29Мар

Hcv ag: 4 обязательных анализа

Содержание

4 обязательных анализа

Комплексное исследование объединяет 4 анализа, обязательных для госпитализации, постановки на учет, перевода из/в лечебное учреждение, получения санитарной книжки, получения разрешения на работу в РФ и пр. Исследования позволяют обнаружить заболевания, передаваемые при медицинских процедурах и половым путем: ВИЧ, гепатиты В и С, сифилис. В случае анонимной сдачи данного обследования не требуется указывать паспортные данные (Ф. И. О, адрес постоянного места жительства, гражданство).

В комплекс входят:

  • HIV 1,2 Ag/Ab Combo (определение антител к ВИЧ типов 1 и 2 и антигена p24)
  • Anti-HCV, антитела, ИФА
  • Treponema pallidum, антитела, ИФА
  • HBsAg, ИФА

Синонимы русские

Гепатит С, антитела + гепатит B, антиген, австралийский антиген + ВИЧ 1 и 2, антитела и антиген p24 + сифилис (бледная трепонема), антитела.

Синонимы английские

Anti-HCV + HBsAg, Hepatitis B Surface Antigen + HIV 1,2 Ag/Ab Combo,HIV 1,2 Abs, p24 antigen + Treponema pallidum Abs.

Метод исследования

  • Иммуноферментный анализ (ИФА).
  • Электрохемилюминесцентный иммуноанализ (ECLIA).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Исследование предназначено для скрининга гепатитов B и C, ВИЧ-инфекции 1 и 2 типов и сифилиса.

Для скрининга гепатита B в тесте определяют один из антигенов этого вируса – HBsAg. Он входит в состав оболочки вируса и является самым ранним маркером активной инфекции. HBsAg обычно появляется в крови через 2-8 недель после заражения. Этот антиген может быть обнаружен как при остром, так и при хроническом гепатите В. Он не определяется при разрешении острой инфекции гепатита В и после вакцинации. Следует подчеркнуть, что HBsAg также не обнаруживается в период «серологического окна». Более того, в некоторых случаях инфекция гепатита носит латентный характер, при этом вирус сохраняется в ткани печени (о чем свидетельствует положительный результат анализа на ДНК вируса), однако HBsAg в крови не выявляется. Таким образом, HBsAg – это чувствительный, но не абсолютный маркер для исключения гепатита В. Присутствие HBsAg в крови более 6 месяцев служит одним из критериев диагностики хронического гепатита В. При выявлении HBsAg в крови проводят дополнительные, подтверждающие тесты для уточнения диагноза.

Для скрининга гепатита C в тесте определяют IgG-антитела к этому вирусу. Anti-HCV могут быть обнаружены как при текущей инфекции (острой или хронической), так и при разрешении острого гепатита C. Таким образом, анализ на Anti-HCV не позволяет дифференцировать острый и хронический гепатит и гепатит C в анамнезе. При выявлении Anti-HCV в крови проводят дополнительные, подтверждающие тесты для уточнения диагноза.

Скрининг ВИЧ-инфекции 1-го и 2-го типа осуществляется с помощью определения антител к этому вирусу и антигена p24. Анализ на антитела к вирусу характеризуется очень высокой чувствительностью (> 99,5  %). Специфичность такого анализа ниже: ложноположительный результат может наблюдаться при наличии в крови пациента аутоантител, заболеваниях печени, недавней вакцинации против вируса гриппа и при наличии другой острой вирусной инфекции. По этой причине при получении положительного результата проводят дополнительный, подтверждающий анализ. Также для получения более точной информации о ВИЧ-статусе пациента анализ на антитела к ВИЧ дополняют анализом на антиген p24 – один из структурных белков вирусного капсида, являющийся ранним маркером острой ВИЧ-инфекции. Анализ на p24 может быть особенно полезным на ранних стадиях инфекции, когда титр антител к вирусу еще не достиг определяемого уровня. Следует отметить, что при выработке достаточного количества антител к ВИЧ (в том числе и к p24) этот антиген может больше не определяться. Специфичность анализа на p24 достигает 100  %, а его чувствительность – 30-50  %. Комбинация двух тестов для определения ВИЧ (антитела и антиген p24) позволяет достичь 100 % чувствительности и специфичности.

Для скрининга сифилиса в тесте определяют IgM- и IgG-антитела к бледной трепонеме (Treponema pallidum). Анализ характеризуется очень высокой чувствительностью. При следующих факторах могут наблюдаться ложноположительные результаты: наличие в крови аутоантител (например, антиядерных антител), наличии ОРВИ, мононуклеоза, кори и других вирусных инфекций, узелкового периартериита, ревматоидного артрита, склеродермии и других заболеваний соединительной ткани, других спирохетозов (болезнь Лайма, лептоспироз) и других трепонематозов. По этой причине при получении положительного результата анализа проводят дополнительные, подтверждающие тесты для уточнения диагноза. Серологические тесты имеют наибольшую информативность во вторичном периоде и при латентном сифилисе.

Так как в исследовании определяются антитела к возбудителям заболеваний, при интерпретации результата следует учитывать состояние иммунной системы пациента. Ложноотрицательные результаты могут наблюдаться у пациентов с иммуносупрессией (прием глюкокортикоидов и других иммуносупрессантов) и у пожилых людей. Также большое значение имеют анамнестические данные: принадлежность пациента к группе риска по этим заболеваниям (использование инъекционных наркотических средств, многократные переливания крови), наличие аутоиммунных и инфекционных заболеваний, физиологическое состояние организма (беременность, пожилой возраст).

Для чего используется это исследование?

  • Для скрининга гепатитов B и C, ВИЧ-инфекции 1-го и 2-го типов и сифилиса.

Когда назначается исследование?

  • При госпитализации в стационар;
  • при оформлении санитарной книжки;
  • при постановке на учет по беременности;
  • при постановке на воинский учет;
  • при получении разрешения на работу.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно – для всех 4 показателей.

 

Положительный результат

Отрицательный результат

Anti-HCV

Острый гепатит C

Хронический гепатит C

Гепатит C в анамнезе

Норма

HBsAg

Острый гепатит B

Хронический гепатит B

Норма

Латентный гепатит B

Период «серологического окна» гепатита В

Вакцинация против гепатита В

HIV 1,2 Ag/Ab Combo:

 

ВИЧ-инфекция

Ложноположительный результат:

  • наличие в крови аутоантител
  • заболевания печени
  • недавняя вакцинация против вируса гриппа
  • другая острая вирусная инфекция

 

Норма

HIV 1,2 Ag/Ab Combo:

Острая ВИЧ-инфекция

Норма

 

Treponema pallidum Abs

 

Сифилис

Ложноположительный результат:

  • наличие в крови аутоантител
  • ОРВИ, мононуклеоз, корь и другие вирусные инфекции
  • узелковый периартериит, ревматоидный артрит, склеродермия и другие заболевания соединительной ткани
  • другие спирохетозы (болезнь Лайма, лептоспироз)
  • другие трепонематозы

 

Норма

Ложноотрицательный результат:

  • первичный и третичный период сифилиса

Что может влиять на результат?

  • Время, прошедшее с момента инфицирования;
  • состояние иммунной системы организма;
  • наличие в крови аутоантител, вирусных и бактериальных патогенов, препятствующих осуществлению реакции.

Russian | World Gastroenterology Organisation

Практическое руководство Всемирной организации гастроэнтерологов

профессор J. Heathcote, председатель (IASL)

профессор A. Elewaut (OMGE)
профессор S. Fedail (OMGE)
профессор A. Gangl (OMGE)

профессор S. Hamid (OMGE)
доктор D. Lavanchy (WHO)
доктор H. Liu (OMGE)
доктор J. Krabshius (OMGE)

1. Определение

Острый вирусный гепатит (ОВГ)– это системная инфекция, преимущественно поражающая печень. ОВГ часто вызывается гепатотропными вирусами (вирусы гепатита А, В, С, D и E). Поражать печень могут и другие вирусные инфекции. (цитомегаловирус), вирус простого герпеса, Коксаки вирус, аденовирусы. В то время как гепатиты А и Е являются самолимитирующимися, инфекция гепатита С, и в меньшей степени гепатита В, в основном склонны к хронизации.

2. Вступление и ключевые положения

Вероятно, основное различие между этим руководством OMGE и всеми другими опубликованными работами, связанными с острым вирусным гепатитом, заключается в осознании того, что он, возможно, плохо поддается лечению.

Тем не менее, единственный важнейший момент относительно лечения ОВГ состоит в том, что лечение подавляющего большинства случаев должно быть поддерживающее и не требует госпитализации или назначения препаратов. Хирургическое вмешательство (в течение острого периода или из-за неверного диагноза) может быть опасно.

Отдельные свидетельства говорят о том, что неверное лечение данного заболевания происходит достаточно часто – особенно в плохо оснащенных заведениях.

В то время как большая часть острых инфекций бессимптомна, в тех случаях, когда симптомы присутствуют, они схожи, вероятно, у всех пяти разновидностей вирусных гепатитов. Важно установить, что вирусы, вовлеченные в риск прогрессии, различаются.

  • Гепатит А     Самолимитирующийся. Уровень фульминантной печеночной недостаточности очень низок; риск смертности в возрасте старше 40 лет 1%
  • Гепатит В     Самолимитирующийся в 95% случаев (только у взрослых), отличается у лиц младше 5 лет
  • Гепатит С     Самолимитирующийся в 20-50% случаях (>90% при лечении монотерапией альфа-интерферона)
  • Гепатит D     Самолимитирующийся, если HBV также самолимитирующийся
  • Гепатит Е     Самолимитирующийся. Общая фатальность всех случаев при фульминантной печеночной недостаточности 1-3%; у беременных женщин – 15-25%

В большинстве случаев требуется только поддерживающее лечение. Если HAV эндемичен, может быть исключен гепатит А, так как более ранняя инфекция дает пожизненный иммунитет.

Второе важное замечание заключается в идентификации групп риска. Например, у беременных очень важно исключить HEV. Подобным образом, острый гепатит более опасен для взрослых, чем для детей, особенно после 40 лет, тем более, если протекает на фоне хронического заболевания печени. В любом случае должны быть выделены группы риска тяжелого гепатита – он обычно поражает пожилых и лиц с хроническими заболеваниями печени.

Острый молниеносный (фульминантный) гепатит может встретиться в любом возрасте.

Ключевые положения, которые следует запомнить:

  • Острый «гепатит» может быть вызван вирусом, токсином или быть первым проявлением хронического заболевания печени
  • Острый вирусный гепатит почти всегда самолимитирующийся
  • Почти в каждом случае лучше всего не делать ничего (за исключением прекратить принимать препараты, такие как оральные контрацептивы)
  • Витамины не играют никакой роли – особенно в развивающихся странах большое количество в/в витаминов назначается без надобности
  • Ограничение диеты в белке не играет никакой роли в случае неосложненного острого гепатита – в развивающихся странах пациенты могут быть уже лишены белков; это ведет к белковой недостаточности со всеми соответствующими осложнениями
  • Начать физические упражнения, когда пациент почувствует себя в силах их выполнять, нет необходимости держать пациента в постели
  • Повышенный уровень аланиновой трансферазы (ALT) в плазме крови является лучшим индикатором повреждения при остром гепатите, но он не отражает тяжесть заболевания (для этого требуется определение уровня билирубина)
  • Все формы острых вирусных гепатитов представлены одинаковыми симптомами
  • Необходимо учитывать эндемичность, например гепатит А преимущественно поражает детей в эндемичных районах
  • Убедиться, что имеется острая инфекция, а не обострение молчащего хронического заболевания
  • Другие хронические заболевания печени могут протекать остро, например аутоиммунный гепатит
  • Принять во внимание передачу, а соответственно, профилактику и вакцинацию по необходимости
  • Новорожденного от беременной с HBV защитить анти-НВ вакциной и анти НВ антителами сразу после рождения.

 

Таблица 1 схема решений – диагнозы острых гепатитов

 

Острый гепатит С (HCV) – важно сразу провести тест на РНК HCV и анти- HCV

  • Если оба теста положительны – вероятнее всего, обострение хронического HCV
  • Если присутствует только РНК HCV Æ вероятен острый HCV с образованием в дальнейшем анти- HCV

Развитие сонливости и/или коагулопатии у пациента с острым вирусным гепатитом – всегда побочный эффект

Ссылки по острым вирусным гепатитам:

  1. US Centers for Disease Control (CDC)
  2. ABC of diseases of liver, pancreas, and biliary system: Acute hepatitis, S D Ryder and I J Beckingham, BMJ 2001; 322: 151-153. [Full text] [PDF]

3. Острый гепатит А

3.1 – Патогенез и естественное течение

вирус гепатита А (HAV) – это РНК-содержащий вирус типа Picornaviridae. Главной особенностью является само-лимитируемость заболевания. Лечение HAV должно быть, следовательно, поддерживающим. Средняя длительность инкубационного периода HAV составляет 28 дней и может колебаться от 15 до 45 дней.

 

Инфекция HAV самоолимитирующаяся и не требует лечения; необходимо вакцинировать контактировавших (особенно в районах с низкой распространенностью)

Хронической инфекции не существует, инфекция HAV дает пожизненный иммунитет. У некоторых возможны рецидивы через 6-9 месяцев.

Риск печеночной недостаточности при молниеносном гепатите очень мал (0,01-0,1%), но увеличивается с возрастом и в случаях с предсуществующим заболеванием печени.. У лиц старше 40 лет уровень смертности составляет 1%.

3.2 – Эпидемиология — распространенность и встречаемость

подсчитано, что ежегодно в мире происходит 1.5 млн случаев острого гепатита А, или – в зависимости от эндемичности района около 150/100000, большей частью в районах с низким уровнем гигиены и со слабо развитой санитарной инфраструктурой.

Распространенность и встречаемость инфекции гепатитом А напрямую зависят от социо- экономических условий. Инфекция встречается преимущественно в детском возрасте. В типичном случае более 90% в развивающихся странах детей заражены вирусом гепатита А.

Более 90% в развивающихся странах детей заражены вирусом гепатита А (пожизненный иммунитет)

3.3 – факторы риска

Передача

Вирус HAV найден в стуле лиц с острым HAV в бессимптомный период и на ранних стадиях заболевания. HAV распространяется среди людей обычно тогда, когда предмет, контаминированный вирусом из стула инфицированного, попадает в рот неинфицированному. Это означает, что у гепатита А фекально-оральный путь передачи. Большая часть эпизодов передачи имеет место при контакте с членами семьи, туристами, побывавшими в эндемичном районе, от полового партнера с вирусом НАV, передача инфекции от того, кто готовит пищу, или через детей в детских садах.

Путь передачи HAV — фекально-оральный

 

Плохие гигиенические условия слабые санитарные меры представляют важнейший риск

Группы риска/условия для HAV

  • Дети, живущие в плохих санитарных условиях и в районах с низким уровнем гигиены
  • Дети, живущие в областях с высокой встречаемостью HAV
  • Лица, участвующие в анальном сексе
  • Лица, нелегально использующие инъекции лекарств (бездомные)
  • Плохие санитарные условия
  • Лица, употребляющие продукты высокого риска (например, сырых морских животных)
  • Дневные служащие и семьи детей, посещающих детские сады
  • Лица, путешествующие в эндемичные районы
3.4 – диагноз и дифференциальный диагноз

Все формы острого вирусного гепатита изначально представлены одинаково.

Вирус HAV достоверно диагностируется с помощью анти-HAV IgM (присутствие анти- HAV IgG указывает на инфекцию в прошлом). Персистирующие анти-HAV IgM иногда могут быть обнаружены при аутоиммунном гепатите. У детей заболевание обычно протекает бессимптомно. У взрослых инфекция HAV, как правило, сопровождается симптомами.

Определяющими симптомами являются:

  • Желтуха (желтушность кожи и склер)
  • Быстрая утомляемость
  • Боли в животе
  • Потеря аппетита
  • Тошнота
  • Диарея
  • Лихорадка
  • Темный цвет мочи
  • Рецидив, сопровождающийся холестазом или сывороточной болезнью
3.5 – лечение острого гепатита

Субъективное впечатление общего вида пациента должно руководить позицией врача. Ни госпитализация, ни карантин или постельный режим или назначения (например, витаминов, ограничения в диете, переливания крови) не являются необходимыми.

Лечение должно быть консервативным и поддерживающим. Для инфекции HAV нет специфических назначений. Очень важна гигиена, необходимо всегда мыть руки после пользования туалетом. Лечение должно быть сконцентрировано на лечении симптомов и на идентифицировании малейших изменений у тех, кто находится в группе особого риска развития фульминантной печеночной недостаточности.

Лица старше 40 и те, у кого имеются хронические заболевания печени, находятся в группе наибольшего риска.

Лица, контактировавшие с инфицированными, должны быть вакцинированы.

ОСР и гормональная заместительная терапия должны быть прекращены для избежания холестаза. Не рекомендуется потребление алкоголя.

3.6 – Профилактика

В продаже имеется целый ряд инактивированных вакцин.

Вакцины для профилактики перед возможным контактом (например, VAQTA от Merck или HAVRIX от GSK) обеспечивают долгую защиту в течение 20 лет. Вакцинация для профилактики после контакта должна быть проведена как можно раньше.

3.7 Перспективы

Улучшение санитарных условий и водоснабжения являются наиболее важными целями для помощи предотвращения инфекции HAV (и многих других инфекций!)

Ключевыми положениями являются:

  • Строительство лучшей инфраструктуры здравоохранения
  • Улучшение санитарных условий и водоснабжения
  • Программы действий пациентов (образовательные и обучающие, гигиена и мытье рук)
  • Развитие легких и дешевых диагностических инструментов
  • Вакцинация перед вероятным контактом для групп риска (путешественники, военнослужащие, мужчины-гомосексуалисты, служащие правопорядка)
  • Вакцинация лиц, бывших в контакте с инфицированными острым гепатитом А
  • Всегда проверять на гепатит В плюс иммунизация и вакцинация, когда это необходимо (ВОЗ рекомендует всеобщую вакцинацию против гепатита В)
3.8 – Дальнейшая информация

Ссылки по гепатиту А:

  1. CDC info
  2. http://www.who.int/emc-documents/hepatitis/docs/whocdscsredc2007.html/index.html
3.9 – Резюме

Клиническое течение острого гепатита А неотличимо от других типов острых вирусных гепатитов. Однако если тест на наличие HAV IgM положителен, нет необходимости проверять другие причины острого вирусного гепатита.

В типичном случае симптомы включают в себя лихорадку, недомогание, анорексию, тошноту, дискомфорт в животе и иногда диарею с последующим потемнением мочи и желтухой. Тяжесть заболевания и смертность повышается в пожилых возрастных группах. Выздоровление после гепатита А может быть медленным, оно характеризуется утомляемостью, тошнотой и сниженным аппетитом. Осложнения гепатита А включают рецидивы с холестатическим компонентом или без него и фульминантный гепатит. Фульминантный гепатит случается примерно в 0.01% инфекций и характеризуется персистирующей тошнотой, рвотой и образованием кровоподтеков с быстрым ухудшением уровня сознания и функций печени. Риск смертности очень высок. Хронической инфекции HAV не существует. В настоящее время нет специфической антивирусной терапии. Тем не менее, назначаются только поддерживающие мероприятия, может быть рекомендовано воздержание от алкоголя. Не следует назначать таких мер как карантин, длительные госпитализации, применение витаминов (за исключением случаев диагностированных авитаминозов), других «поддерживающих» лекарств или переливаний крови.

4. Острый гепатит В

4.1 Патогенез и естественное течение

Вирус гепатита В (HBV) – ДНК-содержащий вирус типа Hepadnaviridae. Вирус присутствует в большинстве жидкостей тела лиц с острым или хроническим гепатитом и у бессимптомных носителей. Он передается парентеральным путем, например, в результате пользования общими иглами. Передача оральным путем не характерна. Частой причиной являются половые контакты. Невакцинированные работники здравоохранения являются группами с высоким риском из-за высокой вероятности повреждений иглой. В эндемичных районах гепатит В часто передается вертикально или горизонтально среди маленьких детей, играющих вместе (укусы и царапины). Инкубационный период гепатита В составляет 60 дней и может варьироваться от 28 до 160 дней.

Приблизительно 30% инфекций взрослых представлены иктеричным гепатитом, а у 0.1 – 0.5% развивается фульминантный гепатит.

В случае фульминантного гепатита иммунный ответ на инфицированные гепатоциты является всеохватывающим, и свидетельст вирусной репликации нет. Тесты на HBsAg могут быть негативными: следовательно существует необходимость дальнейшего исследования на анти-HBc IgM.

Инфекция разрешается у >95% взрослых с исчезновением сывороточного HBsAg и, следовательно, с появлением анти-HBs антител. Естественная иммунизация характеризуется обнаружением анти-HBc плюс анти-HBs антител.

Инфекция HBV приводит к одному из четырех исходов:

  • Выздоровление после острой инфекции (95% здоровых в предыдущем взрослых не старше 40 лет)
  • Фульминантный гепатит
  • Хронический гепатит В
  • Состояние неактивного переносчика

Исход инфекции HBV зависит от иммунологических факторов и, возможно, частично от характеристик вируса. Важную роль играет возраст, в котором произошла инфекция. Приобретенная перинатально, и у детей до года, хроническая инфекция разовьется в 80-90% случаев; у детей от 1 до 5 лет 30-50% продолжится развитие хронической инфекции. Для сравнения, у 30-50% взрослых, активно зараженных HBV, симптомы отсутствуют, но только у 2-6% из них разовьется хроническая инфекция.

