28Дек

Антитела к тиреоидной: АТ-ТПО (антитела к тиреоидной пероксидазе, микросомальные антитела, антитела к микросомальному антигену)

Содержание

Сдать анализ на антитела к тиреоидной пероксидазе в СПб

ТипВ центреНа домуСамостоятельно
Сыворотка крови

Срок исполнения: 2 раб.дней

Одно из аутоиммунных нарушений у человека – реакция иммунитета против фермента щитовидной железы, которая определяется по наличию в крови антител к тиреоидной пероксидазе. При этом человек страдает от недостатка гормонов Т4 и Т3 – они не могут синтезироваться без присоединения активного йода к тиреоглобулину, за которое отвечает данный фермент. Повышенное содержание АТ-ТПО может наблюдаться при нескольких заболеваниях, которые сопровождаются агрессией иммунной системой против собственных тканей организма. Поражения щитовидной железы нередко сочетаются с другими аутоиммунными нарушениями – гепатитом, первичным гипокортицизмом, ревматоидным артритом и другими.

Антитела к АТ-ТПО – для чего сдают анализ

Выделение антител к тиреоидной пероксидазе происходит уже на ранних стадиях таких патологий, как тиреоидит Хашимото или болезнь Грейвса. Если они обнаруживаются в период беременности, в будущем у женщины может развиться послеродовой тиреоидит, у ребенка также повышен риск проблем со здоровьем.

Иногда анализ крови на АТ-ТПО показывает наличие антител даже у здоровых людей. Причины этого явления пока неизвестны. Предполагают, что такой результат соответствует физиологической норме, либо является предвестником развития заболеваний щитовидной железы, либо это последствие ошибок при обработке биоматериала.

Показаниями для этого обследования являются:

  1. Симптомы гипертиреоза или гипотиреоза;
  2. Наличие диффузного токсического зоба;
  3. Наличие хронического тиреоидита;
  4. Появление плотных отеков голени и офтальмопатии.

Такое исследование могут назначить новорожденному, если у его матери диагностирована болезнь Грейвса или обнаружен высокий уровень антител. Беременные женщины сдают этот анализ в рамках первого скрининга, что дает возможность оценить риск невынашивания беременности. Доктор может направить на обследование, если необходимо проверить – можно ли принимать пациенту амиодарон, препараты, содержащие интерферон и иные медикаменты.

Если уровень антител к тиреоидной пероксидазе повышен, врач может заподозрить у обследуемого наличие:

  1. Узлового токсического зоба;
  2. Послеродовой дисфункции щитовидной железы;
  3. Болезни Грейвса;
  4. Подострого, хронического или аутоиммунного тиреоидита;
  5. Идиопатического гипотиреоза;
  6. Нетиреоидных аутоиммунных болезней.

Антитела к ТПО: где сдать анализ в СПб

Анализ на антитела к ТПО по цене, доступной широкому кругу клиентов, выполняется в Санкт-Петербурге в лаборатории «Express Medical Laboratory». Пациенты, которые обращаются к нам для выполнения обследований, могут быть уверены в точности и достоверности результата.

Необходимо учитывать, что показания лабораторного теста зависят от таких факторов, как медикаментозное и хирургическое лечение щитовидной железы, радиотерапия, массаж, рентген, биопсия, эндоскопия и УЗИ незадолго до взятия биоматериала. Узнать дополнительную информацию о диагностике можно по телефону, указанному на нашем сайте.

Эффективен ли левотироксин в профилактике выкидышей у женщин с антителами к тиреоидной пероксидазе?

Актуальность 

Наличие антител к тиреоидной пероксидазе (ТПО) ассоциировано с повышенным риском спонтанных абортов и преждевременных родов, даже в условиях нормальной функции щитовидной железы. 

Согласно результатам небольших исследований, применение левотироксина может снижать частоту вышеуказанных неблагоприятных событий. Однако данные крупных рандомизированных исследований отсутствуют. 

Методы

В двойное слепое плацебо-контролируемое исследование Thyroid AntiBodies and LEvoThyroxine study (TABLET) были включены женщины с наличием антител к ТПО. с эутиреозом и указанием в анамнезе на выкидыши или бесплодие.  

Из 19 585 женщин из 49 клиник Великобритании, прошедших скрининг на наличие антител к ТПО и тиреоидную функцию в исследование были рандомизированы 952 женщины. Из них 476 женщин получали 50 мкг левотироксина 1 раз в день и 476 женщин — плацебо до зачатия вплоть до окончания беременности. 

В качестве первиной конечной точки было выбрано рождение живого ребенка на 34 и более неделе гестации. 

Результаты

Исследование завершили 940 из 952 женщин. 

  • 266 из 470 женщин из группы левотироксина (56,6%) и 274 из 470 женщин, получавших плацебо (58,3%) забеременели.
  • Частота рождения живых детей составила 37,4% (176 из 470 женщин) в группе терапии левотироксином и 37,9% (178 из 470 женщин) в группе терапии плацебо. Относительный риск 0,97; 95% ДИ, 0,83-1,14, P=0,74; абсолютное различие, −0,4%; 95% CI, −6,6- 5,8). 
  • Анализ не выявил достоверных различий между группами по частоте преждевременных родов и неонатальным исходам
  • Серьезные побочные явления были зарегистрированы у 5,9% женщин в группе левотироксина и у 3,8% из группы плацебо (P=0,14).

Заключение

Применение левотироксина у женщин с эутиреозом и антителами к тиреоидной пероксидазе не приводит к повышению частоты рождения живых детей, в сравнении с плацебо. 

Источник: Rima K. Dhillon-Smith, Lee J. Middleton, Kirandeep K. Sunner, et al. N Engl J Med. Published online March 23, 2019. 

Гипофизарно-тиреоидная система — сдать анализы в Москве. Научный центр «ЭФиС»

ГИПОФИЗАРНО-ТИРЕОИДНАЯ СИСТЕМА
T-Uptake (Тироксин связывающая способность в сыворотке или плазме человека) 4-8 ч. 1440 р. 1 д. 720 р.
АТ к рТТГ (антитела к рецепторам ТТГ) 4-8 ч. 2780 р. 1 д. 1390 р.
АТ МАГ (антитела к микросомальной фракции тироцитов) до 5 д. 670 р.
АТ ТГ (антитела к тиреоглобулину) 4-8 ч. 1160 р. 1 д. 580 р.
АТ ТПО (антитела к тиреоидной пероксидазе) 4-8 ч. 1180 р. 1 д. 590 р.
Т3 (трийодтиронин) общий 4-8 ч. 980 р. 1 д. 490 р.
Т3 (трийодтиронин) свободный 4-8 ч. 960 р. 1 д.
480 р.
Т4 (тироксин) общий 4-8 ч. 980 р. 1 д. 490 р.
Т4 (тироксин) свободный 4-8 ч. 960 р. 1 д. 480 р.
ТГ (тиреоглобулин) 4-8 ч. 1380 р. 1 д. 690 р.
ТТГ (тиреотропный гормон) ультрачувствительный 4-8 ч. 960 р. 1 д. 480 р.

Антитела к тиреоидной пероксидазе, 96

Назначение: набор предназначен для количественного определения IgG-антител к тиреоидной пероксидазе в образцах человеческой сыворотки или плазмы крови методом иммуноферментного анализа . Антиген: высокоочищенная тиреоидная пероксидаза. Диапазон измерения: 5-3000 МЕ/мл. Чувствительность: 5 МЕ/мл. Стандартизация: стандарты набора прокалиброваны по стандарту MRC 66/387 для антител к тиреоидной пероксидазе. Приложения теста: заболевания щитовидной железы являются наиболее распространенными среди всех аутоиммунных заболеваний. Тиреоидные аутоиммунные заболевания связаны с появлением различных аутоантител и, видимо, могут быть связаны с генетической предрасположенностью. Эти аутоантитела направлены против локализованных на мембранах и/или экстрацеллюлярныхных антигенов тиреоидных клеток: — Тиреоглобулин (ТГ) — водорастворимый гликопротеин с м.м. приблизительно 660 кДа, составляющий основную массу тиреоидного коллоида (около 75% его массы). Он отвечает за хранение и продукцию гормонов щитовидной железы. Синтез тиреоидных гормонов Т3 и Т4 основан на окислительном йодировании двух остатков тирозина в молекуле тиреоглобулина, связанных вместе, и протеолитическом отщеплении гормонов Т3 и Т4 от молекулы ТГ. Одновременно с секрецией Т3 и Т4 в циркуляцию поступают также небольшие количества ТГ. Тиреоглобулин является сильным аутоантигеном. В-лимфоциты с IgM-антителами к тиреоглобулину, связанными с мембраной клеток, обнаруживаются даже в крови здоровых людей. Вместе с антителами против тиреопероксидазы (анти-ТПО), высокие титры IgG-антител к тиреоглобулину являются маркерами хронического аутоиммунного тиреоидита Хашимото. Анти-ТГ антитела найдены у 50-60% пациентов с тиреоидитом Хашимото. — Микросомальный антиген тиреоидной клетки является интегральным мембранным белком микросом. Этот антиген был охарактеризован как фермент тиреоидная пероксидаза (ТПО) с м.м. около 110 кДа. — Рецептор ТТГ является регуляторным белком, интегрированным в мембране тиреоидной клетки, он влияет как на синтез и секрецию тиреоидных гормонов, так и на клеточный рост. — Так называемый коллоидный антиген 2 (КА2). У пациентов с болезнью Грейвса иммуногенетическая форма гипертиреоидизма часто связана с появлением дополнительных антител, направленных против антигенов мышц глаза. Они являются причиной эндокринной офтальмопатии. Аутоантитела обнаруживаются при воспалительных заболеваниях щитовидной железы аутоиммунной природы. Различные симптомы заболеваний щитовидной железы: зоб, болевой синдром щитовидной железы, гипертиреоидизм и гипотиреоидизм могут иметь место при иммуногенетическом процессе и в случае появления органоспецифических антител. Это подчеркивает клиническую значимость определения аутоантител для оценки тиреоидных заболеваний. Наиболее важными аутоиммунными заболеваниями щитовидной железы являются: болезнь Хашимото, первичная микседема, болезнь Грейвса (часто связана с эндокринной офтальмопатией и другими бессимптомными заболеваниями, например, послеродовыми тиреоидитами. Появление анти-ТГ и анти-ТПО аутоантител одновременно, по-видимому, связано с их функциональной ассоциацией. Остатки тирозина в молекуле тиреоглобулина как белка-предшественника тиреоидных гормонов Т3 и Т4 йодируются при участии тиреоидной пероксидазы (ТПО). ТТГ стимулирует синтез и секрецию тиреоидных гормонов в тесной кооперации с другими белками. Это обстоятельство делает возможным одновременное появление всех этих антител. Ингибирование пероксидазной активности специфическими аутоантителами (анти-ТПО) снижает синтез тиреоидных гормонов и, таким образом, приводит к гипотиреоидизму. Особенно в конце беременности определение тиреоидных антител может быть полезным диагностическим тестом в ранней диагностике гипотиреоидизма, возникающего после рождения ребенка (послеродовая болезнь Хашимото). Наиболее высокие титры тиреоидных аутоантител найдены у пациентов с болезнью Хашимото. Концентрация антител к тиреоглобулину при этой болезни превышает титр анти-ТПО антител, в то время как у пациентов с болезнью Грейвса обнаруживается высокий уровень анти-ТПО антител. Кроме этого, для этих заболеваний характерны высокие концентрации антител к рецептору ТТГ. Определение специфических тиреоидных аутоантител используется в диагностике следующих заболеваний: ● Болезнь Грейвса (иммуногенная), ● Тиреоидит Хашимото, ● Эндокринная орбитопатия, ● Многоузловой зоб, Гипер/гипотиреоидизм неустановленного генеза, ● послеродовые тиреоидиты.


Следите за нами:  

Анализ крови на антитела к тиреопероксидазе (АТ-ТПО) в Москве, цена 640 руб. – сдать в Лаборатория.ру

Анализ крови на антитела к тиреопероксидазе (АТ-ТПО) предназначен преимущественно для диагностики гипотиреоза и гипертиреоза.

Тиреопероксидаза (ТПО) является ключевым ферментом в образовании гормонов щитовидной железы. Антитела к ТПО могут влиять на нормальную функцию этого эндокринного органа, представляя собой в основном иммуноглобулин G-типа.

АТ-ТПО связываются с антигенами на клетках, выстилающих микросомальную мембрану ткани железы. Считается, что они разрушают ткань этого органа в результате стимуляции лимфоцитарными клетками-киллерами. Эти иммуноглобулины присутствуют при гипотиреозе и гипертиреозе, часто при аутоиммунном тиреоидите Хашимото, который является основной причиной гипотиреоза. Это состояние у женщин детородного возраста вызывает серьезную озабоченность из-за пагубного воздействия недостаточного уровня тироксина на развитие мозга плода.

Анализ на антитела к тиреопероксидазе также назначается при подозрении на болезнь Грейвса, основную причину гипертиреоза. Эта болезнь – наиболее распространенный тип тиреотоксикоза у женщин детородного возраста, ухудшающий фертильность и повышающий риск выкидыша до 26%. Трансплацентарный переход антител к тиреопероксидазе (ТПО) у беременных может повлиять на развивающийся плод или привести к заболеванию щитовидки у новорожденного.

Аутоантитела часто выявляют не только у пациентов с аутоиммунной болезнью, но и у лиц без выраженной дисфункции ЩЖ. В последние годы анализ на антитела к тиреопероксидазе иногда назначается в качестве маркера ранней диагностики ряда заболеваний, таких как рак, ревматоидный артрит и глютеновая болезнь.

Показания к назначению анализа на АТ-ТПО

Анализ на антитела к тиреопероксидазе назначается в следующих случаях:
  • характерные симптомы заболевания щитовидной железы;
  • дифференциальная диагностика аутоиммунного поражения щитовидки;
  • аномальные результаты анализов на гормоны ЩЖ, такие как ТТГ, свободный Т3 и Т4;
  • подозрение на воспаление этого органа;
  • диагностика гипотиреоза, вызванного разрушением ткани ЩЖ;
  • для определения заболевания щитовидки у новорожденных, если у матери были диагностированы проблемы с ЩЖ;
  • беременным женщинам с аутоиммунными нарушениями.

Тиреоидные антитела продуцируются лимфоцитами щитовидной железы.

Clin Exp Immunol. 1982 апрель; 48(1): 196–200.

Эта статья была процитирована другими статьями в PMC.

Abstract

Значение характерного лимфоцитарного инфильтрата в органе-мишени при органоспецифическом аутоиммунном заболевании неизвестно. Мы продемонстрировали выработку антител к тиреоглобулину и иммуноглобулинов (IgG, IgM и IgA) лимфоцитами щитовидной железы при болезни Грейвса и тиреоидите Хашимото с двумя бляшкообразующими клетками (PFC).Щитовидная железа, по-видимому, является важным местом продукции тиреоглобулиновых антител, но тиреоидные лимфоциты также содержат много IgG PFC, неспецифичных к тиреоглобулинам. Краткосрочное культивирование и прямой анализ антител к тиреоглобулину на планшетах для микро-ELISA подтвердили результаты анализа PFC. Таким образом, такие препараты, как карбимазол, могут воздействовать на локальный источник продукции аутоантител.

Полный текст

Полный текст доступен в виде отсканированной копии оригинальной печатной версии.Получите копию для печати (файл PDF) полной статьи (670K) или щелкните изображение страницы ниже, чтобы просмотреть страницу за страницей. Ссылки на PubMed также доступны для Selected References .

Избранные ссылки

Эти ссылки находятся в PubMed. Возможно, это не полный список литературы из этой статьи.

  • Фаучи А.С. Иммунорегуляция при аутоиммунитете. J Аллергия Клин Иммунол. 1980 июль; 66 (1): 5–17. [PubMed] [Google Scholar]
  • Фрейд А., Кунори Т.Спонтанно образующие бляшки лимфоциты человека, обнаруженные с помощью анализа бляшек на белок-А. Сканд Дж. Иммунол. 1980;11(3):283–289. [PubMed] [Google Scholar]
  • Gronowicz E, Coutinho A, Melchers F. Анализ бляшек для всех клеток, секретирующих Ig данного типа или класса. Евр Дж Иммунол. 1976 г., август; 6 (8): 588–590. [PubMed] [Google Scholar]
  • Hammarström L, Smith CI, Pettersson D, Mellstedt H, Holm G. Анализ бляшек с белком-A: новая система для обнаружения клеток, секретирующих данный идиотип.Дж Иммунол. 1980 г., январь; 124 (1): 140–142. [PubMed] [Google Scholar]
  • МакГрегор А.М., Петерсен М.М., Маклахлан С.М., Рук П., Смит Б.Р., Холл Р. Карбимазол и аутоиммунный ответ при болезни Грейвса. N Engl J Med. 1980 г., 7 августа; 303 (6): 302–307. [PubMed] [Google Scholar]
  • McLachlan SM, Bird AG, Weetman AP, Smith R, Hall R. Использование анализов бляшек для изучения синтеза аутоантител к тиреоглобулину лимфоцитами периферической крови человека. Сканд Дж. Иммунол. 1981, сен; 14 (3): 233–242. [PubMed] [Google Scholar]
  • McLachlan SM, McGregor A, Smith BR, Hall R.Синтез тиреоидных аутоантител лимфоцитами щитовидной железы Хашимото. Ланцет. 1979 г., 20 января; 1 (8108): 162–163. [PubMed] [Google Scholar]
  • Мухтар Э.Д., Смит Б.Р., Пайл Г.А., Холл Р., Вайс П. Связь тиреотропных иммуноглобулинов с функцией щитовидной железы и эффектами хирургического вмешательства, радиойода и антитиреоидных препаратов. Ланцет. 1975 г., 29 марта; 1 (7909): 713–715. [PubMed] [Google Scholar]
  • Ringdén O, Rynnel-Dagö B, Kuunori T, Smith CI, Hammarström L, Freijd A, Möller E. Индукция синтеза антител в В-лимфоцитах человека различными поликлональными активаторами B-клеток: оценка прямым и косвенные анализы PFC.Immunol Rev. 1979; 45:195–218. [PubMed] [Google Scholar]
  • Tötterman TH. Распределение Т-, В- и тиреоглобулин-связывающих лимфоцитов, инфильтрирующих железу при болезни Грейвса, тиреоидите Хашимото и тиреоидите де Кервена. Клин Иммунол Иммунопатол. 1978 г., июль; 10 (3): 270–277. [PubMed] [Google Scholar]
  • Волин Б., Перлманн Х., Перлманн П. Анализ бляшек IgG- или IgM-зависимых цитолитических лимфоцитов в крови человека. J Эксперт Мед. 1976 г., 2 ноября; 144 (5): 1375–1380. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]
  • Yoshida H, Amino N, Yagawa K, Uemura K, Satoh M, Miyai K, Kumahara Y.Ассоциация сывороточных антитиреоидных антител с лимфоцитарной инфильтрацией щитовидной железы: исследования семидесяти вскрытий. J Clin Endocrinol Metab. 1978 г., июнь; 46 (6): 859–862. [PubMed] [Google Scholar]

Статьи по клинической и экспериментальной иммунологии предоставлены здесь Британским обществом иммунологии


Что такое антитела к щитовидной железе?

Обычно ваш организм вырабатывает антитела (разновидность белка крови), чтобы защитить себя от посторонних веществ, таких как бактерии, токсины или вирусы.Но иногда ваше тело по ошибке вырабатывает антитела, которые атакуют здоровые части. Примером этого являются антитела щитовидной железы — наличие антител щитовидной железы является признаком возможного заболевания щитовидной железы.

Какие существуют типы антител к щитовидной железе?

 Существуют три основных типа антител, которые имеют отношение к заболеванию щитовидной железы:

  • антитела к тиреопероксидазе (TPOAb),
  • антитела к тиреоглобулину (TgAb)
  • антитела к рецептору ТТГ (TrAb)

наличие эти антитела указывают на аутоиммунное заболевание щитовидной железы — проблему, при которой иммунная система вашего организма неправильно вырабатывает антитела к собственной здоровой ткани щитовидной железы.

Затем эти антитела атакуют ткань щитовидной железы, препятствуя ее правильному функционированию.

Как узнать, есть ли у вас антитела к щитовидной железе?

Единственный способ проверить, есть ли у вас антитела к щитовидной железе, — сделать анализ крови. Вы можете сделать это самостоятельно, сдав анализ крови на щитовидную железу, не выходя из собственного дома.

Как каждое антитело щитовидной железы влияет на ваш организм?

Присутствие каждого антитела влияет на вашу щитовидную железу по-разному:

Антитела к тироидной пероксидазе (TPOAb)

Присутствие TPOAb связано с болезнью Хашимото.

ТПОАт атакуют здоровую ткань щитовидной железы и мешают ей вырабатывать тиреоидные гормоны. Это также известно как наличие недостаточной активности щитовидной железы (гипотиреоз).

До 95% людей с болезнью Хашимото будут иметь антитела к ТПО в крови, что делает их наиболее очевидным признаком того, что у вас может быть или разовьется болезнь Хашимото.

Антитела к тиреоглобулину (TgAb)

Антитела к тиреоглобулину (TgAb) представляют собой другой тип антител, связанных с заболеванием щитовидной железы.

Как и антитела к ТПО, TgAb также обнаруживаются у людей с болезнью Хашимото, но в меньшей степени.

Антитела к рецепторам щитовидной железы (TRAb)

Эта группа антител нацелена на рецепторы тиреотропного гормона (ТТГ) в щитовидной железе. Это может привести к перепроизводству железой гормонов щитовидной железы, что приводит к сверхактивности щитовидной железы (гипертиреоз).

Гипертиреоз может привести к болезни Грейвса, и основной причиной являются TRAb.

Почему так важны антитела щитовидной железы?

Отслеживание уровня антител поможет вам понять, подвержены ли вы риску заболевания щитовидной железой.

Кроме того, аутоиммунные состояния связаны друг с другом. Если у вас есть диагноз Хашимото, вы также можете подвергаться риску развития таких заболеваний, как диабет 1 типа, болезнь Аддисона, глютеновая болезнь и пернициозная анемия.

Наличие антител к щитовидной железе может побудить вашего врача провести скрининг на эти другие заболевания в зависимости от ваших симптомов.

Примечание об антителах при беременности

Заболевания щитовидной железы связаны с неблагоприятными исходами беременности, риск которых повышается при наличии антител.Если вы беременны или планируете беременность и обеспокоены заболеванием щитовидной железы, важно обсудить это со своим лечащим врачом.

