: 15/SC/0179). В общей сложности было набрано 40 стационарных пациентов Университетских больниц Северного Мидленда (UHNM), идентифицированных только по номерам образцов, которые были старше 18 лет, были в состоянии дать информированное согласие, должны были пройти обычный анализ крови и у которых уровень СРБ в сыворотке >100 мг/л, измеренный с помощью иммунотурбидиметрии на анализаторе Siemens Advia 2400 (Siemens Healthcare Diagnostics Limited, Фримли, Великобритания).Все аспекты нашего исследования соответствовали нормативным положениям и условиям, установленным комитетом NRES и местным комитетом по этике Кильского университета.

    Сбор проб человеческой сыворотки

    Цельная кровь человека была собрана в гелевые пробирки BD Vacutainer SST без антикоагулянта. Пробирки с образцами оставляли на 30 мин для свертывания и центрифугировали при 3500 g в течение 7 мин для отделения сыворотки. Образцы сыворотки хранили при 4°C.

    Очистка СРБ из образцов сыворотки человека

    СРБ очищали из сыворотки человека с заметно повышенными уровнями СРБ (>100 мг/л), что определяли с помощью обычно используемого клинического анализа, с помощью аффинной хроматографии с PCho, как описано выше.Объем проб сыворотки составлял 900 мкл. Затем элюированные образцы очищали с помощью эксклюзионной хроматографии, как описано для анализа in vitro , для выделения потенциальных изоформ CRP. Вкратце, образцы наносили на колонку через петлю ввода образца объемом 2 мл. Элюцию образца с использованием буфера А контролировали по поглощению в УФ-излучении при 280 нм при скорости потока 0,5 мл/мин. Время элюирования pCRP и mCRP рассчитывали перед очисткой на основе исследований in vitro .

    ELISA-анализ СРБ из образцов сыворотки крови человека

    После элюции из колонки для эксклюзионной хроматографии очищенные pCRP и mCRP из образцов сыворотки человека также подвергали анализу ELISA в соответствии с общими процедурами, описанными выше.Очищенные фракции pCRP и mCRP сыворотки человека перед анализом разводили в буфере А 1:100 и 1:10 соответственно. Для калибровки 50 мкл кальциевого буфера (буфер А) добавляли в столбцы 1–8, ряды А–В планшета для ИФА. 50 мкл либо нативного pCRP (Scripps), либо mCRP ( in vitro , очищенный после диссоциации 3 М мочевины) добавляли в колонку 1, ряды A–B (0,165 мкг, 0,0033 мг/мл). Проводили серийное разведение до столбца 7, ряды A-B, оставляя только кальциевый буфер в столбце 8, ряды A-B (отрицательный контроль).

    Экспериментальные процедуры для образцов человеческой сыворотки, примененные к коммерчески полученному CRP

    Общие методы аффинной и эксклюзионной хроматографии, а также ELISA приведены в другом месте. Особенности этой экспериментальной процедуры были следующими: на аффинную колонку PCho наносили всего 3,0 мг (1,2 мл при 2,5 мг/мл) CRP (сайт связывания). Элюированные ЭДТА 3 мл фракции CRP собирали и концентрировали с использованием Vivaspin Turbo 15 (10 кДа MWCO) при 4°C, 2100 об/мин в течение 10 мин.После повторной калибровки колонки для исключения размера (необходимой в связи с заменой колонки) с использованием стандартов молекулярной массы СРБ (115 кДа), кональбумина (75 кДа), овальбумина (43 кДа), карбоангидразы (29 кДа, рибонуклеазы (13,7 кДа), и апротинин (6,5 кДа), FPLC этого очищенного PCho CRP с исключением размера проводили при скорости потока 0,5 мл/мин Было проведено два цикла исключения размера, первая загрузка 500 мкг CRP, сверх CRP в образце сыворотки с самым большим клинически определяемым уровнем СРБ вторая загрузка 100 мкг.Фракции, охватывающие объем элюции mCRP, указанный в калибровке, собирали (шесть фракций по 5 мл в каждом случае), разводили 1:100 и 1:50 в кальциевом буфере и подвергали ИФА (первичное антитело CRP-8) в трех повторностях для всех фракций. . Были заполнены два планшета для ELISA, один для фракций эксклюзионной хроматографии (SEC) по 500 мкг, другой для фракций из эксперимента SEC по 100 мкг. Оба включали калибровку в трех экземплярах с использованием серийных разведений 6 нг мСРБ (3 М мочевины, диссоциированной) вместе с положительным (4 нг мСРБ) и отрицательным (кальциевый буфер, буфер А) контролями.

    Результаты

    Производство и очистка мономерного С-реактивного белка

    in vitro

    Эксклюзионная хроматография использовалась для оценки уровня диссоциации пентамерного СРБ в мономерный СРБ в присутствии 1 мМ ЭДТА при различных концентрациях мочевины, каждая в течение нескольких недель, и для очистки как пСРБ, так и мСРБ из образец. Это привело к выбору 2-4 М мочевины в течение 10 недель. Для калибровки объем пустот был рассчитан равным 46.79 мл и объем колонки 120,6 мл. Объемы элюции для стандартов молекулярной массы приведены в таблице S1, а калибровочный график — на рисунке S1. Кривые элюирования показаны на рис. 1, а объемы элюирования и рассчитанные молекулярные массы в таблице 1. В кривых элюирования нет признаков промежуточных агрегаций CRP, состоящих из 2, 3 или 4 субъединиц. Фракции по 5 мл собирали во время элюции, собирая две фракции, связанные с каждым пиком, например, 75–80 мл, 80–85 мл для пСРБ, 90–95 мл, 95–100 мл для мСРБ для диссоциации 3 М. , объединяли и концентрировали в элюирующем буфере для дальнейшей характеристики.Измерение концентрации белка (поглощение при УФ-излучении 280 нм) для концентрированных образцов pCRP и mCRP показало потери до 50% по отношению к исходному pCRP. Потери действительно значительно различаются, с прямой корреляцией между количествами CRP, и, по-видимому, существует «базовая» потеря, особенно на этапе концентрации, независимо от количества. Это явно имеет гораздо больший эффект для небольших количеств. Для количеств CRP в диапазоне мг достигается выход до 90% после исключения размера и концентрации, в то время как для небольших количеств в диапазоне мкг обычные потери до 50%.