95-99% здоровых в прошлом взрослых полностью выздоровеют от острого гепатита В

4.2 – Эпидемилогия – распространенность и встречаемость

ВОЗ установила, что за год происходитр более 5 миллионов случаев инфекции острого гепатита В. Встречаемость инфекции HBV и способы передачи значительно отличаются во всем мире в соответствии с эндемичностью, и этот показатель колеблется от 0.1 до 120 на 100000.

Средняя ежегодная встречаемость острого гепатита В в Европе составляет 20 случаев на 100000 населения. Ежегодно в результате насчитывается приблизительно 950000 зараженных. Из них 90000 станут хронически зараженными, 20000 из последней группы умрут от цирроза или опухоли печени.

(пожалуйста, удалите этот абзац: «общая встречаемость гепатита В в Соединенных Штатах составляет 13.2 случая на 100000 населения, достигая более 70000 случаев в год. Ве они предотвращаются вакцинацией перед контактом»)

http://www.who.int/emc-documents/hepatitis/docs/whocdscsrlyo2002/disease/world_distribution.html

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/hepatitis/resource/dz_burden02.htm

Инфекция вирусом HBV является глобальной проблемой здравоохранения. Два биллиона человек в мире были заражены; 360 миллионов заражены хронически; более 520.000 каждый год умирает (50.000 от острого гепатита В и 470.000 от цирроза или рака печени) Распространенность и встречаемость HBV значительно варьирует в различных областях мира. Наиболее распространен HBV в

Китае, Юго-Восточной Азии, в Африке южнее Сахары, на большей части островов Тихого океана и в бассейне Амазонки. Также высокий уровень распространенности наблюдается в околополярном регионе (Северного полюса).

В развитом мире гепатит В — это болезнь, поражающая в основном взрослых из групп высокого риска, в более бедных регионах мира заболевание в высокой степени эндемично и широко распространено среди детей. Все программы по вакцинации лучшим образом концентрируются на вакцинации младенцев и детей, потому что в этом возрасте можно предотвратить возникновение хронической инфекции.

В западном мире основное внимание уделялось вакцинации взрослых в группах высокого риска, таких как гомосексуалисты, и работники здравоохранения. ВОЗ пропагандирует всеобщую иммунизацию.

4.3 – Факторы риска и пути передачи

Группы риска острой инфекции HBV:

  • Работники здравоохранения
  • Полицейские
  • Мигранты
  • Ищущие убежища и те, кому было отказано
  • Военнослужащие
  • Туристы и студенты (незащищенный секс)
  • Любой небезопасный секс
  • Лица, использующие лекарства в инъекциях
  • Пациенты гемодиализа (всегда становятся носителями)
  • Пожарные
  • Заключенные
  • Лица, получающие небезопасные инъекции
  • Лица, получающие неотслеженную кровь при переливаниях
  • Небезопасный пирсинг, нанесение татуировок, акупунктура, племенные скарификации, обрезания

Повторное использование инъекционной техники может вызвать до 20 миллионов инфекций HBV каждый год

Пути передачи

  • HBV передается через жидкости тела, такие как кровь, слюна, семя, (данные о грудном молоке противоречивы). Путь может быть:
  • Перинатальным – от матери к ребенку при рождении (вертикальный)
  • От ребенка к ребенку (горизонтальный)
  • Через небезопасные инъекции и переливания
    • Нестерильные инструменты, иглы для татуировок, зубное оборудование, другие острые предметы, например при скарификации, женском обрезании
  • Половой контакт
    • Незащищенный секс (гетеро- или гомосексуальный)

HBV также передается через прокол кожи и контакт на слизистой с кровью или другими инфицированными жидкостями тела. Вирус найден в очень высоких концентрациях в крови и серозном экссудате.

4.4 – Диагноз и дифференциальный диагноз

Наиболее распространенными симптомами инфекционного гепатита являются утомляемость или усталость. Лихорадка, мышечные, суставные боли и синдром «больной сыворотки» (serum sickness syndrome) могут быть представлены в продромальный период острого HBV. Некоторые заметят, что их моча становится темнее, а кожа приобретет желтоватую окраску (желтуха).

Ведущие симптомы Менее распространенныео симптомы
Утомляемость и усталость Потеря массы тела
Недомогание Депрессия
Желтуха Возбудимость, раздражительность
Лихорадка Головные боли
Мышечные и суставные боли Расстройства сна
  Дискомфорт в правом подреберье
  Кожный зуд
  Тошнота и диарея
  Потеря аппетита

Для целого ряда антигенов и антител, связанных с инфекцией HBV, существуют коммерческие серологические тесты.

В случае подозреваемой острой инфекции HBsAg будет положительным, он должен исчезнуть через 3-6 месяцев после острого начала (необходимо всегда делать последующие повторные проверки). Без продолженных исследований невозможно различить острый гепатит В от обострения хронического гепатита В – это необходимо во всех случаях.

4.5 – Лечение острого гепатита В

У 95-99% здоровых в прошлом взрослых после острой инфекции HBV наступает спонтанное выздоровление. Поэтому непохоже, чтобы антивирусная терапия улучшала темпы выздоровления, и она не требуется, если болезнь не сопровождается внепеченочными осложнениями, такими как узелковый периартериит. В таких случаях у иммунокомпромисных лиц (например, с хронической почечной недостаточностью) может быть рекомендована антивирусная терапия ламивудином.

При фульминантном гепатите тщательная интенсивная терапия способна улучшить выживаемость, но единственной доказанным методом лечения, который улучшает исход, является ортотропная трансплантация печени. Полное выздоровление с образованием анти- HBs антител обеспечивает долговременную защиту.

4.6 – Профилактика

Вакцинация (доступна с начала 1980-х) продолжает оставаться лучшим способом решения проблемы, гепатит В поддается профилактике, а всеобщая вакцинация, вероятно, лучше всего – в странах, где, конечно, высока распространенность.

Имеются два типа вакцин гепатита В.

  • Рекомбинантные или генноинженерные вакцины разработаны с использованием HBsAg, синтезированного в дрожжах (Saccharomyces cerevisiae) или в клетках млекопитающих, в которые был встроен ген HBsAg. Обе состоят из суспензии поверхностного антигена вируса HBV. В каждой стране существуют свои препараты.
  • Человеческие вакцины из дериватов плазмы приготовлены из очищенного HBsAg из плазмы людей с хронической инфекцией HBV. Во всем мире существует более 15 различных лицензированных плазменных дериватных вакцин.

Значительных различий по безопасности, иммуногенности или эффективности у этих двух типов вакцин нет.

HBV вакцины создают протективный (>10ME/мл) уровень антител к HBsAg у 95% детей и 90% взрослых. Ревакцинация действенна у 80% людей, у которых не развивается ответ на первичную вакцинацию. Не рекомендуется ревакцинация нон-респондеров после двух серий вакцинации (6 доз).

Можно провести различия между пре- и пост-экспозиционной вакцинациями.

4.6.1 – пре-экспозиционная вакцинация

Особенно уместна в группах высокого риска.

Существует целый ряд рекомбинантных вакцин – они схожи по эффективности, но дозировки могу

т отличаться, например:

Recombivivax-HB (10 µг HBsAg)
Детям до 11 лет, мать отрицательна по HBsAg 2,5 μг (младенцам при родах)
Детям до 11 лет, мать положительна по HBsAg 5 μг
Детям 11-19 лет 5 μг
Иммунокомпетентные взрослые 10 μг
Пациент с иммуносупрессией 40 μг
Пациент на почечном диализе 40 μг

 

Engerix-B (20 µг HBsAg)
Детям младше 11 лет 10 μг
Детям старше 11 лет 20 μг
Взрослым 20 μг
Пациент с иммуносупрессией 40 μг
Пациент на почечном диализе 40 μг

4.6.2 – пост-экспозиционная вакцинация

Рекомендуется комбинация иммуноглобулинов гепатита В (HBIg, при наличии) и HBV вакцины. Если есть в наличии HBIg (в большинстве стран нет), их следует назначать всем детям от HBs+ матерей во время родов.

Этот аспект особенно полезен для новорожденных, поскольку немедленное начало пост- экспозиционной иммунизации предотвратит неонатальную инфекцию у детей от инфицированных HBV матерей. Важно провести вакцинацию в первые 24 часа. Нет данных о наличии протективного эффекта при применении вакцины спустя более 7 дней после родов.

Непосредственная экспозиция позитивной в отношении HBsAg (чрезкожная инокуляция или трансмукозная экспозиция) жидкости тела (например, укол иглой):

  • Единичная доза HBIg внутримышечно из расчета 0.06 мл/кг (как можно раньше)
  • Затем полный курс вакцинации HBV (начать в течение 7 дней)

Непосредственная экспозиция при половом контакте с инфицированным HBV человеком:

  • Единичная доза HBIg внутримышечно из расчета 0.06 мл/кг (в пределах 14 дней) (очень дорого и не везде применимо)
  • В комплексе с полным курсом вакцинации (не ждать!)

4.6.3 – Противопоказания и побочные эффекты

Существует очень немного противопоказаний:

  • тяжелые аллергические реакции на предыдущие дозы
  • тяжелые аллергические реакции на пекарские дрожжи (как и при приготовлении хлеба), вместо этого можно использовать вакцину HBV, полученную из плазмы
  • температура выше 38.5˚С

Ниже перечислены факторы, не являющиеся противопоказаниями при назначении вакцины HBV:

  • Любые второстепенные заболевания, такие как ОРВИ или диарея, с температурой ниже 38.5˚С
  • Аллергия или астма
  • Лечение антибиотиками
  • Инфекция HCV, однако необходимо больше информации об эффективности вакцинирования HBV младенцев и новорожденных, которые инфицированы HCV
  • Грудное вскармливание
  • Припадки в анамнезе
  • Хронические заболевания
  • Постоянные неврологические расстройства
  • Недоношенность или малый вес при рождении
  • Наличие в анамнезе желтухи при рождении
  • Беременность (хотя обычно в этом случае не рекомендуется)
4.6.4 – Безопасность вакцин и качество

Термостабильность

  • нельзя замораживать вакцины HBV. Точка замерзания вакцины – 0.5˚С
  • при хранении при температуре 2-8˚С вакцина HBV устойчива по крайней мере в течение 4 лет
  • HBV вакцины относительно устойчивы к нагреванию и слегка уменьшают свою силу при хранении в течение 2-6 месяцев при температуре 37˚С

Тест на встрясывание

Если Вы видите замороженную вакцину, значит она повреждена. Однако вакцина могла быть заморожена ранее и разморожена снова. Тест на встрясывание может использоваться для проверки, была ли вакцина испорчена замораживанием в прошлом.

  • Сравните вакцину, которую, вероятно заморозили и разморозили в прошлом, с вакциной того же производителя, которую точно никогда не замораживали
  • Взболтайте емкости с вакцинами
  • Внимательно посмотрите на содержимое
  • Дайте вакцинам отстояться 15-30 минут для окончания осаждения (одна емкость рядом с другой)
  • Не использовать, если осадок устанавливается ниже уровня практически прозрачной жидкости
4.7 Перспективы

Более мощные адъюванты могут уменьшить число вакцинаций от 3 до 2 или 1 укола.

В настоящее время разрабатываются новые детские вакцины (сотрите: «с более сильными адъювантами»)

4.8 – Дальнейшая информация

Ссылки по острому гепатиту В

  1. EASL Consensus Paper
  2. CDC information
  3. http://www.who.int/emc-documents/hepatitis/docs/whocdscsrlyo20022/index.htm
4.9 – Резюме – последовательность серологических тестов при подозрении на острый гепатит
  • всегда исследуйте HAVIgM
  • на Востоке дополнительно проведите тест на HEV (если имеется в наличии, в противном случае — методом исключения)
  • если имеются факторы риска, провести тест на HBsAg и на наличие РНК HCV (плюс анти-HCV антитела)
  • последовательность тестов
  1. HBc IgM и HBsAG
  2. HAV IgM
  3. Анти-HCV антитела
  4. РНК HCV
  5. Анти-HEV антитела (только если перечисленные выше отрицательны)

5. Острый гепатит С

5.1 Патогенез и естественное течение

Вирус гепатита С (HCV) – это РНК-содержащий вирус типа Flaviviridae.

Инкубационный период варьируется от 14 до 160 дней, в среднем 7 недель.

Наиболее острые и хронические инфекции бессимптомны. Если появляются симптомы, они обычно длятся 2-12 недель.

Недостаточность сильного Т-лимфоцитарного ответа определяет высокий уровень хронических инфекций. Анти- HCV антитела не являются протективными (не нейтрализующие антитела).

В отличие от других форм острых инфекционных гепатитов, HCV склонен к хронизации течения. Это подчеркивает важность нахождения путей профилактики процессов, переходящих в хроническую фазу. Стандартная монотерапия альфа-интерфероном снижает степень перехода HCV в хроническое течение до уровня менее 10%.

К сожалению, большую часть острых инфекций пропускают, так как они текут бессимптомно, поэтому возможности лечения малы.

5.2 – Эпидемиология – распространенность и встречаемость

В настоящее время неизвестна общая встречаемость гепатита С. По предварительным оценкам, каждый год происходит 6400000 случаев инфекции HCV. В Соединенных Штатах было подсчитано, что ежегодно случается более 20000 случаев.

http://www.cdc.gov/ncidod/diseases/hepatitis/resource/dz_burden02.htm

Встречаемость новых случаев инфекции с выраженными симптомами оценивается в 1-3 случая на 100000 ежегодно, однако сообщалось об уровне более 20/100000. В действительности же встречаемость новых инфекций очевидно гораздо выше (большинство случаев бессимптомны). Встречаемость снижается по двум причинам: (а)передача с кровью может быть снижена до нуля: (б) всеобщие меры предосторожности снизили передачу через медицинский инструментарий.

Приблизительно 3% населения мира инфицировано HCV, суммарно 170 миллионов человек. В США HCV инфицировано около 4 миллионов человек, из которых у 2.7 миллионов, как считается, имеется хроническая инфекция.

5.3 – Факторы риска и пути передачи

Передача осуществляется с кровью. Как инфекция, переносимая кровью, гепатит С потенциально может передаваться половым путем главным образом у лиц с другими сексуально-трансмиссивными заболеваниями. Перинатальная передача составляет около 5%, гораздо ниже, чем при ВИЧ и HBV. Кормление грудью не несет риск инфицирования. В группе риска находятся работники здравоохранения, главным образом из-за нозокомиальной передачи (укол иглой в 3% случаев грозит заражением HCV), а также заключенные и лица, родившиеся в странах с высокой эндемичностью.

CDC предлагает выделить следующие группы и категории риска:

 

Нозокомиальный риск составляет около 1% — эндоскопия, емкости для нескольких доз, хирургия. Лица с сексуально-трансмиссивными заболеваниями, включая такие распространенные, как герпес, представляют дополнительную группу риска. Другие потенциально опасные в этом смысле занятия – нюхание кокаина, нанесение татуировок, пирсинг, ятрогенные причины (грязное окружение), ритуальные порезы и массовые церемонии обрезания.

5.4 – диагноз и дифференциальный диагноз

После изначальной экспозиции, РНК вируса гепатита С может обнаруживаться в крови в течение 1-3 недель. Антитела к HCV обнаруживаются с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) только в 50-70% случаев, когда появляются симптомы, с повышением вероятности до 90% и больше через 3 месяца. Повреждение клеток печени манифестируется через 4-12 недель повышением уровня ALT. Острая инфекция может быть тяжелой, но фульминантной бывает очень редко. Исследования показывают, что риск возникновения фульминантного гепатита очень низок – менее 1%.

Наиболее широко используемые скрининговые тесты для HCV основаны на исследованиях с адсорбированными ферментами (ELISA, ИФА). HCV можно диагностировать по присутствию анти-HCV антител в сыворотке, но антительные тесты не дают результатов до истечения 3 месяцев после острой инфекции. Лучшим способом для постановки диагноза острого HCV является исследование на наличие РНК HCV, в частности, если за этим последует образование анти-HCV антител и будет наблюдаться сероконверсия.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) обнаруживает РНК HCV в плазме в пределах 1-2 недель после инфицирования. Чувствительность ИФА с адсорбированными ферментами для обнаружения антител составляет 97%.

Антитела могут не выявляться в течение периода до 8 недель после инфицирования, и острый гепатит С обычно протекает субклинически (фаза окна). Антитела не обеспечивают иммунитет.

Недевно было технически разработано прототипное исследование, направленное выявить качественно и количественно весь белок core-антигена (ядерный) вируса гепатита С (HCV coreAg) в сыворотке и плазме крови в присутствии или отсутствии анти-HCV антител.

Исследования показывают, что обнаружение HCV coreAg позволит выявить HCV инфекцию примерно на 1.5 месяца раньше, чем скрининговые тесты по обнаружению HCV антител, и всего на 2 дня позже чем количественное обнаружение РНК HCV в индивидуальных образцах.

5.4.1 – Исследования крови при остром HCV

Анти- HCV

Замечание: анти HCV антитела не позволяют судить о том, острый это процесс, хронический или он не больше не присутствует.

Количественные тесты для обнаружения присутствия или отсутствия вируса (РНК HCV)

  • ПЦР для этого возбудителя

Количественные тесты для обнаружения титра вируса (РНК HCV)

  • Мониторирование Amplicor HCV
  • Quantiplex РНК HCV (bДНК)
  • ТМА (наиболее чувствительный)
5.5 – Лечение острого гепатита С

Показания к лечению:

o Сероконверсия +РНК HCV или HCcore Ag + в сыворотке

Важна ранняя идентификация HCV, потому что существуют свидетельства о том, что раннее вмешательство стандартным альфа-интерфероном может заметно снизить риск хронической инфекции – от 80 до 10%. Профилактики до экспозиции HCV не существует.

5.6 — Профилактика

в профилактике HCV иммуноглобулины неэффективны. Действительно эффективной пассивной или активной иммунизации не существует. Изменение поведения и ограничение экспозиции ситуаций факторов риска составляет все шансы первичной профилактики.

5.7 — Перспективы

а) профилактика
Важной целью является разработка HCV вакцины, стимулирующей клеточный иммунитет. Вакцины – как лечебные, так и профилактические – сейчас находятся на стадии разработок.

б) лечение острого HCV
Будущие исследования должны быть крупнее и в них следует больше основываться на доказательствах, они должны концентрировать внимание на эффективности пегинтерферонов и на сроках начала терапии.

  • Начать терапию необходимо сразу после установления диагноза или
  • Отложить начало лечения на 2-4 месяца для того чтобы избегать лечения тех, кто выздоровеет спонтанно (только в 10-30% случаев).
5.8 – Дальнейшая информация

Данные по гепатиту С

  1. NIH Concensus paper HCV
  2. Therapy of Acute Hepatitis C; Alberti et at; Hepatology 2002;36;s195-s200. Pubmed-Medline
  3. Centers for Disease Control

6. Острый гепатит D

6.1 – Патогенез и естественное течение

Гепатит D только сосуществует с гепатитом В

Вирус гепатита D (HDV) – это дефектный одноцепочечный РНК-вирус типа Deltaviridae. Это неполный РНК-вирус, которому требуется поверхностный антиген HВV для передачи своего генома от клетки к клетке. Таким образом, он случается только у тех людей, которые положительны в отношении HВV-поверхностного антигена.

Средний инкубационный период варьирует от 60 до 90 дней, но может также колебаться в пределах 30-180 дней.

Из-за того, что HDV полностью зависит от HВV, длительность инфекции HDV полностью определятся длительностью инфекции HВV. У большинства людей, инфицированных HDV, репликация HВV подавлена. Инфицирование HDV может произойти или в результате коинфекции с HВV, или как суперинфекция у лиц с хроническим HВV.

  • Коиефекция
    • тяжелое острое заболевание
    • низкий риск хронизации
    • неотличим от HВV
  • Суперинфекция
    • Обычно развивается острое обострение хронического гепатита
    • Высокий риск хронизации заболевания печени
6.2 – Эпидемиология – распространенность и встречаемость

Как у острого, так хронического гепатитов D распространенность уменьшается в Средиземноморье и многих других областях мира, что связывается с уменьшением распространенности носителей HBsAg во всей популяции. Встречаемость HDV среди всего населения Италии снизилась с 3.1/1000000 в 1987 г. до 1.2/1000000 в 1992 г. Однако продолжают обнаруживать новые фокусы высокой распространенности HDV, как в случае острова Окинава в Японии, областей в Китае, Северной Индии и Албании. Показатели всеобщей распространенности и встречаемости отсутствуют.

6.3 – Факторы риска и передача

Способы передачи:

  • Перкутанно
    • лица, использующие инъекции лекарств
  • Пермукозно
  • Половые контакты

Способы передачи HDV схожи с таковыми у HВV.