Обратите внимание, что диапазоны анализов крови, используемые во время беременности, отличаются и зависят от триместра.

Учебник по антителам к щитовидной железе в пяти упаковках

Гипотиреоз и гипертиреоз распространены и часто являются результатом аутоиммунитета щитовидной железы. Широкая доступность лабораторного тестирования сывороточных антител к щитовидной железе может вызвать вопросы у пациентов и клиницистов.

Что на самом деле говорят нам антитела щитовидной железы? Вот обзор наиболее упорядоченных антител к щитовидной железе в сыворотке, интерпретируемых в общих клинических сценариях.

Случай № 1: Тиреоидные антитела при тиреоидите Хашимото

У здоровой 24-летней женщины случайно обнаружены повышенные титры сывороточных антител к тиреопероксидазе (TPOAb) и антител к тиреоглобулину (TgAb) на фоне нормального уровня тиреотропного гормона (ТТГ) 3,5 мМЕ/мл и свободного тироксин (Т4) 0.9 нг/дл. Она бессимптомная. У ее матери диабет 1 типа и тиреоидит Хашимото. Она спрашивает: «Что означают мои положительные антитела к щитовидной железе?»

Направления таких пациентов обычное дело для эндокринологов. Сывороточные TPOAb и TgAb-позитивность связаны с тиреоидитом Хашимото (HT), также известным как хронический лимфоцитарный тиреоидит. Эти антитела могут влиять на синтез гормонов щитовидной железы, вызывая дисфункцию щитовидной железы (обычно гипотиреоз). В то время как TPOAb может непосредственно атаковать щитовидную железу, уровни TPOAb могут также отражать хронический иммунный ответ, включающий как Т-, так и В-клеточный иммунитет (Khoury и коллеги; Ramos-Leví и Marazuela).Около 90% пациентов с АГ будут иметь положительные титры TPOAb, тогда как только 50% будут иметь положительный уровень TgAb.

Мы сообщили нашей пациентке, что со временем у нее повышается риск развития дисфункции щитовидной железы, порядка 1-2% в год (Танбридж и коллеги; Вандерпамп и коллеги; Хубер и коллеги) из-за хронического воспаления щитовидной железы и инфильтрации иммунными клетками. . Мы посоветовали ей измерять уровень ТТГ и свободного Т4 в сыворотке не реже одного раза в год и рассказали ей о симптомах гипотиреоза.Хотя сейчас это не относится к ней, мы также обсудили, что повышенные уровни TPOAb и TgAb повышают риск развития дисфункции щитовидной железы во время беременности или если ей назначали амиодарон для лечения аритмии, литий для лечения психических расстройств и ингибиторы тирозинкиназы (ИТК). ) или ингибиторы иммунных контрольных точек (ICI) при раке.

Случай № 2: Антитела к щитовидной железе при наблюдении за раком щитовидной железы

37-летний мужчина с папиллярным раком щитовидной железы в анамнезе и тотальной тиреоидэктомией наблюдается для наблюдения за раком щитовидной железы.Он активно занимается своим лечением и хочет узнать больше о том, как его рак будет контролироваться с течением времени.

Благодаря открытому доступу к данным пациентов в электронных медицинских картах мы заметили, что все больше пациентов хотят узнать о своем раке щитовидной железы и о том, чего ожидать в отношении наблюдения за ним. Нам, эндокринологам, повезло, что мы располагаем сывороточным тиреоглобулином (ТГ) в качестве надежного онкомаркера при дифференцированном раке щитовидной железы. Уровни ТГ можно контролировать после тотальной тиреоидэктомии, независимо от того, проводилась ли абляция радиоактивным йодом, но, как правило, это не помогает людям, перенесшим только гемитиреоидэктомию (Park и коллеги; Ritter и коллеги).Повышение уровня ТГ указывает на персистирующий или рецидивирующий рак щитовидной железы, что может потребовать дальнейшего обследования или лечения. Однако, когда уровни TgAb также присутствуют, уровни Tg могут быть ненадежными. Важно всегда заказывать уровни как TgAb, так и Tg, даже если TgAb изначально отрицательный, потому что у некоторых пациентов со временем могут генерироваться TgAb.

Большинство лабораторий используют иммунометрический анализ (IMA) для измерения уровней Tg в сыворотке крови у пациентов с отрицательным TgAb. IMA автоматизирован, недорог, имеет быстрое время обработки и имеет хорошую точность.Однако примерно у 10-20% пациентов будут положительные уровни TgAb, которые могут мешать анализу IMA; в таких случаях могут наблюдаться искусственно заниженные уровни ТГ, что приводит к ошибочному заверению. У пациентов с положительными уровнями TgAb при ИМА предпочтительнее их измерение с помощью радиоиммуноанализа. Более новые тесты, такие как масс-спектроскопия, также показали первоначальные перспективы у пациентов с положительными уровнями TgAb, но все еще могут давать ложноотрицательные значения Tg (Netzel и коллеги; Spencer и коллеги).

Случай № 3: Тиреоидные антитела при болезни Грейвса

У здоровой женщины 52 лет в последнее время появилось стойкое сердцебиение.ТТГ в сыворотке < 0,02 мМЕ/мл (эталонное значение, 0,3–4,7 мМЕ/мл), свободный Т4 составляет 5,70 нг/дл (эталонное значение, 0,8–1,7 нг/дл), а свободный трийодтиронин (Т3) составляет 1920 пг/дл. (контроль, 222-383 пг/нл). У нее мелкий двусторонний тремор рук и синусовая тахикардия. Как нам обработать этот новый диагноз тиреотоксикоза?

Это одна из самых частых консультаций, которые мы получаем. Тиреоидные антитела могут помочь в дифференциальной диагностике тиреотоксикоза.

Антитела

к рецептору ТТГ (TRAb) нацелены на рецептор ТТГ и могут оказывать ингибирующее, нейтральное или стимулирующее действие.Тест иммуноглобулина, ингибирующего связывание тиреотропина (TBII), измеряет антитела, которые ингибируют связывание ТТГ с его рецептором. Стимулирующие TRAb, известные как иммуноглобулины, стимулирующие щитовидную железу (TSI), связаны с болезнью Грейвса; они стимулируют рецептор ТТГ, что приводит к увеличению продукции и высвобождению гормона щитовидной железы. Хотя в коммерческих лабораториях названия могут различаться, все положительные титры TBII, TRAb или TSI можно использовать для диагностики болезни Грейвса. Эти антитела экономичны, имеют быстрое время обработки и более удобны по сравнению со сканированием поглощения радиоактивного йода.Поскольку TRAb также связываются с орбитальными фибробластами и мышечными клетками, они могут вызывать экзофтальм и гипертрофию глазных мышц, известную как тиреоидная болезнь глаз. Уровни антител к щитовидной железе могут контролировать риск и реакцию на лечение тиреоидного заболевания глаз, которое не всегда отражает биохимическую тяжесть гипертиреоза.

Нашему пациенту был начат короткий курс пропранолола для лечения гипертиреоза. Пару дней спустя ее результат титра TSI был в 10 раз выше верхней границы нормы, подтверждая болезнь Грейвса.После начала приема метимазола мы можем отслеживать ее уровни TSI в сыворотке, чтобы предсказать шансы на будущую ремиссию.

Случай № 4: Антитела к щитовидной железе при использовании TKI и ICI

Мы получили сообщение от онколога пациента, который начал лечение пациента пембролизумабом, ингибитором белка запрограммированной гибели клеток (PD-1) ICI, для лечения метастатической меланомы. Лабораторный скрининг щитовидной железы, проведенный во время ее четвертого цикла терапии, показал ТТГ <0,02 мМЕ/мл и свободный Т4 3,40 нг/дл, что свидетельствует о тиреоидите, вызванном ИЦИ.

С появлением ИТК и ИКИ в лечении рака мы наблюдаем рост ассоциированного тиреоидита. ICI-тиреоидит встречается у 10-25% пациентов, которые обычно протекают бессимптомно и демонстрируют снижение поглощения радиоактивного йода, соответствующее деструктивному тиреоидиту (Iyer и коллеги; Muir и коллеги; Peiró и коллеги). Сывороточные TgAb и TPOAb часто отсутствуют и не нужны для диагностики (Iyer и коллеги; de Moel и коллеги; Mazarico и коллеги).

ICI тиреоидит деструктивный; это не связано с TSI, и, хотя TRAb иногда обнаруживают, эти лабораторные результаты считаются вторичными по отношению к сильному иммунному ответу, а не способствующими основному патогенезу.

Гипотиреоз, связанный с ИТК, встречается у 40% пациентов и связан с постепенным развитием перманентного гипотиреоза (Lechner и коллеги; Torino и коллеги). Тиреоидные антитела часто отсутствуют.Интересно, что дисфункция щитовидной железы, связанная как с ИТК, так и с ИКИ, была связана с улучшенным ответом на терапию рака; они не являются основанием для прекращения или прерывания лечения рака (Пейро и коллеги; де Моэль и коллеги; Ма и коллеги).

Случай № 5: Тиреоидные антитела во время беременности

У 31-летней женщины с выкидышем в анамнезе и тиреоидитом Хашимото (положительный результат на TPOAb) только что подтвердилась 7-недельная беременность. Как следует наблюдать за этим пациентом или лечить его?

Гормон щитовидной железы необходим для нормального развития плода (Leung и коллеги; Smallridge и коллеги).Риск неблагоприятных исходов беременности, включая выкидыш, повышен у женщин с положительным уровнем антител к ТПО и более высокой концентрацией ТТГ. Американская ассоциация щитовидной железы рекомендует начинать прием левотироксина у женщин с TPOAb-позитивным уровнем ТТГ > 2,5 мМЕ/мл и рассматривать возможность назначения левотироксина женщинам с TPOAb-отрицательным уровнем ТТГ между верхней границей референтного диапазона и 10 мМЕ/мл. После начала приема левотироксина анализы щитовидной железы следует проверять каждые 1-2 месяца в течение беременности.

Важно также помнить, что у беременных женщин с болезнью Грейвса в настоящее время или в анамнезе измерения TRAb в сыворотке могут предоставить полезную прогностическую информацию о плоде, поскольку антитела, стимулирующие рецептор ТТГ, могут проникать через плаценту, повышая риск гипертиреоза плода. Титры TSI в сыворотке все еще могут быть положительными, чтобы представлять этот риск, даже если у матери больше нет гипертиреоза или у нее интактная щитовидная железа.

Последние мысли

Тиреоидные аутоантитела являются важным инструментом в диагностике и лечении заболеваний щитовидной железы (включая тиреоидит Хашимото и болезнь Грейвса), в наблюдении за раком щитовидной железы и в оптимизации статуса гормонов щитовидной железы во время беременности.Поскольку эти тесты легко доступны в большинстве лабораторий, мы надеемся, что это краткое изложение поможет в их интерпретации и в лечении этих распространенных заболеваний щитовидной железы.

Систематический обзор и метаанализ

Введение

Узлы щитовидной железы — распространенное заболевание шеи, при этом злокачественные узлы составляют 5–15% из них (1). Патологическая классификация Рак щитовидной железы (РЩЖ) включает папиллярный, фолликулярный и недифференцированные виды.За исключением безболезненных узелков, ТК обычно не имеет других специфических клинических симптомов, что затрудняет обнаружение на ранней стадии. За последние годы заболеваемость ТС увеличилась. постепенно увеличивается, занимая 9-е место среди всех опухолей мира (2–5). Ранняя диагностика ТС и хирургического лечения имеют особое значение для прогноза пациенты.

Самое точное обследование перед операцией диагноз ТС, цитологическое исследование тонкоигольной аспирационной аспирации щитовидной железы (FNAC) невозможно отличить фолликулярную карциному щитовидной железы от фолликулярная аденома.Недавние исследования показали, что измерение TgAb может помогают дифференцировать TC от неопределенных узлов, подвергнутых FNAC (6–8).

TgAb, гликопротеин IgG, секретируемый лимфоидной тканью B клеток, а антитела к тироидной пероксидазе (ТПОАт) обычно указывают на аутоиммунные заболевания щитовидной железы (AITD), когда они положительны. Эти два антитела также могут быть повышены у пациентов с TC (9). В последнее время все больше исследований основное внимание уделялось взаимосвязи между антителами к щитовидной железе и ОК. Ан раннее исследование показало, что уровень распространенности положительных TgAb в больных ТК было 2.в 5 раз больше, чем в общей популяции (9). Kim и коллеги (10) впервые сообщили, что TgAb можно использовать в качестве независимого предиктора диагноза ТС (OR=1,80, 95% ДИ=1,29–2,58) вне зависимости от наличия АИТ, особенно у более молодые пациенты (11). Более того, Пациенты с ТС с положительным уровнем TgAb имели худший прогноз после хирургия (12,13). Однако этот вопрос остается спорный. Поэтому настоящий метаанализ был проведен для систематически оценивать связь между положительными показателями щитовидной железы антитела (TgAb и TPOAb) и риск ТС.

Материалы и методы
Стратегия поиска

Был проведен систематический поиск с использованием трех электронные базы данных (Pubmed, Embase и Cochrane library) для получить потенциально релевантные статьи, опубликованные до октября 2018. Стратегия поиска включала термины (все поля) «щитовидная железа». рак», «карцинома щитовидной железы», «новообразование щитовидной железы» или «тиреоидная узелок» и «антитело к тиреоглобулину», «тиреоглобулин аутоантитела», «антитела к тироидной пероксидазе», «тироидная пероксидаза аутоантитела», «тиреоидные антитела», «тиреоидные аутоантитела», «TgAb» или «ТПОАт».Мы также искали соответствующие статьи по ссылкам оригинальной статьи и обзорных статей.

Критерии выбора

Критерии включения были следующими: i) Исследования исследовали связь между предоперационной сывороткой щитовидной железы антитела (TgAb или TPOAb) в качестве категориальной переменной и риск ТК; ii) пациенты с ТК и доброкачественными узлами щитовидной железы были классифицируются на группу случаев и контрольную группу соответственно; III) Диагноз ТС был основан на дооперационном FNAC или послеоперационном гистологическая биопсия.Рецензии, дубликаты литературы, встречи аннотация и исследования, в которых не было представлено отношение шансов (OR) и соответствующие данные 95% доверительных интервалов (ДИ), скорректированные с помощью многофакторный логистический регрессионный анализ был исключен.

Извлечение данных

Два исследователя независимо друг от друга извлекли важные информацию из выбранной литературы. Извлеченные данные включены: первый автор, год издания, место исследования, размер выборки, типы рака, смешанные факторы, значения ОШ и 95% ДИ с поправкой на многомерный логистический регрессионный анализ.

Оценка качества

Шкала Ньюкасла-Оттавы (14) использовалась для оценки качества избранная литература. Эта шкала трехмерна: выделение, сопоставимость и экспозиция с диапазоном баллов от 0 до 9. Оценки по 0–6 были классифицированы как исследования низкого качества, а 7–9 баллов – как исследования низкого качества. качественные исследования.

Статистический анализ

Статистический анализ выполнен с использованием STATA ПО 14.0. Неоднородность исследований оценивалась с использованием статистика I-квадрата и Q-критерий Кокрана.Если бы было значительная неоднородность (I2>50% или P<0,10), Для метаанализа использовалась модель случайных эффектов. Далее Гэлбрейт график был использован для исследования источника неоднородности от единичные исследования. В то же время метарегрессия и подгруппа анализы были выполнены на основе характеристик исследований, чтобы определить факторы, которые способствовали неоднородности. В противном случае использовалась модель с фиксированными эффектами. Объединенные ОШ и 95% ДИ были рассчитывается для оценки связи между положительными показателями щитовидной железы антител и риск ТС.Z тест был использован для определения значимость этой ассоциации. Анализ чувствительности был проводится для изучения влияния одного исследования на общий оценка риска путем исключения одного исследования в каждом цикле. Бегг ранг корреляционный тест и регрессионный тест Эггера были использованы для оценки предвзятость публикации, а результат метаанализа был исправлен с использованием метода обрезки и заполнения, если была выявлена ​​предвзятость публикации. Считалось, что P<0,05 указывает на статистически значимое разница.

Результаты
Поиск и изучение литературы характеристики

Наш поиск выявил 2817 потенциально релевантных статьи, из которых 392 дублировали и были удалены (Рис.1). После прочтения заголовка и реферат, 2 373 статьи были удалены на основании исключения критерии. Далее был опубликован полный текст остальных 52 статей. рассмотрены и еще 35 исключены. Наконец, 17 статей были включены в метаанализ (7,8,10,11,15–27). характеристики этих изделий перечислены в Таблице I.

Таблица I. исследования.

Таблица I.

Характеристики в комплекте исследования.

Автор, год Страна Объем выборки (случай/контроль) Типы рака Вмешивающиеся факторы скорректировано в исходном исследовании OR или RR (95% ДИ) Показатель качества (ссылки)
Zhu et al , 2018 Китай 90/285 а ; Нет b TC Возраст, размер узла, ТШ 2.59 (1,25–5,37) а ; Нет b 8 (15)
Лю и др. , 2018 Китай 524/2460 и ; 524/2460 b TC Возраст, размер узла, ТТГ, TPOAb/TgAb 4,435 (1,902–10,345) и ; 0,901 (0,346–2,350) б 9 (16)
Чжао и др. , 2017 (мужской) Китай 276/193 и ; Нет b PTC Возраст, ТТГ, TPOAb/TgAb, размер узла, номер узла 3.21 (1,36–7,57) а ; Нет b 9 (17)
Чжао и др. , 2017 (женщина) Китай 844/728 и ; 844/728 b PTC Возраст, ТТГ, TPOAb/TgAb, размер узла, количество узелков 1,80 (1,38–2,36) а ; 1,98 (1,44–2,73) б 9 (17)
Лю и др. , 2017 Китай 927/927 и ; 927/927 b PTC Возраст, пол, ТШ 2.35 (1,82–3,04) а ; 1,58 (1,21–2,05) б 6 (11)
Цзэн и др. , 2016 Китай 578/620 и ; Нет b PTC Возраст, узелок размер 4.894 (2,520–9,505) и ; Нет b 8 (18)
He и др. , 2016 Китай 189/748 и ; 194/764 b ТК Возраст, пол, ТТГ, ТПОАт/ТгАт 1.53 (0,91–2,56) а ; 0,92 (0,54–1,57) б 8 (19)
Цинь и др. , 2015 Китай 237/1401 и ; 237/1,401 b ДКН Возраст, пол, узел размер, количество узелков, ТТГ, TPOAb/TgAb 2,10 (1,40–3,15) а ; 1,2 (0,71–2,04) б 9 (20)
Ли и др. , 2015 Китай 1967/7228 и ; 1,967/7,228 b TC 18 смешение факторы с 1.20 (1,02–1,42) а ; 2,83 (2,39–3,36) б 7 (21)
Василеядис и др. ал , 2014 Греция 389/447 и ; Нет b PTC Возраст, пол, HT, ТТГ, размер узла 1,86 (1,21–2,53) а ; Нет б 9 (8)
Грани и др. , 2014 Италия 78/1,131 и ; Нет b MN Возраст, размер узла, номер узла, TPOAb/TgAb 0.98 (0,41–2,38) а ; Нет b 6 (22)
Азизи и др. , 2014 Америка 233/1790 и ; 233/1790 б МН Возраст, пол 2,24 (1,57–3,19) а ; 1.19 (0,88–1,61) б 7 (23)
Ву и др. , 2013 Китай 537/1595 и ; 537/1595 b PTC Возраст, пол, ТТГ, ТПОАт/ТгАт 1.921 (1,431–2,580) а ; 1,945 (1,195–3,165) б 9 (24)
Лунь и др. , 2013 Китай 636/1631 и ; 634/1,627 b PTC Возраст, пол, ГТ, ТТГ, ТПОАт/ТгАт 1,89 (1,47–2,44) а ; 1.19 (0,88–1,61) б 8 (25)
Boi и др. , 2013 Италия 189/1,472 и ; 189/1472 б МН Возраст, пол, ТТГ, ТПОАт/ТгАт 1.67 (1,05–2,67) а ; 2,15 (1,42–3,25) б 7 (26)
Азизи и др. , 2011 Америка 253/2,247 и ; 253/2,247 б МН Возраст, пол, узел номер, ТШ 1,57 (1.11–2.23) а ; 1.12 (0,83–1,51) б 7 (7)
Ким и др. , 2010 Корея 296/1,342 и ; Нет b MN Возраст, пол, узел количество, размер узла, ТТГ 1.61 (1.12–2.33) а ; Нет b 6 (10)
Boelaert et al , 2006 Великобритания Нет a ; 91/1,138 б МН ТШ Нет а ; 1,19 (0,6–2,35) б 7 (27)
Мета-анализ

Шестнадцать статей, содержащих 17 исследований по связь между TgAb и риском TC с участием 34 488 пациенты были включены, а объединенное ОШ составило 1.93 (95% ДИ = 1,64–2,27, I2 = 67,2%), на основе случайных эффектов модель (рис. 2). Двенадцать исследований по связь между TPOAb и риском TC с участием 30 007 были включены пациенты, а объединенное ОШ составило 1,48 (95% ДИ = 1,15–1,91, I2 = 83,0%), на основе случайных эффектов модель (рис. 3).

Анализ гетерогенности

Как упоминалось выше, произошло значительное неоднородность включенных исследований. В исследованиях TgAb, радиальный график Гэлбрейта показал, что два исследования вызвали неоднородность (18,21) (рис.4). После удаления двух исследований мы обнаружили, что остальные включенные исследования были однородными (I2=9,7%, P=0,35) и связь между положительным TgAb и повышенным риском TC не изменился (ОШ=1,93, 95%ДИ=1,74–2,14). Кроме того, мета-регрессионный анализ был проведен на основе характеристик исследований, включая место исследования, типы рака, размер выборки и сопутствующие факторы. Результаты показали, что смешанные факторы (пол и количество узлов щитовидной железы) были ответственны за 74.6% от неоднородность (P<0,05).

В исследованиях TPOAb, проведенных Li et al (21) и Zhao et al (17) (женщины), данные исследований были причинами неоднородность (рис. 5). связь между положительными TPOAb и повышенным риском ТС не выявлена. измениться (ОШ=1,33, 95%ДИ=1,13–1,57), а неоднородность стала не значимо (I2=36,5%, P=0,12) после удаления два исследования. Мета-регрессионный анализ не выявил характеристики исследований, которые привели к неоднородности. Это только показал незначительную гетерогенность в группе PTC.