    Рисунок 1 . Генерация мономерного CRP. Прослеживается эксклюзионная хроматография для экспериментов по диссоциации мочевины с 1 мМ ЭДТА. В каждом случае пик 1 представляет собой элюированный пентамерный CRP, а пик 2 представляет собой элюированный мономерный CRP. (A) 2M мочевина (B) 2,5M мочевина (C) 3M мочевина (D) 4M мочевина — пик 3 определен как несущественный на основе рассчитанной молекулярной массы.

    Таблица 1 . Объемы элюирования колонки для исключения размера и расчетные молекулярные массы после диссоциации pCRP с помощью различных концентраций мочевины.

    Диссоциация 3 М мочевины (рис. 1C) явно максимизирует как выход mCRP, так и конверсию pCRP в mCRP, и поэтому использовалась в последующих исследованиях. В присутствии кальция (5 мМ) признаков диссоциации не наблюдалось (результаты не показаны).

    Вестерн-блоты очищенного

    in vitro Продукты диссоциации pCRP

    вестерн-блоттинга (рис. 2) эксклюзионной хроматографии, элюированных мономерными и недиссоциированными пентамерными фракциями СРБ (рис. 1), подтвердили способность белков распознаваться антителом против СРБ.

    Рисунок 2 . Характеристика мономерного СРБ in vitro . (A) Вестерн-блоты (невосстанавливающий 12,5% SDS) пентамерной (a) и мономерной (b) фракций CRP из анализа эксклюзионной хроматографии после диссоциации с мочевиной. (а) Дорожка 1 (0,1 мкг) и дорожка 2 (1 мкг) содержат пентамерную фракцию, отделенную от 3 М образца, диссоциированного с мочевиной, с контрольным pCRP на дорожке 3. (б) Дорожки 1, 3, 5, 7 содержат мономерную фракцию отдельно от 2, 2.Образцы диссоциации мочевины 5, 3 и 4 М соответственно. Дорожки 2, 4, 6, 8 содержат буфер. Дорожка 9: mCRP, диссоциированный с 3 М мочевиной (дорожка 5), затем элюированный из аффинной колонки PC с помощью ЭДТА (b). Эту дорожку вырезали из блота после 5-минутной экспозиции, а оставшиеся дорожки 1–8 экспонировали еще в течение 40 мин. Дорожка 10. Маркеры молекулярной массы (Biorad Precision Plus неокрашенные), вырезаемые перед блоттингом и окрашиваемые кумасси бриллиантовым синим. Пунктирная линия указывает 23 кДа. (B) PCho Аффинная хроматография эксклюзионной очистки, in vitro продуцирует mCRP (из 3 М мочевины, дорожка 5, Ab).Главный пик представляет собой элюирование mCRP хелатором кальция ЭДТА. Время представляет собой прошедшее время после загрузки образца mCRP. Вестерн-блот аффинно очищенного mCRP с PCho показан на дорожке 9 блота в (Ab).

    Связывание очищенного мономерного CRP

    in vitro с фосфохолином

    3 М мочевинный диссоциированный mCRP, очищенный методом исключения по размеру, наносили на аффинную колонку PCho с последующей элюцией хелатирующим буфером с ЭДТА (буфер D) (рис. 2). Объединенные фракции mCRP концентрировали и подвергали вестерн-блоттингу (рис. 2), подтверждающему способность белка распознаваться антителом против CRP.Измерение концентрации белка (поглощение при УФ-излучении 280 нм) для концентрированного образца mCRP показало потери до 70% по отношению к исходному mCRP.

    Исследования осаждения с

    Streptococcus pneumoniae Полисахарид клеточной стенки

    Было проведено осаждение mCRP и pCRP с помощью CWPS. Калибровочные данные и графики ELISA для pCRP и mCRP приведены в таблицах S2, S3, рисунках S2, S3. Уровни преципитации как нативного pCRP, так и , продуцируемого in vitro , очищенного методом эксклюзионной очистки mCRP (3 М мочевины, диссоциированной) при инкубации с различными количествами CWPS, показаны на рисунке 3.

    Рисунок 3 . Осаждение pCRP (20 мкг) и mCRP (3 М мочевины, 20 мкг) с CWPS. Показаны ошибки ± стандартное отклонение ( n = 2).

    Pentameric CRP отображает классическую кривую преципитации (37) с небольшим преципитацией с CWPS на обоих концах кривой, где белок или лиганд находится в значительном избытке. Приблизительно 2 мкг pCRP осаждается из раствора при инкубации с 0,1 мкг CWPS, а 7 мкг pCRP осаждается из раствора при инкубации с 300 мкг CWPS.Максимальное осаждение (17 мкг из общего количества 20 мкг pCRP) происходит при одинаковых количествах белка и CWPS (20 мкг). Осаждение mCRP поддерживает общий уровень приблизительно 5–7 мкг независимо от количества CWPS, достигая пика чуть более 7 мкг, когда mCRP инкубируют с 50 мкг CWPS, хотя этот пиковый уровень все еще заметно ниже, чем для pCRP с 50 мкг CWPS (примерно 15 мкг).

    Очистка СРБ из образцов сыворотки человека

    Образцы сыворотки от 40 пациентов с повышенным уровнем СРБ (>100 мг/л по данным клинического анализа) очищали индивидуально с помощью аффинной хроматографии с PCho (рис. S4).Дальнейшая очистка и характеристика следовали процедурам, применяемым для mCRP in vitro . Все аффинно очищенные образцы подвергали эксклюзионной хроматографии (рис. 4). Основной пик элюировался при 79,01 мл (110 кДа; рис. S1; пСРБ). Хотя пик мСРБ, ожидаемый при 95 мл, не наблюдался ни в одном из очищенных образцов (рис. 4), фракции 90–95 и 95–100 мл ( см. Таблицу 1, Рисунок 1) были объединены для дальнейшего анализа.