Риск фульминантного гепатита при коинфекции составляет 5%. В другом случае прогноз коинфекции в общем хороший. Прогноз при суперинфекции варьируется. Существуют некоторые представления о том, что хроническое заболевание печени протекает более тяжело, но это не всегда так.

6.4 – Диагноз и дифференциальный диагноз

В течении острой HDV инфекции HDVAg и РНК HDV (ПЦР) появляются рано, а анти-HDV антитела класса IgM появляются позже.

До того, как станет возможным выявить анти-HDV антитела, должно пройти 30-40 дней после появления первых симптомов.

6.4.1 – Серология в случае коинфекции

Серологическое течение HDV инфекции варьируется в зависимости от того, получен ли вирус как коинфекция вместе с гепатитом В или как суперинфекция у человека, который уже является носителем гепатита В. У большинства людей с HВV-HDV коинфекцией антитела как класса IgM, так и класса IgG (анти- HDV) выявляются в течение инфекции. Однако у примерно 15% пациентов единственным свидетельством инфекции HDV может быть обнаружение или IgM против HDV в течение острого раннего периода заболевания, или IgG (анти-HDV) в процессе выздоровления. Анти-HDV антитела в общем случае уменьшаются до уровня ниже выявляемого после разрешения инфекции, и серологического маркера, который персистирует и указывает, что пациент вообще был инфицирован HDV, не выявляется. Антиген гепатита дельта (HDAg) может быть обнаружен в сыворотке только у 25% пациентов с коинфекцией HВV-HDV. Когда HDAg находится в определяемых концентрациях, он обычно исчезает, как исчезает HBsAg, и хроническая инфекция у большинства пациентов не развивается. В США и Европе больше нет коммерческих тестов на анти-HDV IgG, поэтому невозможно всегда подтвердить диагноз.

Тесты для определения анти-HDV IgM, HDAg и РНК HDV с помощью ПЦР имеются только в исследовательских лабораториях.

6.4.2 – Серология в случае суперинфекции

У пациентов с хронической инфекцией HВV, которые подвергаются суперинфекции HDV, обычно имеют место несколько общих серологических особенностей:

  1. титр HBsAg уменьшается в то время, как в сыворотке появляется HDAg
  2. HDAg и РНК HDV остаются выявляемыми в сыворотке, потому что хроническая инфекция HDV обычно происходит у большинства пациентов суперинфекцией HDV,в отличие от коинфекции
  3. Высокие титры как IgM, так и IgG против HDV выявляются, которые персистируют неопределенное время.

Репликация HВV обычно подавлена.

6.5 – Лечение острого гепатита D

Специфического лечения не существует. О некоторых успехах докладывают при применении ингибитора вирусной ДНК-полимеразы фоскарнета.

6.6 — Профилактика
  • Коинфекция HВV-HDV предотвращается вакцинацией против HВV
  • Профилактика HВV инфекции = профилактика HВV- HDV суперинфекции
  • Образовательные меры, направленные на предотвращение рискового поведения лиц с хронической инфекцией HВV

Коинфекция HDV можно предотвратить с помощью пре- и постэкспозиционной профилактики

6.7 – Перспективы

Неизвестно, будет ли снова разработан новый тест на определение дельта-антигена.

6.8 – Дальнейшая информация

Ссылки по HDV

  1. CDC information
  2. http://www.who.int/emc-documents/hepatitis/docs/whocdscsrncs20011.html/index.html

7. Острый гепатит E

7.1 – Патогенез и естественное течение

Вирус гепатита Е (HEV) – РНК содержащий вирус типа Caliciviridae. Ключевой особенностью является его самоогарничиваемость, как и HAV. Поэтому лечение HEV должно быть поддерживающим. Госпитализация и назначения не являются в общем необходимыми, за исключением случаев с беременными женщинами и тех, у кого имеется фоновое хроническое заболевание печени.

Средний инкубационный период при гепатите Е – 40 дней и может варьироваться от 15 до 60 дней. Общая смертност всех случаев – 1-3%. У беременных женщин этот показатель составляет 15-25%. Клинические проявления HEV не отличаются от таковых при HAV.

Инфекция HEV является самооганичивающейся и не требует лечения

7.2 – Эпидемиология – распространенность и встречаемость

вспышки гепатита Е случались в довольно широкой географической зоне, преимущественно в развивающихся странах с неадекватными санитарными условиями. Резервуар гепатита в этих областях неизвестен. Спорадические эпизоды инфекции HEV у людей могут поддерживать передачу вируса между эпидемическими периодами, но также возможен не связанный с человеком источник инфекции. В Соединенных Штатах, в Европе и других неэндемичных областях, где не было документировано о возникновении вспышек гепатита Е, в здоровой популяции была обнаружена низкая распространенность антител к HEV (меньше 2%). Источник инфекции для этих людей неизвестен.

7.3 – Факторы риска и передача

HEV передается преимущественно фекально-оральным путем и фекально контаминированная питьевая вода является наиболее частой причиной. Передача может осуществляться вертикально. Передача между людьми минимальна. Не была продемонстрирована передача вируса с кровью.

HEV причастен к крупным эпидемиям в Азии, Африке и Мексике. Молодые люди (20-40 лет) подвергаются воздействию наиболее часто, прогноз в общем хороший за исключением случаев у беременных женщин.

Пре-экспозиционной профилактики не имеется.

7.4 – Диагноз и дифференциальный диагноз

Были разработаны методы для определения антигена HEV и антител IgM/IgG, но эти коммерческие тесты имеются далеко не везде.

Вирус можно идентифицировать в стуле, желчи и цитоплазме гепатоцитов.

Существуют серологические тесты для определения HEV.

Дальнейшую информацию можно найти в Центрах Контроля Заболеваний (Centres for dis- eases Control) и NIH в США и здесь Æ CDC

7.5 – Лечение острого гепатита Е

Лечение только поддерживающее. Беременные составляют особую категорию риска. У беременных с острым гепатитом Е существует риск фульминантной печеночной недостаточности (около 15%). Смертность высока и варьируется от 5 до 25% по данным различных исследований.

Инфекция HEV вызывает смертность до 25% беременных женщин в третьем триместре беременности

7.6 – профилактика

Лучший способ избежать инфекции HEV – избегать использования не прошедшей обработку воды

Избегать употребления воды или мороженого неизвестной чистоты, необработанных морепродуктов и продуктов, вымытых в питьевой воде. В настоящее время коммерческой HEV вакцины не имеется.

7.7 – Перспективы

Безопасная питьевая вода и хорошие санитарные условия являются ключами к эрадикации инфекции HEV

7.8 – Дальнейшая информация

ссылки по HEV

  1. CDC
  2. http://www.who.int/emc-documents/hepatitis/docs/whocdscsredc200112.html/index.html
  3. Aggarwal, R. and Krawczynski, K. Hepatitis E: an overview and recent advances in clinical and laboratory research. J Gastroenterol Hepatol, 15: 9-20, 2000. Pubmed-Medline
  4. http://www.who.int/emc-documents/hepatitis/docs/whocdscsredc200112.html/surveillance/epidemiology_map.html
7.9 – Резюме

Гепатит Е дает ежегодные эпидемии, часто в течение сезона дождей, и ассоциирован главгым образом с фекально контаминированной питьевой водой; исключения составляют связанные с пищей эпидемии (сырые или необработанные морепродукты). Об эпидемических и спорадических случаях сообщалось из Центральной Азии, Среднего Востока, северной и западной Африки и Северной Америки. Эпидемии гепатита Е обычны в частях света с жарким климатом и довольно редки в районах с умеренным климатом. Предварительные свидетельства указывают, что в Египте и Индии обусловлены HEV до 40% острых гепатитов, а в таких странах как Саудовская Аравия, Вьетнам, Индонезия, Малайзия и Непал гепатит Е вызывает до 70% всех острых гепатитов.

8. Обзор литературы

9. Полезные ссылки в Интернете

10. вопросы и обратная связь с вами

ПРИГЛАШЕНИЕ ОСТАВИТЬ КОММЕНТАРИЙ

Комитет по Практическим Руководствам приветствует Ваши любые комментарии и вопросы. Думаете ли Вы, что мы упустили какой-нибудь аспект? Думаете ли Вы, что некоторые процедуры несут дополнительный риск? Поделитесь с нами Вашим опытом. Кликните кнопку ниже и дайте нам знать Ваши взгляды. Вместе мы сможем сделать лучше.

[email protected]

Core-антиген и РНК вируса гепатита С в пробах сыворотки крови пациентов с антителами к Core-антигену вируса | Потапова

1. СП 3.1.3112-13 «Профилактика вирусного гепатита С».

2. Reddy A. K., Dakshinamurty K. V., Lakshmi V. Utility of HCV core antigen ELISA in the screening for hepatitis C virus infection in patients on hemodialysis. Indian J Med Microbiol. 2006 Jan; 24 (1): 55-7.

3. Кудрявцева Е. Н., Корабельникова М. И., Красавченко К. С., Ястребова О. Н., Туманова О. Ю., Лебедева Е. И., Кузина Л. Е., Кицак В.Я, Калашникова А. С., Семененко Т. А., Кузин С. Н. О диагностической значимости определения CORE-антигена вируса гепатита С // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. — 2013. — Том 6, № 73. — С. 32-36.

4. Barril G., Quiroga J. A., Arenas M. D., Espinosa M., Garcia-Fernandez N., Cigarran S., Her-rero J. A., del Peso G., Caro P., Garcia-Agudo R., Amézquita Y., Blanco A., Martfnez-Rubio P., Alcazar J. M., Gonzalez-Parra E., Martfn-Gômez A., Castillo I., Bartolomé J., Carreno V. Impact of isolated hepatitis C virus (HCV) core-specific antibody detection and viral RNA amplification among HCV-seronegative dialysis patients at risk for infection // J. Clin. Microbiol. — 2014. — 52 (8): 3053-6.doi: 10.1128/JCM.01339-14.

5. О применении в практике здравоохранения: приказ МЗ РФ № 322 от 21.10.2002 г.

6. Приказ МЗ РФ № 322 от 21.10.2002 г. «О применении в практике здравоохранения иммуноферментных тест-систем для выявления поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg) и антител к вирусу гепатита С (анти-ВГС) в сыворотке крови человека». Ссылка активна на 15.02.2018. http://base.garant.ru/6963112.

7. Quiroga J.A., Castillo I., Llorente S., Bartolomé J., Barril G., Carreno V. Identification of serologically silent occult hepatitis C virus infection by detecting immunoglobulin G antibody to a dominant HCV core peptide epitope // J. Hepatol. 2009 Feb; 50 (2): 256-63. doi: 10.1016.

8. Leôn P.1, Lopez J. A., Elola C., Lee S. R., Calmann M., Echevarria J.M. Use of overlapping synthetic peptides to characterize samples from blood donors with indeterminate results to hepatitis C virus core antigen. Vox Sang. 1998; 75 (1): 32-6.

9. Потапова А. А. Диагностическая значимость и интерпретация неоднозначных результатов исследования серологических маркеров вирусного гепатита С: дисс.. д-ра биол. наук / М., 2015. — 275 с.

10. Pereira F. M., Zarife M. A.S., Reis E. A.G., Reis M. G. Indeterminate RIBA results were associated with the absence of hepatitis C virus RNA (HCV-RNA) in blood donors. Rev Soc Bras Med Trop. 2014; 47 (1): 12-17.

11. Масалова О. В. Вирусный гепатит С: новые подходы к изучению патогенеза и разработка средств диагностики и профилактики: дисс.. д-ра биол. наук / М., 2011. — 336 с.

12. Yagci S., Padalko E. Comparison of Mono-lisa HCV Ag/Ab ULTRA with two anti-HCV assays for the detection of HCV infection in hospitalsetting // Curr. Microbiol. — 2012. — V. 64, № 2. — P. 148-151.

Интермедикал | ИФА вирусные гепатиты

Выявленные маркеры Диагноз Примечание
IgM анти-HAV и HBsAg Вирусный гепатит А. Сопутств.: «носительство HBsAg». При типичных признаках острого ГА. Необходимо тщательное клинико-лабораторное исследование для исключения ОГВ и ХГВ.
IgM анти-HAV, HBsAg, анти-НВс (total), IgG анти-НВс Вирусный гепатит А. Сопутств.: хронический гепатит В (нерепликативная фаза). При выявлении признаков хронического гепатита у больных острым ГА и отсутствии маркеров репликации (HBV-DNA, HBeAg, IgM анти-НВс).
IgM анти-HAV, HBsAg, анти-НВс (total), IgG анти-НВс, IgM анти-НВс, HBeAg, HBV-DNA Вирусный гепатит А. Сопутств.: хронический гепатит В (репликативная фаза). При выявлении признаков хронического гепатита у больных острым ГА.
HBsAg, HBeAg, IgM анти-НВс, IgM анти-HDV Острая коинфекция ВГВ и ВГD. При отсутствии IgG анти-НВс и клинико-анамнестических признаков обострения ХГВ
HDV-RNA, IgM анти-HDV, HBsAg Острая суперинфекция ВГD. При отрицательных результатах обследования на IgM анти-HBV (или низких титрах этих антител).
Анти-HCV IgG Реконвалесцент ВГС (или ВГС-пастинфекция) — при отрицательных результатах исследования на: IgM анти-HCV и HCV-RNA. Только у практически здоровых при отсутствии эпидемиологических данных и клинико-лабораторных признаков поражения печени.
При невозможности подобного исследования Диспансерное наблюдение такое же, как при диагнозе «носительство HBsAg»
Анти-HCV (total), анти — HCV core IgM, HCV-RNA Острый вирусный гепатит С. При наличии эпидемиологических и клинико-лабораторных признаков острого гепатита и отсутствии маркеров других ВГ. Диспансерное наблюдение такое же, как и при ОГВ.
Анти-HCV IgG, анти — HCV core IgM, анти — HCV core IgG, анти — HCV NS, HCV-RNA Хронический вирусный гепатит С (фаза реактивации). При наличии клинико-биохимических признаков хронического поражения печени. Диспансерное наблюдение такое же, как при ХГВ.
Выявленные маркеры Диагноз Примечание
Анти-HCV IgG анти-HCV core IgG, анти — HCV NS Хронический вирусный гепатит С (латентная фаза). При отсутствии в крови HCV-RNA, анти — HCV core IgM и клинико-биохимических признаков обострения ХГС.
HBsAg, IgM анти-НВс, HBeAg, анти — HCV IgG, анти-HCV core IgM, анти — HCV core IgG, анти — HCV NS, HCV-RNA Острый вирусный гепатит В Сопутств.: хронический вирусный гепатит С (фаза деактивации) При наличии клинико-лабораторных признаков ОГВ. Сопутствующий диагноз является следствием детального клинико-лабораторного обследования на ГС.
HBsAg, IgM анти-НВс, HBeAg, анти — HCV IgG, анти-HCV core IgG, анти — HCV NS Острый вирусный гепатит В Сопутств.: хронический вирусный гепатит С (латентная фаза) При наличии клинико-лабораторных признаков ОГВ. Сопутствующий диагноз является следствием детального клинико-лабораторного обследования на ГС.
HBsAg, IgM анти-НВс, HBeAg, анти — HCV (total), анти-HCV core IgM, HCV-RNA Острая коинфекция ВГВ/ВГС При наличии лишь клинико-лабораторных и эпидемиологических признаков, характерных для острых вирусных гепатитов.
Анти-HCV (total), анти — HCV core IgM, HCV-RNA, HBsAg, анти-НВс (total), IgG анти-НВс Острый вирусный гепатит С. Сопутств.: хронический гепатит В (нерепликативная фаза). При наличии эпидемиологических и клинико-лабораторных признаков острого ГС.
Анти-HCV (total), анти — HCV core IgM, HCV-RNA, HBsAg, анти-НВс (total), IgG анти-НВс, IgM анти-НВс, HBeAg, HBV-DNA Острый вирусный гепатит С. Сопутств.: хронический гепатит В (репликативная фаза). При наличии эпидемиологических и клинико-лабораторных признаков острого ГС и хронического ГВ.

Памятка для пациентов: Гепатиты С и В

Когда вирус гепатита С (сокращенное название — HCV) проникает в организм, иммунная система вырабатывает специальные белки, которые кровь разносит по организму, что бы помочь побороть вирус гепатита С. Они называются антителами. Если у вас обнаружены антитела HCV — это предполагает, что у вас был контакт с HCV. Но это не означает, что у вас гепатит С в активной стадии. У некоторых людей (у 2-3 из 10) иммунная  система способна самостоятельно избавиться от вируса, но у остальных 7-8 человек организм не может побороть вирус.

Есть два вида тестов, используемых для диагностирования состоявшегося контакта с вирусом гепатита С – ИФА (иммуноферментный анализ) и ЭХЛ (электрохемилюминисцентный анализ). Чувствительность и специфичность ИФА при этом составляет около 90%, а ЭХЛ – около 98%, поэтому в крайне редких случаях возможны ложноположительные и ложноотрицательные результаты.

Для определения наличия и активности вируса гепатита С вам понадобится сделать дополнительно соответствующие тесты.

Важно помнить:

·   Даже если у вас был контакт с вирусом гепатита С, ваш организм мог избавиться от вируса самостоятельно. Поэтому важно сделать дополнительные тесты.

·   Попробуйте не волноваться, даже если ваш анализ на антитела положительный, и активный гепатит С подтвердился дополнительными тестами. Обычно, требуется от 10 до 40 лет для того, чтобы вирус повредил вашу печень. Кроме того, существует очень много вещей, которые вы можете сделать для того, чтобы ваша печень оставалась здоровой.

·   Только ваш врач может интерпретировать Ваши индивидуальные результаты тестирования и устанавливать клинический диагноз.

Для уточнения активности вируса ваш доктор, с целью детального обследования, назначит несколько дополнительных анализов крови, что бы узнать точно, что происходит внутри вас. Эти анализы называются ПЦР — полимеразная цепная реакция, с помощью которого обнаруживают генетический материал вируса гепатита С, присутствующий в крови.  Один из анализов даст ответ на наличие вируса у вас. Другой — позволит определить какой генотип у вируса (HCV имеет несколько генотипов). Еще один анализ определит вирусную загрузку — как много у вас вируса гепатита С и насколько активен этот вирус. 

Если у вас есть вирус гепатита С, то он не остается только в клетках печени, он также может быть обнаружен в вашей крови. HCV очень активен и производит много копий самого себя. Анализ на вирусную загрузку — это единственный способ измерить сколько HCV присутствует у вас.

Анализ на Вирусную загрузку очень важен по нескольким причинам:

Первая: Анализ на вирусную загрузку скажет вам  присутствует ли у вас вирус или вы уже освободились от него.

Вторая: Если вы беременная женщина, риск передачи вируса вашему ребенку очень низок, но если вы беременная женщина с высокой вирусной загрузкой, риск передачи вируса ребенку будет несколько выше.

Третья: Если вы решите пройти терапию интерфероном,  анализ на вирусную загрузку поможет доктору узнать действует ли терапия и как долго требуется ее продолжать.

ПОМНИТЕ: Всегда делайте ваши анализы в одной лаборатории. Это позволит делать правильные оценки при сравнении получаемых результатов.

Что такое генотипирование?

Вирус гепатита С (сокращенно HCV) имеет несколько разновидностей. Фактически, есть шесть разных видов HCV. Эти виды называются генотипами и нумеруются от 1 до 6. Некоторые генотипы имеют дальнейшие разделения называемые субтипами (например 1a и 1b).

Для лечащего доктора очень важно знать генотип вашего вируса, так как разные вирусы с разными генотипами по разному поддаются лечению (отвечают на терапию). Например, генотип 1 немного сложнее лечить, чем генотипы 2 или 3. И терапия 1-го типа HCV требует доз препаратов, отличных от применяемых при терапии с генотипами 2 или 3.

Наличие у вас определенного генотипа не означает, что вы больны больше или меньше. Но некоторые генотипы (например, 3) могут быть связаны с определенными состояниями печени, такими как ожирение.

Важно помнить, что у большинства людей гепатит С вообще не проявляется в виде каких либо симптомов — независимо от генотипа вируса.

Знание генотипа вируса важно по нескольким причинам:

Во первых: Если вы решите пойти на терапию, тест на генотип позволит предсказать ваши шансы на избавления от вируса.

Во вторых: тест на генотип вируса поможет вашему доктору определить необходимые дозы препаратов и длительность вашей терапии.

ПОМНИТЕ: Что наличие у вас вируса того или иного генотипа не значит, что вы больны легче или тяжелее.

Важная информация:

Статистика для 100 человек, заражённых гепатитом C (HCV)

Приблизительно у 80 из 100 человек, с выявленным вирусом гепатита С (HCV), заболевание перейдёт в хроническую форму: другие 20 человек, инфицированных HCV, освободятся от вируса самостоятельно. Это связано с тем, что организм некоторых людей в состоянии справиться с HCV естественным путем.

Приблизительно у 20 человек, полученная хроническая инфекция, будет прогрессировать и разовьется за десятилетия в серьезную болезнь: Только у около 20 из первоначальных 100 человек, инфицированных HCV, гепатит разовьется в серьезную, опасную для жизни болезнь (цирроз). Обычно, у человека с гепатитом С печень становится действительно больной в течение 40 и более лет.