Анализ подгрупп

В исследованиях TgAb положительный TgAb был связан с с повышенным риском ТС во всех подгруппах. Более сильный связь была обнаружена в исследованиях, в которых не корректировали параметры щитовидной железы. количество узелков (ОШ = 2,14, 95% ДИ = 1,82–2,52) по сравнению с исследованиями так и было (ОШ = 1,61, 95% ДИ = 1,29–2,00; P = 0,04).

В исследованиях TPOAb не выявлено связи между TPOAb и риск ТС наблюдался в группе ТС и большом размере выборки группа (таблица 2).

Таблица II.

Анализ подгруппы для исследования различия в объединенных значениях ОШ между исследованиями, включенными в метаанализ.

Таблица II.

Анализ подгруппы для исследования различия в объединенных значениях ОШ между исследованиями, включенными в метаанализ.

А, ТГАБ

Испытание неоднородность

Переменные Объединенные ИЛИ (95%ДИ) I 2 (%) P-значение P-значение
Место исследования 0.34
Запад (n=5) 1,78 (1,48–2,14) 0,2 0,405
  Азия (п=12) 2,05 (1,66–2,53) 75,4 0
Тип рака 0,29
  ТС (п=4) 1,99 (1,14–3,46) 78,8 0,003
  DTC (n=1) 2.10 (0,89–2,65)
  ПТК (п=7) 2,11 (1,77–2,50) 42,8 0,105
  МН (=5) 1,72 (1,42–2,07) 2,6 0,392
Размер образца 0,16
>1200 (=12) 1,81 (1,52–2,15) 68,3 0
<1200 (=5) 2.48 (1,65–3,75) 58,4 0,048
С поправкой на узелок номер 0,04
  Да (п=7) 1,61 (1,29–2,00) 60,8 0,018
  Нет (п=10) 2,14 (1,82–2,52) 38,9 0,099
С поправкой на узелок размер 0.76
  Да (п=10) 2,04 (1,54–2,70) 76,1 0
  Нет (п=7) 1,95 (1,72–2,20) 0 0,489
С поправкой на пол 0,18
  Да (п=13) 1,80 (1,56–2,09) 61,00 0,002
  Нет (n=4) 2.90 (1,48–5,69) 67,10 0,028

Б, ТПОАт

Испытание неоднородность

Переменные Объединенные ИЛИ (95%ДИ) I 2 (%) P-значение P-значение

Место учебы 0.53
Запад (n=4) 1,35 (1,00–1,82) 57,3 0,071
  Азия (п=8) 1,55 (1.13–2.12) 84,2 0
Тип рака 0,66
  ТС (п=3) 1,41 (0,56–3,51) 89,9 0
  DTC (n=1) 1.20 (0,71–2,03)
  ПТК (п=4) 1,60 (1,27–2,02) 50 0,112
  МН (=4) 1,35 (1,00–1,82) 57,3 0,071
Размер образца 0,85
>2000 (=6) 1,46 (0,95–2,26) 90,6 0
<2000 (=6) 1.54 (1,21–1,95) 48,3 0,085
С поправкой на узелок номер 0,46
  Да (п=4) 1,69 (1,03–2,78) 91 0
  Нет (п=8) 1,39 (1,14–1,69) 43,2 0,091
С поправкой на узелок размер 0.27
  Да (п=4) 1,79 (1,14–2,79) 80 0,001
  Нет (п=8) 1,36 (1,13–1,63) 47,5 0,064
Анализ чувствительности

Анализ чувствительности показал, что удаление любого исследования TgAb или TPOAb не повлияли на объединенные значения OR и 95% ДИ, предполагая, что результаты нашего метаанализа были стабильно и не зависит от одного исследования.

Предвзятость публикации

В исследованиях TgAb график воронки был асимметричный, что указывает на наличие потенциальной предвзятости публикации (P=0,02; рис. 6), тогда как смещения публикации не существовало (P = 0,28) после удаления данные исследования Li et al (21), в котором был самый большой размер выборки исследование и источник неоднородности. Это предполагало, что существенная разница между меньшими и большими исследованиями, которая возникает неоднородность исследований была причиной асимметрии график воронки (28).Несмотря на это, сразу же был использован метод обрезки и заполнения, а скорректированный ОШ значение оказалось равным 1,61 (95% ДИ = 1,36–1,91), что не значительно отличается от исходных значений ОШ, что доказывает достоверность метаанализа. В исследованиях TPOAb оба воронкообразный график и тест Эггера указывали на наличие систематическая ошибка публикации (P<0,01), но систематическая ошибка публикации не наблюдалась (P = 0,11) после удаления данных из исследования Ли и др. (21) (рис. 7).

Обсуждение

Выявление доброкачественных и злокачественных опухолей щитовидной железы узелки всегда были в центре клинического внимания.это спорно, являются ли антитела щитовидной железы фактором риска для TC (22,29–31). В В настоящем метаанализе TgAb-положительные пациенты были обнаружены дважды. с такой же вероятностью развития TC, как и у TgAb-негативных пациентов, предполагая, что положительный TgAb является фактором риска для TC. Хотя положительный TPOAb связаны с повышенным риском ТС, эта ассоциация не существуют в некоторых подгруппах, что может быть связано с небольшим размер выборки этих подгрупп.

Кроме того, результат метаанализа в соответствии с диагностическим исследованием, проведенным Hosseini et al (29), который обнаружил, что чувствительность и специфичность TgAb для диагностики РЩЖ была 16.04% (95% ДИ = 11,37–21,68) и 90,67% (95% ДИ = 85,66–94,38), соответственно. Следовательно, положительные TgAb специфичны для TC, хотя отрицательный TgAb не имеет большого значения для исключения диагноза TC. В некоторых исследованиях сообщалось, что более низкая чувствительность TgAb может возникают из-за ограничений методов анализа, поскольку использование различных Анализы TgAb могут обнаруживать расхождения в статусе TgAb (32–34).

Хорошо известно, что TgAb в сочетании с TPOAb, раньше был отличительной чертой AITD. Несколько исследований обнаружили очевидная связь между AITD и TC, и сообщил, что сосуществование с AITD может быть одной из причин повышения сыворотки антитела к щитовидной железе у пациентов с ТС (35–37).Тем не менее, положительные TgAb оставались фактором риска ТС в исследованиях. из которых были исключены пациенты с AITD (24,25). А исследование показало, что экспозиция антигена тиреоглобулина во время образование опухоли может вызвать увеличение сывороточного TgAb через иммунные реакции (38). Другой Исследования показали, что тиреоглобулин имеет около 40 антигенных сайтов, что были разными у пациентов с ТС и АИТД (39,40). ТС пациенты демонстрировали явно более высокое содержание фукозы в сердцевине и тенденция к увеличению сиалирования TgAb (41). Дальнейшие исследования могут улучшить прогностическое значение TgAb для TC путем обнаружения специфических для TC TgAb фрагменты.

В настоящем метаанализе было несколько следующих преимущества: во-первых, во всех включенных исследованиях многомерный логистический регрессионный анализ, который контролировал влияние искажающих факторов, что в полной мере продемонстрировало независимая прогностическая ценность TgAb для TC. Во-вторых, наш анализ включал большую выборку данных из 34 488 узлов щитовидной железы. пациентов в 17 исследованиях TgAb. Хотя от умеренного до высокого среди этих исследований наблюдалась неоднородность (I2=67,2%), значение объединенного ОШ не изменилось после удаление двух исследований, вызвавших неоднородность.Это также было обнаружено, что различия в смешанных факторах (щитовидная железа количество узелков и пол), контролируемые исследованием, вызвали 74,6% неоднородность. Это может быть связано с различиями в частоте развития рака. среди людей с разным полом или количеством узлов щитовидной железы. Тем не менее, результаты как анализа чувствительности, так и Метод обрезки и заполнения подтвердил точность нашего метаанализа связь между положительным TgAb и повышенным риском ТС.

Однако настоящий метаанализ также ограничения.Во-первых, большинство включенных исследований были ретроспективными. исследования случай-контроль и перекрестные исследования, которые не смогли чтобы сформулировать причинно-следственную связь между TgAb и TC. Как Поэтому необходимо многоцентровое и проспективное когортное исследование. дополнительно изучить этот вопрос. Во-вторых, предвзятость публикаций идентифицированы в нашем мета-анализе TgAb. Несмотря на то, неоднородность исследований, особенно Li et al. (21) у которого был слишком большой размер выборки и был основным источником неоднородности, привел к этому смещению (28), результат Метод обрезки и заполнения подтвердил подлинность нашего метаанализ.Наконец, в исследованиях TPOAb, хотя мы обнаружили, что высокая неоднородность была получена из одного исследованиях (I2=83,0%), нам не удалось выявить особенности этих исследований, которые привели к неоднородности. Мы поэтому не проводил метаанализ ассоциации между TPOAb и риском TC.

В заключение, положительный результат TgAb представляет собой независимый риск. коэффициент для ТС. Связь между положительными TPOAb и риском ТС еще предстоит выяснить.

Благодарности

Не применимо.

Финансирование

Проект Высшего научного фонда Университет Южного Китая поддержал данное исследование (грант No. 2018KYY497).

Наличие данных и материалов

Наборы данных, использованные и проанализированные в ходе настоящего исследование доступно у соответствующего автора на разумных запрос.

Вклад авторов

YaX, QZ, QAL и SLY задумали и разработали эксперименты. YaX, QZ, QAL, SLY и YoX провели эксперименты.YaX и QZ проанализировали данные. YaX, QAL, SLY, QZ и YoX написали бумага.

Одобрение этики и согласие на участвовать

Не применимо.

Согласие пациента на публикацию

Не применимо.

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересы.

Ссылки

1

Frates MC, Benson CB, Doubilet PM, Кунройтер Э., Контрерас М., Сибас Э.С., Оркатт Дж., Мур Ф.Д. мл., Ларсен PR, Marqusee E и Александр EK: Распространенность и распространение карцинома у больных с одиночными и множественными узлами щитовидной железы на сонография.J Clin Endocrinol Metab. 91:3411–3417. 2006. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

2

Брэй Ф., Ферлай Дж., Соэржоматарам И., Сигел Р.Л., Торре Л.А. и Джемал А.: Глобальная статистика рака, 2018 г.: GLOBOCAN оценки заболеваемости и смертности во всем мире для 36 видов рака в 185 стран. CA Рак J Clin. 68:394–424. 2018. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

3

Моррис Л.Г., Таттл Р.М. и Дэвис Л.: Изменение тенденций заболеваемости раком щитовидной железы в США состояния.JAMA Otolaryngol Head Neck Surg. 142: 709–711. 2016. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

4

Ла Веккья С, Мальвецци М, Босетти С, Гаравелло В., Бертуччо П., Леви Ф. и Негри Э.: Рак щитовидной железы смертность и заболеваемость: глобальный обзор. Инт Джей Рак. 136: 2187–2195. 2015. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

5

Ду Л, Ван И, Сунь Х, Ли Х, Гэн Х, Гэ М и Zhu Y: Рак щитовидной железы: тенденции заболеваемости, смертности и клинико-патологические модели в провинции Чжэцзян, юго-восток Китай.БМК Рак. 18:2

8. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

6

Карацас Т., Василеядис И., Запанти Э., Харитудис Г., Каракостас Э. и Буциос Г.: Тиреоглобулин антитела как потенциальный прогностический маркер папиллярной щитовидной железы карцинома у пациентов с неопределенной цитологией. Am J Surg. 212:946–952. 2016. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

7

Azizi G и Malchoff CD: Аутоиммунный заболевание щитовидной железы: фактор риска рака щитовидной железы.Эндокр Практ. 17: 201–209. 2011. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

8

Василиадис I, Буциос Г., Харитудис Г., Кукулиоти Э. и Карацас Т.: Антитела к тиреоглобулину могут быть потенциальный прогностический маркер папиллярной карциномы щитовидной железы. Анна Сур Онкол. 21:2725–2732. 2014. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

9

Спенсер К.А., Такеучи М., Казаросян М., Ван CC, Guttler RB, Singer PA, Fatemi S, LoPresti JS и Nicoloff JT: Аутоантитела к тиреоглобулину в сыворотке: распространенность, влияние на сыворотку измерение тиреоглобулина и прогностическое значение у пациентов с дифференцированным раком щитовидной железы.J Clin Endocrinol Metab. 83:1121–1127. 1998. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

10

Kim ES, Lim DJ, Baek KH, Lee JM, Kim MK, Kwon HS, Song KH, Kang MI, Cha BY, Lee KW и Son HY: Тиреоглобулин антитела связаны с повышенным риском рака щитовидной железы узелки. Щитовидная железа. 20:885–891. 2010. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

11

Лю И, Ли С, Чжао В и Ван И: Тиреоидит Хашимото является важным фактором риска папиллярного микрокарцинома щитовидной железы у молодых людей.Горм Метаб Рез. 49:732–738. 2017. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

12

Эрнага-Лореа А., Эрнандес-Морхейн М.С., Анда-Апинаниз Э., Пинеда-Аррибас Дж.Дж., Мигелиз-Бермеджо И., Эгилас-Эспарса Н. и Иригарай-Эчарри А.: Прогностическое значение Изменение антитиреоглобулиновых антител после тиреоидэктомии больных папиллярным раком щитовидной железы. Clin Transl Oncol. 20:740–744. 2018. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

13

Тримболи П, Зилиоли В, Империали М и Giovanella L: аутоантитела к тиреоглобулину до введения радиоактивного йода аблация предсказывает дифференцированный исход рака щитовидной железы.Клин Хим Лаборатория мед. 55:1995–2001. 2017. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

14

Уэллс Г.А., Ши Б., О’Коннелл Д., Петерсон Дж., Welch V, Losos M и Tugwell P: шкала Ньюкасла-Оттавы (NOS) для оценки качества нерандомизированных исследований в мета-анализы. 2009 г., http://www.ohri.ca/programs/clinical_epidemiology/oxford.htm

.

15

Zhu C, Li S, Gao X, Zhu G, Song M и Gao F: Ретроспективный анализ узловых образований щитовидной железы: риск рака щитовидной железы Факторы в Сучжоу, Китай.Клин Лаборатория. 64:333–338. 2018. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

16

Лю Дж., Чжэн Д., Ли К., Тан С., Луо З., Юань Z, Gao L и Zhao J: Прогностическая модель злокачественных новообразований щитовидной железы с использованием клинические, биохимические и сонографические параметры у пациентов в многоцентровая установка. BMC Endocr Disord. 18:17–23. 2018. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

17

Чжао Х, Ли Х и Хуан Т: Повышенное мочеиспускание йод, аутоантитела к щитовидной железе и тиреотропный гормон риск папиллярного рака щитовидной железы.Биол Трейс Элем Рез. 184:317–324. 2017. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

18

Цзэн Р., Шоу Т., Ян К.С., Шен Т., Чжан Д.П., Zuo RX, Zheng YQ и Yan XM: риск папиллярной карциномы щитовидной железы Факторы плато Юньнань на юго-западе Китая. Тер Клин Риск Управление 12:1065–1074. 2016. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

19

He LZ, Zeng TS, Pu L, Pan SX, Xia WF и Чен Л.Л.: Гормоны щитовидной железы, аутоантитела, УЗИ и клинические параметры для прогнозирования рака щитовидной железы.Международный J Эндокринол. 2016:82158342016. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

20

Цинь Дж, Ю З, Гуань Х, Ши Л, Лю Ю, Чжао Н, Shan Z, Han C, Li Y и Teng W: Высокий уровень антител к тиреоглобулину повышают риск дифференцированного рака щитовидной железы. Дис маркеры. 2015:6486702015. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

21

Ли Т, Шэн Дж, Ли В, Чжан С, Ю Х, Чен X, Zhang J, Cai Q, Shi Y и Liu Z: Новая вычислительная модель для рак щитовидной железы человека повышает эффективность предоперационной диагностики.Онкотаргет. 6: 28463–28477. 2015. PubMed/NCBI

22

Грани Г., Кальванезе А., Карботта Г., Д’Алессандри М., Неска А., Бьянкини М., Дель Сордо М., Витале М. и Fumarola A: аутоиммунитет щитовидной железы и риск злокачественного новообразования щитовидной железы узелки подвергаются тонкоигольной аспирационной цитологии. Шея головы. 37:260–264. 2014. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

23

Азизи Г., Келлер Дж. М., Льюис М., Пайпер К., Puett D, Rivenbark KM и Malchoff CD: Ассоциация Хашимото тиреоидит с раком щитовидной железы.Endocr Relat Рак. 21:845–852. 2014. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

24

Ву С, Лун И, Цзян Х, Ган Ц, Синь С, Дуань Z и Zhang J: Сосуществование антител к тиреоглобулину и щитовидной железы антитела к пероксидазе коррелируют с повышенным тиреостимулирующим уровень гормонов и поздние стадии папиллярного рака щитовидной железы. Эндокринный. 46: 554–560. 2013. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

25

Лунь И, У С, Ся Ц, Хань И, Чжан С, Лю З, Ван Ф., Дуань З., Синь С. и Чжан Дж.: Тиреоидит Хашимото как фактор риска папиллярного рака щитовидной железы может улучшить рак прогноз.Отоларингол Head Neck Surg. 148: 396–402. 2013. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

26

Бой Ф., Минерба Л., Лай М.Л., Марциани Б., Figus B, Spanu F, Borghero A и Mariotti S: обе щитовидной железы аутоиммунитет и повышенный уровень ТТГ в сыворотке крови являются независимыми факторами риска для злокачественных новообразований у пациентов с узлами щитовидной железы. Дж Эндокринол Инвестировать. 36:313–320. 2013. PubMed/NCBI

.

27

Боларт К., Хорачек Дж., Холдер Р.Л., Watkinson JC, Sheppard MC и Franklyn JA: Сывороточный тиротропин концентрация как новый предиктор малигнизации узлов щитовидной железы исследуют с помощью тонкоигольной аспирации.J Clin Endocrinol Metab. 91:4295–4301. 2006. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

28

Лау Дж., Иоаннидис Дж. П., Террин Н., Шмид Х. и Олкин I: Дело о вводящей в заблуждение воронке. БМЖ. 333: 597–600. 2006. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

29

Хоссейни С., Пейн Р.Дж., Завави Ф., Млинарек A, Hier MP, Tamilia M и Forest VI: Может ли предоперационный тиреоглобулин уровни антител можно использовать в качестве маркера для хорошо дифференцированной щитовидной железы рак? J Otolaryngol Head Neck Surg.45:312016. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

30

Габалец Ф, Србова Л, Нова М, Ховоркова Е, Хорничова Х., Якубикова И., Рыска А. и Кэп Д.: Влияние тиреоидит Хашимото, уровни ТТГ и антитиреоидные антитела Положительный результат на заболеваемость дифференцированным раком щитовидной железы. Эндокринол пол. 67:48–53. 2016. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

31

Селек А, Цетинарслан Б, Таркун I, Кантюрк Z, Ustuner B и Akyay Z: Аутоиммунитет щитовидной железы: действительно связаны с папиллярной карциномой щитовидной железы? Европейская арка Оториноларингол.274: 1677–1681. 2017. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

32

Донеган Д., МакИвер Б. и Альхесирас-Шимних А: Клинические последствия изменения анализы на антитела к тиреоглобулину во время наблюдения за пациентами при дифференцированном раке щитовидной железы. Эндокр Практ. 20:1032–1036. 2014. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

33

Д’Аурицио Ф., Метус П., Феррари А., Карузо Б., Кастелло Р., Виллалта Д., Стеффан А., Гаспардо К., Песенте Ф., Биззаро N, et al: Определение верхнего референтного предела для тиреоглобулина антител по данным Национальной академии клинических рекомендации по биохимии: сравнение одиннадцати различных автоматизированных методы.Основные моменты аутоиммунных заболеваний. 8:82017. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

34

Пикетт А.Дж., Джонс М. и Эванс С.: Причины несоответствие результатов анализов на антитела к тиреоглобулину. Энн Клин Биохим. 49:463–467. 2012. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

35

Lee IS, Hsieh AT, Lee TW, Lee TI и Chien ЮМ: Ассоциация тиреотропина и аутоиммунного заболевания щитовидной железы при развитии папиллярного рака щитовидной железы.Int J Endocrinol. 2017:59403672017. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

36

Чжан Л, Ли Х, Цзи QH, Чжу YX, Ван ZY, Wang Y, Huang CP, Shen Q, Li DS и Wu Y: Клинические особенности папиллярный рак щитовидной железы у больных тиреоидитом Хашимото из район с высокой распространенностью болезни Хашимото. БМК Рак. 12:6102012. Просмотр статьи : Академия Google : PubMed/NCBI

37

Басер Х., Топалоглу О., Там А.А., Эвранос Б., Алкан А., Сунгу Н., Думлу Э.Г., Эрсой Р. и Чакир Б.: Повышение уровня ТТГ может быть используется как дополнительный фактор риска в прогнозировании злокачественных новообразований в эутиреоидные узлы щитовидной железы, оцениваемые с помощью цитологии на основе Bethesda система.Эндокринный. 53:520–529. 2016. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

38

Фиоре Э., Раго Т., Латрофа Ф., Провензале М.А., Пьяджи П., Делитала А., Скутари М., Басоло Ф., Ди Косцио Г., Грассо Л., и др.: тиреоидит Хашимото связан с папиллярной щитовидной железой карцинома: роль ТТГ и лечения L-тироксином. Эндокр Отношение Рак. 18:429–437. 2011. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

39

Латрофа Ф., Риччи Д., Грассо Л., Витти П., Массерини Л, Басоло Ф, Уголини С, Маскиа Г, Лукаккини А и Pinchera A: характеристика эпитопов тиреоглобулина у пациентов при аутоиммунных и неаутоиммунных заболеваниях щитовидной железы с применением рекомбинантные человеческие моноклональные аутоантитела к тиреоглобулину.Джей Клин Эндокринол Метаб. 93: 591–596. 2008. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

40

Sinclair D: Клиника и лаборатория аспекты аутоантител к щитовидной железе. Энн Клин Биохим. 43:173–183. 2006. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

41

Чжао Л, Лю М, Гао И, Хуан И, Лу Г, Гао Y, Guo X и She B: Гликозилирование сывороточного антитела к тиреоглобулину в больных с заболеваниями щитовидной железы.Евр Дж Эндокринол. 168: 585–592. 2013. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed/NCBI

.