    Рисунок 4 . Типичный след эксклюзионной хроматографии одного из образцов сыворотки человека, очищенных с помощью PCho.Пик пСРБ виден, в то время как пик мСРБ не виден.

    Анализ пентамерного и мономерного С-реактивного белка в образцах сыворотки человека

    После аффинной хроматографии с последующей эксклюзионной очисткой фракции как пентамерного, так и мономерного CRP подвергали анализу ELISA и количественному определению. Детали калибровки приведены в Таблице S4, Рисунок S5 (mCRP) и Таблице S5, Рисунок S6 (pCRP). Все концентрации CRP были скорректированы для представления концентрации в исходных образцах сыворотки.Все 40 образцов очищенного pCRP дали положительный результат в ELISA на наличие CRP (фиг. 5). Наименьшее зарегистрированное значение пентамерного СРБ для любого из образцов было рассчитано на уровне 2,5 мг/л, максимальное значение было зарегистрировано на уровне 71,3 мг/л, а среднее значение составило 23,3 мг/л (SE = ±2,3). Все 40 образцов очищенной мономерной формы СРБ из сыворотки также дали положительный результат на наличие СРБ (рис. 5) со средним значением 1,03 мг/л (SE = ±0,11), максимальным значением было 3,14 мг/л (образец 148). Нет существенной корреляции между концентрациями mCRP и pCRP в сыворотке (рис. 5) во всех образцах, например, более высокие значения mCRP в равной степени связаны как с высокими, так и с низкими уровнями pCRP (рис. S7).Очищенные пентамерные и мономерные фракции CRP из колонки для исключения размера также подвергали вестерн-блоттингу. Все 40 образцов pCRP дали положительный результат на CRP, репрезентативная выборка показана на рисунке 5. Что касается mCRP, вестерн-блоты выявили CRP в 3 из 40 образцов mCRP, полученных из образцов пациентов (рисунок 5).

    Рисунок 5 . ИФА и Вестерн-блот анализ пентамерного и мономерного СРБ в образцах сыворотки крови человека. (A,B) Анализ ELISA. Все 40 образцов дали положительный результат как на pCRP, так и на mCRP.Баллы основаны на среднем значении минус средний контроль. Показаны ошибки ± стандартное отклонение ( n = 3). (A) Образцы разбавляли 1:100 в трех повторностях. Средняя концентрация pCRP составляет 23,3 мг/л ( SE = ±2,3). (B) Образцы разводили 1:10 в трех повторах. Средняя концентрация мСРБ составляет 1,03 мг/л ( SE = ± 0,11). (C,D) Вестерн-блоттинг (невосстанавливающий 12,5% SDS) анализ пентамерных и мономерных фракций CRP сыворотки человека, элюированных из колонки для исключения размера. (C) Пентамерный CRP был положительным для всех 40 протестированных образцов (CRP 148, 146, 124, 120, 117, 115, 110, 109, 108 на дорожках 1–9 соответственно показаны здесь). Контрольный образец pCRP (~23 кДа) на дорожке 10. (D) Мономерный СРБ: восемь из сорока образцов сыворотки (018, 021, 023, 109, 115, 148, 153, 175) показаны с двумя образцами (дорожка 5, образец 115; дорожка 6, образец 148; два самых высоких значения в ELISA mCRP) положительны для mCRP с молекулярной массой приблизительно 23 кДа. Дорожка 9 содержит контроль mCRP, диссоциированный мочевиной, с молекулярной массой 23 кДа, причем эта дорожка вырезается из геля через 2.5 мин, а остаток экспонируется еще 42,5 мин. Еще один образец (204, четвертое по величине значение mCRP в ELISA) был положительным на mCRP в вестерн-блоттинге (данные не показаны). мСРБ из образца 012, который дал самое высокое значение ELISA для мСРБ и третье по величине значение ELISA для mCRP, не мог быть визуализирован вестерн-блоттингом.

    Экспериментальные процедуры для образцов человеческой сыворотки, примененные к коммерчески полученному CRP

    Применение наших экспериментальных процедур (PCho-аффинная хроматография с последующим разделением pCRP и mCRP с помощью SEC) для получения CRP из коммерческих источников для выделения mCRP из образцов сыворотки пациентов, все из которых показали заметно повышенные уровни CRP > 100 мг/л при клиническом анализе, было чтобы подтвердить, что эти процедуры очистки не производят mCRP, обнаруженный в образцах пациентов.Аффинная хроматография PCho коммерческого CRP дала чистый острый пик при элюировании ЭДТА (рис. S8A). Элюированные ЭДТА 3 мл фракции G9–G11 CRP (рис. S8A) собирали и концентрировали до 2 мл при 1,44 мг/мл (2,88 мг CRP). Нанесение очищенного PCho CRP на колонку для исключения размера (два отдельных анализа, загрузка 500 мкг и 100 мкг) показало пик pCRP в ожидаемом положении 70–71 мл (рисунки S8B, C), указанный калибровкой (таблица S6, Рисунок S9) без заметного пика в положении mCRP (90–91 мл).ELISA-анализ очищенного нативного CRP PCho + исключения размера как для 500 мкг (таблицы S7, S8, рисунок S10), так и для 100 мкг (таблицы S9, S10, рисунок S11) прогонов исключения размера не выявил обнаруживаемого mCRP. Фракция E5 для колонок исключения большего размера (500 мкг) показывает положительное значение CRP 1,25 мг/л, связанное с хвостом pCRP (рис. 6A), в то время как CRP не мог быть идентифицирован ни в одной из фракций любой серии в области хвоста. Объем элюирования мСРБ. (Рисунок 6Б).