Приблизительно у 2-3 человек, с хронической инфекцией гепатита С, разовьётся рак печени: Только 2-3 человека из первоначальных 100 человек, у которых было установлено инфицирование вирусом гепатита С, заболевают раком печени. Происходит это только после того, как печень будет поражена циррозом в значительной степени.

Гепатит В

Существуют различные анализы крови для диагностики гепатита B. Можно сделать общий тест или серию исследований. Ниже приведены некоторые из основных тестов и их расшифровка.

Основной тест на выявление гепатита В  — Поверхностный антиген (HBsAg, HBs антиген, HBs Ag, австралийский антиген). Он является поверхностным белком вируса гепатита В и может быть обнаружен в крови при остром или хроническом гепатите, а так же при носительстве вируса гепатита В. Есть два вида тестов, используемых для обнаружения HBsAg – ИФА (иммуноферментный анализ) и ЭХЛ (электрохемилюминисцентный анализ). Чувствительность и специфичность ИФА при этом составляет около 90%, а ЭХЛ – около 98%, поэтому в крайне редких случаях возможны ложноположительные и ложноотрицательные результаты.

С целью подтверждения наличия и выявления активности вируса гепатита В  ваш доктор, с целью детального обследования, назначит несколько дополнительных анализов крови, что бы узнать точно, что происходит внутри вашего организма. Эти анализы называются ПЦР — полимеразная цепная реакция, с помощью которого обнаруживают генетический материал вируса гепатита B, присутствующий в крови.  Один из анализов даст ответ на наличие вируса у вас. Другой — определит вирусную загрузку — как много у вас вируса гепатита B насколько активен этот вирус. 

Положительный ПЦР-тест означает, что вирус активно размножается в организме человека и такой человек несет потенциальную опасность заражения гепатитом. Если человек имеет хронический гепатит вирусной этиологии, наличие вирусной ДНК, также, означает, что человек, возможно, подвергается повышенному риску повреждения печени.

Отрицательный ПЦР-тест означает отсутствие вируса гепатита В в крови либо его крайне низкую активность.

Важно! Только Ваш врач может интерпретировать Ваши индивидуальные результаты тестирования и устанавливать клинический диагноз.

Тестирование антигена ядра гепатита С для диагностики активной инфекции гепатита С среди пациентов, находящихся на гемодиализе | BMC Nephrology

Это исследование указывает на хорошую корреляцию между индексным тестом, HCV Ag и золотым стандартом РНК HCV среди пациентов, находящихся на гемодиализе. Среди 112 серопозитивных образцов анти-ВГС антигены ВГС были положительными в 90,7% образцов, давших положительный результат на РНК ВГС. HCV Ag имел 8 (9,3%) ложноотрицательных случаев и 0 (0,00%) ложноположительных случаев при пороговом значении 3 фмоль/л. Это дает специфичность 100% и чувствительность 90.7%. Более низкая частота обнаружения по сравнению с РНК ВГС согласуется с предыдущими исследованиями [7, 9, 10, 17, 19]. Оба теста на HCV Ag и РНК HCR показали значительную корреляцию с коэффициентом теста Спирмена 0,833 ( p  < 0,001). Наш результат качественно считался реактивным, если значение HCV Ag превышало 3 фмоль/л, а результат корреляции был аналогичен предыдущим исследованиям, в которых количественно сообщалось о HCV Ag [6, 14].

Кроме того, HCV Ag показал более высокий уровень чувствительности 95.1% при более высоком уровне РНК ВГС (> 3000 МЕ/мл). Корреляция при уровне РНК ВГС выше 3000 МЕ/мл была выше, с коэффициентом теста Спирмена 0,897 ( p  < 0,001). Это было похоже на другие исследования [6, 10], где чувствительность HCV Ag увеличивалась при более высоких уровнях концентрации РНК HCV. Среди 4 ложноотрицательных случаев с уровнем РНК ВГС  > 3000 уровни РНК ВГС варьировались от 5400 до 24 840 МЕ/мл, что может быть связано с типами генотипа, как показано в других исследованиях [20, 21].

По данным Trevizoli et al., уровни РНК ВГС, как правило, ниже у пациентов, находящихся на длительном ГД, по сравнению с пациентами с нормальной функцией почек [22], что вызвало обеспокоенность по поводу пригодности антигена ВГС для диагностики активного ВГС-инфекция среди населения с БГ, так как чувствительность HCV Ag зависит от уровня РНК [23]. В нашем исследовании средний уровень РНК ВГС составлял 175 455 МЕ/мл, и только в пяти случаях уровень РНК ВГС был ниже 3000 МЕ/мл. Учитывая относительно высокую вирусную нагрузку у большинства пациентов, HCV Ag потенциально может быть использован в качестве еще одного метода диагностики активной инфекции HCV у пациентов с БХ.

У пациентов с уровнем РНК ВГС менее 3000 МЕ/мл HCV Ag был положительным только в одном образце. РНК ВГС для пяти образцов колебалась от 180 до 1980 МЕ/мл, что было намного ниже по сравнению с 3000 МЕ/мл, где HCV Ag лучше всего коррелировал с РНК ВГС. Четыре ложноотрицательных результата с уровнем РНК ВГС ниже 3000 МЕ/мл и четыре ложноотрицательных результата с уровнем РНК ВГС выше 3000 МЕ/мл свидетельствуют о нормальном тесте функции печени. Следовательно, все восемь результатов потребуют подтверждающего тестирования молекулярной РНК, чтобы разрешить этот результат.Ввиду 100% специфичности только отрицательные результаты HCV Ag требуют дальнейшей оценки с помощью РНК HCV. Это подтвердит активные инфекции и определит тех, кто является потенциальными кандидатами на лечение ПППД [19, 24, 25, 26].

Насколько мы можем судить, наше исследование является первым исследованием, использующим тест ARCHITECT HCV Ag с участием азиатских популяций с самым большим размером выборки серопозитивных на HCV (112) среди HD населения. Он показал, что HCV Ag хорошо коррелирует с РНК HCV в азиатском населении. Однако наше исследование имеет несколько ограничений.Во-первых, несмотря на крупнейшее серопозитивное исследование ВГС среди населения с БГ, размер выборки все еще довольно мал. Данные о генотипе ВГС отсутствуют и могут объяснять ложноотрицательный результат HCV Ag, особенно среди пациентов с РНК ВГС выше 3000 МЕ/мл [20, 21].

Население с БГ представляет более высокий риск инфицирования ВГС по сравнению с населением в целом. В Малайзии распространенность ВГС-серопозитивных среди населения с БГ составляет 2% по сравнению с 0,98% в общей популяции [27, 28].Согласно нашему исследованию, распространенность активной виремии ВГС среди населения с БГ составляет 76,8% среди тех, у кого положительный результат на ВГС. Этот вывод аналогичен Jasuja et.al , который сообщил о 72,7% активной виремии HCV среди серопозитивного населения HD [29].

Высокая распространенность активной виремии ВГС среди больных БГ связана с повышенным риском передачи ВГС. В этом исследовании мы продемонстрировали, что только 19,6% (22/112) серопозитивных пациентов с ВГС ранее проходили тестирование на РНК ВГС.Отсутствие подтверждения ВГС представляет собой серьезную проблему в управлении инфекцией ВГС и достижении микроэлиминации в популяции больных БГ. В странах с низким и средним доходом высокая стоимость подтверждающего тестирования на ВГС, а также ограниченное использование терапии ВГС ПППД у пациентов с хронической болезнью почек считались основными причинами плохой обращаемости за лечением ВГС среди пациентов с далеко зашедшей ХБП [6, 23].

Согласно нашему исследованию, HCV Ag представляет собой подходящую альтернативу РНК ВГС благодаря более низкой стоимости и быстрому аналитическому процессу (в течение 40 минут) и, следовательно, короткому времени выполнения [15, 19, 23].Мы предлагаем первоначальный скрининг с помощью антител к ВГС с последующим тестом на антиген ВГС для серопозитивных когорт БГ. Для серопозитивных пациентов с БХ с отрицательным антигеном к ВГС мы рекомендуем последующее наблюдение с помощью теста на РНК ВГС, поскольку его прогностическая ценность составляет 76,5%. Этот алгоритм, предложенный Julicher et al. [16] и Wasitthankasem et al. [17], потенциально могут быть экономически эффективными, поскольку не все серопозитивные пациенты с БГ подвергаются дорогостоящему тесту на РНК. Это могло бы натолкнуть на размышления области для будущих исследований.

Тестирование на антиген ВГС для диагностики инфекции гепатита С: экономичный алгоритм

Задний план: В Северной Америке диагностика инфекции активного вируса гепатита С (ВГС) в настоящее время проводится с использованием теста РНК, который является высокочувствительным и специфичным, но связан с тремя основными ограничениями: лабильностью молекул РНК, более высокими затратами и более длительным временем обработки по сравнению с с коммерчески доступным тестом на ядерный антиген ВГС.В текущем исследовании новый продукт для анализа на ядерный антиген ВГС был оценен для диагностики инфекции ВГС и его потенциала снижения затрат.

Методы: Девяносто образцов плазмы, положительных на РНК ВГС, наряду с 25 отрицательными образцами ВГС использовали для анализа антигена ВГС. Двадцать четыре образца, положительных на группу агентов, были использованы для возможной перекрестной реактивности. Также были использованы 64 образца с положительным результатом на антитела к ВГС с отрицательной РНК ВГС и неопределенными результатами иммуноблоттинга ВГС.

Результаты: В первой группе 78/90 (86,6%) дали положительный результат на антиген ВГС, при этом регрессионный анализ не показал значительных отклонений от линейности. Ни один из пренатальных образцов не дал положительного результата на антиген ВГС. Неспецифических реакций не наблюдалось. В группе с неопределенным антителом к ​​ВГС только 2/64 (3,1%) были антиген-позитивными. В последней группе ни один из образцов с очень низким уровнем антител к ВГС не дал положительного результата на антиген ВГС.Отмечена стопроцентная воспроизводимость как между, так и внутри серий. Анализ затрат показал снижение затрат, связанных с качественным тестированием РНК, минимум на 52,13%.

Выводы: Принимая во внимание сложность диагностики ВГС-инфекции и значительную стоимость и временные затраты, которые она возлагает на клинические лаборатории, тестирование антигена ВГС представляется привлекательным дополнением к существующим лабораторным методам диагностики, требующим большего внимания.

Золотой стандарт в сравнении с тестированием на ядерный антиген ВГС

01 января 2018 г.

7 минут чтения

ДОБАВИТЬ ТЕМУ В СООБЩЕНИЯ ПО ЭЛЕКТРОННОЙ ПОЧТЕ

Получать электронные письма, когда новые статьи публикуются на

Пожалуйста, укажите свой адрес электронной почты, чтобы получать электронные письма, когда новые статьи публикуются на . Подписаться Нам не удалось обработать ваш запрос. Пожалуйста, попробуйте позже. Если у вас по-прежнему возникает эта проблема, свяжитесь с нами по адресу [email protected]ком.

Назад к Хелио

Тестирование на ВГС

предоставляет ценную информацию, которая помогает в профилактике заболеваний и в начале лечения.

В настоящее время диагностика ВГС представляет собой, как минимум, двухэтапный процесс, который включает скрининг на воздействие ВГС с использованием непрямого серологического анализа для выявления антител к ВГС и подтверждение активной инфекции с помощью теста на нуклеиновые кислоты (NAT) для обнаружения вирусной РНК в плазма или сыворотка (т.е. вирусная нагрузка).

Хотя эти два теста способны выявлять и диагностировать пациентов с активной инфекцией ВГС, они успешны настолько, насколько позволяет их доступность.Тест на антитела к ВГС является относительно недорогим, требует быстрого выполнения (TAT) и может быть выполнен в большинстве клинических лабораторий, но большое количество пациентов с положительным результатом на антитела к ВГС выпадают из поля зрения и никогда не получают подтверждающий тест на РНК ВГС. . Двухэтапный диагностический процесс является обременительным для пациента, и в результате потеря пациентов для последующего наблюдения является значительным препятствием в континууме лечения.

NAT: дорого и требует много времени

В дополнение к временным затратам, с которыми сталкивается пациент, другие проблемы также влияют на низкий уровень подтверждающего тестирования.

  • NAT выполняется высококвалифицированным персоналом в специализированных лабораториях, способных проводить сложные анализы; по оценкам, 84% людей не имеют доступа к этим специализированным лабораторным помещениям.
  • Для тех пациентов, у которых есть доступ, стоимость самого теста часто непомерно высока: анализ РНК ВГС может стоить до 120 долларов США.
  • Влияние этих ограничений заметно в странах с низким доходом и ограниченными ресурсами.
Что такое ядерный антиген ВГС?

Более доступное и менее сложное диагностическое тестирование может значительно улучшить доступ к лечению для людей с хроническим ВГС в регионах с низким и средним уровнем дохода (СНСД) и помочь проложить путь к элиминации ВГС.Многообещающей альтернативой тестированию на вирусную нагрузку ВГС является тест на ядерный антиген ВГС (HCVcAg).

HCVcAg представляет собой высококонсервативный антигенный белок различных штаммов HCV, который является частью вирусной частицы HCV; фактически целевой белок более стабилен, чем РНК ВГС. Белок высвобождается в плазму и легко поддается количественному определению в качестве косвенного показателя репликации ВГС. HCVcAg поддается измерению примерно в то же время, что и РНК ВГС, появляясь в сыворотке через один-два дня после РНК ВГС в ходе инфекции.

HCVcAg количественно определяется с помощью иммунологического анализа. Иммуноанализы точны и надежны и имеют ряд преимуществ перед NAT. По сравнению с NAT, большинство иммуноанализов

PAGE BREAK

  • полностью автоматизированы и относительно просты в выполнении
  • имеют более короткий TAT; TAT для анализа HCVcAg составляет около часа, в то время как TAT может составлять до 7 часов для теста на РНК ВГС
  • значительно дешевле и составляет от 1 до 9 долларов США за тест
  • требуют меньших объемов проб
Клиническая полезность : Может ли тестирование на ядерный антиген заменить золотой стандарт?

Но как тест на HCVcAg сравнивается с тестом на РНК ВГС с клинической точки зрения? Стоимость и доступность теста не имеют большого значения, если тест некачественный.Тесты на HCVcAg первого поколения по понятным причинам были непопулярны из-за их низкой чувствительности по сравнению с тестами на РНК; однако новые тесты иммуноанализа хемилюминесцентных микрочастиц (CMIA) намного превосходят эти тесты первого поколения с чувствительностью в 16–25 раз выше.

Тест на HCVcAg можно использовать в двух аспектах: как подтверждающий диагностический тест и как мониторинг лечения, то есть для оценки устойчивого вирусологического ответа (УВО). В нескольких исследованиях, сравнивающих клиническую эффективность HCVcAg и анализов РНК ВГС, была обнаружена высокая корреляция между двумя методами тестирования в обеих условиях.

Имеющиеся в продаже тесты на HCVcAg продемонстрировали высокую чувствительность и специфичность диагностики активной инфекции ВГС в ряде групп населения. Согласно большинству исследований, сравнивающих диагностическую точность тестов на ядерный антиген и РНК ВГС, основным диагностическим ограничением тестирования на HCVcAg является более низкая чувствительность при вирусной нагрузке от 1000 до 3000 МЕ/мл. Поскольку у подавляющего большинства пациентов с хронической инфекцией ВГС уровень РНК ВГС превышает 1000 МЕ/мл, тесты на ядерный антиген могут быть подходящими для скрининга и диагностики хронического ВГС, особенно в группах риска с высокой распространенностью инфекции ВГС. .

Что касается мониторинга лечения, как соотносятся кинетика HCVcAg и РНК HCV у инфицированных пациентов, принимающих противовирусные препараты прямого действия (ПППД)? Исследование, оценивающее полезность тестирования на HCVcAg для выявления УВО, показало, что изначально уровень HCVcAg снижался быстрее, чем уровень РНК HCV. На 2-й неделе лечения соответствие между двумя методами тестирования составило 40%; к концу лечения этот показатель увеличился до 95%. Даже с первоначальным расхождением (из-за быстрого эффекта лечения на HCVcAg) результаты этого исследования показали, что тестирование на HCVcAg было столь же информативным и точным, как РНК HCV для прогнозирования успеха лечения.Кроме того, ранее упомянутая более низкая чувствительность анализа HCVcAg по сравнению с анализом РНК ВГС также не должна препятствовать способности выявлять неудачи лечения, поскольку увеличение вирусной нагрузки после неудачи лечения приводит к значениям, намного превышающим порог чувствительности 3000 МЕ/мл.

РАЗРЫВ СТРАНИЦЫ

Есть ли еще место для мониторинга лечения в эпоху DAA?

Говоря о лечении ПППД, более высокая эффективность и значительно улучшенный профиль безопасности этих препаратов по сравнению со схемами, содержащими интерферон (ИФН) и рибавирин (РБВ), вызывает вопрос: необходим ли вообще регулярный мониторинг лечения?

Исторически установление исходной виремии и раннее снижение вирусной нагрузки были самыми сильными предикторами ответа на лечение.Ежемесячное измерение вирусной РНК во время лечения использовалось для определения продолжительности лечения: так называемая «терапия, управляемая ответом».

Сегодня чрезвычайно высокие показатели ответа на лечение и показатели излечения, связанные с лечением ПППД, уменьшили важность использования уровней РНК ВГС для прогнозирования ответа на лечение.

Кроме того, остаточная РНК ВГС, обнаруженная в конце лечения ПППД, не является редкостью и не связана с рецидивом вируса. Это может быть аргументом в пользу тестирования на HCVcAg, поскольку сниженная чувствительность анализа может не выявить эту клинически незначительную остаточную РНК, что позволяет избежать ненужного беспокойства пациента.Усилением этого аргумента является тот факт, что HCVcAg легче обнаружить, чем РНК HCV, что может помочь улучшить мотивацию пациентов и их приверженность лечению, поскольку они быстрее увидят результаты лечения.

Результат лечения ВГС по-прежнему основывается на тестировании на РНК ВГС, но из-за более высокой эффективности ПППД будущие рекомендации по тестированию на ВГС могут быть сосредоточены на включении или даже замене тестированием на HCVcAg в определенных условиях; Настройки LMIC, в частности.

  • Самое последнее обновление рекомендаций Европейской ассоциации по изучению печени (EASL) включает добавление теста на HCVcAg в качестве альтернативы РНК ВГС, когда тест на РНК недоступен или недоступен.
  • В рекомендациях Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) 2017 г. также указано, что тест на HCVcAg с такой же чувствительностью, что и тест на РНК ВГС, может рассматриваться как более доступная и недорогая альтернатива.

Консенсус, конечно, не был достигнут в отношении тестирования сердцевинного антигена. В самых последних рекомендациях Американской ассоциации по изучению заболеваний печени (AASLD) по-прежнему рекомендуется количественное определение вирусной нагрузки ВГС после 4 недель лечения, а это означает, что пациенты должны пройти тестирование в четыре различных периода времени: исходный уровень, 4-я неделя лечения, окончание лечения и окончание наблюдения после лечения; оценка генотипа и стадии фиброза также необходима для определения возможности лечения ПППД.

Взгляд в будущее

В будущем использование только HCVcAg в качестве диагностического теста в группах населения с высокой распространенностью, таких как потребители инъекционных наркотиков и заключенные, также может снизить потерю пациентов для последующего наблюдения. Использование HCVcAg в качестве диагностического теста также может позволить начать лечение в тот же день из-за короткого времени TAT иммуноанализа по сравнению с тестированием РНК.

PAGE BREAK

Методы тестирования по месту оказания медицинской помощи (POC) также изучаются на предмет их полезности для групп населения с высокой распространенностью и недостаточным обслуживанием.В частности, тестирование сухой капли крови (DBS) с использованием цельной капиллярной крови из пятки или пальца может быть полезным в условиях, когда нет возможности взять образцы венозной крови, а также у лиц с плохим венозным доступом. В настоящее время тестирование DBS плохо коррелирует с тестированием РНК, хотя оно по-прежнему полезно в качестве качественного диагностического теста. Доступность и простота DBS-тестирования делает его жизнеспособной альтернативой в СНСД, где чувствительный качественный анализ, который может легко выявить лиц с активной инфекцией, будет иметь большое значение для сдерживания распространения ВГС и оказания помощи тем, кто в ней нуждается.

С момента первого обнаружения основного антигена ВГС в 1996 году тестирование HCVcAg прошло долгий путь.

  • Современные хорошо зарекомендовавшие себя тесты обладают диагностической точностью, аналогичной тестированию РНК ВГС при вирусной нагрузке более 3000 МЕ/мл.
  • Иммуноанализ на ядерный антиген более удобен тем, что не требует специально обученного лабораторного персонала или специального оборудования; на самом деле тест на HCVcAg можно проводить на том же анализаторе и в то же время, что и тест на антитела к HCV.
  • Они экономичны, требуют меньших образцов, имеют более быстрое ТАТ по сравнению с тестами на РНК, а тестируемые образцы более стабильны.
  • Тестирование на ядерный антиген высоко коррелирует с тестированием РНК независимо от генотипа, даже у пациентов с коинфекцией вирусом гепатита В (HBV) и вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ).

Тестирование на HCVcAg не может полностью заменить тестирование на РНК ВГС, но его полезность для населения с высокой распространенностью и низким доходом очевидна.