Связь между антитиреоидными антителами и качеством… : JBI Evidence Synthesis

История вопроса

Щитовидная железа и ее гормоны играют важную роль в обмене веществ и росте человека. Щитовидная железа может заболеть и производить слишком мало или слишком много гормонов щитовидной железы. Заболевания щитовидной железы распространены во всем мире, однако эпидемиологические исследования проводились в основном в западных странах.Подсчитано, что 11% европейцев имеют дисфункцию щитовидной железы, но только половина знает о своем состоянии. 1 В Соединенных Штатах (США) около 13 миллионов человек живут с невыявленным заболеванием щитовидной железы. 1 Существуют различные заболевания щитовидной железы, но наиболее распространенным является гипотиреоз. 2 Гипотиреоз – это заболевание, при котором щитовидная железа не вырабатывает достаточное количество гормонов щитовидной железы, поэтому пациенты могут предъявлять жалобы на увеличение веса, выпадение волос, мышечные боли, утомляемость, ухудшение памяти, запоры, сухость кожи, непереносимость холода и депрессивное настроение. 1,2 Менее распространенным, но нередким заболеванием щитовидной железы является гипертиреоз. В этом состоянии наблюдается перепроизводство гормонов щитовидной железы, поэтому пациенты могут проявлять раздражительность, утомляемость, нервозность и непереносимость жары. 2,3 В США основной причиной гипотиреоза является аутоиммунный тиреоидит Хашимото (АИТ), а гипертиреоз – болезнь Грейвса (БГ). 1,3 И АИТ, и БГ являются аутоиммунными заболеваниями, поэтому вполне вероятно, что у этих пациентов будут антитиреоидные антитела (аТА) против железы. 2 Подсчитано, что аутоиммунные заболевания щитовидной железы (ATD) в США встречаются примерно у 5–7% населения. 1,3 Однако частота аТА может быть значительно выше, поскольку не рекомендуется оценивать аТА у пациентов с нормальной функцией щитовидной железы. 4,5

При подозрении на гипотиреоз тиреотропный гормон (ТТГ) является первым лабораторным тестом сыворотки, используемым для оценки функции щитовидной железы. 2,6 Если ТТГ находится в пределах нормы (WNL), текущие рекомендации не рекомендуют дальнейшую оценку, независимо от симптомов.Однако, если уровень ТТГ не соответствует норме, следует определить уровень несвязанного гормона щитовидной железы, тироксина (свободный Т4). Если оба лабораторных показателя отклоняются от нормы, врач может оценить наличие одного или обоих аТА: антитиреоидной пероксидазы (анти-ТПО) и антитиреоглобулина (анти-ТГ). 2,6,7 Однако поставщики первичной медико-санитарной помощи могут не определять уровни аТА, так как рекомендации по лечению не меняются при наличии аТА. В идеале диагноз АИТ ставится на основании высокого уровня ТТГ, низкого уровня свободного Т4 и наличия аТА с лимфоцитарными инфильтратами. 2 Гипертиреоз диагностируют, когда уровень ТТГ в сыворотке ниже нормы или не определяется при повышенном уровне свободного Т4 и/или трийодтиронина (Т3). 3 Пациенты с гипертиреозом и симметрично увеличенной щитовидной железой с недавним началом орбитопатии не нуждаются в дальнейшей оценке причины гиперфункции щитовидной железы, поскольку вероятен диагноз БГ. 3 Левотироксин, синтетическая форма Т4, является терапией первой линии при гипотиреозе и АИТ, целью лечения является достижение клинически эутиреоидного состояния. 5,7 Клинически эутиреоидное состояние определяется как достижение нормальных уровней щитовидной железы (ТТГ, свободного Т4 и Т3) с помощью добавок. 1,2 Возможным лечением гипертиреоза, вызванного БГ, является радиоактивный йод, который останавливает выработку гормона щитовидной железы. 3 Как только уровни щитовидной железы достигают WNL, пациенты считаются клинически эутиреоидными, несмотря на наличие затянувшихся симптомов. 2,5 Интересно, что по крайней мере 10% пациентов с заболеваниями щитовидной железы продолжают испытывать стойкие симптомы даже после приема добавок и нормализации уровня гормонов щитовидной железы. 8

Медицинские работники заметили взаимосвязь между заболеваниями щитовидной железы и плохим контролем симптомов. Плохой контроль над симптомами или дистресс-симптом (СД) — это степень физического или психического расстройства, печали или страданий, вызванных определенным заболеванием. 9-11 Симптом дистресса — это явление, которое влияет на все аспекты жизни человека, такие как курс лечения, настроение и мыслительный процесс и, в конечном счете, на выживание. 11 Это явление наблюдается у пациентов с заболеваниями щитовидной железы даже при правильном лечении и нормальных уровнях ТТГ и Т4. 12 Исследователи обнаружили, что любая форма СР напрямую влияет на качество жизни (КЖ). 13 Нарушение когнитивной функции и депрессия являются примерами СР. У пациентов с пролеченными заболеваниями щитовидной железы нарушено психологическое благополучие и плохая когнитивная функция, что напрямую влияет на их качество жизни. 9 Этиология СД при заболеваниях щитовидной железы плохо изучена. Даже при эутиреозе пациенты с АИТ и БГ чаще испытывают плохой контроль симптомов, чем пациенты с неаутоиммунными формами заболевания. 4,14-16 Было высказано предположение, что пациенты с АИТ и БГ чаще страдают СЗ, чем пациенты с другими заболеваниями щитовидной железы. Следовательно, ATD имеют худшие показатели качества жизни по сравнению с теми, у кого нет aTA. 9 Было высказано предположение, что aTA может быть причиной SD у пациентов с ATD. 5,15 Таким образом, патогенез АТЗ может быть более сложным, и аТА может иметь патогенную природу, что негативно влияет на заболеваемость в этой популяции пациентов. 17-19

Одно исследование показало, что физическое и психологическое благополучие у пациентов с аТА было хуже, чем у пациентов без аТА, несмотря на эутиреоидное состояние в обеих группах. 9 Многочисленные исследования выявили более высокую распространенность депрессии у женщин с эутиреоидным АИТ. 20,21 Наличие аТА может быть маркером уязвимости к депрессии, потому что аТА положительно связаны с депрессией. 22 Кроме того, было высказано предположение, что более высокие уровни аТА напрямую связаны со степенью СЗ. Увеличение SD и снижение качества жизни наблюдались при клинически эутиреоидной ATD. 9,13,15,16 Группа исследователей отметила ухудшение состояния здоровья у пациентов с уровнями аТА в два раза превышающими референсный диапазон по сравнению с пациентами с уровнями аТА ниже установленного порогового уровня. 13 Более того, повышенные концентрации аТА были независимо связаны с депрессией, не связанной с дисфункцией щитовидной железы. 23 Недавнее исследование показало, что более чем у половины пациентов с аномально высоким уровнем аТА наблюдается значительное снижение концентрации внимания и когнитивных функций. 19 У пациентов с более высоким уровнем аТА показатели физического и психологического благополучия хуже, чем у пациентов с более низким уровнем аТА. 9 Однако более раннее исследование показало корреляцию между заболеванием щитовидной железы и снижением когнитивной функции, независимо от aTA. 12 Тем не менее, феномен плохого контроля симптомов у пациентов с заболеваниями щитовидной железы был изучен и задокументирован, поэтому взаимосвязь между качеством жизни и SD, например, когнитивная дисфункция и депрессия, может быть постоянной борьбой для людей, живущих с заболеваниями щитовидной железы, особенно при наличии АТА. 9

Различные инструменты могут количественно определять самочувствие и оценивать качество жизни у пациентов с хроническими заболеваниями. Целесообразно измерять КЖ и SD у этой популяции пациентов, поскольку хронические заболевания редко представляют угрозу для жизни.Таким образом, план ухода за пациентами с хроническими заболеваниями заключается в оптимизации качества жизни, так как больше беспокоит нетрудоспособность, а не долголетие. Качество жизни широко изучалось у пациентов с хроническими заболеваниями. Однако до недавнего времени КЖ не изучалось у пациентов с хроническими доброкачественными заболеваниями щитовидной железы. Исследования с использованием опросников качества жизни, связанного со здоровьем (HRQoL), показали, что у пациентов, получавших лечение щитовидной железы, ухудшалось самочувствие независимо от функции щитовидной железы. 12,14 Субъективная оценка того, как медицинская ситуация влияет на физическую, эмоциональную и социальную функцию человека, измеряется с помощью оценок HRQoL. 15 Общий краткий опросник 36 (SF-36) измеряет восемь аспектов здоровья и популярен, потому что он надежен при оценке качества жизни HRQoL у хронически больных пациентов. 9 Первый утвержденный вопросник HRQoL для щитовидной железы, ThyPRO, был разработан для отслеживания улучшения симптомов и улучшения качества жизни. 16,24 Недавний систематический обзор вопросников HRQoL, используемых у пациентов с щитовидной железой, показал, что некоторые опросы лучше в зависимости от типа дисфункции щитовидной железы. 25 Детская популяция также подвержена ATD, поэтому вопросники, которые оценивают качество жизни HR, были утверждены для этой возрастной группы. PedsQL 4.0 — это общий инструмент HRQoL, который содержит 23 элемента и охватывает четыре измерения: физическое, эмоциональное, социальное и школьное функционирование. 26 Длительные симптомы, такие как нарушение когнитивной функции, депрессия и другие формы СЗ, могут влиять на качество жизни, поэтому их влияние оценивали у пациентов с заболеваниями щитовидной железы. Когнитивную функцию можно оценить с помощью Задачи сравнения памяти (MCT), которая представляет собой утвержденный опросник, оценивающий память, исполнительную функцию и внимание. 12 Подшкала Rand-36 использовалась для оценки депрессии у пациентов с заболеваниями щитовидной железы. 12 Симптом дистресса можно измерить с помощью контрольного списка симптомов-90-пересмотренного (SCL-90-R), который представляет собой пятибалльную многомерную шкалу оценки симптомов. 9 Все эти инструменты были разработаны для помощи исследователям и поставщикам медицинских услуг в оценке влияния симптомов на пациентов и их качество жизни.

В мае 2017 года рецензенты провели поиск в базе данных JBI по систематическим обзорам и отчетам о реализации , Кокрановской библиотеке, PROSPERO и библиотеке Кэмпбелла и не смогли найти систематический обзор по этой теме.Несмотря на то, что известно о заболеваниях щитовидной железы, многие пациенты, страдающие заболеваниями щитовидной железы, все еще испытывают плохой контроль над симптомами. 15 Плохой контроль симптомов увеличивает риск развития сопутствующих заболеваний, поэтому периодическая оценка длительных симптомов, таких как нарушение когнитивной функции или депрессия, в клинических условиях может значительно улучшить общее самочувствие и продолжительность жизни. У пациентов с клинически эутиреоидной ATD наблюдались повышенная SD и сниженное качество жизни. 9,13,15,16 Это явление может быть связано с отсутствием знаний об аутоиммунных компонентах заболеваний. 13 Если существует связь между aTA, QoL и SD, текущие рекомендации могут быть устаревшими. Рекомендуемые методы диагностики и лечения заболеваний щитовидной железы могут не подходить для пациентов с аТА. Таким образом, основное внимание в этом обзоре уделяется оценке взаимосвязи между aTA и качеством жизни у пациентов с заболеваниями щитовидной железы. Намерение состоит в том, чтобы выявить проблемы, связанные с хорошо известным заболеванием, побудить к дальнейшим исследованиям, чтобы раскрыть этиологию симптоматического дистресса, несмотря на адекватное лечение, и в конечном итоге улучшить качество жизни у пациентов с заболеваниями щитовидной железы.

Критерии включения

участников

В этом обзоре будут рассмотрены исследования, включающие пациентов всех возрастов и национальностей из всех стран, у которых были диагностированы заболевания щитовидной железы. Заболевания щитовидной железы могут включать, помимо прочего, аутоиммунный тиреоидит Хашимото, гипотиреоз и/или болезнь Грейвса. Будут рассмотрены как женщины, так и мужчины. В этот обзор не будут включены исследования, в которых оцениваются пациенты, которые не находятся в эутиреоидном состоянии или не находятся под клиническим контролем с помощью лекарств или других форм лечения.

Экспозиция

Феномен, представляющий интерес в этом обзоре, представляет собой наличие или отсутствие антитиреоидных антител у пациентов с заболеваниями щитовидной железы. Наличие или отсутствие антитиреоидных антител выявляется с помощью физических тестов, таких как образцы крови. Специфические антитиреоидные антитела, вероятно, включают антитела к тиреопероксидазе и/или антитела к тиреоглобулину.

Исходы

Интересующий результат – качество жизни.Вторичные исходы включают: симптомы дистресса, когнитивные функции и депрессию, которые могут повлиять на качество жизни. Изменение качества жизни, связанного со здоровьем, можно определить с помощью ряда методов, включая анкеты и интервью, которые позволяют оценить и количественно определить симптомы. Результаты будут измеряться с помощью анкет или опросов, включая, помимо прочего: Study Short Form-36, ThyPRO, подшкалу Rand-36, PedsQL 4.0, задачу сравнения памяти и/или контрольный список симптомов-90-пересмотренная шкала.

Типы исследований

В этом обзоре будут рассмотрены аналитические обсервационные исследования, включая проспективные и ретроспективные когортные исследования, исследования случай-контроль и аналитические перекрестные исследования. Также могут быть включены рандомизированные контролируемые исследования, если в них сообщается о связи между антитиреоидными антителами и качеством жизни. Будут включены исследования, опубликованные на английском языке. Исследования, опубликованные с 1956 года, будут включены, поскольку именно тогда были обнаружены первые антитела к щитовидной железе. 27

Стратегия поиска

Стратегия поиска будет направлена ​​на поиск как опубликованных, так и неопубликованных исследований. Был предпринят первоначальный ограниченный поиск в PubMed и Embase для выявления статей по этой теме с последующим анализом текстовых слов, содержащихся в заголовках и аннотациях, а также индексных терминов, используемых для описания этих статей. Это послужило основой для разработки стратегии поиска, включающей ключевые слова и термины указателя, которые будут адаптированы для каждого источника информации.Предлагаемая стратегия поиска для каждой базы данных подробно описана в Приложении I. Список ссылок всех исследований, отобранных для критической оценки, будет проверен на наличие дополнительных исследований.

Базы данных для поиска включают:

CINAHL

Посольство

ХаПИ

PsycINFO

ПабМед

Скопус

Академический поиск Премьер

Регистры испытаний для поиска включают:

ClinicalTrials.правительство

Базы данных клинических испытаний Национального института здравоохранения (NIH)

Кокрановский центральный регистр контролируемых исследований

Поиск неопубликованной литературы и неопубликованных исследований будет включать:

MedNar

Академия Google

Диссертации и тезисы ProQuest

Исходные ключевые слова, которые следует использовать:

  • заболевания щитовидной железы, гипотиреоз, гипертиреоз, тиреоидит Хашимото, аутоиммунное заболевание щитовидной железы, болезнь Грейвса, эутиреоид
  • антитела к щитовидной железе, антитела к тиреопероксидазе, антитела к тиреоглобулину, аутоантитела к щитовидной железе
  • качество жизни, качество жизни, связанное со здоровьем, качество жизни, связанное с щитовидной железой, симптоматическое расстройство, психологическое благополучие, когнитивная функция, депрессия

Выбор исследования

После поиска все найденные цитаты будут сопоставлены и загружены в EndNote (Clarivate Analytics, Пенсильвания, США), а дубликаты удалены.Затем названия и аннотации будут проверены двумя независимыми рецензентами на соответствие критериям включения в рецензию. Исследования, которые могут соответствовать критериям включения, будут извлечены полностью, а их детали импортированы в Систему унифицированного управления, оценки и обзора информации Института Джоанны Бриггс (JBI SUMARI). Полный текст выбранных исследований будет извлечен и детально оценен двумя независимыми рецензентами в соответствии с критериями включения. Полнотекстовые исследования, не соответствующие критериям включения, будут исключены, а причины исключения будут указаны в приложении к итоговому отчету о систематическом обзоре.Включенные исследования пройдут процесс критической оценки. Результаты поиска будут полностью представлены в итоговом отчете и представлены в виде блок-схемы PRISMA. Любые разногласия, возникающие между рецензентами, разрешаются путем обсуждения или с третьим рецензентом.

Оценка методологического качества

Выбранные исследования будут подвергнуты критической оценке двумя независимыми рецензентами на уровне исследований на предмет методологического качества обзора с использованием стандартизированных инструментов критической оценки Института Джоанны Бриггс для оценки количественных исследований. 28 Любые разногласия, возникающие между рецензентами, будут разрешаться путем обсуждения и, при необходимости, с третьим рецензентом.

Извлечение данных

Данные будут извлечены из статей, включенных в обзор, с использованием стандартизированных инструментов извлечения данных в JBI SUMARI двумя независимыми рецензентами. 28 Извлеченные данные будут включать конкретные сведения об интересующем воздействии, включая различные категории воздействия, если применимо, популяции, методы исследования и результаты или зависимые переменные, имеющие значение для вопроса обзора и конкретных целей.Любые разногласия, возникающие между рецензентами, разрешаются путем обсуждения или с третьим рецензентом. С авторами статей свяжутся для запроса отсутствующих или дополнительных данных, если это необходимо.

Синтез данных

Количественные данные, по возможности, будут объединены в статистическом мета-анализе с использованием JBI SUMARI. Все результаты подлежат двойному вводу данных. Величины эффекта, выраженные в виде коэффициентов корреляции или разности средних, вместе с 95% доверительными интервалами будут рассчитаны для анализа.Неоднородность будет оцениваться статистически с использованием стандартных тестов хи-квадрат и I 2 . Выбор модели (случайные или фиксированные эффекты) и метода метаанализа будет основываться на руководстве Tufunaru et al. 2015. 29 Анализы подгрупп будут проводиться при наличии достаточных данных для изучения сопутствующих заболеваний, возраста участника на момент оценки качества жизни, уровня антитиреоидных антител, наличия определенных антител и продолжительности заболевания.Анализы чувствительности будут проводиться для проверки принятых решений относительно наличия антитиреоидных антител на КЖ. Там, где объединение статистических данных невозможно, результаты будут представлены в описательной форме, включая таблицы и рисунки, чтобы помочь в представлении данных, где это уместно. График воронки будет создан для оценки предвзятости публикации, если в метаанализ включено 10 или более исследований. Статистические тесты на асимметрию графика воронки (тест Эггера, тест Бегга, тест Харборда) будут выполняться там, где это необходимо.

Оценка достоверности

В этом обзоре будет использоваться подход Grade of Assessment, Development and Evaluation (GRADE) для оценки уверенности в качестве доказательств, а результаты будут представлены в сводной таблице результатов, созданной с помощью GRADEPro.

Благодарности

Этот систематический обзор литературы проводится в рамках требований для получения степени доктора сестринского дела (DNP).

Приложение I: Стратегия поиска

PubMed

  • 1. «качество жизни» ИЛИ QOL ИЛИ HRQOL ИЛИ «качество жизни, связанное со здоровьем» ИЛИ «показатель качества * » ИЛИ симптом * ИЛИ благополучие ИЛИ ThyPRO ИЛИ Качество жизни Связанное с этим качество жизни ИЛИ Качество жизни, связанное с щитовидной железой ИЛИ «Симптом Дистресс» ИЛИ «Симптом Опыт» ИЛИ «психологическое благополучие» ИЛИ «когнитивная функция» ИЛИ «депрессия»
  • 2.щитовидная железа * или hashimoto * или eootyroid * или hipothyroid * или hypothyroid * или hyperthyroid * или «hashimoto thyrodititis» или могила * или «аутоиммунная щитовидная железа * » или «autoMunity щитовидной железы» или «щитовидная железа» Нарушения» ИЛИ Гипотиреоз ИЛИ Гипертиреоз ИЛИ «Тиреоидит Хашимото» ИЛИ «функция щитовидной железы» ИЛИ «дисфункция щитовидной железы» ИЛИ «Аутоиммунное заболевание щитовидной железы» ИЛИ «Болезнь Грейвса» ИЛИ Эутиреоид
  • 3. «Антитела к щитовидной железе» ИЛИ «Антитела к тиреоидной пероксидазе» ИЛИ «Антитела к тиреоглобулину» ИЛИ «Аутоантитела к щитовидной железе» ИЛИ антитела ИЛИ к тироидным ИЛИ к аутоантителам ИЛИ к ТПО ИЛИ к тиреопероксидазе ИЛИ к тпо ИЛИ к тг ИЛИ к тиреоглобулину ИЛИ антитело
  • 4.№1, №2 и №3

Cinahl Cinahl

  • 1. (MH щитовидная железа * или Ti щитовидная железа * или болезнь * или болезнь щитовидной железы * или Ti щитовидная заболевание * или дисфункция * ИЛИ расстройство )
  • 2. Гипотиреоз или Hypothyro * или Myxedema или SubaCute Thyro * или (первичная гипотир * ) или (Overt Hypothyro * ) или (Non * AutoMimune * Щита) или [ MH Antibod * или МШ-щитовидная железа * или MH Thyroiditis или Tpo или щитовидная пероксидаза или тироглобулин или антитело или антитело тиреоглобулина или Hashimoto * или (аутоиммунная болезнь * ) или (аутоиммунное расстройство * ) или ( аутоиммунный тиреоидит) или (аутоиммунная щитовидная железа * ) или тиреоидит или хэшимото или hashimoto * или hashimoto + или lymphotic * или (лимпфоцитарная щитовидная железа * ) или (лимфоматозные тиреоиды) или lymphomat * или Ti Antibod * ИЛИ AB антитела ИЛИ аутоантитела ИЛИ анти- ИЛИ Хашимото струма ИЛИ синдром Хашимото ИЛИ тяжелые ∗ 5 4
  • 5 ]
  • 5
  • 3.качество жизни ИЛИ MH качество жизни ИЛИ TI качество жизни ИЛИ качество жизни, связанное со здоровьем ИЛИ TI качество жизни, связанное со здоровьем ИЛИ качество жизни, связанное со здоровьем ИЛИ TI качество жизни, связанное со здоровьем, ИЛИ QoL ИЛИ качество жизни, связанное со здоровьем щитовидной железы жизнь ИЛИ качество жизни, связанное со здоровьем щитовидной железы ИЛИ качество жизни ИЛИ TI качество жизни ИЛИ TI качество жизни, связанное со здоровьем щитовидной железы ИЛИ thyPRO ИЛИ качество жизни, связанное с щитовидной железой ИЛИ AB thyPRO ИЛИ TI thyPRO ИЛИ симптоматический дистресс ИЛИ (симптоматический дистресс) ИЛИ (симптом нагрузка) ИЛИ (симптом дистресс) ИЛИ (SF-36) ИЛИ (анкета sf-36) ИЛИ когнитивная функция ИЛИ депрессия
  • 4.№1, №2 и №3