    Рисунок 6 .Исключение размера FPLC повторно очищенного CRP PCho. Кривые элюирования показаны как для (A) 500 мкг, так и для (B) 100 мкг CRP, загруженных в колонку. Фракции E5–E10 и J5–J10 (по 5 мл каждая) разводили 1:100 и 1:50 в кальциевом буфере и подвергали ИФА (первичное антитело CRP-8) в трех повторах (см. Таблицы S7–S10, Рисунки S10, S11). . Для каждой фракции показан общий CRP в мг/л, усредненный по двум разведениям. Фракция E5 для более высокой (500 мкг) загрузки показывает положительное значение, связанное с хвостом pCRP, в то время как CRP не может быть идентифицирован ни в какой другой фракции или ни в какой фракции цикла 100 мкг.Указаны две фракции, в которых будет элюироваться mCRP.

    Обсуждение

    Эксперименты по диссоциации С-реактивного белка с использованием коммерчески доступного pCRP и ряда концентраций мочевины проводились в течение 10 недель, чтобы установить подходящий протокол in vitro для производства мономерного С-реактивного белка. Цель состояла в том, чтобы свести к минимуму силу мочевины, при этом вызывая высокий уровень диссоциации в течение реалистичного периода времени. Хотя механизм диссоциации в присутствии мочевины не ясен, мы считаем, что это наиболее подходящий метод из описанных в литературе (20), поскольку попытки обработки пентамерного СРБ нагреванием или кислотными условиями приводили к полной денатурации белка (20). данные не показаны).Наиболее подходящей концентрацией мочевины для почти полной диссоциации пентамерного СРБ в мономерный (>90%) была 3 М (рис. 1). Более низкие концентрации мочевины приводили к частичной диссоциации или ее отсутствию, в то время как удаление ионов кальция из СРБ оказалось решающим независимо от концентрации мочевины. Диссоциированные образцы были успешно разделены на mCRP и остаточный pCRP с помощью эксклюзионной хроматографии, анализ вестерн-блоттинга подтвердил способность обоих белков распознаваться антителом против CRP.

    Дальнейшую характеристику mCRP in vitro проводили с использованием аффинной хроматографии с PCho и преципитации с помощью CWPS. Пик mCRP на аффинной хроматографии PCho (рис. 2) подтверждает кальций-зависимую PCho-связывающую способность , продуцируемого in vitro , mCRP, что дополнительно подтверждается вестерн-блот-анализом элюированного пика, который, как и ожидалось, был положительным для CRP. На основании этих экспериментальных данных был сделан вывод, что эксперименты по диссоциации мочевины успешно диссоциировали pCRP на составляющие его субъединицы с получением формы mCRP in vitro , которая сохранила свою способность связывать PCho.Исследования осаждения с CWPS (рис. 3) показали, что in vitro mCRP, полученный здесь, также сохраняет способность распознавать свой прототипный лиганд CWPS. Однако, в отличие от кривой преципитации CWPS, наблюдаемой для pCRP, in vitro , продуцируемый mCRP, не соответствует общей колоколообразной кривой, типичной для агрегации и преципитации сшитого комплекса (37). Более низкий уровень преципитации и его повышенная однородность в диапазоне концентраций CWPS по сравнению с pCRP, где каждый пентамер может достигать перекрестного связывания за счет многосайтового присоединения CWPS к одному или нескольким CWPS, согласуется с тем, что один сайт связывания PCho на мономер снижает возможность агрегации, хотя модификация мономера, которая снижает, но не устраняет связывание CWPS, нельзя сбрасывать со счетов.В предыдущих отчетах с использованием 8 М мочевины для диссоциации описывалось производство мономерной формы СРБ, которая демонстрировала снижение растворимости [агрегация и образование осадка при концентрациях кальция всего 0,05 мМ (9)] и изоэлектрической точки, а также потерю кальция. зависимое связывание с прототипом лиганда CRP CWPS (20). Это говорит о том, что mCRP in vitro , полученный здесь при 3 М мочевине, отличается от ранее описанного.

    Экспериментальные данные, полученные в результате исследований диссоциации in vitro , обеспечивающих получение мономерного СРБ с молекулярной массой приблизительно 23 кДа, который обратимо связывает PCho кальций-зависимым образом, осаждается с CWPS и распознается моноклональным антителом против СРБ, сформировали основа для методики, разработанной для анализа мономерного С-реактивного белка в сыворотке человека у пациентов с заметно повышенным уровнем СРБ >100 мг/л.Нашей целью было провести этот анализ независимо от антител, специфичных к одной или нескольким формам mCRP или специфичных к определенным эпитопам mCRP, с использованием образцов пациентов с клинически зарегистрированным повышенным уровнем pCRP >100 мг/л. Таким образом, аффинную хроматографию PCho с последующим исключением по размеру, дополненную вестерн-блоттингом и ELISA, использовали для выделения, очистки и обнаружения мономерного CRP в сыворотке. Средняя концентрация пентамерного СРБ в образцах сыворотки пациентов была рассчитана по данным ELISA и составила 23.3 мг/л, при этом минимальное рассчитанное значение составляет 2,5 мг/л, а максимальное – 71,3 мг/л (рис. 5). Разница между уровнями pCRP, определенными здесь, и уровнями, полученными в результате клинического анализа, все из которых были зарегистрированы как >100 мг/л, предполагает значительные потери во время процедуры очистки и необходимость более эффективных процессов количественного определения форм CRP.