Ссылки
  • Агемо А., Дегаспери Э., Де Никола С. и др.Количественное определение корового антигена позволяет контролировать эффективность противовирусных препаратов прямого действия у пациентов с хронической инфекцией, вызванной вирусом гепатита С. Клин Гастроэнтерол Гепатол . 2017;14(9):1331-1336.
  • Алонсо Р., Перес-Гарсия Ф., Ампуэро Д., Рейгадас Э., Боуза Э. Новые противовирусные препараты прямого действия для пациентов с хронической инфекцией ВГС: можем ли мы контролировать лечение, используя тест на ядерный антиген ВГС? Диагностика Microbiol Infect Dis . 2016;87:243-246.
  • Arboledas JCA, Guerrero IP, Rodriguez MJB и др.Кор-антиген вируса гепатита С в лечении пациентов, получающих лечение новыми противовирусными препаратами прямого действия. Диагностика Microbiol Infect Dis . 2017;89:29-34.
  • Цетинер С., Дюран А.С., Кибар Ф., Яман А. Сравнение эффективности теста на ядерный антиген ВГС нового поколения и теста на РНК ВГС при ведении вирусной инфекции гепатита С . Transfus Apher Sci . 2017;56:362-366.
  • Истербрук П.Дж., Робертс Т., Сэндс А., Пилинг Р.Диагностика вирусного гепатита. Курс Мнение ВИЧ СПИД . 2017;12:302-314.

РАЗРЫВ СТРАНИЦЫ

  • Freiman JM, Tran TM, Schumacher SG et al. Тестирование основного антигена ВГС для диагностики инфекции ВГС: систематический обзор и метаанализ. Ann Intern Med. 2016;165(5):345-355.
  • Khan H, Hill A, Main J, Brown A, Cooke G. Может ли тестирование антигена вируса гепатита C заменить анализ цепной реакции полимеразы рибонуклеиновой кислоты для обнаружения вируса гепатита C? Систематический обзор.Открытый форум Infect Dis . 2017. DOI: 10.1093/ofid/ofw252.
  • Логги Э., Галли С., Витале Г. и др. Мониторинг лечения гепатита С противовирусными препаратами прямого действия серологическими и молекулярными методами. PLoS ОДИН. 2017;12(11):e0187755.
  • Lamoury FMJ, Soker A, Martinez D et al. Ядерный антиген вируса гепатита С: упрощенный инструмент мониторинга лечения, в том числе рецидивов после лечения. Дж Клин Вирол . 2017;92:32-38.
  • Пилинг Р.В., Боэрас Д.И., Маринуччи Ф., Истербрук П. Будущее тестирования на вирусные гепатиты: инновации в технологиях и подходах к тестированию. BMC Infect Dis . 2017; 17 (Приложение 1): 699. DOI 10.1186/s12879-017-2775-0.
  • Talal AH, Chen Y, Zeremski M et al. Кор-антиген вируса гепатита С: потенциальная альтернатива тестированию на РНК ВГС у лиц с расстройствами, связанными со злоупотреблением психоактивными веществами. J Subst Злоупотребление . 2017;78:37-42.
  • Wasitthankasem R, Vichaiwattana P, Auphimai C et al.Коровый антиген ВГС является альтернативным маркером РНК ВГС для оценки активной инфекции ВГС: значение для улучшения диагностических возможностей в эпоху доступных ПППД. PeerJ . 2017;5:e4008. DOI 10.7717/peerj.4008.

ДОБАВИТЬ ТЕМУ В СООБЩЕНИЯ ПО ЭЛЕКТРОННОЙ ПОЧТЕ

Получать электронные письма, когда новые статьи публикуются на

Пожалуйста, укажите свой адрес электронной почты, чтобы получать электронные письма, когда новые статьи публикуются на . Подписаться Нам не удалось обработать ваш запрос.Пожалуйста, попробуйте позже. Если у вас по-прежнему возникает эта проблема, свяжитесь с нами по адресу [email protected]

Назад к Хелио

ВГС Центральный

Информационный бюллетень по диагностике вируса гепатита С (ВГС) — Группа действий по лечению

Что такое скрининг?

Скрининг предназначен для выявления возможных заболеваний. Для вируса гепатита С (HCV) скрининг означает поиск антител вместо вируса.

Что такое антитела?

Антитела представляют собой Y-образные белки, вырабатываемые иммунной системой человека. Они являются частью реакции иммунной системы на вирусы, бактерии и другие вредные вещества (называемые антигенами ).

Антитела прикрепляются к антигенам или инфицированным клеткам и метят их, чтобы другие иммунные клетки могли их найти и вывести из строя. Антитела остаются в организме человека еще долго после того, как вызвавший их антиген исчезает (это называется иммунологической памятью ).Если тот же антиген снова попадет в организм человека, даже спустя годы, иммунная система запомнит его и пошлет антитела для его уничтожения.

Когда ВГС попадает в кровоток человека, он вызывает иммунный ответ. Иммунная система вырабатывает антитела для борьбы с ВГС. Иногда иммунная система сама избавляется от вируса гепатита С (это называется спонтанной элиминацией вируса ). Около четверти людей с гепатитом С спонтанно избавляются от вируса. Это более вероятно у молодых людей (особенно у женщин), у людей, не инфицированных ВИЧ, и у людей с генотипом IL28B CC (см. информационный бюллетень TAG Hepatitis C и IL28B Gene ).

Даже если человек излечился от ВГС или вылечился с помощью лечения, антитела к ВГС остаются в крови человека в течение многих лет.

Что означает отрицательный результат теста на антитела к ВГС?

Отрицательный результат теста на антитела обычно означает, что человек не был инфицирован гепатитом С (если только он не был инфицирован совсем недавно или у него ослаблена иммунная система).

Организму требуется не менее двух месяцев (а иногда и до девяти месяцев) для выработки антител.Люди с ослабленной иммунной системой (из-за болезни или приема некоторых лекарств) не всегда способны вырабатывать антитела. Это может произойти у людей с аутоиммунными заболеваниями (когда иммунная система человека атакует его или ее собственные органы или ткани), у ВИЧ-позитивных людей с количеством клеток CD4 ниже <200 клеток/мм3 и у людей, принимающих иммунодепрессанты.

Что означает положительный результат теста на антитела к ВГС?

Положительный результат теста на антитела означает, что человек инфицирован гепатитом С.Это не означает, что у человека все еще есть гепатит С. Для постановки диагноза необходим другой тест, чтобы найти настоящий вирус гепатита С.

Что такое тестирование?

Тестирование подтвердит или исключит наличие у кого-либо заболевания.

Как проводится тестирование на гепатит С?

Тест на вирусную нагрузку (называемый РНК ВГС ) используется для проверки наличия гепатита С в кровотоке. Обычно вирус гепатита С можно обнаружить в кровотоке человека через две недели после заражения.

*За исключением недавнего риска (в течение шести месяцев) или у людей с ослабленной иммунной системой
**В течение первых шести месяцев после инфицирования ВГС человек может спонтанно избавиться от вируса; при недавнем риске повторите определение вирусной нагрузки для подтверждения хронической инфекции гепатита С

Существует два типа тестов на вирусную нагрузку: качественные и количественные.

Качественное тестирование проверяет наличие вируса гепатита С в кровотоке (обнаруживаемый или неопределяемый).

Количественный анализ измеряет количество вируса гепатита С в кровотоке. Эти тесты используются во время и после лечения ВГС, чтобы увидеть, работает ли оно и излечивается ли человек.

Качественное тестирование на ВГС

Тестирование основного антигена ВГС

Коровый антиген гепатита С представляет собой вирусный белок. Поскольку коровый антиген является частью вируса гепатита С, его обычно можно обнаружить в кровотоке через две недели после заражения.

Поскольку тест на ядерный антиген ВГС проще и дешевле, чем тест на вирусную нагрузку, некоторые эксперты предлагают использовать его в условиях ограниченных ресурсов. Тестирование на ядерный антиген может использоваться — часто вместе с тестированием на антитела к ВГС — для выявления острого ВГС или подтверждения хронической инфекции ВГС. Тестирование на ядерный антиген ВГС также можно использовать для оценки результатов лечения. Хотя он не выявляет низкие уровни ВГС (<1000 МЕ/мл), обычно вирусная нагрузка гепатита С намного выше у людей с рецидивом после лечения ВГС.

Генотипирование ВГС

Существует по крайней мере шесть известных генотипов гепатита С, пронумерованных в порядке их обнаружения. Каждый генотип имеет множество подтипов, каждому из которых присвоена буква в том порядке, в котором они были обнаружены. Люди могут быть инфицированы более чем одним генотипом ВГС (так называемая смешанная инфекция ). Это, скорее всего, произойдет с людьми, которые получили продукты крови или переливали кровь много лет назад или в месте, где кровоснабжение не проверяется на ВГС; люди на почечном диализе; или люди, употребляющие инъекционные наркотики с помощью общего нестерилизованного инструментария.

В настоящее время тип и продолжительность лечения ВГС зависят от того, какой генотип имеет человек. Вскоре можно будет использовать одну схему лечения ВГС для всех (называемую пангенотипической ), что сделает генотипирование ВГС ненужным.

Стадирование заболевания печени

Тип и продолжительность лечения ВГС иногда зависят от степени повреждения печени у человека (например, людям с циррозом печени часто назначают рибавирин, и они лечатся дольше, чем люди с меньшим поражением печени).

Существуют различные методы определения степени повреждения печени у человека (называемые стадирование ). Хотя неинвазивные тесты не всегда так точны, как биопсия печени, они безопаснее, дешевле и проще в проведении и проведении. Становится все более распространенным использование рутинных анализов крови или ультразвукового исследования, чтобы определить, есть ли у человека цирроз печени.

Новая диагностика ВГС

Теперь, когда лечение ВГС стало проще, безопаснее и эффективнее, диагностика должна стать проще и дешевле.

В идеале ВГС вскоре будет диагностирован с помощью одного экспресс-теста в месте оказания медицинской помощи и вылечен пангенотипическим режимом.

Клиническая польза анализа корового антигена вируса гепатита С (HCVcAg) для выявления активной инфекции ВГС у пациентов, находящихся на гемодиализе и у пациентов с трансплантацией почки

Аннотация

Фон

Распространенность HCV-инфекции высока, и она является основной причиной заболеваемости и смертности, связанных с поражением печени, у пациентов, находящихся на гемодиализе и у пациентов с трансплантацией почки.Диагностика инфекции, вызванной вирусом гепатита С (ВГС), требует как скрининга на антитела к ВГС, так и подтверждающего тестирования на нуклеиновые кислоты (NAT). Коровый антиген вируса гепатита С (HCVcAg) является надежным прямым вирусным маркером для выявления активной инфекции ВГС.

Цель

Для оценки клинической полезности корового антигена ВГС для выявления активной инфекции ВГС у пациентов, находящихся на гемодиализе и у пациентов с трансплантацией почки.

Методы

Для тестирования на HCVcAg был включен в общей сложности 231 образец плазмы с преобладанием низкой вирусной нагрузки, и его рабочие характеристики сравнивались с РНК ВГС «золотой стандарт».

Результаты

Сравнение HCVcAg с РНК ВГС показало превосходную специфичность 99 % (95 % ДИ: от 94,7 до 100 %) и чувствительность 80,62 % (95 % ДИ: 73,59–87,7 %). Аналогично, PPV и NPV для HCVcAg составляли 99,1% (95% ДИ: от 93,7% до 99,9%) и 80,2% (95% ДИ: 74% до 85,2%) соответственно. Корреляция между HCVcAg и РНК HCV оказалась хорошей (R 2 = 0,86, p<0,0001). Среди распространенных индийских генотипов ВГС (1, 3 и 4) наблюдалась хорошая корреляция между РНК ВГС и HCVcAg (R 2 = 0.81, р<0,0001).

Выводы

Это первое индийское исследование, показывающее, что HCVcAg является надежным и экономически эффективным прямым маркером для выявления активной инфекции HCV у пациентов, находящихся на гемодиализе и у пациентов с трансплантацией почки. Внедрение тестирования на HCVcAg может улучшить доступность эффективного и недорогого лечения заболеваний у пациентов, находящихся на гемодиализе и пересаженных почках. В случаях с отрицательным результатом на HCVcAg последовательное тестирование с антителами против HCV с последующим определением РНК HCV может быть надежным и экономически эффективным подходом.

Образец цитирования: Ponnuvel S, Fletcher GJ, Anantharam R, Varughese S, David VG, Abraham P (2021) Клиническая польза анализа корового антигена вируса гепатита C (HCVcAg) для выявления активной инфекции HCV у пациентов, находящихся на гемодиализе и пересаженных почках. ПЛОС ОДИН 16(4): е0250263. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0250263

Редактор: Чен-Хуа Лю, Государственная больница Тайваньского университета, ТАЙВАНЬ

Получено: 17 ноября 2020 г .; Принято: 3 апреля 2021 г .; Опубликовано: 22 апреля 2021 г.

Авторское право: © 2021 Ponnuvel et al.Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все соответствующие данные содержатся в рукописи и файлах вспомогательной информации.

Финансирование: Это исследование было поддержано грантом Fluid Research Grant Христианского медицинского колледжа, Веллор, Тамил Наду, Индия (грант IRB №: 12009).Спонсор не участвовал в разработке дизайна исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Во всем мире 80 миллионов человек живут с хронической инфекцией вируса гепатита С (ВГС) [1]. ВГС-инфекция является важной причиной заболеваемости и смертности, связанных с поражением печени, среди пациентов, находящихся на гемодиализе и трансплантированных почках. Глобальная распространенность инфекции ВГС у пациентов с терминальной стадией почечной недостаточности (ТПН) составляет 7.5% [2]. Положительный результат на ВГС в сыворотке реципиентов почечного трансплантата (ПП) в 10 раз выше, чем в общей популяции [3]. В Индии, на основе анти-HCV и РНК HCV, распространенность инфекции HCV среди пациентов, находящихся на гемодиализе, составляет от 4,3% до 45% и 27,7% соответственно [4,5].

Пациенты с хронической болезнью почек (ХБП) подвержены высокому риску заражения ВГС. Было выявлено несколько факторов высокого риска инфицирования ВГС среди диализных пациентов, в том числе длительное воздействие на сосуды, многократные переливания крови, продолжительность терминальной стадии болезни почек, режим диализа и одновременная распространенность ВГС-инфекции в диализном отделении.Хроническая HCV-инфекция вызывает ухудшение состояния здоровья, повышенный риск заболеваний печени, более высокую сердечно-сосудистую смертность и криоглобулинемический синдром у пациентов, находящихся на гемодиализе [6,7]. У реципиентов почечного трансплантата инфекция ВГС независимо связана с острым отторжением, хронической нефропатией аллотрансплантата, диабетом и гломерулонефритом de novo [8,9].

Диагноз ВГС-инфекции традиционно основывается на обнаружении антител к ВГС и РНК ВГС. Однако антитела к ВГС не могут быть обнаружены в период окна 70 дней [10].Кроме того, тесты на анти-ВГС не были надежными у диализных пациентов из-за притупленного гуморального иммунного ответа, который возникает при заболеваниях почек. Диагностические ограничения обнаружения антител заключаются в том, что он не может отличить текущую или перенесенную инфекцию, а частота ложноотрицательных результатов составляет 17,9% у пациентов, находящихся на гемодиализе [11]. Таким образом, для диагностики активной инфекции ВГС необходимы надежные прямые маркеры, такие как РНК ВГС или, возможно, ядерный антиген ВГС (HCVcAg).

Количественное определение РНК ВГС

рекомендуется для диагностики, оценки и лечения в соответствии с рекомендациями по клинической практике, улучшающими глобальные результаты заболевания почек (KDIGO) [12].РНК ВГС также используется для оценки приверженности лечению и устойчивого вирусологического ответа через 12 или 24 недели после завершения лечения. Количественное определение РНК ВГС с помощью полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени (ОТ-ПЦР) является высокочувствительным, специфичным и надежным, но дорогостоящим, трудоемким и требует сложного оборудования и обученного персонала [13]. Хотя количественная оценка РНК ВГС широко признана золотым стандартом, она не подходит для рутинного скрининга пациентов, находящихся на гемодиализе, в условиях ограниченных ресурсов.Недавно был разработан метод количественного определения HCVcAg, клиническая чувствительность которого составляет 90 %, что сравнимо с РНК ВГС. Этот анализ оказался полезным для выявления ранней и активной инфекции ВГС у пациентов, находящихся на диализе.

HCVcAg представляет собой надежный стабильный маркер активной инфекции, чем РНК ВГС. Он высвобождается в плазму во время сборки вируса и может быть обнаружен через несколько дней после РНК ВГС [14]. Она более стабильна, чем РНК ВГС, при комнатной температуре, что облегчает транспортировку [15].Положительный результат на HCVcAg подтверждает активность репликации вируса. В этом исследовании мы установили клиническую полезность анализа HCVcAg как надежной, экономичной и высокопроизводительной альтернативы РНК ВГС для диагностики активной инфекции ВГС у пациентов, находящихся на гемодиализе и у пациентов с трансплантацией почки.

Методы

Дизайн исследования и пациенты

Десять мл K 2 Образцы крови с ЭДТА были собраны у реципиентов гемодиализа и трансплантата почки. Образцы крови центрифугировали при 2500 об/мин в течение 10 минут для отделения плазмы и хранили при -80°С.Перед тестированием у каждого пациента было получено письменное информированное согласие. В период с января 2014 г. по декабрь 2019 г. мы провели исследование 231 архивного образца плазмы пациентов, находящихся на гемодиализе и трансплантированных почках. Этот план исследования был одобрен Наблюдательным советом учреждения и комитетом по этике (протокол IRB № 12009) Христианского медицинского колледжа, Веллор, Индия.

Оценка антител к ВГС

Антитела

к ВГС оценивали с помощью иммуноанализа хемилюминесцентных микрочастиц (ARCHITECT HCV Ab, Abbott, Висбаден, Германия).Образцы с <1,0 S/CO считались отрицательными. Образцы с ≥1,0–5,0 S/CO и ≥5,0 S/CO считались слабо положительными и положительными соответственно. Слабоположительные образцы были повторены в двух экземплярах в соответствии с руководством по тестированию.

Количественное определение РНК ВГС и генотипирование ВГС

РНК ВГС

определяли количественно из образцов плазмы с помощью автоматизированной ПЦР в реальном времени (Abbott Real-Time HCV RNA assay; Abbott Molecular, США) с динамическим диапазоном количественного определения от 12 до 10 8 МЕ/мл.

РНК ВГС

выделяли из образцов плазмы с использованием мини-набора QIAamp Viral RNA (Qiagen, Германия) в соответствии с протоколом производителя. Секвенирование области NS5b HCV проводили с помощью ПЦР с геминастацией. Первый этап ПЦР проводили с использованием набора Titanium® One-Step RT-PCR, а затем проводили второй этап ПЦР с использованием ДНК-полимеразы Super Therm Taq (Medox ® ). Амплифицированный продукт 392 п.н. из второго раунда ПЦР был секвенирован после этапа очистки для удаления димеров праймеров и избытка dNTP.Полученные нуклеотидные последовательности подвергали BLAST с использованием базы данных последовательностей HCV BLAST. Последовательности праймеров показаны в Таблице 1.

Количественное определение HCVcAg

Количественное определение

HCVcAg (ARCHITECT HCV Ag, Abbott, Висбаден, Германия) проводили из хранящихся образцов плазмы. Образцы плазмы центрифугировали при 7000 об/мин в течение 7 минут и переносили (200 мкл) в чашки для образцов объемом 2 мл, чтобы избежать возможного засорения иглы для аспирации образцов Architect.Анализ HCVcAg представляет собой двухэтапный хемилюминесцентный иммуноанализ на микрочастицах (CMIA) с использованием микрочастиц, покрытых моноклональными анти-HCV, для количественного определения HCVcAg. На первом этапе предварительной обработки вирусные частицы лизируются и извлекается HCVcAg. На втором этапе любой ядерный антиген ВГС, присутствующий в предварительно обработанном образце, связывается с микрочастицами, покрытыми анти-ВГС, конъюгированными с конъюгатом анти-ВГС, меченным акридинием. Результирующая хемилюминесцентная реакция измеряется в относительных световых единицах (RLU).Концентрацию HCVcAg в каждом образце определяли с использованием калибровочной кривой Architect HCV Ag, полученной во время калибровки анализа. Линейный диапазон количественного определения HCVcAg составляет от 3,0 фмоль/л до 20000 фмоль/л. Образцы с концентрацией >20000 фмоль/л разводили по протоколу автоматического разбавления. Пороговое значение анализа для положительного результата составляло ≥3,0 фмоль/л, тогда как значения от 3,0 до 10 фмоль/л и >10 фмоль/л считались слабо положительными и положительными соответственно.Слабоположительные образцы (от 3,0 до 10 фмоль/л) повторяли в двух экземплярах в соответствии с рекомендациями руководства по тестированию.

Статистические методы

Чувствительность, специфичность, положительная прогностическая ценность (PPV), отрицательная прогностическая ценность (NPV) и корреляция (ранговая корреляция Спирмена) HCVcAg были рассчитаны с использованием золотого стандарта РНК HCV с использованием MedCalc ® v14.8.1 (Бельгия) и GraphPad Программное обеспечение Prism v8.0 (Калифорния). Значение p <0,05 считалось статистически значимым.