Эмбаза

  • 2. ‘щитовидная железа’/exp ИЛИ ‘щитовидная железа’ ИЛИ ​​’щитовидная железа’/exp ИЛИ ‘щитовидная железа’ ИЛИ ​​’гипотиреоз’/exp ИЛИ ‘гипотиреоз’ ИЛИ ​​’гипертиреоз’/exp ИЛИ ‘гипертиреоз’ ИЛИ ​​’диагноз гипотиреоза’/ exp ИЛИ ‘диагноз гипотиреоза’ ИЛИ ​​’осложнения гипотиреоза’/exp ИЛИ ‘осложнения гипотиреоза’ ИЛИ ​​’болезнь хашимото’/exp ИЛИ ‘болезнь хашимото’ ИЛИ ​​’болезнь Грейвса’/exp ИЛИ ‘болезнь Грейвса’ ИЛИ ​​’аутоиммунный тиреоидит’/exp ИЛИ ‘аутоиммунный тиреоидит’ ИЛИ ​​’явный гипотиреоз’/exp ИЛИ ‘явный гипотиреоз’ ИЛИ ​​’явный гипертиреоз’/exp ИЛИ ‘явный гипертиреоз’ ИЛИ ​​’субклинический гипотиреоз’/exp ИЛИ ‘субклинический гипотиреоз’ ИЛИ ​​’субклинический гипертиреоз’/exp ИЛИ ‘субклинический гипертиреоз ИЛИ ‘субклиническое заболевание щитовидной железы’/exp ИЛИ ‘субклиническое заболевание щитовидной железы’ ИЛИ ​​’хронический тиреоидит’/exp ИЛИ ‘хронический тиреоидит’ ИЛИ ​​’осложнения тиреоидита’/exp ИЛИ ‘осложнения тиреоидита’ ИЛИ ​​’тиреоидит’/exp ИЛИ ‘тиреоидит’ ИЛИ «иммунология тиреоидита»/exp ИЛИ «иммунология тиреоидита» ИЛИ ‘диагноз тиреоидита’/exp ИЛИ ‘диагноз тиреоидита’ ИЛИ ​​’микседема’/exp ИЛИ ‘микседема’ ИЛИ ​​’осложнения микседемы’/exp ИЛИ ‘осложнения микседемы’ ИЛИ ​​’диагноз микседемы’/exp ИЛИ ‘диагноз микседемы’ ИЛИ ​​’аутоиммунный гипотиреоз’ /exp ИЛИ «аутоиммунный гипотиреоз» ИЛИ «аутоиммунный гипертиреоз»/exp ИЛИ «аутоиммунный гипертиреоз»
  • 3.«качество жизни» ИЛИ «краткая форма 36» ИЛИ «оценка когнитивных функций» ИЛИ «когнитивный дефект» ИЛИ «шкала дистресса симптомов» ИЛИ «опросник качества жизни, связанный со здоровьем» ИЛИ типро ИЛИ «оценка памяти» ИЛИ «депрессия» ИЛИ «симптом» бедствие
  • 4. №1 И №2 И №3

psycinfo

  • 1. (((de щитовидная железа или щитовидная железа * или «болезнь щитовидной железы» или «дисфункция щитовидной железы * » или «расстройство щитовидной железы * » или гипотиреоз или гипотиро * или myxedema Или «SubaCute thyro * » или «первичный гипотир * » или «Overt hypothyro * » или «Non * autobimune * щитовидная железа * » или «hashimoto * Struma» или «Hashimoto синдром ИЛИ «серьезный » ИЛИ хашимото ИЛИ «аутоиммунный тиреоидит» ИЛИ «аутоиммунный тиреоидит» ИЛИ тиреоидит ИЛИ «лимфоцитарный тиреоидит» ИЛИ «лимфоматозный тиреоидит» ИЛИ «тиреоидит ИЛИ» ИЛИ «Хронический аутоиммунный тиреоидит» ИЛИ «Аутоиммунный тиреоидит» ИЛИ «Аутоиммунный гипотиреоз» ИЛИ гипертиреоз ИЛИ эутиреоид
  • 2.(((DE антитело ИЛИ «тиреоидное антитело» ИЛИ ТПО ИЛИ «тиреоидная пероксидаза» ИЛИ тиреоглобулин ИЛИ «тиреоглобулиновое антитело» ИЛИ «TI антитело» ИЛИ аутоантитело ИЛИ «антитиреоглобулин» ИЛИ «антитиреоидная пероксидаза» ИЛИ «Антитела к тироидной пероксидазе» ИЛИ «Антитела к ТПО» ИЛИ «анти-ТПО» ИЛИ «анти-Tg»
  • 3. (((DE качество жизни» ИЛИ «качество жизни, связанное со здоровьем» ИЛИ «качество жизни, связанное со здоровьем» ИЛИ КЖ ИЛИ «качество жизни, связанное со здоровьем, связанное с щитовидной железой» ИЛИ «качество жизни, связанное со здоровьем, связанное с щитовидной железой» of-life» ИЛИ «качество жизни» ИЛИ «качество жизни, связанное со здоровьем щитовидной железы» ИЛИ thyPRO ИЛИ «качество жизни, связанное с щитовидной железой» ИЛИ «психическое благополучие» ИЛИ «физическое благополучие» ИЛИ «Физическое благополучие» ИЛИ «психическое благополучие» ИЛИ «психическое благополучие » ИЛИ «Восприятие здоровья» ИЛИ «Контрольный список симптомов-90-пересмотренный» ИЛИ «SCL-90-R» ИЛИ «Показатель исхода, сообщаемый пациентом» ИЛИ « Сообщаемый пациентом критерий исхода» ИЛИ «Аффективные расстройства» ИЛИ Когниция ИЛИ «Психосоциальное благополучие» ИЛИ «Психическое здоровье» ИЛИ «Физическое здоровье» ИЛИ «Клинические переменные» ИЛИ HRQOL ИЛИ «GO-QOL» ИЛИ ThyTSQ ИЛИ «когнитивная функция» ИЛИ депрессия ИЛИ «симптом дистресса»
  • 4.№1, №2 и №3

Scopus

  • 1. ВСЕ (щитовидная железа ИЛИ гипотиреоз ИЛИ * щитовидная железа * ИЛИ эутиреоид ИЛИ тиреоидит ИЛИ «аутоиммунный тиреоидит» ИЛИ хашимото)
  • 2. ВСЕ («качество жизни» ИЛИ «симптоматический дистресс» ИЛИ «когнитивная функция» ИЛИ депрессия ИЛИ внимание)
  • 3. ВСЕ («антитела к щитовидной железе» ИЛИ пероксидаза ИЛИ «анти-ТПО» «аутоантитела к щитовидной железе» ИЛИ «антитела к щитовидной железе» ИЛИ антитело )
  • 4.№1, №2 и №3

HaPI

  • 1. Щитовидная железа ИЛИ «заболевание щитовидной железы» ИЛИ «заболевание щитовидной железы» ИЛИ «болезнь Хашимото» ИЛИ «аутоиммунный тиреоидит» ИЛИ гипертиреоз ИЛИ гипотиреоз ИЛИ Грейвса ИЛИ «болезнь Грейвса»
  • 2. «качество жизни» ИЛИ «благополучие» ИЛИ «благополучие» ИЛИ «качество жизни, связанное со здоровьем» Или «когнитивная функция» ИЛИ «депрессия» ИЛИ «симптоматическое расстройство»
  • 3. №1 И №2

МедНар

  • 1.щитовидная железа
  • 2. антитело
  • 3. №1 И №2

ProQuest Dissertations and Thesis

  • 1. щитовидная железа ИЛИ «заболевание щитовидной железы» ИЛИ «заболевание щитовидной железы » ИЛИ гипотиреоз ИЛИ «аутоиммунный тиреоидит» ИЛИ «аутоиммунный тиреоидит» ИЛИ тиреоидит ИЛИ «тиреоидит Хашимото» ИЛИ ИЛИ «Хронический аутоиммунный тиреоидит» ИЛИ «Аутоиммунный тиреоидит» ИЛИ «Аутоиммунный гипотиреоз» ИЛИ «Аутоиммунный гипертиреоз» ИЛИ Болезнь Грейвса
  • 2.«антитела к щитовидной железе» ИЛИ «тиреоидная пероксидаза» ИЛИ «антитиреоидная пероксидаза» ИЛИ «антитела к щитовидной пероксидазе»
  • 3. «sf-36 качество жизни, связанное со здоровьем» ИЛИ «качество жизни» ИЛИ «качество жизни, связанное со здоровьем» ИЛИ «качество жизни, связанное со здоровьем, связанное с щитовидной железой» ИЛИ «качество жизни, связанное с щитовидной железой» ИЛИ «Симптом Контрольный список-90-пересмотренный» ИЛИ «Показатель исхода, сообщаемый пациентом» ИЛИ «Показатель исхода, сообщаемый пациентом» ИЛИ «когнитивная функция» ИЛИ депрессия ИЛИ «симптоматический дистресс»
  • 4.№1 И №2 №3

Базы данных клинических испытаний Национального института здравоохранения (NIH)

  • 1. щитовидная железа
  • 2. качество жизни
  • 3. антитело
  • 4. №1, №2 и №3

ClinicalTrials.gov

  • 1. щитовидная железа
  • 2. антитело
  • 3. №1 И №2

Кокрановский центральный регистр контролируемых исследований

  • 1.Щитовидная железа
  • 2. Качество жизни ИЛИ благополучие ИЛИ качество жизни, связанное со здоровьем
  • 3. Антитело
  • 4. №1, №2 и №3

Academic Search Premier

  • 1. щитовидная железа ИЛИ Хашимото ИЛИ гипотиреоз ИЛИ гипертиреоз ИЛИ Грейвс ИЛИ эутиреоз
  • 2. антитело ИЛИ пероксидаза ИЛИ тиреоглобулин
  • 3.качество жизни или благополучие или благополучие или качество жизни, связанное со здоровьем ИЛИ когнитивная функция ИЛИ депрессия ИЛИ симптом дистресса
  • 4. №1, №2 и №3

Google Scholar

  • 1. Щитовидная железа ИЛИ Хашимото ИЛИ Грейвса ИЛИ гипотиреоз ИЛИ тиреоидит ИЛИ гипертиреоз
  • 2. «качество жизни» ИЛИ QOL ИЛИ HRQOL ИЛИ ThyPRO ИЛИ «качество жизни, связанное со здоровьем» ИЛИ «когнитивная функция» ИЛИ депрессия ИЛИ «симптоматическое расстройство»
  • 3.антитело ИЛИ антитиреоидная пероксидаза ИЛИ антитиреоглобулин ИЛИ антитиреоидные антитела
  • 4. №1, №2 и №3

Каталожные номера

1. Гармендиа М.А., Сантос П.С., Гильен-Грима Ф., Галофре Дж.К. Заболеваемость и распространенность дисфункции щитовидной железы в Европе: метаанализ. J Clin Endocrinol Metab 2014; 99 3:923–931. 2. Фицджеральд П.А. Пападаки М.А., Макфи С.Дж. Эндокринные расстройства. Текущая медицинская диагностика и лечение 55-е изд. Нью-Йорк: McGraw-Hill Education; 2016.1078–1189. 3. Росс Д.С., Берч Х.Б., Купер Д.С., Гринли С.М., Лаурберг П., Майя А.Л., Ривкис С.А., Сэмюэлс М., Соса Дж.А., Стэн М.Н., Уолтер М.А. Щитовидная железа 2016; 26 10:1343–1421. 4. Bianchi GP, Zaccheroni V, Solaroli E, Vescini F, Cerutti R, Zoli M, Marchesini G. Качество жизни, связанное со здоровьем, у пациентов с заболеваниями щитовидной железы. Qual Life Res 2004; 13 1:45–54. 5. Антонелли А., Феррари С.М., Коррадо А., Ди Доменикантонио А., Фаллахи П. Аутоиммунные заболевания щитовидной железы. Аутоиммунная версия 2015 г.; 14 2:174–180. 6. Джеймсон Дж., Мандель С.Дж., Витман А.П. Каспер Д., Фаучи А., Хаузер С., Лонго Д., Джеймсон Дж., Лоскальцо Дж. Заболевания щитовидной железы. McGraw-Hill Education, Принципы внутренней медицины Харрисона [Интернет] . Соединенные Штаты Америки: 2015 г. 7. Николл Д., Лу С., Пиньоне М., МакФи С.Дж. Николл Д., Лу С., Пиньоне М., МакФи С.Дж. Алгоритмы диагностики. The McGraw-Hill Companies Inc, Карманный справочник по диагностическим тестам [Интернет] .Соединенные Штаты Америки: 2012 г. 8. Промбергер Р., Герман М., Палликуннель С.Дж., Зееманн Р., Меузель М., Отт Дж. Качество жизни после операции на щитовидной железе у женщин с доброкачественным эутиреоидным зобом: влияющие факторы, включая тиреоидит Хашимото. Am J Surg 2014; 207 6:974–979. 9. Муссиг К., Кунле А., Зауберлих А.Л., Вайнерт С., Этофер Т., Саур Р. и соавт. Положительный результат на антитела к пероксидазе щитовидной железы связан с симптоматическим дистрессом у пациентов с тиреоидитом Хашимото. Brain Behav Immun 2012; 26 4: 559–563. 10. Ротонди М., де Мартинис Л., Коперчини Ф., Пигнатти П., Пирали Б., Гилотти С. и соавт. Сывороточный негативный аутоиммунный тиреоидит имеет более мягкую клиническую картину по сравнению с классическим тиреоидитом Хашимото. Eur J Endocrinol 2014; 171 1:31–36. 11. Армстронг Т.С. Симптоматический опыт: анализ концепции. Онкол НурсФорум 2003; 30 4:601–606. 12. Веккинг Э.М., Аппельхоф Б.С., Флиерс Э., Шене А.Х., Хюйсер Дж., Тийссен Дж.Г. и соавт.Когнитивное функционирование и самочувствие у пациентов с эутиреозом, получающих заместительную терапию тироксином при первичном гипотиреозе. Eur J Endocrinol 2005; 153 6:747–753. 13. Отт Дж., Промбергер Р., Кобер Ф., Нойхольд Н., Теа М., Хубер Дж. К. и соавт. Тиреоидит Хашимото влияет на нагрузку симптомов и качество жизни, не связанное с гипотиреозом: проспективное исследование случай-контроль у женщин, перенесших тиреоидэктомию по поводу доброкачественного зоба. Щитовидная железа 2011; 21 2:161–167. 14.Winther KH, Cramon P, Watt T, Bjorner JB, Ekholm O, Feldt-Rasmussen U, et al. Специфическое для заболевания, а также общее качество жизни сильно страдает при аутоиммунном гипотиреозе и улучшается в течение первых шести месяцев терапии левотироксином. PLoS One 2016; 11 6:e0156925. 15. Уйсал Х.Б., Айхан М. Аутоиммунитет влияет на качество жизни, связанное со здоровьем, у пациентов с тиреоидитом Хашимото. Kaohsiung J Med Sci 2016; 32 8:427–433. 16. Ватт Т., Хегедус Л., Бьорнер Дж. Б., Гроенвольд М., Боннема С. Дж., Расмуссен А. К. и соавт.Является ли аутоиммунитет щитовидной железы сам по себе определяющим фактором качества жизни у пациентов с аутоиммунным гипотиреозом? Eur Thyroid J 2012; 1 3:186–192. 17. Дардано А., Баццичи Л., Бомбардьери С., Монзани Ф. Симптомы эутиреоидного тиреоидита Хашимото: играет ли роль сам аутоиммунитет? Щитовидная железа 2012; 22 3:334–335. 18. Бьянчин С., Коффин С., Виадер Ф., Руф Дж., Карайон П., Потье Ф. и соавт. Антитела к тиреопероксидазе у пациентов с энцефалопатией Хашимото связываются с астроцитами мозжечка. Журнал нейроиммунологии 2007; 192 (1–2): 13–20. 19. Лейхе Т., Муссиг К., Вейнерт С., Ласке С., Харинг Х.У., Саур Р. и соавт. Увеличение числа случаев слабости при проверке внимания у пациентов с тиреоидитом Хашимото по сравнению с пациентами с другими заболеваниями щитовидной железы. Психоневроэндокринология 2008; 33 10:1432–1436. 20. Гийнас А.М., Угуз Ф., Аскин Р. и соавт. Распространенность депрессии и тревожных расстройств у пациентов с эутиреоидным тиреоидитом Хашимото: сравнительное исследование. Gen Hosp Psychiatry 2014; 36 1:95–98. 21. Кирим С., Кескек С.О., Коксаль Ф. и соавт. Депрессия у больных эутиреоидным хроническим аутоиммунным тиреоидитом. Endocr J 2012; 59 8:705–708. 22. Ван де Вен А.С., Мунтьеверф Дж.В., Нетеа-Майер Р.Т., де Вегт Ф., Росс Х.А., Свип Ф.К. и др. Связь между функцией щитовидной железы, аутоиммунитетом щитовидной железы и факторами состояния и чертами депрессии. Acta Psychiatr Scand 2012; 126 5:377–384. 23.Pop VJ, Maartens LH, Leusink G, van Son MJ, Knottnerus AA, Ward AM и др. Связаны ли аутоиммунная дисфункция щитовидной железы и депрессия? J Clin Endocrinol Metab 1998; 83 9:3194–3197. 24. Ватт Т., Крамон П., Хегедус Л., Бьорнер Дж. Б., Боннема С. Дж., Расмуссен А. К. и соавт. Измерение качества жизни, связанное с щитовидной железой, ThyPRO обладает хорошей чувствительностью и способностью обнаруживать соответствующие эффекты лечения. J Clin Endocrinol Metab 2014; 99 10:3708–3717. 25. Вонг К.К., Ланг Б.Х., Лам К.Л.Систематический обзор качества инструментов для оценки качества жизни, связанных со здоровьем, для щитовидной железы рекомендует ThyPRO для пациентов с доброкачественными заболеваниями щитовидной железы. J Clin Epidemiol 2016; 78:63–72. 26. Спиркова А., Дусаткова П., Печкова М., Колоускова С., Снайдерова М., Оберманнова Б. и соавт. Лечение аутоиммунного заболевания щитовидной железы связано со снижением качества жизни среди молодых людей с диабетом 1 типа. Int J Endocrinol 2015; 2015:185859doi:10.1155/2015/185859.27. Ройтт И.М., Дониач Д., Кэмпбелл П.Н., Воан Хадсон Р. Аутоантитела при болезни Хашимото: лимфаденоидный зоб. Ланцет 1956; 268 6947:820–821. 28. Институт Джоанны Бриггс. Руководство для рецензентов Института Джоанны Бриггс: издание 2014 г. Австралия: Институт Джоанны Бриггс; 2014. 29. Туфанару С., Манн З., Стефенсон М., Ароматарис Э. Метаанализ фиксированных или случайных эффектов? Общие методологические проблемы в систематических обзорах эффективности. Int J Evid Based Healthc 2015; 13 3:196–207.

Любопытный случай дисфункции щитовидной железы и моноклональное антитело | SFEBES2016 | Общество эндокринологии BES 2016

Алемтузумаб — первое гуманизированное моноклональное антитело. Применяется при гемобластозах. Это связано с вторичными аутоиммунными побочными эффектами, включая болезнь Грейвса, гипотиреоз, болезнь Гудпасчера и ИТП. Мы представляем случай резкого изменения биохимии щитовидной железы в течение короткого промежутка нескольких недель — от бушующих уровней свободных гормонов до глубокого гипотиреоза.

У 46-летнего мужчины во время планового мониторинга через 2 года после последней инфузии алемтузумаба были обнаружены отклонения от нормы показателей функции щитовидной железы. У него не было никаких симптомов заболевания щитовидной железы. Признаков болезни Грейвса не было. Его предыдущие анализы щитовидной железы были совершенно нормальными. В анамнезе не было заболеваний щитовидной железы или других аутоиммунных заболеваний в семье.

У него были положительные антитела к рецепторам ТПО и ТТГ. Он начал с 20 мг карбимазола, после чего биохимический анализ его щитовидной железы улучшился, а доза препарата была снижена до 5 мг.

Пять недель спустя он пошел к своему терапевту, чувствуя себя плохо. В этот момент у него был повторный анализ щитовидной железы, который показал, что его ТТГ подскочил с 0,15 до 75,8, наряду с низким уровнем свободных гормонов (ранее нормальным). Он начал с 50 мкг L -тироксина, и эту дозу нужно было постепенно увеличивать.

Этот случай представляет собой увлекательную иллюстрацию быстрого изменения функции щитовидной железы в результате аутоиммунного процесса. Считается, что механизм дисфункции щитовидной железы связан с лимфопенией, которая приводит к продукции аутореактивных Т-клеток.Обзор литературы показывает, что может возникнуть целый спектр заболеваний щитовидной железы: тиреотоксикоз, гипотиреоз, болезнь Грейвса и субклинический гипертиреоз.

Интересно, что у него не было никаких симптомов, несмотря на первоначальный высокий уровень свободных гормонов. Это подтверждает рекомендацию о мониторинге функции щитовидной железы через 3 месяца после лечения алемтузумабом, и это следует делать в течение как минимум 4 лет с момента последней инфузии.