    Мономерный CRP был успешно идентифицирован с помощью ELISA в очищенном CRP всех 40 образцов сыворотки пациентов (рис. 5), при этом три из четырех самых высоких концентраций также были обнаружены с помощью вестерн-блоттинга.В сочетании с аффинной хроматографией PCho, используемой для очистки, наши результаты демонстрируют, что мономерный CRP сыворотки не только проявляет ту же способность, что и диссоциированный mCRP in vitro , обратимо связываться с PCho зависимым от кальция образом, но также распознается теми же моноклональные анти-СРБ как pCRP, так и in vitro mCRP. По данным ELISA средний зарегистрированный уровень мономерного СРБ в образцах сыворотки составил 1,03 мг/л, а минимальное зарегистрированное значение равно 0.12 мг/л, а максимальное зарегистрированное значение 3,14 мг/л. Примечательно, что две самые высокие концентрации мСРБ в сыворотке, рассчитанные с помощью ELISA (образцы 115 и образцы 148; фигура 5), были обнаружены вестерн-блоттингом (фигура 5). Нет корреляции между содержанием двух молекулярных форм (рис. S7), например, из десяти самых высоких значений пСРБ в сыворотке (рис. 5) только три соответствовали одному из десяти самых высоких значений mCRP (рис. 5). Эти результаты свидетельствуют о том, что уровни мономерного СРБ в сыворотке значительно ниже, чем уровни пентамерного СРБ, при этом уровни мономерного СРБ варьируют в разных когортах.Несмотря на потерю белка в процессе очистки и концентрирования, мономерный СРБ, связывающий PCho, обнаруживается в сыворотке пациентов с заметно повышенным уровнем СРБ на порядок более высоких уровней по сравнению с ранее опубликованными данными, основанными на ELISA в сыворотке (24, 36). Хотя это может быть связано с различными процедурами, с тем, что мы включили только пациентов с повышенным уровнем СРБ >100 мг/л или с тем, что мСРБ связан с микрочастицами, избегающими аффинной экстракции PCho (30, 35), это повышает вероятность двух различных формы циркулирующего мСРБ.Поскольку все использованные здесь образцы пациентов имеют заметно повышенный уровень СРБ, из представленных здесь данных нельзя сделать никаких выводов относительно того, присутствует ли мСРБ в нормальной, здоровой сыворотке, или о природе этого мСРБ, если он присутствует.

    Чтобы убедиться, что mCRP, идентифицированный здесь в сыворотке, не является продуктом наших процедур очистки, нативный CRP из коммерческих источников был подвергнут тем же процедурам, что и образцы сыворотки, включая аффинную хроматографию PCho (которая позволила бы выделить любой из кальций-зависимых PCho связывание растворимого mCRP в дополнение к pCRP), концентрацию, исключение размера и ELISA с использованием того же антитела (CRP-8).Результаты (рис. 6) показывают, что мСРБ не является продуктом наших процедур, при этом мСРБ не обнаруживается с помощью ELISA. Таким образом, наш вывод состоит в том, что кальций-зависимое связывание PC, растворимый mCRP, идентифицированный и охарактеризованный здесь, присутствует на обнаруживаемых уровнях в сыворотке с заметно повышенными уровнями CRP.

    mCRP, выделенный из образцов сыворотки крови человека, в данном случае, где уровни pCRP были клинически оценены как >100 мг/л, а образцы mCRP, диссоциированные с 3 М мочевиной в течение 10 недель, обладают ключевыми связывающими свойствами.Оба проявляют способность обратимо связываться с PCho кальций-зависимым образом и, как и pCRP, оба распознаются одним и тем же моноклональным антителом против CRP. Осаждение мСРБ, диссоциированного мочевиной, с CWPS также предполагает, что обе исследуемые здесь формы сохраняют общие структурные и функциональные свойства мономеров CRP в пентамерной молекуле CRP. Это говорит о том, что мСРБ, обнаруженный здесь в сыворотке с заметно повышенными уровнями СРБ, подобен связанной с мембраной диссоциированной субъединице с близкой к нативной структурой, предложенной Lv и Wang (22), Zhang et al.(36) и Ji et al. (25). Было высказано предположение, что почти нативный мембраносвязанный mCRP является промежуточным этапом между диссоциацией после прикрепления pCRP к мембране и высвобождением после конформационного изменения (25, 27). Высвобождается ли сывороточный mCRP, обнаруженный здесь, с клеточной поверхности после диссоциации pCRP или он возникает где-то еще, неясно. Если это pCRP, связанный с клеточной поверхностью, то это предполагает, что превращение в конформационно отличный mCRP после диссоциации не является необходимым условием для высвобождения из мембраны.

    Перекрывающиеся характеристики in vitro и ex vivo mCRP, описанные здесь, позволяют предположить, что физиологически значимый мономерный CRP, который сохраняет почти нативную структуру и функцию субъединицы pCRP, был получен посредством in vitro диссоциации пентамерного CRP с использованием 3 мочевины в течение длительного периода. Это может обеспечить не только новые способы количественного определения как pCRP, так и mCRP в клинических условиях, но также и прочную основу для углубленного изучения структуры, функции и разнообразия физиологического CRP.

    Заявление о доступности данных

    Все наборы данных, созданные для этого исследования, включены в статью/дополнительный материал.

    Заявление об этике

    Исследования с участием людей были рассмотрены и одобрены Комитетом по этике научных исследований Национальной службы здравоохранения Великобритании (NRES) South Central — Oxford B (ссылка REC: 15/SC/0179). Пациенты/участники предоставили письменное информированное согласие на участие в этом исследовании.

    Вклад авторов

    RW, JM, JL и HW произвели и охарактеризовали mCRP in vitro .RW выделили и охарактеризовали мСРБ в сыворотке. А. Ф. руководил и наблюдал за сбором образцов сыворотки. AS разработал и руководил программой работы, а также руководил интерпретацией результатов при участии TG, JL и HW. TG внесла изменения в рукопись, составленную RW и AS, и завершила выпуск окончательной версии, включая рисунки. Все авторы внесли свой вклад в доработку рукописи и одобрили окончательный вариант для публикации.

    Финансирование

    Эта работа была частично поддержана наградой Кильского университета для AS, TG и AF.

    Конфликт интересов

    Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

    Благодарности

    Мы благодарим Управление патологии и медицинских сестер Университетской больницы Северного Мидленда NHS Trust, Стаффордшир, Великобритания, которые собирали образцы пациентов на протяжении всего исследования.