Results

Результаты количественного определения HCVcAg в 231 образце плазмы сравнивали с золотым стандартом РНК HCV для расчета чувствительности, специфичности, корреляции, PPV и NPV. Демографические характеристики зарегистрированных пациентов показаны в Таблице 2 , а профили функции почек показаны в Рис. 1.

Рис. 1. Классификация пациентов с профилем функции почек.

*Средняя расчетная скорость клубочковой фильтрации (рСКФ) в мл/мин/л.73 м 2 с 95% доверительным интервалом (p <0,0001). ** Медиана креатинина сыворотки (Sr Cr) в мг/дл с доверительным интервалом 95% (p <0,0001).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0250263.g001

Среди 231 образца 129 (55,8%) были положительными на РНК ВГС, а 102 (44,2%) образца были отрицательными на РНК ВГС. Среди 129 образцов, положительных на РНК ВГС, 33 (25,6%) образца имели более низкую вирусную нагрузку <3 log МЕ/мл. Из 129 РНК-положительных образцов HCV 99 (76,7%) образцов были анти-HCV-позитивными, а остальные 30 (23.3%) образцы были анти-ВГС-отрицательными. Из 99 анти-HCV-положительных образцов 78 (78,8%) образцов были положительными на HCVcAg, а 21 (21,2%) образца были отрицательными на HCVcAg. Аналогичным образом, из 30 анти-HCV-отрицательных образцов 26 (86,7%) образцов были положительными на HCVcAg и 4 (13,3%) образца были отрицательными на HCVcAg. Среди 102 РНК ВГС-отрицательных образцов 58 (56,9%) образцов были анти-ВГС-положительными, а остальные 44 (43,1%) образца были анти-ВГС-отрицательными. Из 58 положительных на анти-ВГС образцов 1 (1,7%) образец был положительным на HCVcAg, а 57 (98.3%) образцы были отрицательными на HCVcAg. В 44 анти-HCV-отрицательных образцах все 44 (100%) образца были отрицательными на HCVcAg (рис. 2).

Общая чувствительность, специфичность, PPV и NPV HCVcAg составляли 80,62% (95% ДИ: от 73,59 до 87,7%), 99% (95% ДИ: от 94,7 до 100%), 99,1% (95% ДИ: 93,7% до 99,9%) и 80,2% (95% ДИ: от 74% до 85,2%) соответственно. Общая корреляция между РНК HCV и HCVcAg была хорошей (R 2 = 0,86, p<0,0001). Медиана РНК ВГС составляла 1,9 log МЕ/мл (95% ДИ: от 0 до 3.76 МЕ/мл), а медиана концентрации HCVcAg составляла 0 log фмоль/л (95% ДИ: от 0 до 0,73) (рис. 3) .

В образцах, положительных на РНК ВГС (n = 129), была обнаружена хорошая корреляция между РНК ВГС и HCVcAg (R 2 = 0,8, p<0,0001). Медиана РНК ВГС составила 5,4 log МЕ/мл (95% ДИ: от 4,99 до 5,71 МЕ/мл), а медиана концентрации HCVcAg составила 2,5 log фмоль/л (95% ДИ: 2,11–2,7) (рис. 4) .

В образцах (n = 99), которые были положительными как на РНК ВГС, так и на анти-ВГС, была обнаружена хорошая корреляция между РНК ВГС и HCVcAg (R 2 = 0.77, р<0,0001). Медиана РНК ВГС составила 5,1 log МЕ/мл (95% ДИ: от 4,79 до 5,69 МЕ/мл), а медиана концентрации HCVcAg составила 2,2 log фмоль/л (95% ДИ: 1,7–2,57) (рис. 5) .

В образцах (n = 30), положительных на РНК ВГС и отрицательных на анти-ВГС, была обнаружена превосходная корреляция между РНК ВГС и HCVcAg (R 2 = 0,91, p<0,0001). Медиана РНК ВГС составляла 5,8 log МЕ/мл (95% ДИ: от 5,31 до 6,15 МЕ/мл), а медиана концентрации HCVcAg составляла 3 log фмоль/л (95% ДИ: 2.с 46 по 3.41) (рис. 6) .

Корреляция между РНК ВГС и HCVcAg в образцах общего генотипа

Образцы (n = 89) с тремя распространенными генотипами (1, 3 и 4) показали хорошую корреляцию между РНК HCV и HCVcAg (R 2 = 0,81, p<0,0001). Медиана РНК ВГС составила 5,4 log МЕ/мл (95% ДИ: от 5,1 до 5,8 МЕ/мл), а медиана концентрации HCVcAg составила 2,5 log фмоль/л (95% ДИ: 2,27–2,7) (рис. 7) .

Анализ кривой рабочих характеристик приемника (ROC)

Кривая рабочей характеристики приемника обеспечивает чувствительность 100% и специфичность 91.9% с вирусной нагрузкой >3,39 log МЕ/мл, что эквивалентно 2500 МЕ/мл РНК ВГС (рис. 8) .

Обсуждение

HCVcAg и РНК HCV являются прямыми маркерами репликации HCV. Однако данных о полезности HCVcAg у пациентов, находящихся на гемодиализе и трансплантированных почках, немного. Такие пациенты имеют более высокий риск заражения ВГС, связанный с лечением заболевания [5]. Поскольку требуемая частота тестирования на РНК ВГС выше в этой группе, молекулярное тестирование увеличивает общую стоимость в три раза по сравнению с прямым тестированием на ВГС-cAg.Кроме того, надежность скрининга на антитела к ВГС не является оптимальной среди пациентов, находящихся на гемодиализе и пересаженных почках, из-за иммуносупрессии [17]. Следовательно, это исследование подтвердило полезность HCVcAg в качестве доступного вирусного маркера для диагностики активной инфекции ВГС.

Образцы для количественного определения РНК ВГС должны быть заморожены до момента тестирования. Образцы сыворотки или плазмы на HCVcAg не требуют такого обращения с образцами. Это также упрощает транспортировку в ближайшую лабораторию для определения HCVcAg, и его можно тестировать на той же автоматизированной платформе, которая используется для антител к HCV.Высокая положительная прогностическая ценность этого HCVcAg позволяет проводить скрининг пациентов с ХБП до того, как они начнут диализ в клинических условиях. Благодаря простоте тестирования и более быстрому времени выполнения, этот анализ может быстро разделить инфицированных и неинфицированных пациентов с ВГС.

Это исследование показало, что общая надежность и сопоставимость HCVcAg с РНК ВГС хорошие (R 2 = 0,86, p<0,0001). Сравнение анализа HCVcAg со всем диапазоном вирусных нагрузок ВГС (от 1 до 7 log МЕ/мл), представляющих естественное течение инфекции ВГС, показало чувствительность ≥ 80%.Анализ данных о вирусной нагрузке ВГС, за исключением ≤3 log МЕ/мл, заметно улучшил общую чувствительность до 99% (данные не показаны), что согласуется с глобальными данными [18]. Как правило, у ранее не получавших лечение лиц вирусная нагрузка ВГС находится в диапазоне от 10 5 до 10 6 МЕ/мл [19]. Большое когортное исследование (n = 10006) подтвердило клиническую полезность HCVcAg в качестве скринингового/диагностического анализа для выявления активной инфекции HCV [20]. Кроме того, данные текущих исследований согласуются с рекомендациями EASL (2016 г.) и Глобального отчета ВОЗ по гепатитам (2017 г.) по внедрению HCVcAg для выявления активной инфекции ВГС [21,22].

В образцах, отрицательных по анти-ВГС и положительных по РНК ВГС (n = 30), анализ HCVcAg показал превосходную корреляцию с РНК ВГС (R 2 = 0,91). Это может быть связано с отсутствием измеримого гуморального ответа, что приводит к более высокой вирусной нагрузке ВГС, чем у анти-ВГС-позитивных пациентов. Поскольку в группе ХБП преобладает иммуносупрессия, ведущая к отрицательному статусу анти-ВГС, HCVcAg имеет важное диагностическое значение для надежного выявления активной инфекции ВГС. Таким образом, этот недорогой анализ с сопоставимыми рабочими характеристиками с РНК ВГС можно рассматривать для выявления активной инфекции ВГС.

Надежный анализ прямого обнаружения ВГС должен быть в состоянии идентифицировать активную инфекцию, вызванную распространенными генотипами. Текущий анализ HCVcAg показал хорошую корреляцию с РНК HCV у пациентов, находящихся на гемодиализе и у пациентов с трансплантацией почки, инфицированных распространенными генотипами (1, 3 и 4). Однако надежность анализа нуждается в дальнейшей оценке с другими генотипами ВГС.

Одним из ограничений результатов исследования является пониженная чувствительность анализа HCVcAg с образцами РНК ВГС с низким уровнем, которая показала расхождение 10 3 МЕ/мл.Это несоответствие ожидается, потому что методы амплификации мишеней, основанные на внутренней ПЦР, намного более чувствительны, чем серологические методы амплификации сигнала [23]. Чтобы преодолеть это, во время анализа HCVcAg можно использовать добавление полиэтиленгликоля (ПЭГ), который является потенциатором реактивности Ag-Ab. Это достигается за счет стерического исключения Ag и Ab за счет более экспонирования ПЭГ в дисперсионной среде и облегчения взаимодействия Ag-Ab [24]. ВГС-инфекция вызывает сильные кор-антитела против ВГС, и нельзя игнорировать вероятность того, что комплексы HCVcAg и core-Ab ставят под угрозу чувствительность анализа HCVcAg.Таким образом, отделение HCVcAg от антител к HCV может повысить чувствительность анализа HCVcAg, что требует тщательной проверки [25, 26].

Выводы

HCVcAg является чувствительным и специфичным прямым вирусным маркером активной репликации ВГС. Этот анализ проще с точки зрения логистики, экономически эффективен, прост в выполнении, воспроизводим и занимает меньше времени, чем анализ на РНК ВГС. В условиях ограниченных ресурсов HCVcAg можно использовать в качестве подтверждающего маркера вместо тестирования на РНК ВГС при выявлении активной инфекции ВГС у пациентов, находящихся на гемодиализе и пересаженных почках.В случаях с отрицательным результатом на HCVcAg последовательное тестирование с антителами против HCV с последующим определением РНК HCV может быть надежным и экономически эффективным подходом. Клиническая полезность этого анализа может быть с уверенностью распространена на пациентов, находящихся на гемодиализе и трансплантированных почках.

Благодарности

Авторы благодарят сотрудников лаборатории вирусных гепатитов и отделения нефрологии за неоценимую поддержку в данном исследовании.

Каталожные номера

  1. 1. Мохд Ханафия К., Гроегер Дж., Флаксман А.Д., Вирсма С.Т.Глобальная эпидемиология вирусной инфекции гепатита С: новые оценки возрастной серораспространенности антител к ВГС. Гепатология. 2013; 57: 1333–1342. пмид:23172780
  2. 2. Гудкин Д.А., Бибер Б., Джадул М., Мартин П., Канда Э., Писони Р.Л. Смертность, госпитализация и качество жизни среди пациентов с инфекцией гепатита С, находящихся на гемодиализе. Clin J Am Soc Нефрол CJASN. 2017; 12: 287–297. пмид:275
  3. 3. Моралес Дж. М., Фабрици Ф. Гепатит С и его влияние на трансплантацию почки.Нат Рев Нефрол. 2015; 11: 172–182. пмид:25643666
  4. 4. Агарвал С.К., Дэш С.К., Иршад М. Заражение вирусом гепатита С во время гемодиализа в Индии. J Assoc врачей Индии. 1999; 47: 1139–1143. пмид:11225211
  5. 5. Джасуджа С., Гупта А.К., Чоудри Р., Хер В., Аггарвал Д.К., Мишра А. и др. Распространенность и ассоциации виремии гепатита С у пациентов, находящихся на гемодиализе в больнице третичного уровня. Индийский Дж. Нефрол. 2009; 19: 62–67. пмид:20368926
  6. 6. Фабрици Ф., Месса П., Мартин П.Качество жизни, связанное со здоровьем, у диализных пациентов с ВГС-инфекцией. Int J Artif Organs. 2009; 32: 473–481. пмид:19844890
  7. 7. Фабризи Ф., Диксит В., Месса П. Влияние гепатита С на выживаемость диализных больных: связь со смертностью от сердечно-сосудистых заболеваний? J Вирусная гепатит. 2012; 19: 601–607. пмид:22863263
  8. 8. Крусадо Х.М., Каррера М., Торрас Х., Гриньо Х.М. Вирусная инфекция гепатита С и поражения клубочков de novo в почечных аллотрансплантатах. Am J Transplant Off J Am Soc Transplant Am Soc Transpl Surg.2001; 1: 171–178. пмид:12099366
  9. 9. Фабризи Ф., Месса П., Мартин П., Таккуше Б. Вирусная инфекция гепатита С и посттрансплантационный сахарный диабет у пациентов с трансплантацией почки: метаанализ. Int J Artif Organs. 2008; 31: 675–682. пмид:18825640
  10. 10. Ли Каволи Г., Загарриго С., Скиллачи О., Сервилло Ф., Тралонго А., Коглиторе М. и др. Тест на основной антиген вируса гепатита С при наблюдении за диализными пациентами. Лечение Hepat Res. 2012;2012. пмид:23304475
  11. 11.Эль-Шериф А., Эльбахрави А., Абоэльфотох А., Абделькарим М., Сайед Мохаммад А.Г., Абдалла А.М. и др. Высокий уровень ложноотрицательных результатов анти-ВГС среди египетских пациентов, находящихся на регулярном гемодиализе. Hemodial Int Int Symp Home Hemodial. 2012; 16: 420–427. пмид:22360424
  12. 12. Заболевание почек улучшает глобальные результаты. Клинические рекомендации KDIGO по профилактике, диагностике, оценке и лечению гепатита С при хроническом заболевании почек. 2008. pmid:18382440
  13. 13.Бруггманн П., Берг Т., Оврехус А.Л.Х., Морено К., Брандао Мелло К.Е., Рудо-Тораваль Ф. и др. Историческая эпидемиология вируса гепатита С (ВГС) в отдельных странах. J Вирусная гепатит. 2014;21 Приложение 1: 5–33. пмид:24713004
  14. 14. Mederacke I, Wedemeyer H, Ciesek S, Steinmann E, Raupach R, Wursthorn K, et al. Эффективность и клиническая полезность нового полностью автоматизированного количественного анализа основного антигена ВГС. J Clin Virol Off Publ Pan Am Soc Clin Virol. 2009; 46: 210–215. пмид:19766055
  15. 15.Танака Ю., Такаги К., Фуджихара Т., Кицуги К., Фудзивара К., Хирамацу К. и др. Высокая стабильность иммуноферментного анализа для определения корового антигена вируса гепатита С до и после инкубации при комнатной температуре. Hepatol Res Off J Jpn Soc Hepatol. 2003; 26: 261–267.
  16. 16. Daniel HD-J, David J, Raghuraman S, Gnanamony M, Chandy GM, Sridharan G и др. Сравнение трех различных методов генотипирования вируса гепатита С: 5′-NCR-ПЦР-ПДРФ, ПЦР, специфичной для основного типа, и секвенирование NS5b в больнице третичного уровня в Южной Индии.Джей Клин Лаб Анал. 2016;31. пмид:27580956
  17. 17. Ханука Н., Сикулер Э., Товбин Д., Мостославский М., Хаусман М., Оргель М. и др. Инфицирование вирусом гепатита С у пациентов с почечной недостаточностью при отсутствии антител к вирусу гепатита С. J Вирусная гепатит. 2002; 9: 141–145. пмид:11876797
  18. 18. Wasitthankasem R, Vichaiwattana P, Auphimai C, Siripon N, Klinfueng S, Tangkijvanich P, et al. Коровый антиген ВГС является альтернативным маркером РНК ВГС для оценки активной инфекции ВГС: значение для улучшения диагностических возможностей в эпоху доступных ПППД.Пир Дж. 2017;5: e4008. пмид:250
  19. 19. Heidrich B, Wiegand SB, Buggisch P, Hinrichsen H, Link R, Möller B, et al. Лечение наивных пациентов с хроническим гепатитом С генотипов 2 и 3 пегилированным интерфероном альфа и рибавирином в реальных условиях: актуальность для новой эры ПППД. ПЛОС ОДИН. 2014;9: e108751. пмид:25302676
  20. 20. Тилборг М. ван, Марзуки Ш.А., Вонг В.В.Л., Маан Р., Вермерен Дж., Маасуми Б. и др. Коровый антиген ВГС как альтернатива тестированию на РНК ВГС в эпоху противовирусных препаратов прямого действия: ретроспективный скрининг и диагностические когортные исследования.Ланцет Гастроэнтерол Гепатол. 2018;3: 856–864. пмид:30274834
  21. 21. Рекомендации EASL по лечению гепатита С 2016. J Hepatol. 2017; 66: 153–194. пмид:27667367
  22. 22. ВОЗ | Доклад о глобальном гепатите, 2017 г. Всемирная организация здравоохранения; Доступно: http://www.who.int/hepatitis/publications/global-hepatitis-report2017/en/.
  23. 23. Маккей И.М., Арден К.Е., Ницше А. ПЦР в реальном времени в вирусологии. Нуклеиновые Кислоты Res. 2002; 30: 1292–1305. пмид:11884626
  24. 24.Гарсия В.С., Гонсалес В.Д.Г., Марсипар И.С., Вега М.Р., Гульотта Л.М. Оптимизация и стандартизация реакции иммуноагглютинации для диагностики инфекции Trypanosoma cruzi на основе комплексов латекс-(рекомбинантный антиген). Trop Med Int Health TM IH. 2014; 19: 37–46. пмид:24219561
  25. 25. Лаперш С., Ле Маррек Н., Симон Н., Бушардо Ф., Дефер С., Манье-Монтрей М. и др. Новый тест на ядерный антиген ВГС, основанный на диссоциации иммунных комплексов: альтернатива молекулярной биологии в диагностике ранней инфекции ВГС.Трансфузия (Париж). 2003; 43: 958–962. пмид:12823757
  26. 26. Daniel HDJ, Vivekanandan P, Raghuraman S, Sridharan G, Chandy GM, Abraham P. Значение ядерного антигена вируса гепатита C (HCV) как альтернативного плазменного маркера активной инфекции HCV. Индийская J Med Microbiol. 2007; 25: 37–42. пмид:17377351

Основной антиген гепатита С: диагностика и мониторинг пациентов, инфицированных вирусом гепатита С

https://doi.org/10.1016/j.ijid.2019.09.022Получить права и содержание

Основные моменты

Уровни корового антигена вируса гепатита С (HCV-cAg) коррелируют с уровнями РНК ВГС.

HCV-cAg можно использовать в качестве суррогатного маркера инфекции HCV.

HCV-cAg упрощает блок-схему инфекции ВГС.

HCV-cAg способен выявить неэффективность противовирусного лечения прямого действия.

Резюме

Введение

Необходимы новые эффективные стратегии для оценки инфекции активного вируса гепатита С (ВГС).Цель этого исследования состояла в том, чтобы оценить способность корового антигена ВГС (HCV-cAg) в качестве маркера активной инфекции ВГС у впервые диагностированных пациентов, для мониторинга лечения и для выявления терапевтической неудачи.

Материалы и методы

Проспективное исследование было проведено в региональной эталонной больнице в Испании. HCV-cAg и вирусная нагрузка (РНК-HCV) были протестированы в образцах плазмы или сыворотки от трех групп пациентов: новый диагноз, мониторинг лечения и неэффективность лечения.Группу наблюдения за лечением тестировали в начале лечения, через 4 недели после начала лечения, в конце лечения и через 12 недель после завершения лечения. Тестирование корового антигена HCV Architect проводили для тестирования HCV-cAg, а вирусную нагрузку определяли количественно с помощью системы Cobas 6800.

Результаты

Всего было проанализировано 303 образца от 124 пациентов. Наблюдалась отличная корреляция между HCV-cAg и HCV-RNA ( R 2  = 0,932). Оптимальное значение отсечки составило 3 фмоль/л при анализе кривой рабочих характеристик ресивера, а площадь под кривой составила 0.987 (95% доверительный интервал 0,972–1,000). Чувствительность и специфичность HCV-cAg составляли 97% и 95% соответственно. Наиболее расходящиеся результаты наблюдались в группе наблюдения за лечением.

Выводы

HCV-cAg продемонстрировал хорошую чувствительность и специфичность в качестве маркера активной инфекции HCV, нового диагноза, выявления неэффективности противовирусной терапии и мониторинга лечения.

Ключевые слова

Вирус гепатита С

Коровый антиген ВГС

Мониторинг лечения

Альтернативные и новые инструменты

Гепатит С

Автор

Рекомендуемые статьи

© 2019 The s.Опубликовано Elsevier Ltd от имени Международного общества инфекционных заболеваний.