Моноклональные патогенные антитела к рецептору тиреотропного гормона при базедовой болезни с выраженной тиреостимулирующей активностью, но дифференциальной блокирующей активностью активируют множественные сигнальные пути

Реферат

Антитела-мишени щитовидной железы для вызывающих болезнь аутоантител при болезни Грейвса представляют собой рецепторы тиреотропного гормона (ТТГ), но мало что известно о молекулярной основе этого ответа патогенных антител.Мы описываем характеристики двух высокоаффинных mAb, полученных из экспериментальной мышиной модели болезни Грейвса с гипертиреозом, которые проявляют мощную тиреостимулирующую активность. Нанограммовые концентрации моноклональных антител IgG KSAb1 и KSAb2 и их Fab вызывают полную стимуляцию рецептора ТТГ, которая соответствует лиганду ТТГ, и, таким образом, действуют как полные агонисты рецептора. Однако KSAb1 и KSAb2 проявляют различную активность в их способности блокировать ТТГ-опосредованную стимуляцию рецептора, что указывает на незначительные различия в их биологических свойствах.В исследованиях замещения IgG и Fab KSAb1 и KSAb2 конкурируют с аутоантителами при болезни Грейвса, а также с антителами, блокирующими щитовидную железу, присутствующими у некоторых пациентов с гипотиреозом, что указывает на тесную связь между этими аутоиммунными детерминантами на рецепторе. В исследованиях пассивного переноса однократные инъекции KSAb1 или KSAb2 IgG в микрограммах приводили к быстрому повышению уровня тироксина в сыворотке и состоянию гипертиреоза, которое сохранялось в течение нескольких дней. В щитовидной железе были обнаружены признаки некроза клеток, но не было сопутствующего мононуклеарно-клеточного инфильтрата.При изучении путей активации их рецепторов как KSAb1, так и KSAb2 провоцировали фосфорилирование внутриклеточного пути ERK1/2 в первичных тироцитах, что указывает на то, что в патогенезе болезни Грейвса могут участвовать множественные сигнальные пути. Таким образом, наши результаты подчеркивают сходство экспериментальной мышиной модели в воспроизведении расстройства у человека и предоставляют улучшенные средства для характеристики молекулярной основы этого патогенного ответа.

Болезнь Грейвса является распространенным АТ-опосредованным заболеванием, при котором основной антиген-мишень был идентифицирован как рецептор поверхности фолликулярных клеток щитовидной железы (TSHR) 3 для тиреотропного гормона (ТТГ) (1).Недавние данные также предполагают участие второго аутоантигена, рецептора инсулиноподобного фактора роста-1 (IGF-1R), в экстратиреоидных осложнениях болезни Грейвса, таких как тиреоид-ассоциированная офтальмопатия (2). Члены одной группы анти-ТТГР-АТ ведут себя как агонисты, имитируя действие природного лиганда ТТГ на рецептор, и известны как тиреотропные антитела (ТСАт) (3). TSAbs гиперстимулируют фолликулярные клетки щитовидной железы к секреции тироксина, что приводит к гипертиреозу.Другая группа анти-ТТГ (блокирующих) антител (TSBAb) может действовать как антагонист связывания ТТГ с рецептором, что иногда может приводить к гипотиреозу (3). Одна недавняя модель указывает на возможную перекрестную реактивность антител против ТТГР с ИФР-1Р, приводящую к опосредованной Т-клетками индукции компонентов внеклеточного матрикса и манифестации тиреоид-ассоциированной офтальмопатии и претибиальной микседемы (2, 4, 5). . Также были описаны антитела нейтрального класса к TSHR, которые не обладают ни агонистической, ни антагонистической активностью, хотя их роль в заболевании еще предстоит выяснить.

TSHR принадлежит к семейству рецепторов, связанных с G-белком, с большим внеклеточным доменом, семимембранной областью и коротким цитоплазматическим хвостом (6). Трансмембранная область рецепторов, связанных с G-белком, отвечает за передачу активирующего сигнала путем регуляции малых вторичных мессенджеров, таких как цАМФ, диацилглицерин и инозитол-1,4,5-трифосфат (7). Вполне вероятно, что способ активации ТТГ и последующий внутриклеточный регуляторный каскад могут в конечном счете отвечать за наблюдаемые у разных пациентов различия в отношении токсической гиперплазии (увеличение железы и зоб), экстратиреоидных осложнений и ответа на лечение (8).TSHR уникален среди большого семейства рецепторов, связанных с G-белком, поскольку подвергается сложным посттрансляционным модификациям, таким как расщепление на две субъединицы, связанные дисульфидной связью, известные как субъединица A и субъединица B (9, 10). Субъединица А в 53 кДа, соответствующая эктодомену TSHR, представляет особый интерес, поскольку она предпочтительно связывает TSAb (11), и было высказано предположение, что образующийся расщепленный фрагмент, высвобождаемый в кровоток, может быть первичным стимулом для провоцирования аутоиммунитета у восприимчивые люди (10, 11).

В дополнение к передаче сигналов через гетеротримерные G-белки в ряде сообщений предполагается, что ТТГ может активировать пути, связанные с инозитол-1,4,5-трифосфаткиназой. Эта активация приводит к фосфорилированию пути ERK1/2 MAPK (12, 13, 14, 15). Предполагается, что эти действия связаны со стимулирующим рост эффектом ТТГ при стимуляции щитовидной железы. Эти пути широко известны как нижележащие мишени для IGF-1R. Взаимосвязь между ТТГ и ИФР-1Р была оценена почти 20 лет назад, когда было обнаружено, что ИФР-1Р существенно усиливает действие ТТГ на пролиферацию культивируемых тироцитов (16).Могут ли стимулирующие щитовидную железу антитела, направленные на TSHR, как и TSH, инициировать фосфорилирование ERK, еще предстоит продемонстрировать.

Выделение TSAb в виде mAb было долгожданной целью, но до недавнего времени оказалось чрезвычайно труднодостижимой (17). Создание экспериментальных животных моделей болезни Грейвса с гипертиреозом привело к разработке mAb IgG с ограниченной активностью TSAb (18, 19, 20). В то же время было описано, что человеческие mAb IgG к TSHR, полученные от пациента с болезнью Грейвса, обладают мощной активностью в отношении щитовидной железы в диапазоне нанограммов (21).Человеческое mAb действовало как полный агонист, активируя TSHR до максимальной стимуляции, эквивалентной той, которая достигается при субнасыщающих концентрациях TSH (22). Совсем недавно также было описано мышиное mAb с аналогичной эффективностью (23), которое было разработано на основе экспериментальной модели и ведет себя как полный агонист TSHR. Кроме того, это mAb было патогенным в экспериментах по переносу Ab in vivo и, как сообщается, приводило к лимфоцитарному инфильтрату щитовидной железы (23). Детерминанты рецептора для полного агониста и других стимулирующих и блокирующих мышиных mAb зависят от конформационной трехмерной укладки эктодомена, находящегося в области, богатой лейциновыми повторами, внутри подковообразной структуры (23).Недостаточное количество полных агонистов аутоантител к ТТГ, присутствующих в сыворотке пациентов (24, 25), препятствует сравнению их свойств, которые могут влиять на патогенез болезни Грейвса. В этом отчете мы описываем свойства двух mAb с полной агонистической активностью по отношению к TSHR, которые также демонстрируют тонкие различия в их поведении с точки зрения антагонизма стимуляции рецепторов, опосредованной ТТГ, и которые активируют несколько сигнальных путей. Наконец, мы показываем, что mAb являются патогенными in vivo при введении мышам, при этом однократная инъекция микрограммового количества IgG вызывает быструю гиперсекрецию тироксина, что приводит к устойчивому гипертиреозу со значительными морфологическими изменениями, но с минимальным инфильтратом мононуклеарных клеток в щитовидной железе.

Материалы и методы

Измерение TSHR Abs и тесты функции щитовидной железы

В зависимости от образцов для оценки, антитела к ТТГ измеряли с использованием двух различных типов анализов ингибирования связывания ТТГ (наборы для свиней TRAK RIA и TRAK II DYNOtest для человека (Brahms Diagnostika), требующие 50 и 100 мкл чистой сыворотки, соответственно, в основном в соответствии с инструкции производителя (26).Результаты выражали в процентах ингибирования связывания 125 I-меченого ТТГ.Активность TSAb и TSBAb измеряли с помощью биоанализа с использованием клеток СНО, стабильно трансфицированных человеческим TSHR, называемых клетками JP09 (27), через 24 часа после посева 30 000 клеток/лунку в плоскодонные 96-луночные планшеты (26, 28). Перед анализом среду заменяли изотонической HBSS без NaCl, содержащей сахарозу и HEPES с добавлением 0,5 мМ изобутил-1-метилксантина (Sigma-Aldrich) для ингибирования активности фосфодиэстеразы (26, 28). Анализы также проводились в физиологическом изотоническом HBSS, содержащем NaCl, где сахароза была заменена на 130 мМ NaCl.В каждую лунку в трех повторностях добавляли бычий ТТГ (бТТГ; Sigma-Aldrich) (40 мкЕд/мл), тест-сыворотку (3 мкл) или очищенный IgG, разведенный в соответствующей среде HBSS, и инкубировали в течение 4 ч при 37°С. Высвобождаемый в среду цАМФ измеряли с помощью RIA (R&D Systems), а результаты выражали в пикомолях на миллилитр или в стимуляции по сравнению с базовым значением, полученным со средой, как описано (28). TSBAb были обнаружены аналогичным образом путем добавления субнасыщающей дозы бТТГ (40 мкЕд/мл) к тестируемому образцу или контрольной сыворотке и измерения снижения ТТГ-опосредованной стимуляции цАМФ, как описано ранее (28).В нашей лаборатории коэффициенты вариации между и внутри анализа для TSAb были измерены как <16 и <14%, а для TSBAbs эти коэффициенты были <24 и 11% соответственно (28). Общий гормон щитовидной железы (ТТ4) определяли методом РИА с 25 мкл сыворотки (DS Laboratories) четырех нормальных животных BALB/c для определения исходных значений.

Рекомбинантные аденовирусы (объявления)

Рекомбинантный Ad, экспрессирующий голорецептор TSHR человека (TSHR-Ad), был сконструирован с использованием системы аденовирусных векторов AdEasy (Quantum Biotechnologies).Вкратце, кДНК TSHR (26) вырезали из pBluescript II SK расщеплением Kpn I и Not I и лигировали в вектор переноса Ad (pShuttleCMV; Quantum Biotechnologies). После линеаризации вектора pShuttleCMV/hTSHR CMV с помощью Pme I и обработки щелочной фосфатазой линейную ДНК котрансформировали электропорацией в электрокомпетентную Escherichia coli BJ5183 вместе с суперскрученной плазмидой pAdEasy-1, содержащей вирусную ДНК.Рекомбинанты отбирали в канамицине, экстрагировали и расщепляли с помощью Pac I для выявления инвертированных концевых повторов и, наконец, трансфицировали в клетки HEK293A для образования вирусных частиц. Ad, содержащий субъединицу TSHR-A человека (aa 1–289) (обозначаемую как Ad-субъединица A), был любезно предоставлен Drs. С. М. Маклахлан и Б. Рапопорт (29, 30). Ad, экспрессирующий β-галактозидазу, использовали в качестве контроля и получали с использованием системы AdEasy. Все вирусные конструкции размножали в клетках HEK293, дважды очищали центрифугированием в градиенте CsCl (29, 30) и подвергали диализу против PBS, а концентрацию вируса определяли по оптическому поглощению при 280 нм.Очищенные Ads разделяли на аликвоты и хранили при -80°C.

Иммунизация и отбор животных на гибридомы

Все мыши были получены от Harlan. Для инъекций голорецептора TSHR-Ad самкам мышей BALB/c ( n = 10, возраст 7–8 недель) вводили внутримышечно. с рекомбинантным вирусом (50 мкл, содержащий 10 11 частиц) в PBS три раза с трехнедельными интервалами (31). У животных брали кровь через 1 неделю после второй инъекции, а затем через 4 недели после третьей инъекции снова брали пробы и индивидуально тестировали на активность TSAb.

Для инъекций A-субъединицы-Ad использовали протокол иммунизации низкими дозами 10 9 частиц (30). Самок мышей BALB/c (16 животных в возрасте 7–8 недель) иммунизировали, как описано, через 1 и 3 недели после второй инъекции брали кровь и индивидуально тестировали на активность TSAb. Животные со стабильно повышенной активностью TSAb получали третью инъекцию А-субъединицы-Ad. Неделю спустя за этой инъекцией последовала бустерная инъекция внутрибрюшинно. инъекция клеток CHO, экспрессирующих эктодомен TSHR, через якорь GPI (2 × 10 6 клеток в 500 мкл PBS) (32).Животных умерщвляли через 3 дня и удаляли селезенки в асептических условиях для получения гибридом с последующим забором крови путем пункции сердца для получения сыворотки и иссечением щитовидной железы для гистологического анализа. Все эксперименты на животных проводились с одобрения Положений Министерства внутренних дел (Великобритания) и Королевского колледжа Лондона под полным ветеринарным контролем.

Скрининг гибридом и клонирование

Суспензию клеток селезенки сливали с клетками миеломы X63-Ag8653 в соотношении 5:1 с использованием среды для слияния полиэтиленгликоля для получения гибридом (50% раствор; Immune Systems) в среде RPMI 1640, содержащей 20% FCS, 2 мМ пирувата натрия, 2 мМ l-глютамина и 0.01% пенициллин/стрептомицин/фунгизон (все от Invitrogen Life Technologies) и высевали в 96-луночные планшеты. Гибридомы отбирали в условиях гипоксантина, аминоптерина и тимидина (среда HAT; Invitrogen Life Technologies) и среды HT (Immune Systems). Супернатанты (100 мкл) из лунок, демонстрирующих рост, тестировали на связывание ТТГ и ингибирование активности Ig (TBII) с использованием наборов TRAK II (DYNOtest для человека). Положительные лунки расширяли и дважды субклонировали по 0,3 клетки/лунку в среде с добавлением 10–20% кормовой добавки для гибридом Doma-Drive (Immune Systems).Гибридомы изотипировали с использованием набора для моноклонального изотипирования мышей (Serotec). IgG очищали из супернатантов тканевых культур с помощью хроматографии на протеине А-сефарозе (33), чистоту оценивали с помощью SDS-PAGE и определяли количество белка с помощью анализа белка по Бредфорду.

Приготовление тканей

Fab получали из IgG расщеплением папаином (Sigma-Aldrich) с использованием 2,5 мг IgG, 1 М цистеина (25 мкл), 20 мМ ЭДТА (25 мкл) и 1 мг/мл папаина в ацетатном буфере (5 мкл). и инкубировали в течение ночи при 37°C (33).После добавления 100 мМ йодацетамида (110 мкл) для прекращения реакции гидролизат смешивали с протеином А-сефарозой в течение 1 ч при 4°С. После краткого этапа центрифугирования в микроцентрифуге супернатант собирали и подвергали диализу в течение ночи против PBS. Чистоту Fab проверяли с помощью SDS-PAGE, а реактивность TSHR подтверждали путем оценки активности TBII.

Йодирование IgG и Fab и исследования замещения

IgG (0,25 нМ) или Fabs (0.25 нМ) KSAb1 или KSAb2 в 10 мкл PBS метили 5 мкл Na 125 I с использованием пробирок, покрытых йодогеном, путем инкубации в течение 10 мин при комнатной температуре. Свободный изотоп удаляли гель-фильтрацией в колонках Sepharose G25 и рассчитывали удельную активность (34). Аффинность антител измеряли анализом насыщения связывания. Вкратце, различные концентрации 125 I-меченых IgG KSAb1 или KSAb2 добавляли в двух повторах в пробирки, покрытые TSHR человека (из набора TRAK II DYNOtest для человека), ресуспендировали в буфере для связывания из набора в конечном объеме 200 мкл. и инкубировали в течение ночи в холодной комнате до достижения равновесия.После трехкратного промывания пробирок в промывочном буфере из набора определяли связанный 125 I-меченый IgG путем подсчета радиоактивности на гамма-счетчике (DPC Laboratories). Неспецифическое связывание вычитали, и значения K d рассчитывали при 50% насыщении с использованием программного обеспечения Excel. Результаты сродства выражали как обратные значения K d (литр на моль).

Исследования конкуренции проводились аналогично описанным выше.Различные концентрации немеченых IgG или Fab ресуспендировали в буфере для связывания (из набора TRAK II DYNOtest для человека) в конечном объеме 200 мкл и добавляли в пробирки, покрытые TSHR человека, из набора. После 2 ч инкубации при встряхивании при комнатной температуре пробирки дважды промывали промывочным буфером из набора. Добавляли субнасыщающую концентрацию 125 I-меченых KSAb1 или KSAb2 IgG, инкубацию продолжали в течение 1 часа, пробирки промывали и подсчитывали в гамма-счетчике. Для конкуренции с сыворотками пациентов с болезнью Грейвса в пробирки, покрытые человеческим TSHR, добавляли 100 мкл сыворотки, как описано выше.Ингибирование связывания 125 I-меченых KSAb1 или KSAb2 определяли и выражали в процентах ингибирования.

Инъекция KSAb1 и KSAb2 IgG для стимуляции щитовидной железы in vivo

Инъекцию различных доз очищенного IgG KSAb1 или KSAb2 проводили внутривенно. и и.п. маршруты. Самкам мышей BALB/c (18 животных в возрасте 7–8 недель) вводили однократно внутривенно введение в хвостовую вену KSAb1 или KSAb2 IgG в стерильном PBS (50 мкл), содержащем 10 или 100 мкг Ат (по три мыши на группу).Другой группе мышей вводили однократно внутрибрюшинно. введение KSAb2 IgG в стерильном PBS (100 мкг). Для контроля животным вводили внутривенно. с декарбоксилазой глутаминовой кислоты (mAb GAD-1), соответствующим изотипу, 100 мкг IgG mAb, специфичным для Ag островковых клеток. У всех животных брали кровь через 7, 28 и 70 ч после инъекции и определяли уровни ТТ4 в сыворотке. Мышей забивали через 70 ч и вырезали щитовидную железу для гистологического анализа.

Передача сигналов TSHR и фосфорилирование ERK

Ткань щитовидной железы была получена в качестве хирургических отходов от пациентов, перенесших тиреоидэктомию для лечения различных состояний, включая болезнь Грейвса, узловую болезнь и очаговые хорошо дифференцированные злокачественные новообразования.Ткань обрабатывали, как описано ранее (35). Освобожденные тироциты пипеткой переносят в 25-мм колбы для присоединения клеток и образования монослоев. Их поддерживали в среде RPMI 1640 с добавлением 10% FCS и пенициллина/стрептомицина/фунгизона. Их разрушали осторожной обработкой трипсином и использовали между вторым и шестым пассажами. Клетки в чашках диаметром 60 мм переносили в среду, содержащую 1% FCS, на 16 ч до начала экспериментальных обработок.К конфлюэнтным монослоям щитовидной железы добавляли человеческий ТТГ (1 мЕд/мл; Sigma-Aldrich), рекомбинантный человеческий IGF-1 (10 нМ; R&D Systems), KSAb1 IgG (10 нг/мл) и KSAb2 IgG (10 нг/мл). ), а монослои инкубировали 15 мин; анти-IGF-1Rα (mAb 1H7) (5 мкг/мл) (BD Pharmingen) добавляли в другой планшет на 45 мин. В контрольные планшеты добавляли PBS. После соответствующего времени инкубации планшеты промывали PBS и клетки собирали в трис-солевом буфере, содержащем 15 мМ CHAPS (Sigma-Aldrich), 1 мМ ЭДТА, 10 мкг/мл соевого ингибитора трипсина, 5 мкл/мл 10 % Nonidet P-40 и 0.1 мкл/мл ПМСФ (100 мМ). Лизаты солюбилизировали в буфере Лэммли и подвергали SDS-PAGE, а разделенные белки переносили на поливинилидендифторидную мембрану (Millipore). После блокирования в течение ночи в 1% растворе БСА в трис-солевом растворе мембрану инкубировали с антифосфорилированными антителами ERK (Santa Cruz Biotechnology) в течение ночи при 4°С, промывали и затем инкубировали с мечеными пероксидазой вторичными антителами в течение 2 ч при комнатной температуре. температура. Связанные антитела выявляли с использованием системы ECL-Plus (Amersham Bioscience), а специфические сигналы регистрировали на пленке X-Omat (Kodak) и денситометрически с помощью количественного сканера Bioimage.

Гистология щитовидной железы

Щитовидные железы фиксировали и обрабатывали в формалине. Срезы окрашивали H&E для морфологического анализа. Иммуногистохимию проводили для обнаружения В- и Т-клеток на фиксированных срезах щитовидной железы с помощью анти-мышиного CD20 с последующим обнаружением с помощью набора ImmunoCruz anti-goat kit (Santa Cruz Biotechnology), крысиных антимышиных CD4 и CD8 mAb с последующим обнаружением с помощью биотинилированных антитела против крыс (Vector Laboratories) и конъюгат стрептавидин-биотин-пероксидаза (Dako).Извлечение Ag проводили перед окрашиванием путем варки под давлением при pH 6,0 для CD20 и CD8 Ab и при pH 9,0 для CD4 Ab.

Результаты

мышей BALB/c были иммунизированы рекомбинантным Ad, экспрессирующим голорецептор TSHR (TSHR-Ad) или субъединицу TSHR-A (субъединица A-Ad), чтобы вызвать гипертиреоидную болезнь Грейвса (29, 30). Первоначальную оценку антител к TSHR проводили для антител TSA в отдельных образцах крови всех животных. В группе TSHR-Ad (голорецептор) через 1 неделю после второй иммунизации только одно животное продемонстрировало заметное повышение активности TSAb с 90-кратным увеличением по сравнению с исходным (не показано).Таким образом, в нашей лаборатории 10% заболеваемость индуцированной гипертиреозом Грейвса после протокола полной холорецепторной иммунизации отличается от таковой в других группах, которые сообщили о более высокой заболеваемости (30, 31).

Для инъекций A-субъединицы-Ad мы использовали усовершенствованный протокол иммунизации низкими дозами, который предпочтительно вызывает гипертиреоз у большей частоты иммунизированных животных (30). Через неделю после второй инъекции девять животных были положительными (56%) по активности TSAb, начиная с 3.Повышение активности от 1 до 92,6 раз по сравнению с базовыми уровнями (таблица I⇓). Одиннадцать животных (68%) показали значительное повышение уровня ТТ4 в сыворотке и, следовательно, имели гипертиреоз (таблица I⇓). Эти результаты полностью согласуются с результатами Chen et al. (30). Одно животное из этой группы с самыми высокими стабильными уровнями TSAb было выбрано для получения гибридомы и ревакцинировано третьей инъекцией A-субъединицы-Ad, а затем через 1 неделю внутрибрюшинно. инъекция клеток CHO, экспрессирующих высокий уровень эктодомена TSHR человека, связанного якорем GPI с клеточной поверхностью плазматической мембраны, для увеличения популяции Ab-секретирующих B-клеток селезенки.Сыворотка от выбранного животного при умерщвлении показала, что у него гипертиреоз с повышенным уровнем TT4 (134 мкг/мл; TT4 для контрольных мышей BALB/c составлял 56,25 ± 8,26 мкг/мл), а также высокоположительный результат в отношении активности TBII с ингибированием на 87%. связывание 125 I-меченого ТТГ.

Таблица I.