    Дополнительный материал

    Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fimmu.2020.00115/full#supplementary-material

    Сокращения

    CRP, С-реактивный белок человека; pCRP, пентамерный С-реактивный белок человека; mCRP, мономерный С-реактивный белок человека; БСА, бычий сывороточный альбумин; PBS, фосфатно-солевой буфер; ТМВ, 3, 3′, 5, 5′, тетраметилбензидин; APC, p -аминофенилфосфорилхолин; FPLC, быстрая белковая жидкостная хроматография; CWPS, Streptococcus pneumoniae С-полисахарид клеточной стенки; NRES, Служба этики научных исследований Национальной службы здравоохранения; ЭДТА, этилендиаминтетрауксусная кислота; ELISA, твердофазный иммуноферментный анализ; трис, трис(гидроксиметил)аминометан; РХо, фосфохолин.

    Каталожные номера

    1. Pepys MB, Dash AC, Fletcher TC, Richardson N, Munn EA, Feinstein A. Аналоги белков человеческой плазмы, С-реактивного белка и Р-компонента у других млекопитающих и у рыб. Природа. (1978) 273:168–70. дои: 10.1038/273168a0

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    2. Шрив А.К., Читэм Г.М.Т., Холден Д., Майлз Д.А.А., Тернелл В.Г., Воланакис Дж.Е. и соавт. Трехмерная структура С-реактивного белка человека. Nat Struct Biol. (1996) 3:346–54. doi: 10.1038/nsb0496-346

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    3. Томпсон Д., Пепис М.Б., Вуд С.П. Физиологическая структура С-реактивного белка человека и его комплекса с фосфохолином. Структура. (1999) 7:169–77. дои: 10.1016/S0969-2126(99)80023-9

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    4. Мортенсен Р.Ф., Османд А.П., Гевурц Х. Влияние С-реактивного белка на лимфоидную систему.I. Связывание с тимусзависимыми лимфоцитами и изменение их функций. J Exp Med. (1975) 141:821–39. doi: 10.1084/jem.141.4.821

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    5. Mortensen RF, Marcelletti JF, Johnson CS, Furmanski P. С-реактивный белок человека (CRP): селективный регулятор клеток-предшественников моноцитов костного мозга. Анн Н.Ю. акад. (1982) 389:457–8. doi: 10.1111/j.1749-6632.1982.tb22171.x

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    6.Трон К., Манолов Д.Э., Рокер С., Качеле М., Торжевски Дж., Ниенхаус Г.Ю. С-реактивный белок специфически связывается с Fcgamma-рецептором типа 1 на макрофагоподобной клеточной линии. Евро J Иммунол. (2008) 38:1414–22. doi: 10.1002/eji.200738002

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    7. Zhang Z, Ni H. С-реактивный белок как предиктор смертности у пациентов в критическом состоянии: метаанализ и систематический обзор. Интенсивная терапия анестезии. (2011) 39:854–61. дои: 10.1177/0310057С11039

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    9. Койвунен М.Е., Крогсруд Р.Л. Принципы иммунохимических методов, применяемых в клинических лабораториях. Медицинская лаборатория. (2006) 37:490–7. дои: 10.1309/MV9RM1FDLWAUWQ3F

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    10. Рифаи Н., Баллантайн С.М., Кушман М., Леви Д., Майерс Г.Л. Высокочувствительный анализ С-реактивного белка и сердечного С-реактивного белка: есть ли необходимость дифференцировать? Клин Хим. (2006) 52:1254–7. doi: 10.1373/clinchem.2006.070904

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    11. Пассери В., Виллерсон Дж. Т., Йех Э. Т. Прямое провоспалительное действие С-реактивного белка на эндотелиальные клетки человека. Тираж. (2000) 102:2165–8. doi: 10.1161/01.CIR.102.18.2165

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    12. Пассери В., Ченг Дж.С., Уиллерсон Дж.Т., Йех Э.Т. Модуляция опосредованной С-реактивным белком индукции хемоаттрактантного белка-1 моноцитов в эндотелиальных клетках человека препаратами против атеросклероза. Тираж. (2001) 103:2531–4. DOI: 10.1161/01.CIR.103.21.2531

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    13. Torzewski J, Torzewski M, Bowyer DE, Frohlich M, Koenig W, Waltenberger J, et al. С-реактивный белок часто колокализируется с терминальным комплексом комплемента в интиме ранних атеросклеротических поражений коронарных артерий человека. Тромб атеросклероза Vascu Biol. (1998) 18:1386–92. doi: 10.1161/01.ATV.18.9.1386

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    14.Zhang YX, Cliff WJ, Schoefl GI, Higgins G. Коронарное распределение C-реактивного белка: его связь с развитием атеросклероза. Атеросклероз. (1999) 145:375–9. doi: 10.1016/S0021-9150(99)00105-7

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    15. Zhang Z, Yang Y, Hill MA, Wu J. Способствует ли С-реактивный белок развитию атеротромбоза посредством опосредованного оксидантами высвобождения протромбических факторов и активации тромбоцитов? Фронт Физиол. (2012) 3:1–6.doi: 10.3389/fphys.2012.00433

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    17. Ji S, Ma L, Bai C, Shi J, Li H, Potempa LA, et al. Мономерный С-реактивный белок активирует эндотелиальные клетки посредством взаимодействия с микродоменами липидного рафта. ФАСЭБ. Дж. (2009) 23:1806–16. doi: 10.1096/fj.08-116962

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    18. Li R, Ren M, Luo M, Zhang Z, Luo B, Wy J. Мономерный С-реактивный белок изменяет свойства фибринового сгустка на эндотелиальных клетках. Рез. тромба. (2012) 129:251–6. doi: 10.1016/j.thromres.2012.03.014

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    20. Potempa LA, Maldonado BA, Laurent P, Zemel ES, Gewurz H. Антигенные, электрофоретические и связывающие изменения человеческого С-реактивного белка, селективно модифицированные в отсутствие кальция. Мол. Иммунол. (1983) 20:1165–75. дои: 10.1016/0161-5890(83)-2

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    21.Ван М.И., Цзи С.Р., Ба К.Дж., Эль Кебир Д., Ли Х.И., Ши Д.М. и др. Редокс-переключатель в С-реактивном белке модулирует активацию эндотелиальных клеток. FASEB J. (2011) 25:3186–96. doi: 10.1096/fj.11-182741

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    23. Ying SC, Gewurz H, Kinoshita CM, Potempa LA, Siegel JN. Идентификация и частичная характеристика множества нативных и неоантигенных эпитопов С-реактивного белка человека с использованием моноклональных антител. Дж Иммунол. (1989) 143:221–8.