Систематический обзор и метаанализ

История вопроса и цели . Активная инфекция вирусом гепатита С (ВГС) основана на обнаружении РНК ВГС, которая эффективна, но требует больших затрат и необходимости найма обученного персонала. Этот систематический обзор и метаанализ нацелены на оценку диагностической точности тестирования на антиген к ВГС для выявления случаев ВГС и мониторинга противовирусного лечения, включая лечение ПППД. Методы . Исследования были выявлены с помощью поиска в PubMed, Lilacs и Scopus с 1990 г. по 31 марта 2020 г. Были включены когортные, перекрестные и рандомизированные контролируемые испытания. Два независимых рецензента извлекли данные и оценили качество с помощью адаптированного инструмента оценки качества исследований диагностической точности (QUADAS-2). Нашим основным результатом было определение точности обнаружения HCV Ag для диагностики, которую мы оценили с помощью метаанализа случайных эффектов. Результаты .Из 3062 найденных статей 54 соответствовали нашим критериям приемлемости. В исследованиях были описаны когорты из 20 стран, включая 14 286 человек с хроническим ВГС. Исследования по технологии ECLIA продемонстрировали самое высокое качество по сравнению с исследованиями, в которых использовался ELISA. Совокупная чувствительность и специфичность (95% ДИ) HCV Ag для выявления активной инфекции HCV составляли 98,82% (%; 99,30%) и 98,95% (%; 99,49%) соответственно. Было обнаружено высокое соответствие между тестированием на антиген ВГС и обнаружением РНК ВГС 89,7% и 95% для оценки противовирусного лечения. Выводы . Согласно нашим выводам, тестирование на антиген к ВГС может быть полезным для выявления активных случаев ВГС в районах с низким уровнем ресурсов. Для противовирусного лечения в конце лечения будет полезно тестирование на HCV Ag.

1. Введение

Диагностика инфекции, вызванной вирусом гепатита С (ВГС), в первую очередь проводится путем обнаружения антител к ВГС (анти-ВГС), хотя этот тест не позволяет отличить перенесенные и текущие инфекции. Для получения дополнительной информации требуется тестирование РНК ВГС.Выполнение последних затруднено из-за необходимости найма обученного персонала, использования специализированного оборудования, дороговизны реагентов [1, 2].

Ранняя диагностика ВГС важна для выявления острых и хронических случаев, а также для начала и мониторинга терапевтической стратегии. В связи с этим выявление инфекции в ее острой фазе очень важно для хорошего клинического прогноза [3–5]. С дополнительной точки зрения, учитывая, что большинство инфекций протекают бессимптомно и быстрая репликация вируса на этом этапе, ключевым моментом является быстрое и надежное выявление острых инфекций.Математическое моделирование выявило значимость острых бессимптомных инфекций для общей динамики ВГС [6].

Чтобы снизить затраты и улучшить доступ, в некоторых исследованиях для диагностики инфекции гепатита С использовали HCV Ag в сыворотке или плазме. HCV Ag появляется примерно через 2–3 недели после контакта с вирусом, почти одновременно с РНК HCV [7]. Тест на определение антигена ВГС (HCV Ag) использовался для диагностики ВГС в нескольких случаях, в основном среди групп риска, лиц с ослабленным иммунитетом и пациентов, находящихся на гемодиализе, из-за его низкой стоимости и более короткого времени, необходимого для получения его результатов [8, 9].Тест на HCV Ag также использовали для мониторинга противовирусного ответа на ПЭГ-интерферон и прямые противовирусные препараты (ПППД) [10–15].

Хотя некоторые исследования были направлены на оценку HCV-антигенов для диагностики ВГС и мониторинга противовирусной терапии, был проведен только один систематический обзор и метаанализ для оценки полезности HCV-антигенов для диагностики [16]. Насколько нам известно, не проводилось исследований, в которых одновременно оценивалась бы диагностическая точность HCV Ag для мониторинга противовирусной терапии. Мы провели систематический обзор и метаанализ, чтобы оценить диагностическую точность тестирования на антиген к ВГС для выявления случаев ВГС и мониторинга противовирусного лечения, включая лечение ПППД.

2. Материалы и методы

Мы провели систематический обзор диагностики и лечения ВГС с использованием теста HCV Ag в сравнении с обнаружением РНК ВГС в соответствии со стандартными рекомендациями PRISMA (http://www.prisma-statement.org/). Мета-анализ был проведен для оценки HCV Ag в качестве диагностического теста на инфекцию HCV.

2.1. Стратегия поиска

Исследования были идентифицированы с помощью поиска в PubMed, Lilacs и Scopus по следующим терминам: («гепатит С» ИЛИ «ВГС» ИЛИ «гепацивирус» ИЛИ «вирус гепатита С» И «HCVAg» ИЛИ «гепатит С» коровый антиген» ИЛИ «антиген HCV» И «диагностика» ИЛИ «обнаружение» ИЛИ «лабораторный метод» И («терапия» ИЛИ «лечение» ИЛИ «противовирусная терапия».»). Стратегия поиска выполнена с включением статей, опубликованных до 30 мая th , 2020.

2.2. Отбор исследований

Критерии включения и исключения были установлены перед тем, как приступить к поиску и обзору. Критерии включения были следующими: дизайн «случай-контроль», перекрестный, когортный или рандомизированный дизайн исследования; отчет об обнаружении HCV Ag в сыворотке, плазме или другом биологическом образце; отчет об обнаружении РНК ВГС; и обучение на английском, португальском или испанском языках.Критериями исключения были тип статьи, такой как редакционные комментарии, обзоры, письма-мнения и материалы конференций, а также исследования с недостаточными данными для оценки чувствительности и/или специфичности анализа.

Отбор статей для этого обзорного исследования основывался на тщательной оценке названия и аннотации после поиска по ключевым словам, и когда статья соответствовала критериям включения, проверялся полный текст и извлекались данные.

2.3. Извлечение данных

Два независимых исследователя извлекли данные, а затем перепроверили их.Когда данные были неясными или требовали предположений, для достижения консенсуса проводились консультации с двумя другими исследователями. Были извлечены значения TP, TN, FP и FN, соответствующие тесту, оцениваемому в каждой статье, и были составлены таблицы сопряженности и расчеты чувствительности и специфичности. О статьях, в которых не было этих необходимых данных, сообщалось явно; мы связались с соответствующим автором и запросили эти данные. Исследования, на которые не были получены запрошенные данные, были исключены.

2.4. Оценка качества

Мы использовали стандарт QUADAS-2 (Оценка качества исследований диагностической точности 2) для оценки качества и риска систематической ошибки во включенных исследованиях [17]. Этот метод был разработан для оценки диагностической точности исследований по 4 основным областям (отбор пациентов, индексный тест, эталонный стандарт, а также поток и время). Каждый домен оценивался в соответствии с риском систематической ошибки (низкий, высокий или неясный), а в первых трех доменах также учитывались опасения по поводу применимости (низкий, высокий или неясный).Два независимых рецензента оценили характеристики исследования и методологическое качество.

2.5. Статистический анализ

Чувствительность к HCV Ag представляла собой долю образцов с положительным тестом на РНК ВГС, которые также были положительными при тестировании на HCV Ag. Специфичность представляла собой долю образцов с отрицательным результатом тестирования на РНК ВГС, которые также были отрицательными при тестировании на ВГС Ag. Чувствительность и специфичность были первичными показателями результатов.

Мета-анализ для каждого теста на HCV Ag был проведен для расчета сводной статистики, включающей точечные оценки и их соответствующие 95% доверительные интервалы (95% ДИ) с помощью модели случайных эффектов (REM) и неоднородности исследования (статистика).Результаты одномерного анализа (включая все исследования) сравнивались с объединенными оценками двумерного анализа, где это было возможно. Описательный анализ был проведен для индексных тестов с менее чем четырьмя исследованиями и когда существенная неоднородность была очевидна при осмотре леса и сводных площадок.

Статистический анализ выполнен с использованием программы R 4.0.2 с общим пакетом метаанализа (версия пакета метаанализа 4.9-6).

3. Результаты
3.1. Выбор и характеристики исследований

Систематический обзор выявил 3062 цитирования, из которых 54 статьи соответствовали критериям включения после прочтения рефератов и полнотекстовых статей (рис. 1). В 54 статьях антигены к ВГС использовались для диагностики инфекции ВГС, и некоторые из этих исследований, поскольку в них анализировались разные группы, упоминаются более одного раза в Таблице 1. И 17 из этих 54 исследований также предоставили информацию о антигенах ВГС для лечения ВГС. Только одно исследование [18], представленное в таблице 2, имело информацию об использовании антигенов ВГС для лечения, а не для диагностики, поэтому это исследование не упоминается в таблице 1.


98,9%

год Автор (ссылка) Страна HCV-GT Исследование HCV Ag пробирной Золотой стандарт Образец Корреляция HCV AG для HCV РНК SE (%) SP (%)

ChemiLuminescence
2019 Bo Feng et al.[39] Китай Китай 1, 2, и 3 Проспекты Архитектор HCV AG (ABBOTT диагностика, Wiesbaden Германия) HCV РНК 782 NA Na 90,6% 96,6%
2019 Луцейко и др. [40] Польша 1 Перспективный Архитектор HCV Ag (Abbott Diagnostics, Висбаден, Германия) РНК ВГС 514
Сыворотка 90; в течение ; после 97.1% 99,6%
2019 Catlett et al. [41] Australia Na Cohort Eduction Архитектор HCV AG (ABBOTT диагностика) HCV РНК 186 Plasma / DBS (Плазма)
(DBS)
98,1-100% ( плазма), 90,7-92,5 (DBS) 100% (плазма/DBS)
2019 Perez-Garcia et al. [42] Испания 1A, 1b, 2, 3, и 4 Проспект Архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) HCV РНК 124 Сыворотка / плазма 97% 95%
2019 Fan et al.[36] Китай 1b Ретроспектива Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics, Висбаден, Германия) Тест COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HCV, версия 2.0 (Roche Molecular Systems, США 790, Калифорния 8 8, 83 90, CA 8, 8 3 90, Калифорния 8, 83) 135 Сыворотка 80,2% 89,7%
2019 Xiang et al. [43] Китай Китай 1b, 2a, 3A, 3b, 6a, 1b / 3b перспективы архитектор HCV AG (ABBOTT диагностика) (диагностика Roche) 106 100% NA
2018 van Tilborg et al.[44] Канада 1a, 1b, 1 (не указано), 2, 3, 4, 5, 6 Ретроспектива Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) Roche) 10006 Сыворотка 99,0% NA
2018 Nguyen et. [24] Вьетнам NA Проспект Архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) Cobas Ampliprep / Cobas Taqman V2 (Roche) 104 DBS 87.2% 100%
2018 Adland et al. [45] Великобритания 1, 3 1, 3 Retrospect архитектор HCV AG (ABBOTT диагностика) Abbott Realtime HCV ASSAY (ABBOTT MOLECULEL, DES PLARKES, IL) NA 97.7 % NA
2018 Lamoury et al. [28] Австралия 1a, 1b, 2, 3a, 6 Перспективный Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) Тест COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HCV v2.0 (Roche Diagnostics) 120 120 Plasma DBS 91,6% плазма 92,9% DBS 100% Plasma 100% плазма и 96,1% NO DBS
2018 Chevaliez et al. [14] Na Na 1b 1b Retrospect архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) Roche High-Pure System / Cobas Taqman HCV Test V2.0 (Roche) 631 Plasma 99.80 % NA
2017 Wasitthankasem et al.[29] Таиланд Таиланд 1A, 1b, 3A, 3b, 6c, 6f, 6i, 3b, 6c, 6f, 6i, 6n 90c, 6f трансверсальный архитектор HCV AG (ABBOTT диагностика) ABBott Realtime HCV (Abbott Molecular) 290 сыворотка 100% 97,1%
2017 Mohamed et al. [27] Танзания 1a, 4a Перспективный Архитектор HCV Ag (Abbott Diagnostics) Тест COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HCV v2.0 (Roche Molecular) 153 Сыворотка / DBS 99,1% сыворотка и 76,7% DBS 94,4% сыворотки и 97,3% DBS
2017 Lucejko et al. [46] Европа 1a/1b/3a/4-2/29/0/2 Longitudinal Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) Тест COBAS AmpliPrep HCV (Roche Molecular Systems, Pleasanton) США) 33 Сыворотка/плазма 100% NA
2017 Talal et al.[47] EUA EUA 1A, 1B, 2, 3, 4 Проспекты Архитектор HCV AG (Abbott диагностика) Cobas Taqman Assay (Roche Diagnostics) 109 Serum 97,9% 100%
2017 Rockstroh et at [15]. Na Na 1 1 Retrospect Архитектор HCV AG (ABBOTT Diagnostics) Roche High-Pure / Cobas Taqman HCV Test V2.0 (Roche Diagnostics) 737 Plasma 99.05% 100%
2017 Loggi et al. [48] ​​ Италия 1a, 1b, 1 (подтип недоступен), 2, 3, 4 Продольный анализ Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) диагностика) 96 Сыворотка 100% НП
2017 Arboledas et al. [49] Испания 1A, 1b, 2, 3, 4 Проспект Архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) Cobas Ampliprep / Cobas Taqman HCV Анализ (Roche Diagnostics) 262 Plasma 98.7% NA
2017 Arboledas et al. [49] ИСПАНИЯ 1A, 1b, 2, 3, 4 Retrospect архитектор HCV AG (ABBOTT диагностика) Cobas Ampliprep / Cobas Taqman HCV Assay (Roche Diagnostics) 132 Plasma 98,5% NA
2017 Lamoury et al. [11] Австралия 1, 2, 3 Потенциальные Архитектор HCV Ag (Abbott Diagnostics) Тест COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HCV v2.0 (Roche Diagnostics) 92 Плазма 94% NA
2017 Alonso et al. [50] Испания 1A, 1b, 2c, 3, 4 Retrospect архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) Cobas Ampliprep / Cobas Taqman HCV Assay (Roche Diagnostics) Serum нет данных 96,2% 100%
2016 Aghemo et al.[13] Италия Italy 1, 2, 3, 4, 5 Проспекты Архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) ABBOTT Realtime HCV (Abbott Molecular) 58 Serum NA % NA
2016 Pischke et al. [51] Германия 1, 2, 3, 4 Ретроспективное продольное исследование Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) Тест COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HCV v2.0 (Roche Diagnostics) 20 НП НП 100% НП
2016 Kim et al. [52] Южная Корея 1, 2 Retrossucty Retherospect Архитектор HCV AG (ABBOTT диагностика) Cobas Ampliprep / Cobas Taqman HCV Assay (Roche Diagnostics) 92 Serum NA
2015 Kamal et al. [53] Египет 4 Проспективное продольное исследование Архитектор HCV Ag (Abbott Diagnostics) COBAS Amplicor, версия 2.0 (Roche Molecular) 410 Сыворотка 99,5% 96,8%
2015 [54] Италия 1A, 1b 1A, 1b Проспект Архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) Abbott Realtime HCV (Abbott Molecular) 23 Плазма / сыворотка день 0: день 1: 4 : 100% NA
2014 Chevaliez et al.[55] NA 1, 2, 3a, 4, 5a, 6 NA Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HCV test v2.0 (Roche Diagnostics v2.0) 594 NA 100% 100%
2014 Garbuglia et al. [56] Италия 1a, 1b, 1c, 1a/b, 2a, 2c/b, 3a, 4a 292 Плазма 90.4% 87,5%
2014 Heidrich et al. [57] Германия Германия 1n, 2n, 3n 1n, 2n, 3n Проспект Архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) Cobas Taqman Assay V1.0 (Roche Diagnostics) 596 Serum 92,9% 92,9% 92,9% 98,9%
2014 Florea et al. [35] Romania Na Na Retrospect Архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) Cobas Taqman Assay (Roche Diagnostics) 76 Serum 82.4% 100%
2014 Лонг и др. [26] China 1B, 1A Retrospect Longitumnal Архитектор HCV AG (ABBOTT Diagnostics) ABBOTT Realtime HCV (Abbott Molecular) 227 Plasma HCV:
HCV / ВИЧ-1:
100% NA
2013 Hadziyannis et al. [58] Греция 1, 2, 3, 4 Нет данных Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) COBAS Amplicor v2.0 (Roche Molecular) 89 Сыворотка 93,2% NA
2013 Tedder et al. [10] UK UK 1A, 1b, 2, 3 Retrospect Abbott архитектор HCV (Abbott Diagnostics) RT-PCR Taqman In-House 54 Plasma 90,7% NA
2012 Murayama et al. [22] Япония 1A, 1b, 2a, 2b Trance Architer Архитектор HCV AG (ABBOTT диагностика) Cobas Ampliprep / Cobas Taqman (Roche Diagnostics) и Abbott Realtime HCV (Abbott Molecular) 80788 80788 Плазма 100% NA
2012 Murayama et al.[22] Япония 1a, 1b, 2a, 2b Transversal Lumipulse Ortho HCV Ag (Fujirebio, Токио, Япония) COBAS AbpliPrep/COBAS MobotTimeAbbotTaqMan (Roche Diagnostics) и 80 Плазма 95% NA
2012 Vermehren et al. [59] Na , 1b 1A, 1b , 1b , 1b Проспекты Архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) ABBOTT Realtime HCV (Abbott Molecular) 160 Serum (Versant HCV РНК качественный анализ Abbott RealTime HCV assay) 99.3% NA
2012 Mederacke et al. Германия Германия 1A, 3A Transversal Архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) Cobas Taqman Assay (Roche Diagnostics) 238 Serum / Plasma ВИЧ / ВГС HCV / HBV ВГС/ВИЧ: 95,7% ВГС/ВГВ: 100% ВГС/ВИЧ:1100%
ВГС/ВГВ:9100%
2011 Kesli et al. [60] Турция 1B 1b Retrospect Архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) Вирусная РНК РНК (Циаген) 212 Serum 96.3% 100%
2011 Moscato et al. [30] Италия 1A, 1B, 2A, 2C, 3A, 4 Retrospect Architest Архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) Cobas Taqman Assay (Roche Diagnostics) 32 Serum Группа A: 97,1% группа B: 100% Группа A: 100% группа B: 100%
2010 Miedouge et al. [61] Франция 1, 1a, 1b, 1d, 2, 2a, 2b, 2c, 2k, 2i, 2r, 2x, 3a, 4a, 4c, 4d, 4r, 5a, 6 Когорта Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) Анализ COBAS TaqMan (Roche Diagnostics) 3009 Сыворотка 100% 99.2%
2010 Росс и др. [62] Германия 1A, 1B, 2A, 3A, 4A, 5A E 6F Проспект Архитектор HCV AG (ABBOTT диагностика) Versan HCV РНК V3.0 (диагностика Siemens) 394 394 Сыворотка 100% 100%
2005 Masahiko Takahashi et al. [32] Япония NA Перспективные Lumipulse Ortho HCV Ag (Ortho Clinical Diagnostics) COBAS Amplicor версия 2.0 (Roche Diagnostics) 44 Serum 90,9% Na
ELISA
2017 Wang et al. [23] Китай Na Na ELISA HCV AG (Laibo Biotechnology) ABBOTT Realtime HCV (ABBOTT Molecular) 333 88,9% 100%
2012 Мураяма и др.[22] Япония 1a, 1b, 2a, 2b Трансверсальный ELISA-Ag (Ortho Clinical Diagnostics, Токио, Япония) COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan (Roche Real Diagnostics) и AbbottAble ) 80 Плазма 100% NA
2012 Murayama et al. [22] Япония 1a, 1b, 2a, 2b Поперечное Ortho HCV Ag IRMA (Ortho Clinical Diagnostics, Токио, Япония ) 80 Плазма 100% NA
2012 Murayama et al.[22] Япония 1a, 1b, 2a, 2b Transversal Lumispot Eiken HCV Ag (Eiken Chemical, Токио, Япония) COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan (Roche Diagnostics) и Abbot Diagnostics ) 80 Плазма 100% NA
2008 Medhi et al. [63] Индия NA Поперечное Orthotrak-C™ (Ortho Clinical Diagnostics) (Ortho HCV 3.0) QIAAMP Вирусная РНК Миникит (Циаген) В доме RT-ПЦР и ПЦР в реальном времени 250 NA 96% 96% 100%
2006 Reddy et al. [34] Индия Na Retrospect Ortho HCV AG (Ortho клиническая диагностика) Cobas Amplippor HCV Test V2.0 (Roche) 111 Na 60% 83 %
2005 Bouzgarou et al.[64] Тунис 1a, 1b, 2c, 3a, 4c/4d Ретроспектива Orthotrak-C™ (Ortho Clinical Diagnostics) Внутренняя ОТ-ПЦР и COBAS Amplicor Monitor v2.0 версия) 76 Сыворотка NA 84% 89%
2005 Gonzalez et. [21] Испания 1 Когорта Orthotrak-C™ (Ortho Clinical Diagnostics) Тест COBAS Amplicor HCV v2.0 (Roche) и COBAS Amplicor HCV Monitor v2.0; Roche Diagnostics (RNA) 58 Сыворотка 42,5% 100%
2005 Laperche et al. [7] Франция 1, 1a, 1b, 2a/c, 3a, 4a, 4c/d Cohort Orthotrak-C™ (Ortho Clinical Diagnostics) COBAS Amplicor HCV test v2.0 ) 35 Плазма Нет данных Панель 1 : 100%
Панель 2: 96.3%
NA
2005 Massaguer et al. [65] ИСПАНИЯ 1, 2, 3, 4 Cohort Orthotrak-C ™ (Ortho клиническая диагностика) Cobas Amppleor HCV тест V2.0 (Roche) 116 92,1% 100%
2005 Fabrizi et al. [66] Италия Нет данных Перспективные Orthotrak-C™ (Ortho Clinical Diagnostics) Тест COBAS Amplicor HCV v2.0 (Roche) 292 Сыворотка 92,7% 97,4%
2004 Soffalred. [31] Италия 1a, 1b, 2a/c, 3a, 4c/d Потенциально Orthotrak-C™ (Ortho Clinical Diagnostics) Versant HCV RNA v3.0 (Siemens Diagnostics) 1 Сыворотка 94% NA
2004 Lorenzo et al. [67] Испания 1a, 1b, 2a/c, 3a Cohort Orthotrak-C™ (Ortho Clinical Diagnostics) COBAS Amplicor HCV test v2.0 (Roche) 16 Сыворотка NA 87,6% 40%
2004 Schütal. [20] Германия Na Проспект Orthotrak-C ™ (Ortho клиническая диагностика) в реальном времени PCR 23 Serum 98% 96,2%
2003 Танака и др. [68] Япония 1b, 2a, 2b Ретроспектива Внутренняя Тест COBAS Amplicor HCV v1.0 (roche) 207 Serum 97% 100%
Immunohistochмиимия
1997 Ballardini et al. [19] Италия 1A, 1b, 2,3A, 4A Retrospect в доме RT-PCR в доме 31 ткани печени Na 80,6% NA