Активность антител, стимулирующих щитовидную железу, и уровни тироксина в сыворотке мышей BALB/c, иммунизированных A-субъединицей-Ad, измеренные через 1 неделю после второй иммунизации a

Моноклональные антитела

Супернатанты культур (100 мкл) собирали из лунок с 70–80% сливом и тестировали в чистом виде на активность TBII с использованием наборов TRAK II DYNOtest для человека.Всего было проверено 250 лунок, в результате чего были получены три положительные лунки (лунка 9, 98%, лунка 17, 96% и лунка 233, ингибирование 80%). При размножении активность TBII первичной клеточной линии лунки 233 быстро снижалась. Оставшиеся две линии были клонированы дважды по 0,3 клетки/лунку и переименованы в KSAb1 и KSAb2, которые находились в непрерывной культуре в течение >7 мес. Было показано, что подтипы H- и L-цепей для KSAb1 и KSAb2 представляют собой IgG2b/k и IgG2a/k соответственно.

Тиреостимулирующая активность моноклональных антител

Как KSAb1, так и KSAb2 IgG стимулировали продукцию цАМФ в клетках CHO, стабильно трансфицированных человеческим TSHR.Первоначальные исследования доза-реакция проводились в среде, не содержащей NaCl и содержащей сахарозу, обычно используемой из-за ее повышенной чувствительности для обнаружения TSAb (36). Как показано на рис. 1⇓ A , в исследованиях доза-реакция как KSAb1, так и KSAb2 IgG показали типичные сигмовидные кривые при стимуляции TSHR с достижением >98% ответа, достигаемого при субнасыщающей дозе бТТГ. Однако, хотя оба mAb проявляют полную агонистическую активность, достигая почти максимальных стимулирующих ответов цАМФ, они показали различия в их стимулирующих реакциях цАМФ при более низких дозах IgG.Таким образом, общие KSAb1 и KSAb2 продемонстрировали максимальную стимуляцию в 199 и 183 раза по сравнению с исходным значением, при этом 3-кратная стимуляция была достигнута при 1,2 нг/мл и 2,2 нг/мл IgG соответственно (фиг. 1⇓ A ). Было определено, что значения EC 50 для KSAb1 и KSAb2 IgG составляют 9,4 и 93 нг/мл соответственно (фиг. 1⇓ A ). Fab KSAb1 и KSAb2 также давали аналогичные ответы TSAb на интактный родительский IgG (фиг. 1⇓ A ) и, следовательно, также вели себя как полные агонисты TSHR.

ФИГУРА 1.

Кривые доза-реакция TSAb KSAb1 и KSAb2 IgG и Fab, оцененные с помощью биоанализа в клетках JPO9. К клеткам JPO9 в солевом свободный изотонический буфер HBSS, содержащий сахарозу и HEPES ( A ), или физиологический изотонический буфер HBSS, содержащий NaCl ( B ), и стимулированный цАМФ измеряли (в пикомолях на миллилитр), как описано в Materials and Methods .Реакция цАМФ на субнасыщающую дозу бТТГ в бессолевой и физиологической изотонической среде составила 164 и 157 пмоль/мл соответственно. Показанные результаты являются репрезентативными, по крайней мере, для трех независимых экспериментов, проведенных в трех экземплярах.

Мы также провели исследования доза-реакция при физиологических концентрациях соли, хотя эти условия анализа демонстрируют пониженную чувствительность по сравнению с использованием бессолевого, содержащего сахарозу изотонического буфера HBSS (36).Доза-реакция для продукции цАМФ, индуцированной ТТГ, существенно не менялась в буфере, содержащем NaCl, при этом 40 мкЕд/мл давали максимальную стимуляцию (не показано). Важно отметить, что как KSAb1, так и KSAb2 IgG продолжали проявлять полную агонистическую активность с максимальным стимулирующим ответом цАМФ, достигающим >98% ответа, полученного при субнасыщающей дозе бТТГ (рис. 1⇑ B ). Наблюдались типичные сигмовидные кривые доза-реакция, которые снова при более низких дозах показали различия в стимулирующей активности цАМФ KSAb1 и KSAb2 IgG (фиг.1⇑ Б ). В физиологических солевых условиях KSAb1 и KSAb2 продолжали быть активными при концентрациях <1 и 3 нг/мл соответственно. IgG показали значения EC 50 в наномолярном диапазоне 16,5 и 100 нг/мл соответственно (рис. 1⇑ B ). Более того, Fab-фрагменты KSAb1 и KSAb2 также продемонстрировали аналогичную эффективность стимуляции цАМФ (рис. 1⇑ B ).

Блокирование активности ТТГ-опосредованной стимуляции (TSBAb)

Способность KSAb1 и KSAb2 IgG блокировать опосредованную ТТГ стимуляцию цАМФ в клетках JP09 измеряли в анализе блокирования опосредованной ТТГ стимуляции.В анализе исследовали различные концентрации IgG, чтобы гарантировать, что блокирующая активность не зависит от концентрации антител. В то время как KSAb1 демонстрировал незначительную активность TSBAb, KSAb2 IgG демонстрировал воспроизводимую активность >20% TSBAb при всех протестированных концентрациях Ab (≤30 нг/лунку), эквивалентную 240 нг/мл, что было ниже концентрации субнасыщения агонистической активности для KSAb2. Следовательно, KSAb2 действовал со слабым антагонизмом к опосредованной ТТГ стимуляции цАМФ (рис. 2⇓). Интересно, что ни KSAb1, ни KSAb2 IgG не продемонстрировали реактивности с каким-либо конкретным пептидом в полном наборе синтетических пептидов эктодомена TSHR с помощью ELISA (28), что дает убедительные доказательства распознавания конформационных эпитопов на рецепторе (не показано).

ФИГУРА 2.

Активность TSBAb KSAb1 (□) и KSAb2 (▪) IgG, измеренная в клетках JPO9 с использованием субнасыщающей концентрации 40 мкЕд bTSH. Активность TSBAb, выраженная в процентах ингибирования ТТГ-индуцированного цАМФ, рассчитывалась, как описано в Materials and Methods . Исследовали различные концентрации KSAb1 и KSAb2 IgG, чтобы убедиться, что блокирующая активность не зависит от концентрации Ab. Показанные результаты являются репрезентативными по крайней мере для двух независимых экспериментов, проведенных в трех повторностях.

Деятельность TBII

В анализах TBII с использованием наборов TRAK II DYNOtest для человека анализ доза-реакция KSAb1 и KSAb2 IgG, показывающий концентрации 3,3 и 10 нг/мл, был достаточным для 50% ингибирования 125 I-меченой активности связывания ТТГ (рис. 3). ⇓). Более того, для обоих mAb 20% ингибирование достигалось при концентрациях 0,7–4,4 нг/мл, тогда как 100 нг/мл было достаточно для ингибирования 95% (рис. 3⇓). Fab придавали активность TBII, аналогичную интактному родительскому IgG (фиг.3⇓).

РИСУНОК 3.

Кривые доза-реакция активности TBII KSAb1 IgG (▪—▪) и Fab (▪- — -▪) и KSAb2 IgG (▴—▴) и Fab (▴- — -▴) с использованием наборов TRAK DYNOtest для человека. Различные концентрации IgG или Fab (нанограммы на миллилитр), разведенные в нормальной человеческой сыворотке, добавляли для анализа в пробирки, покрытые человеческим TSHR. Показанные результаты являются репрезентативными, по крайней мере, для трех независимых экспериментов, проведенных в трех экземплярах.

Исследования конкуренции с KSAb1 и KSAb2

При анализе насыщения связывания с использованием пробирок, покрытых тиреотропным гормоном человека (из наборов TRAK II DYNOtest для человека), оба 125 I-меченые IgG KSAb1 и KSAb2 связывались с рецептором с высокой аффинностью, со значениями K d , равными 4.5 × 10 10 л/моль и 6,25 × 10 10 л/моль соответственно (рис. 4⇓). Затем меченые IgG и Fab моноклональных антител использовали в качестве индикаторов в конкурентных исследованиях для изучения эпитопов на рецепторе. Мы исследовали, вытесняют ли меченые KSAb1 и KSAb2 IgG гетерогенные аутоантитела к TSHR у пациентов с болезнью Грейвса. В качестве контроля использовали сыворотки здоровых людей без семейной истории аутоиммунитета. Как показано на фиг. 5⇓ A , сыворотка пациентов с болезнью Грейвса ингибировала связывание KSAb1 или KSAb2 с иммобилизованным рецептором.Кроме того, хотя разные сыворотки в одинаковой степени конкурировали как с мечеными KSAb1, так и с KSAb2 IgG, сыворотки различались по своей ингибирующей активности, что указывает на гетерогенную природу аутоантител против TSHR в сыворотках разных пациентов (рис. 5⇓ ). Чтобы исследовать аутоиммунные детерминанты на TSHR, присутствующие при других состояниях, мы оценили сыворотки с сильной блокирующей активностью от пациентов с аутоиммунным гипотиреозом, которые также конкурировали за связывание с рецептором с меченым KSAb1 или KSAb2 IgG (рис.5⇓ А ). Наконец, при использовании субнасыщающих концентраций 125 I-меченых IgG в пробирках, покрытых TSHR человека, как KSAb1, так и KSAb2 IgG конкурировали друг с другом, показывая, что их эпитопы перекрываются на TSHR (фиг. 5⇓ B ). Более того, Fab KSAb1 и KSAb2 также конкурировали между собой, что свидетельствует о тесной ассоциации их детерминант на TSHR (рис. 5⇓ C ).

РИСУНОК 4.

Измерение аффинности антител ( K d ) KSAb1 ( A ) и KSAB2 IgG ( B ) путем экспериментов по насыщению связывания с использованием пробирок, покрытых тиреотропным гормоном человека, из наборов TRAK DYNOtest для человека в качестве источника иммобилизованного рецептора и 125 I-меченые mAb (~2.5 мкКи/мл) с повышением концентрации немеченого IgG или без него. Значения IC 50 и K d были рассчитаны с использованием Excel. Сродство Ab выражали как обратные значения K d (литр на моль). Неспецифическое связывание с использованием нерелевантных mAb IgG (GAD1) ​​составило <5%. Все определения были выполнены в повторных образцах.

РИСУНОК 5.

Конкурентные исследования с использованием 125 I-меченых KSAb1 IgG или Fab и KSAb2 IgG или Fab с сывороткой пациентов ( A ) между KSAb1 и KSAb2 IgG ( B ) и между KSAb1 и KSAb2 Fab ( C ) связывание с иммобилизованным тиреотропным гормоном человека.Использовали сыворотку пациентов с болезнью Грейвса ( n = 6) и пациентов с гипотиреозом с высоким уровнем TSBAbs ( n = 6). В качестве контроля использовали нормальную человеческую сыворотку ( n = 4) от лиц без семейной истории аутоиммунных заболеваний. Результаты выражены как связывание 125 I-меченого IgG. Результаты показывают широкий спектр ингибирующей активности всех сывороток от пациентов с болезнью Грейвса и TSBAb-положительных пациентов с гипотиреозом с 125 I-меченными KSAb1 или KSAb2 IgG, подтверждая, что mAb связывают аутореактивные эпитопы на TSHR, сходные с эпитопами, распознаваемыми пациентами. ‘ сера.Контрольная нормальная сыворотка давала незначительное ингибирование (<15%).

Исследования замещения с использованием меченых KSAb1 и KSAb2 IgG в качестве индикаторов также проводились с другой панелью mAb против TSHR IgG, которые специфичны для линейных детерминант рецептора и проявляют незначительную стимулирующую активность щитовидной железы (37). Ни KSAb1, ни KSAb2 IgG не проявляли какой-либо конкуренции с mAb A10, A9 и A7, специфичными к остаткам, расположенным в аминоконцевой, средней и карбоксиконцевой областях рецептора соответственно (37) (не показано).Таким образом, стимулирующие эпитопы на TSHR отличаются от линейных эпитопов, распознаваемых этой панелью mAb против TSHR.

Передача сигналов TSHR и фосфорилирование ERK

Недавно появился ряд сообщений, предполагающих, что активация тироцитов через TSHR может быть опосредована сигнальными путями, отличными от тех, которые включают генерацию цАМФ, связанную с G-белком (12, 13, 14). До сих пор остается без ответа вопрос, зависит ли фосфорилирование ERK от образования цАМФ.Мы обнаружили, что как KSAb1, так и KSAb2 IgG могут провоцировать фосфорилирование ERK1/2 в первичных тироцитах (рис. 6⇓). Действие двух mAb было сходным и наблюдалось при сравнительно низких концентрациях. Они имитировали эффекты ТТГ человека (1 мЕд/мл) и ИФР-1 (10 нМ) (рис. 6⇓ ). Из-за возможного перекрестного взаимодействия между рецептором TSHR и IGF-1 (4, 5) мы добавили блокирующее IGF-1R Ab 1H7 к культурам, обработанным этими mAb, и обнаружили, что 1H7 может частично ослаблять фосфорилирование ERK (рис.6⇓ В ). Добавление одного 1H7 или нерелевантных Ab не могло изменить уровни фосфорилирования ERK. Таким образом, оказывается, что как KSAb1, так и KSAb2 могут инициировать передачу сигналов в тироцитах посредством активации пути ERK и что IGF-1R может быть, по крайней мере, частично вовлечен в это действие (Fig. 6⇓).

РИСУНОК 6.

KSAb1 и KSAb2 могут провоцировать фосфорилирование ERK1/2 в первичных тироцитах человека. A , Конфлюэнтные культуры тироцитов, полученные от пациента с болезнью Грейвса, обработанные буфером (контроль), KSAb1 (10 нг/мл), KSAb2 (100 нг/мл), ТТГ человека (1 мЕд/мл) , или IGF-1 (10 нМ) в течение 15 минут, после чего монослои собирали и подвергали вестерн-блоттингу на фосфорилированную ERK1/2 (P-ERK) и β-актин. B , Культуры из нормально выглядящей ткани, полученной из узлового зоба, обрабатывали буфером, KSAb1 или KSAb2 (10 нг/мл) отдельно или в комбинации с 1H7 (5 мкг/мл) в течение 15 мин. Лизаты подвергали вестерн-блоттингу, как описано выше. Показанные результаты являются репрезентативными по крайней мере для трех независимых экспериментов, проведенных в трех повторностях.

Исследования пассивного переноса KSAb1 и KSAb2 IgG

Мы оценили эффект инъекции KSAb1 и KSAb2 IgG in vivo наивным мышам с точки зрения индуцирования гипертиреоза.Мы ожидали, что KSAb1 и KSAb2 будут перекрестно реагировать с мышиным TSHR, поскольку два mAb были получены от мыши со значительным гипертиреозом. Две дозы IgG по 10 мкг и 100 мкг каждого mAb вводили внутривенно. у мышей, а индуцированную гипертироксинемию определяли в разные моменты времени. В качестве контроля использовали mAb GAD1, совпадающие по изотипу с Ag островковых клеток поджелудочной железы. Результаты на рис. 7⇓ показывают, что как KSAb1, так и KSAb2 IgG являются патогенными при дозе 10 или 100 мкг KSAb1 и 100 мкг KSAb2, что приводит к быстрому стимулирующему ответу щитовидной железы, характеризующемуся гипертироксинемией в течение 7 часов после введения.Уровень тироксина в сыворотке вернулся к исходному уровню через 70 часов. Инъекция KSAb2 в дозе 10 мкг продемонстрировала более отсроченный ответ в виде повышения уровня ТТ4 с пиком через 28 ч (рис. 7⇓). Мы также исследовали влияние i.p. инъекция KSAb2 IgG, которая параллельна стимуляции, опосредованной в.в. доставка (рис. 7⇓). Эти результаты также подтверждают перекрестную реактивность KSAb1 и KSAb2 в отношении мышиного TSHR.

РИСУНОК 7.

Уровни тироксина в сыворотке (TT4) в различные моменты времени у самок мышей BALB/c после пассивного переноса KSAb1 IgG (▪—▪) ( A ) и KSAb2 IgG (▴—▴) ( B ) i.v. инъекция. Значения ТТ4 (микрограмм на миллилитр) у отдельных мышей из каждой группы ( n = 3) показаны в момент времени 0 (до инъекции mAb), через 7, 26 и 70 часов. Результат введения KSAb2 IgG внутрибрюшинно. впрыск показан в C . Также показаны контрольные мыши, получавшие нерелевантный IgG (мАт GAD1) ​​(- — -). ∗∗, p < 0,01

Гистологический анализ щитовидной железы мышей, получавших KSAb1 и KSAb2, показал как фолликулярные, так и эпителиальные изменения по сравнению с железами животных, получавших контрольное mAb (рис.8⇓, A–F ). В отличие от щитовидной железы контрольных животных, получавших моноклональные антитела к GAD1 (рис. 8⇓ A ), фолликулы щитовидной железы мышей, получавших KSAb1 и KSAb2 IgG, были разного размера и формы, с фокальными областями, демонстрирующими полную потерю люминальный коллоид, связанный с коллапсом просвета фолликула; в других участках коллоид выглядит бледным, тонким, а также мелковакуолизированным (рис. 8⇓, B–E ). Более того, фолликулы, содержащие бледный коллоид, были выстланы уплощенными и ослабленными эпителиальными клетками, тогда как фолликулы без коллоида демонстрировали выстилку эпителиальных клеток цилиндрическими и кубическими клетками с многослойностью (пунктирные стрелки на рис.8⇓). Кроме того, было обнаружено, что отдельные некротические клетки присутствуют в просветном коллоиде, а также в эпителии, выстилающем фолликулы, с пикнотическими ядрами (показаны на рис. 8⇓ F ). Наконец, гистологический анализ срезов H&E не выявил инфильтрата мононуклеарных клеток в железах животных, получавших KSAb1 и KSAb2 IgG, независимо от дозы или пути введения (рис. 8⇓, B–F ). Это открытие было дополнительно подтверждено иммуногистохимическим окрашиванием щитовидной железы, при этом окрашивание антителами к мышиным CD4, CD8 и CD20 не выявило какого-либо инфильтрата В- или Т-клеток (не показано).

РИСУНОК 8.

Гистология щитовидной железы мышей после пассивного переноса KSAb1 или KSAb2 IgG для индуцирования гипертиреоза. A , Щитовидная железа контрольной мыши, получавшей GAD1. B и C , KSAb1 IgG в дозах 10 и 100 мкг соответственно. D , подробный вид спавшихся фолликулов из B . E и F , KSAb2 IgG в дозах 10 и 100 мкг соответственно. Увеличение, ×60.Апоптотические эпителиальные клетки внутри коллоида (стрелка) и фолликулы без коллоида показали эпителиальную выстилку столбчатых и кубовидных клеток с многослойностью (пунктирная стрелка).

Обсуждение

Получение mAb с агонистической активностью в отношении TSHR было долгожданной целью ряда лабораторий, которая была достигнута лишь недавно (17). Прогресс в этом достижении зависел от создания жизнеспособных экспериментальных моделей АТ-индуцированного гипертиреоза.Однако одним важным исключением было заметное достижение человеческого mAb IgG со всеми основными свойствами добросовестного патогенного Ab (21). Среди нескольких стимулирующих щитовидную железу моноклональных антител, полученных на экспериментальных моделях, только одно продемонстрировало полную агонистическую активность и активность, которые соответствовали таковым при заболевании человека (23). МкАТ, описанные в этом исследовании, KSAb1 и KSAb2, попадают в эту категорию антител, ассоциированных с заболеванием, поскольку они проявляют следующее: 1) активность полного агониста в отношении TSHR человека; 2) эффективность в нанограммах IgG; 3) высокое сродство к ТТГР человека в диапазоне 10 10 л/моль; и 4) патогенность in vivo с индукцией гипертиреоза.

Наши результаты показывают, что эпитопы KSAb1 и KSAb2 на TSHR, вероятно, имеют конформационную природу и перекрываются с аутореактивными детерминантами, распознаваемыми аутоантителами пациентов. Их эпитопы на TSHR, вероятно, близки и тесно связаны друг с другом, потому что меньшие Fab KSAb1 и KSAb2 также конкурируют за связывание с рецептором. Кроме того, наш вывод о том, что эти эпитопы также перекрываются с детерминантами, связанными с сильным антагонизмом в отношении связывания ТТГ с ТТГ, согласуется с предыдущими исследованиями тесной взаимосвязи эпитопов рецепторов, связанных со стимуляцией рецепторов и антагонизмом к ТТГ (23, 38).

Примечательные аспекты наших исследований с KSAb1 и KSAb2 основаны на получении двух стимулирующих щитовидную железу mAb с полной активностью агониста TSHR, что позволяет нам сравнить их поведение. Наш поразительный вывод о том, что KSAb1 IgG и KSAb2 IgG демонстрируют различия в цАМФ-опосредованной передаче сигналов TSHR, повышает вероятность того, что антитела к различным эпитопам рецептора могут влиять на функцию щитовидной железы. Хотя известно, что ТТГ стимулирует оба каскада аденилциклазы и фосфолипазы С в щитовидной железе человека, концентрации ТТГ, необходимые для стимуляции последнего пути (фосфолипазы С), значительно выше (7).KSAb1 и KSAb2 имеют сопоставимую аффинность и проявляют различия в образовании цАМФ, особенно при очень низких дозах ТТГ. Однако фосфорилирование ERK после обработки двумя mAb сходно. Это наблюдение ставит под сомнение утверждение о том, что фосфорилирование ERK (или р38), спровоцированное ТТГ, является тривиальным следствием какого-то неопознанного примеси (14, 39, 40). Таким образом, можно предположить, что перекрывающиеся эпитопы, распознаваемые двумя mAb, как предполагают исследования конкурентного связывания, могут быть связаны с активностью, связанной с фосфорилированием ERK1/2, тогда как активность цАМФ может быть связана с различными аспектами соответствующие эпитопы.Ясно, что будущие исследования с использованием клеток, сверхэкспрессирующих IGF-1R в присутствии и в отсутствие TSHR, могут оказаться полезными. Изменения в профиле антител к ТТГР с течением времени (41, 42, 43) могут объяснить колебания статуса гормонов щитовидной железы, обычно наблюдаемые у пациентов с болезнью Грейвса (8, 41, 42). Кроме того, существенные различия, наблюдаемые у разных пациентов в отношении увеличения железы и экстратиреоидных проявлений, позволяют предположить, что другие факторы, возможно, связанные с другим рецептором, могут играть важную роль в патогенезе болезни Грейвса (2, 4, 44).Остается неясным, распознает ли моноклональное mAb эпитоп(ы) IGF-1R или этот рецептор прямо или косвенно взаимодействует с TSHR.