    Реферат PubMed | Академия Google

    24. Wang J, Tang B, Liu X, Wu X, Wang H, Xu D, et al. Повышение уровня мономерного СРБ при остром инфаркте миокарда: возможный новый и специфический биомаркер для диагностики и оценки тяжести заболевания. Атеросклероз. (2015) 239:343–9. doi: 10.1016/j.atherosclerosis.2015.01.024

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    25. Ji S, Wu Y, Zhu L, Potempa LA, Sheng F, Lu W, et al.Клеточные мембраны и липосомы диссоциируют С-реактивный белок (CRP) с образованием нового биологически активного структурного интермедиата: mCRP m . FASEB J. (2007) 21:284–94. doi: 10.1096/fj.06-6722com

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    26. Kresl JJ, Potempa LA, Anderson BE. Превращение нативного олигомера в модифицированную мономерную форму С-реактивного белка человека. Int J Biochem Cell Biol. (1998) 30:1415–26. дои: 10.1016/S1357-2725(98)00078-8

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    27.Брейг Д., Неро Т.Л., Кох Х.Г., Кайзер Б., Ван Х, Тиле Дж.Р. и др. Переходные изменения в структуре СРБ приводят к обнажению провоспалительных участков связывания. Нац.коммун. (2018) 8:14188. doi: 10.1038/ncomms14188

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    28. Yao Z, Zhang Y, Potempa LA, Rajab I, Ji L, Lv J, et al. Метод, основанный на чувствительности к окислительно-восстановительному потенциалу, для количественного определения как пентамерного, так и мономерного С-реактивного белка в одном анализе. J Immunol Methods. (2019) 470:40–5. doi: 10.1016/j.jim.2019.04.009

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    29. Eisenhardt SU, Thiele JR, Bannasch H, Stark B, Peter K. C — реактивный белок, как конформационные изменения влияют на воспалительные свойства. Клеточный цикл. (2009) 8:3885–92. doi: 10.4161/cc.8.23.10068

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    30. Habersberger J, Frederik S, Scheichl A, Htun N, Bassler N, Merivirta R, et al.Циркулирующие микрочастицы генерируют и транспортируют С-реактивный белок у пациентов с инфарктом миокарда. Кардиоваскулярный рез. (2012) 96:64–72. дои: 10.1093/cvr/cvs237

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    31. Слевин М., Крупински Дж. Роль мономерного С-реактивного белка в регуляции ангиогенеза, воспаления эндотелиальных клеток и тромбообразования при сердечно-сосудистых/цереброваскулярных заболеваниях? Хистол Гистопатол. (2009) 24:1473–8. дои: 10.14670/ХН-24.1473

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    32. Li SL, Feng JR, Zhou HH, Zhang CM, Lv GB, Tan YB, et al. Кислый рН способствует индуцированной окислением диссоциации С-реактивного белка. Мол Иммунол. (2018) 104:47–53. doi: 10.1016/j.molimm.2018.09.021

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    33. Thiele JR, Habersberger J, Braig D, Schmidt Y, Goerendt K, Maurer V, et al. Диссоциация пентамерного белка в мономерный С-реактивный белок локализует и усугубляет воспаление: in vivo доказательство мощного провоспалительного механизма и новой противовоспалительной стратегии. Тираж. (2014) 130:35–50. doi: 10.1161/РАСПИСАНИЕAHA.113.007124

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    34. Molins B, Pena E, Vilahur G, Mendieta C, Slevin M, Badimon L. Изоформы С-реактивного белка различаются по своему влиянию на рост тромба. Тромб атеросклероза Vascu Biol. (2008) 28:2239–46. doi: 10.1161/ATVBAHA.108.174359

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    35. Кроуфорд Дж.Р., Триал Дж., Намби В., Хугевен Р.С., Таффет Г.Е., Энтман М.Л.Плазменные уровни эндотелиальных микрочастиц, несущих мономерный С-реактивный белок, повышены при заболевании периферических артерий. J Cardiovasc Transl Res. (2016) 9:184–93. doi: 10.1007/s12265-016-9678-0

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    36. Zhang L, Li HY, Li W, Shen ZY, Wang YD, Ji SR, et al. Анализ ELISA для количественного определения мономерного С-реактивного белка в плазме. Фронт Иммунол. (2018) 9:1–5. doi: 10.3389/fimmu.2018.00511

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Как избавиться от высокого содержания белка в организме

    Питьевая вода — хороший способ избавиться от высокого содержания белка в организме.

    Изображение предоставлено: Kentaroo Tryman/Maskot/GettyImages

    Ваше тело — это удивительная, хорошо смазанная машина, которая чрезвычайно эффективно уравновешивает количество белка в крови и моче, когда все работает как надо. Однако могут возникнуть определенные проблемы со здоровьем, из-за которых вашему организму будет сложно справляться с избытком белка самостоятельно.

    В этих случаях вам может понадобиться небольшая помощь, чтобы избавиться от лишнего белка. Имейте в виду, однако, что высокий уровень белка обычно идет рука об руку с проблемами почек.Если вы подозреваете, что в вашем организме высокое содержание белка, или если ваш врач уже подтвердил это, убедитесь, что вы строго следуете инструкциям вашей медицинской бригады. Никогда не пытайтесь лечить высокий уровень белка в организме самостоятельно.