Условные обозначения: нет данных: нет данных; ГТ: генотип; SE: чувствительность; СП: специфичность; В: версия; БГ: оба генотипа; r и rho: коэффициент корреляции; r2: коэффициент детерминации.
8

год Автор Страна HCV Ag пробирной Лечение Чувствительность Специфичность Concordance

2019 Бо Фэн и др. [39] Китай China Архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) 782 PEG-IFN- α и Ribavirin Na Na Na
2020 Lin et al.[18] Архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) 110 110 ParitaBrevir / Ritonavir, Ombitasvir E Dasabuvir Na Na Базовый уровень: 97.3, неделя 2: 54.8, неделя 4: 63.9, конец: 89.7 , после Н12: 98,6
2019 Fan et al. [36] Китай Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) 135 (PEG-INF- α ) и RBV Неделя 12: 96,5% 85% NA
2018 van Tilborg et al. [44] Канада Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) 10.006 Лечение противовирусными препаратами прямого действия (исключая TVR и BOC) с PEG-INF, RBV или без них Неделя 4: 34,6% Окончание лечения 903 : 50%
Последующая 12-я неделя: 98,2%
Последующая 24-я неделя: 100%
4-я неделя: 86,6%
Конец лечения: 97,5%
Последующая 12-я неделя: 97,7%
Последующая 24-я неделя : 100%
NA
2018 Chevaliez et al.[14] NA Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) 631 PRV, усиленный ритонавиром и OBV в одной таблетке в сочетании с DSV Неделя 4: 71,0%
Неделя 12: : 87.5%
Неделя 4: 95,3%
Неделя 12: 95,3%
Неделя 12: 97,4%
Неделя отложений 12: 98.9%
Конкретные: 99,84%
Неделя 4: 97.05%
Неделя 12: 98,8%
Неделя 12: 99%
Неделя 12: 99%
2017 Луцейко и др.[46] Европа Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) 33 OBV/PRV/r±DSV±RBV и LDV/SOF День 7: 62,5%
День 7 9 78% 9-я неделя: 80% : 44,4%
Неделя 4: 81,8%
Конец лечения: 100%
НП
2017 [15] Na AR Architect HCV AG (Abbott Diagnostics) 737 737 RTV-усиленный PRV и OLL с DSV CODMINED с или без RBV Na Na Объединение между HCV AG и HCV РНК в неделю 4 (96.46%) и через неделю после лечения (99,75%)
2017 Loggi et al. [48] ​​ Италия Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) 96 3D±RBV; СОФ±РБВ; СОФ+СМВ±РБВ; SOF+LDV±RBV; SOF+DCV; SOF+PEG-IFN- α +RBV Неделя 2: 42,8% Неделя 4: 31,25% Неделя 8 и 12: 0% Неделя 2: 84,2%
Неделя 4: 78,4%
Неделя 8: 83,1% 900 Неделя 12: 90,4%
Неделя 16 и 24: 100%
NA
2017 Arboledas et al.[49] Испания Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) 262 2D+RBV; 3D±RBV; SOF+DAC±RBV; SOF+LED±RBV; SOF+SIM±RBV; СОФ+ПЭГ+РБВ; СОФ+РБВ; SIM+DAC+RBV NA NA Неделя 1: 56,7%
Неделя 4: 83%
Конец лечения: 93,5%
2017 Laalmoury. [11] Australia Australia Australia Australia HCV AG (Abbott Diagnostics) 92 PEG-INF- α -2b и RBV Лечение: 31%
Проекта: 100%
Конец лечения: 56%
УВО12/24 : 100% чувствительность и специфичность
Лечение: 98%
После лечения: 100%
Конец лечения: 100%[50]
Испания Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) 28 Viekirax+Exviera/Harvoni/Viekirax+Exviera+RBV/Harvoni+RBV/Sovaldi/SOF+DCV/SOF+SMV+RBV

3

3 RBV
Окончание лечения: 92,8% NA
2016 Aghemo et al. [13] Италия Architect HCV Ag (Abbott Diagnostics) 58 PRV/RTV/OBV+DSV±RBV или SOF+SMV±RBV/SOF+RBV/PEG-IFN ассоциированный SOF+RBV/SOF+ RBV или SOF+SMV±RBV NA NA Конкордантность РНК HCV и HCV Ag: неделя 2: 40%; 4 неделя: 55%; в конце лечения, как и ожидалось, согласие между тестами повысилось до 95%.
2016 Kim et al. [52] Южная Корея Архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) 92 PEG-IFN- α -2A неделя 4: 31,3% Неделя 4: 100% NA
2015 Камаль и др. [53] Egypt Egypt Архитектор HCV AG (Abbott Diagnostics) 410 PEG-IFN- α 2A и RBV Неделя 4: 100%
Неделя 12: 100%
Неделя 4: 97.5%
Неделя 12: 99,3%
NA
2014 Florea et al. [35] Romania Romania архитектор HCV AG (ABBOTT диагностика) 1782 IFN + RBV 4 недели: 77,9%
12 недели: 52,1%
24 недели: 48,1%
48 недель: 88,2%
72 Неделя: 96,1%
4 недели: 100%
12 недели: 100%
12 недели: 100%
24 Недели: 100%
48 недель: 100%
72 Неделя: 100%
Na
2005 González et al.[21] Испания Orthotrak-C ™ (Ortho клиническая диагностика) 58 IFN- α 2 α + RBV Неделя 4: 42,5%
Неделя 12: 10,5%
24 недели после конец: 88,9%
EOT неделя 4: 100%
EOT неделя 12: 100%
24 недели после окончания: 100%
NA
2005 Masahiko [32] Япония Lumipulse Ortho HCV Ag (Ortho Clinical Diagnostics) 44 ПЕГ-ИФН- α -2a+RBV Неделя 7: 76.9%
День 15: 74,1%
NA Неделя 7: 79,5%; : 75%
2004 Soffredini et al. [31] Италия Orthotrak-C ™ (Ortho клиническая диагностика) 111 IFN + RBV неделя 12: 70,5%
6 месяцев после терапии: 94,2%
Na Na

Условные обозначения: PEG: peliguiado; ВОС: боцепревир; ТВР: телапревир; DCV: дакластавир; SOF: софосбувир; ДАК: даклавир; DSV: дасабувир; ЛДВ: ледипасвир; OBV: омбитасвир; PRV: паритапревир; РБВ: рибавирин; RTV: ритонавир; ИФН: интерферон; SIM/SMV: симепревир; НП: недоступно.

Среди 54 исследований, в которых оценивалось обнаружение антигена ВГС для диагностики ВГС, большинство работ (1), в которых использовалась методология электрохемилюминесценции, были высокого качества. В целом все анализы были качественными, как EIA, так и ECLIA.

Основные характеристики включенных сюда исследований представлены в таблицах 1 и 2. Статьи из 20 стран были опубликованы с 1997 по 2019 год. статьи, в которых антиген к ВГС использовался для мониторинга противовирусного лечения.В общей сложности 49 исследований предоставили информацию о генотипах ВГС у инфицированных лиц.

3.2. Оценка качества

Оценка общего риска систематической ошибки для включенных исследований оценивалась с использованием QUADAS-2 и показателей качества этих исследований (дополнительный материал, рисунки S1, S2, S3). Общее качество исследований было высоким, когда отчеты с использованием электрохимиолюминесценции имели наилучшее качество. Согласно рисунку S2, риск систематической ошибки был выше в тестовом индексе.

Это также было продемонстрировано при индивидуальном анализе исследований (рис. S3).Качество ИФА и иммуногистохимии в качестве индексного теста оказалось ниже [19–23]. Кроме того, в двух из трех исследований оценивались образцы DBS [11, 24].

3.3. Антиген HCV для диагностики активной инфекции HCV

В этот обзор были включены различные типы исследований, такие как: продольные, поперечные, проспективные, ретроспективные и когортные. В одно исследование были включены пациенты с коинфекцией ВГС/ВГВ, а в два исследования — пациенты с коинфекцией ВГС/ВИЧ [25, 26].

Четыре исследования продемонстрировали значения чувствительности ниже 87,2%, но в трех из этих исследований для тестирования использовались образцы сухих капель крови (DBS) [24, 27, 28]. В общей сложности 15 исследований использовали ELISA в качестве метода обнаружения, и только в трех из них сообщалось о %. Только в одном исследовании для выявления HCV Ag использовали метод иммуногистохимии [19]. Таблица 3 демонстрирует чувствительность (SE), специфичность (SP), положительную прогностическую ценность (PPV), отрицательную прогностическую ценность (NPV), правильную классификацию (точность) и Каппа для исследований.

98,9 81,7 98.9 93.9 97.0 [62] 94.8 [67]

Статья SE SP PPV NPV Точность Kappa

Lamoury, 2018 [28] 97,7 100.0 100.0 94.1 98.3 98.3 97.1 97.1
Lamoury, 2018 [28] 88,6 96.9 98.7 75.6 90,8 89,7
Adland, 2018 [45] 94,5 100,0 100,0 90,5 96,4 95,3
Нгуен, 2018 [24] 87,2 100.0 100.0 57.7 89.1 87,8 87.8
[29] [29] 97.1 97,1 99,1 99.0 99.3 98.0
Алонсо, 2017 [50] 96,4 100,0 100,0 96,6 98,2 97,2
Mohamed, 2017 [27] 99,1 94,4 98,3 97,1 98,0 96,7
Mohamed, 2017 [27] 76,7 97,3 57,1 80,6
Талал, 2017 [47] 97.9 100,0 100,0 98,4 99,1 98,1
Rockstroh, 2017 [15] 99,5 100,0 100,0 99,4 99,7 98,7
Chevaliez, 2014 [14] 100.0 100.0 100.0 100.0 100.0 100,0 98.9 98.9
Garbuglia, 2014 [56] 91.4 100.0 91,4 89,6
Гейдрих, 2014 [57] 92,6 98,9 99,6 83,9 94,4 93,2
Mederacke, 2012 [25] 95.7 100.0 100.0 25.0788 250 95.8 93.9 93.9 93.9
Mederackke, 2012 [25] [25] 90.9 94.6 94,6 96.5 95,4
Mederacke, 2012 [25] 100,0 100,0 100,0 100,0 100,0 98,9
Yuksel, 2011 [69] 94,3 97,9 99,1 87,0 95,3 94,2
Kesli, 2011 [60] 96,3 100,0 100,0 89,7 97,2 95,9
москато, 2011 [30] 100.0 97,1 97,1 95,2
Мускат, 2011 [30] 100,0 100,0 100,0 100,0 100,0 98,4
Miedouge, 2010 [61] 98.9 100.0 100.0 88.9 89.9 99.9 99.0
[62] 100,0 100,0 100,0 100,0 100.0 100,0 98,8
Medhi, 2008 [63] 96,4 100,0 100,0 86,7 97,1 95,7
Reddy, 2006 [34] 14,3 97,8 60,0 83,0 82,0 80,4
Bouzgarrou, 2005 [64] 83,6 88,9 99,0 29,6 84,0 82,5
Гонсалес, 2005 [21 ] 68.9 100,0 100,0 74,7 83,8 82,8
Massaguer, 2005 [65] 92,1 100,0 100,0 65,5 93,1 91,7
Фабрици, 2005 [66] 92.7 974 974 94.7 96,5 96,5 95.9 95.9
[67] 87.7 95.9 16.7 84.9 83.2
Schuttler, 2004 [20] 98.0 96.2 99.0 92.7 97.6 96.3
Tanaka, 2000 [68] 97.3 100.0 100.0 98.5 99.0 98.0
Lucejko, 2000 [40] 97.1 99.6 99.6 96.7 98.2 97,2
Кэтлетт, 2019 [41] 100,0 99,2 98,1 100,0 99,5 98,3
Кэтлетт, 2019 [41] 100,0 96,4 90,7 100,0 97,3 96,1
Гарсиа, 2019 [42] 97,7 97,7 96,9 98,3 97,7 96,7
Mederacke, 2012 [25] 98.3 96,6 98,9 95,0 97,9 96,6
Фэн, 2020 [39] 97,0 97,6 92,4 99,1 97,5 96,2
Лин, 2020 [18] 97,3 98,1 99,1 94,5 97,5 96,4
Среднее значение 95,3 94,0

Большинство исследований, включенных генотипы 1a и 1b (29/54), а также наблюдалась ложноотрицательная корреляция между обнаружением антигенов ВГС и генотипом 3 [29] и высокая согласованность между антигенами ВГС и результатами РНК ВГС среди исследований, включавших пациентов с ВГС, коинфицированных ВГВ и ВИЧ.Москато и др. [30] продемонстрировали корреляцию между истинно положительными результатами и генотипом 1b.

Всего в одномерные сводные оценки чувствительности и специфичности было включено 23 исследования. Совокупная чувствительность и специфичность с 95% ДИ составляли 98,82% (%; 99,30%) и 98,95% (%; 99,49%) соответственно (рис. 2). Неоднородность визуально оценивается на рисунках 2(а) и 2(б). Исследования кажутся однородными в целом, где 65% () для специфичности и 50% () для оценок чувствительности.

3.4. Антиген ВГС для мониторинга противовирусной терапии

Всего в 18 исследованиях для оценки противовирусного лечения использовалось тестирование антигена ВГС (таблица 3). В большинстве исследований (15/18) использовалась методика ECLIA, и только в трех из них применялся ИФА [21, 31, 32]. Для большинства исследований не представлялось возможным рассчитать чувствительность и специфичность. В девяти исследованиях в качестве противовирусного лечения использовали ПЕГ-ИФН/рибавирин. Девять из 18 исследований использовали ПППД для противовирусного лечения. Кроме того, только 5 сообщили о совпадении между HCV и РНК HCV.Что касается полезности тестирования и терапии антигена ВГС, пять исследований продемонстрировали результаты антигена ВГС через 4 недели и в конце лечения, и только в двух оценивался УВО. В конце лечения чувствительность варьировала от 50 до 100%, а специфичность — от 92,8% до 100%. На 4-й неделе после начала лечения чувствительность теста на HCV Ag варьировала от 31,25 до 77,9%. Было обнаружено высокое соответствие между тестированием на HCV Ag и обнаружением РНК HCV после завершения лечения. Эти пять исследований обнаружили согласие с 89.от 7% до 99,75%.

4. Обсуждение

Этот обзор направлен на оценку теста на обнаружение антигена ВГС в качестве альтернативы РНК ВГС для диагностики активной инфекции ВГС и мониторинга противовирусного лечения. Мы пришли к выводу, что тестирование на HCV Ag может быть альтернативой тесту на РНК HCV для молекулярной диагностики инфекции HCV.

Тестирование на HCV Ag продемонстрировало совокупную чувствительность 98,82% (%; 99,30%) и специфичность 98,95% (%; 99,49%). Технология ECLIA показала более высокие значения чувствительности и специфичности для обнаружения HCV Ag для выявления активных случаев HCV.Однако этот метод более широко используется для HCV Ag по сравнению с методом ELISA. Галли и др. [33] показали, что методика ECLIA, специально разработанная Abbott Diagnostics Architect HCV Ag, которая является наиболее часто используемым сегодня тестом, выявляет до 0,06 мкг/мл HCV Ag, тогда как более старые тесты ELISA, такие как антиген Ortho Core, выявляют только образцы с 10 мкг/мл антигена. /мл или более HCV Ag. Редди и др. [34] привлекли только хронические почки и обнаружили, что чувствительность обнаружения HCV Ag в тестах ELISA составляет всего 60%. Важно отметить, что это низкое значение также может быть связано с клиническим состоянием этих людей.Однако оценить эту информацию в данном обзоре не представлялось возможным из-за недостатка информации по этой теме.

Образцы DBS использовались в качестве биологического образца для обнаружения Ag ВГС с использованием методологии ECLIA и показали % [24, 27, 28] по сравнению с обнаружением Ag ВГС в сыворотке или плазме. Из-за этого использование образцов DBS также необходимо дополнительно изучить, чтобы облегчить диагностику путем обнаружения HCV Ag. Исследования, в которых использовалась сыворотка или плазма с методологией ECLIA для диагностики HCV Ag, показали чувствительность между 90.4 и 100% по сравнению с обнаружением РНК ВГС. Два исследования продемонстрировали более низкую чувствительность. Флореа и др. [35] обнаружили чувствительность 82,4%, но тест продемонстрировал хорошие результаты у пациентов с  МЕ/мл. Фан и др. [36] установили чувствительность 80,2%, но причины такого низкого значения установить не удалось.

В этом исследовании также проанализировано несколько исследований, в которых анализировалось использование антигенов к ВГС для мониторинга лечения ВГС с использованием различных препаратов и в разное время лечения. В большинстве этих исследований использовалась методика ECLIA.Гонсалес и др. [21] предполагают, что ИФА для выявления HCV Ag не используется для контроля окончания лечения или УВО из-за низкой чувствительности теста, представленного в исследовании (42,5%). В нескольких исследованиях оценивалась согласованность между тестированием на антиген ВГС и обнаружением РНК ВГС для оценки противовирусного лечения, но в этих исследованиях были обнаружены значения от 89,7% до 95%, демонстрирующие возможность тестирования на антиген ВГС вместо обнаружения РНК ВГС в районах с низким уровнем ресурсов. Также было отмечено, что тестирование на HCV Ag имеет высокую чувствительность в конце лечения по сравнению с 4 неделями после начала лечения.Фан и др. [36] предположили, что HCV Ag может быть более чувствительным предиктором рецидива, чем РНК HCV после противовирусного лечения.

Большинство исследований, в которых оценивалась точность теста HCV Ag для диагностики ВГС, проводились в регионах с высокой распространенностью ВГС, и это влияет на эффективность анализа для выявления острых случаев ВГС. В настоящем исследовании было отмечено, что чувствительность не всегда была 100% из-за различий в распространенности или изучаемой популяции. В этих случаях, таких как гемодиализ и у людей, живущих с ВИЧ, должно быть интересно провести РНК ВГС в случаях с отрицательным результатом на ВГС, чтобы исключить ложноотрицательные случаи [37, 38].Эта ситуация может увеличить затраты, но она остается недорогой стратегией по сравнению с тестированием РНК ВГС у всех субъектов. Экономический анализ тестирования на антиген к ВГС должен иметь значение в условиях высокого уровня ВГС. Если краткосрочные и долгосрочные последствия ложноположительных (FP) и ложноотрицательных (FN) тестов на HCV Ag меньше, чем дополнительные затраты на использование РНК HCV, использование теста на HCV Ag будет эффективным.

Это исследование имеет некоторые ограничения, такие как оценка коинфекции ВИЧ или ВГВ и генотипа ВГС в результатах метаанализа.Кроме того, было невозможно определить чувствительность и специфичность тестирования антигена ВГС для оценки противовирусного лечения из-за отсутствия данных, и в нескольких исследованиях анализировался УВО после лечения ПППД.

Мы пришли к выводу, что обнаружение HCV Ag с использованием метода ECLIA, особенно в образцах сыворотки, полезно для выявления активных случаев HCV. Кроме того, этот анализ показал хорошие результаты для оценки противовирусного ответа, особенно на терапию ПЕГ-ИФН. Анализ HCV Ag может быть важным инструментом для увеличения диагностики ВГС в районах с низким уровнем ресурсов.

Доступность данных

Все данные доступны в рукописи и дополнительных материалах.

Раскрытие информации

Спонсоры не участвовали в разработке исследования и сборе, анализе и интерпретации данных, а также в написании рукописи.

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что в этом разделе у них нет конкурирующих интересов.

Благодарности

Это исследование было поддержано Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ), Бразильский национальный советник по технологическому и научному развитию (CNPq) и Фонд Освальдо Круза (FIOCRUZ).