Ab с мощной активностью TSAb являются патогенными и непосредственно ответственны за состояние гипертиреоза. Исследование уровней тироксина в сыворотке у отдельных мышей выявило ряд животных, у которых уровни гормонов не коррелировали с активностью TSAb в сыворотке. Это неудивительно, потому что несоответствие также обнаружено как у пациентов-людей, так и в различных моделях индуцированной болезни Грейвса (26, 29, 45, 46).Мы подтвердили в остром исследовании путем пассивного переноса KSAb1 и KSAb2 IgG, что эти антитела приводили к быстрому гипертиреозу у животных. Более того, и.п. Путь введения KSAb2 также приводил к повышению уровня ТТ4 в сыворотке, кинетика которого соответствовала внутривенному введению. маршрут. Различия в эффективности между KSAb1 и KSAb2, наблюдаемые при более низких дозах в экспериментах in vitro, также проявлялись в исследованиях in vivo. Таким образом, и.в. инъекции более низкой дозы 10 мкг IgG KSAb2 показали замедленную кинетику индуцированного гипертиреоза у животных, в отличие от индуцированного гипертиреоза с KSAb1, который показал аналогичную индукцию повышенного уровня тироксина в сыворотке при испытанных дозах 10 и 100 мкг.Однако, как только были достигнуты максимальные уровни тироксина в сыворотке при дозах 10 или 100 мкг либо KSAb1, либо KSAb2 IgG, уровни гормона снижались с аналогичной кинетикой, пока не достигли базового уровня через 70 часов после инъекции.

Интересно, что гистологический анализ щитовидной железы через 70 ч после инъекции показал морфологические изменения, свидетельствующие как о стимулирующем, так и о цитотоксическом эффектах. Стимулирующие эффекты характеризовались пролиферативными изменениями эпителия, о чем свидетельствовали очаги гиперплазии фолликулов с потерей коллоидообразования, связанной с многослойностью и коллапсом просвета.Цитотоксические эффекты проявлялись в виде некроза отдельных клеток в выстилающем эпителии и в виде отмирания тироцитов, присутствующих в коллоидном материале. Эти цитотоксические эффекты, вероятно, опосредованы в результате увеличения продукции гормонов щитовидной железы, вызванной TSAb в железе, что приводит к массивному накоплению перекиси водорода на апикальной поверхности фолликулов щитовидной железы (47, 48). Не было никаких признаков инфильтрата мононуклеарных клеток, подобного тому, который присутствует в железах пациентов с болезнью Грейвса.Возможно, длительное хроническое исследование введения mAb может привести к воспалительным изменениям в щитовидной железе, но интересно, что в аналогичном остром исследовании с их мощным TSAb mAb группа Costagliola et al. (23) сообщили об инфильтрате мононуклеарных клеток в железах их мышей с гипертиреозом. Поскольку временные рамки в их исследовании после однократной инъекции mAb TSAb были аналогичны временным рамкам в остром исследовании в этом отчете, это открытие предполагает, что, возможно, антитела к различным эпитопам на TSHR могут быть связаны с воспалительной реакцией в щитовидной железе. (23).В другом недавнем исследовании Davies et al. (18) использовали mAb хомяка к TSHR с более слабой активностью TSAb, чем в этом исследовании, для изучения как острых, так и хронических эффектов введения mAb мышам (49). Хотя трудно провести корреляцию мАт хомяка с мощными стимулирующими мАт, описанными в настоящем документе, интересно, что хроническая стимуляция не индуцировала гипертироксинемию у животных, но приводила к десенсибилизации рецептора, а также к значительным морфологическим изменениям, таким как гипертрофия. истощение коллоидов в щитовидной железе (49).Тем не менее, не было сообщений об инфильтрации мононуклеарных клеток в щитовидную железу животных после хронической стимуляции моноклональными антителами хомяка (49).

Разработка мощных стимулирующих щитовидную железу mAb, таких как KSAb1 и KSAb2, открывает путь к молекулярному расщеплению TSHR и эпитопов, связанных с аутоиммунными заболеваниями. Картирование конформационных эпитопов на TSHR, распознаваемых KSAb1 и KSAb2, может быть выполнено путем скрининга библиотеки фаговых случайных пептидов в сочетании с мутагенезом (50).Это поможет в характеристике эпитопов, связанных со стимуляцией щитовидной железы, на TSHR и их способов внутриклеточной передачи сигналов. Понимание этих сигнальных событий может также иметь отношение к осложнениям болезни Грейвса, таким как тиреоид-ассоциированная офтальмопатия и претибиальный микседема. Наконец, создание антиидиотипических антител к KSAb1 и KSAb2 для идентификации индивидуальных клонотипов специфичных анти-ТТГР антител, присутствующих у пациентов с болезнью Грейвса, может позволить исследованиям в будущем сопоставить их реакцию на лечение и, следовательно, адаптировать терапию для отдельных пациентов. пациентов без риска рецидива.

Благодарности

Мы выражаем нашу глубокую признательность Drs. Sandra McLachlan и Basil Rapoport за предоставление субъединицы A-Ad и вместе с доктором Chun-Rong Chen за то, что они поделились своим экспериментальным протоколом для увеличения масштаба и очистки вируса, подходящего для иммунизации. Мы благодарим доктора Монику Гора за помощь на ранних этапах конструирования полноразмерного рекомбинантного Ad TSHR человека и Ника Бейли за иммуногистохимическое окрашивание щитовидной железы.

Раскрытие информации

У авторов нет финансового конфликта интересов.

Сноски

  • Затраты на публикацию этой статьи были частично покрыты оплатой страниц. Таким образом, эта статья должна иметь пометку реклама в соответствии с 18 U.S.C. Раздел 1734 исключительно для указания на этот факт.

  • ↵1 Эта работа была поддержана средствами Департамента диабета, эндокринологии и внутренних болезней Медицинской школы Королевского колледжа, Лондон, США.K. (J.P.B и A.M.M.) и грантов Национального института здравоохранения EY008976, EY11708, DKD63121 (TJS) и K23 RR017304 (для A.G.G.).

  • ↵2 Направлять корреспонденцию и запросы на перепечатку д-ру Дж. Полу Банге, Королевский колледж Лондона, Отделение генной и клеточной терапии, Отделение диабета, эндокринологии и внутренних болезней, Медицинская школа Королевского колледжа, Бессемер-роуд, Лондон SE5 9PJ, Великобритания. Адрес электронной почты: paul.banga{at}kcl.ac.uk

  • ↵3 Сокращения, используемые в данной статье: TSHR, рецептор тиреотропного гормона; ТТГ, тиреотропный гормон; бТТГ, бычий ТТГ; Объявление, аденовирус; CHO, яичник китайского хомячка; IGF-1R, рецептор инсулиноподобного фактора роста-1; TBII, Ig, ингибирующий связывание ТТГ; TSAb, тиреостимулирующие антитела; TSBAb, анти-TSHR (блокирующие) Ab.

  • Получено 7 июля 2005 г.
  • Принято 4 октября 2005 г.
  • Рапопорт Б., С. М. Маклахлан. 2001. Аутоиммунитет щитовидной железы. Дж. Клин. Инвестировать. 108: 1253-1259.

  • Прабхакар, Б. С., Р. С. Бан, Т. Дж. Смит. 2003. Современные взгляды на патогенез болезни Грейвса и офтальмопатии.Эндокр. Откр. 24: 802-835.

  • Рис Смит, Б., С. М. Маклахлан, Дж. Фурманиак. 1988. Аутоантитела к рецептору тиротропина. Эндокр. Откр. 9: 106–121.

  • Причард Дж., Р. Хан, Н. Хорст, В. В. Круикшенк, Т. Дж. Смит. 2003. Иммуноглобулиновая активация экспрессии хемоаттрактантов Т-клеток в фибробластах пациентов с болезнью Грейвса опосредуется через путь рецептора инсулиноподобного фактора роста I.Дж. Иммунол. 170: 6348-6354.

  • Смит, Т.Дж., Н. Хоа. 2004. Иммуноглобулины пациентов с болезнью Грейвса индуцируют синтез гиалуронана в их орбитальных фибробластах через аутоантиген, рецептор инсулиноподобного фактора роста-1. Дж. Клин. Эндокринол. Метаб. 89: 5076-5080.

  • Рапопорт Б., Г. Д. Чазенбалк, Дж. К. Жауме, С. М. Маклахлан. 1998. Рецептор тиротропина (ТТГ): взаимодействие с ТТГ и аутоантителами.Эндокр. Откр. 19: 673-716.

  • Лоран, Э., Дж. Мокель, Дж. Ван Санде, И. Графф, Дж. Э. Дюмон. 1987. Двойная активация тиреотропином каскадов фосфолипазы С и цАМФ в щитовидной железе человека. Мол. Клетка. Эндокринол. 52: 273-278.

  • Cooper, D.S. 2003. Гипертиреоз. Ланцет 362: 459-468.

  • Кадзита Ю., CR Rickards, PR Buckland, RD Howells, B. Rees Smith. 1985. Анализ рецепторов тиротропина с помощью фотоаффинной маркировки: ориентация субъединиц рецептора в клеточной мембране. Биохим. Дж. 227: 413-420.

  • Лусфелт, Х., К. Пишон, А. Джоливе, М. Мисрахи, Б. Кайю, М. Джамус, Б. Ваннье, Э. Милгром. 1992. Структура двух субъединиц рецептора тиротропина человека. проц. Натл. акад. науч. США 89: 3765-3769.

  • Чазенбалк, Г.Д., Пичурин П., Чен Ч. Р., Латрофа Ф., Джонстон А. П., Маклахлан С. М., Рапопорт Б. 2002. Тиреотропные аутоантитела при болезни Грейвса преимущественно распознают свободную субъединицу А, а не голорецептор тиротропина. Дж. Клин. Инвестировать. 110: 209-217.

  • Яковелли Л., Л. Капобьянко, Л. Сальваторе, М. Саллезе, Г. М. Д’Анкона, А. ДеБлази. 2001. Тиротропин активирует митоген-активируемый путь протеинкиназы в FRTL-5 с помощью цАМФ-зависимого механизма, независимого от протеинкиназы А.Мол. Фармакол. 60: 924-933.

  • Сонье, Б., К. Турнье, К. Жакмен, М. Пьер. 1995. Стимуляция митоген-активируемой протеинкиназы тиротропином в первичных культурах фолликулов щитовидной железы человека. Дж. Биол. хим. 270: 3693-3697.

  • Вандепут, Ф., С. Перпет, К. Кулонваль, Ф. Лами, Дж. Э. Дюмон. 2003. Роль различных подсемейств митоген-активируемых протеинкиназ в стимуляции пролиферации эпителиальных клеток щитовидной железы человека циклическим аденозин-5′-монофосфатом и факторами роста.Эндокринология 144: 1341-1349.

  • Лефковиц, Р. Дж., С. К. Шеной. 2005. Передача сигналов рецепторов β-аррестинами. Наука 308: 512-517.

  • Трамонтано, Д., Г. В. Кушинг, А. К. Мозес, С. Х. Ингбар. 1986. Инсулиноподобный фактор роста-I стимулирует рост клеток щитовидной железы крысы в ​​культуре и синергизирует стимуляцию синтеза ДНК, индуцированную ТТГ и Graves’-IgG.Эндокринология 119: 940-942.

  • Маклахлан, С. М., Б. Рапопорт. 2004. Моноклональные антитела, стимулирующие щитовидную железу: преодоление препятствий и путь вперед. клин. Эндокринол. 61: 10-18.

  • Андо Т., Р. Латиф, А. Прицкер, Т. Моран, Ю. Нагаяма, Т. Ф. Дэвис. 2002. Моноклональное антитело, стимулирующее щитовидную железу. Дж. Клин. Инвестировать. 110: 1667-1674.

  • Сандерс, Дж., Дж. Джеффрис, Х. Депретер, Т. Ричардс, М. Эванс, А. Кидди, К. Бреретон, М. Гроенен, Ю. Ода, Дж. Фурманиак, Б. Рис Смит. 2002. Моноклональные антитела, стимулирующие щитовидную железу. Щитовидная железа 12: 1043-1050.

  • Костаглиола, С., Дж. Д. Ф. Франссен, М. Бономи, Э. Уризар, М. Вильнич, А. Бергманн, Г. Вассар. 2002. Получение мышиного моноклонального антитела к рецептору ТТГ со стимулирующей активностью. Биохим. Биофиз. Рез. коммун. 299: 891-896.

  • Сандерс, Дж., М. Эванс, Л.Д.К.Е. Премавардхана, Х. Депретер, Дж. Джеффрис, Т. Ричардс, Дж. Фурманиак, Б. Рис Смит. 2003. Человеческие моноклональные тиреотропные аутоантитела. Ланцет 362: 126-128.

  • Сандерс Дж., Дж. Джеффрис, Х. Депратер, М. Эванс, Т. Ричардс, А. Кидди, К. Бреттон, Л.Д.К.Е. Премавардхана, Д.Ю. Чиргадзе, Р. Нуньес Мигель, Т.Л. Бланделл, Дж. Фурманиак, Б. Рис Смит. 2004. Характеристики человеческого моноклонального аутоантитела к рецептору тиротропина: структура последовательности и функция. Щитовидная железа 14: 560-570.

  • Костаглиола, С., М. Бономи, Н. Г. Моргенталер, Дж. Ван Дурме, В. Паннилс, С. Рефетофф, Г. Вассар. 2004. Очерчивание прерывистого конформационного эпитопа моноклонального антитела, проявляющего полную активность тиротропина in vitro и in vivo.Мол. Эндокринол. 18: 3020-3034.

  • Жауме, Дж. К., А. Какинума, Г. Д. Чазенбалк, Б. Рапопорт, С. М. Маклахлан. 1997. Аутоантитела к рецептору тиротропина в сыворотке присутствуют на гораздо более низком уровне, чем аутоантитела к тиреопероксидазе, по данным проточной цитометрии. Дж. Клин. Эндокринол. Метаб. 82: 500-507.

  • де Фортеза Р., К.У. Смит, Дж. Амин, З.М. Маккензи, М. Закария.1994. Визуализация рецептора тиротропина на клеточной поверхности с помощью сильнодействующих аутоантител. Дж. Клин. Эндокринол. Метаб. 78: 1271-1273.

  • Рао, П. В., П. Ф. Уотсон, А. П. Витман, Г. Караянниотис, Дж. П. Банга. 2003. Контрастная активность антител к рецептору тиротропина в экспериментальных моделях болезни Грейвса, вызванной инъекцией трансфицированных фибробластов или вакцинацией дезоксирибонуклеиновой кислотой. Эндокринология 144: 260-266.

  • Перре, Дж., М. Ладгейт, Ф. Либерт, К. Жерар, Дж. Э. Дюмон, Г. Вассар, М. Парментье. 1990. Стабильная экспрессия рецептора ТТГ человека в клетках СНО и характеристика клонов, экспрессирующих по-разному. Биохим. Биофиз. Рез. Комм. 171: 1044-1050.

  • Мюльберг Т., Дж. А. Гилберт, П. В. Рао, А. М. МакГрегор, Дж. П. Банга. 2004. Динамика тиреостимулирующих и блокирующих антител к рецептору тиротропина в мышиной модели болезни Грейвса.Эндокринология 145: 1539-1545.

  • Чен Ч.Р., Пичурин П., Нагаяма Ю., Латрофа Ф., Рапопорт Б., Маклахлан С.М. 2003. Аутоантиген рецептора тиротропина при болезни Грейвса является как виновником, так и жертвой. Дж. Клин. Инвестировать. 111: 1897-1904 гг.

  • Чен Ч.Р., Пичурин П., Чазенбалк Г.Д., Алиски Х., Нагаяма Ю., Маклахлан С.М., Рапопорт Б. 2004. Иммунизация низкой дозой аденовируса, экспрессирующего субъединицу А рецептора тиреотропного гормона, отклоняет ответ антител в сторону ответа аутоантител при болезни Грейвса человека.Эндокринология 145: 228-233.

  • Нагаяма Ю., М. Кита-Фуруяма, Т. Андо, К. Накао, Х. Мидзугути, Т. Хаякава, К. Эгучи, М. Нива. 2002. Новая мышиная модель гипертиреоза Грейвса с внутримышечной инъекцией аденовируса, экспрессирующего рецептор тиротропина. Дж. Иммунол. 168: 2789-2794.

  • Меткалф Р., Н. Джордан, П. Ф. Уотсон, С. Гуллу, М. Уилтшир, М.Крисп, К. Эванс, А. П. Витман, М. Ладгейт. 2002. Демонстрация аутоантител иммуноглобулинов G, A и E к человеческому рецептору тиротропина с использованием проточной цитометрии. Дж. Клин. Эндокринол. Метаб. 87: 1754-1761.

  • Харлоу, Э., Д. Лейн. 1988. Антитела: Лабораторное руководство Cold Spring Harbour Press, Cold Spring Harbour.

  • Джонстон, А. П., Р. Торп. 1987. Методы радиоактивного мечения.А. П. Джонстон и Р. Торп, ред. Иммунохимия на практике, 2-е изд. 113 Blackwell Scientific, Оксфорд.

  • Джанукакис, А. Г., Х. Дж. Цао, Т. А. Дженнингс, Т. Дж. Смит. 2001. Экспрессия простагландин-эндопероксид-Н-синтазы в эпителиальных клетках щитовидной железы человека. Являюсь. Дж. Физиол. 280: С701-С708.

  • Касаги К., Дж. Кониши, Ю. Иида, К. Икекубо, Т. Мори, К. Кума, К.Торизука. 1982. Новый анализ стимулятора щитовидной железы человека in vitro с использованием культивируемых клеток щитовидной железы: влияние хлорида натрия на увеличение аденозин-3′,5′-монофосфата. Дж. Клин. Эндокринол. Метаб. 54: 108-114.

  • Николсон, Л. Б., Х. Власе, П. Грейвс, М. Нильссон, Дж. Молн, Г. К. Хуанг, Н. Г. Моргенталер, Т. Ф. Дэвис, А. М. МакГрегор, Дж. П. Банга. 1996. Моноклональные антитела к рецептору ТТГ человека: картирование эпитопа и связывание с нативным рецептором на базолатеральной плазматической мембране фолликулярных клеток щитовидной железы.Дж. Мол. Эндокринол. 16: 159-170.

  • Моргенталер, Н. Г., В. Б. Миних, М. Виллих, Т. Богуш, Дж. М. Холлидт, В. Веглохнер, К. Ленцнер, А. Бергманн. 2003. Аффинная очистка и диагностическое использование аутоантител к рецептору ТТГ из сыворотки человека. Мол. Клетка. Эндокринол. 212: 73-79.

  • Pomerance, M., HB Abdullah, S. Kamerji, C. Correze, JP Blondeau. 2000.Тиреотропный гормон и циклический АМФ активируют митоген-активируемый протеинкиназный каскад p38. Дж. Биол. хим. 275: 40539-40546.

  • Коррез, К., Ж. П. Блондо, М. Померанс. 2000. Рецептор тиротропина не участвует в активации митоген-активируемых протеинкиназ p42/p44 препаратами тиротропина в клетках яичника китайского хомячка, экспрессирующих рецептор тиротропина человека. Щитовидная железа 10: 747-752.

  • Крайем З., Э. Барон, Л. Кахана, О. Садех, М. Шинфельд. 1992. Изменения стимулирующих и блокирующих антител к рецепторам ТТГ у пациента, перенесшего три цикла перехода от гипотиреоза к гипертиреозу и обратно к гипотиреозу. клин. Эндокринол. 36: 211-214.

  • Касаги К., А. Хидака, К. Эндо, С. Миямото, Р. Такеучи, Т. Мисаки, Х. Сакахара, Дж. Кониси. 1993. Колебания функции щитовидной железы в зависимости от баланса между стимулирующими и блокирующими типами антител к рецепторам ТТГ: клинический случай.Щитовидная железа 3: 315-318.

  • Ким, В. Б., Х. К. Чанг, Х. К. Ли, Л. Д. Кон, К. Тахара, Б. Я. Чо. 1997. Изменения в эпитопах тиреостимулирующих антител в сыворотке крови при болезни Грейвса во время лечения гипертиреоза: терапевтические последствия. Дж. Клин. Эндокринол. Метаб. 82: 1953-1959.

  • Smith, TJ. 2003. Предполагаемая роль фибробластов в патогенезе болезни Грейвса: доказательства участия рецептора инсулиноподобного фактора роста-1 в активации фибробластов.Аутоиммунитет 36: 409-415.

  • Но, Дж. Ю., Н. Хамада, Ю. Иноуэ, Ю. Абэ, К. Ито, К. Ито. 2000. Тиреостимулирующие антитела связаны с офтальмопатией Грейвса, но иммуноглобулин, связывающий тиреотропин, связан с гипертиреозом у пациентов с болезнью Грейвса. Щитовидная железа 10: 809-813.

  • Костальола, С., М.-К. Многие, Дж. Ф. Денеф, Дж. Поленц, С. Рефетофф, Г.Вассар. 2000. Генетическая иммунизация беспородных мышей кДНК рецептора тиротропина обеспечивает модель болезни Грейвса. Дж. Клин. Инвестировать. 105: 803-811.

  • Денеф, Дж. Ф., М. К. Мани, М. Ф. Ван дер Хов. 1996. Вызванное йодом ингибирование щитовидной железы и некроз клеток: два последствия одного и того же механизма, опосредованного свободными радикалами. Мол. Клетка. Эндокринол. 121: 101-103.

  • Риу, К., Х. Тоноли, Ф. Бернье-Валентин, Р. Рабийо, П. Фонупт, Б. Руссе. 1999. Восприимчивость дифференцированных тироцитов в первичной культуре к апоптозу после воздействия перекиси водорода: связь с уровнем экспрессии регуляторных белков апоптоза, Bcl-2 и Bax. Эндокринология 140: 1990-1997.

  • Андо, Т., Р. Латиф, Т. Ф. Дэвис. 2004. Концентрационно-зависимая регуляция функции рецептора тиреотропина с помощью тиреотропного антитела.Дж. Клин. Инвестировать. 113: 1589-1595.

  • Дромей, Дж. А., С. М. Вининк, Г. Х. Петерс, Дж. Эндл, П. Дж. Тиг, И. Тодд, М. Р. Кристи. 2004. Картирование эпитопов аутоантител к аутоантигену IA-2 диабета 1 типа с помощью пептидного фагового дисплея и молекулярного моделирования: перекрытие детерминант антител и Т-клеток. Дж. Иммунол. 172: 4084-4090.