    Функции белка

    Когда вы слышите слово «белок», вы можете сразу же подумать о диетическом белке, который содержится в вашей пище, но это не единственный тип белка. В вашем организме также есть белки в виде альбумина, антител и ферментов (среди прочего), которые выполняют важные функции во всех ваших клетках и тканях.Вот некоторые из основных вещей, которые делают эти белки:

    • Помогите укрепить свою иммунную систему, чтобы бороться с болезнями.
    • Действуют как гормоны, регулирующие функции организма.
    • Создайте новые мышцы и помогите сохранить текущую мышечную массу.
    • Переносит кислород, питательные вещества, витамины и лекарства по всему телу.

    Хотя ваше тело действительно использует белки, которые вы едите, для создания новых форм белка, которые выполняют все эти важные функции, употребление пищи с высоким содержанием белка не приводит к повышению уровня белка в крови.Когда это происходит, это обычно указывает на то, что с вашим здоровьем происходит что-то нежелательное.

    Высокое содержание белка в крови

    Высокий уровень белка в крови, также называемый гиперпротеинемией, возникает, когда уровень определенных белков в крови выше, чем должен быть. Это не само заболевание, а клинический признак того, что в вашем организме происходит что-то еще. Поскольку высокий уровень белка в крови сам по себе не вызывает каких-либо неприятных симптомов, врачи обычно обнаруживают его во время обычного анализа крови или при поиске другой проблемы.

    Если ваш врач обнаружит высокий уровень белка в вашей крови, он начнет расследование, чтобы выяснить почему ваш уровень высок. Клиника Майо перечисляет следующие потенциальные причины высокого содержания белка в крови:

    .
    • Дегидратация
    • Гепатит (В и С)
    • ВИЧ/СПИД
    • Множественная миелома
    • Амилоидоз
    • Моноклональная гаммапатия неустановленной значимости (MGUS)

    Подробнее: Причины низкого уровня белка в крови

    Высокое содержание белка в моче

    Ваши почки частично служат для удаления отходов или лишней жидкости из крови, оставляя при этом такие важные вещества, как белки.Здоровые почки действительно хороши в этой работе, но если у вас есть основное заболевание или состояние, влияющее на функцию почек, белки могут проходить через механизмы фильтрации в ваших почках и попадать в мочу. Это называется протеинурией (причудливое название, означающее, что уровень белка в моче выше нормы).

    Существует множество различных состояний, которые могут вызывать протеинурию, но некоторые из них включают:

    • Диабет
    • Хроническая болезнь почек
    • Болезнь сердца/сердечная недостаточность
    • Высокое кровяное давление
    • Лимфома Ходжкина
    • Волчанка
    • Почечная инфекция
    • Беременность и/или преэклампсия
    • Ревматоидный артрит
    • Серповидноклеточная анемия

    С другой стороны, согласно данным клиники Майо, некоторые факторы могут вызвать временное повышение уровня белка в моче.В этих случаях уровень белка обычно нормализуется сам по себе по прошествии некоторого времени, или вы избавляетесь от этой конкретной ситуации, и ваши почки помогают отфильтровать избыток белка. Вещи, которые временно повышают уровень белка, включают:

    • Эмоциональный стресс
    • Интенсивные упражнения
    • Лихорадка
    • Воздействие низких температур
    • Обезвоживание

    Подробнее: Диета для снижения содержания белка в моче

    Избавление от высокого содержания белка

    Поскольку существует множество различных причин высокого содержания белка в крови или моче, лучший способ сбалансировать уровень белка и избавиться от его избытка — это лечить основную причину.Чтобы убедиться, что вы определили правильную причину, вам необходимо проконсультироваться с врачом.

    Например, если у вас повышенный уровень белка в моче из-за высокого кровяного давления, вам необходимо работать над тем, чтобы держать свое кровяное давление под контролем и в нормальных, здоровых пределах. В большинстве случаев, если вы это сделаете, уровень белка нормализуется и исчезнет сам по себе.

    С другой стороны, по данным Национального почечного фонда, если высокий уровень белка является результатом обезвоживания, вы можете избавиться от избыточного белка (или разбавить его концентрацию), выпив больше воды и убедившись, что вы получаете достаточно электролитов.Это помогает обратить вспять обезвоживание и, опять же, помогает нормализовать уровень белка.

    Если высокий уровень белка вызван эмоциональным стрессом, вы можете снизить его, регулярно занимаясь методами снижения стресса, такими как йога и медитация, а также разговаривая с терапевтом, который поможет вам справиться со своими эмоциями, чтобы вы могли справиться с ними. лучше.

    Имейте в виду, что некоторые из состояний, вызывающих высокий уровень белка (как в крови, так и в моче), являются серьезными и потенциально опасными для жизни, если их не лечить должным образом и под наблюдением врача.

    Не пытайтесь лечить высокий уровень белка в домашних условиях без предварительной консультации с врачом. Как только вы выясните основную причину повышенного уровня белка, вы сможете вместе разработать план лечения.

    Ваши потребности в белке

    Несмотря на то, что здоровые почки действительно эффективно фильтруют любой избыток белка в крови, а высокий уровень белка обычно не связан непосредственно с диетой, все же рекомендуется не перебарщивать с потреблением.Многие думают, что чем больше белка, тем лучше, но это не всегда так. Пока вы получаете достаточно, чтобы обеспечить свое тело тем, что ему нужно, вам не нужно потреблять много лишнего.

    Текущая рекомендация по белку составляет 0,8 грамма на килограмм массы тела. Это означает, что если вы весите 150 фунтов, вам нужно всего около 55 граммов в день. Если вы очень активны или пытаетесь нарастить мышечную массу, ваши потребности могут быть немного выше. В отчете Harvard Health отмечается, что вы можете потреблять в два раза больше рекомендуемого количества белка в день (и, возможно, даже немного больше), не испытывая никаких негативных последствий.